Последствия воздействий ионизирующих излучений: цитогенетические изменения в лимфоцитах крови человека

Размещено на http://www.allbest.ru/

Последствия воздействий ионизирующих излучений: цитогенетические изменения в лимфоцитах крови человека

03.00.01-03 - радиобиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

Снигирева Галина Петровна

Москва 2009

Работа выполнена в Российском научном центре рентгенорадиологии «Росмедтехнологий»

Научный консультант:

доктор биологических наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Пелевина Ирина Ивановна

доктор биологических наук, профессор

Севанькаев Александр Васильевич

доктор биологических наук

Нугис Владимир Юрьевич

Ведущая организация - Российский научный центр радиологии и хирургических технологий «Росмедтехнологий», г. Санкт-Петербург

Защита состоится «____»__________2009 г. в _____ часов на заседании диссертационного совета Д.501.00.65 при Московском Государственном Университете им. М.В.Ломоносова по адресу: 119991, Москва, Ленинские горы, дом 1, МГУ, корп. 12, Биологический факультет, ауд. 557.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Биологического факультета МГУ им. М.В.Ломоносова. Отзывы просим присылать по адресу: 119991, Москва, Ленинские горы, МГУ, биологический факультет. Факс (495) 939-11-15

Автореферат разослан «___»_________2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук Веселова Т.В.

излучение аберрация хромосомный

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Человеку приходится сталкиваться с источниками ионизирующего излучения при самых разных обстоятельствах. Наряду с медицинским облучением населения в диагностических и терапевтических целях, использование радиоактивных источников в различных областях науки, промышленности и медицины не исключает возможности профессионального облучения специалистов. В условиях постоянного повышенного радиационного фона работают космонавты, которые совершают длительные полеты на околоземной орбите.

Применение ядерных технологий с использованием источников ионизирующего излучения в военных и мирных целях могут создавать опасность радиационных аварий, когда в результате радиоактивного загрязнения местности облучению могут подвергаться многочисленные группы людей, а внештатные ситуации на предприятиях атомного комплекса могут приводить к переоблучению персонала. Примерами таких ситуаций являются аварии на ядерном реакторе в Селлафильде в Англии в 1957г., на производственном объединении «Маяк» на Урале в 1957г., на атомной станции Три Майл Айленд в США в 1979г. и Чернобыльской атомной станции в 1986г.

Для того чтобы предсказать тяжесть радиационного поражения организма, вовремя оказать эффективную помощь, а также оценить возможные последствия облучения, необходимо иметь достоверную информацию о полученной дозе ионизирующего излучения. При радиационных авариях, в случаях неконтролируемого облучения данные физической дозиметрии часто бывают ограничены, нуждаются в уточнении или могут полностью отсутствовать. Подобные ситуации имели место при облучении населения в результате ядерных взрывов на Семипалатинском полигоне, сброса радиоактивных отходов в р.Теча в Челябинской области, аварии на Чернобыльской АЭС. В таких случаях особое значение приобретают биологические маркеры радиационного воздействия. На сегодняшний день общепризнанно, что наиболее информативными и чувствительными являются цитогенетические показатели, а именно хромосомные аберрации в лимфоцитах периферической крови (Дубинина, 1977; Севанькаев, Насонов, 1979; Пяткин, Нугис, 1981; Bender et al, 1988; Tawn, Whitehouse, 2003; Terzoudi, Pantelias, 2006; Simon et al., 2007, Obe, 2007).

Принципы цитогенетического метода дозиметрии и индикации радиационного воздействия достаточно убедительно обоснованы во многих отечественных и зарубежных исследованиях, результаты которых послужили основой для выработки рекомендаций ВОЗ, МАГАТЭ и НКДАР ООН по практическому использованию анализа хромосомных аберраций в лимфоцитах крови в качестве тест-системы для количественной оценки мутагенных факторов радиационной природы (WHO, 1976; IAEA, 1986, 2001; UNSCEAR, 1986). Информация о «биологической» дозе, полученная с помощью цитогенетических методов, шире, чем ее физическое значение, т.к. она отражает не только результат радиационного воздействия, но и его индивидуальную радиочувствительность, что позволяет более корректно прогнозировать ранние и отдаленные последствия облучения.

