Механизмы регуляции апоптоза в нейроэндокринной системе гипоталамуса в позднем онтогенезе

Участие гена HER2/neu в механизмах апоптоза и старения НСК.

Онкопротеин HER2/neu играет важную роль во многих процессах, в том числе в канцерогенезе (Sunpaweravong and Sunpaweravong, 2005; Nagy et al., 1999). Онкогенные характеристики HER2/neu связаны с влиянием на различные апоптотические пути в клетках, сверхэкспрессирующих этот белок (Sabbatini et al., 1999; Nagy et al., 1999; Zhou et al., 2000). Целью данного этапа работы было изучить изменения в регуляции процесса апоптоза, вызываемые сверхэкспрессией HER2/neu, в НСК гипоталамуса HER2/neu трансгенных мышей при старении. Мы исследовали экспрессию апоптотических сигнальных белков в сравнении с уровнем апоптоза и функциональной активностью в НЭС. Кроме того, определяли уровень 17в-эстрадиола в плазме крови, как одного из возможных антиапоптотических факторов, активных в нейронах.

Мы обнаружили, что при старении у данных мышей не наблюдается активации апоптоза НСК, в отличие от животных дикого типа (Рис. 12-14). Таким образом, впервые было показано, что сверхэкспрессия HER2/neu достаточна для защиты от возраст-зависимой активации апоптоза в НСЦ. Эти находки предполагают, что HER2/neu сверхэкспрессия активирует мощные антиапоптотические механизмы. В поисках причин такой устойчивости к возраст-зависимому апоптозу мы проанализировали экспрессию ряда ключевых апоптоз-регулирующих молекул.

В наших экспериментах показано увеличение экспрессии р53 при старении в нейронах гипоталамуса, коррелирующее с повышением уровня апоптоза, у мышей дикого типа. Однако у старых трансгенных животных уровень апоптоза оставался низким, так же как и синтез р53 (Рис. 15А,C,D). Мы предположили, что возможной причиной подавления возраст-зависимой активации апоптоза может быть супрессия р53-опосредуемого сигнального пути на уровне регуляторов р53. Результаты наших исследований показали, что наиболее уязвимой точкой этого каскада при сверхэкспрессии HER2 является WRN (Рис. 15В). Недостаточная экспрессия WRN может нарушать взаимодействие с р53, тем самым подавлять его синтез и функционирование. Вероятно, это является причиной преждевременного старения и повышенного канцерогенеза данной линии мышей (уровень заболеваемости у старых мышей линии HER2 составляет 100%, наиболее часто встречающейся опухолью у старых мышей HER2 является аденокарцинома, число их на одно животное составляет 4,7). Кроме того, мы предполагаем, что, несмотря на повышение количества белка WRN при старении, функция его значительно снижена, т.к., помимо wild-type WRN, могут экспрессироваться и дефектные формы этого белка.

Выявлено, что регуляция апоптоза в различных ядрах опосредуется разными сигнальными путями. Так, у старых мышей SHR мы наблюдали активацию р53-зависимого пути в СОЯ и ПВЯ (Рис. 15А,C,D). При этом имело место повышение экспрессии caspase-8 в НСЦ старых мышей SHR (Рис. 16D). У трансгенных мышей, очевидно, сверхэкспрессия HER2/neu блокировала

А В

Рис. 12. TUNEL-позитивные клетки в СОЯ и ПВЯ мышей SHR и HER2+/+. А - по оси У: число апоптотических клеток на срез ядер; Обозначения: М - молодые мыши, С - старые мыши, * - достоверность отличий по отношению к контролю, о - достоверность отличий между молодыми и старыми контрольными животными, те же обозначения для последующих рисунков. В - микрофотография ПВЯ старой мыши, увел. х400.

С D

Рис. 13. Клетки, окрашенные бромидом этидия (апоптотические клетки-обведение) в СОЯ и ПВЯ мышей SHR и HER2+/+. С - по оси У: доля апоптотических клеток на срез ядер в процентах. D - микрофотография ПВЯ старой мыши, увел. х400.

Рис. 14. Клетки, окрашенные бромидом этидия в ПВЯ мышей SHR и HER2+/+. Стрелками отмечены апоптотические клетки; люминисцентная микроскопия, увел. х400. 14c микрофотография ПВЯ старых мышей HER2/neu, 14d микрофотография ПВЯ старых мышей SHR.

Значительное количество всех апоптотических путей, независимо от возраста животного (Рис. 12, 13).

