Патогенетические механизмы и коррекция центральной невропатической боли (экспериментальное исследование)

снижение порога возникновения ВП

100

100

увеличение амплитуды ВП

100

100

появление ВП с постразрядами

100

100

появление в ЭКоГ спонтанных пик-волновых разрядов

100

0

появление в ЭКоГ пик-волновых разрядов при стимуляции удаленных зон

100

0

Характер нейрональной активности в антиноцицептивной системе у крыс с центральным болевым синдромом

С целью оценки состояния активности антиноцицептиной системы при развитии ЦБС и определения ее вклада в патогенез центральной невропатической боли была исследована биоэлектрическая активность нейронов в дорсальном ядре шва (ДЯШ) - ключевой серотонинергической структуре антиноцицептивной системы.

Исследования импульсной активности нейронов ДЯШ у интактных, ложнооперированных животных показали, что для ядра характерно наличие тонически активных нейронов с различным паттерном (Рис. 8), при этом доля активных зон в ядре составляло 30 % от общего числа регистрировавшихся зон (n=287). У животных с ЦБС через 30 мин после аппликации пенициллина на спинной мозг, т. е. в период максимального развития синдрома, число активных нейронов увеличивалась до 50% (Р ? 0,05).

Рис. 8. Изменение паттерна импульсной активности нейронов в дорсальном ядре шва при развитии центрального болевого синдрома у крыс.

На осциллограммах: неритмический (1), ритмический (2) и пачечный (3) типы активности. Калибровка 500 мкВ (1,2), 200 мкВ (3), 1 с.

На круговых диаграммах представлено соотношение неритмического (точки), ритмического (белый сектор) пачечного (штриховка) паттерна активности в дорсальной (верхний полукруг) и вентральной (нижний полукруг) частях ДЯШ у крыс интактных (I), ложнооперированных (II) и с ЦБС.

Средняя частота разрядов нейронов в ДЯШ у интактных (n = 88) и ложнооперированных животных (n=76) не различалась и составляла 4,5--5,5 имп/с. У животных с ЦБС частота разрядов нейронов (n=75) была достоверно (Р ? 0,05) более высокой по сравнению с интактными и ложнооперированными животными, достигая 8,5±0,9 имп/с.

Установлено, что у животных с ЦБС в ДЯШ возрастает доля нейронов с пачечным типом активности (Рис. 8).

Таким образом, проведенное исследование показало, что в период развития ЦБС, происходит изменение активности нейронов антиноцицептивной структуры. Увеличение числа активных зон ядра, возрастание средней частоты импульсной активности нейронов, числа нейронов с пачечным типом активности свидетельствуют об активации ДЯШ. Казалось бы, возникает противоречие: с одной стороны наблюдается повышенная активность в антиноцицептивной системе, и, следовательно, усиливается тормозное влияние на ноцицептивную передачу, с другой стороны имеет место выраженный центральный болевой синдром.

Но, как показала оценка болевой чувствительности к термическому ноцицептивному воздействию с помощью теста Hot Plate, являющегося тестом физиологической боли, этого наблюдаемого усиления достаточно, чтобы подавить лишь физиологическую боль. У крыс наблюдали достоверное повышение латентного периода болевой реакции в ответ на ноцицептивное термическое воздействие. Следовательно, тормозное влияние со стороны антиноцицептивной системы в этих условиях эффективно только в отношении физиологической боли и недостаточно в отношении патологической боли, какой является центральная невропатическая боль. Из этого следует, что если усилить активность антиноцицептивной системы, то можно подавить ЦБС, что было проверено в следующей серии опытов.

В поведенческих опытах сравнивались клинические проявления ЦБС у крыс без усиленной активации антиноцицептивной системы(n=5) и у крыс с гиперактивацией антиноцицептивной системы (n=8), вызванной нейрохимической стимуляцией путем введения в него конвульсанта. Конвульсант столбнячный токсин (1 мкл) вводили в ДЯШ в разные сроки до создания ЦБС (за 2, 4, 6, 8 часов), а также одновременно с моделированием болевого синдрома. Как показали проведенные исследования, предварительная нейрохимическая активация антиноцицептивной системы за 4-6-8 часов до моделирования ЦБС, но не позже чем за 2 часа до начала моделирования ЦБС, предотвращала развитие центральной невропатической боли (Рис. 9). ЦБС у животных с активированной антиноцицептивной системой не развивался. ЦБС у животных, которым не активировали антиноцицептивную систему, спонтанные приступы боли и аллодиния были четко выражены.

Рис. 9. Влияние нейрохимической активации дорсального ядра шва на центральный болевой синдром у крыс. Клинические проявления центрального болевого синдрома без активации дорсального ядра шва (I) и после предварительной нейрохимической активации шва (II). Верхние кривые - актограмма и нижние - фонограмма. Отметка времени 5с

О повышении активности в ДЯШ свидетельствовали данные исследования биоэлектрической активности в ядре. После нейрохимической активации ДЯШ наблюдали существенные изменения ВП в ответ на электрическое раздражение кожи задней конечности. Эти изменения заключались в том, что N1-компонент комплекса ВП значительно увеличивался (Рис. 10), в среднем на 100% (Р< 0,05).



Рис. 10. Изменение амплитуды компонентов ВП в дорсальном ядре шва после введения в него конвульсанта. Белые столбики -- до введения токсина, заштрихованные -- после введения. По оси ординат -- амплитуда компонентов ВП (в мкВ); по оси абсцисс -- компоненты вызванного потенциала. Внизу схема измерения соответствующих компонентов ВП. *- P < 0.05 по сравнению с показателями до введения СТ.

Тот факт, что только предварительное создание гиперактивности в ДЯШ отменяет развитие ЦБС, можно объяснить тем, что для подавления столь тяжелого синдрома, необходимо, чтобы в ДЯШ ко времени возникновения ЦБС повышенная нейрональная активность была уже сформирована.

Таким образом, наше положение о том, что формирование центрального болевого синдрома происходит при недостаточности тормозного влияния со стороны антиноцицептивной системы мозга, подтверждается тем, что при повышении нейрональной активности в ядре до необходимого уровня тормозный контроль со стороны антиноцицептивной системы в отношении ЦБС осуществляется.

Наши данные о роли нарушения тормозных процессов в развитии центральной невропатической боли с одной стороны согласуются с существующей в литературе гипотезой Head H., Holmes G. и ее современными модификациями (Head H., Holmes G., 1911, (Cesaro P. et al., 1991, Craig A.D., 1998, 1999), рассматривающими растормаживание в специфических лемнисковых и неспецифических структурах таламуса, термосенсорных путях таламуса, как причину возникновения болевого синдрома, но с другой стороны отличаются, поскольку наши данные показывают, что возникновение центральной невропатической боли может обусловлено не только нарушением в системе таламуса, но и нарушением торможения на разных уровнях центральной ноцицептивной и антиноцицептивной систем.