Анализ хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови нашел широкое применение при молекулярно-эпидемиологическом обследовании людей, подвергшихся облучению (Brogger et al., Hagmar et al., 1990, 1994; Brooks, 1999; Bonassi et al., 2000, 2001, 2002; Durante et al., 2001;). Известно, что повреждение генетического аппарата клетки, которое может проявляться на уровне структурных перестроек хромосом в виде симметричных транслокаций, в ряде случаев лежит в основе радиационного канцерогенеза (Rowley, 1998; Bonassi, 1999; Mitelman et al., 1997, 2006; Rossner et al., 2005). Однако к нерешенным вопросам относится роль соматических мутаций в развитии неопухолевой патологии. Повышенный уровень хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови может предшествовать развитию патологических процессов или просто быть индикатором неблагополучия в организме человека. Имеющиеся данные о взаимосвязи хромосомных аберраций с соматическими заболеваниями у лиц, подвергшихся облучению в процессе профессиональной деятельности или в результате проживания на радиационно-загрязненных территориях, не являются однозначными и свидетельствуют о необходимости проведения систематических исследований в этом направлении для получения более детальной информации.

В большинстве случаев, при которых люди подвергаются воздействию радиации, как от естественных, так и от техногенных источников, речь идет об облучении в небольших дозах. Поэтому главную озабоченность вызывают последствия радиационного воздействия в малых дозах, особенность биологического действия которых до сих пор является предметом активных дискуссий (Воробцова, 1974, 1991, 2006; Кузин, 1977, 1991, 1995; Шевченко, Померанцева, 1985; Спитковский, 1992; Бурлакова, 1994; Пелевина и др., 1996, 2003; Upton, 2001; Bonner, 2003; Morgan, 2003; Preston, 2003; Булдаков и Калистратова 2003, 2005; Enns et al., 2004; Mothersill, Seymour, 2004 и др.; Москалев и Зайнуллин, 2004). При этом количественная оценка малых доз, а также возможных последствий облучения остаются проблемами, сталкивающимися с серьезными научными и методическими трудностями. В связи с этим одной из актуальных задач радиационной биологии является разработка чувствительных критериев, с помощью которых можно объективно судить об опасности воздействия радиации, особенно в малых дозах, на организм человека. Естественно, что эта задача может быть успешно решена только на основе данных цитогенетического мониторинга людей, подвергшихся облучению при различных аварийных и чрезвычайных ситуациях.

Цель и задачи исследования

Основной целью работы было изучение цитогенетических эффектов облучения в лимфоцитах периферической крови человека и возможность их применения для количественной оценки воздействия ионизирующего излучения и прогноза неблагоприятных медицинских последствий.

Поставленная цель определила решение следующих задач:

1) исследовать спектр и частоту хромосомных аберраций стабильного и нестабильного типов в лимфоцитах периферической крови лиц, подвергшихся облучению при различных ситуациях:

у профессионалов, подвергшихся радиационному воздействию в процессе производственной деятельности и при внештатных ситуациях;

у жителей загрязненных радионуклидами территорий;

у участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС;

2) изучить дозовую зависимость частоты хромосомных аберраций при воздействии гамма- и бета-излучения in vitro при разных мощностях дозы и построить калибровочные кривые «доза-эффект»;

3) изучить цитогенетические эффекты разных видов ионизирующего излучения (гамма-, бета- и космическое излучение) и определить их относительную биологическую эффективность;

4) оценить индивидуальные и среднегрупповые дозы радиационного воздействия по частоте хромосомных аберраций стабильного и нестабильного типов в обследованных группах;

5) установить взаимосвязь между заболеваемостью и уровнем цитогенетических повреждений в лимфоцитах периферической крови в группах профессионалов и участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС;

На защиту выносятся следующие положения:

1. Цитогенетические повреждения в лимфоцитах периферической крови лиц, подвергшихся облучению в результате аварийных и чрезвычайных ситуаций, являются объективным показателем радиационного воздействия и могут быть использованы для биологической оценки дозы.