Рис. 15. 15А Содержание р53 мРНК в НСК СОЯ и ПВЯ. 15В Содержание WRN мРНК в НСК СОЯ и ПВЯ, по оси У: проценты. 15С,D Микрофотография ПВЯ старых мышей SHR (C), HER2/neu (D), увел. х400. ИГХ реакция с антителами к р53.

AB

C D

Рис. 16. Содержание Bcl-2-ИР (16А), Mcl-1-ИР (16В), Вах-ИР (16С), caspase-8-ИР (16D) материала в НСК СОЯ и ПВЯ, по оси У: оптическая плотность.

Одной из причин повышения уровня апоптоза в ПВЯ старых SHR мышей может быть снижение экспрессии Mcl-1 и Bcl-2 (Рис. 16А, В). С другой стороны, аналогичное снижение уровня Mcl-1 в СОЯ и ПВЯ старых мышей HER2/neu не влияет на устойчивость к апоптозу (Рис. 16В). Очевидно, причиной этого является супрессия основных апоптотических путей в клетках трансгенных мышей.

Известно, что Bax является ключевым фактором функционального равновесия между выживанием клетки и апоптозом (Sun et al., 2004). Наше исследование показало, что повышенная экспрессия Bax в СОЯ старых мышей SHR является, возможно, одним из факторов, опосредующих высокий уровень клеточной смерти. Кроме того, мы обнаружили значительное снижение уровня Вах в НСК трансгенных мышей только в ПВЯ. Можно заключить, что это подавление синтеза Вах связано с показанной нами HER2/neu-зависимой супрессией р53 и, далее, caspase-8 (Рис. 16С,D).

Анализ интенсивности экспрессии ВП (ВП мРНК) и количества ВП-ИР вещества в НСК как показателя функциональной активности СОЯ и ПВЯ выявил, что активность этих ядер зависит от генетической линии мышей (Рис. 17, 18). Мы выявили, что сверхэкспрессия HER2 вызывает увеличение синтеза ВП в НСЦ, независимо от возраста животного. Кроме того, мы показали, что гипоталамические центры поддерживают постоянный уровень активности при старении у мышей дикого типа, однако эти ядра в состоянии значительно увеличивать секрецию ВП у трансгенных мышей, т.е. дополнительная активность гена HER2/neu у трансгенных животных влияет на основную функцию НСК.

Таким образом, выявлен сигнальный каскад супрессии апоптоза при HER2/neu сверхэкспрессии (см. предложенную нами сх. - Рис. 19). Основным механизмом подавления апоптоза у трансгенных мышей является блокирование р53-зависимого каскада, что приводит к снижению синтеза caspase-8 и Вах, дисрегуляции синтеза антиапоптотических белков Bcl-2 и Mcl-1. Обнаружена

AB

Рис. 17. Уровень синтеза ВП в НСК гипоталамуса. 17а - количество мРНК ВП в СОЯ и ПВЯ. 17б - Количество ВП-ИР материала в СОЯ и ПВЯ.

Рис. 18. In situ гибридизация для выявления мРНК ВП с использованием меченых дигоксигенином рибопроб в гипоталамусе HER2/neu мышей и мышей дикого типа (SHR). OC - оптическая хиазма (optic chiasma), IIIv - третий желудочек (III ventriculum). увел. х400. a - количество ВП мРНК в СОЯ молодых мышей SHR; b - количество ВП мРНК в СОЯ молодых мышей HER2; c - количество ВП мРНК в ПВЯ молодых HER2 мышей; d - количество ВП мРНК в ПВЯ старых HER2 мышей.

А

В Рис. 19. А Сигнальный каскад апоптоза при физиологическом старении, В Сигнальный каскад апоптоза при старении НСК трансгенных мышей HER2/neu.

Возможная причина подавления р53-опосредуемого апоптоза у HER2-трансгенных мышей - низкая экспрессия гена WRN, регулирующего синтез р53. Важным фактором, принимающим участие в повышении выживания клеток гипоталамуса трансгенных животных, является 17в-эстрадиол, уровень которого в плазме крови не снижается при старении. Результатом всего этого является повышенное выживание НСК старых трансгенных мышей HER2/neu.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Cтарение является сложным многофакторным процессом, ассоциированным с широко распространенными изменениями в экспрессии генов во многих тканях млекопитающих. Среди множества причин старения чаще всего называют свободнорадикальное окисление (Gupte et al., 2010), повреждение ДНК вследствие оксидативного стресса или других причин, укорочение теломер (Olovnikov, 1996; Eller et al., 2006; Ding and Shen, 2008). Все это может активировать р53 в стареющих клетках, что было изучено на тканях, клетки которых способны к размножению в течение жизни особи (Edwards et al., 2007). Однако молекулярные механизмы старения постмитотических нейронов в условиях in vivo оставались до сих не изученными. Каждый этап онтогенеза требует своих «триггеров» и имеет свои «точки начала». Механизмы инициации инволюционных изменений до сих пор являются предметом дискуссии.