Полученные результаты исследования нейропатофизиологических механизмов центральной невропатической боли дают возможность заключить, что развитие центральной невропатической боли обусловлено возникновением в ноцицептивной системе на первом и последующих уровнях агрегатов сенситизированных нейронов, действующих как сетевой генератор усиленного самоподдерживающегося возбуждения, а также дизрегуляцией во взаимодействии активности антиноцицептивной и ноцицептивной систем. Указанные процессы формируют ПАС, которая является патогенетической основой центрального невропатического болевого синдрома.

Роль иммунного фактора в патогенезе центральной невропатической боли

До настоящего времени остается малоизученным такой важный вопрос проблемы центральной невропатической боли, как роль иммунной системы в механизмах развития центральных болевых синдромов. Современные данные литературы свидетельствуют о существенной роли иммунологических факторов в развитии неврологических нарушений (Ковалев И.Е. и др., 1987; Крыжановский Г.Н. и др. 1991, 2003; Дамбинова С.А. и др. С.А 1996; Скоромец А.А., и др., 1997; Евсеев А.В. и др., 2001; Магаева С.В., Морозов С.Г. 2005; Сорокина Е.Г. и др., 2006; Евсеев В.А., 2007; Евсеев В.А. и др., 2008; Klein R. et al., 199;, Fundytus M.E. et al., 1998; McKnight K. et al., 2005).

Исследуя патогенетические механизмы развития центральной невропатической боли, мы уделили особое внимание участию в развитии центральной невропатической боли антител к нейромедиаторам, которые рассматриваются как фактор обратной связи во взаимодействии ЦНС и иммунной системы (Ашмарин И.П., Фрейдлин И.С, 1989; Евсеев В.А., 2007). Были изучены иммунонейромодулирующие эффекты антител к возбуждающим и тормозным нейромедиаторам (глутамату, серотонину, ГАМК), которые играют ключевую роль в развитии и подавлении невропатических болевых синдромов.

Рис. 11. Динамика развития механической аллодинии, вызванной интратекальным введением антител к ГАМК

На оси ординат - аккумулятивный показатель аллодинии (в усл. ед.), на оси абсцисс - время после введения антител к ГАМК. * -P <0.001 по сравнению с аккумулятивным показателем при введении 0,9% NaCl

Как показали исследования, гомолатеральная аппликация животным (n=6) агаровой пластинки с антителами к тормозному медиатору ГАМК в дозе 300 мкг на дорсальную поверхность L4-L6 сегментов спинного мозга приводила к появлению у подопытных животных механической аллодинии Рис. 11). Через 10-15 минут после интратекального введения антител к ГАМК у всех животных в ответ на легкое касание кисточкой кожи в области дерматомов, подвергшихся воздействию антител к ГАМК, возникала болевая реакция. Неболевое механическое раздражение вызывало отдергивания ипсилатеральной задней конечности и вокализацию, что свидетельствовало о наличии механической аллодинии в этой зоне. В этот период аккумулятивный показатель аллодинии (АПА), характеризующий интенсивность и площадь зоны механической аллодинии, равнялся 21.1±4.3 усл. ед. К 30 минуте после аппликации на дорсальную поверхность спинного мозга антител к ГАМК интенсивность и площадь аллодинии достигала максимальных значений, у крыс при легком неболевом механическом касании кожи возникала сильная непрерывная вокализация, отдергивание ипсилатеральной задней конечности и бурная реакция избегания с последующим хаотическим бегом (АПА = 34.6±17.1). Через 60 минут показатели аллодинии уменьшались, зоны аллодинии редуцировались, аккумулятивный показатель аллодинии принимал минимальные значения (АПА = 9,2 ± 1,6). При интратекальной аппликации указанной дозы антител к ГАМК на спинной мозг наблюдали развитие только аллодинии, спонтанных приступов у животных не было зарегистрировано. Также не было обнаружено влияния на болевую чувствительность антител к ГАМК (50 мг/кг) при системном внутрибрюшинном способе введения.

Исследование возможности иммуномодуляции болевой чувствительности антителами к тормозным нейромедиаторам было продолжено в опытах по изучению эффектов антител к другому тормозному нейромедиатору - серотонину. Интратекальное (L4-L6) введение крысам (n=10) антител к серотонину в дозе 300 мкг приводило к развитию у подопытных животных механической аллодинии на стороне аппликации. В 60% случаев у подопытных животных в ответ на легкое касание кисточкой кожи в области дерматомов, подвергшихся воздействию антител к серотонину, возникала аллодиническая реакция. В контрольных группах, в которых животным на дорсальную поверхность мозга апплицировали либо 0,9% NaCl (n=6), либо гамма-глобулин (n=6), не было обнаружено каких-либо поведенческих проявлений центральной невропатической боли.

Поскольку эффекты антител к нейромедиаторам обнаруживались только при непосредственном подведении их к структурам ЦНС, то были проведены опыты, чтобы проверить, влияют ли антитела к нейромедиаторам на биоэлектрическую активность нейронов.

В электрофизиологических опытах исследовали влияние высокоочищенных антител к серотонину на биоэлектрическую активность нейронов сенсомоторной коры головного мозга крыс. Крысам в сенсомоторную кору головного мозга вводили антитела к серотонину (10 мкг, n=10), гамма-глобулин (10 мкг, n=5) либо физиологический раствор (n=5) на глубину 200 мкм в объеме 2 мкл в течение 2 мин, регистрировали биоэлектрическую активность - ЭКоГ.

Как показали проведенные опыты, фоновая нейрональная активность сенсомоторной области коры больших полушарий у крыс до введения исследуемых веществ характеризовалась сочетанием низкоамплитудных быстрых (12-16 Гц) и медленных (4-6 Гц) колебаний. Интракортикальное введение антител к серотонину приводило к появлению на ЭКоГ в первые 2-3 минуты реакции десинхронизации, при которой преобладающим ритмом были низкоамплитудные (до 40 мкВ) волны частотой 16-20 Гц. Начиная с 5-10 минуты после введения антител к серотонину, у всех животных (n=10) на ЭКоГ возникали непродолжительные одиночные и групповые высокоамплитудные разряды (до 300-500 мкВ), следующие с частотой 2-3 в 1 сек. Через 20 минут после введения антител к серотонину периоды пароксизмальной активности увеличивались и регистрировались уже в виде доминирующего высокоамплитудного ритма с частотой волн 4-6 Гц. Эпилептиформная активность после интракортикального введения антител к серотонину сохранялась у крыс на протяжении всего периода исследования (60 мин). У животных с введением в сенсомоторную кору физиологического раствора было зарегистрировано в первые минуты микроинъекции снижение амплитуды волн и увеличение их частоты. В последующем фоновая ритмика восстанавливалась. В контрольных опытах с использованием гамма-глобулина также в первые минуты микроинъекции наблюдалась реакция десинхронизации, которая в дальнейшем сменялась кратковременным появлением на ЭКоГ редких одиночных высокоамплитудных разрядов и восстановлением фоновой ритмики ЭКоГ через 15-20 мин. Развитие эпилептиформной активности после введения антител к серотонину может быть обусловлено снижением тормозного серотонинергического контроля.

