Влияние метил-1-н-1,2,4-триазола на пол и активность каталазы тканей крыс

Размещено на http://www.allbest.ru/

ВЛИЯНИЕ МЕТИЛ -1-Н-1,2,4-ТРИАЗОЛА НА ПОЛ И АКТИВНОСТЬ КАТАЛАЗЫ ТКАНЕЙ КРЫС

Жумаш Н.М. - студент гр.ЭГ-214 Байжаханова А.Ш. - преп.

Международный гуманитарно-технический университет

В экспериментах, проведенных на крысах показано, что длительная интоксикация организма производным 1,1-диметилгидразина -метил-1-Н-1,2,4-триазолом приводит к повышению уровня липопероксидации в тканях на фоне снижения антиоксидантных возможностей клеток. Это позволет предположить, что повреждающее действие этого вещества на клеточные мембраны обусловлено, главным образом, его прооксидантными свойствами. В Республике Казахстан сложилась неблагоприятная экологическая обстановка по некоторым химическим веществам, в частности по 1,1-несимметричному диметилгидразину (НДМГ), в связи с широким, многолетним, бесконтрольным и экологическим безграмотным применением. Воздействие ракетно-космической отрасли на окружающую среду проявляется ее загрязнением компонентами ракетного топлива и продуктами его превращений. В настоящее время, среди пятнадцати активно используемых космодромов мира, «Байконур» по-прежнему занимает первое место по количеству осуществляемых пилотируемых запусков (1). Несимметричный диметилгидразин (1,1- диметилгидразин) и его производные -нитрозодиметиламин и др., чрезвычайно токсичные соединения по отношению к различным видам животных и растительных организмов. В животный организм 1,1-ДМГ и его производные могут проникать любыми путями: при вдыхании паров продукта, через кожу, через пищеварительный тракт. Химический анализ образцов почвы, взятой в местах падения отработанных ступеней или при авариях ракет - носителей, показал, что наряду с 1,1ДМГ и нитрозодиметиламином могут атмечатся повышенные концентрации и других производных 1,1-ДМГ, таких как гуанидин, метил-1-Н-1,2,4-триазол (триазол) (2).

Проведенный анализ литературы показал, что производные триазола могут использоваться в качестве пестицидов. При этом пирродиазол, или 1Н-1,2,4триазол(С2Н3N3) имеет молекулярную массу 69,1, а применяемый в США 3-амино 1Н1,2,4-триазол, имеет молекулярную массу 84,1. Для последнего была определена токсичность на крысах: при однократном поступлении через пищеварительный тракт LD50-5г/кг, а при чрезкожном действии -4 г/кг (3,4). Среди параметров, характеризующих состояние биологических мембран, одним из основных является перекисное окисленное липидов (ПОЛ) , которое, являясь нормальным метаболическим процессом, широко представленным во всех органах и тканях, участвует в регуляторных функциях клетки [5] и контролируется высокоэффективной антиоксидантной системой (АОС), способствующей поддержанию реакций окисления на минимальном стационарном уровне уровне [6]. Установлено, что процессы ПОЛ активируются при многих патологических состояниях, а липидные перекисные соединения оказывают дестабилизирующее влияние на обменные процессы в клетке, изменяя проницаемость мембран. При этом сущестенное изменение уровня ПОЛ в различных указывает на повреждение АОС клеток. Анализ полученных данных показал что состояние окислительного метоболизма при действии гидразина и его производных изучено недостаточно . Малоизучено состояние окилительной модификации белков,отсутствуют данные о состоянии ПОЛ и АОС при этом Учитывая это, было проведено изучение интенсивности процессов ПОЛ и активности каталазы в эритроцитах и микросомах гомогенатов печени у крыс, получавших в течение 2-х недель per os метил -1,2,4-триазол.

Материалы и методы исследования. Эксперименты проведены на 28 взрослых лабораторных белых крысах обоего пола массой 190-280г, разделенных на 2 группы. Животные первой группы (n=13) служили крнтролем, а крыс второйгруппы (n=15) получали перорально в течение 2-х недель метил-1-Н-1,2,4-триазол из расчета 1/10 LD50, что составляло в среднем 10 мг/100г массы тела животного.