Результаты наших исследований пептидергической и катехоламинергической систем гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы показывают, что старческие изменения начинаются в первую очередь в центральных регуляторных органах (нейросекреторные центры гипоталамуса), и далее уже распространяются на периферическое звено, что обуславливает нарушения стрессорного ответа и адаптации у животных на поздних этапах онтогенеза.

Вазопрессин, один из основных нейрогормонов, играет важную роль во многих реакциях организма. Мы показали, что старые животные в состоянии поддерживать уровень синтеза вазопрессина, сравнимый с таковым у молодых, но это является результатом морфофункционального напряжения стареющих нейросекреторных клеток. Более того, синтез вазопрессина зависит от генотипа животного, так, он значительно повышен у старых HER2/neu трансгенных и TNF-нокаутных мышей.

Нами был подробно изучен механизм реализации старческих изменений в нейросекреторных клетках гипоталамуса. Мы выявили, что при физиологическом старении у мышей происходит значительная потеря нейронов крупноклеточных нейросекреторных центров (супраоптическое и паравентрикулярное ядра), и эти нейроны гибнут путем апоптоза. Ранее подобные данные были получены различными авторами при изучении патологического старения. Так, показано повышение апоптоза нейронов фронтальной коры и гиппокампа у больных болезнью Альцгеймера и допамин-продуцирующих нейронов в стриатуме и substantia nigra при болезни Паркинсона (Mattson et al., 1999, 2001), мотонейронов спинного мозга у больных боковым амиотрофическим склерозом (Kim et al., 2001) и т.д. Выявленные нами сигнальные пути апоптоза нейронов мозга при старении отличаются от таковых у молодых животных (см. предлагаемую нами схему - Рис. 20). Также показана тесная связь сигнального каскада апоптоза с генотипом животного.

Рис. 20. Сигнальные пути апоптоза в различных НСЦ при старении.

Таким образом, рассмотрены возможные пути реализации апоптоза нейронов гипоталамуса на поздних этапах онтогенеза и выявлены основные закономерности клеточной гибели у животных при различных воздействиях и использовании иммуномодуляторов. У старых животных в реализации апоптоза участвуют внешний путь активации (через caspase-8), митохондриальный путь (изменения экспрессии белков семейства Bcl-2) и р53-зависимый путь, связанный с повреждением ДНК. На основании полученных данных можно заключить, что наиболее важное значение на поздних этапах онтогенеза приобретает р53-зависимый путь, и блокада этого каскада приводит к нарушению возраст-зависимой активации апоптоза и снижению продолжительности жизни.

ВЫВОДЫ

1. В нейроэндокринной системе при старении происходит массовая элиминация клеток путем апоптоза. В первую очередь изменяется функция центрального звена эндокринной системы, что является одной из причин возрастных изменений периферических эндокринных органов. Сохранившиеся нейроны супраоптического и паравентрикулярного ядер вынуждены поддерживать синтез нонапептидов на уровне физиологических потребностей, и в связи с этим находятся в состоянии функционального напряжения. Экспрессия нейромодуляторных пептидов, таких как нейропептид Y и инсулин/инсулиноподобные пептиды, в нонапептидергических нейронах гипоталамуса при старении снижается.

2. Экспрессия про- и антиапоптотических белков в супраоптическом и паравентрикулярном ядрах молодых мышей одинакова, несмотря на то, что эти центры играют разную роль в регуляции функций организма. У старых мышей в изучаемых нейросекреторных центрах усиливается экспрессия проапоптотических белков р53 и caspase-8, снижается содержание инсулина/ инсулиноподобных пептидов (фактора выживания клеток). Однако в паравентрикулярном ядре, кроме того, уменьшается экспрессия Mcl-1 и Bcl-2, а в супраоптическом - усиливается экспрессия проапоптотического белка Вах, т.е. при старении сигнальные каскады и уровень апоптоза в супраоптическом и паравентрикулярном ядрах различаются.

3. Инактивация гена TNF in vivo (TNF-нокаутные мыши) не влияет на синтез сигнальных белков апоптоза в нейросекреторных клетках. При старении наблюдается активация апоптоза нейросекреторных клеток TNF-нокаутных мышей по caspase-8-зависимому пути, и отсутствие гена TNF не влияет на активность данного процесса.

