Біотехнологія одержання та використання моноклональних антитіл до IgM людини
Розробка біотехнології одержання моноклональних антитіл (МКАТ) до IgМ людини та створення на їх основі високоспецифічних і чутливих методів імуноаналізу. Порівняльна характеристика різних схем імунізації для отримання анти-IgM МКАТ, відбір гібридоми.
| Рубрика | Медицина |
| Вид | автореферат |
| Язык | украинский |
| Дата добавления | 12.07.2015 |
| Размер файла | 85,5 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Доказана возможность использования конъюгатов 2-х МКАТ в составе ИФА тест-систем для диагностики цитомегалии и Эпштейн-Барр вирусной инфекции, также 3-х МКАТ в составе иммуносорбента наборов для диагностики токсоплазмоза, краснухи и урогенитального хламидиоза и простого герпеса.
Разработан высокочувствительный ИФА набор для количественного определения IgM-антител с аналитической чувствительностью 11 нг/мл. Предложена методика специфического выделения IgM человека с использованием иммуноаффинного сорбента на основе полученных анти-IgM МКАТ.
Ключевые слова: гибридомы, моноклональные антитела, иммуноглобулины, эпитопы, иммуноферментный анализ, иммуноаффинные сорбенты.
Summary
Galkin O.Yu. Biotechnology of obtaining and use of monoclonal antibodies to human IgM. - Manuscript.
Thesis for a PhD degree, specialty 03.00.20 - biotechnology. - I.I. Mechnikov Odesa National University of Ministry of Education and Science of Ukraine, Odesa, 2010.
The thesis presents the results of studies aimed for elaboration of biotechnological fundamentals of human anti-IgM MAb production and investigation. An original set of 21 novel clone hybridomas - producers of monoclonal antibodies to human IgM - has been obtained. Advanced study of biotechnological characteristics of the antibodies has been carried out: their specificity, affinity constant, and titer in culture medium have been determined. The epitope structure of human IgM molecule has been found to contain three basic epitope regions (ER): А, В, and С. ER А includes 1 predominant epitope А1, represented by the highest number of high affinity MAbs, and 2 adjacent epitopes А2 and А3 of medium affinity. ER В contains 2 adjacent epitopes В1 and В2 with medium affinity MAbs. ER С includes only 1 epitope with medium affinity MAbs. Epitope specificity of anti-IgM MAbs has been proven to depend on immunization scheme. The short-term immunization scheme results in mono-specificity of anti-ER-A antibodies, and the prolonged scheme causes the produced MAbs to be directed against antigenic determinants ER-B and ER-C. A comparative study of the possibility of using both immunization schemes for production of MAbs against human IgM has been conducted. Considering high immunochemical characteristics of MAbs, rapid results, and the absence of allergic reactions in Balb/c mice, the short-term immunization scheme appears more convenient and adequate.
Diagnostic characteristics of produced MAbs used as a complex with immunoenzyme conjugate and immunosorbent have been studied. Information capacity of one MAb conjugate exceeded that of a well-known analogue СН2 (Sorbent, Russia), and another three MAbs within the sorbent complex ensured better analytical properties versus МВ11 MAbs (Sigma, USA). A possibility of using 2 MAb-based conjugates in test systems to diagnose cytomegalic inclusion disease and Epstein-Barr viral infection, as well as 3 MABs within a test kit immunosorbent for diagnostics of toxoplasmosis, rubella, urogenital chlamidiosis, and simplex herpes has been proven.
A high sensitivity immunoenzyme kit for total IgM assay of analytical sensitivity 11 ng/ml has been elaborated. A well-reproducible and easy method of specific human IgM isolation using the produced anti-IgM MAb-based immunoaffine sorbent has been proposed.
Our MAb-based immunosorbents and peroxidase conjugates served as a base for elaboration and production of kits intended for detection of IgM antibodies against Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis and viruses of rubella, herpes simplex, cytomegalic inclusion disease, and Epstain-Barr virus. Test kits for detection of IgM antibodies against other infectious agents, such as varicella-zoster virus or pneumonia agents can be developed using the obtained MAbs or MAb-based conjugates. The study results have also been implemented in lecture courses of the department of industrial biotechnology of National Technical University of Ukraine “KPI”.
Keywords: hybridomas, monoclonal antibodies, immunoglobulins, epitopes, enzyme immunoassay, immunoaffine sorbents.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Віруси як антигени. Клітинні фактори противірусного імунітету. Взаємодії антигену з імуноглобуліновим рецептором на поверхні клітини. Ступінь напруженості видового імунітету. Отримання моноклональних антитіл проти певної антигенної детермінанти.
курсовая работа [34,6 K], добавлен 11.12.2013Значення антибіотиків у життєдіяльності людини. Порівняльна характеристика методів одержання і промислових способів виробництва антибіотиків. Характеристика антибіотика тобраміцин та біологічного агента. Обґрунтування вибору технологічної схеми.
курсовая работа [343,3 K], добавлен 13.04.2014Сумісність лікарської речовини й антимікробного консерванту, обґрунтування складу, показників якості, матеріалу первинного пакування і технології одержання очних крапель на основі кромоглікату натрію, їх стабільність в процесі виробництва і зберігання.
