Иммунобиологическая оценка состояния облученных животных и способы повышения радиорезистентности организма

Наибольший радиозащитный эффект наблюдался при введении тимогена в дозах 10-12 мкг/крысу (50±5 мкг/кг). Эти дозы введения препарата и были взяты для разработки способа профилактики острой лучевой болезни. Радиозащитное действие способа испытано в экспериментальных условиях на белых беспородных крысах при тяжелой степени острой лучевой болезни.

В опытах использованы белые крыс - самцы, с массой тела 180-190 г. к началу эксперимента. Все животные по принципу аналогов были разбиты на группы по 10 штук в каждой: первая - биологический контроль; вторая - контроль облучения; третья - контроль предварительного облучения; четвертая - контроль препарата; пятая, шестая и седьмая - подопытные (0,75 Гр + тимоген; 1,0 Гр + тимоген и 1,5 Гр + тимоген, соответственно).

Условия содержания и кормления крыс всех подопытных групп были идентичными.

Выполнение способа. За 20-30 дней до воздействия ЛД_90/30 крыс предварительно облучали дозами 0,75; 1,0 и 1,5 Гр, а за 7-10 дней до облучения указанной летальной дозой крысы ежедневно получали 10-12 мкг тимогена с водой и кормом. В перерасчете на массу тела доза тимогена составляла 50±5 мкг/кг.

Результаты исследований. Крысы групп биологического контроля в течение всего срока наблюдения (30 суток) были клинически здоровыми, охотно поедали корм, адекватно реагировали на внешние раздражители, случаев гибели не наблюдалось.

У животных группы контроля облучения с первых дней после воздействия радиации в дозе 9,0 Гр резко снижалось количество лейкоцитов в крови. У многих крыс на 5-7 сутки отмечалась диарея. Вокруг глаз и носовых отверстий образовывались коричневые корочки из запекшейся крови, что свидетельствовало о выраженном проявлении геморрагического синдрома. Гибель крыс начиналась с 7 суток и составила 90-100% при средней продолжительности жизни 10 дней. При патологоанатомическом вскрытии трупов павших животных диагностировалась лучевая болезнь тяжелой и крайне тяжелой степени.

В группе животных предварительно облученных малыми дозами признаки диареи и геморрагического синдрома были единичными. Гибель отмечалась с 12 суток. Средняя продолжительность жизни павших крыс составила 14-16 дней, выживаемость - 40-50%

У животных, получавших только тимоген в указанной дозе в течение 5-10 дней и затем облученных дозой 9,0 Гр (ЛД_90/30), клинические признаки и были схожи с таковыми группы контроля предварительного облучения в малых дозах. Выживаемость составила 40-50%.

У крыс подопытных групп, после обработки указанным способом (предварительное облучение + тимоген), клиническое проявление лучевой болезни было выражено на уровне средней и легкой степени, отсутствовали признаки геморрагического синдрома. Случаи диареи были единичными и непродолжительными. Животные оставались чистыми, гладкими, подвижными, адекватно реагировали на внешние раздражители, охотно поедали корм. Средняя продолжительность павших животных составила 18-20 суток, выживаемость - 70-80% (табл. 5).

Таблица 5. Выживаемость облученных летальной дозой крыс

Группы	Кол-во крыс (штук)	Доза профилактич. обработки (Гр)	Доза введения тимогена (мкг)	Доза облучения (Гр)	Выживаемость (%)
1. Биологич. контроль	10	нет	нет	нет	100
2. Контроль облучения	10	нет	нет	9,0	0
3. Контроль предварительного облучения	10 10 10	0,75 1,0 1,5	нет нет нет	9,0 9,0 9,0	40 50 50
4. Контроль препарата тимоген	10	нет	10-12	9,0	40
5. Опытная	30	0,75	10-12	9,0	60-70
6. Опытная	30	1,0	10-12	9,0	70-80
7. Опытная	30	1,5	10-12	9,0	70 - 80

Таким образом, результаты опытов на белых беспородных крысах показали, что радиозащитный эффект (70-80%) наблюдается через 20-30 дней с начала применения способа, включающего предварительное воздействие гамма-излучения в диапазоне доз от 0,75-1,5 Гр и введения тимогена в дозе 10-12 мкг/крысу (50±5 мкг/кг) с кормом ежедневно за 7-10 дней до облучения летальной дозой.

В дополнительном исследовании изучали влияние предварительного облучения в дозе 0,75 Гр в сочетании с тимогеном на гематологические показатели (табл. 6).

Таблица 6. Показатели картины крови облученных летальной дозой крыс с применением предварительного облучения в и тимогена (7 сутки)

Группы, воздействие	Лейкоциты, 109/л	Эритроциты, 1012/л	Тромбоциты, 109/л
1 9 Гр (к.о.)	0,70±0,07*	3,70±0,18*	96,2±4,06*
2 0,75 + 9,0 Гр	2,20±0,07**	4,57±0,23**	174,2±3,05**
3 тим+9,0 Гр	2,80±0,07**	5,02±0,16**	178,4±4,12**
4 0,75+т+9,0Гр	3,90±0,17**	5,82±0,23**	198,5±3,03**
5 биол. контр.	8,98±0,15	6,56±0,08	410,4±9,02

У животных группы контроля облучения на 7 сутки после воздействия г-излучения в дозе 9,0 Гр достоверно снижалось количество лейкоцитов в крови. В то время как у животных второй, третьей и четвертой групп содержание лейкоцитов на этот срок исследования было достоверно выше в 2,0; 4,6 и 6,5 раза, соответственно. В последующие сроки лейкоциты в защищенных группах сохраняли стабильную динамику роста и достигали нижних границ физиологической нормы к 30 суткам.

Содержание эритроцитов у крыс второй, третьей и четвертой групп на 7 сутки после облучения было достоверно выше облученного контроля на 23,5; 35,6 и 57,3%, соответственно. Содержание тромбоцитов на этот срок в защищенных группах было также достоверно выше контроля облучения в 1,81; 1,85 и 2,06 раза, соответственно.

Таким образом, количество лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов у однократно облученных 9 Гр животных резко снижается по сравнению с биологическим контролем, соответственно - в 14,8 раза, в 1,7 раза и в 4,3 раза. Последовательное применение предварительного облучения в дозе 0,75 Гр и тимогена обеспечивает достоверную сохранность клеток периферической крови крыс, облученных летальной дозой.