4. Повышенная экспрессия онкопротеина HER2/neu вызывает усиление синтеза вазопрессина в нейросекреторных центрах трансгенных мышей. При старении у трансгенных мышей синтез вазопрессина увеличивается не только по отношению к мышам дикого типа, но и по сравнению с молодыми трансгенными мышами.

5. Экспрессия гена синдрома Вернера WRN, регулирующего синтез и функциональную активность онкосупрессора р53, в нейросекреторных клетках при физиологическом старении увеличивается, что приводит к интенсификации синтеза р53 и, как следствие, высокому уровню апоптоза.

6. Сверхэкспрессия HER2 у трансгенных мышей блокирует экспрессию WRN при старении, выраженную у старых мышей дикого типа. Низкий уровень WRN не приводит к активации р53 и таким образом подавляет последующий каскад апоптоза: показана супрессия синтеза проапоптотических белков Вах и caspase-8. Как следствие, у трансгенных мышей при старении не происходит активации апоптоза нонапептидергических нейронов гипоталамуса. Сверхэкспрессия тирозинкиназного рецептора HER2 блокирует сигнальный путь р53, влияя как на белки, регулирующие р53, так и на р53-зависимые белки.

7. Иммуномодуляторы (интерферон-альфа и индуктор эндогенного интерферона - циклоферон) снижают активность вазопрессинергических нейронов. Так, интерферон-альфа оказывает супрессорный эффект на синтез вазопрессина, инсулина/ инсулиноподобных пептидов и Bcl-2, циклоферон снижает экспрессию Вах и Bcl-2 у молодых и старых мышей. Экзогенный интерферон-альфа не является протектором апоптоза нейронов гипоталамуса при старении, напротив, индукция эндогенного интерферона введением циклоферона снижает апоптоз во всех изученных группах. Введение интерферона-альфа и циклоферона перед стрессом снижает уровень апоптоза в ядрах гипоталамуса только у старых животных, т.е. участие иммуномодуляторов в регуляции гибели нейронов гипоталамуса зависит от стадии онтогенеза и от вида иммуномодулятора.

8. При старении в активации апоптоза участвуют внешнерецепторный путь (через caspase-8), митохондриальный (изменения экспрессии белков семейства Bcl-2) и р53-зависимый путь, связанный с повреждением ДНК. В тканях, где экспрессия р53 конституитивно снижена (трансгенные мыши со сверхэкспрессией онкогена HER2/neu), повышения апоптоза при старении не происходит. Низкий уровень апоптоза на поздних этапах онтогенеза является критическим для особи, и животные этой линии имеют значительно меньшую по сравнению с диким типом продолжительность жизни. Высокий канцерогенез у старых HER2/neu трансгенных мышей также является следствием супрессии р53-зависимого пути клеточной гибели.

ОСНОВНЫЕ РАБОТЫ, ОПУБЛИКОВАННЫЕ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Бажанова Е.Д., Данилова О.А., Черниговская Е.В., Бажанов И.А. Соотношение вазопрессин- и окситоцин-продуцирующей активности различных ядер гипоталамо-гипофизарной нейросекреторной системы // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. - 1997. - Т. 33, № 2. - C. 199-204.

2. Бажанова Е.Д., Гриневич В.В., Данилова О.А., Черниговская Е.В. Изменение окситоцин(ОТ)-эргических нейросекреторных клеток (НСК) в добавочных крупноклеточных нейроэндокринных ядрах (ДЯ) гипоталамуса у крыс при старении // Морфология. - 1997. - Т. 111, N 2. - С. 44-46. Перевед. и опубл. в Neurosci Behav Physiol. 1998. 28(4):354-356, Bazhanova E.D., Grinevich V.V., Danilova O.A., Chernigovskaya E.V. 3. Age-related changes in oxytocinergic neurosecretory cells in the accessory magnocellular neuroendocrine nuclei of the hypothalamus in rats.

3. Бажанова Е.Д., Черниговская Е.В., Данилова О.А. Гипоталамическая регуляция функции коры надпочечников у старых и молодых крыс // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. - 1998. - Т. 34, № 2.- C. 233-239.

4. Бажанова Е.Д., Черниговская Е.В., Данилова О.А., Бажанов И.А. Характеристика ядрышкового аппарата нейросекреторных клеток гипоталамуса у крыс разного возраста при острой иммобилизации животных // Цитология.- 1998.- Т. 40, № 4.- С. 248-255.

