Характеристика нейроиммунного взаимодействия у больных ревматоидным артритом

Таблица 7

Определение характера влияния ацетилхолина и адреналина на уровень апоптоза CD4+ лимфоцитов больных РА с различной ФМА

Учитывая количественный и функциональный дефицит CD8+ клеток в периферической крови больных РА первой группы, наличие у них относительной парасимпатикотонии, а также преимущественно гуморально-метаболический вариант обеспечения ВНС, количественный и функциональный дефицит CD4+ - клеток в крови больных РА третьей группы, полученные результаты могут свидетельствовать о роли нейромедиаторов ВНС в дефиците указанных клеток в этих группах. Отсутствие дефицита CD4+ - клеток во 2 группе больных, возможно, обусловлено относительной симпатикотонией и высоким уровнем пролактина (Krishnan N., e.a. 2003).

Известно, что уже на стадии пролиферации начинается дифференцировка Т - клеток, поэтому на следующем этапа анализа нами была проведена сравнительная характеристика обеих Т- клеточных субпопуляций в зависимости от содержания внутриклеточных цитокинов, функционально характеризующих указанные популяции как Т - клетки первого (Т1) и Т - клетки второго типа (Т2) у пациентов больных РА и здоровых женщин

Таблица 8

Сравнительный характеристика CD4+ и CD8+ лимфоцитов в зависимости от содержания внутриклеточных цитокинов больных РА и здоровых женщин группы 1 («правшей»)

Примечание: M±m;

Характер различий общей группы больных от здоровых доноров свидетельствовал о снижении как Т1, так и Т2 - лимфоцитов, кроме «наивных» CD4+ и CD8+ с двойной экспрессией (IFN/IL-4)+, уровень которых был выше в группе больных. Сравнительный анализ Т1 и Т2 лимфоцитов больных РА и здоровых женщин свидетельствовал о противоположных изменениях в группах больных с различной ФМА: о дефиците Т2 лимфоцитов в первой группе больных и Т1 лимфоцитов в третьей группе (табл. 8, 10).

Дефицит Т1 лимфоцитов для пациентов первой группы касался только CD4+IFN+ лимфоцитов, в то время как, содержание CD8+ IFN+ лимфоцитов не было снижено. Также содержание CD8+(IFN/IL-4)+ лимфоцитов значимо не различалось с аналогичной группой здоровых, в то же время количество «наивных» CD4+(IFN/IL-4)+ было относительно высоким (таблица 8). В третьей группе пациентов Т2 лимфоциты в разной степени различаются от Т2 лимфоцитов здоровых людей: если популяция CD4+/IL-4+ лимфоцитов значимо снижена, то содержание CD8+/ IL-4+ - лимфоцитов не отличалось от здоровых. Повышение CD8+(IFN/IL-4)+ лимфоцитов, как и в 1 группе пациентов, на уровне тенденции (таблица 10).

Таблица 9

Сравнительный характеристика CD4+ и CD8+ лимфоцитов в зависимости от содержания внутриклеточных цитокинов больных РА и здоровых женщин группы 2 («амбидекстры1»)

Пациенты второй группы «амбидекстры 1» относительно здоровых женщин второй группы, характеризовались аналогичными общей группе изменениями Т1 и Т2 лимфоцитов: значимым снижением всех субпопуляций, кроме «наивных» CD4+ и CD8+ лимфоцитов с двойной экспрессией цитокинов (таблица 9).

Таблица 10

Сравнительный характеристика CD4+ и CD8+ лимфоцитов в зависимости от содержания внутриклеточных цитокинов больных РА и здоровых женщин группы 3 («амбидекстры2»)

Примечание: M±m;

В процессе определения характера влияния нейромедиаторов на Т1 и Т2 лимфоциты общей группы больных РА было установлено зависящее от дозы влияние ацетилхолина на Т - клетки с двойной экспрессией IFNY/IL-4. Так, определен стимулирующий эффект ацетилхолина в дозе (1·10-10М) на содержание Тх0 - CD4+(IFNY/IL-4)+ (р=0,017) и выраженная тенденция к подавлению популяции цитотоксических нулевых Т-клеток - CD8+(IFNY/IL-4)+ ацетилхолином в дозе 1·10-7М (р=0,07). В то же время, инкубация активированных мононуклеаров с адреналином в (1·10-4М) достоверно снижает содержание IFNY + клеток в обеих Т - клеточных субпопуляциях и IL-4+ клеток среди CD4+ лимфоцитов. Таким образом, определен модулирующий эффект нейромедиаторов на внутриклеточную продукцию цитокинов Т- лимфоцитами.