Изучение роли антител к нейромедиаторам в патогенезе центральной невропатической боли было продолжено при исследовании влияния антител к возбуждающему нейромедиатору - глутамату, являющимся ключевым звеном в запуске синаптических, внесинаптических и внутринейрональных процессов при патологической боли.

После интратекального введения антител к возбуждающему нейромедиатору - глутамату в дозе 300 мкг животным с ЦБС (n=6) существенно была снижена интенсивность болевых пароксизмов (P<0,01) по сравнению с контрольной группой животных (Рис. 12.А), в то же время выраженность аллодинии не претерпевала (P> 0,05) каких- либо изменений (Рис. 12.Б). Внутрибрюшинное введение антител к глутамату в дозе 50 мг/кг крысам с центральным болевым синдромом (n=7) не влияло на развитие как спонтанных приступов, так и аллодинии (P> 0,05).



А Б

Рис. 12. Влияние интратекального введения антител к глутамату на спонтанные приступы боли и аллодинию. Заштрихованные столбики - введение 0,9% NaCl, темные столбики - введение антител к глутамату. А - спонтанные приступы боли, Б - аллодиния. *-P < 0,01 по сравнению с контрольной группой

Результаты проведенного исследования свидетельствуют о том, что антитела к нейромедиаторам обладают нейротропным эффектом, при этом антитела к тормозным нейромедиаторам при интратекальном введении обладают проноцицептивным эффектом и приводят к развитию у животных центральной невропатической боли в виде механической аллодинии, а антитела к возбуждающему нейромедиатору глутамату обладают антиноцицептивным эффектом и снижают выраженность спонтанных приступов боли. Кроме того, данные о разнонаправленных модулирующих эффектах антител к возбуждающим и тормозным нейромедиаторам являются доказательством значимости дизрегуляции процессов возбуждения-торможения в ноцицептивной системе, приводящей к развитию ПАС, а также подтверждают многогранность процессов, вовлекаемых в формирование ПАС.

Коррекция центральной невропатической боли

Данные фундаментальных исследований, полученные при изучении нейропатофизиологических и нейроиммунопатологических механизмов центральной невропатической боли и позволившие нам заключить, что в основе патогенеза центральной невропатической боли лежит дизрегуляция взаимодействия антиноцицептивной и ноцицептивной систем, дали нам основание считать, что один из принципов коррекции центральной невропатической боли может являться восстановление нарушенного баланса антиноцицептивная-ноицептивная систем путем активации антиноцицептивной системы. В связи с этим, на моделях ЦБС были изучены эффекты электростимуляции ДЯШ, влияние серотонинергической системы и влияние недавно открытой антиноцицептивной каннабиноидергической системы.

На моделях ЦБС было показано, что восстановление баланса взаимодействия антиноцицептивная - ноцицептивная системы путем нейроэлектростимуляции ДЯШ оказывает тормозное влияние на спонтанные приступы боли и аллодинию у крыс со спинальным и тригеминальным ЦБС (Рис. 13).

Электростимуляцию ДЯШ у крыс со спинальным (n=15) и тригеминальным (n=15) ЦБС осуществляли через предварительно (за 10 дней) вживленные в ядро электроды. Достоверное снижение интенсивности синдрома наблюдали при следующих параметрах электростимуляции ДЯШ: длительность прямоугольного стимула 0,5 мс, частота 15-30 Гц и сила раздражения 5-12 В. При повышении силы раздражения больше 14В у животных, кроме аналгезии, возникал ряд побочных нежелательных эффектов: беспокойство, гиперактивная двигательная реакция. Обезболивающее влияние нейроэлектростимуляции было более выражено на модели ЦБС спинального происхождения.



Рис. 13. Подавление спонтанных приступов боли у крысы с центральным спинальным болевым синдромом электростимуляцией дорсального ядра шва. Фонограмма (1) и актограмма (2) до (I) и во время (II) электростимуляции (6В, 30Гц) ДЯШ. Период электростимуляции отмечен сплошной линией над отметкой времени (3). Отметка времени 10 с.

Наши данные об аналгетическом эффекте, обусловленном гиперактивацией нейронов антиноцицептивной системы, и имеющиеся в литературе сообщения о стимуляционной аналгезии (stimulation-produced analgesia, Mayer D. J. et al., 1971), а также клинические данные о подавлении центральной боли при электростимуляции коры (Tsubokawa T. et al., 1993) и о подавлении различных видов невропатической боли при электростимуляции глубинных структур мозга ((Шабалов В.В., Исагулян Э.Д., 2005, Meyerson B.A., Linderoth B., 1999, 2001) доказывают, что восстановление баланса между анти- и ноцицептивной системами является патогенетически обоснованным принципом коррекции центральной невропатической боли.

Большой спектр нейромедиаторов, участвующих в работе антиноцицептивной системы, открывает широкие возможности для целенаправленного патогенетически обоснованного поиска коррекции невропатических болевых синдромов, через воздействие на нейромедиаторные процессы, усиливающие тормозную активность антиноцицептивной системы.

В настоящее время роль тех или иных нейромедиаторов в механизмах коррекции невропатической боли исследуется в основном применительно к невропатической боли периферического происхождения, участие различных нейромедиаторных систем в контроле центральной невропатической боли остается малоизученным.

В нашей работе были изучены антиноцицептивные эффекты агониста серотониновых 5HT-рецепторов и агонистов каннабиноидных рецепторов.

А Б

Рис. 14. Влияние агониста 5-HT₃ рецепторов - квипазина на центральный болевой синдром у крысы.

На радиальных диаграммах представлены показатели ЦБС у крыс после интратекального введения введения 0,9% NaCl (А) и 200 мкг квипазина (Б). Показатели синдрома (в %): 1 - вокализация, 2- общая двигательная реакция в период приступа, 3- аутотомия, 4-механическая аллодиния, 5-частота спонтанных приступов боли, 6 -длительность спонтанных приступов боли.