5. Черниговская Е.В., Бажанова Е.Д., Thibault J., Данилова О.А.. Участие моноаминергических клеток гипоталамуса в регуляции стрессорной реакции организма при старении. // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. - 1999. - Т. 35, № 1.- С. 48-52.

6. Бажанова Е.Д. Роль апоптоза в развитии нервной системы млекопитающих // Усп. Совр. Биол. - 1999 - Т. 119, № 4.- С. 368-374.

7. Черниговская Е.В., Ямова Л.А., Бажанова Е.Д., Глазова М.В. Развитие NPY-ергической системы гипоталамуса крыс в ходе постнатального онтогенеза и ее участие в регуляции нонапептидергических нейросекреторных центров. // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. - 2000. - Т. 36, № 5, C. 461-464.

8. Bazhanova E.D., Chernigovskaya E.V., Danilova O.A. Different pathways of neurohormonal hypothalamic control of the adrenal cortex function in young and old rats // Mech Ageing Dev 2000 Sep 29;118(3):91-102.

9. Бажанова Е.Д., Жуков Д.А., Порта С., Данилова О.А. Влияние избегаемого и неизбегаемого стресса на уровни катехоламинов в надпочечниках и кортикостерона в плазме крови у молодых и старых крыс. // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. - 2002. - Т. 38, № 2, C. 181-184.

10. Е.Д. Бажанова, Д.Л. Теплый. Влияние интерферона-aльфа на гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальную систему мышей при старении // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. - 2003. - Т. 39, № 5, c. 482-487.

11. Е.Д. Бажанова, А.Н. Москвин, Г.Б. Белостоцкая, А.Г. Таранухин, Д.Л. Теплый. Реакция гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы на оксидативный стресс у мышей разного возраста // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. - 2004. - Т. 40, № 1, 72-76.

12. Е.Д. Бажанова, Д.Л. Теплый. Участие интерферона-aльфа в регуляции апоптоза клеток гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы старых мышей при оксидативном стрессе // Морфология. - 2004. - Т. 125, N 1. - 23-26. Перевед. и опубл. в Neurosci. Behav. Physiol. 2005. 35(4):375-378, Bazhanova E.D., Teplyi D.L. Involvement of interferon-alpha in the regulation of apoptosis of cells of the hypothalamo-hypophyseal-adrenocortical system of aged mice in oxidative stress.

13. Е.Д. Бажанова. Участие интерферона-альфа в регуляции апоптоза // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. - 2005. - Т. 41, № 2, 101-106.

14. Ю.В. Абатнина, Е.Д. Бажанова, Д.Л. Теплый. Роль витамина Е в регуляции апоптоза при патологии и старении // Усп. геронтол. - 2005. - вып. 17. - С. 29-33.

15. В.Н. Молодцов, Е.В. Cенченков, Е.Д. Бажанова. Апоптоз и экспрессия вазопрессина, инсулина и Bcl-2 в нейросекреторной системе старых мышей // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. - 2006. - Т. 42, № 3, c. 283-288.

16. Ю.В. Абатнина, Е.Д. Бажанова, Д.Л. Теплый. Апоптоз нейросекреторных клеток гипоталамуса при стрессе у мышей на разных этапах онтогенеза // Морфология. - 2005. - Т. 127, N 3. - С. 27-29. Перевед. и опубл. в Neurosci Behav Physiol. 2006. 36(5):527-530. Abatnina Y.V., Bazhanova E.D., Teplyi D.L. Apoptosis of hypothalamic neurosecretory cells in stress mice at different stages of ontogenesis.

17. Е.Д. Бажанова, В.Н. Молодцов, К.И. Павлов. Изменения экспрессии апоптоз-ассоциированных молекул в нейросекреторных клетках гипоталамуса мышей при старении // Морфология. - 2006. - Т. 130, N 6. - с. 35-39. Перевед. и опубл. в Neurosci Behav Physiol. 2008. 38(1):43-47. Bazhanova E.D., Molodtsov V.N., Pavlov K.I. Aging-related changes in the expression of apoptosis-associated molecules in neurosecretory cells of the mouse hypothalamus.

18. Е.Д. Бажанова, В.Н. Молодцов, И.Г. Попович, В.Н. Анисимов. Возрастные особенности экспрессии белков-маркеров апоптоза у трансгенных мышей HER2/neu // Морфология. - 2007. - Т. 131, N 3. - c. 22-25.

19. Е.Д. Бажанова, В.Н. Молодцов, И.Г. Попович, В.Н. Анисимов Регуляция апоптоза нейросекреторных клеток гипоталамуса у трансгенных мышей HER-2/neu в онтогенезе //Успехи геронтологии. - 2007. - т. 20, № 4. - C. 31-35.

