Фармакогностичне дослідження видів роду Galium L. флори України

4. З трави п. справжнього, п. верболистого, п. пухнастоногого, п. карпатського та п. несправжньом'якого виділено та ідентифіковано 21 речовину - 1 ароматичну та 3 фенолкарбонові кислоти, 4 гідроксикоричні кислоти, 2 кумарини, 10 флавоноїдів, 1 іридоїд.

5. Вперше з трави підмаренника справжнього, п. верболистого та п. пухнастоногого одержано ліпофільні комплекси - «Галофілін», «Вербенол», «Галіканд», відповідно, та фенольні (з попередньо знежиреної сировини) комплекси «Галіверин», «Феносаліцин», «А-фунг», відповідно. Методом абсорбційної спектрофотометрії у ліпофільних комплексах визначено вміст хлорофілів та каротиноїдів; у фенольних комплексах методом абсорбційної спектрофотометрії та методом ВЕРХ встановлено вміст гідроксикоричних кислот та флавоноїдів. Методом хромато-мас-спектрометрії досліджено компонентний склад комплексів - у ліпофільних комплексах ідентифіковано та визначено вміст 68 сполук, у фенольних комплексах - 41 сполуки.

6. Визначено антимікробну та протигрибкову активність комплексів «Галофілін», «Вербенол», «Галіканд», «Галіверин», «Феносаліцин» та
«А-фунг». Вперше встановлено кореляційні зв'язки між вмістом основних БАР в одержаних комплексах та рівнем їх антимікробної та протигрибкової активності. Визначено гостру та субхронічну токсичність комплексів.

7. Вперше з трави підмаренника справжнього одержано екстракт сухий «ВСС-Т» та екстракт сухий «ОПК-Т». Встановлено гостру токсичність та гепатопротекторну активність екстрактів сухих «ВСС-Т» та «ОПК-Т».

8. Розроблено проекти МКЯ «Підмаренника справжнього трава», «Підмаренника справжнього трави екстракт сухий «ВСС-Т», «Підмаренника справжнього трави екстракт сухий «ОПК-Т».

СПИСОК ОПУБЛІКОВАНИХ ПРАЦЬ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

1. Ільїна Т. В. Компонентний склад петролейної, хлороформної та етилацетатної фракцій трави Galium verum / Т. В. Ільїна, А. М. Ковальова, О. В. Горяча // Український біофармацевтичний журнал. 2009. № 5(5). С. 31- 36. (Особистий внесок - підготовка фракцій для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні статті).

2. Амінокислотний склад кореневищ з коренями та трави Galium verum L. / Т. В. Ільїна, О. В. Горяча, А. М. Ковальова, О. В. Андрусенко, А. М. Комісаренко // Фармаком. 2009. №1. С. 41-44. (Особистий внесок - підготовка зразків для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні статті).

3. Ільїна Т. В. Хроматографічне дослідження фенілпропаноїдів трави Galium carpaticum Klok. / Т. В. Ільїна, А. М. Ковальова, О. В. Горяча // Фармаком. 2010. № 3. С. 36-40. (Особистий внесок - проведення частини експериментальних досліджень, обробка одержаних результатів, участь у оформленні статті).

4. Дослідження ефірної олії трави Galium carpaticum Klok. / Т. В. Ільїна, А. М. Ковальова, О. В. Горяча А. М. Комісаренко // Український біофармацевтичний журнал. 2010. № 5(10). С. 26- 29. (Особистий внесок - підготовка зразку для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні статті).

5. Исследование эфирного масла цветков Galium verum L. / Т. В. Ильина, А. М. Ковалева, О. В. Горячая, А. Н. Александров // Химия природных соединений. 2009. №4. С. 493. (Особистий внесок - підготовка зразку для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні статті).

