Главная Коллекция "Revolution" Биология и естествознание Гігієнічна оцінка антимікробної дії композитів з наночастками срібла

Гігієнічна оцінка антимікробної дії композитів з наночастками срібла

Методи дослідження антимікробної активності наночасток срібла та композитів на їх основі. Антимікробна дія та фізичні параметри композиту на основі каоліну та наночасток срібла. Оцінка ефективності антимікробної дії композитів з наночастками срібла.

Рубрика	Биология и естествознание
Вид	диссертация
Язык	русский
Дата добавления	02.12.2017
Размер файла	1,5 M

посмотреть текст работы

скачать работу можно здесь

полная информация о работе

весь список подобных работ

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Страница:

Питома поверхня за азотом (м2/г)

18,0

9,0

Сумарний об'єм пор (см3/г)

0,07

0,02

Розмір пор (нм)

8,0

5,0

Кислотність (мкмоль/г)

1,29

0,97

Найважливішими показниками вважаються сумарний об'єм пор та їх розмір. Розмір пор «Кремневіту» відноситься до мезопор (8,0 нм), що відповідає вимогам до медичних мінералів. Оскільки розмір наночасток Ag в нашому композиті, що буде викладено нижче, є на рівні 20-60 нм, що значно більше пор мінералу, це вказує на переважну адсорбцію НЧ на поверхні часток «Кремневіту», що, на наш погляд, забезпечує більшу антимікробну дію в порівнянні з частками срібла 3-5 нм, які в значній мірі проникають у пори і це може зменшувати очікувану антимікробну дію.

Кислотність свідчить про наявність гідроксильних груп, які беруть участь у катіонному обміні. Встановлені показники фармацевтичної білої глини є меншими, ніж у «Кремневіту», що надає дещо більшу перевагу останньому.

5.2 Антимікробна активність композиту на основі «Кремневіта» та наносрібла

Висока адсорбційна активність глинистих мінералів, зокрема препарату «Кремневіт», не тільки до мікроорганізмів, а також до багатьох хімічних сполук та велика адсорбційна ємність надали підставу вважати доцільним та перспективним створити композит на основі «Кремневіту» та наночасток срібла.

Обґрунтуванням вибору саме «Кремневіту» слугували його перевага перед фармацевтичною білою глиною, перш за все, завдяки незначній кількості слюди та кварцу в його складі, а також гранулометричному складу та сорбційно-структурній характеристиці, що доведено в розділі 5.1.

До уваги брали також відоме застосування глини як сорбента при лікуванні опіків, інших уражень шкіри та як ентеросорбента при шлунково-кишкових захворюваннях, дисбактеріозах та як постачальника в організм мікро- та макроелементів.

Поряд з перерахованим, «Кремневіт» як препарат білої глини не належить до бактерицидних глин, а володіє бактерицидністю опосередковано. Адсорбуючи на собі мікроорганізми на якийсь час, блокує їх життєдіяльність та механічно виводить їх з організму чи з ураженої поверхні. Тому, маючи в розпорядженні такий препарат нами, сумісно з Міжнародном центром електронно- променевих технологій при Інституті електрозварювання ім. О.Е. Патона створено композит з НЧ срібла на основі «Кремневіту» [146].

Технологія електронно-променевого випарювання в вакуумі з послідовним осадженням парової фази з успіхом застосовується при отриманні покриттів НЧ неорганічних сполук. В якості такої, як вже було вказано, запропонований препарат білої глини «Кремневіт». Останнім часом велике практичне значення набули подібні композиції, які складаються з різнорідних, навідь слабко взаємодіючих структурних елементів.

Після отримання композиту «Кремневіт»+НЧAg» були виконані електронномікроскопічні дослідження самого препарату «Кремневіт» та композиту з використанням проникаючого електронного мікроскопу. Зображення часток «Кремневіту» представлено на рис. 5.3, на якому відмічені розміри наночасток.

Рис. 5.3. Частки «Кремневіту», розмір часток від 60 нм до 140 нм. Електронна мікроскопія (збільшення х 58000)

Рис. 5.4. «Кремневіт» з НЧ Ag сферичної форми, розмір часток від 14 нмдо 61 нм. Електронна мікроскопія (збільшення х 152000)

Електронномікроскопічне зображення НЧ Ag, адсорбованих на частках «Кремневіту», представлено на рис. 5.4, на якому відмічені НЧ від 14 нм до 60 нм. Щодо форми НЧ, то вона сферична. Частки такої форми здійснюють найменшу токсичну дію на клітини теплокровних. За даними літератури, частки такої форми розміром вище за 10 нм не вважаються шкідливими для організму.

Середній розмір наночасток срібла залежить від часу експозиції при отриманні композиту. При використанні даної технології середній розмір наночасток срібла за три хвилини експозиції, як правило, дорівнює 25 нм, при збільшенні часу експозиції до 10 хвилин спостерігається зростання часток до 50-60 нм. В нашому випадку час експозиції становив десять хвилин.

В наше розпорядження для дослідження бактерицидної активності надійшов зразок композиту з концентрацією НЧ Ag 271,0 ± 5,18 мкг/г (0,0271 % Ag).

Антимікробну дію зразків досліджували суспензійним методом. Контролем слугував AgNO₃. Зі всіх зразків та контролю готували розчини з концентрацією 27,0 мкг/см³ за кількістю срібла. Послідовні розбавлення робили на дистильованій воді.

Попередньо зроблені розбавлення на фосфатному буфері були забраковані, так як AgNO₃ вступав в реакцію з фосфатами, що призводило до утворення осаду. Вважаємо, що така ж реакція відбувалася із НЧ Ag, але частки глини її маскували.

В табл. 5.9 представлені результати визначення антимікробної активності композиту з вихідною концентрацією НЧAg 271,0 ± 8,43 мкг/г. E. coli було залучено до досліджень, як представника умовно-патогенних грамнегативних мікроорганізмів, серед яких все більше різновидів стають етіологічним фактором інфекційних процесів. Визначали бактерицидний ефект погодинно та протягом семи діб.

Таблиця 5.9

Антимікробна дія композиту на тест-мікроорганізм E. coli , КУО/см³

Концентрація НЧ Ag, мкг/см3	Композит, час спостереження
	2 год	4 год	6 год	24 год	48 год	7 діб
0,27	0	0	0	0	0	0
0,13	0	0	0	0	0	0
0,07	зл.р.*	зл.р.	зл.р.	зл.р.	0	0
0,035	зл.р.	зл.р.	зл.р.	зл.р.	зл.р.	зл.р.
0,017	зл.р.	зл.р.	зл.р.	зл.р.	зл.р.	зл.р.
Контроль культури 4,6·106

*зл.р. - зливний ріст

Отримані результати свідчать про те, що концентрації 0,27 та 0,13 мкг/см³ вже через дві години контакту призводили до повної загибелі E. coli. Відмічена наявність пролонгованого ефекту. Через 48 год діючою концентрацією була також 0,07 мкг/см³. Ефект зберігався до сьомої доби (граничний строк спостереження). Органічне забруднення в певній мірі нейтралізувало дію срібла - бактерицидна концентрація складала 0,27 мкг/см³ НЧ срібла.

