Экспрессионный профиль микрорнк при меланоме кожи и меланоцитарных новообразованиях кожи

Установлено, что повышение пролиферативных способностей и высокая инвазивность клеток меланомы часто обусловлены CTGFи GLI2 - генами, принимающими участие в нисходящей регуляции комплекса YAP/TAZ-TEAD. Важно отметить, что микроокружение клеток меланомы тоже может быть вовлечено в YAP/TAZ-TEAD-регуляцию, например, за счет генерации активных форм кислорода и цитокинов.

Мутации в гене BRAF, часто выявляемые у пациентов с меланомой, ассоциируются с ингибированием MST1/2 киназ и Rac-зависимым переключением экспрессии кадгеринов в клетках меланомы. Одной из частых мутаций при меланоме является мутация Rac1. Rac1 принимает участие в модификации цитоскелета, что потенциально может модифицировать активность сигнального пути Hippo. Показано, что активирующие мутации GNAQ или GNA11 (соответственно кодирующие Gq или G11) при некоторых видах меланомы приводят к активации YAP, что обусловливает развитие злокачественного новообразования. Белки Gq и G11 являются альфа субъединицами гетеротримерных G-белков, участвующих в G-белок сопряженном рецептор сигналинге (GPCR). При мутациях GNAQи GNA11происходит конвертирование G-белков в конститутивно активную форму вследствие снижения их ГТФ-азной активности. GPCR сигналинг регулирует сигнальный путь Hippo, активируя или ингибируя активность YAP зависимых от сопряженных G-белков способом. Например, активация G12/13 стимулирует YAP, индуцируя YAP дефосфорилирование, перемещение в ядро и транскрипционную активность, в то время как Gs ингибирует YAP, способствуя его фосфорилированию. Таким образом, в клетках меланомы при наличии активирующей мутации Gq/11 сигнальный путь Hippo-YAP выступает в качестве медиатора меланомогенеза (Yuetal., 2014; Fengetal., 2014). Установлено, что одиночные полиморфизмы генов сигнального пути Hippo являются предикторами сниженных показателей выживаемости у пациентов с меланомой. К числу таких генетических вариантов относятся YAP1rs11225163, TEAD1 rs7944031 и TEAD4rs1990330 (Yuanetal., 2015).

Трансформирующий фактор роста бета (TGF-в) является белком, в опухолевых клетках принимающим участие в регуляции процессов пролиферации, дифференцировки, апоптоза посредством контроля экспрессии большого количества генов-мишеней. Кроме того, данный фактор играет роль в регуляции иммунного ответа при развитии опухоли. TGF-в-сигналинг инициируется при активации мембранных TGF-в-рецепторов I типа (TвRI) и II типа (TвRII), которые являются триггерами SMAD2/3 и non-SMAD сигнальных путей, включая PI3K/Akt, p38 MAPK и ERK (Ansa-Addo etal., 2017). В клетках меланомы трансформирующий фактор роста бета индуцирует программу эпителиально-мезенхимального перехода. Во время конвертации пролиферативного фенотипа клеток меланомы в инвазивный, инициированного TGF-в, происходит изменение активности PI3K и PDGF сигнальных путей. Интересно отметить, что при развитии резистентности к ингибиторам BRAF у пациентов с меланомой, происходит супрессия экспрессии Sox10, приводящая к активации TGF-в-сигналинга, и как следствие этого, повышению активности EGFR и PDGFR (Schlegel et al., 2014; Wehbe et al., 2012).

В регуляции эпителиально-мезенхимального перехода, индуцированного TGF-в, определенную роль играют эпигенетические изменения. Установлено, что регуляция членов семейства PcGEZH1 и EZH2, осуществляющих репрессию транскрипции происходит посредством метилирования гистонов (Quetal., 2014; Meyers etal., 2017).

