Сравнительная оценка биотрансформации органических отходов видами семейства Lumbricidae

Размещено на http://www.allbest.ru/

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Сравнительная оценка биотрансформации органических отходов видами семейства Lumbricidae

03.00.16 - экология

На правах рукописи

Мухитова Минзифа Эминовна

Ульяновск, 2009

Работа выполнена на кафедре биологии, ветеринарной генетики, паразитологии и экологии Федерального государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор, заслуженный работник высшей школы РФ Романова Елена Михайловна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Горбачев Владимир Николаевич

кандидат сельскохозяйственных наук, профессор Кригер Наталья Владимировна

Ведущая организация: Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Самарская государственная сельскохозяйственная академия»

Защита состоится «____» __ 2009 года в _____ часов на заседании диссертационного совета Д 212.278.07 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Ульяновский государственный университет по адресу: 432000, г. Ульяновск, ул. Набережная реки Свияга, 40, корпус, аудитория 703.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ульяновского государственного университета по адресу: 432000, г. Ульяновск, ул. Набережная реки Свияга, 40, а с авторефератом - на сайте Вуза

Отзывы на автореферат направлять по адресу: 432000, г. Ульяновск, ул. Л.Толстого, 42, Ульяновский государственный университет, управление научных исследований

Автореферат разослан «___» ______________ 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент С.В. Пантелеев

Общая характеристика работы

Актуальность темы. Ресурсы суши Земли включают в себя почвы, как главный фактор развития сельского хозяйства и благосостояния человечества (FAO, 1995a; Wood, Sebastian, Scherr, 2000). Итоговый документ UNCED 1992 - «Повестка дня на XXI век» - основной в области стратегии земельных ресурсов - делает акцент на реальности угрозы глобальной продовольственной безопасности в связи с недостаточным вниманием к проблемам земельных ресурсов. Экологическая Доктрина РФ в части экологической безопасности, относит к числу основных приоритетов (п.4) обеспечение населения России экологически безопасными продуктами питания. Поэтому все чаще для повышения плодородия почв вместо традиционных химических удобрений используют технологии биологического или органического земледелия (Стриганова, 1988; Вирясов, 1992; Горчаков, 2002), которые включают вермикультуру (запатентована Барретом в Америке, 1959) и ЭМ-технологии (разработаны Хиго Теро в Японии, 1998).

Вермикультура прошла испытание временем и имеет широкое распространение в мировом сельском хозяйстве, в первую очередь, в европейских странах: Франции, Италии, Германии, Нидерландах, Польше, Венгрии, Великобритании; в странах востока - Японии и Китае; в США и Канаде. В США в 1979 г. был принят закон, запрещающий вывоз из страны калифорнийских червей и их коконов. Однако к этому времени технология воспроизводства вермикультуры калифорнийских червей уже широко распространилась по планете и, принятый в США, закон не нанес ее развитию никакого ущерба.

Вермикомпостирование - это экологически чистый способ утилизации органических отходов различного происхождения с помощью сообщества педобионтов, в котором функционально доминируют дождевые черви - люмбрициды (Морев, 1989; Tsukamoto, 1977; Appelhof, 1981; Reinecke, 1981(a), 1981(б), 1987; Vermiculture, 1982; Lofs-Holmin, 1985). Вермикомпосты представляют собой высокоценные органические удобрения, при внесении в почву они стимулируют процессы естественного восстановления плодородия (Гиляров, 1985; Игонин, 1995; Попов, 2001; Калинина, 2002).

Вермикомпостирование отходов животноводства одновременно решает три важные проблемы современной цивилизации: получение ценных удобрений, утилизации отходов животноводства и охраны природной среды в зонах крупных животноводческих комплексов (Мельник, 1990; Красовский, 1991; Игонин, 1995; Городний, 1999; Бубина, 2004).

Дождевые черви играют ключевую роль в биотическом круговороте питательных веществ в почве. В биотическом круговороте почвенные микроорганизмы и растения закрепляют химические элементы почвы в своих клетках, а дождевые черви, и другие почвенные беспозвоночные, выводят эти элементы из органического вещества растений и микробной биомассы обратно в почву и обогащают ее азотом, фосфором и калием. Органика, проходя через кишечник люмбрицид, переваривается под действием энзимов и кишечной микрофлоры, разлагается до более простых соединений, структурируется; почвенные частички обогащаются гуминовыми кислотами, кальцием, магнием, фосфорной кислотой. Многие минеральные соединения переходят в доступные для растений формы (Покровская, 1991; Tomati, 1986).

Дождевые черви выполняют оздоровительные и обеззараживающие функции, элиминируя патогенную почвенную микрофлору, поглощая и переваривая бактерии, водоросли, грибы и их споры, простейших и нематод (Зиборова, 2006). Семейство люмбрицид включает свыше 200 видов дождевых червей, которые относятся к разным морфо-экологическим группам. Наиболее распространенными являются два вида: компостные черви
(Eisenia fetida) и почвенные черви (Lumbricus terrestris). Калифорнийские черви (E.f. аndrei) - промышленная линия, созданная Барретом, не адаптированы к климатическим условиям центральной зоны РФ, в природной среде в зимний период погибают. Природные виды люмбрицид Средневолжского региона обладают широкой экологической валентностью, хорошо переносят зимний период, при наличии хороших технологических характеристик их можно было бы эффективно использовать для утилизации отходов животноводства.

В Российской Федерации вермикультура получила широкое распространение. Вермикультура активно развивается в Брянской, Владимирской, Самарской областях, в Татарии (Городний, 1990; Игонин, 1995; Мамеева, 2003). В ряде случаев калифорнийских червей (E. f. andrei) скрещивают с местными компостными червями (E. fetida). Перспективы использования природных почвенных червей (L. terrestris) в качестве вермикультуры ранее не исследовались.

Цель работы: Оценить перспективы использования природных видов семейства люмбрицид (Lumbricidae) для переработки органических отходов сельскохозяйственного производства.

В соответствии с этой целью решались следующие задачи:

- оценить репродуктивный потенциал природных видов компостных и почвенных червей (E. fetida, L. terrestris) Средневолжского региона;

- провести сравнительные исследования вермикомпостов люмбрицид;

- исследовать характеристики вермикомпостов из разных субстратов;

- провести биотестирование общей токсичности исходных субстратов и вермикомпостов;

- исследовать структуру вермикомпостов;

- провести сравнительные исследования микробиоценозов кишечника почвенных и компостных червей (L. terrestris и E. fetida);

- охарактеризовать микрофлору вермикомпостов люмбрицид.