20. Е.Д. Бажанова, И.Г. Попович. Регуляция апоптоза нейросекреторных клеток гипоталамуса TNF-нокаутных мышей при старении // Докл.Акад.наук. - 2008. - 420 (6). - C. 839-841.

21. Е.Д. Бажанова, Павлов К.И., И.Г. Попович, В.Н. Анисимов. Онтогенетические особенности регуляции апоптоза нейросекреторных клеток гипоталамуса у TNF-нокаутных мышей // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. - 2009. - Т. 45, № 5. - C. 518-523.

ТЕЗИСЫ.

1. Черниговская E.В., Бажанова E.Д., Данилова O.A. Особенности стресс-реакции гипоталамо-гипофизарной нейроэндокринной системы в старости. Мат. III Междунар. Конф. Колосовские чтения-97, СПб. - 1997. - С. 93-94.

2. Bazhanova, E.D.: Hypothalamic monoaminergic system changes in aging. Abstr. of II National Gerontology Congress, Bucharest, Romania, 1997. - Р. 245-246.

3. E. Bazhanova, E. Chernigovskaya, O. Danilova. Stress reaction of vasopressin and tyrosine hydroxylase immunoreactive (IR) structures in young and old rats. World Congress of neurohypophysial hormones, Monreal, Quebec, Canada. - 1997. - Р. 53.

4. Бажанова E.Д., Черниговская E.В., Данилова O.A. Возрастные аспекты пептидергической и моноаминергической гипоталамической регуляции адренокортикальной функции в стрессорных условиях. Мат. Конф. с междунар. уч. “Эндокринные механизмы регуляции функций в норме и патологии”, посвященная 75-летию проф. Колпакова; Новосибирск. - 1997. - С. 17-18.

5. E. Bazhanova, D. Zhukov, S. Porta and O. Danilova. Stress reaction of adrenal medulla catecholamines (СА) and blood corticosterone (С) in young and old rats. 4 Internat. Congress of Neuroendocrinology, Kitakyushu, Japan. - 1998. - Р. 50.

6. E.V. Chernigovskaya, Yamova L.A., E.D. Bazhanova, Glazova М.V., Таrаnukhin А.G. Interaction between NPY-producing cells and vasopressinergic centers of hypothalamus during rat postnatal ontogenesis. Genetic and developmental psychoneuroendocrinology, Internat. Symposium, Новосибирск. - 1999. - С. 122.

7. Е.Д. Бажанова, А.Г. Таранухин, В.Б. Косткин. Влияние ?-интерферона на количество c-fos-иммунореактивных (ИР) нейросекреторных клеток (НСК) гипоталамуса при стрессе у молодых и старых мышей. Тез. докл. V Всероссийск. конф. «Нейроэндокринология-2000», СПб. - 2000. - С. 17.

8. Е.Д. Бажанова, А.Г. Таранухин Влияние оксидативного стресса на количество c-fos-иммунореактивных (ИР) нейросекреторных клеток (НСК) гипоталамуса старых мышей. ХХХ Всеросс. Совещ. по проблемам высшей нервной деятельности, посвящ. 150-летию И.П. Павлова, СПб. - 2000. - С. 176-177.

9. E.D. Bazhanova, D.L. Teplyi. The effect of oxydative stress to c-fos immunoreactive neurosecretory cells in young and old mice. International Conf. “Free radicals in the development and functions of CNS. From fetus to aging”, SPb. - 2001. - Р. 88.

10. Е.Д.Бажанова. Cостояние гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы старых мышей при действии интерферона-альфа. 2 конф. с междунар. уч., посвященная 80-летию проф. Колпакова “Эндокринная регуляция физиологических функций в норме и патологии”, Новосибирск. - 2002. - С. 20.

11. E.D. Bazhanova, V.N. Molodtsov, E.V. Senchenkov, A.N. Moskvin. The effect of hyperbaric oxygen on the induction of c-fos and bcl-2 in hypothalamic cells in young and old mice. Abstr. of VIII Meeting on high pressure biology, M. - 2003. - P. 3.

12. Molodtsov V., E. Senchencov, E. Bazhanova. The level of apoptosis and bcl-2 expression in hypothalamic magnocellular neurosecretory centers in young and old mice under a different influences. Abstr. of Internat. Symposium “Neuron differentiation and plasticity - regulation by intercellular signals”, M. - 2003. - Р. 54-55.