При TGF-в-индуцированном ЭМТ происходит активация сигнального пути PI3K. Во время прогрессии меланомы установлена корреляция между уровнем инактивации PTEN, негативного регулятора PI3K-сигналинга, повышающимся уровнем фосфорилирования АКТ и уровнем переключения экспрессии Е-кадгерина на N-кадгерин. Показано, что TGF-в может индуцировать PI3K-сигналинг либо путем прямого взаимодействия между TGF-в рецепторами и PI3K, либо непрямым путем, повышая экспрессию факторов роста, которые, в свою очередь, активируют PI3K-сигнальный путь через тирозинкиназные рецепторы. Выявлено, что, в отсутствие SMAD4 TGF-в не способен индуцировать фосфорилирование АКТ. Это указывает на высокую значимость канонического сигнального пути TGF-в-SMAD4 в регуляции транскрипции в клетках меланомы (Schlegel et al., 2014).

TGF-в способен повышать экспрессию SKP2, одного из ключевых регуляторов прогрессии клеточного цикла, индуцирующего деградацию нескольких ингибиторов циклин-зависимых киназ, включая p27kip1, p21cip1, и p57. В клетках меланомы уровень экспресии SKP2 коррелирует с метастазированием опухоли. Медиатором индуцированной TGF-в экспрессии SKP2 является протоонкогенный белок c-Myc, являющийся фактором транскрипции (Quetal., 2014).

Следует отметить ряд паракринных эффектов TGF-в на микроокружение опухолевых клеток при меланоме. Паракринная секреция TGF-в модулирует опухолевое микроокружение, способствуя росту меланомы, инвазии и метастазированию. Важную роль при этом играет активация ассоциированных с опухолью фибробластов, иммуносупрессивный и проангиогенный эффекты. Активированные TGF-в стромальные фибробласты могут стимулировать синтез белков экстрацеллюлярного матрикса, включая коллаген, фибронектин, тенасцин и б2-интегрин, что формирует цитоскелет и осуществляет промоцию повышения способностей клеток к выживанию, миграции и метастазированию (Perrot et al., 2013).

По мере прогрессии меланомы происходит активация ангиогенеза - в опухолевой ткани появляется новая сосудистая сеть, эффективно обеспечивающая опухолевые клетки необходимыми веществами. Частично это обусловливается паракринной секрецией TGF-в, который способствует рекрутингу и пролиферации эндотелиальных клеток для формирования новых сосудов. В клетках меланомы в TGF-в-индуцированный ангиогенез вовлечены несколько активированных проангиогенных факторов, к числу которых относятся интерлейкин 8 (IL-8) сосудисто-эндотелиальный фактор роста (VEGF) (Perrot et al., 2013).

TGF-в является негативным регулятором активности иммунных клеток при меланоме и играет важную роль в контроле функций и пролиферации Т-лимфоцитов. TGF-в блокирует продукцию IL-2 (лимфокина, активирующего T-лифоциты, естественные киллеры (NK) и другие клетки иммунной системы), а также супрессирует регуляторы клеточного цикла в Т-лимфоцитах. Трансформирующий фактор роста бета контролирует экспрессию эффекторных молекул, продуцируемых цитотоксическими Т-лимфоцитами и обладает свойствами важного фактора дифференцировки для регуляторных Т-лимфоцитов (Treg). Регуляторные Т-лимфоциты в больших количествах присутствуют в тканях опухолей, в том числе и в меланоме и способствуют иммуносупрессии, медиируемой TGF-в (Quetal., 2014).

Установлено, что в клетках меланомы экспрессируется моноцитарный хемоаттрактантный протеин 1 (MCP-1), хемокин, осуществляющий рекрутинг макрофагов, инфильтрирующих ткань меланомы и продуцирующий факторы, способствующие опухолевой инвазии, ангиогенезу и иммуносупрессии. Интерлейкин 10 (IL-10) экспрессируется в клетках многих линий меланомы invitro и в тканях первичной и метастазирующей меланомы invivo. Повышенный уровень IL-10 выявлен у пациентов с метастазирующей меланомой и коррелирует с прогрессией опухоли. Показано, что трансформирующий фактор роста бета повышает экспрессию MCP-1и IL-10 в клетках меланомы, медиация данного эффекта осуществляется взаимодействием между сигнальными путями SMAD, PI3K/AKT и BRAF/MAPK.

