Роль стохастических факторов в процессе формирования первичных повреждений ДНК и хромосомных аберраций при воздействии радиации на соматические клетки млекопитающих in vitro и in vivo

где Y_AC - доля (%) клеток, содержащих нестабильные хромосомные аберрации, A₀ - начальная доля аберрантных клеток при t=0, T₁, T₂ - характерное время элиминации быстрой и медленной компонент, соответственно, "с" - доля клеток с быстрой элиминацией, t - время после облучения.

В табл. 2 приведены регрессионные коэффициенты для лиц с наиболее представительными цитогенетическими данными. Расположенные в порядке возрастания степени тяжести ОЛБ результаты демонстрируют рост начальной доли клеток и снижение времени элиминации "быстрой" фракции клеток по мере роста степени тяжести ОЛБ (c увеличением дозы). Аналогичной зависимости от дозы для времени элиминации "медленной" фракции T₂ и доли клеток с быстрой элиминацией "с" не наблюдается. По сравнению с рекомендациями IAEA (2001), где характерное время "полужизни" нестабильных аберраций принято равным 3 (лет), наши результаты показывают более быструю элиминацию 90% аберрантных клеток с характерным временем в пределах 0,5ч1,5 (лет) и последующим медленным снижением оставшихся 10% аберрантных клеток.

Таблица 2

Регрессионные коэффициенты индивидуальных зависимостей от времени доли аберрантных клеток в крови лиц с наиболее представительными цитогенетическими данными

*без оценки статистической погрешности

Разновидности нестабильных аберраций в аберрантных лимфоцитах облучившихся лиц в пострадиационном периоде были исследованы в группе из 56 человек в зависимости от степени тяжести ОЛБ. Динамика среднего числа аберраций в аберрантных клетках (табл. 3) была получена в виде:

Y_AB = Y₁ + (Y₀-Y₁) exp(- t/T₃),

где Y_AB -число нестабильных хромосомных аберраций на аберрантную клетку, Y₀ - начальное число аберраций; Y₁ -число аберраций в отдаленном периоде; T₃ - характерное время снижения числа аберраций. Анализ результатов (табл. 3) показывает, что число ацентриков и центрических колец в аберрантных клетках не зависит от времени после облучения, но увеличивается с ростом тяжести ОЛБ. Начальное число дицентриков возрастает с ростом степени тяжести ОЛБ от I до IV за счет клеток содержащих более одного дицентрика. В отдаленном периоде число дицентриков стремится к постоянной величине порядка 0,3-0,4 диц/абер.кл. Этот уровень устанавливается для подгруппы с ОЛБ-III-IV за 3,4 (лет) и примерно за вдвое большее время для подгруппы с ОЛБ-I.

Таблица 3

Коэффициенты регрессионной зависимости от времени среднего числа нестабильных аберраций в аберрантных лимфоцитах облучившихся лиц

В настоящем исследовании установлено, что среднее число нестабильных спонтанных аберраций в аберрантных клетках равно (1,04), из них ацентрики, дицентрики и центрические кольца составляют 0,79; 0,18 и 0,07, соответственно. Следовательно, по разновидностям аберраций, содержащихся в аберрантных клетках, облучившиеся лица в отдаленном периоде отличаются от контрольной группы (табл. 3). В результате облучения среднее число радиационных маркеров оказывается в 2ч3 раза выше в период до 40 лет после облучения. По этой причине частота дицентриков в лимфоцитах крови облучившихся лиц остается существенно выше спонтанного уровня даже при достижении такого уровня по доле аберрантных клеток.

Изменение с течением времени после облучения соотношения видов нестабильных аберраций в аберрантных клетках облучившихся лиц может являться следствием различий в способности аберраций передаваться дочерним клеткам. Известно, что наименьшей вероятностью характеризуются именно дицентрики (~50% в первом митозе), поэтому их доля с течением времени уменьшается. Однако сохраняющийся в организме облучившегося человека источник аберраций в виде облученных стволовых клеток может поддерживать повышенную частоту радиационных маркеров в соматических клетках человека длительное время после воздействия радиации.

