Контроль в молочной отрасли

А = X ± 0,3,

где X-- среднеарифметическое двух параллельных определений, %.

Методика определения массовой доли сухих веществ с использованием марли в качестве инертного наполнителя

Средства измерения, аппаратура, материалы и реактивы:

- весы лабораторные 2-го класса точности, наибольшим пределом взвешивания 200 г и пределом допускаемой погрешности ±0.15 мг по ГОСТ 24104:

- шкаф сушильный электрический, обеспечивающий поддержание температуры (105±2) "С;

- эксикатор по ГОСТ 23932 и ГОСТ 25336;

- бкжса металлическая;

- марля по ГОСТ 9412;

- кальций хлористый безводный по ГОСТ 450.

Допускается применение других средств измерения по технической документации типов, утвержденных в установленном порядке и внесенных в Государственный реестр средств измерений с метрологическими характеристиками и оборудования с техническими характеристиками не ниже, а также реактивов, по качеству не ниже указанных.

Подготовка к анализу

Подготовку пробы к анализу проводят в соответствии с 7.4 настоящего стандарта.

В металлическую бюксу на дно укладывают два кружка марли, высушивают их с открытой крышкой при (105±2) "С 20--30 мин и, закрыв крышкой, охлаждают в эксикаторе в течение 20--30 мин. после чего взвешивают.

Проведение анализа

Дтя получения результата измерения проводят два параллельных определения.

В подготовленную бюксу взвешивают от 2.000 до 3.000 г йогурта с отсчетом до третьего знака после запятой, равномерно распределяя его по всей поверхности марли, и, закрыв крышкой, взвешивают. Затем открытую бюксу и крышку помешают в сушильный шкаф при (Ю5±2) "С на 60 мин. после чего бюксу закрывают, охлаждают в эксикаторе и взвешивают снова с отсчетом до третьего знака после за пятой.

Высушивание и взвешивание продолжают через 20--30 мин до получения разницы в массе между двумя последовательными взвешиваниями не более 0,001 г.

Обработка результатов

Массовую долю сухого вещества вычисляют по ГОСТ 3626 (2.4.1).

Вычисление проводят до второго знака после запятой. Результат округляют до первого знака после запятой.

За окончательный результат принимают среднеарифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает сходимости

Вычисление проводят до второго знака после запятой. Результат округляют до первого знака после запятой.

Окончательный результат измерения Л, выражают в виде:

Л = X ± 0.4.

где X среднеарифметическое результатов двух параллельных определений, %.

Определение бактерий группы кишечных палочек -- по ГОСТ 9225.

Определение дрожжей и плесневых грибов по ГОСТ 10444.12.

Staphylococcus aureus -- по ГОСТ 30347; сальмонеллы-- по ГОСТ Р 52814

Молочнокислые микроорганизмы в йогурте определяют следующим образом:

Метод определения молочнокислых микроорганизмов в йогурте

Метод основан на высеве определенного количества продукта и (или) его разведений в жидкие или агаризованные селективные питательные среды, культивировании посевов при оптимальных условиях. учете полученных результатов и. при необходимости, определении морфологических и биохимических свойств обнаруженных микроорганизмов и их подсчете. Метод используют при текущем производственном контроле.

Отбор и подготовка проб

Отбор проб йогурта и подготовка его к анализу по ГОСТ 9225.

Средства измерения, аппаратура, материалы и реактивы.

Я™ проведения испытания принимают аппаратуру, материалы, реактивы по ГОСТ 9225.

Подготовка к испытанию

Растворы для приготовления десятикратных разведений готовят в соответствии с ГОСТ 9225.

Питательные среды готовят в соответствии с ГОСТ 10444.11.

Проведение испытания

Приготовление разведений продукта проводят в соответствии с ГОСТ 9225 и ГОСТ 10444.11.

Посев для подсчета молочнокислых бактерий (термофильный молочнокислый стрептококк. болгарская и ацидофильная молочнокислые палочки, в случае использования) проводят в стерильное обезжиренное молоко. Для этого по 1 см3 из шестого, седьмого, восьмого и девятого десятикратных разведений йогурта вносят в две пробирки со стерильным обезжиренным молоком.

Пробирки с посевами помешают в термостат и инкубируют при (37±1) "С в течение 72 ч.

Обработка результатов

Обработку результатов испытаний йогурта по определению количества молочнокислых бактерий, а также при необходимости дифференцированного учета -- количества термофильного молочнокислого стрептококка и болгарской палочки проводят по ГОСТ 10444.11.