Научная новизна. Природные виды люмбрицид обладают хорошей структурирующей способностью, но проявляют избирательность в отношении органических субстратов. Структурирующая способность калифорнийских червей по отношению к разным субстратам более выровнена; доля наиболее ценной для растений фракции в составе их вермикомпостов составляет не менее 50%.

У почвенных люмбрицид (L. terrestris) в кишечном микробиоценозе доминирует кишечная микрофлора, осуществляющая деструкцию лигно-целлюлозного комплекса. У компостных червей (E. fetida) и калифорнийских червей (E. f. andrei) доминирует микрофлора, осуществляющая трансформацию органических и минеральных форм азота и органических фосфатов. Микрофлора вермикомпостов люмбрицид в 5-7 раз обильнее и богаче по своему составу микрофлоры исходных субстратов.

Природные виды люмбрицид (E. fetida и L. terrestris), как и калифорнийские черви (E. f. andrei), обладают способностью снижать содержание тяжелых металлов в вермикомпостах. Общая токсичность вермикомпостов природных видов люмбрицид не превышает токсичности вермикомпостов калифорнийских червей.

Вермикомпосты природных видов люмбрицид (E. fetida, L. terrestris) содержат меньше гумуса, чем вермикомпосты калифорнийских червей
(E. f. andrei).

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты исследований вносят вклад в развитие эйдэкологии дождевых червей. Полученные результаты свидетельствуют о важной роли педобионтов этого семейства в процессах естественного почвообразования, и о перспективности использования природных видов (L. terrestris, E.fetida) в технологиях утилизации органических отходов цивилизации.

Природные люмбрициды - (L. terrestris, E.fetida) занимают разные экологические ниши в биогеоценозах; выявленные нами отличительные особенности микробиоценозов их кишечника связаны с эволюционно обусловленной экологической специализацией каждого из видов.

Вермикомпосты природных видов люмбрицид (L. terrestris, E. fetida) из органических отходов животноводства по химическому составу представляют собой ценное удобрение, незначительно уступающее вермикомпостам калифорнийских червей.

В ходе исследований разработан состав исходных субстратов, позволяющий использовать почвенных червей (L. terrestris), наравне с компостными (E. fetida), для переработки органических отходов основных отраслей отечественного животноводства.

Основные положения, выносимые на защиту:

- вермикомпосты почвенных (L. terrestris) и компостных червей
(E. fetida) по своим характеристикам достоверно не отличаются. Вермикомпосты калифорнийских червей (E. f. andrei) содержат больше гумуса, чем вермикомпосты червей природных видов (L. terrestris, E. fetida);

- природные виды люмбрицид (L. terrestris, E. fetida) эффективно утилизируют органические отходы животноводства, обладают хорошей структурирующей способностью, уменьшают токсичность, снижают содержание тяжелых металлов в ходе биотрансформации субстратов;

- природные виды люмбрицид L. terrestris и E. fetida, по сравнению с калифорнийскими червями E. f. andrei, имеют низкий репродуктивный потенциал, растянутый период инкубации и нуждаются в селекции по этим признакам.

Апробация работы и публикации. Материалы исследований были представлены и обсуждались на конференциях всех уровней, в том числе на Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых «Региональные проблемы народного хозяйства» (Ульяновск, 2004), на Всероссийской научно-практической конференции «Современное развитие АПК: региональный опыт, проблемы, перспективы» (Ульяновск, 2005), на III Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы экологии и охраны природы. Пути их решения» (Ульяновск, 2006), на IV Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы экологии и охраны природы. Пути их решения» (Ульяновск, 2007), на V международной научно-практической конференции «Татищевские чтения: актуальные проблемы науки и практики» (Тольятти, 2008), на Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы аграрной науки и образования» (Ульяновск, 2008).

По материалам исследований опубликовано тринадцать работ, в т.ч. одна в издании из списка ВАК РФ.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 169 страницах, включает 11 таблиц, 70 рисунков и 8 фотографий. Состоит из введения, обзора литературы по изучаемой проблеме, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов, библиографического списка и приложения. Библиография включает 284 наименований, в том числе 41 на иностранных языках.

Содержание работы

Во введении обоснована актуальность темы, сформулированы цель, задачи, научная новизна и практическая значимость работы, приведены положения, выносимые на защиту, изложена структура диссертации.

В первой главе изложен обзор литературы по изучаемой проблеме. Подробно рассмотрены вопросы биологии и экологии семейства люмбрицид и их роль в биогеоценозах, приведен обзор существующих технологий вермикомпостирования, методов оценки вермикомпостов.

Во второй главе изложена характеристика объекта, материалов и методов исследований. Объектом исследования являлись люмбрициды природных видов E. fetida (компостные черви) и L. terrestris (обыкновенные дождевые черви) и их вермикомпосты, полученные из субстратов, на основе органических отходов животноводства. Субстраты включали: основу (ферментированный навоз сельскохозяйственных животных) - 60%, солому - 30%, почву -10%. Исследовались четыре вида субстратов: 1 - на основе навоза крупного рогатого скота; 2 - на основе свиного навоза; 3 - на основе овечьего навоза; 4 - на основе кроличьего навоза. Каждый из субстратов заселялся одним из видов люмбрицид. Всего было проведено десять серий опытов.

Репродуктивный потенциал каждого из видов люмбрицид оценивался по количеству коконов от пары червей за неделю, числу личинок, вылупившихся из коконов за один репродуктивный цикл, периоду созревания коконов. Отдельно оценивался коллумелярный вес особей и общая биомасса червей при заселении субстрата и по окончании вермикомпостирования.