Таким образом, показано, что пострадиационная динамика частоты нестабильных аберраций имеет двухфазный вид с быстрым спадом до 90% аберрантных клеток за 0,5ч1,6 лет и последующим медленным снижением в течение 10ч20 лет. Среднее число аберраций на одну аберрантную клетку за первые 10 лет снижается от величины 1,4ч2,4 до постоянного значения порядка (1,0), что соответствует спонтанному уровню по сумме аберраций, но не по разновидностям. Так, без облучения в аберрантных клетках доля дицентриков составляет 18%, а в облученных аберрантных клетках - вначале 50ч70%, а затем снижается до 30% в отдаленном периоде. Поэтому частота радиационных маркеров превышает спонтанный уровень до 40ч50 лет после облучения.

При изучении динамики транслокаций в лимфоцитах облучившихся лиц возникают вопросы: “Снижается ли частота транслокаций со временем или она выходит на плато? Если плато существует, то в течение какого времени оно сохраняется и зависит ли эта частота транслокаций от дозы облучения?” Ответы были найдены путем анализа результатов обследования методом FISH, итоги которого представлены в табл. 4. Динамика транслокаций имела вид:

Y_TR=Y₁ + (Y₀ - Y₁) exp(-t/T₄),

где Y_TR- частота трансл/100GEкл, Y₀- начальная частота, Y₁-частота в отдален-ном периоде, T₄ - характерное время снижения частоты транслокаций.

Таблица 4

Коэффициенты регрессионной зависимости от времени частоты транслокаций (tc+ti) /100GEкл в лимфоцитах крови облучившихся лиц

*оценка экстраполяцией на начальное время

На рис. 11 представлена динамика частоты транслокаций в лимфоцитах крови облучившихся лиц. Анализ результатов (рис. 11) показывает, что как начальная частота, так и частота транслокаций в отдаленном периоде возрастают с ростом степени тяжести ОЛБ. Во всех подгруппах получена качественно одинаковая динамика с характерным временем снижения в пределах 1,2ч7,8 лет. Для подгрупп c ОЛБ II-IV частоты транслокаций выше спонтанного уровня вплоть до 50 лет после облучения. В подгруппе с ОЛБ-I эта частота превышает спонтанный уровень только в первые 20 лет после облучения. Кратность снижения с течением времени частоты транслокаций (Y₁/Y₀) составляет 0,12; 0,18; и 0,13 для трех групп, соответственно.

Для исследования возможности оценки частоты транслокаций путем подсчета АМ стандартным методом была проанализирована динамика АМ, которая показала схожие с транслокациями результаты (табл. 5). Так, начальная частота АМ и их частота в отдаленном периоде возрастают с ростом степени тяжести ОЛБ. Во всех подгруппах наблюдается качественно одинаковая динамика с характерным временем снижения в диапазоне от 3 до 11 лет.

Рис. 11 Зависимость от времени после облучения частоты наблюдаемых транслокаций в лимфоцитах крови облучившихся лиц с разной степенью тяжести ОЛБ. Точки - индивидуальные данные, сплошные линии - регрессионные зависимости (табл. 4). Пунктирная линия - соответствующий спонтанный уровень

Таблица 5

Коэффициенты регрессионной зависимости от времени частоты аномальных моноцентриков (АМ) в лимфоцитах крови облучившихся лиц

В подгруппе с ОЛБ-I существенное превышение спонтанного уровня наблюдается только в первые 10 лет после облучения. Сопоставление регрессионных зависимостей частоты транслокаций и АМ показало, что в остром периоде частота АМ составляла 10-12% от уровня транслокаций в группах ОЛБ-I, ОЛБ-II и 5% в группе ОЛБ-III. В отдаленном периоде это соотношение составило в среднем 18% по всем подгруппам.