6. Терпеноиды и ароматические соединения эфирного масла цветков и травы Galium salicifolium Klok. / Т. В. Ильина, А. М. Ковалева, О. В. Горячая, Б. А. Виноградов // Химия природных соединений. № 1. 2012. С. 136 -137. (Особистий внесок - підготовка зразків для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні статті).

7. Протигрибкова активність ліпофільних фракцій рослин роду Galium. Повідомлення 1. / Н. В. Кашпур, О. В. Горяча, Т. В. Ільїна, А. Ю. Волянський, А. М. Ковальова, Т. П. Осолодченко // Клінічна фармація. 2011. Т. 15. № 4. С. 50 - 53. (Особистий внесок - підготовка зразків для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні статті).

8. Дослідження токсичності та алергізуючої дії ліпофільних фракцій представників роду підмаренник / Н. В. Кашпур, О. В. Горяча, Т. В. Ільїна, А. М. Ковальова, А. Ю. Волянський // Український журнал клiнiчної та лабораторної медицини. 2011. Т. 6. №4. С. 200 - 204. (Особистий внесок - підготовка зразків для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні статті).

9. Протигрибкова активність ліпофільних фракцій рослин роду Galium. Повідомлення 2. / Н. В. Кашпур, О. В. Горяча, Т. В. Ільїна, А. М. Ковальова, А. Ю. Волянський, Т. П. Осолодченко // Клінічна фармація. 2012. Т. 16. № 1. С. 48 - 51. (Особистий внесок - підготовка зразків для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні статті).

10. Дослідження етилацетатно-спиртових фракцій трави підмаренника пухнастоногого та підмаренника верболистого і встановлення їх протимікробної активності / О. В. Горяча, А. М. Ковальова, Т. В. Ільїна, Н. В. Кашпур, А. Ю. Волянський // Зб. трудів НМАПО ім. П.Л. Шупика. вип.21. кн.4. 2012. С. 238 - 244. (Особистий внесок - підготовка зразків для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні статті).

11. Дослідження складу хлороформної фракції трави підмаренника несправжньом'якого / О. Ю. Лещенко, О. В. Горяча, Т. В. Ільїна, А. М. Ковальова // Запорожский медицинский журнал. 2012. №3 (72). С. 92 -95. (Особистий внесок - підготовка фракції для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні статті).

12. Элементный состав травы и корневища с корнями подмаренника настоящего / Т. В. Ильина, О. В. Горячая, А. М. Ковалева, Ю. А. Понарина // Университетская наука: Теория, практика, инновации. Сборник трудов 73-й научной конференции КГМУ и сессии Центрально-Черноземного центра РАМН. В з-х томах. Курск: ГОУ ВПО КГМУ Росздрава, 2008. Т.3. С. 70 - 74. (Особистий внесок - підготовка зразків для аналізу, обробка одержаних результатів, участь у оформленні статті).

13. Сравнительное изучение компонентного состава эфирных масел подмаренников и их биологической активности / Т Т. В. Ильина, О. В. Горячая, А. М. Ковалева, Н. В. Кашпур, А. Ю. Волянский // Актуальные проблемы науки фармацевтических и медицинских вузов: от разработки до коммерциализации: Материалы научно-практической конференции с международным участием, посвященной 75-летию Пермской государственной фармацевтической академии (7 - 9 декабря 2011 года), г. Пермь - 2011. С. 83 - 85. (Особистий внесок - підготовка зразків для аналізу, обробка одержаних результатів, участь в оформленні статті).

14. Ільїна Т. В. Дослідження фенілпропаноїдів трави G. dasypodum Klok. / Т. В. Ільїна, А. М. Ковальова, О. В. Горяча // Military and political sciences in the context of social progress Problems and ways of modern public health development. Materials digest of the XV and XVI International Scientific and Practical Conference (Kiev, London, December 7 - December 15, 2011; Kiev, London, December 21-December 26, 2011) Military, political, medical and pharmaceutical sciences / All-Ukrainian Academic Union of specialists for professional assessment of scientific research and pedagogical activity - Odessa: InPress. 2012. P. 178 -179. (Особистий внесок - підготовка зразків для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні статті).