У крыс с ЦБС (n=9) интратекальная (L4-L6) аппликация 200 мкг агониста серотониновых 5-HT3 рецепторов - квипазина (Sigma, США) вызывала достоверное (P 0,01) снижение интенсивности болевого синдрома по сравнению с животными контрольной группы, которым вводили 0.9% NaCl (n=10), при этом степень снижения показателей болевого синдрома была различной (Рис. 14). В большей степени уменьшались частота приступов (70,1 + 6,2 %), аутотомия (73,3 + 4,4) и общая двигательная реакция (73,3+. 4,44). В меньшей степени - вокализация и аллодиния (соответственно 78,0+ 5,4 и 86,6 + 5,4). Антиноцицептивный эффект квипазина был подтвержден при изучении его влияния на ноцицептивный флексорный рефлекс. Интратекальное введение крысам (n=9) 200 мкг квипазина влияло на поздний компонент ноцицептивного флексорного рефлекса, который отражает активацию С-афферентов. Квипазин повышал порог возникновения позднего компонента и его продолжительность, вплоть до полного его подавления.

В настоящее время перспективным направлением в плане поиска новых возможностей коррекции невропатической боли является использование эндогенной каннабиноидергической антиноцицептивной системы. Открытие каннабиноидных рецепторов и эндогенных лигандов к ним: липофильных соединений анандамида (арахидонилэтаноламид) и 2-арахидонилглицерина, способствовало возросшему научному интересу к изучению регуляторных механизмов каннабиноидов, а также изучению возможности с помощью эндогенной каннабиноидергической системы управлять патологическим процессом. Эндогенная каннабиноидергическая система в организме человека и животных представлена специфическими рецепторами, их агонистами, механизмами синтеза и инактивации (Devane W.A., 1992; Pertwee R.G., 1997, 1999; Glass M. et al, 1997; Farquhar-Smith W.P. et al, 2000; Rice A.S.C., 2003). Наличие каннабиноидных рецепторов продемонстрировано в ключевых структурах, осуществляющих регуляцию болевой чувствительности: в дорсальных рогов спинного мозга, ростровентромедиальном отделе продолговатого мозга, околоводопроводном сером веществе ствола мозга, ядрах таламуса ((Чурюканов М.В., Чурюканов В.В., 2005; Devane W.A. et al., 1992; Pertwee R.G., 1997, 1999; Richardson J.D. et al., 1998; Glass M.et al., 1999; Farquhar-Smith W.P. et al., 2000; Rice A.S.C., et al. 2003). Анальгетический эффект каннабиноидов показан у животных на моделях воспаления (Jaggar S. I. et al., 1998; Richardson J.D. et al., 1998; Martin W.J et al. 1999; Clayton N. et al., 2002), на модели периферического невропатического болевого синдрома (Chapman V. 2001; Fox A. et al., 2001). Однако экспериментальные исследования по изучению влияния агонистов каннабиноидных рецепторов на моделях центральной боли не проводились. В нашей работе впервые представлены экспериментальные данные об обезболивающем влиянии каннабиноидов на центральную невропатическую боль.

На модели ЦБС были изучены эффекты следующих агонистов каннабиноидных рецепторов: анандамида, WIN 55,212-2 и HU210. В контрольных опытах крысам вводили 0.9% NaCl и 0.9% NaCl+ДМСО (диметилсульфоксид), ДМСО использовали при приготовлении растворов каннабиноидов.

Системное введение эндогенного агониста каннабиноидных рецепторов - анандамида, (20 мг/кг внутрибрюшинно) животным с ЦБС (n=6) в течение первых 15 мин после введения уменьшало спонтанные приступы (АПСП15мин =66,6± 11,4) и не влияло на аллодинию (АПА15 мин =45 ± 10). Через 30 мин при системном способе введения анандамида аккумулятивные показатели симптомов центральной боли практически были на уровне контрольных показателей и соответственно равнялись АПСП30мин=126,7 ± 34,2 и AПА30мин=58,5 ± 3,9. Через 60 мин спонтанные приступы боли и аллодиния были даже усилены по сравнению с выраженностью спонтанных приступов и аллодинии у животных контрольных групп (0,9%NaCl и ДМСО), аккумулятивные показатели соответственно составили АПСП 60мин=115,4 ± 41,7, AПА60мин=70,8 ± 16,8 (Рис. 15,16)).

Интратекальное введение анандамида (10, 100 мкг), особенно в дозе 100 мкг, существенно влияло на развитие ЦБС у крыс (n=12). Анандамид через 15 мин после введения уменьшал зону аллодинии и ее интенсивность на 56% (AПА15мин=17±5,9), через 30 мин на 86% (AПА30мин=8,4±5,4) и через 60 мин на 94% (AП60мин=3,1±2,5). При интратекальном способе введения анандамид также достоверно в течение 30 мин снижал выраженность, частоту и длительность спонтанных приступов боли, соответствующие аккумулятивные показатели равнялись: через 15 мин - AПСП15мин=28,8±13,4, через 30 мин - AПСП30мин=15,5±8,6 (Рис. 15, 16).

Системное введение синтетического лиганда каннабиноидных рецепторов - WIN55,212-2 в дозе 1 мг/кг крысам с ЦБС достоверно подавляло аллодинию и спонтанные приступы боли. Через 15 мин после внутрибрюшинного введения WIN55,212-2 аккумулятивный показатель аллодинии был уменьшен на 75% (АПА15 мин =10,0 ± 6,0,); а спонтанных приступов боли на 90% (АПСП15мин=11,4 ±4,8). Через 30 -60 мин после введения WIN55,212-2 аналгетический эффект сохранялся и показатели соответственно равнялись: AПА30мин=9,8±,6,5, AПСП30мин=22,4±3,7 и AПА60мин=3,4±2,21%, AПСП60мин=4,8±2,4, при этом в 50% случаев центральный невропатический болевой синдром подавлялся полностью (Рис. 15, 16).

После интратекального введения WIN55,212-2 в дозе 100 мкг аналгетический эффект был более выражен, чем аналгетический эффект анандамида. В 80% случаев отмечали полное подавление аллодинии и спонтанных приступов WIN 55,212-2, особенно в интервале 15 мин. (AПА15мин=0,3±0,3). Через 15 мин после интратекального введения WIN 55,212-2 полностью подавлялись спонтанные приступы боли (AПСП15мин=0±0). Обезболивающий эффект WIN 55,212-2 был стойким и длительным, о чем свидетельствуют аккумулятивные показатели через 30 и 60 мин. Так, через 30 мин аллодиния была подавлена на 98% (AПА30мин=1,2±0,9), а спонтанные приступы боли на - 99% (AПСП30мин=0,6±0,6). Через 60 мин также существенно были подавлены все симптомы ЦБС, в среднем аллодиния была подавлена на 71% (AПА60мин=13,4±10,4,), а спонтанные приступы боли на 84% (АПА60мин=4,0±4,0) (Рис. 15, 16).

