Транспорт са2+ в мітохондріях гладеньком`язових клітин
Досліди, виконані на обробленій розчином дигітонін у суспензії гладеньком`язових клітин матки щурів, вплив реагентів, а також вивчення з використанням ізотопного методу властивостей системи Mg2+, ATP-залежного транспорту іонів Са у мітохондріях міометрія.
| Рубрика | Химия |
| Вид | диссертация |
| Язык | украинский |
| Дата добавления | 06.07.2014 |
| Размер файла | 47,6 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Дисертація присвячена вивченню властивостей системи Mg2+,ATP-залежного транспорту іонів Са у мітохондріях гладеньком`язових клітин матки (міоцитів).
У дослідах на суспензії міоцитів, оброблених розчином дигітоніну (0,1 мг/мл), тестовано систему Mg2+,АТР-залежного оборотного накопичення іонів Са як мітохондріальну. Вона є чутливою до гальмівної дії рутенієвого червоного (І0,5=0,6+0,2 мкМ) і азиду натрію (І0,5=0,9+0,3 мМ) та резистентною до дії тапсигаргіну і циклопіазонієвої кислоти. АТР та іони Mg є специфічними для цієї системи. Cu2+ > Ni2+ > Co2+ неспецифічно її пригнічують.
Досліджена та кінетично охарактеризована залежність швидкості акумуляції Са2+ у мітохондріях від концентрації Mg2+, ATP (у присутності сукцинату), сукцинату (у присутності АТР), неорганічного фосфату та Са2+.
Класичні інгібітори Mg2+,ATP-залежних мембранозв`язаних кальцієвих помп пригнічують накопичення Са2+ у мітохондріях: рутенієвий червоний > еозин Y ~ n-хлормеркурібензоат >> о-ванадат ~ азид натрію. Mg2+,ATP-залежна акумуляція Са2+ в мітохондріях є чутливою до зміни рН середовища інкубації, але не залежить від іонів Na.
Поліамін спермін активує Mg2+,ATP-залежне накопичення Са2+ в мітохондріях (значення уявної константи активації Ка становило 0,43+0,04 мМ).
Аннотация
Веклич Т.А. Транспорт Са2+ в митохондриях гладкомышечных клеток. - Рукопись.
Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.04 - биохимия. Институт биохимии им. О.В.Палладина НАН Украины, Киев, 2002.
Диссертационная работа посвящена исследованию свойств системы Mg2+,ATP-зависимого транспорта ионов Са в митохондриях гладкомышечных клеток миометрия.
В экспериментах, выполненных на суспензии миоцитов, обработанных раствором дигитонина (0,1 мг/мл), с использованием изотопного метода (45Са2+) проведено систематическое исследование свойств Са2+-аккумулирующей системы митохондрий миоцитов.
Доказано, что нечувствительная к действию тапсигаргина и циклопиазониевой кислоты аккумуляция Са2+ в них полностью тормозится рутениевым красным (10 мкМ) и азидом натрия (10 мМ) и осуществляется в митохондриях. Значение начальной скорости транспортного процесса составляет 1260+130 пмоль Са2+/106 клеток за 1 мин.
Накопление ионов Са в митохондриях гладких мышц обратимо. Кальциевый ионофор А-23187 индуцирует освобождение Са2+ после его предварительной аккумуляции в этих субклеточных структурах.
Транспортная система митохондрий специфична относительно АТР и ионов Mg. Двухвалентные катионы неспецифически угнетают Mg2+,ATP-зависимый транспорт Са2+ в митохондриях в сответствии с последовательностью: Cu2+ > Ni2+ > Co2+ (кажущаяся константа ингибирования I0,5 составляет 4,2+0,2, 51+4 и 290+30 мкМ соответственно).
Исследована и кинетически охарактеризована зависимость скорости аккумуляции Са2+ в митохондриях от концентрации Mg2+, ATP (в присутствии сукцината), сукцината (в присутствии АТР), неорганического фосфата и Са2+. Значение константы активации по Са2+ КСа2+ составляет 1,0+0,1 мкМ.
Изучена чувствительность Са2+-аккумулирующей системы митохондрий к классическим ингибиторам Mg2+,ATP-зависимых мембранносвязанных кальциевых насосов. Ингибирующий эффект этих веществ на накопление Са2+ в митохондриях соответствует последовательности: рутениевый красный (І0,5 = 0,6+0,2 мкМ) > эозин Y (І0,5 = 2,1+0,4 мкМ) ~ n-хлормеркурибензоат (І0,5 = 3,1+0,3 мкМ) >> о-ванадат (І0,5 = 0,6+0,2 мМ) ~ азид натрия (І0,5 = 0,9+0,3 мМ).