2. Хромосомные аберрации нестабильного типа являются чувствительным биологическим маркером, который может быть использован для прогноза неблагоприятных медицинских последствий облучения и формирования групп риска в отношении развития соматической патологии.

Научная новизна работы. Впервые проведено масштабное цитогенетическое обследование людей, которые подвергались облучению преимущественно в низких дозах вследствие радиационных аварий (население, проживающее на загрязненных радионуклидами территориях) и при различных ситуациях (профессионалы, подвергшиеся радиационному воздействию в процессе производственной деятельности и участники ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС).

Впервые представлены результаты многолетнего цитогенетического мониторинга космонавтов, принимавших участие в полетах на станции «Мир» и Международной космической станции (МКС).

Впервые для профессионального облучения проведено сравнение цитогенетической эффективности разных видов ионизирующего излучения (гамма-, бета-, космическое излучение) и определены коэффициенты относительной биологической эффективности (ОБЭ).

Получены калибровочные кривые «доза-эффект» для хромосомных аберраций стабильного и нестабильного типов, позволившие оценить индивидуальные и среднегрупповые дозовые нагрузки в ранние и отдаленные периоды после радиационного воздействия.

Установлена взаимосвязь между цитогенетическими показателями крови и результатами медицинского обследования лиц, подвергшихся радиационному воздействию в процессе профессиональной деятельности и при аварийной ситуации.

Практическое значение работы. Результаты работы используются в практической деятельности Республиканского экспертного совета Российского научного центра рентгенорадиологии по установлению связи заболеваний с предшествовавшим радиационным воздействием (цитогенетическое обследование участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС, а также лиц, подвергшихся облучению в результате других аварийных и чрезвычайных ситуаций). По частоте стабильных хромосомных аберраций проводится оценка доз облучения, а результаты цитогенетического обследования являются одним из критериев при формировании групп риска в отношении развития соматической патологии. Полученная информация позволяет более эффективно применять профилактические и лечебные мероприятия, направленные на снижение и возможное предотвращение негативных последствий облучения.

Результаты работы использованы при подготовке методических указаний и методических рекомендаций МЗ РФ, а также пособий для врачей.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на: Международном рабочем совещании «Методы в радиационной цитогенетике», 1991 (Мюнхен, Германия); Международном совещании «Определение доз у населения после аварии на Чернобыльской АЭС», 1994 (Мюнхен, Германия); III Международном рабочем совещании «Методология реконструкции доз», 1995 (Брюссель, Бельгия); Международной конференции «Радиация и здоровье», 1996 (Беэр Шева, Израиль); Рабочем совещании НАТО, 1997 (Киев); XII Международном симпозиуме «Человек в космосе», 1997 (Вашингтон, США); III и V съездах по радиационным исследованиям, 1997, 2006 (Москва); IV Международной конференции по экологическому образованию, 1998 (Пущино); XI конференции по космической биологии и авиакосмической медицине, 1998 (Москва); Международной научной конференции в рамках года России на Украине, 2003 (Одесса); Международном симпозиуме «Хроническое радиационное воздействие: возможности биологической индикации», 2000 (Челябинск); Международной конференции «Радиоактивность при ядерных взрывах и авариях», 2000 (Москва); Международной конференции «Проблемы радиационной генетики на рубеже веков», 2000 (Москва); II Международном рабочем совещании «Радиационная безопасность пилотируемых полетов на Марс», 2003 (Дубна); Международных конференциях «Генетические последствия чрезвычайных и радиационных ситуаций», 2002, 2005 (Москва, Дубна); I и II Международном совещании «Человек и электромагнитные поля», 2003, 2007 (Саров); II Международной конференции «Современные проблемы генетики, радиобиологии, экологии и эволюции», 2005 (Ереван); VI Международной научной конференции «Экология человека и природа», 2004 (Плес); XVII рабочем совещании NASA, 2006 (Санкт-Петербург); VII Международной конференции по применению источников радиации в промышленности, 2008 (Прага, Чехия); XXXVI Международной конференции Европейского общества по радиационным исследованиям, 2008 (Тур, Франция); Международной научно-практической конференции «Чернобыльские чтения - 2008». 2008 (Гомель); Международной конференции «Системы жизнеобеспечения как средство освоения человеком дальнего космоса», 2008 (Москва); научно-практической конференции РНЦРР, 2009 (Москва); V съезде радиобиологического общества Украины, 2009 (Ужгород).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 137 печатных работ, в том числе: 25 статей в российских и зарубежных журналах из списка ВАК, 29 статей в сборниках и журналах, 5 методических указаний и рекомендаций МЗ РФ и 54 тезиса международных конференций.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на стр. машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы (глава I), описания объектов и методов исследования (глава II), изложения полученных результатов и их обсуждения (главы III, IV, V), выводов и списка литературы. Текст иллюстрирован таблицами и рисунками. Список литературы включает отечественных и зарубежных работ.

2. СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Во введении дано обоснование актуальности выбранной темы в связи с имеющимися на сегодняшний день исследованиями, посвященными оценке и прогнозу последствий радиационного воздействия в малых дозах на человека. Сформулированы цели и задачи исследования.

В I главе представлен обзор данных литературы по цитогенетическим показателям крови и их применению для оценки мутагенных факторов окружающей среды, с акцентом на воздействие радиационных факторов. Обсуждается возможность использования анализа хромосомных аберраций в лимфоцитах крови для индикации и количественной оценки радиационного воздействия. Представлен обзор цитогенетических методов, которые применяются в биологической дозиметрии.

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Характеристика групп обследования. По отношению к облучению все обследованные в рамках представленной работы люди разделены на две группы. Первая группа объединяет профессионалов, т.е. лиц, которые постоянно или временно контактируют с источниками ионизирующего излучения в процессе производственной и научной деятельности. Вторая группа включает население, которое подверглось радиационному воздействию в результате различных аварийных ситуаций. В отдельную группу выделены участники ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС (ликвидаторы). Характеристика групп (включая и группы сравнения) представлена в таблице 1.

Цитогенетическое обследование включало анализ нестабильных хромосомных аберраций с применением классического цитогенетического метода и стабильных хромосомных аберраций с применением метода флуоресцентной гибридизации in situ с ДНК-пробами (FISH метод). С помощью классического цитогенетического метода обследовано 2084 человека, с применением FISH метода -191человек.

Методика проведения цитогенетического анализа. Культивирование лимфоцитов периферической крови и приготовление хромосомных препаратов проводили с использованием стандартного протокола (Moorhead et al., 1960, Bauchinger et al., 1998). Культуральная среда RPMI 1640 содержала 15% эмбриональной телячьей сыворотки, 2,5% фитогемагглютинина, 10 мМ 5-бромдезоксиуридина и антибиотики. Инкубацию клеточной культуры проводили при 370С в течение 48 часов.

Препараты метафазных хромосом, предназначенные для анализа нестабильных хромосомных аберраций, окрашивали с использованием технологии «флюоресценция плюс краситель Гимза» (FPG-метод), позволяющей определять долю клеток, находящихся на стадии первого митотического цикла (Apelt et al., 1981). При микроскопировании учитывали все типы хромосомных аберраций, распознаваемые без кариотипирования.

Таблица 1 Характеристика обследованных групп

Группы	Число обследованных	Возраст, лет	Период обследования, гг.
Лица, профессионально контактирующие с ионизирующим излучением
Сотрудники РФЯЦ-ВНИИЭФ (г.Саров)	«гамма» группа*	108	45 - 85	1998 - 2000
	«бета» группа**	79	45 - 84	2003 - 2005
Космонавты	48	29 - 61	1992 - 2008
Участники ликвидации последствий аварии на ЧАЭС
Ликвидаторы аварии на ЧАЭС 1986-89гг.	1044	29 - 73	1990 - 2007
Ликвидаторы-профессионалы***	60	36 - 72	1995 - 2003
Жители территорий, загрязненных радионуклидами вследствие радиационных аварий
Жители Брянской области	80	27 - 68	1992 - 1994
Жители Алтайского края	226	25 - 75	1992 - 1994
Жители Павлодарской обл. Казахстана	18	55 - 59	2007
Жители с. Муслюмово, Челябинской обл.	116	5 - 78	1993 - 1994
Жители окрестности АЭС «Три Майл Айленд», США	29	25 - 75	1994 - 1995
Группы сравнения (контрольные группы)
Жители Московского региона	114	15 - 69	1990 - 2006
Жители г.Сарова	49	45 - 79	1998 - 2000
Жители с. Тюменцево (Алтайский край)	30	45 - 79	1992 - 1994
Жители Павлодарского района Казахстана	47	50 - 56	2004 - 2007
Космонавты до I-го полета	51	26 - 60	1992 - 2008