При системном введении синтетического лиганда каннабиноидных рецепторов - HU210 в дозе 50 мкг/кг достоверно подавлялись спонтанные приступы и аллодиния. Через 15 мин после внутрибрюшинного введения HU210 спонтанные приступы были уменьшены на 76% (АПСП15мин= 29.2±5.9), а аллодиния была снижена на 69% (АПА= 12.4±8.1). Через 30 мин показатели для спонтанных приступов были снижены на 91% (АПСП30 мин=23.1±5.9) и для аллодинии на 81% (АПА30мин=5.0±3.0), при этом у части животных (33% случаев) аллодиния отсутствовала.

А Б

Рис. 15. Влияние каннабиноидов на спонтанные приступы боли.

А - системное введение, Б - интратекальное введение.

* -P<0.05 по сравнению с 0.9% NaCl, # - P<0.05 по сравнению с ДМСО

А Б

Рис. 16. Влияние каннабиноидов на аллодинию.

А - системное введение, Б - интратекальное введение.

* -P<0.05 по сравнению с 0.9% NaCl, # - P<0.05 по сравнению с ДМСО.

Выраженный обезболивающий эффект HU210 был отмечен у крыс с ЦБС и через 60 мин, в среднем спонтанные приступы боли были уменьшены на 84% (АПСП60мин=5.8±4.8), а аллодиния была уменьшена на 94% (АПА=2.3±2.3), при этом спонтанные приступы боли в 50% случаев и аллодиния в 83% случаев подавлялись полностью (Рис. 15, 16).

Через 15 мин после интратекального введения 5 мкг HU210 наблюдали почти полное снижение (99%) спонтанных приступов боли (АПСП=1.7±0.8) и полное подавление аллодинии (АПА=0±0) у крыс с ЦБС. Обезболивающий эффект интратекального введения HU210 через 30-60 мин был особенно выраженным в отношении спонтанных приступов боли, о чем свидетельствуют аккумулятивные показатели через 30мин (АПСП30мин=15.1±0.7, АПА30мин=10.9±0.9) и через 60 мин (АПСП60мин=3.6±2.0, АПА60мин=13.3±11.7) (Рис. 15, 16).

Следует отметить, что агонисты каннабиноидных рецепторов в используемых дозах не вызывали изменения двигательной активности у крыс, о чем свидетельствовало контрольное тестирование двигательной активности крыс на приборе «Rota-Rod” (Ugo Basil, Италия).

Полученные в настоящем исследовании данные свидетельствуют о том, что системное и интратекальное введение лигандов каннабиноидных рецепторов животным с ЦБС приводит к подавлению как аллодинии, так и спонтанных приступов боли. Отсутствие обезболивающего действия анандамида при системном введении, по всей видимости, связано с его быстрой инактивацией гидролазой амида жирных кислот.

Наблюдаемое нами одновременное подавление каннабиноидами аллодинии и спонтанных приступов боли хорошо согласуется с данными, свидетельствующими о том, что агонисты каннабиноидных рецепторов могут взаимодействовать как с пре -, так и с постсинаптическими каннабиноидными рецепторами, одновременно влияя и на секрецию нейромедиаторов из центральных терминалей первичных афферентов, и на активность постсинаптических нейронов дорсального рога (Hohmann A.G. et al. 1998, 1999; Chapman V., 2001; Morisset V., Urban I. 2001). Учитывая также, что при развитии невропатической боли наблюдается up-регуляция каннабиноидных рецепторов в структурах центральной нервной системы (Siegling A. et al., 2001; Lim G. et al., 2003), можно думать, что использование средств, активирующих каннабиноидергическую систему, будет вполне оправданным.



Заключение

В результате проведенной нами работы были созданы новые модели невропатической боли центрального происхождения с клиническими проявлениями в виде спонтанных приступов боли и аллодинии. Модели ЦБС характеризовались поведенческими проявлениями боли, изменениями в системе микроциркуляции, вовлечением иммуномодулирующих процессов, изменениями биоэлектрической активности на разных уровнях ноцицептивной системы, дизрегуляцией во взаимодействии антиноцицептивной и ноцицептивной систем.

На разработанных моделях центральной невропатичекой боли были получены доказательства, что в основе развития центральной невропатической боли лежат нейропатофизиологические процессы, вызывающие в ноцицептивной системе на первом и последующих уровнях передачи возникновение агрегатов сенситизированных нейронов, действующих как сетевой генератор усиленного самоподдерживающегося возбуждения; нейроиммунопатофизиологические процессы, модулирующие деятельность ноцицептивной системы; дизрегуляторные процессы, затрагивающие баланс возбуждение - торможение в антиноцицептивной и ноцицептивной системе. Указанные процессы объединяют ноцицептивные структуры в новую патодинамическую интеграцию - ПАС, результатом деятельности которой является центральный болевой синдром.

Патогенетически обоснованная коррекция может быть эффективна при воздействии на указанные процессы. Как показали исследования на моделях ЦБС, активация антиноцицептивной системы, приводящая к восстановлению баланса взаимодействия антиноцицептивная - ноцицептивная системы, подавляет клинические проявления ЦБС. Воздействие на тормозные нейромедиаторные системы, в частности каннабиноидергическую и серотонинергическую, приводит к усилению активности антиноцицептивной системы и подавлению экспериментальной центральной невропатической боли, что может быть использованы при разработке новых аналгетических средств для терапии центральной невропатической боли.

На основе теории генераторных и системных механизмов нейропатологических расстройств созданы новые экспериментальные модели центральной невропатической боли: модель центрального болевого синдрома спинального происхождения, модель центрального болевого синдрома тригеминального происхождения, модель центрального болевого синдрома таламического происхождения, модель механической аллодинии.

Патогенетической основой развития центральной невропатической боли является формирование в структурах регуляции болевой чувствительности патологической алгической системы, характеризующейся недостаточностью антиноцицептивного тормозного контроля, повышением возбудимости и реактивности ноцицептивных нейронов, как в первичных, так и в вышележащих центрах, включая кору головного мозга.