Метод определения молочнокислых микроорганизмов (Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus и Streptococcus thcrmophilus) в йогурте (посев на твердые среды)

Настоящий метод предназначен для подсчета специфических микроорганизмов йогурта и основан на высеве определенного количества продукта и (или) его разведений на агаризованные селективные питательные среды, культивировании посевов при оптимальных условиях, учете полученных результатов и, при необходимости, определении морфологических и биохимических свойств обнаруженных микроорганизмов и их подсчете.

Lactobacillus delbaiecki subsp. bulgaricus: термофильный микроорганизм, который образует чечевицеобразные с четко очерченными краями колонии диаметром 1--3 мм на подкисленной среде MRS при условиях, описанных и настоящей методике.

Микроскопический препарат: палочки, обычно короткие, но иногда образуются и более длинные, неспорообразуюшис, грамположительные, неподвижные и каталазоотрицателыше.

Streptococcus thermophilus: термофильный микроорганизм, который образует чечевицеобразные колонии диаметром 1--2 мм на питательной среде М17 при условиях, описанных настоящим методом.

Микроскопический препарат: клетки шарообразной формы (0.7--0.9 мкм в диаметре) в парах или длинных цепочках, грамположительные и каталазоотрицательные.

Средства измерения, аппаратура, материалы и реактивы.

Для проведения испытания применяют аппаратуру, материалы и реактивы по 3ОСТ 9225, а также дополнительно:

- микроапаэростат или эксикатор, или емкость с герметично закрывающейся крышкой:

- анаэробный агент: анаэробная система: FN 25 -- supplier-OXOID:

- пептон I (триптический перевар казеина), закупаемый по импорту;

- пептон 2 (триптический перевар мяса), закупаемый по импорту;

- питательные среды MRS. М17, закупаемые по импорту.

Растворы, питательные среды и реактивы

Раствор для приготовления разведений Состав:

- пептон I (триптический перевар казеина) -- 0.5 г;

- пептон 2 (триптический перевар мяса) -- 0.5 г;

- дистиллированная вола -- 1000 см'. Приготовление:

пептоны растворяют в воде. Разливают по 100 см' в бутылочки или колбочки. Стерилизуют при (121±1) "С в течение (15±1) мин.

Питательные среды 7.18.3.2.1 11одкисленная среда М RS Состав:

- пептон I

- мясной эксгракг

- дрожжевой экстракт

- глюкоза

- твин80

- фосС в течение (15± I) мин.

Состав:

- пептон 1 - 2,5 г;

- пептон 2 -2,5 г:

- пегп о! 1 3 (перевар сои) -5,0 г:

- дрожжевой экстракт - 2,5 г;

- мясной экстракт - 5,0 г;

- глицерофосфат (С,Н Д Р№,) - 19.0 г;

-10 г;

- 10 г: -5 г,

- 20 г; -1 см5; -2 г. -5 г; -2 г, -0,2 г: -0,05 г,

- 9-18 г;

- 1000 см».

- сернокислый магний (MgSO/ 7Н.О)

- аскорбиновая кислота

- агар

- дистиллированная вода

-0,25 г; -0,5 г; -9-18 г; -950 см'.

Приготовление:

все компоненты растворяют в кипящей воде. Охлаждают до 50 "С. Устанавливают рН таким образом, чтобы после стерилизации рН был в пределах 7.1--7.2. Готовую среду разливают в бутылочки по95 см3. Стерилизуют при (121±1) 'С в течение (15±1) мин.

Раствор лактозы

Состав:

- лактоза -- 10 г;

- дистиллированная вода ПК) см5.

Приготовление:

лактозу растворяют в воде, стерилизуют при (121±1) *С в течение (15±1) мин.

Полная среда

Состав:

- основная среда (7.18.3.2.2.1) -95 см3;

- раствор лактозы (7.18.3.2.2.2) -- 5 см3.

Приготовление:

Непосредственно перед использованием расплавляют основную среду в водяной бане и охлаждают до 48 "С--50 "С. Подогревают раствор лактозы до 48 "С--50 "С. Добавляют раствор лактозы к основной среде и перемешивают.

Подготовка образцов и проб

Перед вскрытием поверхность упаковки йогурта обмывают, протирают, удаляя грязь, которая может загрязнить йогурт. Затем поверхность протирают 70 %-ным этиловым спиртом. Упаковки с Йогуртом вскрывают в условиях, приближенных к асептике.

Йогурт

Навеску йогурта массой (10+1) г помещают в стерильную посуду и тщательно перемешивают с использованием стерильных приспособлений или блецдера.

Йогурт фруктовый (овощной)

Тщательно перемешивают все содержимое упаковки с йогуртом с использованием блендера (измельчителя). Затем отбирают (10± 1) г образца для исследования.