Отбор проб вермикомпоста (биогумуса) на испытания проводили в соответствии с разделом 3 ГОСТ 17.4.4.02, пробоотборник определялся по ГОСТ 19126. Хранение и подготовка проб к анализу соответствовали ГОСТ 26712. Материалы и реактивы, применяемые при отборе проб и испытаниях, готовили по ГОСТ 17.4.4.02 и 26712. Требования безопасности при проведении испытаний соответствовали ГОСТ 267. Определение рН проводили по ГОСТ 27979. Определение химического состава вермикомпоста: содержание гумуса - по ГОСТ 26213, содержания органического вещества - по ГОСТ 27980, содержания общего азота, фосфора и калия - по ГОСТ 26715, ГОСТ 26717, ГОСТ 26718, содержания кальция и магния - по ГОСТ 27894.11. Содержание аммиачного азота и азота нитратного - по ГОСТ 26716-85, 26488-85. Содержание подвижного фосфора по ГОСТ 26205-91. Содержание тяжелых металлов: свинца, кадмия - по ГОСТ 30178-96. Работы выполнялись на базе лаборатории химико-аналитического контроля растениеводческой, пищевой продукции и кормов ФГУ САС «Ульяновская». Полученные вермикомпосты оценивали по ТУ 9810-004-27826969-97.

Исследование общей токсичности исходных субстратов и вермикомпостов проводилось в соответствии с ГОСТ №13496.7-97. Структурный состав вермикомпостов определяли сухим просеиванием по ГОСТ 12536-79.

Микрофлора исследовалась в соответствии с Методическими указаниями 1990 г. Минздрава СССР. Обработка результатов испытаний проводилась в соответствии с ГОСТ 26712. Для оценки численности систематических групп микроорганизмов проводили посевы на элективные питательные среды. Учет численности аммонифицирующих микроорганизмов проводили на МПА, нитрифицирующих микроорганизмов - на среде Виноградского, целлюлозолитических микроорганизмов - на среде Гетчисона, актиномицетов - на КАА (крахмально аммиачном агаре), грибов - на среде Чапека, микроорганизмов, мобилизующих органические фосфаты - на среде Менкиной (Теппер, 2005). Статистическая обработка полученных данных проводилась при помощи пакета MS Excel 2000 по общепринятым алгоритмам (Ивантер, Коросов,1992).

Результаты собственных исследований и их обсуждение изложены в третьей главе. Раздел 3.1. посвящен оценке репродуктивного потенциала природных видов люмбрицид.

По результатам наших исследований репродуктивный потенциал природных компостных червей (E. fetida) составил - 8,3±0,2 личинки за репродуктивный цикл, при продолжительности инкубационного периода - 11,3±0,1 суток. Почвенные черви (L. terrestris) продуцировали достоверно меньше личинок 4,2±0,2 экз., при продолжительности инкубационного периода - 15±0,1 суток. Калифорнийские черви (E.f. аndrei) продуцировали 15,7±0,3 личинок за репродуктивный цикл при инкубационном периоде 9,5±0,1 суток. По сравнению с природными видами люмбрицид они обладали более высоким репродуктивным потенциалом. Наши результаты хорошо согласуются с данными Смоленцева (2004), Appelhof, (1981); Reinecke, 1981(a), 1981(б), 1987; Vermiculture, (1982); Lofs-Holmin, (1985).

Полученные результаты свидетельствуют, что компостные черви
(E. fetida) и обыкновенные дождевые черви (L. terrestris), обитающие в Средневолжском регионе, имеют пониженный репродуктивный потенциал и нуждаются в селекции на повышение плодовитости и сокращение инкубационного периода, если предполагается их использование в технологиях вермикомпостирования.

В ходе исследований было установлено, что коллумелярная масса у разных видов семейства люмбрицид существенно отличается. У почвенных червей (L. terrestris) она составляла 0,92±0,10 г. Это в 3 раза выше, чем у компостных червей (E. fetida). Коллумелярная масса компостных червей составила 0,31±0,01 г. Коллумелярная масса калифорнийских червей была выше, чем у компостных и составляла 0,72±0,01 г.

Прирост биомассы вермикультуры исследовали на субстрате из ферментированного навоза крупного рогатого скота. В субстраты массой 3 кг заселяли по 150 особей половозрелых люмбрицид, из расчета 50 особей на 1 кг субстрата. Перед заселением люмбрицид взвешивали для определения биомассы. Биомасса 150 калифорнийских червей (E.f. andrei) составляла в среднем 108±15,10 г, при средней массе 1 червя 0,72±0,07 г. Биомасса 150 компостных червей (E. fetida) составляла 46,5±4,6 г при средней массе 1 червя - 0,31±0,10 г. Биомасса 150 обыкновенных дождевых червей (L. terrestris) составляла - 138±14,7 г, при средней массе 1 червя 0,92±0,11 г. Через три месяца, после завершения вермикультивирования, все люмбрициды, включая молодь, были извлечены из контейнеров для определения итоговой биомассы. Было установлено, что в конце опыта биомасса калифорнийских червей возросла в 5 раз и составила 540±38,3 г. Биомасса (E. fetida) возросла в 4,5 раза и составила 209±18,8 г. Биомасса (L. terrestris) возросла в 4,3 раза и составила 702±65,9 г. При количественном подсчете червей было установлено, что наибольший прирост численности был характерен для популяции калифорнийских червей. В конце опыта численность калифорнийских червей составила 1052±91,4 особи, это в 7 раз больше, чем было заселено. Численность популяции компостных червей (E. fetida) возросла в 6 раз и составила 927±89 особей. Численность почвенных червей (L. terrestris) возросла в 5 раз и составила 753±67 особи. В вермикомпостировании показатель биомассы червей на единицу объема субстрата играет важную роль. Поэтому, для использования природных компостных червей, обитающих в Средневолжском регионе, в технологических целях необходимо провести селекцию на повышение коллумелярной массы.

В разделе 3.2. изложены результаты сравнительной оценки химического состава исходных субстратов. Всего исследовались 4 субстрата; №1 был приготовлен на основе навоза крупного скота, №2 - из свиного навоза, № 3 - из овечьего навоза, № 4 - из кроличьего навоза. По химическому составу исходные субстраты существенно не отличались, однако в субстрате из навоза крупного рогатого скота (№1) содержание общего углерода составляло 9,74±0,20 % и было достоверно выше, чем в остальных субстратах (7,19-7,67%). В субстрате №2 было отмечено наиболее высокое содержание общего (0,67±0,07%) и подвижного фосфора (0,38±0,06мг/100г). По содержанию основных химических элементов показатели наших субстратов соответствовали приведенным в справочной литературе (Васильев, 1988; Ягодин, 1989).

Во всех субстратах были выявлены тяжелые металлы. Сами по себе тяжелые металлы не являлись предметом нашего исследования, но поскольку свинец и кадмий содержались во всех субстратах, мы сочли нужным исследовать их содержание и выяснить, как оно изменяется в процессе биотрансформации под действием люмбрицид.