Нарушение тормозных процессов в центральных структурах ноцицептивной системы является условием для развития клинических симптомов центральной невропатической боли в виде аллодинии и спонтанных приступов боли, что подтверждается их возникновением при создании дефицита торможения в ноцицептивной системе и подавлением аллодинии и спонтанных приступов боли при нейроэлектрической и нейрохимической активации антиноцицептивной системы. Локализация нарушения торможения в ноцицептивной системе влияет на соматотопическую проекцию центральной невропатической боли, а степень нарушения торможения определяет симптоматику центральной невропатической боли.

У животных со спонтанными приступами боли и у животных с аллодинией отмечается гиперактивность нейронов в ноцицептивной системе, характеризующаяся снижением порога и увеличением амплитуды вызванных потенциалов в дорсальных рогах спинного мозга и сенсомоторной коре головного мозга, появлением деполяризационных волн в комплексе ВП в спинном мозге и синхронных постразрядов волн в комплексе ВП в сенсомоторной коре. Для животных со спонтанными приступами боли характерно наличие спонтанных эпилептиформные разрядов в сенсомоторной коре головного мозга.

Антитела к нейромедиаторам оказывают иммуномодулирующее влияние на центральную невропатическую боль. Антитела к тормозным нейромедиаторам - серотонину и ГАМК, обладают проноцицептивным эффектом, а антитела к возбуждающему нейромедиатору - глутамату обладают антиноцицептивным эффектом.

Одним из основных принципов коррекции центральной невропатической боли является восстановление нарушенного баланса во взаимодействии антиноцицептивной и ноцицептивной систем путем активации антиноцицептивной системы.

Электростимуляция дорсального ядра шва - ключевой структуры антиноцицептивной системы, подавляет центральный болевой синдром у животных.

Агонист серотониновых рецепторов 5HT-3 - квипазин снижает выраженность аллодинии и спонтанных приступов боли у животных с центральным болевым синдромом.

Агонисты каннабиноидных рецепторов анандамид, WIN55,212-2 и HU210 эффективно купирует экспериментальный центральный болевой синдром, подавляя патологическую алгическую систему, и могут быть использованы при разработке новых перспективных анальгетиков для включения в комплексную патогенетическую терапию центральных невропатических болевых синдромов.



Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Крыжановский Г.Н., Графова В.Н., Данилова Е.З., Игонькина С.И, Сахарова О.П. Болевой синдром спинального происхождения. // Бюл. эксперим. биол. и мед.- 1973.- Т. 76. - № 9. - С. 31-35.

2. Крыжановский Г.Н., Графова В.Н., Данилова Е.З., Игонькина С.И. Исследование болевого синдрома спинального происхождения (к концепции генераторного механизма болевого синдрома). // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1974. - Т. 78. - № 7. - С. 15-20.

3. Крыжановский Г.Н., Игонькина С.И., Графова В.Н., Данилова Е.З. Экспериментальная тригеминальная невралгия (к концепции генераторного механизма болевого синдрома). // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1974. - Т. 78. - № 11. - С. 16-20.

4. Крыжановский Г.Н., Игонькина С.И. Экспериментальные синдромы боли и зуда таламического происхождения. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1976. - Т.81. - № 6. - С. 651-653.

5. Игонькина С.И., Крыжановский Г.Н. Анальгезия при электростимуляции ядер среднего мозга у крыс с болевым синдромом спинального происхождения. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1977. - Т. 84. - № 7. - С. 16-19.

6. Крыжановский Г.Н., Игонькина С.И. Анальгезия, вызванная созданием генератора возбуждения в среднем мозгу. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1978. - Т. 85. - № 2. - С. 145-148.

7. Игонькина С.И., Крыжановский Г.Н. К анализу аналгезии, вызванной созданием генератора возбуждения в дорзальном ядре шва. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1979. - Т. 88. - № 9. - С. 278-281.

8. Алиев М.Н., Игонькина С.И., Крыжановский Г.Н. Образование генератора патологически усиленного возбуждения в хвостатом ядре при экспериментальном паркинсоническом синдроме. // Бюл. эксперим. биол. и мед. // 1981. - Т. 92. - № 12. - С. 657-659.

9. Крыжановский Г.Н., Игонькина С.И. Влияние электростимуляции околоводопроводного серого вещества среднего мозга на экспериментальную тригеминальную невралгию. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1983. - Т. 95. - № 6. - С. 15-17.

10. Крыжановский Г.Н., Петров Р.В., Графова В.Н., Данилова Е.И, Захарова Л.А., Игонькина С.И., Лебедева М.А., Михайлова А.А. Влияние миелопептидов на физиологическую и патологическую боль. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1986 - Т.102. - № 8. - С. 181-183.

11. Крыжановский Г.Н., Игонькина С.И., Трубецкая В.В. Влияние болевого синдрома спинального происхождения на болевые реакции, вызванные ноцицептивным термическим воздействием. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1987. - Т. 104. - № 8. - С. 149-151.

12. Крыжановский Г.Н., Игонькина С.И., Трубецкая В.В., Оеме П., Бинерт М. Влияние субстанции Р и ее фрагментов на физиологическую и патологическую боль. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1988. - Т.105. - № 6. - С. 655-657.

13. Крыжановский Г.Н., Горизонтова М.П., Игонькина С.И. Изменение системы микроциркуляции при болевом синдроме спинального происхождения. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1988. - Т.106. - № 9. - С. 280-282.

14. Крыжановский Г.Н., Игонькина С.И., Трубецкая В.В., Оеме П., Одарюк Ю. Влияние субстанции Р на активность нейронов антиноцицептивной системы. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1989. - Т.108. - № 12. - С. 651-654.

15. Крыжановский Г.Н., Горизонтова М.П., Игонькина С.И. Влияние верапамила на поведенческие и микроциркуляторные нарушения при болевом синдроме спинального происхождения. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1990. - Т. 109. - № 5. - С. 425-428.

16. Крыжановский Г.Н., Игонькина С.И., Трубецкая В.В., Изменение электрической активности нейронов дорсального ядра шва при развитии генератора патологически усиленного возбуждения в ноцицептивной системе. // Бюл. эксперим. Биол. и мед. - 1990. - Т. 110. - № 12. - С. 573-576.

17. Крыжановский Г.Н., Горизонтова М.П., Игонькина С.И, Зинкевич В.А., Сперанская Т.В., Карганов М.Ю. Изменения микроциркуляции при экспериментальной тригеминальной невралгии у крыс. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1991. - Т. 111. - № 1. - С. 9-11.

18. Горизонтова М.П., Игонькина С.И., Зинкевич В.А., Сперанская Т.В. Состояние системы микроциркуляции у хомячков в условиях моделирования центральных болевых синдромов. // Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1991. - № 6. - С. 12-15.