В таблиці 5.10 наведені результати, отримані стосовно дії композиту на

P. аeruginosa.

Таблиця 5.10

Антимікробна дія композиту на тест-мікроорганізм P. аeruginosa, КУО/см³

Концентрація НЧ Ag, мкг/см3	Композит, час спостереження
	24 год	48 год	7 діб
0,27	0	0	0
0,13	0	0	0
0,07	60	0	0
0,035	560	зл.р.*	зл.р.
Контроль культури 3·106

Одними з основних збудників хірургічних інфекцій є P. аeruginosa. Серед грамнегативних збудників частка P. аeruginosa складає близько 24 %. Внаслідок наявності у псевдомонад різних механізмів резистентності їх характерною особливістю є швидке формування стійкості до більшості, а іноді і до всіх антибіотиків. Тому пошук альтернативних антибіотичних препаратів є надто перспективним, особливо по відношенню до псевдомонад внаслідок вищезазначених властивостей цього збудника інфекцій. Діючою концентрацією, яка призводила до знищення збудника вже через 24 год контакту і утримувалась на такому рівні до кінця терміну спостереження була 0,07 мкг/см³. Органічне навантаження призвело до зниження діючої концентрації НЧ до 0,13 мкг/см³.

Наступним дослідженим нами представником збудників ВЛІ були дріжджеподібні гриби роду Candida. Основним біотопом кандид є слизова ротової порожнини. Вони зустрічаються в середньому у 25,7 % людей. У зв'язку з широким застосуванням антибіотиків, до більшості з яких Candida резистентні, кандидози стали однією з найбільших проблем клінічної патології. Candida можуть вражати не тільки слизові оболонки ротової порожнини, вагіни, стравоходу, шлунку та кишечника але й вісцеральні органи (легені, підшлункову залозу та ін.).

В той же час за отриманими раніше нами даними та результатами інших авторів Candida дуже чутливі до ураження НЧ срібла. Досліджуваний нами композит також пригнічував їх ріст в дуже малій концентрації - 0,035 мкг/см³ (табл. 5.11).

Таблиця 5.11

Антимікробна дія композиту на тест-мікроорганізм C. albicans, КУО/см³

Концентрація НЧ Ag, мкг/см3	Композит, час спостереження
	24 год	48 год	7 діб
1	2	3	4
2,7	0	0	0
0,27	0	0	0
0,13	0	0	0
0,07	0	0	0
0,035	13,0	0	0
0,017	зл.р.*	0	0
0,0085	зл.р.	зл.р.	зл.р.
Контроль культури 8,1·105

*зл.р. - зливний ріст

Через 48 год ця концентрація знизилась до 0,017 мкг/см³ і утримувалась такою до семи діб. Зазвичай органічне навантаження частково нівелювало цей ефект до 0,27 мкг/см³, який знизився до 0,13 мкг/см³ через 48 год.

Чутливість C. albicans до НЧ срібла обумовлена взаємодією НЧ з цис-теїновими залишками в мембрані мікроорганізму, які містять SН- групи.

Найбільш стійким до композиту був S. aureus (табл. 5.12). Діюча концентрація 2,7 мкг/см³ була на порядок більша, ніж на інші досліджені збудники. Пошук ефективних антибіотичних сполук до S. aureus є на менш актуальним, ніж до P. аeruginosa, оскільки цей збудник вважається найчастішим етіологічним фактором виникнення внутрішньолікарняних інфекцій.

Таблиця 5.12

Антимікробна дія композиту на тест-мікроорганізм S. аureus, КУО/см³

Концентрація НЧ Ag, мкг/см3	Композит, час спостереження 24 год
1	2
27,0	0
2,7	0
0,27	515
0,13	зл. р.*
Контроль культури 2,4·106

*зл.р. - зливний ріст

Відома висока антимікробна ативність AgNO_3,тому проведено порівняння активності іонного срібла та наночасток срібла (табл. 5.13).

Таблиця 5.13

Антимікробна активність AgNO₃

Концентрація іонів Ag, мкг/см3	Експозиція	Кількість E. coli, КУО/см3
		дослід	контроль
2,71	24 год.	0	4,5·106
0,27		0
0,13		430
0,07		460
0,035		зливний ріст

Застосування контролю AgNO₃, вважали обов'язковим з двох причин:

-розчин AgNO₃ давав уявлення щодо кількості срібла в зразку;

-порівняння обох результатів дозволяло робити висновок стосовно антимікробної активності іонного срібла (розчин AgNO₃) та НЧ Ag (розчин суспензії глини з НЧ срібла).

Антимікробна активність AgNO₃, в порівнянні з активністю композита, за даними таблиць 5.9-5.13, майже в 2 - 7 разів менша. Отримані результати співпадають з даними інших дослідників і вказують на доцільність та перевагу створення композиту з препарату «Кремневіт» та НЧ Ag.

Враховуючи здатність НЧ до агрегації у водних чи інших розчинах, провели визначення фактичних розмірів та стабільності структури у водній суспензії часток «Кремневіту» з адсорбованими на них наночасточками срібла методом лазерної кореляційної спектроскопії на спектрометрі «Zeta Sizer-3».

Досліджували 0,01 % та 0,001% розчин суспензії, який виявляв високу бактерицидну активність, оскільки попередньо було встановлено, що завдяки малій концентрації розчину суспензії, великі частинки не маскують нанорозмірні частинки. Досліджено зразок, який був щойно отриманий та ретельно перемішаний (зразок 1), зразок, який відстоювався 24 год (зразок 2) та зразок, який відстоювався 22 доби (зразок 3). В зразках 2 та 3 досліджували надосадову рідину. Визначали такі параметри: розмір часток за фракціями, кількість часток кожної фракції, об'єм, який займає кожна з фракцій. Отримані результати представлені в таблиці 5.14 - 5.16.

Таблиця 5.14

Зразок № 1. Комплексна характеристика показників вихідної суспензії композиту після перемішування

Фракція	Розмір, нм	Кількість, %	Об'єм, %
1	170-1400	92,4	14,3
2	1400-4500	7,6	85,7

Таблиця 5.15

Зразок № 2. Комплексна характеристика показників вихідної суспензії через 24 год відстоювання композиту

Фракція	Розмір, нм	Кількість, %	Об'єм, %
1	190-650	90,8	58,0
2	650-1600	9,2	42,0

Таблиця 5.16

Зразок № 3. Комплексна характеристика показників вихідної суспензії композиту через 22 доби відстоювання

Фракція	Розмір, нм	Кількість, %	Об'єм, %
1	30-100	87,7	7,1
2	100-1000	12,3	92,9

Порівняльний аналіз трьох послідовних за часом вимірювань свідчить про поступове осадження великих за розміром часток та можливість виявлення за цей рахунок нанорозмірних часток «Кремневіту» .

Так, зразок № 3 (табл. 5.16) складається з двох фракцій: НЧ розміром 30-100 нм, їх кількість 87,7 % та фракція наночасток розміром 100-1000 нм у кількості 12,3 %. Визначені фракції є носіями НЧAg.

Отримані результати вказують на можливість використання «Кремневіту» як стабілізатора наночасток металів та як суспензії для внутрішнього застосування з великою адсорбційною та бактерицидною активністю.

Додатково декілька зразків було передано для визначення концентрації НЧ Ag в суспензіях композита в Інститут медицини праці НАМНУ. Концентрацію срібла визначали методом атомно-емісійної спектрометрії з індуктивно-звґязаною плазмою (АЕС-ИСП) на приладі Optima 2100 DV фірми Perkin Elmer (США) за відповідною методикою.

На дослідження були направлені проби, які відстоювалися 50 діб після приготування відповідних розбавлень зразків композита з НЧ Ag (табл.5.17).

Таблиця 5.17

Визначення НЧ срібла в зразках композиту (50 діб відстоювання)

Статус зразка	Ступінь розбавлення суспензії, %	Концентрація срібла в розбавленні, мкг/см3	Концентрація срібла в надоосадовій рідині, мкг/см3
1	2	3	4
Суспензія композиту	0,01	2,7	0,22 ± 0,012
Суспензія композиту	0,001	0,27	0,054 ± 0,011
Вихідний зразок композиту	-	-	379 ± 5,12

Отримані результати, наведені в табл. 5.17, з яких випливає наступний висновок: частки каоліна та НЧ Ag активно взаємодіють, що сприяє утворенню стабільної структури, яка володіє антимікробною активністю. Такі результати вважаємо перспективними для розробки різних модифікацій медичних препаратів.