Наиболее высокий уровень свинца был выявлен в субстратах из свиного - 15,9±0,3 мг/кг и кроличьего навоза - 15,9±0,3 мг/кг. В субстратах из овечьего навоза и навоза крупного рогатого скота содержание свинца составляло 14,4±0,3 мг/кг и 13,3±0,08 мг/кг, соответственно.

Наиболее загрязнен кадмием был субстрат из овечьего навоза
(1,53±0,1 мг/кг), в меньшей мере - субстраты из свиного (1,37±0,1 мг/кг), кроличьего (1,20±0,1 мг/кг) и из навоза крупного рогатого скота
(0,7±0,02 мг/кг). Других тяжелых металлов в субстратах обнаружено не было.

В разделе 3.3. приведены результаты сравнительных исследований химического состава вермикомпостов природных люмбрицид (E. fetida, L. terrestris) и калифорнийских червей (E.f. аndrei) из органических отходов разных отраслей животноводства.

Проведенные исследования показали, что в вермикомпостах люмбрицид природных видов (E. fetida, L. terrestris) и вермикомпостах калифорнийских червей отмечен прирост основных биофильных элементов - углерода, азота, фосфора, калия, по сравнению с их содержанием в исходных субстратах.

Наибольший прирост общего гумуса, в пересчете на углерод (по отношению к исходному субстрату) отмечен в вермикомпостах калифорнийских червей (E.f. аndrei). В их вермикомпостах содержание общего гумуса возрастало в 1,6-2 раза и было достоверно выше, чем в вермикомпостах природных видов. Полученные нами результаты согласуются с данными Стригановой, (1989); Атлавините, (1990); Игонина, (1995); Еськова, (2004); Самедова, (2004); Попова, (2004). По содержанию общего гумуса вермикомпосты природных видов (E. fetida, L. terrestris) достоверно не отличались. В вермикомпостах калифорнийских червей (E.f. аndrei) уровень общего азота возрос в среднем в 1,5-2 раза.

Наши результаты согласуются с данными других исследователей (Мельник, 1990; Покровская, 1991; Еськов, 2004; Мерзлая, 2004; Попов, 2004; Черников, 2004; Pussard, 1983). В вермикомпостах природных видов (E. fetida, L. terrestris) содержание общего азота повысилось незначительно. При сравнении вермикомпостов трех видов люмбрицид по содержанию общего азота достоверных отличий не выявлено. Наибольший прирост уровня азота нитратного (в среднем в 6 раз), отмечен в вермикомпостах калифорнийских червей (E.f. аndrei). В вермикомпостах природных видов (L. terrestris, E. fetida) содержание азота нитратного также возросло в 5,7 раза. Вермикомпосты по содержанию азота нитратного между собой достоверно не отличались. Наши результаты расходятся с данными Михеева (Михеев, 2005): в его исследованиях содержание азота нитратного в вермикомпостах компостных червей (E. fetida) возрастало на 7%, а содержание азота аммиачного - на 28% по отношению к непереработанному субстрату. Возможно, это обусловлено режимами вермикультивирования, состоянием самой вермикультуры и микрофлорой субстрата. Наибольший прирост содержания азота аммиачного (в 7,8 раз) отмечен в вермикомпостах почвенных червей (L. terrestris). В вермикомпостах калифорнийских червей (E.f. аndrei) содержание азота аммиачного возрастало в среднем в 6,8 раза, а компостных червей (E. fetida) - в 6,9 раза. Различия между вермикомпостами люмбрицид по содержанию азота аммиачного были статистически не достоверны.

В вермикомпостах калифорнийских червей (E.f. аndrei) содержание общего фосфора возросло в 3,3 раза, а в вермикомпостах почвенных червей (L. terrestris) - в 2,9 раза, а в вермикомпостах компостных червей (E. fetida) - в 2,6 раза.

При сравнении вермикомпостов разных видов люмбрицид по содержанию общего фосфора достоверных различий не было выявлено. Наши результаты согласуются с данными других исследователей (Мельник, 1990; Покровская, 1991; Мерзлая, 2004; Черников, 2004; Pussard, 1983).

Наибольший прирост содержания подвижного фосфора (в 4,5 раза) отмечен в вермикомпостах калифорнийских червей (E.f. аndrei). В вермикомпостах почвенных червей (L. terrestris) содержание подвижного фосфора достоверно возрастало в 3,5 раза, а в вермикомпостах компостных червей
(E. fetida) - в 2,8 раза. Вермикомпосты из овечьего, кроличьего и свиного навоза достоверно отличаются по содержанию подвижного фосфора. Полученные нами результаты по приросту подвижного фосфора в вермикомпостах хорошо согласуются с данными Еськова (Еськов, 2004), в его исследованиях подвижный фосфор возрастал в 2,6 раза и расходятся с данными Михеева (2005), в его исследованиях содержание подвижного фосфора в вермикомпостах, по отношению к исходным субстратам снизилось на 42%.

В вермикомпостах калифорнийских червей (E.f. аndrei) содержание общего калия, по отношению к исходному субстрату, возрастало в три раза. В вермикомпостах L. terrestris содержание калия возрастало в 2,6 раза, а в вермикомпостах E. fetida - в 2,4 раза. Различия по содержанию калия в вермикомпостах люмбрицид были не достоверны. Наши результаты по приросту общего калия согласуются с результатами ряда исследователей: Мельник, (1990); Покровская, (1991); Попов, (2004); Черников, (2004); Pussard, (1983). Наши результаты не согласуются с данными Михеева В.А. (2005): в его исследованиях содержание калия в вермикомпостах снижалось на 44%.

При исследовании вермикомпостов на содержание кальция было установлено, что в вермикомпостах компостных червей (E. fetida) этот показатель возрастал в 3,5 раза по отношению к исходному субстрату. В вермикомпостах природных видов (E.f. аndrei,L. terrestris) содержание кальция возрастало в три раза. Различия между вермикомпостами по содержанию кальция были не достоверны. Наши результаты согласуются с данными Мельника, (1990) и расходятся с результатами Михеева, (2005).