19. Крыжановский Г.Н., Игонькина С.И., Трубецкая В.В., Оеме П., Одарюк Ю. Влияние С-концевого фрагмента субстанции Р - СР5-11 на активность нейронов дорсального ядра шва. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1991. - Т. 112. - № 12. - С. 578-580.

20. Крыжановский Г.Н., Решетняк В.К., Игонькина С.И., Зинкевич В.А., Эпилептиформная активность в соматосенсорной области коры у крыс с тригеминальной невралгией. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1992. - Т. 114. - № 8 - С. 126-128.

21. Ветрилэ Л.А., Башарова Л.А., Игонькина С.И., Трекова Н.А.,.Евсеев В.А. Влияние антител к катехоламинам и серотонину на болевую чувствительность и развитие толерантности к морфину при экспериментальной наркомании. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1993. - Т. 116. - № 11. - С. 453-455.

22. Игонькина С.И., Чалова В.В. Влияние гиперактивации соматосенсорной коры на болевой синдром спинального происхождения. // Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1995. - № 1. - С. 12-14.

23. Трекова Н.А., Ветрилэ Л.А., Башарова Л.А., Игонькина С.И., Евсеев В.А. Влияние антител к дофамину и норадреналину на болевую чувствительность животных. // Журн. высш. нерв. деят. - 1996. - Т. 46. - № 3. - С. 604-606.

24. Евсеев В.А., Башарова Л.А Ветрилэ Л.А., Трекова Н.А., Игонькина С.И., Миковская О.И. Иммунотерапия экспериментальной наркомании антителами к серотонину и дофамину. // Бюл. экспер. биол. и мед. - 1996. - Т.122. - № 8. - С. 189-192.

25. Крыжановский Г.Н., Решетняк В.К., Зинкевич В.А., Игонькина С.И., Чалова В.В. Новая модель аллодинии. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1996. - Т. 122. - № 9. - С. 258-261.

26. Игонькина С.И., Решетняк В.К Влияние гидрокортизона на нейрогенный болевой синдром у крыс. // Эксперим. и клин. фармакол. - 1997. - Т. 60. - № 1. - С. 13-15.

27. Игонькина С.И., Крыжановский Г.Н., Зинкевич В.А., Башарова Л.А., Ветрилэ Л.А., Евсеев В.А., Решетняк В.К., Кукушкин М.Л. Влияние антител к серотонину на развитие нейропатического болевого синдрома. // Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1997 - N 2. - С. 6-8.

28. Крыжановский Г.Н., Зинкевич В.А., Игонькина С.И., Чалова В.В., Решетняк В.К., Кукушкин М.Л. Особенности электрической активности в дорсальных рогах крыс с болевым синдромом спинального происхождения. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1998. - Т. 125. - № 3. - С. 269-272.

29. Игонькина С.И., Крыжановский Г.Н., Кукушкин М.Л., Решетняк В.К., Зинкевич В.А., Башарова Л.А., Ветрилэ Л.А., Евсеев В.А. Влияние антител к дофамину на развитие нейропатического болевого синдрома у крыс. // Журн. высш. нерв. деят. - -2000. - Т.50. - № 6. - С. 999-1006.

30. Игонькина С.И., Кукушкин М.Л., Башарова Л.А., Ветрилэ Л.А., Миковская О.И., Евсеев В.А. Влияние антител к серотонину на биоэлектрическую активность сенсомоторной коры. // Бюл. эксперим. биол и мед. - 2001. - Т. 131. - № 5. - С. 517-519.

31. Кукушкин М.Л., Игонькина С.И. Роль 5-HT3 рецепторов в механизмах развития центрального болевого синдрома. // Бюл. эксперим. биол и мед. - 2003. - Т. 135.- № 6. - С. 647-651.

32. Евсеев В.А., Игонькина С.И., Ветрилэ Л.А.Иммунологические аспекты патологической боли. // Вестник РАМН. - 2003. - № 6. - С. 12-16.

33. Кукушкин М.Л, Игонькина С.И., Гуськова Т.А. Изучение механизмов боли, индуцированной пефлоксацином. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 2004. - Т. 137. - № 4. - С. 379-382.

34. Кукушкин М.Л., Игонькина С.И., Чурюканов М.В., Чурюканов В.В., Бобров М.Ю., Безуглов В.В., Грецкая Н.В. Роль агонистов каннабиноидных рецепторов в механизмах подавления центрального болевого синдрома. // Бюл. эксперим. биол и мед. - 2006. - Т. 142. - № 7. - С. 47-50.

35. Игонькина С.И. Влияние электростимуляции ядер среднего мозга на физиологическую боль и болевой синдром спинального происхождения. // Вопросы общего учения о болезни. - М., 1976. - С.116-118.

36. Игонькина С.И Генераторные механизмы аналгезии центрального происхождения. // Актуальные проблемы заболевания и выздоровления. - М., 1981. - С. 104-107.

37. Крыжановский Г.Н., Графова В.Н, Игонькина С.И., Луценко В.К., Никушкин Е.В., Полгар А.А. Базисные нервные процессы и их регуляция в механизмах формирования и ликвидации генераторов патологически усиленного возбуждения. // Патология нервной регуляции функций. - М., 1987. - С. 53-73.

38. Игонькина С.И., Трубецкая В.В. Нарушение антиноцицептивной регуляции и коррекция центральных болевых синдромов. // Нарушение механизмов регуляции и их коррекция. / Тезисы докладов IV Всесоюзного съезда патофизиологов . - Кишенев, 1989. -Т. 1. - С. 83.

39. Igonkina S.I., Zinkevich V.A., Trubetzkaya V.V. Antinociceptive dysregulation and correction of spinal pain syndrome. / Constituent Congress International society for Pathophysiology. - Moscow, 1991. - P. 49.

40. Igonkina S.I., Gorizontova M.P. Supression of pathological pain by Mg2+ and verapamil. // The International symposium. Physiological and biochemical basis of brain activity. - St.-Petersburg, 1994. - P. 27.

41. Kryzhanovsky G.N., Igonkina S.I.. Effect of substance P fragments on pathological pain. // The Pain Clinic. Abstracts of 7th International symposium. - Istanbul. 1996. - Suppl. 1, P. 353-354.

42. Igonkina S.I., L.A. Basharova, L.A.Vetrile, Zinkevich V.A. Effect of antiserotonin antibodies on the neuropathic pain syndrome. // XXXIII International Congress of Physiological Sciences. - St.Petersburg, 1997. - PO95.20.

43. Igonkina S.I., Basharova L.A., Vetrile L.A. Effect of immunization by the serotonin-protein conjugate on the neuropathhic pain syndrome in rats. //II Congress of the European Federation of IASP Chapters. Pain in Europe. - Barselona, 1997. - P. 374.

