Регуляторний природний пептидний комплекс нирок: отримання, фізико-хімічні властивості, зв'язок з головним комплексом гістосумісності, імунобіологічні ефекти та розробка фармакологічної речовини

Введення пептидного комплексу нирок за умов розвитку експериментальних патологій прискорювало відновлення функціональних елементів нирки. Дослідження продемонстрували, що пептидний комплекс здатен підсилювати біосинтез ДНК (включення ³Н-тімідіну) в нирках в органозалежний спосіб. За умов нефректомії контрлатеральна нирка під впливом пептидів швидше відновлювала свій функціональний стан, скоріш адаптувалась до зростання обсягів фільтрації, явища гіпертрофії були більш вираженими, ніж в контрольних тварин.

Отже, пептиди головного комплексу гістосумісності під час введення тваринам з пошкодженням ниркової тканини різної етіології прискорюють розвиток компенсаційно-пристосувальних реакцій та регенерацію ниркової паренхими.

Останнє питання, яке на наш погляд потребує обговорення, це механізм взаємодії пептидів з Т-клітинами: взаємодіють пептиди з Т-клітинами самостійно чи в комплексу з молекулами ГКГС? Якщо пептид взаємодіє з молекулою ГКГС, то як введений в середовище вільний пептид взаємодіє з молекулою ГКГС, в яку за фізіологічних умов вже вбудовано пептид?

На це питання можуть дати відповідь роботи Базельского інституту імунології, в яких показано, що на поверхні антиген-презентуючих клітин майже завжди існують (особливо в умовах, несприятливих для клітин, наприклад, низька температура) вільні від пептида молекули ГКГС, але дуже не стабільні. Стабілізація досягається після взаємодії з пептидами із зовнішнього середовища. Утворений комплекс, що дуже важливо, може взаємодіяти з великим числом рецепторів [Vallitutti S., Lanzavecchia A., 1995].

Взаємодія комплексу пептид-ГКГС з Т-клітинним рецептором може приводи до різних наслідків, від повної активації Т-клітин до нуль-реакції [Evavold B.D., Sloan-Lancaster J., Allen P.M., 1993].

Цей феномен в світовій практиці зараз набуває значної уваги, завдяки використання синтетичних пептидів як лікарських препаратів [Морозов В.Г., Чалисова Н.И., Окулов В.Б., 1998].

Наприклад, американська компанія "ImmuLogic Pharmaceutical Corporation” (Массачусет) розробляє "пептидні вакцини" для досягнення толерогенних ефектів [Norman Ph.S. et al., 1997; Nicodemus C. et al., 1997]. Тому зрозуміло, що пептидний комплекс нирок, який виявив виражену терапевтичну активність за умов нефропатології, зараз проходить доклінічні випробування як новий лікарський препарат. Однак, майбутнє без сумнівів належить його синтетичним аналогам.

ВИСНОВКИ

фармакологічний імунобіологічний пептидний нирка

1. Пептидний комплекс, який екстрагується з нирок за допомогою органічних кислот в присутності катионів двохвалентних металів, в цілому наданий пептидами головного комплексу гістосумісності.

2. Пептидний комплекс нирок здатен змінювати функціональний стан лімфоцитів періферічної крові (підвищення експресії CD3, CD4, HLA-DR з активацією у вигляді кепінгу та кластерізації, зниження - CD22 та незначно CD8) та функціональну морфологію тимуса в фізіологічних умовах та під час імунізації тимусзалежними антигенами.

3. Природний пептидний комплекс нирок володіє здатністю активувати фібріноліз та блокувати перетворення тромбіну, що відповідає функціональним особливостям органу, за фізіологічних умов та під час розвитку патології нирки.

4. Пептидний комплекс нирок запобігає розвитку антигенспецифічної відповіді на антиген ниркової тканини за умов експериментальної патології (аутоімунний нефрит, полікомпонентная імунопатологія, алотрансплантація нирки) та під час внесення у кров хворих на хронічний гломерулонефрит.

5. За умов аутоімунного нефриту змінюється спектр пептидів ниркової тканини (зникають або виникають пептидні фракції, змінюється їх співвідношення), введення екзогенного пептидного комплексу викликає відновлення спектру пептидів нирок.

6. Окремі фракції пептидного комплексу нирок здатні впливати на Кон-А індуковану проліферацію мишиних спленоцитів та ІЛ-2 індуковану - клітин лінії CTLL (СD8+). Більш гідрофобні хроматографічні фракції підсилювали проліферацію, гідрофільні - знижували у характерній дозозалежній манері ("дзвіноподібні" криві).

7. Нирки мають специфічний набір пептидних речовин, який відрізняється від такого в тканинах селезінки, тимуса, підшлункової залози, печінки, пародонту. В складі цього комплексу виявлено фрагменти іпсилон-(55-66; 56-66) та альфа-(48-61)- ланцюгів гемоглобіну, убіквітіна (1-20).