К числу микроРНК, экспрессия которых наиболее значимо повышалась в клетках меланомы по сравнению с доброкачественными меланоцитарными новообразованиями относится микроРНК-4286. Вместе с тем, ее роль в меланомагенезе крайне мало исследована. К числу сигнальных путей, в регуляции которых принимает участие miR-4286, относятся путь биосинтеза N-гликанов (N-Glycan biosynthesis), сигнальный путь биосинтеза жирных кислот (Fatty acid biosynthesis), сигнальный путь метаболизма тирозина (Tyrosine metabolism). Гены-мишени miR-4286 принимают участие в регуляции процессов, играющих ключевую роль в опухолевой трансформации клеток, среди которых пролиферация, митоз, клеточная миграция и адгезия клеток.

Трансфекция специфического ингибитора микроРНК-4286 в клетки меланомы BRO нарушала процесс деления клеток, останавливая клеточный цикл в фазе S-G2 и блокируя переход к митозу. Кроме того, ингибирование miR-4286 приводило к снижению миграционной активности опухолевых клеток, что было установлено методом «скрэтч-теста».

Путь биосинтеза N-гликанов относится к сигнальным путям, регулируемым miR-4286. Известно, что в опухолевых клетках выявляются значительные изменения N-гликозилирования структур клеточной мембраны, что является результатом дисрегуляции функционирования гликозилтрансфераз и гликозидаз. В частности, повышение экспрессии некоторых сиалированных гликанов является хорошо известной особенностью многих опухолевых клеток. Измененное сиалирование ассоциируется с повышенным метастатическим потенциалом клеток, включая усиление подвижности, инвазивности и выживаемости (Schultzetal., 2014). Up-регуляция экспрессии некоторых сиалилтрансфераз является хорошо известным событием, происходящим во время опухолевой трансформации клеток. Сиалилтрансферазы образуют семейство ферментов, состоящее более чем из 20 ферментов, функции которых в различных тканях и способы взаимодействия с субстратами значительно различаются. Показано, что повышение уровня сиалирования структур клеточной мембраны стимулирует подвижность опухолевых клеток, воздействуя на экстрацеллюлярный матрикс. Во многих линиях опухолевых клеток, в том числе и клетках меланомы, выявлена выраженная позитивная корреляция между процессами миграции/инвазии и высоким уровнем сиалирования клеточной поверхности. Установлено, что в контексте последнего, основными объектами биохимических модификаций являются интегрины и рецепторы молекул адгезии. Активность интегринов вовлечена во множество аспектов метастазирования, включая отсоединение опухолевых клеток от базальной мембраны, миграцию через стромальный матрикс, выживание во время циркуляции в сосудах, адгезия к эндотелию во время экстравазации, формирование метастатического узла в условиях нового микроокружения. Известно, что процесс гликозилирования необходим для функционирования интегринов. Регуляция интегринов осуществляется несколькими различными типами структуры гликанов, среди которых важным модулятором функций интегринов является б2-6 сиалирование N-гликанов (Hang etal., 2016).