На следующем этапе работы исследовались молекулярно-генетические особенности Т - лимфоцитов больных РА и здоровых женщин с различной ФМА. В частности, при сравнении длины теломерных районов ДНК иммунокомпетентных клеток были установлены значимые различия в гранулоцитах между группами здоровых людей, различающихся по характеру ФМА - гр.1=7851,1±384,1; гр.2=8032,6±287; гр.3=9230,2±375; р=0,02(гр1-3); р=0,04(гр.2-3).

Сравнение длины теломерных районов ДНК в иммунокомпетентных клетках больных РА между собой не выявило различий ни в одной из исследуемых клеточных популяций, невзирая на то, что больные РА женщины с различной ФМА значимо различались по возрасту. Следует отметить, что в группе больных нами установлена корреляционная зависимость не только между возрастом и длиной теломерных районов ДНК в лимфоцитах (r=-0,43; p=0,006), но и значимая отрицательная зависимость с длительностью заболевания (r=-0,33; p=0,046).

При сравнении общих групп больных РА и здоровых доноров получены результаты, подтверждающие литературные данные об укорочении у больных теломерных участков ДНК в иммунокомпетентных клетках. При сравнении больных РА с группами здоровых в зависимости от ФМА были получены данные, свидетельствующие об укорочении длины теломерных участков ДНК в клетках больных РА 1 и 3 групп относительно групп здоровых доноров с аналогичной асимметрией (таблица 11). В группе 2 статистически достоверных различий длины теломерных районов ДНК в иммунокомпетентных клетках больных РА и здоровых доноров не было установлено, что может быть связано с активностью СО ВНС в этой группе, медиаторы которой активируют теломеразу (Elissa S. Epel., Jue Lin., Firdaus S. Dhabhar et al., 2009), а также с протективным действием пролактина (Krishnan N., e.a. 2003).

Таблица 11

Сравнение длины теломерных районов ДНК иммунокомпетентных клеток больных РА и здоровых доноров в зависимости от ФМА

Примечание: Единицы измерения - пары нуклеотид; M±m;

Клинические проявления заболевания (суставной синдром) у больных РА оценивался при поступлении в стационар и при выписке по следующим показателям: ЧБС (число болезненных суставов), ЧПС (число припухших суставов), ВАШ (визуальная аналоговая шкала), DAS 28, СОЭ (скорость оседания эритроцитов). Не было обнаружено достоверных различий по этим признакам между группами при поступлении больных РА в стационар и при выписке.

Согласно индексу DAS28, позволяющему оценить не только эффективность лечения, но и текущий уровень активности процесса, все пациенты, независимо от ФМА имели высокую активность болезни и достоверно не различались по параметрам суставного синдрома между анализируемыми группами. В результате проведенного лечения группы также не различались между собой по отдельным показателям суставного синдрома. При этом динамика суставного синдрома в отдельных группах была различной (таблица 12).

Таблица 12

Динамика суставного синдрома в группах больных РА в зависимости от ФМА

Примечание: M±SD - средняя ± стандартное отклонение;

Так, хороший эффект на терапию получен в группе 3 (с преимущественно доминантным правым полушарием): индекс DAS28 снизился на 1,42, при выписке составлял 4,84. В группе 2 (с активностью обоих полушарий) получен удовлетворительный эффект на терапию: индекс DAS28 снизился на 1,35, но при выписке в среднем по группе равнялся 5,33. В группе 1 (у пациентов с доминантным левым полушарием) эффекта на терапию не было - за время лечения DAS28 снизился на 1,06 и составил в среднем по группе 5,4. Таким образом, установлен зависящий от ФМА эффект на стандартный курс лечения, свидетельствующий об эффективности применяемого лечения у пациентов с активностью обоих полушарий и отсутствии выраженного эффекта у пациентов с доминантным левым полушарием.

Резюмируя результаты работы, можно сказать, что больных РА женщин характеризует сочетанное изменение иммунной и нервной систем, связанное с особенностями ФМА и определяющее клинико-иммунологическую разнородность РА, что свидетельствует о роли межсистемного взаимодействия в патогенезе заболевания.

ВЫВОДЫ

Больных РА относительно здоровых женщин характеризует сопряженное изменение психологических, иммунологических и функциональных параметров: снижение функциональной активности нервной системы, дисбаланс Т - клеточного звена, активация В - клеточного эвена и нарушение функций моноцитарно-макрофагального звена иммунной системы. У больных определена связь всех исследуемых характеристик с активностью отделов ВНС и зависимость указанной активности от функциональной межполушарной асимметрии, что свидетельствует о значимой роли ВНС и ФМА в межсистемном взаимодействии при ревматоидном артрите.