Микроскопические исследования

Готовят микроскопический препарат йогурта, окрашивают метиленовым голубым (например, спиртовым раствором метиленового голубого 6 г/дм3), затем просматривают несколько полей зрения под микроскопом, чтобы определить соотношение двух бактериальных видов (кокки и палочки) и выбрать разведения для их количественного учета. Как правило, для подсчета палочек используют пятое или шестое разведение, для подсчета стрептококков -- седьмое или восьмое разведение.

Приготовление первого разведения

К пробе йогурта, приготовленной в соответствии с 4.18.4.1.1 или 4.18.4.1.2. добавляют раствор (4.18.3.1). пока общий объем не достигнет 50 см '. Перемешивают на блендере в течение I мин. Затем добавляют раствор (4.18.3.1), пока общий объем не достигнет 100 см1. Таким образом получают первое разведение.

Приготовление десятикратных разведений

В пробирку с 9 см3 раствора пептонов (4.18.3.1) вносят I см ' первого разведения йогурта. Смесь тщательно перемешивают в течение 10 с. Таким образом получают второе разведение. Повторяют эту операцию до получения серии требуемых разведений.

Посев и инкубация

Для определения количества L. bulgaricus и S. thermophilus засевают по 1 см' каждого разведения в две чашки Петри для определения каждого вида микроорганизмов.

При определении L. bulgaricus в каждую чашку Петри нативают по 12--15 см1 расплавленной подкисленной среды М RS (4.18.3.2.1) температурой (45± I) 'С.

При определении S. thermophilics в каждую чашку Петри наливают по 12--15 см' расплавленной среды М17 (4.18.3.2.2) температурой (45±1) "С.

Метод определения бифидобактерий (Bifidobacterium) в биойогурте (посев на твердые среды)

Метод основан на высеве определенного количества продукта и (или) его разведений в агаризо-ванные селективные питательные среды, культивировании посевов при оптимальных условиях, учете результатов по характерным признакам и, при необходимости, определении морфологических свойств обнаруженных микроорганизмов и их подсчете.

Отбор и подготовка проб

Отбор проб биойогурта и подготовка его к анализу - по ГОСТ 9225 .

Средства измерения, аппаратура, материалы и реактивы

Для проведения испытания применяют аппаратуру, материалы и реактивы по ГОСТ 9225, а также дополнительно:

- микроанаэростат или эксикатор, или емкость с герметично закрывающейся крышкой;

- анаэробный агент: анаэробная система: AN 25 -- supplier-OXOID;

- система для стерилизации фильтрацией фирмы Sartorius или аналогичные системы других фирм (0,45 мкм);

- диклоксациллин Sigma D9016;

- питательная среда MRS, закупаемая по импорту;

- кукурузно-лактозная среда (ГМ К-1) для количественного учета микроорганизмов по |8|.

Подготовка к испытанию

Растворы для приготовления разведений готовят в соответствии с ГОСТ 9225

Питательные среды

Питательная среда М RS с диклоксацнллнном

Состав питательной среды MRS:

пептон - 10 г;

мясной экстракт - 10 г;

дрожжевой экстракт -5 г;

глюкоза - 20 г;

твин 80 -1 см»;

фосфат калия однозамещенный -2 г,

ацетат натрия тригидрат -5 г.

диаммоний цитрат -2 г,

сернокислый магний (MgS04 * 7Н О) 0.2 Г,

сернокислый марганец (MnSO, * 4Н О) -0.5 г.

агар - 15 г;

- дистиллированная вода -- 1000 см *.

Приготовление раствора селективного агента

Состав:

- диклоксациллин --25 мг Sigma D 9016;

- дистиллированная «юда -- 50 см1.

Диклоксациллин растворяют в дистиллированной воде, затем полученный раствор стерилизуют фильтрацией, срок хранения раствора -- 15 сутпри4 "С.

В момент использования готовят разведение этого раствора 1:10.

Приготовление антиоксидантного раствора

Состав:

L-цистеин гид ро хлор ид -- 3 г Sigma С 7880;

дистиллированная вода -- ИХ) см*.

Растворяют хлористый цистеин в дистиллированной воде, затем полученный раствор стерилизуют фильтрацией. Раствор разливают по 10 см" в стерильные пробирки. Хранят 15 сут при 4 'С.

Приготовление питательной среды:

вносят 15 г агара в колбу с 500 см' дистиллированной воды, которую помешают в кипящую водяную баню до полного растворения агара. Вносят 55 г сухой среды М RS в другую колбу с 500 см1 дистиллированной воды температурой 50 С. Смешивают оба раствора и хорошо перемешивают. Если необходимо, то устанавливают рН перед стерилизацией так. чтобы после автоклавирования рН составил (6.5+0,2) при 25 "С.