13. Senchencov E., V. Molodtsov, E. Bazhanova. The effect of interferon alpha to level of apoptosis and bcl-2 expression in neuroendocrine system in young and old mice. Abstr. of International Symposium “Neuron differentiation and plasticity - regulation by intercellular signals”, M. - 2003. - Р. 56-57.

14. Молодцов В.Н., E.В. Сенченков, E.Д. Бажанова. Регуляция апоптоза клеток гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы мышей при старении. Тез. докл. Всероссийской конф. с междунар. участием «Нейроэндокринология-2003», СПб. - 2003. - С. 120-122.

15. E.D. Bazhanova. The level of insulin-like immunoreactive (IR) material in mouse hypothalamus in aging. Abstr. of 2 International Conf. on Functional Genomics of Ageing, Crete, Greece. - 2004. - Р32.

16. Ю.В. Абатнина, Е.Д. Бажанова, Д.Л. Теплый. Влияние витамина Е на апоптоз клеток нейросекреторных центров гипоталамуса мышей при старении. Мат. науч.-практич. конф. «Общество, государство и медицина для пожилых и инвалидов», М. - 2004. - С. 7.

17. Ю.В. Абатнина, Е.Д.Бажанова, Д.Л. Теплый. Особенности действия циклоферона на апоптоз клеток нейроэндокринных центров гипоталамуса на поздних этапах онтогенеза. Мат. VII междунар. Науч. Конф. «Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря». Астрахань. - 2004. - С. 53-54.

18. Е.Д. Бажанова, Г.Б. Белостоцкая. Уровень инсулина и Bcl-2 в крупноклеточных ядрах гипоталамуса старых мышей. Мат. VII междунар. Науч. Конф. «Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря», Астрахань. - 2004. - С. 54-55.

19. Е.В. Сенченков, В.Н. Молодцов, Е.Д. Бажанова. Онтогенетические изменения синтеза вазопрессина в нейросекреторных клетках гипоталамуса при различных воздействиях. Тез. докл. XIX съезда Физиол. общества им. Павлова, 2004, Екатеринбург, Россия, Ч. 1, Российский физиологический журн. им. Сеченова. - 2004. - Т. 90, № 8. - С. 195.

20. Бажанова Е.Д., Молодцов В.Н., Сенченков Е.В., Белостоцкая Г.Б. Синтез вазопрессина в нейросекреторных клетках гипоталамуса мышей при старении. Мат. электронной конф. "Информационно-вычислительные технологии в решении фундаментальных научных проблем и прикладных задач химии, биологии, фармацевтики, медицины ИВТН-2004 ", 2004. - М. - С. 42.

21. Бажанова Е.Д., Павлов К.И., Боткина К.Ю., Белостоцкая Г.Б. Динамика синтеза апоптоз-ассоциированных белков Вах и Мcl-1 в нейросекреторной системе молодых и старых мышей. Мат. электронной конф. "Информационно-вычислительные технологии в решении фундаментальных научных проблем и прикладных задач химии, биологии, фармацевтики, медицины ИВТН-2005 ", 2005. - М. - С. 35.

22. Бажанова Е.Д., Сенченков Е.В., Молодцов В.Н. Экспрессия апоптоз-ассоциированных белков Вcl-2 и Bax в нейросекреторных клетках мышей при старении. Тез. докл. Всеросс. Конф. с междунар. уч. «Нейроэндокринология-2005», СПб. - 2005. - С. 18-19.

23. Ю.В. Абатнина, Д.Л. Теплый, Е.Д. Бажанова, Г.Б. Белостоцкая. Влияние циклоферона на апоптоз клеток нейросекреторных центров гипоталамуса при стрессе. Тез. докл. Всеросс. Конф. с междунар. уч. «Нейроэндокринология-2005», СПб. - 2005. - С. 7.

24. Е.Д. Бажанова, К.И. Павлов, К.Ю. Боткина. Онтогенетические особенности регуляции апоптоза нейросекреторных клеток гипоталамуса при различных воздействиях. Науч. труды 1 съезда физиологов СНГ, Сочи, Дагомыс. - 2005. - С. 371.

25. K.I. Pavlov, E.D. Bazhanova. Change of synthesis proapoptotic protein Bax in neurosecretory system of TNF-/- mice in ageing. International Summer school in Behavioral Neurogenetics, 2005. - M. - Р. 76-77.

26. Павлов К.И., Молодцов В.Н., Бажанова Е.Д. Онтогенетические особенности регуляции апоптоза у мышей еrbb2+/+. Мат. XIII междунар. совещ. по эволюционной физиологии памяти акад. Орбели, СПб. - 2006. - С. 163.

