Дія на віруси імунодефіциту людини і грипу нових поверхнево-активних речовин та їх імуноад’ювантні властивості

7. Криворутченко Ю.Л. Использование мурамилпептидов в вирусных вакцинах // Вопр. вирусол.-1999.-№ 1.-С. 4-8.

8. Криворутченко Ю.Л. Сурфактанты как средства индивидуальной профилактики ВИЧ/СПИДа // Міробіол. журн.-1999.-№1.-С.95-103.

9. Криворутченко Ю.Л., Андроновская И.Б., Чирва В.Я., Пертель С.С., Гришковец В.И., Земляков А.Е., Курьянов В.О., Кривошеин Ю.С. Влияние сапонинов из Hedera taurica Carr. и модифицированных мурамилпептидов на репродукцию вируса иммунодефицита человека in vitro // Вопр. вирусол.-1997.-№ 1.- С.34-36.

10. Криворутченко Ю.Л., Кривошеин Ю.С. Мирамистин-катионный детергент с выраженными анти-ВИЧ свойствами // Труды Крым. мед. инст.”Проблемы, достижения и перспективы развития медико-биологических наук и практического здравоохранения”.- Том 131.-Симферополь.-1995.-C.109-112.

11. Криворутченко Ю.Л., Кривошеин Ю.С., Андроновская И.Б., Кастрикина Л.Н., Лонская Н.И., Рудько А.П. Использование отечественных детергентов дезинтегрона-О и дезинтегрона-Б для солюбилизации гликопротеидов вируса гриппа // Микробиол.журн.-1991.-Том 53, № 3.-С.96-100.

12. Криворутченко Ю.Л., Кривошеин Ю.С., Андроновская И.Б., Носик Д.Н., Калнина Л.Б., Петрова М.С. Влияние эмбриональной сыворотки коров на анти-ВИЧ-свойства мирамистина // Вопр. вирусол.-1994.-№ 6.-C.281-283.

13. Криворутченко Ю.Л., Кривошеин Ю.С., Маренникова С.С., Степанова Л.Г., Носик Д.Н., Калнина Л.Б., Рудько А.П. Изучение анти-ВИЧ-активности мирамистина // Вопр. вирусол.-1994.-№ 6.-C.267-269.

14. Кривошеин Ю.С., Криворутченко Ю.Л. Поверхностно-активные вещества в арсенале средств борьбы со СПИДом //Мiкробiол. журн.-1997.-Т.59, № 1.-С.87-97.

15. Кривошеин Ю.С., Криворутченко Ю.Л., Крашенюк А.В., Лепский А.А., Митичкин О.В., Ажицкий Г.Ю., Троицкий Г.В., Зайцева Н.Е. Электрофоретическое разделение и очистка биологических объектов в условиях микрогравитации //Косм. наука и техника.-1989.-№ 4.-С.5-10.

16. Кривошеин Ю.С., Шатров В.А., Криворутченко Ю.Л., Андроновская И.Б. Иммунологический анализ гемагглютинина вируса гриппа A(H1N1), выделенного с помощью различных детергентов //Микробиол. журн.-1990.-Т.52, № 3.-C.51-54.

17. Пертель С.С., Кадун А.Л., Какаян Е.С., Чирва В.Я., Криворутченко Ю.Л., Кривошеин Ю.С., Бакова А.А., Андроновская И.Б. Синтез и биологическая активность аномерных бутилгликозидов мурамоилдипептида // Биоорган.химия.-1999.-Т.25,№ 9.-С.708-715.

18. Попов И.А., Кривошеин Ю.С., Криворутченко Ю.Л., Бакова А.А., Федоркина О.А. Целенаправленное получение моноклональных антител к определенным белкам вируса гриппа // Труды Крым.мед.инст. “Актуальные вопросы теоретической и практической медицины”.- Том 130.-Симферополь.-1991.-C.77-82.

19. Попов И.А., Червонский А.В., Кривошеин Ю.С., Криворутченко Ю.Л., Бакова А.А., Федоркина О.А. Моноклональные антитела к матриксному белку вируса гриппа А, реагирующие с вирусными штаммами различных подтипов//Вопр.вирусол.-1992.-№3.-С.141-144.