в1 субъединица интегрина б1в1 идентифицирована как субстрат для ST6Gal-I сиалтрансферазы для многих линий опухолевых клеток. Повышение экспрессии данного фермента характерно и для меланомы. Взаимодействие б2-6-связанной сиаловой кислоты с в1 субъединицей интегрина изменяет связывающую активность нескольких в1-содержащих гетеродимеров, включая рецепторы для фибронектина, VCAM-1, ламинина и коллагена. Таким образом, N-гликозилирование является незаменимым условием функционирования в1 субъединицы интегрина. Механизм регуляции активности интегрина сиалированием до конца не ясен, но возможно, обусловлен изменением конформации интегрина. Установлено, что б2-6-сиалирование повышает адгезию коллаген-селективных интегринов к коллагену I, усиливает соединение талина с цитозольным «хвостом» интегрина и стимулирует миграцию опухолевых клеток. Показано, что активация ST6Gal-I сиалтрансферазы коррелирует с повышением экспрессии ряда генов, ассоциированных с адгезивным клеточным сигналингом (Hang etal., 2015). Следует отметить, что к числу генов-мишеней микроРНК-4286 относится ряд генов, отвечающих за данный процесс: CLDN1, SEMA4D и SIRPA.

Таким образом, ST6Gal-I-обусловленное б2-6 сиалирование в1 интегрина стимулирует миграцию и инвазию опухолевых клеток, посредством реконституции экстрацеллюлярного матрикса. Взаимодействие между коллагеном I и интегринами является крайне важным в процессе метастазирования, установлено, что индукция изменения фенотипа опухолевых клеток на более инвазивный, триггером которой является коллаген I, обусловлена в1-интегрин-сигналингом. Кроме того, реорганизация коллагена в строме опухоли содействует локальной инвазии, волокна коллагена I формируют пути, вдоль которых мигрируют опухолевые клетки, перемещаясь в сосуды (Schultzetal., 2014).

Установлено, что сиалирование еще одного члена семейства интегринов - б6в4 (ламинин-связывающий рецептор), играет роль в процессах миграции и инвазии. Снижение экспрессии Neu1-сиалидазы приводит к сиалированию в4 субъединицы лиминин-связывающего рецептора. Выявлено, что в результате down-регуляции Neu1, частично локализованной в клеточной мембране, происходит усиление инвазивности и метастатического потенциала опухолевых клеток. Сниженное фосфорилирование сиалированной в4 субъединицы приводит к редукции активности б6в4-индуцируемой киназы фокальной адгезии (FAK). Таким образом, специфические сиалоформы интегрина (и ряд других гликоформ) являются важными медиаторами миграционной активности и инвазивности (Hang etal., 2015).

Сиалированный Tn-антиген и его не сиалированная форма являются ассоциированными с опухолью антигенами, высоко коррелированными с опухолевыми инвазией и метастазированием. Сиалированный Tn-антиген образуется при связывании GalNAc с серином или треонином. GalNAc - углевод, добавляющийся первым во время синтеза гликанов. Сиалированный Tn обнаружен при многих злокачественных новообразованиях, включая меланому. Экспрессия этого антигена ассоциируется с метастазированием, рецидивированием и сниженными показателями выживаемости пациентов. Показано, что индуцированная экспрессия сиалированного Tn-антигена в опухолевых клетках приводит к повышению их способностей к миграции и метастазированию. Первоначально сиалирование Tn-антигена связывали с действием сиалотрансферазы ST6GalNAc-I, но потом было установлено, что и другие сиалтрансферазы могут осуществлять этот процесс (Schultzetal., 2014). Например, ST6GalNAc-II и ST6GalNAc-V. Выявлено, что члены семейства ST6GalNAc связаны с канцерогенезом, экспрессия их повышена при многих злокачественных заболеваниях и часто ассоциируется с высоким метастатическим потенциалом опухолевых клеток. Существует альтернативный механизм образования и аккумуляции сиалированного Tn-антигена, не связанный с повышением экспрессии ферментов семейства ST6GalNAc, а обусловленный дисрегуляцией других гликозилтрансфераз. Cosmc - белок-шаперон, необходимый для активности Т-синтазы, добавляющей галактозу к GalNAc, и таким образом, конкурирующий с ST6GalNAc-I. Показано, что деструкция Cosmcв клетках меланомы приводит к повышению уровня экспрессии сиалированного Tn-антигена. Несмотря на несомненную взаимосвязь между сиалированным Tn-антигеном и прогрессией злокачественного новообразования, механизм специфических эффектов данного антигена в опухолевых клетках до сих пор не ясен. Тем не менее, выявлено несколько носителей сиалированного Tn-антигена, в том числе CD44, муцин Muc 1, в1-интегрин и остеопонтин. Муцины являются высокомолекулярными О-гликозилированными протеинами, к числу функций которых относятся воздействие на клеточную адгезию и сигналинг. Экспрессия муцинов повышается при многих злокачественных новообразованиях. Следует отметить, что в тканях злокачественных опухолей структура гликанов муцинов изменена по сравнению с муцинами, содержащимися в нормальных тканях. Повышение уровня сиалирования модифицирует роль Muc 1 в процессе межклеточной адгезии. Другой носитель сиалированного Tn-антигена, CD44, является хорошо известным белком клеточной адгезии, способным специфически связываться с гиалуроновой кислотой (Zhao etal., 2008).