Радиозащитные свойства флоренты

Вводимые дозы флоренты, обладающие радиозащитным действием, обоснованы нами экспериментально на крысах. Наибольший радиозащитный эффект наблюдался при введении флоренты в течение недели с водой и кормом в объеме 6,0-8,5 мл/кг (табл. 7). При последующем летальном облучении в дозе 7,0 Гр выживаемость составила - 80%, в дозе 9,0 Гр - 40%.

Таблица 7. Выживаемость крыс при введении флоренты

Группы	Доза введения флоренты, мл/кг	Доза облучения	Выживаемость (%)	Доза облучения (Гр)	Выживаемость (%)
1	3,5	7,0	60	9,0	20
2	6,0	7,0	80	9,0	40
3	8,5	7,0	80	9,0	40
4	11,0	7,0	60	9,0	30
5	13,5	7,0	60	9,0	30

Эти объемы препарата нами взяты для изучения влияния флоренты на различные показатели иммунобиологического состояния организма облученных крыс и разработки радиозащитного способа, включающего предварительное облучение в диапазоне доз 0,75-1,0 Гр+флорента+ ЛД. В результате было установлено, что применение способа по указанной схеме защищало 60-80% крыс, облученных в дозе 9 Гр.

Иммуномодулирующие и антиоксидантные свойства флоренты

Изучение влияния флоренты на функциональную активность щитовидной железы проводили на крысах, облученных в дозах 0,5; 1,0; 3,0; 5,0 Гр, соответственно.



Рис. 6. Дозовая зависимость гормонов щитовидной железы на вторые сутки после облучения

На вторые сутки содержание Т₃ при дозах от 0,5 Гр; 1,0 Гр; 3,0 Гр и 5,0 Гр было ниже биологического контроля на 15%, 19,7%, 12,0% и 30%, соответственно. При дозе 5,0 Гр разница была достоверной. Подобная закономерность наблюдалась и с содержанием тироксина (рис. 6).

На седьмые сутки, активность железы была еще более пониженной по сравнению с первичной реакцией на облучение при дозах внешнего однократного г-облучения, превышающих 0,5 и 1,0 Гр. Так, содержание Т₃ при дозах 3,0 и 5,0 Гр понижалось в 1,32 и в 1,38 раза, что было ниже биологического контроля на 24,7% и 27,2%, соответственно. Содержание Т₄ при дозе 0,5 Гр -1,0 Гр уменьшалось, но не достоверно; при дозе 3,0 Гр - в 1,59 раза (на 37,2%), при дозе 5,0 Гр - в 1,67 раза (на 40,5%), что достоверно по отношению к биологическому контролю.

Применение флоренты до облучения по указанной выше схеме способствовало определенной нормализации исследуемых показателей, характеризующих функциональную активность щитовидной железы, и прослеживалось при всех радиационных нагрузках и во все сроки исследования.

Таким образом, внешнее однократное облучение в дозах от 0,5 до 5,0 Гр вызывает нарушение функциональной активности щитовидной железы. При этом наблюдается дозовая и временная зависимость. Наибольшие изменения наблюдаются при дозах 3,0-5,0 Гр на 2-7 сутки после облучения. Применение экстракта пихты сибирской до облучения нормализует функциональную активность щитовидной железы, что проявляется увеличением концентрации тиреоидных гормонов (Т₃, Т₄) у облученных животных до нижних границ физиологической нормы.

Для установления антиоксидантных свойств флоренты изучали динамику малонового диальдегида и глутатионредуктазы в печени облученных крыс. Одновременно с этим определяли динамику титров аутоантител и бляшкообразующих клеток в периферической крови облученных крыс на фоне применения исследуемого препарата. Кровь и печень для исследования брали при убое животных через одни, пять и десять суток после облучения.

Однократное внешнее общее облучение крыс в дозе 7,0 Гр подавляет активность глутатионредуктазы, которая является одним из компонентов антиоксидантной защиты организма, обладает способностью катализировать химические реакции, в результате которых токсичные свободные радикалы и перекиси превращаются в безвредные соединения. Снижение активности антиоксидантного фермента глутатионредуктазы влечет за собой достоверный прирост малонового диальдегида.

В результате наших исследований было установлено, что активность глутатионредуктазы у животных группы облученного контроля, по сравнению с биологическим контролем, была достоверно понижена на 1, 5 и 10 сутки исследования в 3,7; 2,9 и 2,08 раза, соответственно (рис. 8). В то время концентрация малонового диальдегида в печени крыс контроля облучения достоверно возрастала во все сроки исследования в 3,76; 2,93 и 2,02 раза, соответственно (рис. 7).

Введение крысам флоренты за 7 дней до летального облучения способствовало коррекции показателей антиоксидантной системы. Прирост малонового диальдегида в подопытных группах достоверно понижался, а активность глутатионредуктазы достоверно повышалась по сравнению с контролем облучения (рис. 7, 8).

Рис. 7. Динамика малонового диальдегида у облученных крыс на фоне применения флоренты

Рис. 8. Динамика глутатион-редуктазы у облученных крыс на фоне применения флоренты

Так, через 1, 5, 10 сутки у крыс подопытной группы (фл + 7 Гр) активность антиоксидантного фермента ГР было достоверно выше по сравнению с животными группы облученного контроля в 3,39; 2,87; 1,88 раза, соответственно. Подобная закономерность наблюдалась и в подопытной группе (1 Гр + фл + 7 Гр). Введение флоренты животным после облучения в течение 5-7 суток эффект коррекции показателей антиоксидантной защиты организма был явным, но несколько слабее эффекта приема данного препарата перед облучением. Следовательно, у животных, которые получали флоренту сохранялась активность глутатионредуктазы, которая не позволяла накапливаться малоновому диальдегиду в более высоких концентрациях, характерных для животных незащищенной группы.

Облучение в дозе 7,0 Гр вызывало накопление аутоантител в периферической крови облученных животных с оценкой реакции как «положительная» и «резко положительная». Резко положительных значений (3-4 балла) у крыс облученного контроля реакция Уанье достигала на 5 сутки после воздействия радиации. Применение экстракта пихты сибирской оказывало иммуномодулирующее влияние на образование антител к ЛСЭ, при этом титры аутоантител к ЛСЭ выявлялись, но в менее высоких титрах, оцениваемых в 0,5-1,0 балла, а количество клеток аутогемолизинов (БОК) уменьшалось до нижних границ физиологической нормы (2-3%).

Можно считать, что применение флоренты сдерживает реакцию цепного окисления липидов, инициируемую ионизирующим излучением и играющую важную роль в патологии и гибели клеток. В результате понижается значимость такой реакции, способствующей массовому накоплению избытка токсических продуктов окисления липидов. Доказательством тому служат полученные данные по относительной нормализации антиоксидантной защиты, характеризующейся оптимальной активностью глутатионредуктазы и содержанием МДА в норме.