15. Патент 99042 Україна, МПК A 61 K 36 / 74, A 61 K 135 / 00, A 61 P 31 / 04 Спосіб одержання комплексу антимікробної дії / Горяча О. В., Кашпур Н. В., Ільїна Т. В., Комісаренко А. Н., Абдулкафарова Е. Р., Грудько І. В., Очкур О. В., Ковальова А. М., Ісакова Т. В.; патентовласник Нац. фармац. ун-т. a 201102084; заявл. 22.02.2011; опубл. 10.07.2012, Бюл. № 13. (Особистий внесок - підготовка зразку для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформлення патенту).

16. Патент 65519 Україна, МПК A 61 K 36 / 00, A 61 K 135 / 00, A 61 P 31 / 00 Спосіб одержання засобу з антимікробною активністю з трави підмаренника справжнього / Горяча О. В., Кашпур Н. В., Ільїна Т. В., Волянський А. Ю., Комісаренко А. Н., Абдулкафарова Е. Р., Грудько І. В., Очкур О. В., Ковальова А. М., Андрусенко О. В.; патентовласник Нац. фармац. ун-т. u 201105767; заявл. 10.05.2011; опубл. 12.12.2011, Бюл. № 23. (Особистий внесок - підготовка зразку для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні патенту).

17. Патент 64792 Україна, МПК A 61 K 36 / 74, A 61 K 135 / 00, A 61 P 31 / 04 Спосіб одержання ліпофільного комплексу антимікробної дії / Горяча О. В., Кашпур Н. В., Ільїна Т. В., Комісаренко А. Н., Абдулкафарова Е. Р., Грудько І. В., Очкур О. В., Ковальова А. М., Ісакова Т. В.; патентовласник Нац. фармац. ун-т. u201102089; заявл. 22.02.2011, опубл. 25.11.2011, Бюл. № 22. (Особистий внесок - підготовка зразку для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформленні патенту).

18. Патент 78872 Україна, МПК A 61 K 36 / 74, A 61 P 31 / 04 Спосіб одержання ліпофільного комплексу з протигрибковою дією з трави підмаренника пухнастоногого / Горяча О. В., Кашпур Н. В., Ільїна Т. В., Ковальова А. М., Юрченко Н. С., Волянський А. Ю., Сидора Н. В., Колісник Я. С., Кошовий О. М., Комісаренко А. М.; патентовласник Нац. фармац. ун-т. u201208049, заявл. 02.07.2012, опубл. 10.04.2013, Бюл. № 7. (Особистий внесок - підготовка зразку для аналізу, участь у обробці одержаних результатів, оформлення патенту).

Окрім зазначених наукових праць за темою дисертаційної роботи опубліковано 14 тез доповідей у збірках конференцій всеукраїнського та міжнародного рівнів.

АНОТАЦІЯ

Горяча О.В. Фармакогностичне дослідження видів роду Galium L. флори України. - На правах рукопису.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата фармацевтичних наук за спеціальністю 15.00.02 - фармацевтична хімія та фармакогнозія. Національний фармацевтичний університет, Харків, 2013.

Вперше з використанням нумеричних методів таксономії та програмного забезпечення Excel проведено морфолого- та хемотаксономічне дослідження видів роду Galium L. флори України: встановлено їх ієрархічну підпорядкованість; підтверджено самостійність дискусійних таксонів; визначено 5 перспективних видів та проведено їх комплексне фармакогностичне дослідження. У траві п. справжнього, п. верболистого, п. пухнастоногого, п. карпатського та п. несправжньом'якого визначено вміст амінокислот, карбонових та гідроксикоричних кислот, флавоноїдів; окиснюваних поліфенолів, хлорофілів, каротиноїдів; встановлено компонентний склад ефірних олій, елементний склад сировини; з досліджуваних об'єктів виділено та ідентифіковано 21 речовину. Розроблено технології одержання ліпофільних та фенольних комплексів з трави п. справжнього, п. верболистого і п. пухнастоногого та екстрактів сухих з трави п. справжнього; визначено основні БАР; встановлено антимікробну, протигрибкову та гепатопротекторну активність; визначено гостру та субхронічну токсичності субстанцій. Розроблено проекти МКЯ на підмаренника справжнього траву та екстракти сухі з трави підмаренника справжнього.