Таким образом, динамика частоты стабильных аберраций в виде транслокаций и АМ была проанализирована в период до 45 лет после облучения. Показано, что после первых 10 лет частота индуцированных транслокаций падает до 12-18 % от первоначального уровня, оставаясь затем неизменной вплоть до 45-50 лет. Похожие закономерности были выявлены и для АМ, частота которых была примерно в 10 раз меньше, чем частота транслокаций. В целом наблюдалась очевидная корреляция степени тяжести ОЛБ облучившихся лиц с динамикой стабильных аберраций, но она была менее четкой, чем с частотой дицентриков в острый период (рис. 11).

Основной причиной снижения частоты стабильных аберраций в первые годы после облучения является элиминация нестабильных клеток. Как показано выше, элиминация основной доли нестабильных клеток происходит достаточно быстро, за время порядка 0,5ч1,6 лет, в то время как снижение частоты стабильных аберраций за такое время наблюдалось только у лиц с дозой на все тело свыше 4 Гр (ОЛБ III-IV), а при меньших дозах частота стабильных аберраций снижалась гораздо медленнее, за 6ч8 лет. Это означает, что при дозах на все тело менее 4 Гр (ОЛБ I-II) в течение первых 6ч8 лет, наряду с элиминацией лимфоцитов, содержащих стабильные аберрации, идет процесс поступления таких клеток в периферическую кровь за счет процесса пролиферации из облученных стволовых клеток. С течением времени, когда элиминируют все первично облученные лимфоциты, поступление клеток, содержащих транслокации. стабилизируется, приводя к независящей от времени частоте транслокаций в лимфоцитах периферической крови.

5. Совершенствование методов биологической дозиметрии по цитогенетическим показателям.

Сочетание свойств лимфоцитов крови человека и метода их культивирования явилось основой т.н. «золотого стандарта» биодозиметрии, IAEA (2001). При этом соотношение индуцированного и спонтанного уровней аберраций (радиационных маркеров) определяет пределы применимости цитогенетического метода, Alexander G.A. et al. (2007). Для биодозиметрии в остром периоде используют дицентрики, центрические кольца, транслокации, а также ацентрические парные фрагменты, IAEA (2001). Для ретроспективной биодозиметрии в отдаленном периоде рассматриваются полные и неполные транслокации, выявляемые методом FISH. Ключевой проблемой при этом остается выбор калибровочной кривой для вычисления дозы по частоте транслокаций, выявляемых в отдаленном периоде. Точность биодозиметрии на основе транслокаций во многом зависит от погрешности при оценке линейного коэффициента дозовой зависимости и корректного учета спонтанного уровня аберраций, Simon S. et al. (2007).

Рис. 12 Изменение относительной частоты дицентриков (A) и величины Qdr (Б) с течением времени после облучения. Точки - индивидуальные показатели (11 чел., 111 точек), сплошные линии - регрессионные зависимости, пунктир 95% доверительный интервал. Регрессионные формулы

(A): Y=0.84 exp(-t/0.74) + 0.16 exp(-t/7.6))

(Б): Y = 0.545 + 0.455 exp(-t/0.79))

В настоящей работе был исследован фактор индивидуальной радиацион-ной чувствительности человека для уточнении области применимости известных методов на основе нестабильных аберраций для ретроспективной дозиметрии. Для этого был выполнен анализ динамики частоты дицентриков и величины Qdr (число дицентриков и центрических колец на аберрантную клетку) у облучившихся лиц. На рис. 12 показаны относительная частота дицентриков и величина Qdr в зависимости от времени после облучения. По ординате отложены зависимости отношения этих величин на время t к показателю, который был получен у того же человека сразу после облучения.