Таким образом, все вышеупомянутые носители сиалированного Tn-антигена вовлечены в процессы адгезии и миграции опухолевых клеток, это позволяет предположить, что сиалирование данного антигена изменяет функции его носителей, способствуя приобретению опухолевыми клетками более инвазивного и склонного к метастазированию фенотипа.

После проникновения опухолевых клеток в циркуляторное русло, они должны сохранить там свою жизнеспособность, чтобы образовать метастазы в отдаленных органах. Ключевым механизмом направленной адгезии опухолевых клеток к эндотелию, обеспечивающим наличие лигандов для эндотелиальных селектинов является повышение экспрессии сиалированных (sLe) структур на поверхности мембраны опухолевой клетки, в том числе и клеток меланомы. Взаимодействие между sLe структурами и селектинами также осуществляет промоцию формирования агрегатов, состоящих из опухолевых клеток, тромбоцитов и лейкоцитов, защищающих опухолевые клетки от атак иммунной системы. В норме sLe гликаны присутствуют на мембране лейкоцитов и играют важную роль в адгезии и экстравазации лейкоцитов во время воспаления. Экспрессия sLe повышается у пациентов с онкологическими заболеваниями при развитии метастазов и негативно коррелирует с показателями выживаемости. Активация или нарушение функционирования единичной гликозилтрансферазы может быть достаточным для повышения экспрессии sLe. Например, установлено, что эпигенетический сайленсинг ST6GalNAc-VI, также как и индуцированная редукция экспрессии данного гена приводит к аккумуляции sLe. С другой стороны, повышение экспрессии в1-4 GalNAc трансферазы снижает экспрессию sLe структур и восстанавливает более нормальный углеводный профиль клетки. Выявлено, что у опухолевых клеток с индуцированной усиленной экспрессией GalNAc снижаются способности к инвазии и метастазированию. К носителям сиалированных sLe структур относятся CD44, карциноэмбриональный антиген, подокалексин-подобный протеин, молекулы клеточной адгезии меланомы (Schultzetal., 2014).

Рецептор эпидермального фактора роста (EGFR) является членом семейства ErbB-тирозинкиназных рецепторов. Он обеспечивает взаимодействие между экстрацеллюлярными сигналами и интрацеллюлярными эффекторными структурами для индукции соответствующего клеточного ответа. EGFR является важным активатором прогрессии клеточного цикла, инициируя активацию CDK4/6-CYCLIN D комплекса (Wee etal., 2017). На наружной стороне мембраны клетки находятся EGFR-связанные микродомены, так называемые липидные рафты, являющиеся платформами для EGFR-сигналинга. Липидные рафты содержат холестерин, гликосфинголипиды и гликопротеины. Показано, что как гликосфинголипиды, так и гликопротеины ассоциированы с EGFR-сигналингом. Таким образом, гликозилирование является потенциальным регулятором рецептора эпидермального фактора роста. Связанные с липидными рафтами рецептора эпидермального фактора роста гликопротеины включают и интегрины, являющиеся носителями N-гликанов. Интегрин б5в1 - рецептор фибронектина, установлено, что N-гликозилирование этого интегрина играет важную роль в регуляции клеточного цикла и пролиферации клеток посредством модуляции EGFR-сигналинга. Установлено, что среди 14 потенциальных сайтов N-гликозилирования субъединицы б5, именно сайт на Calf домене играет принципиально важную роль в ингибировании эффектов сигнального пути EGFR, посредством регуляции формирования комплекса между EGFR и б5, изменением локализации в липидных рафтах и т.д. Таким образом, N-гликозилирование интегрина б5в1 приводит к ингибированию пролиферативной активности опухолевых клеток посредством негативной регуляции EGFR-сигналинга.