Mg2+,ATP-зависимая аккумуляция ионов Са в митохондриях чувствительна к изменению рН среды инкубации, но не зависит от ионов Na.
Полиамин спермин активирует Mg2+,ATP-зависиую аккумуляцию Са2+ в митохондриях миоцитов, повышая как начальную скорость транспортного процесса, так и количество ионов Са, которые аккумулируются. Кажущаяся константа активации Ка составляет 0,43+0,04 мМ.
Полученные результаты расширяют современные представления о биохимических механизмах кальциевого обмена в клетках гладких мышц, свойствах Са2+-аккумулирующей системы митохондрий этих мышц.
Продемонстрировано, что суспензия миоцитов, предварительно обра-ботанных раствором дигитонина, является перспективной экспериментальной моделью для исследования кинетических свойств Са2+-транспортирующей системы митохондрий.
Полученные результаты важны при разработке методов направленной коррекции активности Са2+-транспортирующей системы митохондрий гладкомышечных клеток.
Summary
Veklich T.O. Transport of Ca2+ in the smooth muscle cells mitochondria. - Manuscript.
Dissertation thesis on obtaining the scientific degree of PhD (Biology) in the speciality 03.00.04 - biochemistry. O.V. Palladin Institute of Biochemistry of NAS of Ukraine, Kyiv, 2002.
The dissertation is devoted to the study of the properties of Mg2+,ATP-dependent Са2+-transport system of mitochondria in smooth-muscle uterine cells (miocytes).
In the experiments using suspension of digitonin (0,1 mg/ml) treated myocytes we tested Mg2+,ATP-dependent Са2+-accumulation system of mitochondria as sensitive to ruthenium red (І0,5=0,6+0,2 M) or sodium azide (І0,5=0,9+0,3 mM) inhibition but resistant to thapsigargin or cyclopiasonium acid. Mitochondria transport system is specific to ATP and Mg2+.
Cu2+ > Ni2+ > Co2+ are non specific to inhibit Mg2+,ATP-dependent Са2+-accumulation transport system in mitochondria.
The experiments allowed to examine and characterize how Са2+ accumulation velocity in mitochondria depends on concentration of Mg2+, ATP (succinate available), succinate (ATP available), non-organic phosphate and Са2+.
The effect of inhibitors of energy-dependent Са2+-transport systems on Mg2+,ATP-dependent Са2+-transport system of mitochondria in miocytes is as follows: ruthenium red > eosin-Y ~ p-chlormercurybenzoate >> о-vanadate ~ sodium azide. Mg2+,ATP-dependent Са2+-accumulation in mitochondria is sensitive to changes of pH, and does not dependent on Na+.
Polyamine spermine activates Mg2+,ATP-dependent Са2+ accumulation in mitochondria (presumed Ka activation constant was 0,43+0,04 mM).
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Хімічний склад і поглинаюча здатність ґрунтів. Методика визначення активності іонів і термодинамічних потенціалів в ґрунтах. Вплив калійних добрив на активність іонів амонію в чорноземі типовому. Поглиблене вивчення хімії як форма диференціації навчання.
дипломная работа [823,0 K], добавлен 28.03.2012Обчислення вибіркових характеристик хімічних елементів, перевірка на випади, кореляційний аналіз. Побудова регресійної моделі сталі. Опис значимості коефіцієнтів рівняння. Рекомендації щодо підвищення властивостей з використанням математичної моделі.
контрольная работа [1,4 M], добавлен 19.04.2015Вивчення Планарної хроматографії яка базується на вибірковому розподіленні компонентів суміші між двома фазами, що не змішуються. Аналіз ролі аналітичних органічних реагентів у процесі обробки хроматограф, методів паперової і тонкошарової хроматографії.
реферат [707,3 K], добавлен 11.10.2011Хроматографія на гелі сефадекса й розподіл по молекулярних масах. Застосування органічних реагентів у рідинній хроматографії для поділу простих ефірів, вуглеводнів, перекисів. Автоматичні методи детектування. Метод, що використовує хлорид цетилпіридинію.
реферат [3,7 M], добавлен 18.10.2014Характеристика та застосування мінеральних вод. Розгляд особливостей визначення кількісного та якісного аналізу іонів, рН, а також вмісту солей натрію, калію і кальцію полуменево-фотометричним методом. Визначення у воді загального вмісту сполук феруму.
курсовая работа [31,1 K], добавлен 18.07.2015Характеристика води по її фізичним та хімічним властивостям. Методики визначення вмісту нітрат іонів у стічній воді фотометричним методом аналізу з двома реактивами саліциловою кислотою та саліцилатом натрію у шести паралелях. Закон Бугера-Ламберта-Бера.