В результате установлено, что уже через год после облучения частота дицентриков и величина Qdr снижаются в среднем на 65% и 35%, соответственно. Такое изменение указывает на неприемлемость этих показателей для ретроспективной биологической дозиметрии. Очевидно, что допустимый временной интервал между облучением и взятием образцов крови может составлять не более 4 месяцев. Из представленных данных следует, что средняя величина Qdr вначале снижается, но по истечении примерно 5 лет выходит на плато, которое проявляется статистически достоверно в пределах 95% интервалов (рис.12). Чтобы изменение величины Qdr с течением времени не искажало оценку дозы, необходимо вносить повышающую поправку в этот показатель, если он получен в период свыше 5 мес. после облучения. Такая поправка составляет от 30% до 50% при взятии образцов крови на анализ в период от 1 года до 10 лет после облучения, соответственно (рис.12).

Для уточнения применимости метода транслокаций в ретроспективной биологической дозиметрии были использованы результаты анализа динамики частоты индуцированных транслокаций в отдаленном пострадиационном периоде. Как известно, индуцированные и наблюдаемые транслокации различаются за счет зависящей от возраста человека частоты спонтанных аберраций. Так, анализ индуцированной компоненты показал снижение частоты транслокаций за первые 5 лет после облучения до постоянного уровня, который существенно не менялся в течение 30 лет. Этот постоянный уровень зависел от поглощенной дозы на все тело и снижался по отношению к начальному значению до 43% при дозах менее 4,7 Гр и до 23% для бульших доз. Характерное время снижения частоты индуцированных транслокаций зависело от дозы, убывая с 4,4 до 1,4 (лет) с ростом дозы от 1 до 7 Гр.

Оцененные параметры динамики частоты индуцированных транслокаций позволяют предложить способ корректировки калибровочной дозовой зависимости. Необходимость корректировки калибровочной in vitro дозовой зависимости, с целью использования частоты транслокаций для ретроспектив-ной биодозиметрии, является актуальной научной задачей, Duran A. et al. (2009). В настоящей работе предложен метод корректировки, основанный на обобщении индивидуальных цитогенетических данных облучившихся лиц, у которых брались образцы крови как в ранний, так и в отдаленный периоды. Начальная частота дицентриков позволила вычислить поглощенную дозу, а прослеженная в пострадиационном периоде динамика частоты транслокаций - внести поправки в in vitro калибровочную зависимость для корректного вычисления дозы по частоте транслокаций, выявляемых в отдаленном периоде.

В качестве калибровочной зависимости на начальное время (острый период, t=0, рис. 13) была использована in vitro дозовая зависимость суммы полных и неполных индуцированных транслокаций, которая была получена в настоящей работе путем вычитания из наблюдаемой в эксперименте частоты транслокаций соответствующего возрастного контроля. Калибровочные дозо-вые зависимости на время t>0 были получены с использованием динамики индуцированных транслокаций в соответствующих дозовых группах. За счет внесения подобных поправок в in vitro калибровочную кривую предложен способ устранить смещенную оценку при вычислении дозы, которая приводит к существенному занижению индивидуальных поглощенных доз (рис.13).

Следует отметить, что в литературе предлагаются альтернативные методы корректировки. Так, в работах Finnon P. et al. (1999), Edwards A.A. et al. (2005), Simon S.L. et al. (2007) предложен метод построения дозовой зависимости путем подсчете транслокаций только в стабильных клетках. Предполагается, что стабильные клетки свободно проходят цикл деления и поддерживают частоту индуцированных в них транслокаций на постоянном уровне. Данная гипотеза правомерна с теоретической точки зрения, однако не получила статистически представительного подтверждения на данных in vivo. Тем не менее, предложенный метод успешно применяется на практике при оценке доз облучения менее 3 Гр, Lloyd D.C. et al. (1998), Edwards A.A. (2007).