20. Федоркина О.А., Бакова А.А., Гордиенко А.И., Криворутченко Ю.Л., Кривошеин Ю.С. Оценка диагностической ценности иммунопероксидазной тест-системы на основе моноклональных антител при выявлении гриппа//Труды Крым.мед.инст. “Проблемы, достижения и перспективы развития медико-биол. наук и практического здравоохранения”.-Том 132, часть II.-Симферополь.-1996.-C.281-285.

21. Krivorutchenko Y.L., Andronovskaja I.B., Hinkula J., Krivoshein Y.S., Ljungdahl-Stahle E., Pertel S.S., Grishkovets V.I., Zemlyakov A.E., Wahren B. Study of the adjuvant activity of new MDP derivatives and purified saponins and their influence on HIV-1 replication in vitro // Vaccine.-1997.-Vol.15.-P.1479-1486.

22. Krivorutchenko Y.L., Krivoshein Y.S., Andronovskaja I.B., Marennikova S.S., Stepanova L.G., Nossik D.N., Kalnina L.B., Rudko A.P. Antiseptic myramistin possesses the strong anti-HIV properties // Мiкробiол. журн.-1996.-Т.58, № 5.-C.90-92.

23. Штамм гибридных культивируемых клеток животных Mus musculus -продуцент моноклональных антител к гемагглютинину вируса гриппа А(Ленинград)385/80(H3N2): А.с.1479510 СССР, МКИ С 12 № 5/00, 5/02 / И.А.Попов, А.В.Червонский, Ю.С. Кривошеин, Ю.Л. Криворутченко (СССР).-№ 4307632/30-13; Заявлено 23.07.87; Опубл. 15.05.89, Бюл.№ 18. -8 c.

24. Штамм гибридных культивируемых клеток животных Mus musculus L-продуцент моноклональных антител к М-белку вируса гриппа типа А: А.с.1652340 СССР, МКИ С 12 № 5/18, C 12 P 21/08, A 61 K39/395 / Ю.С. Кривошеин, И.А. Попов, А.В. Червонский, Ю. Л.Криворутченко (СССР).-№ 4706646/13; Заявлено 19.06.89; Опубл. 30.05.91, Бюл.№ 20.-6 с.

25. Пат.2127605 Россия, 6 А 61 К 39/39, С 07 Н 15/256. Способ стимулирования гуморального и клеточного иммунного ответа на целевой антиген / Криворутченко Ю.Л., Гришковец В.А., Андроновская И.Б., Кривошеин Ю.С. (Украина).-Заявл. 22.05.96; Опубл. 20.03.99; Бюл. №8.-14 с.

26. Андроновская И.Б., Бакова А.А., Криворутченко Ю.Л., Попов И.А., Рудько А.П., Лепихова С.В. Солюбилизация антигенов вируса гриппа с помощью различных детергентов // Тез. респ. конф. “Новые методы диагностики СПИД, других вирусных и бактериальных инфекций в практике инфекционной и противоэпидемической службы”.-Алушта.- 1990.-С.61-62.

27. Криворутченко Ю., Кривошеїн Ю., Андроновська I., Носик Д., Калніна Л., Петрова М. Анти-ВIЛ властивостi мiрамiстину у присутностi ембрiональної сироватки корiв // Збiрник тез Першої Нацiональної науково-практичної конференцiї з проблем ВIЛ/ СНIД.- Київ.- 1995.-С.111-112.

28. Криворутченко Ю., Кривошеїн Ю., Мареннiкова С., Степанова Л., Носик Д., Калніна Л., Рудько А. Антисептик мiрамiстин-анти-ВIЛ властивостi // Збiрник тез Першої Нацiональної науково-практичної конференцiї з проблем ВIЛ/СНIД. - Київ.- 1995.-С.20-21.

29. Попов И.А., Червонский А.В., Кривошеин Ю.С., Криворутченко Ю.Л. Получение моноклональных антител к матриксному белку вируса гриппа типа А //Тез. респ. Конф.“Новые методы диагностики СПИД, других вирусных и бактериальных инфекций в практике инфекционной и противоэпидемической службы”. - Алушта.- 1990.-С.97-98.