Влияние предварительного облучения крыс в дозе 0,75 Гр в сочетании с эракондом и флорентой на содержание клеток костного мозга и периферической крови крыс при дозе 7 Гр

Облучение крыс в дозе 7 Гр угнетало пролиферативную активность костного мозга. При этом общее количество клеток в костном мозге на вторые сутки уменьшалось на 70-80% по сравнению с биологическим контролем. Предварительное облучение в дозе 0,75 Гр за 28-30 суток до воздействия в дозе 7,0 Гр способствовало развитию адаптации клеток костного мозга к повторному воздействию радиации. Больший эффект наблюдался при предварительном облучении крыс с последующим введением препаратов природного происхождения - эраконда и флоренты. Так в четвертой и пятой группах в период первичной реакции на облучение клеток сохранялось достоверно на 45-48% больше, чем в контроле облучения (рис. 9). Функциональный пул гемопоэза, который представлен форменными элементами периферической крови, последовательно реагировал на воздействие ионизирующей радиации вслед за нарушением гемопоэза в костном мозге (табл. 8).

Количество лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов у крыс, подвергнутых ЛД_60/30, резко снижалось по сравнению с биологическим контролем соответственно в 5,6 раза (3 сутки), в 1,7 раза (7 сутки) и в 4,3 раза (7 сутки). Предварительное облучение в низкой дозе оказывало защитное действие на опустошение функционального пула гемопоэза. При этом содержание лейкоцитов периферической крови в указанные сроки повышалось в 1,4 раза, эритроцитов в 1,3 раза, тромбоцитов в 1,2 раза. Введение эраконда и экстракта пихты сибирской с водой и кормом в сочетании с предварительным облучением способствовало еще большему повышению радиорезистентности клеток периферической крови.

Таблица 8. Показатели картины периферической крови подопытных крыс

Группы	Эритроциты, 1012/л (7-е сут)	Тромбоциты, 109/л (7-е сут)	Лейкоциты, 109/л (3-е сут)
1 б.к.	6.56±0.08	410±17	8.98±0.15
к.о.	3.70±0.18*	96±4,6*	1.60±0.07*
(0,75+7Гр)	4.57±0.23**	114±3,1	2.20±0.07**
(0,75+э+7Гр)	4.62±0.16**	126±4,2	2.56±0.07**
(0,75+фл+7Гр)	4.72±0.23**	129±3,3	2.60±0.15**

Так, сохранность лейкоцитов в крови защищенных животных с применением эраконда и флоренты, в среднем, была на 60% выше по сравнению с облученным контролем. Подобная закономерность наблюдалась и с количественным содержанием эритроцитов и тромбоцитов.

Влияние предварительного облучения (1,0 Гр), эраконда, тимогена и флоренты на компенсаторные возможности популяции клеток костного мозга крыс

Для изучения влияния предварительного облучения в низкой дозе, эраконда, тимогена и флоренты, как в отдельности так и в их сочетании, на компенсаторные возможности различных популяций клеток костного мозга крысы были разбиты на 9 групп: первая - биологический контроль; вторая - облученный контроль в дозе 9,0 Гр; третья - 1,0 Гр + 9,0 Гр; четвертая - эраконд + 9,0 Гр; пятая - 1,0 Гр + эраконд + 9,0 Гр; шестая - тимоген + 9,0 Гр; седьмая - 1 Гр + тимоген + 9,0 Гр; восьмая - флорента + 9,0 Гр; девятая - 1 Гр + флорента + 9,0 Гр.

На 2 сутки (период наибольшего опустошения костного мозга) после воздействия в дозе 9,0 Гр содержание эритроидных клеток по сравнению с биологическим контролем достоверно уменьшилось на 90% (p<0,01). Применение исследуемых радиозащитных способов способствовало достоверному сохранению данной популяции клеток в этот период по сравнению с контролем облучения в 2-3 и более раза (рис. 10). На восьмые сутки компенсаторные возможности эритроидных клеток были значительно выше у защищенных животных и составляли в третьей, четвертой, пятой, шестой, седьмой, восьмой и девятой групп - 80,6; 75,1; 83,1; 78,0; 94,4; 77,6; 92,2%%, соответственно по отношению к биологическому контролю, в то время как в незащищенной группе только 61,3%.

Количество нейтрофильных клеток на вторые сутки после облучения в дозе 9,0 Гр достоверно уменьшилось в 17,4 раза или на 94,3% по отношению к биологическому контролю (p<0,01). Применение предварительного облучения в дозе 1,0 Гр, эраконда, тимогена и флоренты как в отдельности так и в их сочетании способствовало сохранению данной популяции клеток по отношению к контролю облучения в 4-5 и более раз (рис. 11). На восьмые сутки компенсаторные возможности нейтрофильных клеток в костном мозге бедренной кости были выражены сильнее в третьей, четвертой, пятой, шестой, седьмой, восьмой, девятой групп подопытных животных и составляли 78,0; 81,0; 86,1; 83,0; 91,5; 80,4; 94,8%%, соответственно по отношению к биологическому контролю. В то время как в группе крыс контроля облучения их содержание составляло только 61,0%, что было достоверно ниже величин подопытных групп и биологического контроля, в среднем, в 1,6 раза (p<0,05).

Рис. 10. Изменение эритроидных клеток в костном мозге крыс на вторые сутки после облучения ЛД_60/30

Рис. 11. Изменение нейтрофильных клеток в костном мозге крыс на вторые сутки после облучения ЛД_60/30

При воздействии радиации в дозе 9 Гр на вторые сутки происходило достоверное снижение лимфоидных клеток в бедренной кости в 12,7 раза по отношению к биологическому контролю (p<0,01). Применение предварительного облучения в дозе 1,0 Гр, эраконда, тимогена и флоренты как в отдельности так и в их сочетании способствовало достоверному сохранению данной популяции клеток в этот период по отношению к контролю облучения в, среднем, в 2,5-4 и более раз (рис. 12). На восьмые сутки компенсаторные возможности лимфоидных клеток в костном мозге бедренной кости были выражены сильнее у защищенных групп подопытных животных и составляли в среднем 76-90%% по отношению к норме. В то время как в группе крыс контроля облучения их содержание составляло только 58,1%, что было достоверно ниже величин подопытных групп.