При исследовании содержания магния было установлено, что в вермикомпостах природных видов (E. fetida и L. terrestris) его уровень возрастал в 3,8 раза, по отношению к исходному субстрату. В вермикомпостах калифорнийских червей (E.f .аndrei) содержание магния достоверно возрастало в 3 раза. Достоверных различий по содержанию магния в вермикомпостах, в зависимости от вида использованной вермикультуры, не было выявлено. Наши результаты согласуются с данными Мельника (1990) и отличаются от результатов Михеева (2005).

Все полученные нами вермикомпосты природных видов люмбрицид и калифорнийских червей оценивались на соответствие с действующим ТУ 9810-004-27826969-97.

Оценка вермикомпостов на содержание тяжелых металлов показала, что уровень свинца и кадмия в них, по отношению к исходному субстрату, в процессе вермикультивирования существенно снизился. В вермикомпостах
E. f. аndrei уровень свинца снижался в 3,6 раза, а в вермикомпостах E. fetida и L. terrestris - в 3 раза.

Исследование вермикомпостов на содержание кадмия показало, что при использовании вермикультуры E.f. аndrei содержание кадмия снижалось в 3,3 раза. В вермикомпостах E. fetida содержание кадмия снижалось в 2,8 раза, а в вермикомпостах L. terrestris - в 1,9 раза. Достоверных отличий по эффективности снижения содержания кадмия разными видами вермикультуры на одних и тех же субстратах не было выявлено. Большинство исследователей отмечает, что люмбрициды связывают и аккумулируют тяжелые металлы в своих тканях (Городний, 1990; Голованова, 2003; Покаржевский, 2004; Hartenstein, 1981; Loehr, 1985; Hartenstein, 1986), существенно снижая их уровень в вермикомпостах. Полученные нами результаты хорошо согласуются с данными Городнего (1990), по результатам которого вермикультура снижает содержание тяжелых металлов в 1,5-2 раза; по данным Зиминой (2005) - в среднем в 2-8 раз; по данным Колупаева (2001) - в 2 раза. По данным Бесчастновой (2007) вермикультура, в зависимости от вида субстрата и металла-загрязнителя, проявляет широкий диапазон очищающей способности от 1,3 до 22,3 раз. Ряд исследователей выражает сомнение в способности червей очищать вермикомпосты от тяжелых металлов (Решецкий, 2004; Титова, 2004; Михеев, 2005).

В подразделах 3.4. - 3.5. изложены результаты сравнительных исследований общей токсичности исходных субстратов и вермикомпостов люмбрицид. Биотест с использованием парамеций (Paramecium сaudatum) позволил установить, что наиболее токсичным из всех исследованных являлся субстрат из отходов свиноводства. Далее в порядке убывания токсического эффекта следовали субстраты из отходов овцеводства и кролиководства. Наименьший уровень токсичности был характерен для субстрата из навоза крупного рогатого скота.

У вермикомпостов порог токсичности по отношению к исходным субстратам снизился в среднем на 20-30%. При использовании компостных червей (E. fetida) наиболее токсичным был вермикомпост из навоза крупного рогатого скота и овец (ЛК50 при 20%), далее в порядке убывания вермикомпосты из кроличьего и из свиного навоза. Вермикомпосты из свиного и кроличьего субстратов проявляли эффект ЛК50 в 25% концентрации.

При тестировании вермикомпостов почвенных червей (L. terrestris) наиболее токсичными были вермикомпосты из навоза крупного рогатого скота и овец, далее, в порядке убывания, из свиного и кроличьего навоза. Вермикомпосты из навоза крупного рогатого скота и овец проявляли эффект ЛК50 в 20% концентрации. У вермикомпостов из свиного и кроличьего навозов ЛК50 проявлялась в 25% концентрации.

Среди вермикомпостов калифорнийских червей (E.f. аndrei) наибольшей токсичностью обладали вермикомпосты из навоза крупного рогатого скота. В меньшей мере это было характерно для вермикомпостов, полученных из овечьего и свиного навозов. Наименее токсичным был вермикомпост из кроличьего навоза. Вермикомпост из навоза крупного рогатого скота проявлял ЛК50 (концентрация раствора, которая вызвала гибель 50% парамеций) в 20% концентрации. У вермикомпостов из овечьего и свиного субстратов ЛК50 проявлялась в 25% концентрации. Вермикомпост из кроличьего субстрата проявлял ЛК50 в 30% концентрации.

Подводя итог данного раздела исследований, следует отметить, что все виды вермикультуры в процессе вермикомпостирования снижают общую токсичность исходных субстратов. Выявлена избирательность действия каждой из вермикультур, в плане снижения общей токсичности, на субстраты из органических отходов отраслей животноводства.

В разделе 3.6. приведены результаты оценки объемов субстратов в ходе вермикомпостирования. В ходе биотрансформации субстратов происходило снижение их объемов. У компостных червей (E. fetida) вермикомпост осел и потерял 30±1,3% от объема исходного субстрата, при использовании калифорнийских червей (E.f. аndrei) объем вермикомпоста уменьшался на 28±0,9%, что достоверно не отличалось от результата, полученного с использованием природного вида компостных червей. Полученные нами результаты согласуются с данными Стригановой (1980).

Вермикомпосты почвенных червей - L. terrestris теряли в объеме гораздо меньше. Их объем по отношению к исходному субстрату снижался на 13±1,2%.

В подразделе 3.7. исследовался структурный состав вермикомпостов люмбрицид. Результаты наших исследований свидетельствовали, что использование вермикультуры превращало неструктурированные исходные субстраты в хорошо структурированные вермикомпосты.

Самые высокие показатели структурированности были свойственны вермикомпостам L. terrestris из отходов скотоводства. Содержание наиболее ценной для растений фракции (2,0/2,5-1 мм) составляло в них 62,15±1,2%. В вермикомпостах E. fetida из кроличьего навоза доля наиболее ценной фракции составляла 59,25±1,5%.

В вермикомпостах L. terrestris из овечьего субстрата содержание ценной для растений фракции было ниже и составляло 52,19±1,5%. Вермикультура L. terrestris плохо структурировала субстраты из кроличьего и свиного навоза.

Во всех вермикомпостах E. fetida, за исключением вермикомпоста из кроличьего навоза, содержание наиболее ценной для растений фракции в среднем составляло 40-43%.

В вермикомпостах E.f. andrei содержание наиболее ценной для растений фракции было стабильно высоким и не опускалось ниже 51-54%. Полученные результаты свидетельствует об успешной селекции вермикультуры по этому признаку. Однако, таких высоких показателей, как природные виды люмбрицид - L. terrestris на субстрате из навоза крупного рогатого скота и E. fetida на субстрате из кроличьего навоза, калифорнийские черви не проявляли.