Таким чином, каолін (біла глина) як природний нанооб'єкт, якість якого вивчена на прикладі препарату «Кремневіт», заслуговує на високу оцінку. Перш за все, необхідно відмітити можливість отримання з каоліну препаратів з достатньо високою кількістю дрібнодисперсних фракцій та покращення його фазового складу. Звичайне струшування «Кремневіту» дозволяє отримати (мас %) 6,7 частинок розміром 100-200 нм та 30,8 розміром 200-500 нм, проти 0 та 7,0 відповідно при струшуванні фармацевтичної білої глини. Завдяки своїй структурі та мінералогічному складу «Кремневіт» може бути препаратом довготривалого застосування, на відміну від монтморилонітових глин.Такий склад забезпечує високу адсорбційну активність до мікроорганізмів, сприятливу дію на слизові оболонки та дозволяє рекомендувати до широкого застосування в різних галузях медицини та біології не тільки як ентеросорбента, а також при пошкодженні слизових оболонок, шкіри та таке інше.

Комплекс виконаних досліджень вказує на наявність достатньо високої антимікробної активності отриманого композита на основі «Кремневіта» та наносрібла. Кристали каолініту, основного компонента «Кремневіта», складаються з багатьох шарів декількох видів накладання та мають два типа зарядів - позитивний і негативний. Структура каолініта та присутність пор між контактуючими частинами дають підставу вважати наявність стійкої адсорбції НЧ Ag на частинках. Це підтверджує електронна мікроскопія та збереження бактерицидної дії суспензії тривалий час, про що свідчать результати визначення срібла в надосадовій рідині після 50 діб зберігання.

Висновки до розділу 5

1. Дослідженнями властивостей препарату каоліну «Кремневіт» встановлена його висока адсорбційна активність до E. coli та S. aureus на рівні 94,44 - 99,13 % при вхідіній кількості мікроорганізмів 34 тис. - 50 тис. в 0,1 см³ 0,1 % суспензії препарату.

2. Виявлено збереження адсорбційної активності препарату при наявності 0,3 % альбуміну та в широкому діапазоні pH (від 2,0 до 9,0), що вказує на його ефективність при застосуванні як ентеросорбента.

3. Встановлено, що препарат «Кремневіт», поряд з наявністю дрібнодисперсних фракцій мірнералу на рівні 100-500 нм в кількості 78,6 мас. %, має також низьку кількість кварцу та гідрослюди (1,24; 0,92 мас % відповідно), що обумовлює його високу активність до мікроорганізмів, органічних сполук та знижує можливу подразнюючу дію на слизові оболонки шлунково-кишкового тракту.

4. Висока адсорбційна активність препарту каоліну «Кремневіт» до мікроорганізмів та органічних сполук в широкому діапазоні pH, незначна кількість домішок кварцу та гідрослюди дозволяють рекомендувати його застосування в медицині як ентеросорбента (профілактика, лікування інфекцій, токсикозів, отруєнь, дисбактеріозів та ін.), а також в інших галузях біології та промисловості.

Результати досліджень, наведені в даному розділі, були представлені в наступних публікаціях

1. Адсорбційна активність каоліну (мікробіологічні дослідження) / Корчак Г.І., Сурмашева О.В., Романенко Л.І., Маринін А.І., Олішевський В.В., Марченко А.Б. // Довкілля та здоров'я. - 2014. - № 4. - С. 37-41.

2. Антимікробна активність композиту на основі каоліну та наночасток срібла / О.В.Сурмашева, Л.І.Романенко, Г.І.Корчак, Н.А.Ніконова, А.К.Горваль, Г.Г.Дідікін // Довкілля та здоровґя, - 2015. - № 4. - С. 13-17.

3. Отримання екологічно безпечного розчину наносрібла / Сурмашева О.В., Корчак Г.І., Міхієнкова А.І. Ніконова Н.О., Романенко Л.І. // Гігієнічна наука та практика: сучасні реалії: Мат.XV з'їзду гігієністів України (Львів, 20 - 21 вересня 2012 р.). - Львів: Друкарня Львівського національного медичного університету ім. Данила Галицького, 2012. - С. 437-438.

4. Сучасні напрямки науково-дослідних робіт в лабораторії санітарної мікробіології в сфері нанотехнологій / Сурмашева О.В., Міхієнкова А.І., Корчак Г.І., Романенко Л.І. // Інфекційні хвороби: невичерпні проблеми (діагностика, етіопатогенетичні особливості, лікування, профілактика): Зб. тез доп. наук.-практ. конф. 10-11 жовтня 2013 р. - К., 2013. - С. 45-49.

РОЗДІЛ 6. УЗАГАЛЬНЕННЯ ОТРИМАНИХ РЕЗУЛЬТАТІВ ТА ГІГІЄНІЧНА ОЦІНКА ЕФЕКТИВНОСТІ АНТИМІКРОБНОЇ ДІЇ НАНОЧАСТОК МЕТАЛІВ З РІЗНИМИ СПОЛУКАМИ

Для профілактики і лікування інфекційно-запальних захворювань необхідні нові підходи і нові лікарські засоби, які відрізняються більш високою ефективністю. Розвиток нанотехнології дозволив відкрити декілька нових аспектів боротьби та попередження хвороб, використовуючи молекулярні якості матеріалів. Було доведено, що срібло має сильну біоцидну дію до більшості мікроорганізмів; за цієї причини срібловмісні препарати використовувалися для обробки опіків і профілактики різноманітних інфекцій.

Оцінку антимікробної активності наночасток металів з різними сполуками проводили на моделі різних за фізико-хімічними і біологічними властивостями зразках композитів, а саме:

- композитах на основі концентрованого колоїдного розчину наносрібла в гліцерині «Срібний щит-1000», отриманого за допомогою модуля плазмового диспергування, та антимікробних препаратів різних груп;

- імпрегнованих НЧ срібла та міді тканинах, отриманих шляхом термічного відновлення іонів срібла або міді на поверхні бавовняних тканин;

- композиту з НЧ Ag на основі препарату каоліна «Кремневіт», отриманого методом електронно-променевого випаровування з послідовним фізичним осадженням парової фази.

Для медичних препаратів дуже важливою є їх хімічна чистота. Композити не є винятком, оскільки поєднуються сполуки різні за структурою та фізико-хімічними властивостями. Враховуючи складність взаємодії складових між собою та з організмом людини, доцільно йти шляхом створення композитів, дія компонентів яких якщо не досконально вивчена, то передбачувана [3, 5, 51, 66, 76]. До таких відносяться запропоновані нами композити. Серед наявних наночасток металів при створенні композитів перевагу віддали сріблу, яке володіє антимікробною активністю та має протизапальну та регенируючу дію. Крім того, відома низька ймовірність виникнення резистентності мікроорганізмів до цього бактерициду [3, 8, 56, 82].

Важливим аспектом вивчення властивостей наночасток є використання адекватних мікробіологічних методів. В проаналізованих нами джерелах літератури, нажаль, методи визначення антимікробної активності наноматеріалів та композитів на їх основі не описувались. За нашим припущенням, автори робіт не звертали увагу читача на цей аспект, оскільки дослідження різних за фізико-хімічними властивостями наночасток потребує, як правило, підбору індивідуального мікробіологічного методу.

Проведені експериментальні дослідження дозволили визначити мікробіологічні методи, прийнятні для випробування як композитів, та і їх компонентів. За результатами досліджень підхожими методами виявились суспензійний метод для рідких засобів та метод агарових пластин, придатний тільки для оцінки ефективності антимікробних тканин.