Рис. 12. Изменение лимфоидных клеток в костном мозге крыс на вторые сутки после воздействия ЛД_60/30

Таким образом, облучение крыс в дозе 9,0 Гр достоверно угнетает пролиферативную активность костного мозга. При этом количество эритроидных, нейтрофильных и лимфоидных клеток на вторые сутки после воздействия радиации в указанной дозе достоверно уменьшается. Применение предварительного облучения за 28-30 суток до летального воздействия, введение эраконда, тимогена и флоренты как в отдельности, так и в их сочетании с предварительным облучением способствует сохранности эритроцитарного, гранулоцитарного и агранулоцитарного ростков гемопоэза в костном мозге бедренной кости крыс. При этом тимоген в большей степени оказывает положительное влияние, как на сохранение, так и на восстановление лимфоидных клеток костного мозга.

Иммунобиологическое состояние защищенных и облученных летальной дозой крыс

На данном отрезке работы изучали влияние предварительного облучения в дозе 1,0 Гр в сочетании с тимогеном, эракондом и флорентой на иммунобиологические показатели подопытных крыс (табл. 9).

Однократное облучение крыс второй группы в дозе 9 Гр достоверно угнетало синтез IgG, IgA, IgM по сравнению с биологическим контролем в 1,8; 2,0 и 1,7 раза, соответственно (p<0,05). При этом достоверно, на 48,7%, увеличивалось содержание ЦИК (p<0,05). В этих условиях реакция Уанье оценивалась как резко положительная. Достоверно, в 3,2 раза, увеличивалось количество бляшкообразующих клеток; значительно уменьшалось содержание Т- и В-лимфоцитов; понижалась функциональная активность щитовидной железы, оцениваемая содержанием Т₃ и Т₄. Перечисленные показатели свидетельствовали о выраженном иммунодефицитном состоянии организма летально облученных животных. При этом нарушалась антиоксидантная система организма, о чем свидетельствовали достоверное повышение малонового диальдегида в 2,24 раза (p<0,01) и достоверное понижение глутатионредуктазы в 2,25 раза (p<0,01).

На этом фоне в третьей, четвертой и пятой подопытных группах происходила коррекция содержания основных классов иммуноглобулинов, Т- и В-лимфоцитов. Функциональная активность щитовидной железы приближалась к норме. Снижалось содержание агрессивных аутоантител, бляшкообразующих клеток и циркулирующих иммунных комплексов; повышалась активность глутатионредуктазы и понижалось содержание малонового диальдегида по сравнению с незащищенными и облученными в летальной дозе животных. Нормализация иммунных и антиоксидантных показателей у защищенных, а затем облученных летальной дозой животных, свидетельствовало о положительном влиянии примененных способов профилактики острой лучевой болезни, включающих предварительное облучение в сочетании с тимогеном, эракондом и флорентой.

Таблица 9. Иммунобиологические показатели подопытных крыс на 7 сутки после воздействия радиации в ЛД_90-100/30

Показатели	Группы
	1 (б.к.)	2 (к.о.)	3 (1Гр+Эр+9Гр	4 1Гр+т+9Гр	5 1Гр+фл+9Гр
Ig G мг/мл	6,88±0,80	3,82±0,04*	5,94±0,12	6,24±0,18**	5,74±0,06**
Ig А мг/мл	0,49±0,08	0,24±0,02*	0,38±0,01	0,42 ±0,21**	0,38±0,04**
Ig М мг/мл	0,58±0,08	0,34±0,08*	0,62±0,04	0,64±0,14**	0,54±0,06**
ЦИК (усл. ед.)	41,4±1,22	61,6±0,12*	42,2±0,14	41,8±0,18**	42,6±0,24**
Антитела к ЛСЭ (баллы)	0,29±0,09	2,2±0,03*	0,5±0,06	0,5±0,16**	0,3±0,01
БОК (%)	1,82±0,03	5,84±0,12*	2,08±0,09	2,22±0,21 **	2,24±0,06**
Т-клетки, %	45,5±1,82	34,5±0,24*	42,5±0,14	43,5±0,23	43,7±1,08
В-клетки, %	29,0±1,02	23,0±0,32*	26,4±0,16	27,4±0,26	26,8±0,82
Т3(нмоль/л)	1,29±0,15	0,72±0,01	1,12±0,01	1,22±0,06**	1,27±015**
Т4(нмоль/л)	54,2±2,02	44,2±0,42*	52,4±1,12	52,8±0,08**	51,8±0,32**
МДА (н-моль/1г ткани)	2,24±0,05	5,02±0,04*	2,32±0,22**	2,36±0,08**	2,28±0,06**
ГР (Н-моль НАДФ•Н2/1 мг ткани за 1 мин.)	14,62±0,32	6,32±0,22*	13,42±0,70**	13,02±1,07**	14,02±0,21**

Гистологические исследования сердца, селезенки и печени крыс, защищенных предварительным облучением в сочетании с препаратами природного происхождения от повторного летального воздействия, показали, что морфологическая структура органов сохранена, а имеющиеся изменения носят стереотипный характер и не имеют отличий от таковых биологического контроля.

Таким образом, способы профилактики острой лучевой болезни, включающие предварительное облучение, в сочетании с тимогеном, эракондом и флорентой в диапазоне доз костномозгового синдрома сохраняют гемопоэз, количество форменных элементов периферической крови. Положительно влияют на неспецифические факторы защиты организма, способствуют нормальной координации гуморальных и клеточных факторов иммунитета, нормализуют антиоксидантную защиту облученного организма, сохраняют морфологическую структуру внутренних органов, способствуют развитию восстановительных процессов в критических органах и тем самым способствуют выживаемости животных, облученных летальными дозами ионизирующей радиации.

Санитарная и биологическая оценка мяса, полученного от животных при внешнем облучении

Возможность использования мяса, полученного от облученных продуктивных животных в чрезвычайных ситуациях, когда неизбежен их массовый убой, на практике всегда вызывает определенный интерес. Наша работа выполнена на животных, при их внешнем облучении в экспериментальных условиях.

При этом нетели получили однократные дозы 4,0 и 4,5 Гр; свиньи - однократную дозу 4,0 Гр; овцы - однократную 3,5 Гр и трехкратную суммарную - 9 Гр, с интервалом в 1-2 месяца (1,0+3,5+4,5 = 9 Гр). Работа предусматривала получение мяса от облученных животных и возможности его длительного хранения в обычных условиях с применением нетрадиционных способов консервации с последующей его ветеринарно-санитарной и биологической оценкой.

Убой продуктивных облученных животных проводили в латентный период острой лучевой болезни. Перед убоем проводили клиническое обследование животных, которое показало, что их общее состояние, температура, пульс дыхание, состояние видимых слизистых, количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина в периферической крови соответствовало значениям, характерным для латентного периода острой лучевой болезни. При осмотре туш и внутренних органов облученных животных наблюдались признаки, характерные также для этого периода болезни (Киршин В.А., Бударков В.А., 1990).