В итоге следует отметить, что природные виды люмбрицид проявляют избирательности по отношению к субстратам. Вермикультура L. terrestris обладала наилучшими структурирующими качествами по отношению к овечьему субстрату и субстрату из навоза крупного рогатого скота, вермикультура E. fetida - по отношению к кроличьему субстрату.

В подразделе 3.8. изложены результаты исследований микробиоценозов кишечника люмбрицид. Количественная оценка микрофлоры кишечного микробиоценоза люмбрицид свидетельствует, что у природных видов люмбрицид E. fetida и L. terrestris общее количество микрофлоры в их микробиоценозах меньше, чем у калифорнийских червей. При сравнении между собой микробиоценозов кишечника природных видов микрофлора богаче у компостных червей E. fetida, чем у почвенных L. terrestris. Если провести сравнение между количественным содержанием микрофлоры в кишечнике люмбрицид и в субстратах (рис. 1.), которые они перерабатывают, то можно прийти к заключению, что кишечный микробиоценоз люмбрицид включает гораздо больше микроорганизмов, чем субстрат. В частности, в кишечном микробиоценозе E.f. andrei общая численность микрофлоры в 3 раза больше, E. fetida - в 2 раза, L. terrestris - в 1,5 раза, чем в исходном субстрате.

Рис. 1. Численность микрофлоры в содержимом кишечника люмбрицид

люмбрицид биогеоценоз вермикомпост природный

Количественные исследования целлюлозолитических бактерий показали, что в содержимом кишечника почвенных червей (L. terrestris) их численность была самой высокой, по сравнению с компостными червями (E. fetida) и калифорнийскими червями (E.f. andrei). При исследовании микрофлоры субстрата было установлено, что содержание целлюлозолитической микрофлоры в нем в 2,7 раза меньше, чем в кишечном микробиоценозе почвенных червей L. terrestris. Если сравнивать количественное содержание целлюлозолитической микрофлоры в кишечнике E.f. andrei и в кишечнике E. fetida, то существенных отличий найти не удается. Если сравнивать между собой количество целлюлозолитической микрофлоры в кишечном содержимом этих червей и в субстрате, то в кишечном содержимом E.f. andrei ее в 1,3 раза, а в кишечном содержимом E. fetida - в 1,2 раза больше (рис. 2а).

При оценке численности сапрофитных грибов было установлено, что больше всего их в кишечном содержимом почвенных люмбрицид (L. terrestris). По сравнению с субстратом, в кишечном микробиоценозе почвенных червей сапрофитных грибов в 2,7 раза больше. В кишечном микробиоценозе E.f. аndrei численность сапрофитных грибов меньше, чем у почвенных червей, но больше чем у компостных. Если сравнивать с содержанием в субстрате, то в кишечном содержимом калифорнийских червей (E.f. аndrei) сапрофитных грибов в 2,2 раза, а в содержимом кишечника компостных червей (E. fetida) - в 1,7 раза больше, чем в субстрате (рис. 2б).

При оценке численности актиномицетов было установлено, что их больше всего в кишечном микробиоценозе почвенных червей (L. terrestris). Численность актиномицетов в кишечном микробиоценозе калифорнийских червей (E.f. аndrei) достоверно ниже, чем у почвенных, но выше чем у компостных (E. fetida). Если провести сравнение с численностью актиномицетов в субстрате, то можно заключить, что в кишечном микробиоценозе почвенных червей (L. terrestris) их в 2,6 раза, калифорнийских (E.f. аndrei) в 2 раза, компостных (E. fetida) - в 1,2 раза больше, чем в исходном субстрате (рис. 2в).

При исследовании численности микрофлоры, мобилизующей органофосфаты, было установлено, что в количественном отношении ее больше всего в микробиоценозе кишечника калифорнийских червей (E.f. andrei); немного меньше - в кишечном микробиоценозе компостных (E. fetida), и еще меньше - в микробиоценозе почвенных червей (L. terrestris). При сопоставлении количества микрофлоры, мобилизующей органофосфаты, в кишечном микробиоценозе люмбрицид и в исходном субстрате, было установлено, что в содержимом кишечника калифорнийских червей (E. f. аndrei) ее в 2,5 раза больше, в кишечном микробиоценозе компостных червей (E. fetida) - в 2 раза, а почвенных (L. terrestris) - в 1,7 раза больше, чем в исходном субстрате (рис.2г).

Исследование численности аммонифицирующей микрофлоры показало, что ее больше всего в микробиоценозе калифорнийских и компостных червей (E. fetida). В кишечном микробиоценозе почвенных червей (L. terrestris) аммонифицирующей микрофлоры значительно меньше. При сравнении с исходным субстратом можно заключить, что в содержимом кишечника люмбрицид численность аммонифицирующей микрофлоры достоверно выше, чем в субстрате. В содержимом кишечника калифорнийских червей численность данной группы микроорганизмов в 2,3 раза, в содержимом кишечника E. fetida - в 2,2 раза, в содержимом кишечника L. terrestris - в 1,7 раза больше, чем в исходных субстратах (рис. 2д).

При сравнительной оценке численности нитрифицирующей микрофлоры в кишечном микробиоценозе у разных видов люмбрицид было установлено, что в содержимом кишечника калифорнийских червей (E.f. аndrei) нитрифицирующей микрофлоры немного больше, чем у компостных червей (E. fetida), и намного больше, чем у почвенных червей (L. terrestris). Если сравнивать с количественным составом микрофлоры субстрата, то можно заключить, что в кишечном микробиоценозе калифорнийских червей ее в 2,4 раза, в содержимом кишечника E. fetida - в 2,2 раза, в содержимом кишечника L. terrestris - в 1,3 раза больше, чем в субстрате (рис. 2е)

а) б)

в) г)

д) е)

Рис. 2. Численность микрофлоры разных систематических групп в содержимом кишечника люмбрицид: в) актиномицетов д) аммонифицирующей микрофлоры б) сапрофитных грибовг) микрофлоры, мобилизующей органофосфаты е) нитрифицирующей микрофлоры

В подразделе 3.9. изложены результаты сравнительных исследований микрофлоры вермикомпостов. В ходе проведенных исследований было установлено, что по количеству микрофлоры вермикомпосты многократно превосходили исходные субстраты. Это было характерно и для вермикомпостов калифорнийских червей и для природных видов люмбрицид.