30. Krivorutchenko Y.L., Andronovskaja I.B., Krivoshein Y.S., Hinkula J., Wahren B., Pertel S.S., Chirva V.Ya., Backinowsky L.V. The configuration of the anomeric centre of MDP derivatives defines the immune response in mice to HIV-1 rgp160 //Abstr. XVIII International Carbohydrate Symposium.-Milano (Italy).-1996.-P.596-597.

31. Krivorutchenko Y.L., Marennikova S.S., Krivoshein Y.S., Stepanova L.G., Nossik M.N., Rudko A.P. A study of anti-HIV activity of the detergent myramistin //Abstr. International Conference on Medical Biotechnology, Immunization and AIDS.-Leningrad.-1991.-S1-11.

Анотація

Криворутченко Ю.Л. Дія на віруси імунодефіциту людини і грипу нових поверхнево-активних речовин та їх імуноад'ювантні властивості. - Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора медичних наук за спеціальністю 03.00.06 - вірусологія. - Національний медичний університет ім. О.О. Богомольця, Київ, 2000.

Дисертація присвячена питанням комплексної оцінки дії на віруси імунодефіциту і грипу поверхнево-активних речовин, які належать до різних класів. У роботі розвивається новий напрямок у вірусології, який ґрунтується на комплексній оцінці впливу на віруси детергентів мірамістину і дезінтегрону-О, зіставленні дії на ВІЛ-1 і ад'ювантних характеристик сапонінів (таурозидів) і гідрофобізованих аномерних похідних МДП. Встановлені: віруліцидні властивості мірамістину і дезінтегрону-О; параметри руйнування вірусів грипу дезінтегроном-О і властивості субвірусних продуктів; дія на ВІЛ-1 і ад'ювантні властивості таурозидів і аномерних мурамілпептидів. Запропоновані: спосіб індивідуальної профілактики ВІЛ-інфекції на основі застосування мірамістину; препарати для діагностики грипу; спосіб стимулювання імунної відповіді за допомогою таурозидів; новий принцип створення ад,ювантно-активних мурамілпептидів, які не активують ВІЛ-1. Основні результати роботи знайшли застосування при створенні нових безпечних ад'ювантів і у профілактиці ВІЛ- інфекції.

Ключові слова: детергенти, сапоніни, мурамілпептиди, ВІЛ-1, грип, ад,юванти, лабораторна діагностика, профілактика СНІДу.

Аннотация

Криворутченко Ю.Л. Воздействие на вирусы иммунодефицита человека и гриппа новых поверхностно-активных веществ и их иммуноадъювантные свойства. - Рукопись.

Дисертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук по специальности 03.00.06 - вирусология. - Нацыональный медицинский университет им.А.А.Богомольця, Киев2000.

Диссертация посвящена комплексной оценке действия на вирусы иммунодефицита человека 1 типа (ВИЧ-1) и гриппа новых поверхностно-активных веществ (ПАВ) трёх различных классов: детергентов мирамистина и дезинтегрона-О, гидрофобизованных аномерных мурамилпептидов (7 производных МДП) и сапонинов из крымского плюща Hedera taurica Carr.(таурозиды H2, I и St-K). Все указанные вещества были впервые получены на Украине.

Сравнительное изучение дезинтегрона-О и детергентов, обычно применяемых для разрушения вирусов, показало, что дезинтегрон-О солюбилизирует большую часть гемагглютинина и нейраминидазы различных вирусов гриппа. Он был одним из наиболее активных ПАВ и не уступал октилгликозиду и цвиттергенту 3-14. Выделенные с помощью дезинтегрона-О субвирусные продукты использовали для получения моноклональных антител (МкА) к гемагглютинину и М1-белку вируса. На основе МкА к М1-белку были разработаны иммунофлуоресцентная и иммунопероксидазная тест-системы, позволяющие выявлять вирусы гриппа различных подтипов.

В результате экспериментов на клеточных линиях MT-4, Jurkat-tat и THP-1 было установлено, что мирамистин подавляет инфекционность внутриклеточного и внеклеточного ВИЧ-1 в концентрации 0,1 мг/мл. Он относится к наиболее эффективным вирулицидным препаратам с анти-ВИЧ активностью и может быть рекомендован для индивидуальной профилактики полового заражения этим вирусом. Присутствие в вируссодержащем материале сыворотки крови и сорбция ВИЧ-1 на ткань (батист) снижают вирулицидную активность мирамистина.