Ветеринарно-санитарная экспертиза показала, что органолептические показатели свежего мяса животных, подвергнутых однократному и трехкратному радиационному воздействию, соответствовали таковым доброкачественного мяса (ГОСТ 7269-79). По физико-химическим и микроскопическим показателям (содержание аминоаммиачного азота, летучих жирных кислот, реакция с серно-кислой медью в бульоне, концентрация водородных ионов, реакция на пероксидазу, количество микроорганизмов в одном поле зрения мазка-отпечатка) мясо, полученное от подвергнутых внешнему радиационному воздействию животных не отличалось от мяса интактных животных, и соответствовало требованиям ГОСТа 23392-78, принятым для доброкачественного мяса. При этом общая микробная обсемененность мышечных слоев говядины, свинины, баранины в остывшем состоянии, полученных от облученных животных, имела тенденцию к увеличению, по сравнению с мясом интактных животных, но отвечала требованиям ГОСТа 2123 7-75.

На следующем этапе работы оценивались ветеринарно-санитарные показатели и биологическая оценка как замороженного мяса, полученного от облученных животных, так и говядины, свинины и баранины, подвергнутых нетрадиционным способам консервирования и хранения при температуре +15…+25⁰С. В работе были использованы два консерванта, разработанных во ВНИИВСГиЭ (1992). Отличительной особенностью разработанных консервантов является то, что наличие в них кислотных добавок (рН рассола - 2,1-2,7%) в сочетании с 20% поваренной солью и 0,1% бензоатом натрия придает им высокие бактериостатические свойства. Все входящие в рецептуры компоненты разрешены к применению в пищевой промышленности Минздрава РФ и ФАО/ВОЗ. Через 60 суток хранения при температуре + 15…+25⁰С консервированная говядина, свинина, баранина от облученных животных по органолептическим соответствовали требованиям ГОСТа 1386-55, существенных изменений в содержании аминоаммиачного азота не наблюдалось. Бульон при добавлении в него 5% раствора сернокислой меди оставался прозрачным или слегка мутным. В поле зрения мазка-отпечатка из глубоких слоев микрофлора не обнаруживалась. Результаты биохимических исследований показали, что концентрация водородных ионов увеличивалась к 60 суткам хранения на 25 - 33%. Реакция на пероксидазу во все сроки была положительной. Исследование консервирующей смеси выявили увеличение рН в процессе хранения в среднем на 30%.

Изучение биологической ценности и безвредности свежего, замороженного и консервированного мяса облученных животных в процессе хранения

Нами исследовалось мясо различного состояния - свежее, консервированное холодом и химическим способом, полученное от животных, подвергнутых однократному и трехкратному внешнему гамма-облучению.

Биологическую ценность и безвредность консервированной говядины, свинины и баранины проводили на инфузории Tetrahimena piriformis и на белых беспородных крысах.

Основным показателем при оценке результатов биотестирования с помощью Tetrahimena piriformis является относительная биологическая ценность (ОБЦ), которая определяется отношением числа выросших инфузорий на исследуемом продукте к числу их на стандартном образце. В качестве стандартного образца нами использовалась говядина, свинина, баранина от клинически здоровых животных в остывшем состоянии (табл. 10).

Таблица 10. Результаты биотестирования мяса животных с помощью инфузории Tetrahimena piriformis

Доза облучения животных (Гр)	Вид мяса	Состояние мяса	Консервант	ОБЦ, % к контролю
4,5	говядина	консерв.	№2	96,8±3,02
4,0	говядина	консерв.	№1	93,9±4,23
4,0	говядина	консерв.	№2	102,0±3,24
контроль	говядина	остывшая	-	100
4,5	свинина	консерв.	№1	99,9±1,52
4,0	свинина	консерв.	№1	100,0±05,43
4,0	свинина	консерв.	№2	97,4±2,37
контроль	свинина	остывшая	-	100
9,0	баранина	консерв.	№2	100,6±3,63
4,5	баранина	консерв.	холод	97,0±3,02
4,5	баранина	консерв.	№1	92,0±4,01
б.к.	баранина	консерв.	№2	100,4±2,32
контроль	баранина	остывшая	-	100

В целом количество инфузорий, выросших на питательных субстратах с добавлением консервированного мяса облученных животных, во всех подопытных группах не имела существенных или достоверных отличий от контрольного показателя, которым являлось остывшее мясо, поэтому ОБЦ мяса находилась в пределах контроля (табл. 10).

Для установления коэффициента эффективности белка мяса в опыте использовались и крысята-отъемыши, самцы со средней массой 54,2 г. В течение 28 дней крысята подопытных крыс ежесуточно получали 3-4,3 г исследуемого продукта, содержавших 180 мг азота или 1,125 г. белка. Контрольная группа животных получала стандартный казеин. Через каждые семь дней производили взвешивание животных. На протяжении всего опыта животные чувствовали себя хорошо. Крысята с удовольствием и полностью поедали мясо, выглядели бодрыми, подвижными. Реакция на внешние раздражители была адекватной.

В целом прирост массы крысят подопытных групп за 28 суток не имел достоверных отклонений от массы таковых контрольной группы. Отсюда коэффициент эффективности белка в подопытных группах соответствовал коэффициенту, полученному в контрольной группе. В конце опыта проводили патологоанатомическое исследование внутренних органов и их взвешивание. Масса печени, почек, селезенки, сердца, семенников и их весовые коэффициенты в подопытных группах находились в пределах величин контрольной группы крысят.

Острый опыт в течение 7 суток проводили на половозрелых крысах-самцах. В задачу входило выявление острого токсического действия исследуемого консервированного мяса.

Содержание крыс на рационе, белковая часть которого полностью состояла из консервированного продукта, в течение 7 суток не выявило заметных изменений в картине крови. Гематологические показатели подопытных животных находились на уровне контрольных величин. Биохимические исследования крови крыс, получавших консервированную говядину, свинину и баранину (консервант №1 и №2) показали, что уровень гормонов щитовидной и поджелудочной желез не имел достоверных отличий от контрольных значений (табл. 11)

Таблица 11. Содержание гормонов Т₃, Т₄ и инсулина в сыворотке крови крыс

Группы	Т3, нмоль/л	Т4, нмоль/л	Инсулин, мкед/мл
Первая (свинина №1)	1,22±0,260	38,61±4,721	19,98±4,365
Вторая (говядина №2)	1,14±0,070	39,37±4,868	20,54±2,530
Третья (баранина №2)	1,23±0,196	41,77±8,149	19,15±1,480
Четвертая (контроль)	1,17±0,154	40,58±3,548	20,65±1,807

В подостром опыте в течение 28 суток крысята отъемыши-самцы содержались на рационе, белок которого полностью состоял из исследуемого продукта. Скармливание крысятам консервированного мяса в течение 28 суток не оказывало заметного влияния на их общее состояние.