Направленность количественных изменений микрофлоры в ходе биотрансформации исходного субстрата в вермикомпост у всех видов люмбрицид была тождественной. При этом общая численность микроорганизмов в копролитах E.f. аndrei по отношению к микрофлоре субстрата возрастала в 7,5 раз, в копролитах E. fetida - в 6,12 раза и в копролитах L. terrestris - в 4,6 раза. Результаты представлены на рис. 3.

В вермикомпостах всех видов люмбрицид отмечено увеличение численности целлюлозолитической микрофлоры, сапротрофных грибов, актиномицетов, микроорганизмов, участвующих в трансформации органических форм фосфора, нитрифицирующей микрофлоры и микрофлоры, осуществляющей азотфиксацию.

Для вермикомпостов почвенных люмбрицид (L. terrestris) в большей мере было характерно увеличение микрофлоры, осуществляющей трансформацию лигнино-целлюлозного комплекса и целлюлозолитической микрофлоры, которая возрастала, по сравнению с субстратом, в 3,3 раза. В вермикомпостах E.f. аndrei и E. fetida этот прирост был менее выражен - в 1,7 и 1,5 раза, соответственно (рис. 4а).

Наибольший прирост численности сапрофитных грибов (в 3,1 раза) был характерен для вермикомпостов L. terrestris. В вермикомпостах E.f. аndrei и E. fetida численность сапрофитных грибов возрастала в меньшей мере (в 2,6 и 1,9 раза, соответственно). Результаты исследований приведены на рис. 4б.



Рис. 3. Численность микрофлоры исходного субстрата и вермикомпостов



а) б)

в) г)

д) е)

ж)

Рис. 4. Численность микрофлоры разных систематических групп в вермикомпостах люмбрицид: а) целлюлозолитической микрофлоры б) сапрофитных грибов в) актиномицетов г) азотофиксирующей микрофлоры д) аммонифицирующей микрофлоры е) нитрифицирующей микрофлоры ж) микрофлоры, мобилизующей органофосфаты

Численность актиномицетов в вермикомпостах почвенных червей
(L. terrestris) возрастала в 2,9 раза, в копролитах E. f. аndrei и E. fetida, соответственно в 2,3 и 1,4 раза (рис. 4в). Эти характерные особенности определяются эволюционно обусловленной специализацией вида и экологической ролью почвенных червей в биогеоценозах.

При исследовании азотфиксирующей микрофлоры было установлено, что в вермикомпостах всех видов люмбрицид ее численность возрастала. В вермикомпостах почвенных люмбрицид L. terrestris это проявилось наиболее ярко. В них количество азотфиксирующей микрофлоры возрастало в 2 раза по сравнению с исходным субстратом. Численность азотофиксирующих бактерий в вермикомпостах E. f. аndrei и E. fetida возрастала в меньшей мере - в 1,6 и 1,3 раза, соответственно (рис. 4г).

Компостные черви (E.f. аndrei и E. fetida) более активно стимулировали процессы превращения органических и минеральных форм азота, трансформации органических фосфатов, чем почвенные люмбрициды. Полученные нами результаты свидетельствуют, что численность аммонифицирующей микрофлоры в вермикомпостах E.f. аndrei возрастала в 2,5 раза, в вермикомпостах E. fetida - в 2,4 раза, в вермикомпостах L. terrestris - в 2 раза (рис. 4д). Численность нитрифицирующей микрофлоры в вермикомпостах E.f. аndrei возрастала в 2,8 раза, в вермикомпостах E. fetida - в 2,5 раза, в вермикомпостах L. terrestris - в 1,5 раза (рис.4е). В вермикомпостах E.f. аndrei численность микрофлоры, участвующей в трансформации органических фосфатов, возрастала в 2,9 раза, по отношению к исходному субстрату, в вермикомпостах E. fetida - в 2,3 раза, в вермикомпостах L. terrestris - в 1,9 раза (рис. 4ж).

Результаты наших исследований свидетельствуют, что организм люмбрицид проводит своеобразный «селективный отбор» микроорганизмов-симбионтов и формирует кишечный микробиоценоз, который в дальнейшем определяет структуру микробиоценоза вермикомпостов. Вермикомпосты, по сравнению с субстратами, содержали в 5-7 раз больше ценной микрофлоры, поэтому можно заключить, что при пассаже через пищеварительный тракт люмбрицид субстрат не только заселяется кишечной микрофлорой червей, но и приобретает в ходе биотрансформации свойства, благоприятные для развития высокоэффективной микрофлоры вермикомпоста.

Результаты сравнительных исследований вермикомпостов люмбрицид разных морфо-экологических групп позволили нам сделать обобщающее заключение об однонаправленности у них механизмов биотрансформации при наличии экологической специализации у природных видов. Разделение люмбрицид на почвенные и компостные, реализуется через специализацию их кишечных микробиоценозов, что объясняет их селективную избирательность по отношению к разным органическим субстратам.

Выводы

1. Репродуктивный потенциал природных видов люмбрицид (E. fetida, L. terrestris) ниже, чем у калифорнийских червей (E f. andrei). У компостных червей (E. fetida) он составляет - 8,3±0,2 личинок, а у почвенных
(L. terrestris) - 4,2±0,2 личинок, у калифорнийских червей (E f. andrei) - 15,7±0,3 личинок за репродуктивный цикл. Продолжительность инкубационного периода личинок у калифорнийских червей меньше (9,5±0,1 сут.), чем у природных видов E. fetida (11,3±0,1 сут.) и L. terrestris (15±0,1 сут.)

2. Вермикомпосты природных видов люмбрицид (E. fetida и
L. terrestris), полученные из отходов животноводства, незначительно уступающие вермикомпостам калифорнийских червей (E f. andrei) по содержанию гумуса.

3. Люмбрициды в одинаковой мере снижали содержание свинца и кадмия в вермикомпостах, полученных из отходов скотоводства и кролиководства. При переработке органических отходов свиноводства и овцеводства красные калифорнийские черви более эффективно снижали содержание свинца и кадмия, чем природные виды.

4. При биотрансформации исходных субстратов в вермикомпосты природные виды люмбрицид E. fetida и L. terrestris снижали общую токсичность в той же мере, что и калифорнийские черви (E f. andrei).