Рис. 13 Калибровочные дозовые зависимости частоты индуцированных транслокаций (tc+ti)/100GE кл для ретроспективной биологической дозиметрии с учетом поправки на время после облучения

Необходимо учитывать, что для применения метода анализа стабильных клеток требуется анализировать аберрации на всех хромосомах с применением панцентромерных проб. Для выполнения небольшого числа прецизионных биодозиметрических исследований метод стабильных клеток с панцентро-мерным мечением является, безусловно, предпочтительным. Однако и использованный в настоящей работе более простой и относительно дешевый метод FISH с анализом лишь 3-х хромосом и корректировкой калибровочной кривой вполне может применяться при массовом скрининговом обследовании без существенной потери точности при оценке дозы. Показано, что с учетом всей совокупности погрешностей, влияющих на ретроспективную оценку дозы по частоте транслокаций, оба подхода имеют сопоставимую точность. Более простой метод позволяет повысить эффективность анализа и снизить его стоимость при сохранении точности в оценке дозы, Stronati L. et a. (2001).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Для стохастических эффектов характерно отсутствие пороговой дозы, а также отсутствие зависимости степени тяжести эффекта от дозы по правилу «все или ничего». Типичными примерами стохастических эффектов являются механизмы канцерогенеза и индукция мутаций в половых и соматических клетках. Причиной стохастических эффектов могут быть повреждения ДНК в одной или нескольких клетках, в то время как для детерминистского эффекта требуется повреждение не менее определенного числа клеток. Особенность воздействия радиации на ДНК состоит в повреждении нуклеотидов, сахаро-фосфатного остова и присоединенных к ДНК белков. Потеря или изменения в генетической информации ДНК напрямую связаны с изменением клоногенного потенциала соматических клеток. Одним из основных видов последствий воздействия радиации на ДНК являются структурные изменения хромосом, которые, в отличие от генных мутаций, визуально видны в метафазе. Поэтому для проявления радиационных повреждений генома клетка должна сохранять способность к делению, т.е. иметь клоногенный потенциал.

В настоящей работе первичные повреждения ДНК, возникающие при воздействии ионизирующей радиации с различной ЛПЭ, были исследованы при помощи разработанной биофизической модели. Эта модель использует стохастическую структуру трека и пространственную структуру ДНК, включая нуклеосомномный, фибриллярный и доменный уровень ее организации. Модель позволяет выполнять стохастическое моделирование физической и радиационно-химической стадий, а также расчет абсолютных значений эффективности индукции первичных повреждений в клетке, субклеточных структурах и ДНК в различных формах ее организации.

Воздействие радиации на лимфоциты крови человека изучались по частоте хромосомных аберраций, индуцированных в результате облучения образцов крови in vitro. Стандартным методом окрашивания и методом FISH была получена дозовая зависимость частоты радиационно-индуцированных аберраций стабильного и нестабильного типа в клетках первого деления. Частота спонтанно возникающих аберраций исследовалась на образцах крови контрольных лиц, не подвергавшихся радиационному воздействию.

Закономерности образования хромосомных аберраций в соматических клетках человека при облучении in vitro и in vivo были изучены путем анализа результатов цитогенетического обследования лиц, облучившихся при радиационных авариях. Основное внимание при этом уделялось частоте аберраций хромосом в отдаленном пострадиационном периоде. Динамика различных типов аберраций показала их способность передаваться в поколениях делящихся соматических клеток. Выявленные закономерности динамики аберраций позволили внести ряд уточнений в методику ретроспективной биологической дозиметрии, основной на цитогенетических показателях.

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что при воздействии тяжёлых ионов фрагментация ДНК зависит от структуры фибриллы хроматина за счёт кластеризации двойных разрывов, что отражается на спектре фрагментов ДНК. При анализе распределения фрагментов ДНК с целью оценки числа двойных разрывов необходимо учитывать неслучайный характер распределения первичных повреждений, обусловленный пространственной конфигурацией хроматина.

2. Показано, что 30-40% радиационно-индуцированных разрывов ДНК в клетке вызваны косвенным действием свободных радикалов - продуктов радиолиза воды.

3. Установлено, что наблюдаемые при касательном воздействии тяжёлых ионов на сферическую чувствительную область аномально большие события поглощения энергии вызваны вкладом вторичных д-электронов.

