АННОТАЦИЯ

Василишин З.П. Лабораторная диагностика клещевого энцефалита и иксодового клещевого боррелиоза среди населения эндемических территорий. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 03.00.06 - вирусология. - Национальный медицинский университет имени О.О. Богомольца, Киев, 2008.

Диссертация посвящена изучению вопросов лабораторной диагностики клещевого энцефалита (КЭ) и иксодового клещевого боррелиоза (ИКБ) среди населения эндемических территорий. В работе для серологической диагностики КЭ и ИКБ исспользовался высокочуствительный метод - иммуно-ферментный анализ (ИФА).

При параллельном титровании парных сывороток крови лихорадящих больных с заболеваниями неизвестной этиологии была определена диагностическая пригодность тест-систем ИФА различных производителей для выявления антител (АТ) классов IgM и IgG к вирусу клещевого энцефалита (ВКЭ): РФ (“Vektor-best”), США (“N-3”), Германии (“IBL”). Наибольшее количество позитивных результатов получено при использовании тест-системы “IBL”. Последующие исследования серологически позитивных сывороток крови, как второй шаг стандартного порядка действия ВОЗ, в ПЦР подтвердили правильность результатов при использовании N-3 в 23 случаях из 25; IBL - 27 из 27; Vektor-best - 4 из 4 позитивных случаев за детекцией IgM, что свидетельствует об высокой диагностической и аналитической чуствительности использованных тест-систем.

Серологически протестированы парные сыворотки крови от 655 лихорадящих больных. При этом АТ против ВКЭ было выявлено у (29,6±1,8) %, часть из которых була анамнестическими, у другой части пациентов - (11,6±1,2) % - было серологически верифицировано диагноз КЭ. Это свидетельствует об функционировании активных очагов КЭ в Закарпатской области с расширением ареала на все ландшафтные зоны.

Анализ результатов титрования сывороток крови положительных к ВКЭ, которые исследовались методом ИФА, показал, что у трети больных (32,9±1,8) % выявлено только IgM к ВКЭ, почти половина пациентов (48,7±1,9) % имели четырехкратное наростание IgG, а в остальных выявлены оба класса АТ к возбудителю КЭ. У половины больных АТ класса IgM к ВКЭ появились на 4,2 день от момента появления лихорадки, на 8 день - у (78,6±1,6) % пациентов, а до 12 дня заболевания (90,4±1,1) % имели диагностические титры АТ, которые можно выявить в ИФА.

Впервые в Украине проведены многоплановые серологические исследования ИКБ с использованием ИФА (Германия “R-Biopharm”). При проведении госпитального надзора за сезонными лихорадящими состояниями в Закарпатской области АТ к Bbss в диагностических титрах выявлены у (59,4±2,9) % обследованных больных. Всего на протяжении года исследований было выявлено 167 случаев болезни Лайма (34,7 на 100 тыс. населения). Большинство случаев ИКБ верифицировано за IgM к боррелиям, а у трети было выявлено одновременно специфические IgM и IgG.

Анализ динамики синтеза специфических антиборрелиозных АТ показал, что у (57,5±2,9) % пациентов они выявлялись на 5-ый день, у (77,9±2,4) % - на 8-ой день заболевания. Таким образом, оптимальными сроками отбора второго образца крови для исследования на IgM к ВКЭ и возбудителя ИКБ предложено 7-10 день от первого дня отбора, а при титровании на IgG к ним - от 14-го дня и далее.

За данными серологического мониторинга сывороток крови здорового населения Закарпатья выявлено высокую имунную прослойку к обеим инфекциям, их частота в среднем составляла (11,7+1,9) % и (18,1+1,8) %, уровень которой зависит от ландшафтной зоны: на горной территории показатель пораженности населения ВКЭ составлял (22,9±3,6) %, на равнине - (0,7±0,7) %; для ИКБ данные показатели - (36,5±3,6) % (2005 г.), (16,4±2,8) % (2006 г.) и (13,0±2,4) % (2005 г.), (7,9±2,0) % (2006 г.) соответственно.