5. Оценка структурирующей способности природных видов люмбрицид (L. terrestris и E. fetida) выявила их избирательность по отношению к субстратам. Почвенные черви (L. terrestris) хорошо структурировали субстраты из органических отходов скотоводства, доводя в них содержание наиболее ценной для растений фракции до 62,15±1,2%. Компостные черви (E. fetida) лучше других структурировали субстраты из органических отходов кролиководства, доводя содержание наиболее ценной для растений фракции в них до 59,25±1,5%. Для почвенных червей (L. terrestris) трудно структурируемыми субстратами являлись отходы кролиководства и свиноводства. Калифорнийские черви (E f. andrei) одинаково хорошо структурировали все субстраты, в их вермикомпостах доля наиболее ценной для растений фракции составляла 51-54%, но они не проявляли такой высокой структурирующей способности, как природные виды (L. terrestris, E. fetida).

6. При пассаже субстратов через кишечник люмбрицид численность микрофлоры в вермикомпостах многократно возрастала. Вермикомпосты калифорнийских червей (E.f. andrei) содержали в 7,5 раз больше полезной микрофлоры, чем исходные субстраты. Вермикомпосты компостных червей
(E. fetida) - в 6,12 раза содержали больше микроорганизмов, чем исходные субстраты, вермикомпосты почвенных червей (L. terrestris) - в 4,6 раза.

7. Почвенные люмбрициды (L. terrestris) в биогеоценозах усиливают трансформацию лигнино-целлюлозного комплекса и азотфиксацию. В вермикомпостах этого вида люмбрицид отмечен наибольший прирост численности целлюлозолитической микрофлоры (в 3,3 раза), сапрофитных грибов (в 3,1 раза) и актиномицетов (в 2,9 раза).

8. Компостные черви (E. fetida) и калифорнийские черви (E.f. andrei) активнее почвенных (L. terrestris) стимулируют процессы превращения органических и минеральных форм азота и трансформации органических фосфатов. Их вермикомпосты содержат в 2,5 раза больше аммонифицирующей, в 2,8 раза нитрифицирующей микрофлоры, в 2,9 раз больше микрофлоры, участвующей в трансформации органических фосфатов, чем вермикомпосты почвенных червей (L. terrestris).

Список публикаций по теме диссертации

1. Мухитова М.Э. Сравнительный анализ эффективности утилизации отходов животноводства с использованием красного калифорнийского гибрида E.f. andrei/ Е.М. Романова, М.Э. Мухитова, Е.В. Титова// Известия ОГАУ - №1(17). - Оренбург, 2008. - С. 159 -162.

2. Мухитова М.Э. Представители семейства Lumbricidae как биологический фактор структурообразования/ Е.М. Романова, Е.В. Титова,
М.Э. Мухитова, А.В. Станкевич // Региональные проблемы народного хозяйства: Мат-лы Всеросс. научн.-практ. конф. молодых ученых. - Ч. 1. - Ульяновск, 2004. - С. 300-305.

3. Мухитова М.Э. Особенности химического состава биогумуса, продуцированного представителями семейства Lumbricidae/ Е.М. Романова,
Е.В. Титова, М.Э. Мухитова, Д.С. Игнаткин, А.В. Станкевич// Современное развитие АПК: Региональный опыт, проблемы, перспективы: Мат-лы Всеросс. научн.-практ. конф. - Ч. V. Актуальные вопросы ветеринарной медицины, биологии и экологии. - Ульяновск, 2005. - С. 266-270.

4. Мухитова М.Э. Особенности химического состава биогумуса как отражение видовой принадлежности вермикультуры/ Е.М. Романова,
Е.В. Титова, М.Э. Мухитова// Актуальные вопросы здоровья и среды обитания современного человека: Мат-лы 2-й Всеросс. научн. конф., посв. 15-летию образования мед. фак-та, 10-летию эколог. фак-та, 5-летию инст-та мед., эколог. и фак-та физ. культуры и реабилитации - Ульяновск, 2005. - С. 98-99.

5. Мухитова М.Э. Изменение химического состава природных субстратов в процессе биоконверсии вермикультивированием/ Е.В. Титова,
М.Э. Мухитова // Проблемы экологии и охраны природы. Пути их решения: Мат-лы III Всеросс. научн.-практ. конф. - Ульяновск: УлГУ, 2006. - С. 155-158.

6. Мухитова М.Э. Вермикомпостирование как метод переработки отходов/ Е.В. Титова, М.Э. Мухитова // Наука в современных условиях: от идеи до внедрения: Мат-лы Всеросс. научн.-практ. конф. - Димитровград, 2007. - С. 150-157.

7. Мухитова М.Э. Структурообразующая роль червей семейства Lumbricidae в биогеоценозах/ Е.В. Титова, М.Э. Мухитова, // Вестник «УГСХА» IV. Актуальные вопросы ветеринарной медицины, биологии и экологии - Ульяновск, 2007. - С. 74-77.

8. Мухитова М.Э. О возможности использования представителей семейства Lumbricidae в биотестировании лесных почв, подверженных антропогенной нагрузке/ Е.В. Титова, М.Э. Мухитова, // Актуальные проблемы рекреационного лесопользования: Международная научн. конф. тезисы докладов - Москва: т-во науч. Изданий КМК, 2007. - С. 139-141.

9. Мухитова М.Э. Применение биотеста Paramecium caudatum для определения токсичности природных субстратов/ Е.В. Титова, М.Э. Мухитова // Проблемы экологии и охраны природы. Пути их решения: Мат-лы IV Всеросс. научн.-практ. конф. - Ульяновск: УлГУ, 2007. - С. 100-102.

10. Мухитова М.Э. Изучение репродуктивного потенциала видов семейства Lumbricidae/ Е.В. Титова, Мухитова М.Э.// Татищевские чтения: актуальные проблемы науки и практики: мат-лы междунар. научн.-практ. конф. - Тольятти, 2008. - С. 107-113.

11. Мухитова М.Э. Роль тяжелых металлов Pb и Cd в формировании токсичности вермикомпоста/ Е.В. Титова, М.Э. Мухитова, О.А. Тощева// Актуальные вопросы аграрной науки и образования: мат-лы междунар.
научн.-практ. конф. - Ульяновск, 2008. - С. 186- 190.

...