*сотрудники, подвергавшиеся гамма-излучению в процессе профессиональной деятельности;

**сотрудники, контактировавшие с бета-излучением трития и его окиси;

***ликвидаторы, работающие на предприятиях атомной промышленности.

Анализ стабильных хромосомных аберраций проводили с помощью метода окрашивания, основанного на молекулярной гибридизации ДНК зонда с ДНК метафазных хромосом, фиксированными на предметном стекле (in situ) и с последующим использованием флуоресцентной микроскопии для детекции результатов гибридизации (FISH метод). Для анализа использовали коктейль проб: меченые биотином ДНК-пробы для 1, 4 и 12 хромосом в комбинации с меченой дигоксигенином панцентромерной пробой. Процедуру окрашивания проводили по методу (Pinkel et al.,1986) в модификации (Bauchinger et al., 1993). Для выявления гибридных молекул ДНК применяли иммунохимическое окрашивание препаратов хромосом с использованием FITC-меченого стрептавидина и конъюгированного с биотином антистрептавидина для хромосомных проб и АМСА - меченых антител для панцентромерных проб. Часть препаратов обрабатывали с помощью коммерческих наборов фирмы MetaSystems GmbH, которые включают ДНК зонды, специфичные к 1, 4 и 12 хромосомам человека. При проведении цитогенетического анализа учитывали «полные» (реципрокные, tc) и «неполные» (нереципрокные, ti) транслокации, инсерции и комплексные хромосомные обмены. Пересчет частоты обменных аберраций с участием окрашенных хромосом на геномную частоту этих событий проводили по формуле (Lucas et al., 1992).

Статистический анализ результатов исследования проводили с применением параметрических и непараметрических методов, который включал анализ различий и связей (Гланц, 1999; Савилов и др., 2004; Реброва, 2006). Для расчетов использовали пакет программ STATISTICA (StatSoft. USA-Russia, версия 6.1). Достоверность статистических гипотез оценивал при пороговом уровне значимости р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Спонтанный уровень хромосомных повреждений в лимфоцитах крови

Для корректной оценки результатов цитогенетического обследования у лиц, подвергшихся радиационному воздействию при различных ситуациях, проведен анализ уровня хромосомных повреждений в группах сравнения, в которые вошли люди, предположительно никогда ранее не подвергавшиеся воздействию ионизирующего излучения (кроме медицинских диагностических исследований).

Нестабильные хромосомные аберрации. Средняя частота хромосомных аберраций в группе жителей Московского региона в 1,5 - 2 раза достоверно ниже аналогичного показателя в других группах сравнения (табл. 2). Повышенный уровень хромосомных аберраций обусловлен, главным образом, аберрациями хроматидного типа и ацентрическими фрагментами. Одной из причин повышенного уровня ацентрических фрагментов может быть хроническое воздействие малых доз ионизирующего излучения с низкой ЛПЭ (Balakrischan, Rao, 1999; Севанькаев и др., 2005). Аберрации хроматидного типа являются в основном показателем влияния на организм мутагенных факторов химической природы. Повышенный уровень хроматидных аберраций может свидетельствовать о загрязнении окружающей среды мутагенами нерадиационной природы, в том числе различными химическими веществами и пестицидами.

Особого внимания заслуживает частота дицентриков и центрических колец - маркеров радиационного воздействия. По полученным данным, этот показатель имеет наибольшее значение в группе космонавтов, обследованных до первого полета (в 5 раз достоверно выше аналогичного показателя в группе жителей Московского региона). По-видимому, уровень дицентриков и центрических колец в крови космонавтов до полета отражает радиационную нагрузку, полученную за счет рентгенодиагностических исследований, которые неоднократно проводят космонавтам в процессе подготовки к полету. Одной из причин более высокой частоты дицентриков и центрических колец в группе жителей г. Сарова является влияние повышенного радиационного фона в городе, обусловленного деятельностью предприятия атомного комплекса.