Оцінка методів вивчення антимікробної активності композитів на основі наночасток срібла показала, що на результати досліду впливають такі фактори як властивості та концентрація НЧ, фізико-хімічна характеристика другого компонента композита, розчинника, рівень мікробного навантаження у досліді, наявність ростових та інгібуючих факторів середовища, яке використовується, термін та умови експозиції і інкубації, тощо. Такий важливий фактор як стабілізація НЧ, був обумовлений самим складом композитів.

Останнім часом дослідники з різних країн приділяють велику увагу вивченню питання зниження токсичної дії антибіотиків на організм людини та, одночасно, підвищення їх активності, розробляючи різні композити на основі наночасток [11, 58, 81, 86]. Більшість досліджень стосуються вивчення композитів з НЧ, отриманих хімічними методами. Оригінальність проведених досліджень полягає у використанні НЧ срібла, отриманих фізичним методом плазмового диспергування, перевагою якого є хімічна чистота одержуваного наноматеріалу та відсутність проблеми стабілізації НЧ.

Узагальнюючи результати випробувань антимікробної дії композиційних систем на основі колоїдного розчину срібла «Срібний щит-1000» з антимікробними препаратами груп аміноглікозидів та цефалоспоринів відносно тест-мікроорганізмів, можна констатувати перевищення сукупної дії композитів порівняно з дією його складових, тобто було встановлене явище синергізму. Спостерігалося зниження діючих концентрацій антимікробних препаратів («Стрептоміцин», «Канаміцин», «Цефазолін») в 2 - 7 разів при збереженні їх властивостей.

Поряд з вивченням антимікробної активності композитів антибіотиків з НЧ срібла, нами була побудована математична модель залежності загибелі тест-мікрорганізмів від тривалості експозиції та концентрації антибіотика. За результатами числових розрахунків параметрів моделі та отриманого коефіцієнта ефективності можна стверджувати, що активність композита в декілька разів вище, ніж одного антибіотика. За значеннями параметрів моделі підтверджена оцінка характеру спільної дії розчину «Срібний щит-1000» й антибіотика «Цефазолін», яка свідчить про синергічний ефект композиційної системи. Можна заключити, що побудова моделей подібних процесів має рацію і дозволяє математичними методами визначити ефективні концентрації діючої речовини.

Серед різноманітних методів отримання НЧ і композитів на їх основі останнім часом перспективним є розвиток напрямку отримання тканин з антимікробними властивостями. Існує декілька різновидів методів отримання таких тканин. Найбільш простим та дешевим способом отримання тканин з НЧ є застосування тепературного фактора [5, 103, 104].

Нами вивчено антимікробну активність імпрегнованих НЧ срібла та/або міді бавовняних тканин, отриманих економічним та доступним методом термічного відновлення іонів.

За результатами досліджень, отримані тканини з НЧ срібла володіли антимікробною активністю до всіх вивчених тест-мікроорганізмів (S.aureus, P. аeruginosa та C. аlbicans). В той же час, тканини, просочені НЧ міді, антимікробною активністю по відношенню до вивчених тест-мікроорганзмів не володіли; зони затримки росту навколо та під зразками були відсутні.

Найбільшу антимікробну активність мали зразки бавовняних тканин, імпрегнованих комбінацією наночасток срібла і міді. Зони затримки росту за різних концентрацій комбінацій наночасток складали 6 мм для тест-мікроорганізму S. aureus, та 4.5 мм для тест-мікроорганізму P. аeruginosa; найменш чутливим до дії Ag/Cu був тест-мікроорганізм E. coli.

Метод термічного відновлення іонів срібла та/або міді дозволив отримати тканини з міцно закріпленими НЧ на її поверхні. Це також підтверджується стійкістю тканин, імпрегнованних НЧ срібла та/або міді, до механічного тертя шляхом прання у пральній машині та довготривалими строками збереження антимікробної активності. Зразки з часу їх одержання зберігалися протягом 14 тижнів при кімнатній температурі на повітрі і проявляли антимікробну активність співмірну активності свіжоприготовлених зразків, що свідчить про можливість зберігання антимікробних властивостей імпрегнованих тканин тривалий час. Отже, імпрегновані танини відповідали обов'язковій вимозі - зберігати антимікробну активність після прання.

Таким чином перевагою імпрегнованих НЧ тканин є той факт, що тканини, які були просочені іонами срібла та іонами срібла і міді після прання втрачали антимікробну активність.

Для створення ще одного композиту на основі НЧ срібла у якості другого компонента був запропонований препарат білої глини «Кремневіт». Останнім часом дослідники віддають перевагу складовим композиту на природній основі, а саме - мінералам. «Кремневіт» є моделлю каоліну (білої глини) і застосовується як біологічна добавка [10]. Але, перш ніж запропонувати «Кремневіт» у якості компонента композита, нами було вивчено та обґрунтовано переваги цього зразку у порівнянні із схожим за фізико-хімічними властивостями препаратом «Фармацевтичної білої глини». «Кремневіт» виявив перевагу завдяки вмісту незначної кількості слюди та кварцу, гранулометричному складу, високій адсорбціїї мікроорганізмів. Він не має застережень до застосування, входить до дозволених препаратів фармакопеями багатьох країн світу. На електронномікроскопічному зображенні препарату «Кремневіт», проведеного з використанням растрового електронного мікроскопу, відмічені частки розміром від 60 нм до 140 нм, що може характеризувати каолін, як природний нанооб'єкт. В той же час біла глина не має бактерицидної активності. Носій наночасток «Кремневіт», максимально очищений від домішок і має широке застосування при лікуванні опіків, інших уражень шкіри та як ентеросорбент при шлунково-кишкових захворюваннях, дисбактеріозах, постачальником в організм мікро- та макроелементів.

Композит було отримано за допомогою технології електронно-променевого випарювання в вакуумі та осадження НЧ на підложку з «Кремневіта», який одночасно є стабілізатором НЧ Ag. На електронномікроскопічному зображенні НЧ Ag, адсорбованих на частках «Кремневіту" відмічені НЧ розміром від 14 нм до 60 нм. Срібло здійснює протизапальну дію, особливо при загоєнні ран, опіків, що посилює аналогічну дію каоліну. Отримані НЧ срібла мають сферичну форму [22], яку вважають найменш активною та токсичною по відношенню до біологічних структур [58, 68, 76]. Токсичність залежить також від концентрації НЧ. В наших дослідженнях концентрація срібла у вигляді наночасток була дуже низька, і в той же час мала високу бактерицидну дію.

Антимікробну дію зразків досліджували суспензійним методом. Вихідна концентрація НЧAg визначалась розрахунковим методом. Контролем слугував AgNO₃. Зі всіх зразків та контролю готували розчини за кількістю срібла, послідовні розбавлення робили на дистильованій воді.

Попередньо зроблені розбавлення на фосфатному буфері були забраковані, так як AgNO₃ вступав в реакцію з фосфатами, що призводило до утворення осаду. Вважаємо, що така ж реакція відбувалася із НЧAg, але частки глини її маскували.

В даній серії експериментів була запланована експозиція 24 год і шість послідовних розбавлень, оскільки не було уявлення щодо бактерицидності НЧ срібла в створеній композиції. Аналогічні дії були проведені з контролем - AgNO₃.

Застосування контролю AgNO₃, вважали обов'язковим з двох причин:

1. розчин AgNO₃ давав уявлення щодо кількості срібла в зразку;

2. порівняння обох результатів дозволяло робити висновок стосовно антимікробної активності йонного срібла (розчин AgNO₃) та НЧ Ag (розчин суспензії глини з НЧ срібла).

