55 больных инфильтративным туберкулезом легких получали инъекции препарата Бестим в дозе 100 мкг (5 ежедневных в/м инъекций) на фоне подобранной противотуберкулезной этиотропной терапии. Оказалось, что иммунотерапия с помощью препарата Бестима значительно снижает бактериовыделение: через 1 месяц после иммунотерапии прекращение бактериовыделения отмечено у 57% пациентов в опытной группе и лишь у 19% в контрольной группе; через 3 месяца тот же параметр составил 80% и 37%, соответственно. Отмечено положительное влияние препарата на закрытие полостей распада в легких, исчезновение симптомов туберкулезной интоксикации и улучшение субъективного состояния пациентов. Положительная клиническая динамика сопровождалась достоверным повышением относительного содержания CD3+ лимфоцитов в периферической крови сразу после окончания лечения и через 3 месяца после иммунотерапии и явной тенденцией к увеличению количества CD3+CD4+ клеток. Кроме того, у больных, получавших Бестим, наблюдалось достоверное снижение лектин-стимулированной РБТЛ и, одновременно, повышение РБТЛ, стимулированной PPD.

Использование Бестима (100 мкг в/м, 1 раз в день, 5 дней) в комплексной терапии у больных с генерализованными формами хирургической инфекции (генерализованный сепсис, перитонит, панкреонекроз, пневмония, абсцессы и инфильтраты брюшной полости, гнойно-воспалительные процессы в малом тазу и др.) и больных с гнойно-септической пульмонологической патологией, развившейся вне связи с оперативным вмешательством (пневмония, обострение бронхоэктатической болезни) позволяет добиться устойчивой положительной динамики в состоянии пациентов. Бестим позитивно влиял на биохимические и гематологические показатели, на восстановление параметров иммунного статуса и, прежде всего, повышение процентного содержания в периферической крови СD3+ лимфоцитов, активированных Т-лимфоцитов СD3+НLА-DR+, CD3+СD4+ клеток, повышение иммунорегуляторного и снижение лейкоцитарно-Т-лимфоцитарного индексов, повышение уровней митоген-индуцированной пролиферативной активности Т-лимфоцитов in vitro.

В ходе клинических испытаний Бестима у 79 испытуемых, страдавших распространенными и локализованными формами мочеполового хламидиоза, выявлено положительное влияние препарата на процесс клинического выздоровления и бактериологической санации пораженных органов. Бестим (100 мкг в/м, 1 раз в день, 10 дней) использовался в качестве дополнения к традиционной антибактериальной терапии. При использовании Бестима в терапии локализованных форм мочеполового хламидиоза как клиническая (КЭ), так и бактериоцидная эффективность (БЭ) после окончания лечения (КЭ_э 81%, БЭ_э 75%) были достоверно выше, чем в контрольной группе (КЭ_к 50%, БЭ_к 56%). Через 3 месяца после окончания лечения достоверность различия в исследованных параметрах сохранялись, причем, у испытуемых, леченных Бестимом, не произошло снижения показателей эффективности терапии вследствие рецидивов (КЭ_э 81%, БЭ_э 80%), как это наблюдалось в контрольной группе (КЭ_к 40%, БЭ_к 35%). Обращает на себя внимание возрастание содержания лимфоцитов, CD3+, CD3+CD4+ и CD3+CD8+ клеток в процессе лечения у испытуемых, получавших Бестим. Наряду с этим происходило снижение уровня CD20+ и CD16+ клеток. Кроме того, наблюдалось снижение спонтанной продукции ИЛ-1, ФНО, ИЛ-6, ИЛ-8 и концентрации С5 компонента комплемента, что связано, вероятно, с уменьшением интенсивности воспаления в пораженных органах. Возросли спонтанная продукция ИЛ-2 и нестимулированная пролиферация лимфоцитов. Усиливалась ИЛ-8- и ФМЛП-индуцированная миграция нейтрофилов, их спонтанная адгезия и фагоцитарная активность мононуклеарных клеток.