Кормление крысят в течение 28 суток консервированным мясом от однократно облученных животных (консервант №1 и №2) не вызывало у них изменений в картине периферической крови, включая лейкоцитарный профиль. Аналогичные результаты при исследовании гематологических показателей получены и при тестировании баранины от трехкратно облученных овец в суммарной дозе 9,0 Гр (консервант №2). Результаты биохимических исследований показали, что уровень общего белка в сыворотке крови всех подопытных групп крыс находился в пределах контрольного значения. Колебания активности аспартат- и аланинаминотрансферазы в сыворотке крови подопытных животных были незначительны по отношению к контролю. В печени активность перечисленных ферментов оставалась стабильной (табл. 12).

Таблица 12. Результаты биохимического исследования

Группы	Показатели
	общий белок (г/л)	АСТ нмоль/л-ч, г-ч	АЛТ нмоль/л-ч, г-ч
		сыворотка крови	печень	сыворотка крови	печень
1	66.3±4,19	3.04±0,12	5,80±0,13	2,30±0,14*	2,58±0,15
2	61,1±6,13	2,65±0,22	5,83±0,10	2,06±0,19	2,89±0,17
3	65,7±6,92	2,36±0,08	6,07±0,02	2,03±0,07	2,93±0,09
4	60,8±3,24	2,54±0,21	6,10±0,14	1,97±0,05	3,11±0,25
5	72,3±2,81	2,74±0,19	5,72±0,15	2,23±0,11	2,79±0,10
6	60,3±6,42	2,89±0,18	5,66±0,13	2,02±0,13	3,04±0,06
контроль	69,7±5,06	2,53±0,18	5,81±0,21	1,91±0,08	2,90±0,07

* - Р ? 0,05

Гистоморфологические исследования сердца, селезенки, печени у всех контрольных и подопытных групп крысят выявили однотипность микроструктурного состояния перечисленных органов.

Таким образом, кратковременное (7 суток) и продолжительное (28 суток) содержание подопытных крыс на рационах с белковым компонентом за счет исследуемого консервированного мяса не оказывало отрицательного влияния на общее состояние, рост и развитие животных; на качественный и количественный состав крови; на уровень общего белка крови. На содержание гормонов щитовидной и поджелудочной желез - тироксина, трийодтиронина и инсулина; на активность ферментов аспартат- и аланинаминотрансферазы в сыворотке крови и печени.

В опыте на трех поколениях крыс установлено, что длительное скармливание консервированной говядины, свинины и баранины не оказывало отрицательного влияния на выживаемость, развитие молодняка, на его росто-весовые показатели, а также воспроизводительные функции самок и самцов крыс. При скармливании консервированного мяса в вареном виде в течение жизни трех поколений, как в опытных, так и в контрольных группах гибели животных не наблюдалось (в опытах использовано 440 крыс). Коэффициент эффективности белка изучаемых продуктов в исходном втором и третьем поколениях подопытных крыс в среднем составлял 2,11-2,68, при этом достоверных различий с контролем не отмечалось.

Народившееся потомство второго и третьего поколений было жизнеспособным, через 9-10 суток после рождения у крысят появлялся шерстный покров; на 13-15 сутки они становились зрячими; к 20-25 суткам (период отъема) набирали живую массу 40-50 г. Явлений тератогенеза не установлено. В возрасте трех месяцев животные достигали живой массы 180-200 г. и становились половозрелыми. Гематологический профиль находился в пределах физиологической нормы.

Таким образом, в опыте на трех поколениях крыс, содержавшихся на рационах с белковым компонентом за счет консервированного мяса, не выявлено каких-либо нарушений в воспроизводительных функциях подопытных животных - половой зрелости, сроках беременности, численности приплода, а также в выживаемости и развитии потомства.

Выводы

1. Однократное гамма-облучение в дозах 7,0 и 9,0 Гр вызывает у крыс глубокие нарушения в кроветворении, угнетает гуморальные и клеточные факторы иммунитета, угнетает функциональную активность щитовидной железы, нарушает антиоксидантную защиту организма и способствует развитию средней и тяжелой степени острой лучевой патологии.

2. Длительное низкоинтенсивное гамма-облучение в течение 30, 60, 90 и 120 суток в суммарных дозах 0,28-1,12 Гр не вызывает видимых клинических изменений у подопытных крыс. При этом наблюдается незначительная лейкопения, эритропения, недостоверное понижение функциональной актив-ности щитовидной железы. Гуморальное и клеточное звено иммунитета ос-тается без изменений. Наблюдается слабый процесс аутоиммунизации в крови, селезенке, печени, почках, который приходится на начальный период нахождения животных под непрерывным облучением. Недостоверное снижение содержания общего белка, эфиров холестерина наблюдается в течение трех месяцев нахождения под облучением. Содержание общих фос-фолипидов не изменяется. Подобные особенности характерны и для свиней.

3. Однократное гамма-облучение крыс в диапазоне доз 0,5-2,0 Гр вызывает изменения со стороны показателей картины периферической крови, достоверность которых носит временной и дозовый характер. Восстановительный процесс протекает интенсивно и заканчивается к 30 суткам.

4. Предварительное однократное -облучение в малых дозах, препараты природного происхождения - эраконд, тимоген и флорента оказывают радиозащитное действие.

5. Предварительное облучение крыс в диапазоне доз от 0,5-1,5 Гр способствует развитию устойчивости их к последующему облучению в летальных дозах. При этом наибольший процент выживаемости (40-50%) у крыс наблюдается при предварительном облучении в дозах 0,75 и 1,0 Гр с временным интервалом между облучениями 28-30 дней.

6. Эраконд, тимоген и флорента, вводимые крысам до облучения в летальных дозах, стабилизируют гемопоэз, клеточные и гуморальные факторы иммунитета, нормализуют антиоксидантную систему организма, оказывают положительное влияние на функциональную активность щитовидной железы.

7. Повышение радиорезистентности организма (70-80%) достигается путем предварительного воздействия гамма-излучения в малых дозах в сочетании с эракондом. При этом однократно за 28-30 дней до воздействия летальных доз крыс подвергают предварительному воздействию гамма-излучения в дозе 0,75-1,0 Гр, а в течение 5-10 дней до облучения летальными дозами ионизирующего излучения вводят эраконд в расчете 5,0-7,5 мл/кг с водой или кормом.