44. Igonkina S.I., Basharova L.A., Vetrile L.A., Kukushkin M.L. Induction of autoantibodies to dopamine and serotonin in rats with neuropathic pain syndrome. // The Pain Clinic. Abstracts of 8th World Congress. - Barselona, 1998. -P. 106.

45. Igonkina S.I., Kukushkin M.L., Basharova L.A., Vetrile L.A. Role of the antibodies to serotonin in mechanisms of the neuropathic pain. // Pathophysiology. - 1998. - V. 5. - Suppl. 1. - P. 198.

46. Kryzhanovsky G.N., Igonkina S.I. Effects of substance P fragments on pathological pain. // Pathophуsiology. - 1999. - № 6. - С. 179-184.

47. Игонькина С.И. Тактильная аллодиния, вызванная нарушением торможения в ноцицептивной системе. // Второй Российский конгресс по патофизиологии. - М., 2000.- С. 54.

48. Igonkina S.I. The involvement of serotonergic system in tactile allodynia. // Acta Physiologica Hungary. - 2002. - V. 89. - P. 87.

49. Кукушкин М.Л, Игонькина С.И., Гуськова Т.А. Влияние фторхинолонов на систему болевой чувствительности. // Боль. - 2004. - № 3. - С. 17-20.

50. Крыжановский Г.Н., Решетняк В.К., Кукушкин М.Л., Игонькина С.И., Графова В.Н., Смирнова В.С. Патологические интеграции в системе болевой чувствительности при центральном болевом синдроме. // Боль. - 2004 - № 4. - С. 10-15.

51. Игонькина С.И., Чурюканов М.В., Кукушкин М.Л., Чурюканов В.В., Бобров М.Ю., Безуглов В.В., Грецкая Н.В. Влияние анандамида на центральный болевой синдром. // Третий Российский конгресс по патофизиологии.- Москва, 2004. - С. 29-30.

52. Игонькина С.И., Кукушкин М.Л., Ветрилэ Л.А., Евсеев В.А Влияние антител к глутамату на центральный болевой синдром. // Патогенез. - 2005. - № 1. - С. 13-14.

53. Кукушкин М.Л., Игонькина С.И., Чурюканов В.В., Чурюканов М.В., Бобров М.Ю., Безуглов В.В., Грецкая Н.В. Обезболивающий эффект анандамида при центральном болевом синдроме. // Боль. - 2005. - № 1 - С. 43-47.

54. Кукушкин М.Л., Игонькина С.И., Чурюканов М.В., Чурюканов В.В., Бобров М.Ю., Безуглов В.В., Грецкая Н.В. Влияние агонистов каннабиноидных рецепторов на центральный болевой синдром. // Патогенез. - 2005. - № 1. - С. 15-16.

55. Игонькина С.И., Кукушкин М.Л., Чурюканов М.В., Чурюканов В.В., Бобров М.Ю., Безуглов В.В., Грецкая Н.М. Анальгетическое влияние агонистов каннабиноидных рецепторов на неврогенную боль центрального происхождения. // Патогенез. - 2005. - № 3. - С. 77-81.

56. Игонькина С.И., Кукушкин М.Л., Ветрилэ Л.А., Евсеев В.А Влияние антител к глутамату на центральный болевой синдром. // Патогенез.- 2005. - № 1. -С. 13-14.

57. Kukushkin M.L., Igonkina S.I., Churukanov M.V., Churukanov V.V., Bobrov M Ju., Bezuglov V.V., Gretskaya N.M. Analgesic Effect Of Cannabinoids On Central Pain Syndrome. // Chinese journal of pathophysiology. - 2006. - V. 22. - № 13. - Suppl. - P. 430.

58. Игонькина С.И., Кукушкин М.Л., Ветрилэ Л.А. Влияние антител к тормозным и возбуждающим нейромедиаторам на развитие нейрогенной боли. // Патогенез. - 2006. - № 1. - С. 52-53.

59. Kukushkin M.L., Igonkina S.I., Churukanov M.V., Churukanov V.V., Bobrov M. Ju., Bezuglov V.V., Gretskaya N.M^. Cannabiniods relieve central pain syndrome. // Europ. J. of Pain. - 2006. - V.10. - P. S48.

60. Evseev V.A., Vetrile L.A., Karpova M.N., Kukushkin M.L., Igonkina S.I., Kuznetzova L.V. Immunobiological specifity of antibodies to glutamate and GABA in the experimental epilepsy and pain syndrom. // International symposium. Interaction of the nervous and immune systems in health and disease. - St.Petersburg, 2007. - P. 21-22.

61. Кукушкин М.Л., Игонькина С.И., Ветрилэ Л.А., Евсеев В.А. Влияние антител к глутамату и ГАМК на развитие центрального болевого синдрома. // Боль. - 2007. - № 3. - С. 8-11.

62. Кукушкин М.Л., Игонькина С.И., Чурюканов В.В., Чурюканов М.В., Бобров М.Ю., Безуглов В.В., Грецкая Н.М. Болеутоляющий эффект каннабиноидов. // Психофармакология и биологическая наркология. - 2007. - Т 7. - Спец. выпуск.- Часть 1.- С. 1-1711.

63. Кукушкин М.Л., Игонькина С.И., Ветрилэ Л.А., Евсеев В.А. Влияние антител к глутамату и ГАМК на развитие центрального болевого синдрома. // Боль. - 2007. - № 3. - С. 8-11.

64. Игонькина С.И., Ветрилэ Л.А., Трекова Н.А., Кукушкин М.Л., Евсеев В.А. Участие антител к глутамату и ГАМК в нейрогенных механизмах болевых синдромов. // Нейроиммунология. - 2007. - Т. 5. - № 2. - С. 52-53.

65. Игонькина С.И., Чурюканов М.В., Кукушкин М.Л., Чурюканов В.В., Бобров М.Ю., Безуглов В.В., Грецкая Н.М. Исследование анальгетического эффекта ванилоидов на модели центрального болевого синдрома. // Вертеброневрология. - 2008. - Т. 15. - № 1-2. - С. 58-59.

66. Игонькина С.И., Ветрилэ Л.А., Кукушкин М.Л., Евсеев В.А. Влияние антител к нейромедиаторам антиноцицептивной системы на нейрогенную боль. // Патогенез.- 2008. - № 2. - С. 49.

67. Kukushkin M.L., S.I. Igonkina S.I., Churukanov M.V. Аnalgesic effect of cannabinoid receptor agonists on animal model of central pain. // Abstracts of 12th Word Congress on Pain. - Glasgow, 2008. - PW 051.

Размещено на Allbest.ru

...