Иммунную систему больных РА женщин-«правшей» 1 группы характеризует нарушение экспрессии активационных маркеров и повышение апоптоза CD8+ Т- клеток, сопровождающееся выраженным дефицитом CD8+ CD45RO+ - лимфоцитов и сдвигом соотношения Т- клеточных субпопуляций в сторону CD4+ CD45RO+ - клеток, а также дефицит Т-клеток 2 типа. Нарушения процессов пролиферации и дифференцировки Т-звена иммунной системы, изменение функциональной активности нервной системы (снижение памяти, «способности к обучению», силы и подвижности возбудительных и рост инерционных процессов), а также неудовлетворительный (по показателям суставного синдрома) эффект лечения обострения, свидетельствуют о варианте течения РА, связанном с доминантностью левого полушария мозга.

Больных РА женщин 2 группы «амбидекстры 1», характеризуют нарушения в обеих Т - клеточных субпопуляциях: увеличение содержания CD4+ лимфоцитов не несущих маркеры активации и дефицит как активированных, так и не активированных CD8+ - лимфоцитов. Функциональная активность Т - клеток обусловлена снижением дифференцированных Т-лимфоцитов 1 и 2 типа и повышением недифференцированных CD4+ и CD8+ лимфоцитов с двойной экспрессией цитокинов. Умеренное снижение функциональной активности нервной системы, особенности нарушений Т-клеточного звена, активация гуморального звена, а также отсутствие отличий от здоровых по длине теломерных районов ДНК в ИКК, были сопряжены с удовлетворительным результатом терапии обострения и свидетельствуют о варианте течения РА, обусловленном активностью обоих полушарий мозга.

Больных РА 3 группы «амбидекстры 2» характеризует нарушение процессов пролиферации, связанное с дефицитом Т- клеток, экспрессирующих поздние маркеры активации и повышенным апоптозом CD4+ лимфоцитов, что сопряжено со сдвигом баланса Т- клеточных субпопуляций в сторону CD8+ CD45RO+- клеток и дефицитом CD4+ CD45RO+ - лимфоцитов, а также с нарушением дифференцировки Т - клеток, приводящее к дефициту Т- клеток 1 типа. Выявленные изменения были связаны с особенностями клинического течения (ранний дебют) и хорошим эффектом терапии обострения, что свидетельствует о варианте течения РА, связанном с доминантностью преимущественно правого полушария.

Больных РА женщин характеризует дисбаланс метаболических и нейровегетативных функций ВНС, зависящий от ФМА. На фоне снижения трофотропных и эрготропных функции ВНС - умеренная парасимпатикотония в первой группе, симпатикотония во второй и преимущественно гуморально-метаболическая активность в третьей группе. Влияние ацетилхолина и адреналина in vitro на лимфоциты больных РА разных групп зависит не только от нейромедиатора и его дозы, но и от фенотипа Т - клеток. Если воздействие на CD4+ клетки оказывает зависящее от ФМА модулирующее влияние, то CD8+ - лимфоциты, дефицит, которых установлен у всех больных РА женщин, не отвечают активацией процессов пролиферации и дифференцировки. В отличие от больных, группы здоровых женщин имеют минимальные различия по вегетативному обеспечению, а Т - лимфоциты здоровых людей устойчивы к воздействию физиологических концентраций нейромедиаторов in vitro. Полученные данные свидетельствует об участии ВНС в патогенезе РА, а также о недостаточной эффективности механизмов регулирующего влияния со стороны нейроэндокринной системы на ИКК при РА.

У больных РА женщин особенности функциональной активности мозга на уровне ВНД, типологических свойств нервной системы и отделов ВНС, а также фенотипические, функциональные и генетические характеристики Т - клеточного звена иммунной системы зависят от характера ФМА и определяют клинико-иммунологическую разнородность заболевания.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Абрамова Т.Я., Абрамов С.В., Королькова О.Ю., Пронкина Н.В., Сизиков А.Э., Коненкова Л.П., Герцог О.А., Сулутьян А.Э., Труфакин С.В., Кожевников В.С., Абрамов В.В. Особенности Т- клеточного звена иммунной системы у больных ревматоидным артритом (РА) с различной функциональной асимметрией полушарий головного мозга // Российский аллергологический журнал, 2007, - №3.- Приложение 1,С. 3.

Абрамова Т.Я., Абрамов С.В., Королькова О.Ю., Пронкина Н.В., Сизиков А.Э., Коненкова Л.П., Герцог О.А., Сулутьян А.Э., Труфакин С.В., Кожевников В.С., Абрамов В.В. Особенности Т - клеточного звена иммунной системы у больных ревматоидным артритом с различной функциональной асимметрией полушарий головного мозга // Омский научный вестник - 2007, N3 (61), сентябрь-декабрь, приложение 2, С 166-168.