8. Повышение радиорезистентности организма достигается путем предварительного воздействия гамма-излучения в малых дозах в сочетании с тимогеном. При этом однократно за 28-30 дней до воздействия гамма-излучения в летальной дозе крыс подвергают предварительному воздействию гамма-излучения в дозе 0,75-1,5 Гр, а в течение 5-10 дней до облучения летальными дозами ионизирующего излучения вводят тимоген с водой или кормом в дозе 40-60 мкг/кг. При этом выживаемость составляет 70-80%.

9. Повышение радиорезистентности организма достигается путем предварительного воздействия гамма-излучения в малых дозах в сочетании с флорентой. При этом однократно за 28-30 дней до воздействия гамма-излучения в летальной дозе крыс подвергают предварительному воздействию гамма-излучения в дозе 0,75-1,0 Гр, а в течение 5-7 дней до облучения летальными дозами ионизирующего излучения вводят флоренту с водой или кормом в объеме 6-8,5 мл/кг. При этом выживаемость составляет в среднем 60-80%.

10. Механизм радиозащитного эффекта предварительного облучения в сочетании с эракондом, флорентой и тимогеном обусловлен их адапто-генными, иммуномодулирующими и антиоксидантными свойствами. Сочетание предварительного воздействия радиации в малых дозах с препаратами природного происхождения повышает компенсаторные возможности гемопоэза у животных, подвергнутых летальному воздействию радиации. Оказывает корригирующее действие на гуморальные и клеточные факторы иммунитета, нормализует процессы аутоиммунизации, сохраняет антиоксидантную систему организма, предотвращает развитие геморрагического синдрома.

11. Гистоморфологическая структура сердца, селезенки и печени у крыс после пролонгированного низкоинтенсивного облучения в малых дозах, а также после облучения в летальных дозах в условиях применения радиозащитных средств сохранена.

12. Мясо, полученное от животных в латентный период острой лучевой болезни при внешнем воздействии ионизирующей радиации, и подвергнутое химическому консервированию сохраняет доброкачественные показатели солонины по органолептическим, биохимическим и бактериологическим показателям до 60 суток при температуре окружающей среды +15…+25⁰С. Биологическая ценность говядины, свинины, баранины по истечении 60 суток хранения не имеет существенных отличий от контрольного продукта.

13. Содержание крыс на рационах с белковым компонентом за счет исследуемой консервированной говядины, свинины и баранины не оказывает отрицательного влияния на общее состояние, рост и развитие животных, на показатели картины крови, уровень гормонов тироксина, трийодтиронина, инсулина, на активность ферментов - аспартат- и аланинаминотрансферазы в сыворотке крови и печени. Не влияет на весовые коэффициенты паренхиматозных органов, воспроизводительную функцию подопытных животных, а также на выживаемость и развитие потомства. Не вызывает гистоморфологических изменений в сердце и печени.

Практические рекомендации

1. Для повышения резистентности организма к неблагоприятным условиям среды, включая чрезвычайные ситуации, связанные с повышением уровня радиации, рекомендуем использовать природные адаптогены - эраконд, тимоген, флоренту.

2. Для повышения надежности комплекса мероприятий по групповой защите животных от воздействия внешней радиации рекомендуем использовать разработанные способы профилактики острой лучевой болезни, которые предполагают предварительное облучение в малых дозах в сочетании с природными радиозащитными средствами.

3. Для установления антирадикальных, антиоксидантных и иммункорригирующих свойств испытуемых лечебных препаратов различной природы рекомендуем использовать облученных лабораторных животных (мышей, крыс).

4. Рекомендуем результаты исследований, связанные с предварительным облучением в малых дозах в сочетании с природными радиозащитными средствами, изучить и учитывать в радиационной терапии онкологических заболеваний.

5. Полученные экспериментальные данные по ветеринарно-санитарной экспертизе и биологической оценке мяса рекомендуем учитывать при решении вопросов рационального использования облученных ионизирующей радиацией животных.

6. Результаты исследований рекомендуем включить в учебный процесс ветеринарных и биологических вузов и факультетов при изучении радиобиологии, патологической физиологии, иммунологии, терапии, ветеринарно-санитарной экспертизы, экологии, радиоэкологии, а также использовать при написании учебников и учебных пособий.

Список опубликованных работ

1. Сафонова, В.А. Влияние неблагоприятных экологических факторов физической природы на некоторые показатели специфической защиты у животных /В.А. Сафонова, В.Ю. Сафонова // Вестник Оренбургского ГУ. 2003. №6. - С. 161-165.

2. Сафонова, В.Ю. Биологическая оценка баранины, полученной от облученных животных /В.Ю. Сафонова // Вестник Оренбургского ГУ. 2004. №9. - С. 107-110.

3. Сафонова, В.А. Влияние ионизирующей радиации на показатели гуморального иммунитета животных /В.А Сафонова, В.Ю. Сафонова // Вестник РАСХН». 2004. №4. - С. 22-24.

4. Сафонова, В.Ю. О влиянии фитопрепаратов на радиорезистентность организма /В.Ю. Сафонова // Вестник Оренбургского ГУ. 2005. №4. - С. 92-96.

5. Сафонова, В.Ю. Влияние экстракта пихты сибирской на некоторые показатели окислительных и аутоиммунных процессов у облученных животных /В.Ю. Сафонова // Вестник Красноярского ГАУ. 2007. Вып. 6. С. 165-169.

6. Сафонова, В.А. Влияние предварительного облучения животных малой дозой радиации в сочетании с фитопрепаратами на содержание клеток костного мозга и периферической крови при последующем летальном радиационном воздействии /В.А. Сафонова, В.Ю. Сафонова // Вестник Красноярского ГАУ. 2008. Вып.2. - С. 190-195.

7. Сафонова, В.Ю. Некоторые показатели радиочувствительности организма и их коррекция / В.Ю. Сафонова // Вестник Оренбургского ГУ. 2008. Вып. 6 (88). С. 112-117.

8. Сафонова, В.Ю. Влияние предварительного воздействия ионизирующего излучения в низкой дозе и эраконда на выживаемость, клиническое состояние и гемопоэз повторно облученных летальной дозой животных /В.Ю Сафонова, В.А. Сафонова // Вестник Красноярского ГАУ. 2008. Вып. 4. С. 196-201.

9. Сафонова, В.Ю. Санитарная и биологическая оценка свежей говядины, полученной от облученных животных /В.Ю. Сафонова // Вестник Оренбургского ГУ. 2008. №81. - С. 117-121.