При проведении работы определено высокую часть больных, которые имели АТ к обоим возбудителям “клещевых” инфекций ((13,5±2,0) %).

В ходе работы изучены закономерности скрытого эпидемического распрастранения возбудителей КЭ и ИКБ путем лабораторного мониторинга населения.

Так при КЭ в большей части пораженными были жители сельской месности - (69,8±1,7) % и интенсивный показатель (ИП) у них был достоверно выше (19,6 на 100 тыс. нас.), чем у жителей городов (12,5 на 100 тыс. нас.), только в горных районах ситуация была противоположной. Чаще болели на КЭ мужчины, взрослые люди, работники сельского хозяйства, в т.ч. лесхозов.

Выявлена существенная разница в уровнях заболеваемости ИКБ в разных ландшафтно-географических зонах. В горной зоне ИП составлял 26,7, на территории со смешанным рельефом - 16,7, а на равнине - 31,2 на 100 тыс. нас. Территорией риска была сельская местность (25,9 на 100 тыс. нас.). Уровень заболеваемости ИКБ у мужчин в целом на территории области был выше, чем у женщин: ИП - 24,9 и 20,7, соответственно.

В структуре заболевших БЛ большую часть составляли взрослые - (73,6±2,6) %, возростная группа 7-18 лет составила (22,2±2,4) % от всех заболевших.

На трансмиссивный путь заражения указывали только (21,7±1,6) % пациентов.

Таким образом, в работе определено динамику образования специфических иммуноглобулинов классов IgM и IgG при КЭ и ИКБ для выбора оптимальных сроков отбора образцов для серологического обследования больных, а также показания до серологического обследования больных в зависимости от клинико-эпидемиологических особенностей КЭ и ИКБ на сегодняшнем этапе для определения тактики лабораторного мониторинга этих инфекций. Выявлено часть моно- и микст-инфекций, вызванных ВКЭ и боррелиями, на основе серологических обследований больных сезонными лихорадочными состояниями. Дано характеристику закономерностей скрытого эпидемического распространения возбудителей КЭ и ИКБ среди населения. Доказано эффективность серологической диагностики КЭ и ИКБ в сезонных лихорадящих больных методом ИФА на эндемических территориях. Разработано методические подходы к лабораторной диагностике “клещевых”инфекций у населения на эндемических территориях.

Ключевые слова: клещевой энцефалит; иксодовый клещевой боррелиоз; лабораторная диагностика.

SUMMаRY

Vasylyshyn Z.P. Laboratory diagnostics of tick born encephalitis and Lyme disease among the population of endemic territories. - A manuscript.

The dissertation for candidate of medical sciences degree on specialty 03.00.06 - virology. - O. Bohomolets National medical university, Kiev, 2008.

Dissertation is devoted to the study of questions of laboratory diagnostics of tick born encephalitis (TBE) and Lyme disease (LD) among the population of endemic territories with the help of immune assay at second level of grant of medico prophylactic help to the population. Estimation of the immune assays of different producers (Russia, the USA, Germany) for the exposure of antibodies of the IgM and IgG classes to TBE and LD is given in this work. The dynamics of formation of specific immunoglobulin of the IgM and IgG classes are determined at the mentioned infections for selection of optimum terms of taking serum for the serological inspection of patients, and also indications to the serological inspection of patients depending on the clinical-epidemiological features of TBE and LD on a modern stage for determination of tactic of the laboratory monitoring of these infections. Found specific weight of monoinfection and polyinfection caused by virus of TBE and borrelias on the basis of serological inspections of patients with the seasonal feverish states. Conformities of the hidden epidemic distribution of the TBE and LD are described by the laboratory monitoring of the combined population. Efficiency of the serological diagnostics of TBE and LD at seasonal feverish patients is led to by the immune assay on endemic territories.

Keywords: tick born encephalitis; Lyme disease; laboratory diagnostics.

Размещено на Allbest.ru