4. Показано, что наблюдаемый на клеточном уровне эффект "свидетеля" объясняется взаимодействием облученных и интактных клеток посредством межклеточного сигнала, который распространяется по законам диффузии.

5. Показано, что частота дицентриков в лимфоцитах крови человека в диапазоне от 5 до 500 диц/100 кл после общего облучения позволяет представить достоверный прогноз последующего развития острой лучевой болезни со степенью тяжести от I до IV.

6. Установлено, что при общем остром облучении человека доля радиационных маркеров в аберрантных клетках сохраняется на повышенном уровне в течение более 40 лет после облучения, что позволяет осуществлять ретроспективную индикацию облучения по частоте дицентриков в отдаленном пострадиационном периоде.

7. Установлено, что при общем остром облучении человека в дозах свыше 1 Гр частота транслокаций снижается за первые 10 лет после облучения до 12-18% от первоначальной величины, а затем остается постоянной в течение последующих 35ч40 лет.

8. Показано, что при длительном фракционированном общем облучении человека с высокой мощностью дозы в суммарных дозах от 1 до 17 Гр при работе в саркофаге ЧАЭС, частота как дицентриков, так и транслокаций в лимфоцитах крови линейно зависит от дозы. После прекращения работ частота дицентриков быстро спадает за 2ч3 года до 10ч15% от первоначальной величины, а частота транслокаций остаётся на постоянном уровне в течение, как минимум, 10 лет после облучения.

9. Доказано, что дозовая зависимость выхода транслокаций при облучении лимфоцитов in vitro не пригодна в качестве калибровочной кривой для ретроспективной биологической дозиметрии. Она должна быть скорректирована с учётом пострадиационной динамики частоты транслока-ций в лимфоцитах крови облучившихся лиц.

СПИСОК ОСНОВНЫХ ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Хвостунов И.К., Чепель В.Ю., Андреев С.Г. Моделирование косвенного действия на ДНК радиации с низкой ЛПЭ //Сборник Трудов VII Совещания стран СНГ по микродозиметрии и школы «Фундаментальные и прикладные аспекты радиационных исследований», Суздаль, 15-20 ноября 1992. М, 1993. часть I. С. 107-125.

Chepel V.Yu., Khvostunov I.K., Mirny L.A., Talyzina T.A., Andreev S.G. 3D Computer model of chromatin fibre for radiation damage simulation //Radiation Protection Dosimetry. 1994. V.52. № 1-4. P. 256-263.

Khvostunov I.K., Andreev S.G., Pitkevich V.A., Chepel V.Yu. Novel algorithm for analysis of DNA and chromatin damage induced by ionising with different quality //10th International Congress of Radiation Research, August 27- September 1, 1995 Wurzburg, Germany: Proceedings of Congress: Congress Lectures / Ed. by U. Hagen, D. Harder, H. Jung, C.S. Streffer. 1995. V.2. P. 254-257.

Khvostunov I.K., Andreev S.G. Microdosimetric distributions for target volumes of complex topology //Proceedings of 12th Symposium on Microdosimetry Sept. 29- Oct. 4, 1996 Oxford, UK. Oxford, 1997. V.2. P. 47-50.

Andreev S.G., Khvostunov I.K., Spitkovsky V.A. et al. Dependence of DNA break clustering in chromatin fibre on radiation quality//P.roceedings of 12th Symposium on Microdosimetry Sept. 29-Oct. 4, 1996 Oxford, UK.Oxford, 1997.V.2. P.133-136.

Андреев С.Г., Хвостунов И.К., Спитковский Д.М., Талызина Т.А. Биофизическое моделирование радиационных повреждений ДНК и хроматина, индуцированных излучением разного качества //Радиационная биология. Радиоэкология.1997. Т.37. № 4. С. 533-538.

Nikjoo H., Uehara S., Khvostunov I.K., Cucinotta F.A. Track structure in molecular radiation biology. Advanced Monte Carlo for Radiation Physics, Particle Transport Simulation and Applications //Proceedings of the Monte Carlo 2000 Conference, Lisbon, 23-26 October 2000. P. 251-260.