Иммуномодулирующие свойства таурозидов и мурамилпептидов изучали на модели иммунизации мышей BALB/c рекомбинантным gp160 ВИЧ-1. Таурозид I стимулировал продукцию антител против gp120 слабее, а против gp160 на уровне фосфата алюминия. Таурозид St-K стимулировал выработку антител против гликопротеидов ВИЧ-1 на уровне фосфата алюминия. Было установлено, что адъювантная активность таурозидов связана с наличием у 3 углеродного атома агликона анионных функциональных групп кислот и не лимитируется наличием альдегидной группы у 4 углеродного атома агликона.

Для оценки влияния сапонинов и мурамилпептидов на ВИЧ-1 использовали коэффициент репродукции. Его рассчитывали как отношение концентрации р24 ВИЧ-1 в культуральной жидкости к числу жизнеспособных клеток в инфицированной культуре Jurkat-tat. Было определено, что таурозид I дозозависимо подавляет репродукцию ВИЧ-1, а таурозиды Н2 и St-K стимулируют экспрессию р24. Структурно-функциональный анализ выявил, что анти-ВИЧ свойства таурозида I связаны с наличием у 3 углеродного атома агликона функциональной группы, включающей остаток кислоты, а у 4 углеродного атома агликона метильной группы. Наличие в положении 4 оксиметильной группы придаёт таурозидам способность стимулировать репродукцию вируса.

Было установлено, что адъювантность гидрофобизованных производных МДП и их влияние на репродукцию ВИЧ-1 зависят от конфигурации аномерного центра мурамилпептидов. Указанные свойства были более выражены у соединений с -конфигурацией аномерного центра. -бутил-МДП стимулировал антительный и клеточный иммунные ответы против гликопротеидов ВИЧ-1. Как иммуноадъювант он значительно превосходил -бутил-МДП и не уступал фосфату алюминия. В отличие от -бутила-МДП, -бутил-МДП не усиливал репродукцию ВИЧ-1. В силу этого он может быть рекомендован для включения в экспериментальные вакцины против ВИЧ-инфекции в качестве безопасного адъюванта. Кроме того было показано, что гидрофобизация -производных МДП способна избирательно усиливать их способность индуцировать Т-клеточный иммунный ответ.

Таким образом, в работе предложены: способ индивидуальной профилактики ВИЧ-инфекции на основе применения мирамистина; препараты для диагностики гриппа; способ стимулирования иммунного ответа с помощью таурозидов; новый принцип создания адъювантно-активных мурамилпептидов, не активирующих ВИЧ-1. Основные результаты работы нашли применение для создания новых безопасных адъювантов и в профилактике ВИЧ-инфекции.

Ключевые слова: детергенты, сапонины, мурамилпептиды, ВИЧ-1, грипп, адъюванты, лабораторная диагностика, профилактика СПИДа.

Summary

Krivorutchenko Y.L. Effects on Human Immunodeficiency Virus and Influenza Virus of New Surfactants and Their Immunoadjuvant Properties.-Manuscript.

Thesis for a doctor's degree by speciality 03.00.06 - virology.- National medical University, Kyiv, 2000.

The dissertation is devoted to complex estimation of action of surfactants belonging to various classes on HIV-1 and influenza virus. A new direction in virology based on the complex estimation of detergents myramistin and desintegron-O effects on HIV and influenza virus was developed. Comparison of HIV-modulating and adjuvant characteristics of the saponins (taurosids) and the lipophilic anomeric MDP-derivatives was developed as well. The anti-HIV properties of myramistin and desintegron-O; parameters of desintegron-O-mediated influenza virus destruction and properties of the subvirus products; HIV-modulating and adjuvant properties of the taurosids and the anomeric muramylpeptides were established. The individual AIDS prevention technique based on myramistin use, preparations for diagnostics of an influenza, the method of stimulation of immune response with taurosids, the new principle of creation of adjuvant-active non-HIV-stimulating muramylpeptides were offered. The main results of the work were used for creation of new safe adjuvants and in prevention of HIV-infection.

Key words: detergents, saponins, muramylpeptides, HIV-1, influenza, adjuvants, laboratory diagnostics, prevention of AIDS.

Размещено на Allbest.ru