Композит з НЧ срібла чинив бактерицидну дію на вивчені збудники внутрішньо лікарняних інфекцій у концентраціях за сріблом від 0,035 до 2,7 мкг/см³. За 24 год контакту внесена кількость мікроорганізмів зменшувалась на 5 lg , про що свідчила повна відсутність росту мікроорганізмів на живильних середовищах. Інтенсивність антимікробного ефекту на мікроорганізми можна розташувати наступним чином: C. albicans > E. coli > P. аeruginosa > S. aureus. Стосовно C. аlbicans, P. аeruginosa та E. coli спостерігали ефект пролонгації дії вже через 48 год контакту, який зберігався до семи діб (кінцевого строку спостереження). Білкове навантаження (0,3 % БСА) призводило до підвищення мінімальної діючої концентрації від 2 до 10 раз.

В даному випадку мали підтвердження залежності антимікробної дії срібла від будови клітинної стінки мікроорганізму: грамнегативні МО (E. coli, P. аeruginosa) були більш чутливим до срібла ніж грампозитивні (S. aureus). Високу стійкість S. аureus можна пояснити наявністю в клітинній стінці 80 % однорідного шару пептидоглікану та тейхоєвих кислот, що суттєво відрізняється від складу клітинної стінки грамнегативних мікроорганізмів.

Щодо високої чутливості C. аlbicans до НЧ срібла, то механізм такої дії на сьогодні вважається недостатньо вивченим. Відомий високий афінітет срібла до груп NH₃. Дослідженнями А.А. Ревіна з співав. [84], присвяченому вивченню особливостей дії кластерного срібла на дріжджові клітини C. аlbicans показано, що йонне срібло адсорбувалось на поверхні клітинної стінки, зафіксовано його проникнення в периплазматичний простір, в той час як НЧ срібла руйнували мембрану, що призводило до зупинки росту та відмирання клітин. Чутливість кандида до срібла встановлена, як вказувалось, в раніших наших дослідженнях та дослідах деяких інших авторів.

Встановлена антимікробна активність композиту має комбінований характер. Спостерігаємо бактерицидну дію срібла за рахунок взаємодії між позитивно зарядженим Ag⁺ та від'ємно зарядженою поверхнею бактеріальної клітини. Одночасно каолін міцно адсорбує НЧ срібла та мікроорганізми, що в свою чергу посилює антимікробний ефект.

Дослідження проб, які відстоювалися 50 діб після приготування відповідних розбавлень зразків композита, підтвердили попередні результати випробувань. Частки «Кремневіта» та НЧ Ag активно взаємодіють, що сприяє утворенню стійкої стабільної структури, яка володіє антимікробною активністю. Такі результати вважаємо перспективними для розробки різних модифікацій медичних препаратів.

НЧ срібла розміром 20-60 нм адсорбовані на частинках каоліну 200-500 нм, що унеможливлює механічне проникнення НЧ Ag через цитоплазматичну мембрану - найбільш уразливу складову бактеріальної клітини. Вважаємо, що відбувається ураження поверхневої та внутрішньої мембран клітинної стінки, яке порушує дифузію необхідних для життєдіяльності сполук і це призводить до загибелі мікроорганізмів.

Композит повинен відповідати ряду вимог: мати високу антимікробну активність, його застосування не повинно сприяти утворенню антибіотикорезистентних штамів, не мати токсичних компонентів, викликати механічного подразнення тканин чи будь-яку іншу токсичну дію на організм людини.

Отримані результати виконаних досліджень дозволяють зробити висновки відносно антимікробної активності, зручності в роботі та перспективності розробки препаратів на основі вивчених композитів.

Поєднання антибіотика з наносріблом дозволило отримати композит, сукупна бактерицидна дія якого вища, ніж сума його складових компонентів. Це дасть можливість послабити побічну дію антибіотиків. На основі викладеного є всі підстави вважати перспективними подальші дослідження з представниками антибіотиків групи цефалоспоринів.

Метод термічної обробки іонів срібла або міді на поверхні бавовняних тканин, в результаті якої отримані НЧ, являється специфічним, але є дуже простим та економічнім. Високі антимікробні властивості тканин з нанесеними на них іонами срібла або у поєднанні срібла та міді дозволять рекомендувати їх для зовнішнього використання в медицині як одноразового матеріалу. Матеріали з НЧ , тобто термічно відновленими іонами срібла або срібла і міді на поверхні бавовняних тканин, можуть бути використаними багаторазово, що має економічний ефект та зручність у застосуванні. Такі тканини можуть бути застосовані для виготовлення виробів із тривалим строком експлуатації. Це може бути різна білизна (чоловіча, жіноча, дитяча, столова, постільна), одяг для медичного персоналу, породілей і немовлят, а також устилки, шкарпетки й т.д.

Комплекс виконаних досліджень щодо композиту на основі «Кремневіта» та наносрібла, отриманого методом випаровування і конденсації металевого срібла у вакуумі, дозволив оцінити його переваги, а саме, високу антимікробну активність у поєднанні з високими сорбційними властивостями. Кристали каолініту, основного компонента „Кремневіта”, складаються з багатьох шарів декількох видів накладання та мають два тапа зарядів - позитивний і негативний. Структура каолініта та присутність пор між контактуючими частинами дають підставу вважати наявність стійкої адсорбції НЧ Ag на частинках. Це підтверджує електронна мікроскопія та збереження бактерицидної дії суспензії тривалий час, про що свідчать результати визначення срібла в надосадовій рідині після 50 діб зберігання.

Результати проведених досліджень антимікробної та специфічної дії композитів на основі НЧ срібла і міді, отриманих трьома методами, дозволили оцінити їх переваги. Поєднання наночасток срібла та міді з антимікробними препаратами, бавовняними тканинами, «Кремневітом» дозволило отримати композити з характеристиками, які значно переважали антимікробний рівень їх компонентів, або мали комбіновану антимікробну і сорбційну дії. Отримані композити на основі наночасток срібла та міді володіють антимікробною активністю відносно мікроорганізмів, які в умовах стаціонару є збудниками внутрішньолікарняних інфекцій.

Вивчені композити можуть бути використаними для розробки лікарських форм у вигляді суспензії, порошків, мазі, супозиторіїв, пов'язок різного типу та ін. Ці препарат будуть доцільні в усіх ланках гігієнічних заходів лікувальних установ для попередження утворення та поширення антибіотикорезистентних мікроорганізмів, що дозволить покращити умови оточуючого середовища, забезпечити безпечність перебування у лікувальному закладі, продуктивно проводити лікувальний процес.

ВИСНОВКИ

В дисертації вирішена актуальна наукова задача - дана гігієнічна оцінка антимікробної дії наночасток срібла, отриманих трьома фізичними методами, та композитів на основі наночасток з антимікробними препаратами, тканинами та препаратом каоліна «Кремневітом».

1. Визначено найбільш чутливий, доступний і достовірний метод для виявлення бактерицидної активності наносрібла у рідкій фазі та композитів на його основі - суспензійний метод, який дозволяє визначити кількісну характеристику рівня антимікробної дії зразку та уникнути впливу інактивуючих факторів на НЧ срібла ( NaCl у розчиннику і білкового навантаження в рідких та щільних поживних середовищах).

2. Доведено наявність ефекту синергізму в отриманих композитах з наносрібла «Срібний щит-1000» і антибіотиків груп цефалоспоринів та аміноглікозидів. Найбільш вираженим був антимікробний ефект у комбінації наносрібла з цефазоліном. Бактерицидна концентрація антибіотика в композиті знизилась у чотири рази і складала 0,78 мкг/см³, проти 3,125 мкг/см³ ізольованого антибіотика, що дає можливість послабити побічні токсичні ефекти антибіотикотерапії.