Таким образом, применение инъекционной формы иммуномодулирующего препарата Бестима в качестве средства патогенетической терапии у больных инфекционными заболеваниями с преимущественно внутриклеточной локализацией возбудителя было патогенетически оправданным, способствовало санации организма от патогена и ликвидации иных патологических признаков заболеваний. Положительная клиническая динамика наблюдалась на фоне выраженной динамики клинико-иммунологических показателей в сторону усиления антиген-специфического иммунного ответа и направлении Т хелперов 1 типа.

Полное отсутствие побочных реакций при применении, комплексное иммуномодулирующее действие препарата, быстрое наступление клинического и иммунотропного эффектов, позволяют рассматривать Бестим как один из песпективных препаратов для иммунокорригирующей терапии в клинике хирургических и инфекционных болезней.

ВЫВОДЫ

1. Установлены закономерности структурно-функциональной организации г-глутамил содержащих дипептидов и показано, что наиболее активным аналогом с иммуномодулирующим действием является г-D-гутамил-L-триптофан (Бестим).

2. Биологическая активность Бестима обусловлена высокоаффинным связыванием со специфическими сайтами на мембранах макрофагов и тимоцитов.

3. Исследование фармакокинетики Бестима при различных путях введения показало высокую биодоступность препарата как при парентеральном, так и при пероральном путях введения.

4. Механизм иммуностимулирующего действия Бестима связан с увеличением дифференцировки и преимущественным усилением функциональной активности Т-лимфоцитов хелперов 1 типа. Как при парентеральном, так и пероральном введении Бестим ускоряет дифференцировку ранних предшественников Т-лимфоцитов в костном мозге, созревание Т-клеток в тимусе, увеличивает ИЛ-2-зависимую пролиферацию лимфоцитов, экспрессию б субъединицы рецептора ИЛ-2, продукцию ИЛ-2 и ИФНг на фоне параллельного снижения продукции ИЛ-4. Бестим усиливает развитие реакции гиперчувствительности замедленного типа, стимулирует дифференцировку и цитотоксическую активность естественных киллеров, увеличивает фагоцитоз и переваривающую активность макрофагов.

5. При развитии иммунного ответа Бестим усиливает антиген-специфическую пролиферацию лимфоцитов и антиген-специфическую продукцию лимфоцитами ИЛ-2 и ИФН-г, стимулирует продукцию антител и появление антителообразующих В-клеток.

6. Бестим усиливает противоинфекционный иммунитет. Механизм протективного действия Бестима в модели экспериментального туберкулеза связан с усилением фагоцитоза, активацией антиген-специфического иммунного ответа и поляризацией Т-хелперов в направлении T-хелперов 1 типа.

7. Бестим обладает иммуномодулирующим действием, изменяя направление преимущественного развития иммунного ответа. В модели экспериментальной аллергической бронхиальной астмы Бестим снижает титры аллерген-специфических IgE и тканевых проявлений аллергического иммунного ответа.

8. Бестим эффективен при комбинированном лечении больных гнойно-воспалительными хирургическими заболеваниями, хламидиозом, туберкулезом легких. Положительная клиническая динамика сопровождается иммуномодулирующим действием, проявляющемся в поляризации иммунного ответа в направлении Т-хелперов первого типа и в усилении антиген-специфического иммунного ответа.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Пигарева Н.В., Симбирцев А.С., Колобов А.А., Калинина Н.М., Кауров О.А., Кетлинский С.А. Изучение иммуномодулирующей активности нового пептидного соединения бестима // Иммунология. - 2000. - №1. - С.33-35.

2. Simbirtsev A., Zabolotnych N., Kolobov A., Pigareva N., Kotov A., Minaeva E., Vinogradova T. Synthetic peptide gamma-D-glutaminyl-L-tryptophan has antituberculosis activity in murine model // Eur.Resp.J. - 2001. - V.18. - N.3. - P.340-344.

3. Наволоцкая Е.В., Колобов А.А., Кампе-Немм Е.А., Заргарова Т.А., Малкова Н.В., Краснова С.В., Ковалицкая Ю.А., Завьялов В.П., Липкин В.М. Синтетический пептид VKGFY и его циклический аналог стимулируют бактерицидную активность макрофагов через неопиоидные рецепторы в-эндорфина // Биохимия. -2003. - Т.68. - №1. - С.42-51.