Хвостунов И.К. Оценка последствий воздействия малых доз радиации на уровне молекул ДНК методом биофизического моделирования //Труды регионального конкурса научных проектов в области естественных наук. Калуга: Эйдос, 2000. Вып.1. С. 290-306.

Sevan'kaev A.V., Khvostunov I.K., Mikhailova G.F. et al. Novel data set for retrospecttive biodosimetry using both conventional and FISH chromosome analysis after accidenttal overexposure //Applied Radiation and Isotopes. 2000. V.52. №5. P. 1149-1152.

Nikjoo H., Uehara S., Khvostunov I.K., Cucinotta F.A., Goodhead D.T. Monte Carlo track structure for radiation biology and space applications //Physica Medica. 2001. V.17. №1(Suppl.). P. 38-44.

Колганов А.В., Филин С.В., Баранов А.Е., Надежина Н.М., Бушма-нов А.Ю., Галстян И.А., Гордеева А.А., Гусев И.А, Гуськов А.К., Иванова Е.Ю., Каширина О.Г., Нугис В.Ю., Потетня О.И., Севанькаев А.В., Хвостунов И.К., Яценко В.Н. Три случая острого радиационного поражения человека от гамма-источника (иридий-192): реконструкция дозы и клиническая картина // Медицинская радиология и радиационная безопасность. 2002. Т.47. №2. С. 34-45.

Nikjoo H., Khvostunov I. K., Cucinotta F. A. The response of (TEPC) proportional counters to heavy ions //Radiation Research.2002.V.157. P. 435-445.

Khvostunov I.K, Andreev S.G., Eidelman Yu.A. Biophysical analysis of radiation induced initial DNA fragmentation // Radiation Protection Dosimetry. 2002. V.99. №1-4. P. 151-152.

Sevan'kaev A.V., Lloyd D.C., Edwards A.A., Moquet J.E., Nugis V.Yu., Mikhailova G.F., Potetnya O.I, Khvostunov I.K. et al. Cytogenetic investigations of serious overexposures to an industrial г-radiography source //Radiation Protection Dosimetry. 2002. V.102. P. 201-206.

Khvostunov I K, and Nikjoo H. Computer modelling of radiation-induced bystander effect //J. Radiol. Prot. 2002. V.22. №3A. P. A33-A37.

Севанькаев А.В., Потетня О.И., Михайлова Г.Ф., Хвостунов И.К. и др. Частота цитогенетических нарушений в лимфоцитах периферической крови у жителей Орловской области, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях после Чернобыльской аварии //Бюллетень Национального радиационно-эпидемиологического регистра «Радиация и риск». 2003. Спец. вып. С. 87-95.

Андреев С.Г., Эйдельман Ю.А., Хвостунов И.К. и др. Радиационные повреждения генетических структур клетки. Экспериментальные данные и результаты моделирования //Лекции школы по радиационной биологии в «Галактике» /Под ред. д.б.н. проф. А.С. Саенко. Обнинск: МРНЦ РАМН, 2003. С. 7-39.

Хвостунов И.К. Микродозиметрические аспекты в биофизическом моделировании биологического действия малых доз радиации //Лекции школы по радиационной биологии в «Галактике» /Под ред. д.б.н. проф. А.С. Саенко. Обнинск: МРНЦ РАМН, 2003. С. 184-204.

Nikjoo H., Khvostunov I.K. Biophysical model of the radiation-induced bystander effect //International Journal of Radiation Biology. 2003. V.79. №1. P. 43-52.

Севанькаев А.В., Голуб Е.В., Хвостунов И.К. и др. Ретроспективная оценка доз в отдаленный пострадиационный период различными биологическими методами //Радиационная биология. Радиоэкология. 2004. Т.44. №6. С. 637-652.