8. Пептидний комплекс нирок містить фракції, які здатні зв'язуватися з молекулярними шаперонами Hsp70, які можуть брати участь в реалізації дії таких пептидів.

9. Загальною схемою будування пептидного комплексу нирок є: в положенні 1 - пролін, в 2 - валін, аспарагінова та глутамінова кислоти, в 3 - лізін, в 4 - аспарагінова кислота, в 6 - аргінін.

10. Синтетичні пептиди - аналоги природного пептидного комплексу нирок (про-глу-ліз-асп-лей-арг-ліз, про-глу-ліз-асп-сер-арг-ліз, про-глу-ліз-асп-асп-арг-лей) під час внесення у кров донорів знижували відсоток теофілін-резистентних клітин, підвищували - теофілінчутливих, активували фагоцитарні функції ПМЯЛ, за умов аутоімунного нефриту відновлювали імунологічну толерантність, виявляли тімуспротективний ефект, прискорювали регенерацію паренхіми нирок. Найбільш активним виявився пептид про-глу-ліз-асп-сер-арг-ліз.

11. Пептиди головного комплексу гістосумісності нирок мають також власну фізіологічну активність не пов'язану з презентацією антигена та імунним розпізнанням, спрямовану на підтримку метаболічних та регенераторних процесів в нирках.

Практичні рекомендації:

1. На підставі проведених досліджень доцільно рекомендувати природний пептидний комплекс нирок для проведення клінічних іспитів, як препарата для лікування аутоімунних захворювань нирок.

2. Перспективне подальше вивчення синтетичних аналогів природного пептидного комплексу нирок як потенційних лікарських речовин.

3. Запропонований методичний підхід для спрямованого синтеза біологічно активних пептидів із заданими властивостями може бути використаний для створення нових лікарських препаратів.

СПИСОК ОПУБЛІКОВАНИХ АВТОРОМ ПРАЦЬ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

1. Відновлення пептидергічної регуляціі у нирках екзогенними поліпептидними речовинами ренального походження. Физиологический журнал.- 1992.- Т.38, N 6.-С. 106-109.

2. Влияние почечных полипептидов на активность лимфоцитов при экспериментальном нефрите. Физиологический журнал.-1993.-Т.39, N5-6.-С.52-56

3. Механізми утворення та дії поліпептидних біорегуляторів-цитомедінів. Фізіологічний журнал.- 1994.-т.40,N1.-С.51-64.

4. Влияние полипептидного комплекса тканей почек на активность лимфоцитов донорской крови. Иммунология// 1995.- N4.-С.31-33.

5. Сравнительное изучение хроматографических спектров полипептидов, экстрагированных из селезенки, печени, почек, тимуса, пародонта свиней. Укр. биохим. журн..- 1995.-т.67,N5.-С.85-89.

6. Вивчення специфічної дії пептидного комплексу нирок під час унілатеральної нефректомії з алостатичною трансплантацією нирки у щурів. ФАРМАКОМ.-1995.-N11-12.-С. 31-37.

7. Тканевая специфичность пептидных экстрактов, выделенных из различных органов, и иммунорегуляторное действие пептидного экстракта почек. Биополимеры и клетка.- 1995.-N5, т.11.-С.61-75.

8. Установление согласованной последовательности пула пептидных фракций, выделенных из коркового вещества почек. Иммунология.-1996.-N2.- С. 24-28

9. Влияние отдельных пептидных фракций, выделенных из коркового вещества почек, на пролиферативную активность лейкоцитов. Иммунология.-1996.-N3.- С.30-33

10. Вплив ниркових поліпептидів на гемокоагуляцію та перекисне окислення ліпідів при гострому емоційно-больовому стресі. Фізіологічний журнал.- 1996.-Т.42,N5-6.-С.39-43

11. Влияние почечных пептидов-цитомединов на гемокоагуляцию и перекисное окисление липидов при экспериментальном нефрите Хеймана. Патологическая физиология.- 1991.-N 5.-С. 35 - 36 (Соавторы Мищенко В.П., Силенко Ю.И., Хавинсон В.Х.).

12. Вплив регуляторних ниркових поліпептидів на гемокоагуляцію і перекисне окислення ліпідів при фтористій інтоксикаціі. Физиологический журнал.- 1993.- Т.39, N 2-3.-С.67-71. (Співавтори Катрушов А.В., Міщенко В.П.).

13. Методические подходы к проведению скрининга биологической активности пептидных веществ. Проблеми екології та медиціни. -1997.-T1,N1-2.-C.12-17. (Співавтор Катрушов А.В.).

14. Изучение терапевтической активности синтетических пептидов-аналогов естественного пептидного комплекса почек на некоторые показатели гомеостаза у хомяков при аутоимунном нефрите. Проблеми екології та медиціни.-1997.-T1,N1-2.-C.24-26. (Співавтор Гейко О.А.).