3. Побудована математична модель, за якою визначено антимікробну активність композита в залежності від тривалості дії та його концентрації. За результатами числових розрахунків параметрів моделі отримано коефіцієнт ефективності антимікробної дії композиту, яка до десяти разів вище, ніж дія одного антибіотика. За значеннями параметрів моделі підтверджена оцінка характеру спільної дії розчину «Срібний щит-1000» й антибіотика «Цефазолін», яка свідчить про синергічний ефект композиційної системи.

4. Виявлена висока антимікробна активність відносно тест-мікроорганізмів S. aureus, E. coli, P. аeruginosa та C. аlbicans зразків бавовняних тканин, імпрегнованих НЧ срібла, срібла та міді, отриманих економічним методом термообробки. Виявлено ефект підвищення антимікробної активності сумісної дії срібла та міді. За концентрації наночасток 1,08 мг/см²у тканині зони затримки росту мікроорганізмів складали до 6 мм. Довготривале зберігання протягом 14 тижнів та автоматичне прання тканин, імпрегнованих НЧ, не зменшувало їх антимікробні властивості, що дозволяє рекомендувати їх для розробки засобів для зовнішнього багаторазового використання та розробки виробів медичного призначення з антимікробною дією. Високі антимікробні властивості тканин з нанесеними на них іонами срібла або у поєднанні іонів срібла і міді дозволяють рекомендувати їх для розробки виробів медичного призначення одноразового використання.

5. Доведена наявність у складі препарату «Кремневіт» часток розміром 100-500 нм у мас % 79,8. Встановлена висока адсорбційна активність «Кремневіту» до умовно-патогенних мікроорганізмів: 0,1 % суспензія адсорбує 94-99 % мікроорганізмів, ефект зберігається за присутності органічних сполук (0,3 % альбуміну) та при зміні pH середовища від 4,0 до 9,0.

6. Встановлено, що нанокомпозит на основі препарату каоліна «Кремневіт» та наночасток срібла сферичної форми розміром 20 - 60 нм має високу антимікробну активність до S. aureus, E. colі, P. aeruginosa, C. albicans за концентрації 0,035 - 2,7 мкг/см³. За 24 год контакту кількість мікроорганізмів, що загинула, зменшилась на 5 lg від вихідного рівня. Антимікробна активність мала комбінований характер: спостерігалася бактерицидна дія НЧ срібла по відношенню до негативно зарядженої поверхні бактеріальної клітини. Одночасно каолін міцно адсорбував НЧ срібла та мікроорганізми, що посилювало антимікробний ефект.

7. Показана висока антимікробна активність композитів, складовими яких є НЧ срібла та/або міді і речовини різного хімічного складу. Виявлено бактерицидний та дріжджецидний ефекти композитів до представників умовно-патогенних мікроорганізмів, які можуть бути збудниками внутрішньолікарняних інфекцій. Доведено ефект синергізму складових у вивчених композитах щодо антимікробної дії.

8. Гігієнічна оцінка антимікробної дії та стабільності композитів, до складу яких входять НЧ металів, дозволяє рекомендувати їх для розробки профілактичних та лікувальних засобів різних форм для зовнішнього і внутрішнього використання.

СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ДЖЕРЕЛ

1. Наноматериалы. Регуляторные вопросы / В.И. Масычева, Е.Д. Даниленко, А.О. Белкина и др. // Ремедиум. - 2008. - № 9. - С. 12-23.

2. Біопротекторна дія цинку в макро- і наноаквахелатній формі на ембріогенез щурів за умови свинцевої інтоксикації / Е.М. Білецька, І.С. Чекман, Н.М. Онул та ін. // Медичні перспективи. - 2013. - №2. - С. 114-119.

3. Mode of antiviral action of silver nanoparticles against HiV-1 / H.H. Lara, N.V. Ayala-Nunes, L. Ixtepan-Turrent, C. Rodriguez-Padilla // J. Nanobiotechnology. - 2010. - № 8. - P. 1-10.

4. Противірусна активність наночасток металів: погляд на проблему / І.С. Чекман, В.Ф. Марієвський, С.Л. Рибалко та інш. // Український мед. часопис. - 2015. - № 5. - С. 45-48.

5. Наночастицы серебра и золота в кремнеземных матрицах: синтез, свойства и применение / А.М. Еременко, Н.П. Смирнова, Ю.П. Муха, Г.Р. Яшан // Теор. эксперим. химия. - 2010. - Т. 46, № 2 - С. 67-86.

6. Садохин В.В. Управление физико-химическими свойствами наночастиц ме- таллов в процессе получения коллоидных растворов методом ионно-плазменной диспергации / В.В. Садохин, О.Б. Логинова, Л.Д. Кистерская // 7. Перспективы науки. - 2013. - № 11(50). - С. 104-107.

7. Мовчан Б.А. Электронно-лучевая нанотехнология и новые материалы в медицине -- первые шаги / Б.А. Мовчан // Вісн. фармакології і фармації. - 2007. - № 12. - С. 5-13.

8. Synthesis and effect of silver nanoparticles on the antibacterial activity of different antibiotics against Staphylococcus aureus and Escherichia coli / A.R. Shahverdi, A. Fakhimi, H.R. Shahverdi, S. Minaian // Nanomedicine. - 2007. - Vol. 3 (2). - Р. 168-171.

9. Synergistic antibacterial effects of в-lactam antibiotic combined with silver nanoparticles / P. Li, J. Li, Ch. Wu et al. // Nanotechnology. - 2005. - Vol. 16 ( 9). - P. 1912-1917.

10. Властивості природного нанооб'єкта - каоліну / Г. І. Корчак // Довкілля та здоров'я. - 2014. - № 4. - С. 45-48.

11. Медичне застосування наночастинок срібла: токсикологічний аспект / І.С. Чекман, А.О. Прискока, В.Ф. Бабій та ін. // Современные проблемы токсикологии. -- 2010. -- № 4. -- С. 10--13.

12. Silver nanoparticles: partial oxidation and antibacterial activities / C.N. Lok, C.M. Ho, R. Chen et al. // J. Biol. Inorg. Chem. - 2007. - Vol.12. - P. 527-534.

13. The bactericidal effect of silver nanoparticles / J.R. Morones, J.L. Elechiguerra, A. Camacho et al. // Nanotechnology. - 2005. - Vol. 16. - P. 2346-2353.

14. Dunn K. The role of Acticoat^TM with nanocrystalline silver in the management of burns / K. Dunn, V. Edwards-Jones // Burns. - 2004. - Vol. 30 (1). - S1 - S9.

15. Стожковска В. Соли серебра сульфонамидов в местном лечении ожогов / В. Стожковска // Новости фармации и медицины. - 1994. - Т. 28, № 6 (149). - С. 146 - 152.

16. Препарати срібла: вчора, сьогодні і завтра / О.Б. Щербаков, Г.І. Корчак, І.М. Скороход та інш. // Фармацевтичний журнал. - 2006. - № 5. - С. 55 - 67.

17. Chopra I. The increasing use of silver-based products as antimicrobial agents: useful development or a cause for concern? / I. Chopra // J. Antimicrob. Chem. - 2007. - Vol. 59. - P. 587-590.

18. Серебро в медицине / Е.М. Благитко, В.А. Бурмистров, А.П. Колесников и др. - Новосибирск : Наука-Центр, 2004. - 254 с.

19. Білоус С.Б. Вітчизняні лікарські засоби подібного складу на ринку України відсутні / С.Б. Білоус // Перспективи розробки м'яких лікарських засобів для зовнішнього застосування з наночастинками срібла : зб. наук. праць співробіт. НМАПО ім. П. Л. Шупика. - К., 2013. - Вип. 22 (4). - С. 354-361.

20. The inhibitory effects of silver nanoparticles, silver ions, and silver chloride colloids on microbial growth / O. Choi, K.K. Deng, N.J. Kim et al. // Water Res. - 2008. - Vol. 42. - P. 3066-3074.