Галстян И.А., Илевич Ю.Р., Клещенко Е.Д., Михайлова Г.Ф., Надежина Н.М, Нугис В.Ю., Севанькаев А.В., Хвостунов И.К. Возможности ретроспективного определения дозы при лучевых поражениях //Медицинская радиология и радиационная безопасность. 2004. Т.49. №5. С. 5-13.

Nikjoo H., Khvostunov I.K. A theoretical approach to the role and critical issues associated with bystander effect in risk estimation //Human and Experimental Toxicology. 2004. V.23. №2. P. 81-86.

Sevan'kaev A.V., Lloyd D.C., Edwards A.A., Khvostunov I.K. et al. A cytogenetic follow-up of some highly irradiated victims of Chernobyl accident // Radiation Protection Dosimetry. 2005.V.113. № 2. P. 152-161.

Андреев С.Г., Эйдельман Ю.А., Хвостунов И.К. и др. Биофизическое моделирование радиационных повреждений генетических структур клетки // Радиационная биология. Радиоэкология. 2005. Т.45. №5. С. 549-560.

Севанькаев А.В., Шкаврова Т.Г., Потетня О.И., Михайлова Г.Ф., Цепенко В.В., Голуб Е.В., Хвостунов И.К. и др. Сравнительное исследование структурных и генных соматических мутаций у работников ядерно-химических предприятий. 1. Исследование нестабильных и стабильных хромосомных аберраций //Радиационная биология. Радиоэкология. 2005. Т.45. №2. С. 149-161.

Севанькаев А.В., Михайлова Г.Ф., Потетня О.И., Цепенко В.В., Хвостунов И.К. и др. Результаты динамического цитогенетического наблюдения за детьми и подростками, проживающими на радиоактивно-загрязненных территориях после Чернобыльской аварии //Радиационная биология. Радиоэкология. 2005. Т.45. №1. С. 5-15.

Мазурик В.К., Михайлов В.Ф., Ушенкова Л.Н., Надежина Н.М., Раева Н.Ф., Севанькаев А.В., Хвостунов И.К. Сопоставление молекулярно-биохимических и цитогенетических характеристик клеток периферической крови у людей в отдаленный период после воздействия ионизирующей радиации в клинически значимых дозах //Радиационная биология. Радиоэкология. 2006. Т.46. №4. С. 393-409.

Севанькаев А.В., Замулаева И.А., Михайлова Г.Ф., Потетня О.И., Цепенко В.В., Хвостунов И.К. и др. Сравнительный анализ генных и структурных соматических мутаций у жителей загрязненных радионуклидами районов Орловской области после аварии на ЧАЭС //Радиационная биология. Радиоэкология. 2006. Т.46. №3. С. 315-321.

Andreev S.G., Eidelman Y.A., Salnikov I.V., Khvostunov I.K. Mechanistic modelling of genetic and epigenetic events in radiation carcinogenesis //Radiation Protection Dosimetry. 2006. V.122. №1-4. P. 335-339.

Sevan'kaev A., Khvostunov I., David Lloyd D. et al. The suitability of FISH chromosome painting and ESR-spectroscopy of tooth enamel assays for retrospective dose reconstruction //Journal of Radiation Research. 2006. V.47. №A (Suppl.). Р. A75-A80.

Nikjoo H. and Khvostunov I.K. Modeling of radiation-induced bystander effect at low LET //Int. J. Low Radiation. 2006. V.3. №2-3. P. 143-158.

Sevan'kaev A.V., Khvostunov I.K., Lloyd D.C. et al. The chromosomal aberration assay for biological dosimetry a long time after exposure // Чернобыльские чтения-2008. Материалы международной научно-практической конференции, Гомель, 24-25 апреля 2008. Гомель: Сож, 2008. С. 248-253.

Khvostunov I.K., Nikjoo H., Uehara S., Hoshi M. The consideration of biological effectiveness of low energy protons using biophysical modeling of the effects induced by exposure of V79 cells //Радиационная биология. Радиоэкология. 2010. Т.50. №1. C. 81-89.

Размещено на Allbest.ru