27. Бажанова Е.Д., Молодцов В.Н., Анисимов В.Н Экспрессия апоптоз-ассоциированных молекул у мышей еrbb2^+/+ в онтогенезе. Мат. Международн. конф. по функциональной морфологии «Колосовские чтения-2006», 2006, СПб. Морфология, 2006. - Т. 129, Вып. 2. - С. 18.

28. Е.Д. Бажанова, В.Н. Молодцов, И.Г. Попович, В.Н. Анисимов. Влияние сверхэкспрессии тирозинкиназного рецептора HER2/neu на регуляцию апоптоза нейросекреторных клеток при старении. Мат. Междунар. Конф. «Свободные радикалы, антиоксиданты и старение», Астрахань. - 2006. - С. 29-32.

29. E.D. Bazhanova, V.N. Molodtsov, V.N. Anisimov. Tyrosine kinase receptor HER2/neu overexpression influences on apoptosis regulation of aged neurosecretory cells. Abstr. of the 2 World Congress on Gender-Specific Medicine, Rome, Italy, 2007. - A64-65.

30. Павлов К.И., И.Г. Попович, В.Н. Анисимов, Е.Д. Бажанова. Возрастные изменения синтеза белков апоптоза Mcl-1 и Bax в гипоталамусе TNF-нокаутных мышей. Тез. Докл. ХХ съезда Физиол. Общества им. Павлова, М. - 2007. - С. 366.

31. E.D. Bazhanova, K.I. Pavlov, I.G. Popovich, V.N. Anisimov. The participation of Bcl-2 family in apoptosis regulation in neuroendocrine system of aged TNF-knockout mice. Abstr. of VI European Congress of International Association of Gerontology and Geriatrics, SPb. - 2007. - Р. 19-20.

32. Е.Д. Бажанова, Д.Л. Теплый, Ю.В. Абатнина. Особенности апоптоза нонапептидергических нейронов гипоталамуса при воздействии циклоферона на молодых и старых мышей. IX Российско-Китайский симпозиум «Новые материалы и технологии», Астрахань. - 2007.

33. И.А. Степанова, К.А. Макарова, И.Г. Попович, Е.Д. Бажанова. Роль тирозинкиназного рецептора HER2 в регуляции апоптоза нейросекреторных клеток при старении. Конф. с междунар. уч. «Нейрохимические механизмы формирования адаптивных и патологических состояний мозга» СПб. - 2008.

34. Бажанова Е.Д., Степанова И.А., Макарова К.А.,Белостоцкая Г.Б., Попович И.Г. Сравнительное определение уровня апоптоза в нейросекреторных центрах HER2/neu мышей в онтогенезе с помощью двух независимых методов. Мат. электронной конф. "Информационно-вычислительные технологии в решении фундаментальных научных проблем и прикладных задач химии, биологии, фармацевтики, медицины ИВТН-2008", М. - 2008.

35. E.D. Bazhanova, I.G. Popovich. Apoptosis regulation in neurosecretory cells of hypothalamus of aged TNF-knockout mice. 12 International TNF Conf. The TNF superfamily and its interactions with other signaling proteins in infection, autoimmunity, cancer and therapy, El Escorial, Madrid, Spain. - 2009.

36. Е.Д. Бажанова, K.Д. Хрестик, Д.Л. Теплый. Некоторые аспекты старения нейросекреторных клеток гипоталамуса. Междунар. симпозиум «Профессиональное здоровье и качество жизни» Куба. - 2009. - С. 10-13.

37. Бажанова Е.Д., Молодцов В.Н., Хрестик К.Д., Анисимов В.Н., Теплый Д.Л. Механизмы регуляции р53-сигнального пути апоптоза нейросекреторных клеток гипоталамуса при старении. Тез. докл. Всеросс. Конф. с междунар. уч. «Нейроэндокринология-2010», СПб. - 2010. - С. 25-26.

38. Теплый Д.Л., Азизова Ю.В., Бажанова Е.Д. Некоторые особенности регуляции апоптоза клеток нейросекреторных центров гипоталамуса мышей линии BALB-c в условиях водной депривации. Тез. докл. Всеросс. Конф. с междунар. уч. «Нейроэндокринология-2010», СПб. - 2010. - С. 133-134.

39. E.D. Bazhanova. Signal apoptotic pathways in hypothalamic neurons in aging. 1 International Congress on controversies in longevity, health and aging, Barcelona, Spain. - 2010. - P2-3.

Размещено на Allbest.ru