15. Специфічні зміни гемостатичної реактивності тварин в несприятливих умовах зовнішнього середовища та їх корекція за допомогою органних пептидних екстрактів. Вестник проблем биологии и медицины.-1997.-N25.-C.19-26.

16. Влияние пептидного комплекса почек на экспрессию поверхностных рецепторов лимфоцитов в условиях связывания внеклеточного кальция. Проблеми екології та медицини.-1998.-2,N1-2.-C.34-37.(Співавтори Веснина Л.Э., Соколенко В.Н.).

17. Вплив ниркових пептидів на морфофункціональний стан тімуса за фізіологічних умов та під час розвитку аутоімунного нефрита. Проблеми екології та медицини.-1998.-2,N1-2.-C.38-40.

18. Взаимодействие пептидсвязывающих белков Hsp70 с пептидным экстрактом почек. Вестник проблем биологии и медицины.-1998.-N11.-C.67-70.

19. Вплив пептидного комплексу нирок на процеси імунітету та неспецифічної резистентності за умов полікомпонентної імунопатології. Вестник проблем биологии и медицины.-1998.-N11.-C.63-67.

20. Участие пептидного комплекса почек в регуляции экспрессии некоторых рецепторов лейкоцитов. Иммунология. -1998. -N4.-C.13-16. (Співавт. Веснина Л.Є.).

21. Препарат тканинних біологічно активних речовин який має регенераторну дію та спосіб його одержання. Патент України N5743. (Спіавтори О.В.Катрушов О.І.Цебржинський, Чумаков О.В., Лисенко С.М., Закладний В.П., Сухотинський В.Л.).

22. А.с.10180А. Україна. МКІ 5 А61 К37/00. Спосіб одержання біологічно активної речовини, що має регенераторну та модулюючу дію/ Промислова власність.-1996.-N3.-C.3.1.76-3.1.77. (Співавтор О.В.Катрушов).

23. Consesnsus sequence of peptide fractions' pool obtained from kidney' cortex substances and its immunoregulative influence. European Journal of Physiology// 1995.-V.430, N4.-R48.

24. The new group of biological regulators for multicellular systems - peptides of major histocompartibility complex/Biological Chemistry.-1998.-v.379,September, Suppl..-S.82.

25. Влияние почечных пептидов-цитомединов на гемостаз, перекисное окисление липидов и некоторые показатели неспецифической рези стентности организма при экспериментальном нефрите. Тезисы докладов научнопрактической конференции "Поиск новых лекарственных средств и их использование в клинике", Чита, 1990, с. 11 (Співавтор Силенко Ю.И.).

26. Влияние почечных полипептидов-цитомединов на гемостаз, перекисное окисление липидов и некоторые показатели неспецифической резистентности организма. Сборник материалов XIII съезда Украинского физиологического общества, Харьков,1990,с. 128. (Співавтори Мищенко В.П., Ксенз И.В.).

27.Использование полипептидного препарата почек в экспериментальной терапии. "Регуляторные полипептиды в норме и патологии" Сб. научн. работ под ред. Б.И.Кузника.Чита,1991, с. 24.

28. Вплив полiпептидiв,видiлених з нирок, на процеси пероксидного окислення лiпiдiв i зсiдання кровi. Тези доповiдей VI Українського бiохiмiчного з'iзду. Киiв. 1992. Частина 1.,С.187. (Співавтои Куценко Л.О. Нарижнюк Н.Д. Боброва Н.А.).

29.Влияние биорегулятора полученного из почек, на перекисное окисление липидов, гемостаз и неспецифическую резистентность организма. Тезисы симпозиума "Пептидные биорегуляторы-цитомедины", Санкт-Петербург,1992,С.72-73.(Співавтори Катрушов А.В., Мищенко В.П.).

30. Возможность межсистемного подхода в изучении механизмов действия цитомединов. Тезисы симпозиума "Пептидные биорегуляторы-цитомедины", Санкт-Петербург,1992, С.73-74.(Співавтори Катрушов А.В., Мищенко В.П.).

31. Пептидергічна регуляція препаратами цитомедінів в організмі. Научные труды третьего международного симпозиума " Системно-антисистемная регуляция в живой и неживой природе", Киев, 10-13 ноября 1993, Киев-1993,С.91-96. (Співавтори Катрушов О.В., Цебржинський О.І., Міщенко В.П.).

32. Створення синтетичного пептидного препарату - аналогу природного пептидного комплекса нирок. Сучасні проблеми фармакології/ Тези доповідей І національного з'їзду фармакологів України. -Київ, 1995.-С.69.

33. Перспективи створення нових лікарських засобів поліпептидної природи. Сучасні проблеми фармакології/ Тези доповідей І національного з'їзду фармакологів України.-Київ, 1995.-С.70.

34. Імунобіологічна активність природного пептидного комплексу нирок та його синтетичних аналогів. Збірка тез І Національного конгресу України з імунології, алергології та імунореабілітації (Алушта, 13-15 травня 1998). - Київ, 1998.-С.88.

Размещено на Allbest.ru