10. Сафонова, В.Ю. Влияние ионизирующего излучения в низкой дозе на гистоморфологию печени крыс /В.Ю. Сафонова, В.А. Сафонова // Известия Оренбургского ГАУ. 2008. №4 (20). - С. 122124.

11. Сафонова, В.Ю. Влияние эраконда, флоренты и тимогена на содержание клеток костного мозга облученных крыс /В.Ю. Сафонова // Труды Кубанского ГАУ. Серия: Ветеринарные науки. 2009, №1 (ч. 1.). - С. 237-239.

12. Сафонова, В.Ю. Влияние физического фактора и тимогена на клинические показатели облученных крыс /В.Ю. Сафонова // Труды Кубанского ГАУ. Серия: Ветеринарные науки. 2009, №1 (ч. 1.). - С. 239-241.

13. Сафонова, В.Ю. Способ физико-биологической профилактики острой лучевой болезни: Патент РФ на изобретение №2307398 /В.А. Сафонова, В.Ю. Сафонова, А.П. Жуков // Бюл., 2007. №27. - 4 с.

14. Сафонова, В.Ю. Способ профилактики острой лучевой болезни лабораторных животных: Патент РФ на изобретение /В.Ю. Сафонова, В.А. Сафонова, А.П. Жуков // Бюл., 2008. №36. 5 с.

15. Сафонова, В.А. Элементы ядерной физики и химии в биологии и ветеринарии: учебное пособие /В.А. Сафонова, В.Ю. Сафонова. - Оренбург: Издательский центр Оренбургского ГАУ, 2000. 118 с.

16. Сафонова, В.Ю. Радиационная экология: учебное пособие /В.Ю. Сафонова, В.А. Сафонова. - Оренбург: Издательский центр Оренбургского ГАУ, 2005. - 312 с.

17. Сафонова, В.Ю. Относительная биологическая эффективность ионизирующих излучений: учебно-методическая разработка /В.Ю. Сафонова. - Оренбург: Издательский центр Оренбургского ГАУ, 2006. 12 с.

18. Сафонова, В.Ю. Дозы ионизирующих излучений: учебно-методическая разработка /В.Ю. Сафонова. - Оренбург: Издательский центр Оренбургского ГАУ, 2006. 11 с.

19. Методы радиационной экспертизы объектов ветеринарного и экологического надзора: учебно-методическое пособие /В.А. Сафонова, Р.Ш. Тайгузин, В.Ю. Сафонова, Д.Г. Мустафина. - Оренбург: Издательский центр Оренбургского ГАУ, 2009. 80 с.

20. Сафонова, В.Ю. Биологическая оценка мяса, полученного от облученных овец /В.Ю. Сафонова, В.С. Портнов // Прикладные аспекты радиобиологии: матер. Всероссийской научно-практической конференции. Москва, 1994. С. 83-84.

21. Сафонова, В.Ю. Изучение биологической ценности консервированного мяса экспресс-методом /В.Ю. Сафонова // Резервы увеличения производства и повышения качества сельскохозяйственной продукции: матер. региональной научно-практической конференции. Оренбург, 1994. - С. 46-47.

22. Сафонова, В.Ю. Изучение биохимических показателей крови и органов крыс, получавших консервированное мясо /В.Ю. Сафонова // Резервы увеличения производства и повышения качества сельскохозяйственной продукции: матер. региональной научно-практической конференции. Оренбург, 1994. - С. 47-48.

23. Сафонова, В.Ю. Биологическая оценка консервированного мяса /В.Ю. Сафонова // Проблемы ветеринарной санитарии и экологии: тематич. сборник науч. работ. - Москва, 1994. Т.94. - С. 24-25.

24. Сафонова, В.Ю. Активность аланин- и аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови и печени крыс, получавших консервированное мясо /В.Ю. Сафонова // Проблемы ветеринарной санитарии и экологии: тематич. сборник науч. работ. Москва, 1994. Т.94. С. 22-23.

25. Сафонова, В.Ю. Годовой отчет научно-исследовательской работы /В.Ю. Сафонова // Государственное задание «Скатка-7». М.: ВНИИВСГиЭ, 1994. 11 с.

26. Сафонова, В.Ю. Некоторые показатели функционального состояния щитовидной и поджелудочной желез у крыс, получавших консервированную говядину от облученных животных /В.Ю. Сафонова // Респ. научно-произв. конф. по актуальным проблемам ветеринарии и жив-ва: матер. конф. Казань, 1997. - С. 143-144.

27. Сафонова, В.Ю. Отдаленные последствия у крыс, поедавших мясо свиней, подвергнутых химическому и радиационному воздействию /В.Ю. Сафонова // Регион. конф. молодых ученых и специалистов: сб. мат. конф. Оренбург, 1997. - С. 60-61.

28. Сафонова, В.Ю. Биологическая оценка мяса свиней, подвергнутых радиационному и химическому воздействию /В.Ю. Сафонова // Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животных: сб. матер. межд. коорд. совещ. Воронеж, 1997. - С. 254-255.

29. Сафонова, В.Ю. Ветеринарно-санитарные показатели баранины, полученной от пораженных ионизирующим излучением овец /В.Ю. Сафонова // Вестник ветеринарии: внутривуз. сборник научных работ. Оренбург, 1999. С. 49-52.

30. Сафонова, В.Ю. Изучение биологической ценности говядины от облученных животных на культуре инфузорий /В.Ю. Сафонова // Вестник ветеринарии: внутривуз. сборник научных работ. Оренбург, 1999. - С. 52-54.

31. Сафонова, В.Ю. Оценка безвредности говядины, полученной в различных экологических условиях /В.Ю. Сафонова // Морфология и хирургия в практической ветеринарии и медицине: материалы научно-практической конференции. Оренбург, 1999. С. 157-158.

32. Сафонова, В.Ю. Клеточные и гуморальные факторы иммунитета животных при внешнем хроническом гамма-облучении /В.Ю. Сафонова // Незаразные болезни животных: матер. Международ. научно-производ. конф., посвящ. 70-летию зооинж. фак-та Казанской ГАВМ 30-31 мая 2000 г. Казань, 2000. С. 239-240.

33. Сафонова, В.Ю. Соотношение Т- и В-лимфоцитов в периферической крови хронически облученных крыс /В.Ю. Сафонова // Вестник ветеринарии: внутривуз. сборник научных работ. Оренбург, 2000. - С. 100 -102.

34. Сафонова, В.А. Биологическая оценка малых уровней радиации при чрезвычайн...