В острых опытах под нембуталовым наркозом (4мг/100г массы тела, внутримышечно) у крыс обеих групп после внутриенного введения гепарина (500 МЕ/кг) канюлировали наружную сонную артерию для взятия проб крови. После центрифугирования крови в течение 10 мин при 1000g эритроциты дважды промывали средой инкубации, содержащей 15 мМ NaCl, 5 мМ Na2HP04(рН-7.4). После взиятие После взятия проб крови сосудистую систему животных промывали охлажденным до 6 0 С физиологическим раствором и брали кусочки печени, которые гомогенизатора типа «Ultra TurraxN8» и получали постмитохондриальную фракцию микросом, центрифугируя пробирки при 40 С в течение 1 часа при 10000g. В полученных супернатантах с помощью биуретовой методики определяли концентрацию общего белка.Об уровне перекисного окисления липидов (ПОЛ) судили по содержанию промежуточных (диеновые коньюгаты,

ДК) и конечных (малоновый диальдегид, МДА) продуктов пероксидации [9] . Концентрацию МДА определяли в супернатантах гомогенатов печени, а ДК-в супернатантах гомогенатовпечени и в гемолизате эритроцитов. В качестве показателя антиоксидантной защиты определяли каталазную активность в гемолизате эритроцитов и супернатантах гомогенатов печени [10]. Полученные результаты статически обрабатывали с использованием программы Microsoft Excel и изменения параметров с учетом непарного критерия Фишера- Стьюдента считали достоверными при р?0.05.

Результаты исследований и их обсуждение. В проведенных экспериментах контрольные величины содержания диеновых коньюгатов( промежуточный продукт пероксидации) в гемолизатах эритроцитов и микросомахпечени составляло, соответственно 15,44±7,63 нмоль/мл эритроцитов и 0,23±0,01 нмоль/мг белка, а количество малонового диальдегида (конечный продукт пероксидации)в супернатанте гомогенатов печени составляло 0,47±0,02 нмоль/мг белка. При 2-х недельной завтраке крыс триазолом у них отмечалось выраженное увеличение интенсивности липопероксидации в тканях. Так, содержание диеновых коньюгатов в гемолизате эритроцитов повышалось по сравнению с контролемна 14,9%(р<0,01), а в микросомах печени -на 34,8%( р<0,001), что отражено на рисунке 1.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Рисунок 1-уровень диеновых коньюгатов (ДК) в эритроцитах (Эр,нмоль/мл эритроцитов) и микросомах печени (Пеь,нмоль/мг белка), а также малонового диальдегида в микросомахпечени (МДА, нмоль/мг белка) у крыс при -хнедельном поступлении per os триазола.

Концентрация малонового диальдегида в микросомальной фракции гомогенатов печени под влиянием длительного поступления в организм крыс триазола повышалась на 21,3%(р<0,01),что показано на рисунке 1. В контрольных условиях активность каталазы в клетках красной крови была равна 54,95±2,87г Н202/мл эритроцитов, а в микросомной фракции печени -0,43±0,02г Н202/мг белка.

На фоне развития оксидативного стресса, вызванного длительным поступлением в организм крыс триазола, отмечалось истощение собственных защитных антиоксидантных ферментов. При этом активность каталазы эритроцитов понижалась на 1,8%, а микросом печени - более значительно -на 25,6% (р<0,001), что показано на рисунке 2.

Переходя к обсуждению полученных результатов, следует отметить, что длительное, в течение 2-х недель введение через желудочно-кишечный тракт крысам триазола приводило к нарушению баланса про-и антиоксидантной систем.

Литература

триазол животное предприятие ракетный

1 . Георгиевский В.И. Физиолгия сельскохозяйственных животных.- М.: Агропромиздат, 1990. - 512 с.

2 .Жеребцов П.И., Солнцев А И., Вракин В.Ф. Обмен и биосинтез белка.- М.: Колос, 1968. - 160 с.

3 .Джусипбекова Б.А., Колбай И.С., Алипбаева Ж.М. и др. Уровень общей протеолитической активности различных тканей крыс при действии гептила, ионов кадмия и биосластилина in vitro // Известия МОН РК, НАН РК. Сер.биол. и мед. - 2003. - № 3. - С.68-73.

4 .Giulivi C., Davies K.J. Dityrosine and tyrosine oxidation products are endogenous markers for the selective proteolysis of oxidatively modified red blood cell hemoglogin by (the 19 S) proteasome // J.Biol. Chem. - 1993. - V.268, № 12. -Р.8752-8759.

5 .Адаптация человека и животных к экстремальным условиям внешней среды: Сб. научных трудов / Под ред. Н.А. Агаджаняна - М.: Изд-во УДН, 1985. - 184 с.

6 .Локшина Л.А. Протеиназы плазматической мембраны лимфоидных клеток и их биологические функции // Биоорг. химия - 1998. - Т.24, № 5. - С.323-331.

Размещено на Allbest.ru