21. Трахтенберг І.М. Наночастинки металів, методи отримання, сфери застосування, фізико-хімічні та токсичні властивості / І. М. Трахтенберг, Н. М. Дмитруха // Укр. журн. з пробл. медицини праці. - 2013. - № 4. - С. 62-74.

22. The impacts of silver nanoparticles and silver ions on wastewater biological phosphorous removal and the mechanisms / Y.G. Chen, H. Chen, X. Zheng, H.J. Mu // J. Hazard. Mater. - 2012. - Vol. 239. - P. 88-94.

23. Acute toxicity of Ag and CuO nanoparticles suspensions against Daphnia magna: The importance of their dissolved fraction varying with preparation methods / H.J. Jo, J.W. Choi, S.H. Lee, S.W. Hong // J. Hazard. Mater. - 2012. - Vol. 227. - P. 301-308.

24. Joshi N. Enhanced resistance to nanoparticle toxicity is conferred by overproduction of extracellular polymeric substances / N. Joshi, B.T. Ngwenya, C.E. French // J. Hazard. Mater. - 2012. - Vol. 241. - P. 363-370.

25. Exposure of engineered nanoparticles to human lung epithelial cells: Influence of chemical composition and catalytic activity on oxidative stress / L.K. Limbach, P. Wick, P. Manse et al. // Environ. Sci. Technol. - 2007. - Vol. 41. -

P. 4158-4163.

26. Артисюк М.В. Цитотоксична активність наносрібла щодо культури клітин СНО К1 / М.В. Артисюк // YouthNanoBioTech-2010. Молодіжний форум з нанобіотехнологій : матер. конф. 19 травня 2010 р., Київ // Український науково-медичний молодіжний журнал. - 2010. - Спеціальний випуск. - С. 20-21.

27. Нанометали: стан сучасних досліджень та використання в біології, медицині та ветеринарії / В.Ф. Шаторна, В.І. Гарець, В.В. Крутенко та інш. // Вісник проблем біології і медицини. - 2012. - Вип. 3. - Т. 2. - С. 29-33.

28. Kondow T. Structures and dynamics of molecules on liquid beam surfaces / T. Kondow, F. Mafune // Ann. Rev Phys Chem. - 2000. - Vol. 51. - P. 731-761.

29. Studies on the biocompatibility and the interaction of silver nanoparticles with human mesenchymal stem cells (hMSCs) / C. Greulich, S. Kittler, M. Epple et al. // Langenbecks Arch Surg. - 2009. - Vol. 394. - P. 495-502.

30. Міхієнкова А.І. Залежність антимікробних властивостей колоїдних розчинів наночасток срібла від походження стабілізаторів / А.І. Міхієнкова // Актуальні питання гігієни та екологічної безпеки України : зб. тез доп. наук.-практ. конф. (Київ, 20-21 травня 2010 р.). - К., 2010. - Вип. 10. - С. 86-88.

31. Андрусишина И.Н. Наночастицы металлов: способы получения, физико-химические свойства, методы исследования и оценка токсичности / И.Н.Андрусишина // Сучасні проблеми токсикології. - 2011. - № 3. - С. 5-13.

32. Сергеев Г.Б. Нанохимия : учебное пособие. - 3-е изд. / Г.Б. Сергеев. - М. : КДУ, 2009. - 336 с.

33. Синтез и свойства наночастиц серебра: достижения и перспективы / Ю. А. Крутяков, А. А. Кудринский, А. Ю. Оленин и др. // Успехи химии. - 2008. - Т. 77, № 3. - С. 242 - 269.

34. Synthesis and antibacterial properties of silver nanoparticles / C. Baker, A. Pradhan, L. Pakstis et al. // J. Nanosci Nanolcchnol. - 2005. - Vol 5. - P. 244-249.

35. Biomimetic synthesis and patterning of silver nanoparticles / R.R. Naik, S.J. Stringer, G. Agarwal et al. // Nat Mater. - 2002. - N 1(3). - P. 169-172.

36. Peptide-mediated reduction of silver ions on engineered biological scaffolds / K.T. Nam, Y.J. Lee, E.M. Krauland et al. // ACS Nano. - 2008. - № 2 (7). - P. 1480-1486.

37. Greener approach for synthesis of antibacterial silver nanoparticles using aqueous solution of neem gum (Azadirachta indica L.) / P. Velusamy, J. Das, R. Pachaiappan et al. // Industrial Crops and Products. - 2015. - Vol. 66 (1). - Р. 103-109.

38. Lactic acid bacteria as reducing and capping agent for the fast and efficient production of silver nanoparticles / L. Sintubin, W. De Windt, J. Dick et al. // Appl Microbiol Biotechnol. - 2009. - Vol. 84(4). - P. 741-749.

39. Extracellular biosynthesis of functionalized silver nanoparticles by strains of Cladosporium cladosporioides fungus / D.S. Balaji, S. Basavaraja, R. Deshpande et al. // Colloids Surf B Biointerfaces. - 2009. - Vol. 68(1). - P. 88-92.

40. Sintubin L. Biologically produced nanosilver: current state and future perspectives / L. Sintubin, W. Verstraete, N. Boon // Biotechnol Bioeng. - 2012. -Vol. 109 (10). - P. 2422-2436.

41. Shankar S.S. Geranium leaf assisted biosynthesis of silver nanoparticles / S.S. Shankar, A. Ahmad, M. Sastry // Biotechnol Prog. - 2003. - Vol. 19 (6). - P. 1627-1631.

42. Nanda A. Biosynthesis of silver nanoparticles from Staphylococcus aureus and its antimicrobial activity against MRSA and MRSE / A. Nanda, M. Saravanan // Nanomedicine: Nanotechnology, Biology, and Medicine. - 2009. - Vol. 5 (4). - P. 452-456.

43. Albrecht M.A. Green chemistry and the health implications of nanoparticles / M. A. Albrecht, C. W. Evans, C. L. Raston // Green Chemistry. - 2006. - Vol. 8, No. 5. - P. 417-432.

44. Sharma V.K. Silver nanoparticles: green synthesis and their antimicrobial activities / V.K. Sharma, R.A. Yngard RA, Y. Lin // Adv. Colloid Interface Sci. - 2009. - Vol. 145. - P. 83-96.

45. Pal S. Does the antibacterial activity of silver nanoparticles depend on the shape of the nanoparticles? A study of the gram-negative bacterium Escherichia coli / S. Pal, Y.K. Tak, J.M. Song // Appl Environ Microbiol. - 2007. - Vol. 73. - P. 1712-1720.

46. Salata 0. Applications of nanoparticles in biology and medicine / 0. Salata // J Nanobiotechnology. - 2004. - Vol. 2. - P. 1-6.

47. Unger C. Inhibitory effects of silver ions on Legionella pneumophila grown on agar, intracellular in Acanthamoeba castellanii and in artificial biofilms / C. Unger, C. Luck // J. Appl. Microbiol. - 2012. - Vol. 112. - P. 1212-1219.

48. Asharani P.V. Anti-proliferative activity of silver nanoparticles / P.V. Asharani, M.P. Hande, S. Valiyaveettil // BMC Cell Biol. - 2009. - Vol. 10. - P. 65-79.

49. Gajbhiye M. Fungus-mediated synthesis of silver nanoparticles and their activity against pathogenic fungi in combination with fluconazole / M. Gajbhiye, J. Kesharwani, A. Ingle // Nanomedicine. - 2009. - Vol. 5. - P. 382-386.

...