Ключові слова: Підмаренник, фармакогностичне вивчення, біологічно активні речовини, фармакологічна активність.

АННОТАЦИЯ

Горячая О.В. Фармакогностическое исследование видов рода Galium L. флоры Украины. - На правах рукописи.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук по специальности 15.00.02 - фармацевтическая химия и фармакогнозия. Национальный фармацевтический университет, Харьков, 2013.

На основе нумерических методов таксономии с использованием программного обеспечения Excel впервые проведено морфолого-таксономическое исследование 31 вида рода Galium L. флоры Украины: проанализировано 7533 положительные и отрицательные состояния вегетативных и генеративных признаков; впервые проведено хемотаксономическое исследование 9 видов подмаренников, используя как маркеры фенольные соединения и терпеноиды, проанализировано 1278 положительных и отрицательных состояний химических признаков. На основе рассчитанных коэффициентов парного родства установлены морфолого-таксономические и хемотаксономические расстояния между таксонами, построены иерархические ряды рода по коэффициентам группового родства и доказана самостоятельность нередко отождествляемых видов - G. dasypodum Klokov и G. salicifolium Klokov; G. verum L. и G. ruthenicumWilld.; G. tomentellum Klokov и G. glabratum Klokov. В основе рода находятся виды секции Еugalium DC. - G. suberectum Klokov, G. intermedium Schult., G. carpaticum Klokov, G. pseudomollugo Klokov, G. kernerianum Klokov. Дендрограмма рода Подмаренник в основном соответствует систематической характеристике рода, представленной во Флоре Украины и более поздних монографиях по систематике рода. По результатам морфолого- и хемотаксономического исследования установлены перспективные виды для дальнейшего фармакогностического исследования - это подмаренник настоящий, п. иволистный, п. пушистоногий, п. карпатский и п. ложномягкий, в которых идентифицированы 43 карбоновые кислоты и установлено их содержание; 22 аминокислоты, 9 из которых являются незаменимыми; определено содержание гидроксикоричных кислот, флавоноидов, суммы окисляемых полифенолов и органических кислот. Из травы исследуемых видов методами препаративной бумажной и тонкослойной хроматографии, хромато-масс-спектрометрии и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) выделено и идентифицировано 21 соединение. Впервые из травы п. настоящего, п. иволистного, п. пушистоногого, п. карпатского и п. ложномягкого выделены и идентифицированы апигенин и лютеолин; из травы п. иволистного, п. пушистоногого, п. карпатского и п. ложномягкого - умбеллиферон; из травы п. настоящего, п. иволистного - кемпферол; из травы п. настоящего, п. пушистоногого и п. ложномягкого - кверцетин; из травы п. ложномягкого - скополетин. Из травы п. настоящего впервые выделены и идентифицированы кислота неохлорогеновая, изокверцитрин, из травы п. иволистного - кофейная и неохлорогеновая кислоты, кверцитрин и изокверцитрин, из травы п. пушистоногого - феруловая и неохлорогеновая кислоты, кверцитрин, изокверцитрин; из травы п. карпатского - кислота феруловая, кверцитрин, изокверцитрин, рутин, из травы п. ложномягкого - кислоты кофейная и феруловая, кверцитрин; из травы п. настоящего, п. иволистного, п. пушистоногого и п. карпатского - кислоты бензойная, фенилуксусная и ванилиновая; из травы п. иволистного, п. пушистоногого и п. карпатского - кислота салициловая. Методом ВЭЖХ в траве п. настоящего впервые идентифицированы и установлено содержание апигенина (64,9 мг/100г), лютеолин-7-О-диглюкозида (19,9 мг/100г), лютеолина (50,1 мг/100г); в траве п. карпатского - лютеолина (91,0 мг/100г), цинарозида (157,8 мг/100г) и лютеолин-7-O-галактозида (6,9 мг/100). Определены основные морфолого-анатомические признаки травы п. настоящего, п. иволистного, п. пушистоногого, п. карпатского и п. ложномягкого. Разработаны технологии получения липофильных «Галофиллин», «Вербенол», «Галиканд» и фенольных комплексов - «Галиверин», «Феносалицин» и «А-фунг» из травы подмаренника настоящего, п. иволистного и п. пушистоногого, а также сухих экстрактов травы подмаренника настоящего. Исследованы биологически активные вещества липофильных и фенольных комплексов; экстрактов сухих травы подмаренника настоящего («ВСС-Т» и «ОПК-Т»). Установлена антимикробная и противогрибковая активность липофильных и фенольных комплексов в отношении S. aureus, E. coli, P. vulgaris, P. aeruginosa, B. subtilis, десяти видов грибов рода Сandida и семи тест-штаммов грибов, не относящихся к роду Сandida; определены корреляционные взаимосвязи между содержанием основных БАВ и уровнем антимикробной и противогрибковой активности комплексов. Исследована гепатопротекторная активность экстрактов сухих травы подмаренника настоящего. Установлено, что экстракт «ОПК-Т» практически не уступает по степени гепатопротекторной активности референс-препарату «Силибор». Липофильные и фенольные комплексы по классификации К. К. Сидорова относятся к VI классу токсичности - относительно безвредные вещества; характеризуются отсутствием субхронической токсичности; экстракты «ВСС-Т» и «ОПК-Т» отнесены к V классу токсичности - практически нетоксические вещества. Разработаны проекты фармакопейных статей на подмаренника настоящего траву и экстракты сухие из травы подмаренника настоящего.