Следовательно, можно предположить, что блокада микроРНК-4286 изменяет активность гликозилтрансфераз, модулируя N-гликозирирование. Это, в свою очередь, оказывает супрессивное воздействие на миграционный потенциал опухолевых клеток и инициирует блокаду перехода от фазы G2 к митозу в клетках меланомы BRO, снижая пролиферативный потенциал опухолевых клеток.

Еще одним путем, регулируемым микроРНК-4286, является путь биосинтеза жирных кислот (Fatty acid biosynthesis). Как было упомянуто выше, функционирование синтазы жирных кислот обеспечивает эндогенный синтез жирных кислот из ацетил СоА и малонил СоА, а ингибирование этого фермента способно инициировать блокаду клеточного цикла, снижая, таким образом, пролиферативные способности опухолевых клеток. Кроме того, известно, что повышение синтеза холестерина, выявляемое у пациентов с меланомой и повышенный его импорт в клетку за счет активации рецепторов LDL, приводит к стимуляции пролиферативной активности клеток меланомы (Kuzuetal., 2016). Показано, что у пациентов с меланомой происходит активация генов, отвечающих за синтез холестерина. При этом изменяется активность ряда сигнальных каскадов, к числу которых относятся PI3K/AKT, mTOR и ряд других. Конститутивная активация PI3K/AKT повышает уровень внутриклеточного холестерина за счет индукции его синтеза, являясь триггером SREBP, повышая LDL-медиируемое поступление холестерина в клетку и ингибируя АВСА1-медиируемый выход его из клетки. Повышение внутриклеточного холестерина коррелирует с прогрессией заболевания. При злокачественных новообразованиях выявлена дисрегуляция уровня митохондриального холестерина. STAR и STARD3 являются белками, необходимыми для регуляции поступления холестерина в митохондрии. Повышение экспрессии данных белков коррелирует с повышением пролиферации и миграционных способностей опухолевых клеток (Kuzuetal., 2016).

Возможно, ингибирование miR-4286 подавляет активность FASN и снижает синтез холестерина, обусловливая установленные нами эффекты.

Сигнальный путь метаболизма тирозина (Tyrosine metabolism) тоже относится к сигнальным путям, регулируемым miR-4286. Известно, что L-тирозин является предшественником меланина. В зависимости от клеточного типа и энзиматического окружения, L-тирозин гидроксилируется в L- дигидроксифенилаланин (L-DOPA) либо тирозингидроксилазой, либо тирозиназой. В процессе меланогенеза тирозиназа окисляет L-DOPA, превращая его в допаквинон, предшественник как эумеланина, так и феомеланина. Установлено, что L-тирозин и L-дигидроксифенилаланин являются позитивными регуляторами синтеза меланина не только в нормальных меланоцитах, но и в клетках меланомы(Slominskietal., 2012).