Страница:

диссертация "Гігієнічна оцінка антимікробної дії композитів з наночастками срібла" скачать

Подобные документы

Значення газообміну для дітей 3-7 років
Обґрунтування особливостей газообміну в організмі дітей 3-7 років. Характеристика розвитку організму дитини дошкільного віку. Вікові особливості дихання дитини: будова, дихальні рухи, газообмін у легенях. Гігієнічна оцінка фізичного розвитку дитини.

курсовая работа [1,2 M], добавлен 25.09.2010
Дослідження динаміки зміни якості води у озері Басів Кут
Стан забруднення атмосферного повітря у Рівненський області. Оцінка екологічного стану озера Басів Кут. Вимоги до якості води і методи гідрохімічних досліджень визначення органолептичних властивостей води. Дослідження якості поверхневих вод озера.

учебное пособие [739,8 K], добавлен 24.10.2011
Біохімічне дослідження процесу стомлення у підлітків
Біологічне значення стомлення, методи його дослідження. Вивчення біохімічних основ стомлення у підлітків та його діагностування доступними засобами. Виявлення зміни в активності слини учнів внаслідок стомлення під час фізичних та розумових навантажень.

курсовая работа [116,8 K], добавлен 21.01.2017
Методи мікробіології
Взаємодія барвників із структурами бактеріальної клітини. Ріст і розмноження бактерій. Культивування вірусів в організмі тварин. Фізичні методи дезінфекції. Гетерогенність популяцій мікроорганізмів. Бактеріостатичний, бактерицидний ефект дії антибіотиків.

контрольная работа [60,4 K], добавлен 24.02.2012
Дослідження особливості пристосувань рослин для запилення комахами
Проведення дослідження особливостей пристосувань певних видів рослин до ентомофілії. Оцінка господарської цінності, значення та можливості використання комахозапилення у практичній діяльності людини. Вивчення взаємної адаптації квитків та їх запилювачів.

контрольная работа [3,0 M], добавлен 11.11.2014
Склад та продукція фітопланктону р. Случ Житомирської області
Історія вивчення автотрофної компоненти річки Случ. Видове та внутрішньовидове різноманіття водоростевих угруповань. Еколого-географічна характеристика фітопланктону та оцінка якості води. Оцінка інформаційного різноманіття екологічного стану річки.

дипломная работа [2,5 M], добавлен 22.01.2015
Ідентифікація Coleochlamys-подібних водоростей наземних біотопів Антарктиди
Фізико-географічна характеристика Антарктиди. Перші дослідження Coleochlamys-подібних водоростей, їх морфологічний і молекулярно-філогенетичний аналіз. Водорості наземних біотопів району дослідження, їх загальний опис та оцінка екологічного значення.

курсовая работа [1,8 M], добавлен 21.06.2014
Дослідження придатності закритих водойм півдня України для вирощування білого амура (на прикладі рибогосподарського ставка в с. Кам’яна Балка Миколаївського району Миколаївської області)
Дослідження екологічних умов обстежуваної водойми, вмісту біогенних елементів в донних відкладах. Оцінка видового складу риб обстежуваного ставка та можливої конкуренції між видами. Результати біометричних та анатомічних спостережень білого амура.

курсовая работа [4,4 M], добавлен 12.02.2016
Будова, функції та методи дослідження мітохондрій
Мітохонрдрії як органоїди клітини, їх будова та функції. Розміри, форма, загальна схема організації мітохондрій. Локалізація ферментної системи мітохондрій. Методи дослідження мітохондрій: електронна мікроскопія; інтерференційне мікроскопування.

курсовая работа [398,9 K], добавлен 21.09.2010
Інтродукція парків м. Миколаєва
Географічне положення та історико-культурний потенціал м. Миколаєва. Дослідження видового біорізноманіття та ареалів походження деревних листяних інтродуцентів парків і скверів міста. Оцінка рясності насаджень, успішності та перспективності інтродукції.

курсовая работа [156,7 K], добавлен 19.04.2015
Морфологічні властивості мікроорганізмів
Основні концепції виду в бактеріології. Особливості визначення систематичного положення мікроорганізмів. Значення морфологічних властивостей в сучасній систематиці мікроорганізмів. Механізм ідентифікації мікроорганізмів на основі морфологічних ознак.

курсовая работа [5,8 M], добавлен 30.01.2016
Концепція нескінченності й космологічна еволюція
Космологічні моделі Всесвіту, наукові роботи О. Фрідмана, Г. Гамова. Стандартна модель еволюції Всесвіту на основі рівняння теорії відносності Ейнштейна та уявлення про кривизну простору. Філософсько-світоглядні проблеми космологічної еволюції.

реферат [21,1 K], добавлен 19.06.2010
Характеристика видового складу тварин літоралі р. Случ в межах м. Березного
Природно-екологічні умови Березнівського району. Біологічні особливості видового складу тварин - гідробіонтів річки Случ. Облік водної ентомофауни. Кількісна оцінка видового складу тварин літоралі р. Случ. Методика дослідження тварин літоралі р. Случ.

дипломная работа [6,6 M], добавлен 29.11.2011
Роль гербарних зразків у розвитку біологічної науки на території України (друга половина ХІХ - початок ХХ ст.)
Історія гербарної справи та флористичних досліджень в Україні. Вивчення таксономічного складу синантропної флори на основі рослинних зразків Й.К. Пачоського. Гербарні колекції в природничих музеях, їх значення для науково-просвітницької діяльності.

статья [25,7 K], добавлен 07.08.2017
Умовні рефлекси
Основі регуляції різноманітної діяльності організму. Функції нервової та ендокринної систем. Реакція організму на будь-яке подразнення. Механізм утворення умовних рефлексів. Роль підкіркових структур та кори великого мозку. Гальмування умовних рефлексів.

реферат [30,7 K], добавлен 30.03.2012
Динаміка перельоту птахів
Загальна характеристика птахів: лелека білий, бусол, або чорногуз, гуска сіра, шпак звичайний, зозуля звичайна, ластівка сільська. Перельоти птахів та методи дослідження цього процесу. Аналіз спостережень за строками прильотів вказаних видів птахів.

реферат [28,1 K], добавлен 21.09.2010
Вищі водні рослини в системі рослинного світу
На основі вивчених еколого-біологічних властивостей рослин водних та прибережно-водних біоценозів проведення визначення стану їхніх ценозів русла річки Сіверський Донець. Визначення видів біоіндикаторів водного середовища, екологічні особливості видів.

курсовая работа [63,9 K], добавлен 07.05.2009
Черепно-мозкові нерви
Місцезнаходження ядер черепно-мозкових нервів. Місця входу та виходу на основі мозку черепно-мозкових нервів, зони їх іннервації. Нюховий, зоровий, окоруховий, блоковий, трійчастий та очний нерви. Гілки трійчастого нерва. Блукаючий та додатковий нерви.

презентация [304,7 K], добавлен 01.02.2014
Структурно-функціональні особливості легень у людини на етапах онтогенезу
Вивчення ембріогенезу легень та періодизації їх формування на основі даних макро-, мікро морфологічного і гістохімічного аналізів. Основні етапи розвитку легень у людини в постнатальному періоді, їх функціональні зміни. Легені на пізніх етапах онтогенезу.

курсовая работа [56,0 K], добавлен 06.11.2010
Зміна активності ферментів системи антиоксидантного захисту у нирках щура за дії гістаміну
Антиоксидантна система як захист проти вільних радикалів. Гістамін:історія вивчення, структура, шляхи синтезу і вивільнення. Визначення активності супероксиддисмутази, каталази, глутатіонпероксидази, вплив на неї наявності гістаміну в нирці щура.

курсовая работа [1,7 M], добавлен 22.06.2014

Другие документы, подобные "Гігієнічна оцінка антимікробної дії композитів з наночастками срібла"

весь список подобных работ

скачать работу можно здесь

сколько стоит заказать работу?

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.