4. Navolotskaya E.V., Kovalitskaya Y.A., Zolotarev Y.A., Kudryashova N.Y., Goncharenko E.N., Kolobov A.A., Kampe-Nemm E.A., Malkova N.V., Yurovsky V.V., Lipkin V.M. Beta-endorphin-like peptide reduces the production of 11-oxycorticosteroids by rat adrenal cortex through non-opioid beta-endorphin receptors // Peptides. - 2003. - V.24. - N.12. - P.1941-1946.

5. Navolotskaya E.V., Vanina V.I., Zolotarev Y.A., Kudryashova N.Y., Goncharenko E.N., Kolobov A.A., Kampe-Nemm E.A., Yurovsky V.V., Lipkin V.M. Synthetic peptide immunocortin stimulates the production of 11-oxycorticosteroides by rat adrenal cortex through ACTH receptors // Regul. Pept. - 2004. - V.119. - N.1-2. - P.99-104.

6. Наволоцкая Е.В., Ковалицкая Ю.А., Золотарев Ю. А., Колобов А.А., Кампе-Немм Е.А., Малкова Н.В., Юровский В.В., Липкин В.М. Характеристика неопиоидного рецептора в-эндорфина // Биохимия. - 2004. - Т.69. - №.4 - С.394-400.

7. Алексеева Т.М., Шабашова Н.В., Фролова Е.В., Колобов А.А., Симбирцев А.С. Влияние иммуномодулятора Бестим на клиническое состояние и иммунную реактивность больных идиопатическими воспалительными миопатиями // Цитокины и воспаление. -2007. -Т.6. -№1. - С.36-39.

8. Петров А.В., Пигарева Н.В., Котов А.Ю., Колобов А.А., Симбирцев А.С. Изучение влияния Бестима (SCV-07) на дифференцировку Т-лимфоцитов у мышей // Цитокины и воспаление. - 2007. - Т.6. - №3. - С.27-31.

9. Ковалитская Ю.А., Садовников В.Б., Колобов А.А., Золотарев Ю.А., Юровский В.В., Липкин В.М., Наволоцкая Е.В. Связывание в-эндорфина и его фрагментов с неопиоидным рецептором перитонеальных макрофагов мыши // Биоорг. Хим. - 2008. - Т.34. - №1. - С.36-42.

10. А. А. Колобов, Н. И. Колодкин, Ю. А. Золотарев, С. Тaфил, Е. В. Наволоцкая. Взаимодействие синтетического иммуномодулирующего дипептида бестима с макрофагами и тимоцитами мыши // Биоорг. Хим. - 2008. - Т.34. - №1. - С.43-49.

11. Alexander Kolobov, Andrey Simbirtsev, Nickolay Kolodkin, Natalia Pigareva, Alfred Rudolph, Cynthia Tuthill. Immunomodulatory properties of gamma-glutamyl and beta-aspartyl containing peptides // Peptides 1998. - Budapest, 1998. - P.526-527.

12. Alexander Kolobov, Andrey Simbirtsev, Natalia Pigareva, Nickolay Kolodkin, Alfred Rudolph, Cynthia Tuthill. Further investigation of immunomodulatory properties of gamma-glutamyl containing peptides // Peptides 2000. - Paris, 2001. - Р.877-888.

13. Alexander A. Kolobov, Andrey S. Simbirtsev, Natalia V. Pigareva, Natalia V. Zabolotnych, Tat'yana I. Vinogradova, Alexander Y. Kotov, Cynthia W. Tuthill, and Alfred R. Rudolph. Biological activity of the immunomodulatory peptide SCV-07 against murine tuberculosis // Peptides 2002. - Napoli, 2002. - Р.536-537.

14. Симбирцев А., Колобов А., Заболотных Н., Пигарева Н., Конусова В., Котов А., Варюшина Е., Бокованов В., Виноградова Т., Васильева С., Туфил С. Изучение биологической активности пептида SCV-07 на модели экспериментального туберкулеза у мышей // Russian Journal of Immunology. - 2003. - V.8 - №1. - С.11-22.