автореферат [38,8 K], добавлен 10.04.2009Структура та функціональні особливості очей, їх значення в житті людини та характеристика головних елементів. Опис основних порушень в роботі системи зору людини та принципи їх лікування, умови та правила призначення і проведення лікувальної фізкультури.
реферат [55,0 K], добавлен 09.01.2010Показники поширеності розсіяного склерозу, вивчення його етіології та виявлення авто-антитіл (абзимів), здатних каталізувати розщеплення ДНК. Визначення прогностичних критеріїв тяжкості й перебігу хвороби, розробка діагностичних підходів і тактики.
автореферат [39,8 K], добавлен 19.03.2009Епідеміологічні особливості травми підшлункової залози і посттравматичного панкреатиту при політравмі. Роль антипанкреатичних антитіл в ідентифікації ступеня тяжкості посттравматичного панкреатиту. Порівняння ефективності запропонованих методів лікування.
автореферат [34,0 K], добавлен 09.03.2009Легеневі патології як одна з найактуальніших проблем сучасності. Шляхи та обґрунтування необхідності створення експрес-діагностики хвороб за допомогою використання дихальної системи людини. Структура програмно-апаратного комплексу та його використання.
статья [86,6 K], добавлен 27.08.2017Цитомегаловірусна інфекція. Імунні комплекси антиген-антитіло, репродукція ЦМВ, цитотоксичність та анти-ЦМВ активність 6-azaC та амізону. Профілактика та лікування ЦМВ-інфекції. Виявлення ранніх білків ЦМВ за допомогою методів експрес діагностики.
автореферат [338,8 K], добавлен 12.03.2009Разработка способа получения моноклональных антител на основе гибридомной технологии. Роль гибридомы в фундаментальной иммунологии. Создание на основе клонально-селекционной теории иммунитета. Методы диагностики заболеваний и злокачественных опухолей.
презентация [524,5 K], добавлен 21.10.2015З найдавніших часів життя людини пов'язане з лісом, з лікарськими рослинами. Вивчення лікувальної дії диких рослин і створення на їх основі лікарських препаратів: буквиця лікарська, валеріана, барвінок, вербозілля лучне, бареліана, вербена, верес.
реферат [21,3 K], добавлен 22.02.2008Вітаміни як група органічних речовин, необхідних для життєдіяльності організму людини, їх види, добова фізіологічна потреба, використання в раціональному харчуванні. Значення вітамінів в обміні речовин і наслідки їх відсутності, нестачі і надлишку.
реферат [200,7 K], добавлен 21.12.2010Вітаміни, їх види та значення в роботі організму людини. Добова потреба людини у вітамінах. Групи жиророзчинних та водорозчинних вітамінів. Методи визначення вітамінів. Необхідність збалансованості харчування і включення повного комплексу вітамінів в їжу.
презентация [4,5 M], добавлен 02.12.2016Поняття та клінічна картина антифосфоліпідного синдрому як клініко-лабораторного симптомокомплексу, що включає венозні і / або артеріальні тромбози, тромбоцитопенію і пов'язаний із синтезом антифосфоліпідних антитіл. Патогенез і смертність при патології.
презентация [2,5 M], добавлен 24.03.2016СНІД - синдром набутого імунодефіциту - це кінцева стадія інфекційного захворювання, викликаного вірусом імунодефіциту людини (ВІЛ), який вражає спеціальні клітини крові (лімфоцити), які відповідають захист організму людини від різних мікробів і поступово
реферат [5,6 K], добавлен 19.08.2005Використання харчування в ролі лікувального засобу. Значення білків, жирів і вуглеводів в харчуванні людини та їх норми. Порушення правильного харчування як причина деяких захворювань. Види вітамінів та способи визначення їх вмісту в харчових продуктах.
реферат [26,9 K], добавлен 04.09.2009Трансфіковані клітини культури клітин яєчників китайського хом’яка. Дослідження експресії трансгена. Рекомбінантні плазміди, які містять ген АРОА1 людини під контролем енхансеру чи промотору середньораннього гена цитомегаловірусу людини з інтроном.
автореферат [52,1 K], добавлен 12.03.2009Вивчення джерел одержання амілолітичних ферментів, з продуцентів – прокаріотів, дріжджеподібних і мікроскопічних грибів. Характеристика властивостей, структури та механізму дії амілолітичних ферментів. Фірми-виробники амілолітичних ферментних препаратів.
курсовая работа [838,8 K], добавлен 14.06.2010Характеристика епідеміологічних, клінічних, лабораторних особливостей прояву і перебігу вірусного гепатиту С, вірусу імунодефіциту людини як мікст-патології. Розробка та специфіка алгоритму епідеміологічної діагностики, можливе лікування і профілактика.
статья [63,2 K], добавлен 27.08.2017Основні методи фізіологічних досліджень. Індивідуально набуті форми вищої нервової діяльності. Класифікація умовних рефлексів. Сигнальні системи людини. Функціональна асиметрія великого мозку. Нейрофізіологічні основи психічної діяльності людини.
курсовая работа [384,0 K], добавлен 20.01.2011Визначення, характеристика функціонального стану людини. Можливості впливу засобів фізичної реабілітації при порушенні функціонального стану людини. Приклад розкриття нервово-рефлекторної дії масажу. Комплекс лікувальної гімнастики, підбір фізичних вправ.
дипломная работа [1,1 M], добавлен 22.01.2015