Абрамова Т.Я., Абрамов С.В., Соловьева И.Г., Сизиков А.Э., Непомнящих В.М., Коненкова Л.П., Герцог О.А., Сулутьян А.Э., Демина Д.В., Леонова М.И., Труфакин С.В., КожевниковВ.С., Абрамов В.В. Нейроиммунные связи у здоровых людей, а также у больных ревматоидным артритом и бронхиальной астмой // Материалы VI конф. иммунологов Урала «Актуальные проблемы фундаментальной и клинической иммунологии и аллергологии»/ октябрь 2007, С.39-40.

Абрамова Т.Я., Соловьева И.Г., Сизиков А.Э., Герцог О.А., Сулутьян А.Э., Коненкова Л.П., Шишкова И.В., Абрамов С.В., Кожевников В.С, Абрамов В.В. Психофизиологический и иммунный статус больных ревматоидным артритом // Медицинская иммунология, 2008, Т.10, № 1, С.43-50.

Абрамова Т.Я., Абрамов С.В., Баровская Н.А., Королькова О.Ю, Шишкова И.В., Сизиков А.Э., Абрамов В.В., Кожевников В.С. Нейроиммунологическая характеристика больных ревматоидным артритом // Сибирский медицинский журнал 2008, - N3(23), С.78.

Абрамов С.В., Абрамова Т.Я., Шишкова И.В., Сизиков А.Э., Кожевников В.С., Абрамов В.В. Сравнительная характеристика Т- клеточного звена иммунной системы у доноров и больных ревматоидным артритом с различной функциональной межполушарной асимметрией (ФМА) головного мозга // Материалы Всероссийской конференции с международным участием «Актуальные вопросы функциональной межполушарной асимметрии и нейропластичности. Москва, 18-19 декабря 2008 г. С.271-275.

Абрамов С.В., Абрамова Т.Я., Сизиков А.Э., Кожевников В.С. Патогенетическая роль функционально асимметрии мозга у больных ревматоидным артритом // Нейроиммунология, 2009. - Т.VII - №.1. С.7.

Абрамов С.В., Абрамова Т.Я., Сизиков А.Э., Кожевников В.С. Сопоставление психофизиологических и иммунологических параметров между группами больных ревматоидным артритом и здоровых женщин // Патогенез, том 8, N1, 2010, С. 27.

Т.Я. Абрамова, С.В. Абрамов, О.Ю. Королькова А.Э. Сизиков, В.С.Кожевников. Дисбаланс Т1/Т2 клеточных субпопуляций в патогенезе психосоматического заболевания // Цитокины и воспаление, том 9, N3, 2010, С.59.

Абрамов С.В., Абрамова Т.Я., Шишкова И.В., Сизиков А.Э., Кожевников В.С. Роль функциональной асимметрии мозга (ФМА) в патогенезе ревматоидного артрита // Вестник Уральской Медицинской Академической Науки N2/1(29), 2010, С. 84-85.

Абрамова Т.Я., Абрамов С.В., Борисов В.И., Сизиков А.Э., Кожевников В.С. Сравнение длины теломерных районов ДНК иммунокомпетентных клеток больных ревматоидным артритом и здоровых доноров в зависимости от функциональной межполушарной асимметрии // «Современные направления исследований функциональной межполушарной асимметрии и пластичности мозга» материалы Всероссийской конференции с международным участием, Москва, 2-3 декабря 2010, С. 57-59.

Абрамова Т.Я., Абрамов С.В., Королькова О.Ю, Сизиков А.Э., Кожевников В.С. Характеристика Т - лимфоцитов первого и второго типа у больных ревматоидным артритом и здоровых доноров // Вестник Уральской Медицинской Академической Науки, Тематический выпуск по аллергологии и иммунологии, N2/1, (35), 2011, С.81-82.

Абрамова Т.Я., Абрамов С.В., Кожевников В.С. Роль межсистемного взаимодействия в патогенезе ревматоидного артрита // Материалы 8-й отчетной конференции НИИ КИ СО РАМН, Новосибирск, 2011, С.8-10.

Абрамова Т.Я., Абрамов С.В., Жарикова И.П., Ильина Н.А., Сизиков А.Э., Кожевников В.С. Динамика клинических проявлений у больных ревматоидным артритом в зависимости от функциональной межполушарной асимметрии // Российский аллергологический журнал, 2011, N4, вып.1, С.2-3.

Размещено на Allbest.ru