дипломная работа [570,8 K], добавлен 07.10.2014Характеристика та особливості застосування мінеральних вод, принципи та напрямки їх якісного аналізу. Визначення РН води, а також вмісту натрію, калію та кальцію. Методи та етапи кількісного визначення магній-, кальцій-, хлорид – та ферум-іонів.
курсовая работа [40,4 K], добавлен 25.06.2015Історія відкриття тіосульфату натрію. Органолептичні та санітарно-гігієнічні показники. Методи одержання тіосульфату натрію. Хімічні властивості тіосульфату натрію. Методи відділення S2O32- іонів від других іонів. Фотометричне визначення тіосульфату.
курсовая работа [141,9 K], добавлен 16.02.2011Апробація варіанту методики визначення йодиду і йоду при спільній присутності з паралельних проб за допомогою використання електрохімічного окислення. Визначення втрати продуктів електромеханічного окислення за відсутності комплексоутворюючих іонів.
курсовая работа [82,5 K], добавлен 25.06.2011Дослідження параметрів, що характеризують стан термодинамічної системи. Вивчення закону фотохімічної еквівалентності, методу прискорення хімічних реакцій за допомогою каталізатора. Характеристика впливу величини енергії активації на швидкість реакції.
курс лекций [443,7 K], добавлен 12.12.2011Швидкість хімічної реакції. Залежність швидкості реакції від концентрації реагентів. Енергія активації. Вплив температури на швидкість реакції. Теорія активних зіткнень. Швидкість гетерогенних реакцій. Теорія мономолекулярної адсорбції Ленгмюра.
контрольная работа [125,1 K], добавлен 14.12.2012Люмінесцентні властивості іонів рідкісноземельних елементів. Явище люмінесценції, його характеристики й класифікація. Люмінесцентні характеристики речовин. Схеми енергетичних рівнів іонів рідкісноземельних елементів, їх синтез методом хімічного осадження.
курсовая работа [946,0 K], добавлен 28.04.2015Реакції амідування та циклізації діетоксалілантранілогідразиду в залежності від співвідношення реагентів та температурного режиму. Вплив природи дикарбонових кислот та їх знаходження в молекулі антранілогідразиду на напрямок реакції циклодегідратації.
автореферат [190,5 K], добавлен 10.04.2009Вплив різних аніонів на розвиток асоціації молекул родаміну 6Ж. Кислотно-основна рівновага органічних реагентів класу Родамінів. Методи визначення аніонних ПАР. Аналіз складних сумішей АПАР. Приготування розчину оксиетильованого алкілсульфату натрію.
дипломная работа [51,2 K], добавлен 25.06.2011Класифікація хімічних реакцій, на яких засновані хіміко-технологічні процеси. Фізико-хімічні закономірності, зворотні та незворотні процеси. Вплив умов протікання реакції на стан рівноваги. Залежність швидкості реакцій від концентрації реагентів.
реферат [143,4 K], добавлен 01.05.2011Вивчення можливості визначення спектрофотометрії йодату і перйодату при спільній присутності за допомогою використання редокс-реакції. Апробація варіанту спільного окислення йодату і пейодату на платиновому електроді. Міра окислення індивідуальних іонів.
дипломная работа [647,9 K], добавлен 25.06.2011Методи синтезу поліаніліну, характеристика його фізико-хімічних та адсорбційних властивостей, способи використання в якості адсорбенту. Електрохімічне окислення аніліну. Ферментативний синтез з використанням полісульфокислот в присутності лаккази.
курсовая работа [810,7 K], добавлен 06.11.2014Предмет біоорганічної хімії. Класифікація та номенклатура органічних сполук. Способи зображення органічних молекул. Хімічний зв'язок у біоорганічних молекулах. Електронні ефекти, взаємний вплив атомів в молекулі. Класифікація хімічних реакцій і реагентів.
презентация [2,9 M], добавлен 19.10.2013Вивчення вітаміну С, опис його властивостей, методик ідентифікації і кількісного визначення. Медичні та фізико-хімічні властивості аскорбінової кислоти, її біосинтез. Фармакодинаміка та фармакокінетика. Залежність між будовою і біологічною активністю.
курсовая работа [1,4 M], добавлен 30.11.2014Характеристика кінетичних закономірностей реакції оцтової кислоти та її похідних з епіхлоргідрином. Встановлення впливу концентрації та структури каталізатору, а також температури на швидкість взаємодії карбонової кислоти з епоксидними сполуками.
магистерская работа [762,1 K], добавлен 05.09.2010