Ключевые слова: Подмаренник, фармакогностическое исследование, биологически активные вещества, фармакологическая активность.

ANNOTATION

Goryacha O.V. Pharmacognostic research of Galium L. genus species of Ukrainian flora. - Manuscript.

Thesis for the Degree of candidate of pharmaceutical science in speciality 15.00.02 - pharmaceutical chemistry and pharmacognosy. National University of Pharmacy, Kharkiv, 2013.

Morphological and chemotaxonomic studies of Galium L. genus species of Ukrainian flora using numeric taxonomy methods and software Excel have been carried out for the first time: hierarchical subordination of the genus have been established; taxonomic independence of identifiable taxa has been confirmed; 5 prospective species for further research have been revealed and their complex pharmacognostic research have been carried out. In herbs of G. verum, G. salicifolium, G. dasypodum, G. carpaticum and G. рseudomollugo amino acids, carboxylic and hydroxycinnamic acids, flavonoids, oxidative polyphenols, chlorophylls and carotenoids have been identified and quantified; elemental composition and essential oils' compositions have been studied. 21 Compounds have been isolated from these species and identified. Optimal technologies for obtaining lipophilic and phenolic complexes from G. veri, G. salicifolii and G. dasypodi herbs and dry extracts from G. veri herb have been developed; main phytochemicals of these extracts have been studied; antimicrobial, antifungal, hepatoprotective activities, acute and subchronic toxicities of complexes and extracts have been studied. The drafts of quality-control technology on Galii veri herb and dry extracts from Galii veri herb have been developed.

Keywords: Galium, pharmacognostic research, biologically active substances, pharmacological activity.

Размещено на Allbest.ru