Повышение концентрации L-тирозина в клетках меланомы приводило к достоверному повышению как синтеза меланина, так и активности тирозиназы, кинетика данного процесса обусловлена исходным меланогенным потенциалом опухолевых клеток. Индукцию синтеза меланина в клетках меланомы сопровождала индукция синтеза меланосом и транслокация тирозиназы из комплекса Гольджи в премеланосомы с последующей активацией, а также индукция экспрессии и повышение активности рецепторов к меланоцитстимулирующим гормонам (MSH). Показано, что L-тирозин способствует перемещению из комплекса Гольджи в меланосомы и других ферментов, например, кислой фосфатазы. Это подчеркивает плейотропный эффект L-тирозина на внутриклеточный транспорт и процессинг, тем не менее, со специфическим действием на стимуляцию активности меланогенных белков. Выявлено, что ингибирование аккумуляции L-тирозина в клетках меланомы приводило к снижению синтеза меланина и пролиферации опухолевых клеток. Установлено, что в различных линиях меланомы L-тирозин не только стимулирует меланогенез, но также повышает способности опухолевых клеток к миграции, инвазии и метастазированию, что возможно, связано с down-регуляцией протеинкиназы С (Slominskietal., 2012).

Не только L-тирозин, но и L-дигидроксифенилаланин является позитивным регулятором меланогенеза в клетках меланомы, повышая активность тирозиназы и стимулируя пролиферацию клеток. О-метилирование L-DOPA и других предшественников меланина играет регуляторную роль в активности меланоцитов вследствие снижения уровня окислительного стресса. Различные модификации меняют функциональную активность не только L-дигидроксифенилаланина, но и L-тирозина. Установлено, что фосфорилирование L-тирозина подавляет пролиферацию клеток вследствие ингибирования тирозинкиназы рецептора эпидермального фактора роста и стимуляции протеин тирозин фосфатаз. L- дигидроксифенилаланин и L-тирозин действуют как позитивные регуляторы рецепторов к меланоцитстимулирующим гормонам (MSH). L-DOPA стимулирует экспрессию MSH-рецепторов в клетках меланомы, усиливая синтез меланина, индуцированный MSH. (Slominski etal., 2009)

Существуют прямой и непрямой механизмы действия L-тирозина и L-DOPA. Прямой регуляторный механизм обусловлен взаимодействием с регуляторными протеинами, специфически связывающими L-тирозини L-DOPA, включая рецепторы для этих аминокислот. Непрямой механизм подразумевает действие L-тирозина и L-DOPA как вторичных мессенджеров, медиирующих взаимодействия между различными интермедиатами меланогенеза. К числу специфических рецепторов L-тирозина и L-DOPA относится ОА1. Этот рецептор идентифицирован как на мембране номальных меланоцитов, так и на мембране клеток меланомы. Показано, что он может быть, как гликозилирован, так и не гликозилирован, что, возможно, способно модулировать его активность. В рамках непрямого механизма действия L-DOPA и его метаболитов установлено, что L-DOPA способен ингибировать фосфолирилование гликопротеинов опухолевых клеток меланомы. Кроме того, в клетках меланомы L-DOPA индуцирует переключение энергетического метаболизма с аэробного на анаэробный гликолиз и стимулирует пентозофосфатный путь окисления глюкозы. Выявлено, что L-DOPA обладает иммуносупрессивным эффектом и ингибирует активность экспрессии рецептора витамина D в опухолевых клетках меланомы. (Slominski etal., 2009)

Можно предположить, что ингибирование miR-4286 снижает синтез L-тирозина и, следовательно, L-DOPA, что обусловливает выявленные нами эффекты.

Таким образом, микроРНК-4286 играет важную роль в патогенезе меланомы кожи, принимая участие в регуляции процессов миграции, адгезии и пролиферации злокачественных клеток, изменяя активность ряда сигнальных путей, прежде всего, пути биосинтеза N-гликанов (N-Glycan biosynthesis), сигнальных путей биосинтеза жирных кислот (Fatty acid biosynthesis) и метаболизма тирозина (Tyrosine metabolism) (Рис.7)

Рис. 7 - Возможный механизм снижения миграционного и пролиферативного потенциала клеток меланомы BRO при ингибировании miR-4286

ВЫВОДЫ