15. Kolobov A.A., Simbirtsev A.S. Bestim is an unique regulator of immunity // New Information technologies in medicine, pharmacology and biology. - Gurzuf, 2005. - Р.81-84.

16. Заболотных Н.В., Виноградова Т.И., Скворцова Л.А., Колобов А.А., Петров А.В., Пигарева Н.В., Сахарова И.Я., Васильева Г.Ю. Бестим в комплексной терапии туберкулеза легких. Под ред. Ю.Н.Левашева и А.С.Симбирцева // - СПб.: «Борей-Арт», 2007. -68 С.

СПИСОК ПАТЕНТОВ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Колобов А.А., Симбирцев А.С., Куликов С.В., Прусаков А.Н., Калинина Н.М., Пигарева Н.В., Котов А.Ю., Шпень В.М. Пептид, обладающий иммуномодулирующей активностью // Патент РФ №2091389 (95120266) от 27.09.97.

2. Kolobov A.A., Simbirtsev A.S., Kulikov S.V., Prusakov A.N., Kalinina N.M., Pigareva N.V., Kotov A.U., Shpen V.M., Kaurov O.A., Ketlinsky S.A.. Gamma-glutamyl containing immunomodulator compounds and methods therewith // PCT WO9719691, May 06, 1997.

3. Кауров О.А., Кетлинский С.А., Колобов А.А., Симбирцев А.С. Иммуностимулятор и препарат на его основе // Патент РФ №212098 (95119704) от 28.10.1998.

4. Колобов А.А., Симбирцев А.С. Пептид, обладающий иммуностимуляторной активностью, и препарат на его основе // Патент РФ №2142958 от 20.10.1999.

5. Kolobov A.A., Simbirtsev A.S., Kulikov S.V., Prusakov A.N., Kalinina N.M., Pigareva N.V., Kotov A.U., Shpen V.M., Kaurov O.A., Ketlinsky S.A.. Gamma-glutamyl containing immunomodulator compounds and methods therewith // US patent 5,744,452. April 28, 1998.

6. A.A. Kolobov, A.S. Simbirtsev. Gamma-glutamyl and beta-aspartyl containing immunomodulator compounds and methods therewith // US patent 5,916,878, June 29, 1999.

7. E.T. Wei, A.A. Kolobov, A.S. Simbirtsev. Gamma-glutamyl and beta-aspartyl containing immunomodulator compounds and methods therewith // PCT WO99/33799, July 08, 1999.

8. Н.В.Заболотных, Л.А.Иванова, Т.И.Виноградова, М.В.Павлова, С.Н.Васильева, А.С.Симбирцев, А.А.Колобов. Способ лечения туберкулеза легких // Патент РФ №2229892 от 06.10.2004.

9. А.А.Kolobov, A.S.Simbirtsev, T.I.Vinogradova, N.V.Zabolotnyh. Treatment of tuberculosis using immunomodulator compounds // PCT WO03013572, February 20, 2003.

10. Tuthill Cynthia W., Rudolph Alfred R., Kolobov Alexandr A., Simbirtsev Andrey S., Petrov Alexandr V. Treatment or prevention of respiratory viral infections with immunomodulator compounds // РСТ WO2005112639, December, 01, 2005.

11. А.А.Kolobov, A.S.Simbirtsev, T.I.Vinogradova, N.V.Zabolotnyh. Treatment of tuberculosis using immunomodulator compounds // US patent 7.173.013, February 06, 2007.

12. Thutill C., Rudolph A., Kolobov A., Simbirtsev A., Petrov A. Treatment or prevention of respiratory viral infections with immunomodulator compounds // WO2005/112639 A3, December 01, 2005.

13. Симбирцев А.С., Колобов А.А., Петров А.В., Пигарева Н.А., Оганезов В.К., Сизякина Л.П., Чирютина Э.В. Способ лечения аллергических заболеваний // Заявка на патент РФ 2007118237 от 17.05.2007.

Размещено на Allbest.ru