Полученную среду разливают по 100 см5 в бутылочки. Стерилизуют при (12Ш) "С в течение 15 мин. Питательную среду хранят в темном месте в течение одного месяца при 0 С--5 'С.

Перед использованием среду расплавляют и выдерживают в кипящей водяной бане в течение 20 мин для регенерации среды. Затем среду охлаждают до (48+1) "Си вносят в каждую бутылочку 1 см5 раствора селективного агента (4.19.3.2.1.2) и 1 см1 раствора антиоксиданта (4.19.3.2.1.3). Смесь аккуратно перемешивают, чтобы не было насыщения среды кислородом.

Питательная среда ГМК-1 Состав:

- кукурузно-молочная смесь -- 30 г;

- пептон -- 30 г;

- лактоза -- 18 г;

- аскорбиновая кислота -- 1 г;

- натрий лимоннокислый (трехзамешенный) --12 т:

- магний сернокислый -- 0,24 г;

- калий фосфорнокислый (однозамешенный) -- 4 г;

- натрий фосфорнокислый (двузамешеинын) -- 2 г;

- агар -- 6 г;

- дистиллированная вода -- 2000 см'.

Приготовление:

50 г сухой питательной среды вносят в 1000 см' дистиллированной воды, нагревают до полного растворения, при наличии осадка фильтруют через ватный фильтр, устанавливают рН (7.2+0.2) с помощью раствора аммиака массовой долей 25 % или раствора гидроокиси натрия массовой долей 40 %. Среду разливают в пробирки высоким столбиком по (10±0.5) или (20±0,5) см' и стерилизуют при (121 + 1) "С в течение (Ю±2) мин.

Перед использованием пробирки со средой помещают в кипящую водяную баню и выдерживают в течение 20 мин для регенерации среды. Затем охлаждают среду до (48± 1) *С и в каждую пробирку с 10 см3 среды вносят 0,1 см' селективного агента (4.19.3.2.1.2) и в пробирку с 20 см3 среды вносят 0.2 см' селективного агента (4.19.3.2.1.2). Содержимое пробирок осторожно перемешивают.

Подготовка образцов и проб

Подготовку образцов и проб проводят в соответствии с 4.18.4.1, 4.18.4.3, 4.18.4.4 настоящего стандарта. Десятикратные разведения проду кта готовят от 1-го до 8-го. При приготовлении проб все перемешивания проводят максимально осторожно, чтобы исключить насыщение кислородом.

Посев и инкубация

Для определения количества бифидобактерин засевают по I см' из четырех последних разведений в две чашки Петри".

В каждую чашку Петри заливают по 12--15 см1 регенерированной среды (3.19.3.2.1) температурой (45± 1) "С.

Содержимое чашек Петри осторожно перемешивают и остаатяют для застывания.

Посте застывания чашки Петри переторачивают донышком вверх и помешают в емкости (4.19.2.1). в которые вкладывают анаэробный агент.

Термостатированне чашек Петри осуществляют при (37±1) 'С в течение 5 сут в анаэробных условиях.

Подсчет колоний

После инкубации подсчитывают количество колоний на чашках Петри. Для подсчета используют чашки, на которых выросло от 10 до 300 колоний. Если колонии имеют гетерогенный вил. необходимо сделать микроскопические препараты нескольких колоний для подтверждения их принадлежности к БГКП

Обработка результатов.

Количество бифидобактерий в пробе .V, КОЕ/г. определяют по формуле

* Допускается проведение посева разведений продукта в пробирки с высоким столбиком сусла (4.19.3.2.2), с последующей выдержкой в термостате при (37±1) "С в течение 5 сут.



5. Транспортирование и хранение

Продукт транспортируют специализированными транспортными средствами в соответствии с требованиями СанПиН 2.3.4.13-19..

Срок годности продукта при температуре хранения от 2^оС до 6°С составляет 36 ч с даты изготовления.

Срок годности продукта может быть увеличен изготовителем в зависимости от особенностей технологического процесса изготовления, применяемых упаковочных материалов, условий хранения на основании гигиенической оценки и заключения Министерства здравоохранения Республики Беларусь и должен быть внесен в технологический документ изготовителя.



6. Гарантии изготовителя

Изготовитель гарантирует соответствие продукта требованиям настоящих технических условий при соблюдении условий транспортирования и хранения, установленных в настоящих технических условиях.

Размещено на Allbest.ru

...