Стабильные хромосомные аберрации. Средняя частота транслокаций (FISH метод) с участием окрашенных хромосом, в группе жителей Павлодарского района Казахстана в 2 раза выше аналогичного показателя в группе жителей Московского региона (табл. 2). Такие различия нельзя объяснить только с позиции возраста - средний возраст в контрольной группе из Москвы составляет 44 года, а у жителей Казахстана - 55 лет. Скорее всего, повышенный уровень стабильных хромосомных аберраций может быть результатом воздействия на организм мутагенных факторов радиационной и химической природы. Подтверждением данного предположения является наблюдаемый повышенный уровень аберраций хромосомного и хроматидного типов при анализе с помощью классического цитогенетического метода.

В группе космонавтов средняя частота транслокаций также почти в 2 раза выше по сравнению с группой жителей из Московы. Результаты, полученные с помощью FISH метода при обследовании космонавтов, подтверждают возможное влияние радиационного воздействия за счет рентгенодиагностических процедур.

Таким образом, цитогенетическое обследование групп сравнения, показало, что хромосомные аберрации с небольшой частотой встречаются у большинства абсолютно здоровых людей, не подвергавшихся техногенному облучению. Спонтанный уровень хромосомных аберраций зависит в первую очередь от места проживания, т.е. определяется экологическими условиями. Существенное влияние на уровень хромосомных аберраций могут оказывать рентгенодиагностические исследования, а также производственные и бытовые факторы генотоксического характера, с которыми человеку приходится сталкиваться на протяжении всей жизни. Достоверных различий по частоте нестабильных хромосомных аберраций в зависимости от пола, возраста и курения не выявлено. В целом, все обследованные группы лиц характеризуются достаточно низкими значениями частот стабильных и нестабильных хромосомных аберраций, которые близки с данными других исследователей.

2. Цитогенетические повреждения в лимфоцитах крови лиц, подвергшихся радиационному воздействию при различных ситуациях

2.1 Профессиональное облучение

2.1.1. Космонавты. Во время космических полетов (КП) космонавты, находясь в экстремальных условиях, постоянно подвергаются воздействию комплекса неблагоприятных для функционирования организма факторов (невесомость, перегрузки, измененный газовый состав, стресс и др.), среди которых следует особо выделить ионизирующее излучение. Контроль уровня облучения во время КП, осуществляемый с помощью физических методов дозиметрии, не всегда позволяет получить полную и объективную информацию о степени опасности космического излучения для организма космонавтов. Это связано с особенностями космического излучения, а также с пролонгированным характером облучения в течение длительного времени.

Пребывание человека в космосе приводит к увеличению частоты хромосомных аберраций - четко прослеживается рост общей частоты хромосомных аберраций, а

Таблица 2 Результаты цитогенетического обследования групп сравнения (контрольные группы)

Группы	Классический цитогенетический метод	FISH метод
	Число обследованных (число клеток)	Частота хромосомных аберраций на 100 кл ± m	Число обследованных (число клеток)	Частота транслокаций Fp на 100 кл ± m
		ХА	диц+ц.к	ф	хрмт
Московский регион	114 (51430)	0,660,04	0,020,01	0,230.02	0,410,03	16 (29043)	0,17±0,03
г. Саров	49 (51893)	0,92±0,04*	0,08±0,01*	0,32±0,02	0,51±0,03	Нет данных	Нет данных
с. Тюменцево	36 (9377)	1,07±0,12*	0,03±0,02	0,57±0,09*	0,470,08	Нет данных	Нет данных
Павлодарский р-он, Казахстан	47 (34940)	1,49±0,06*	0,16±0,02*	0,880,04*	0,880,04*	46 (50562)	0,34±0,03*
Космонавты до 1-го полета	51 (44716)	1,20±0,05*	0,10±0,01*	0,43±0,03*	0,620,04*	5 (9710)	0,30±0,02*

* - значения, достоверно отличающиеся от аналогичных показателей в группе из Московского региона, p<0,05, t-критерий Стьюдента. ХА -все хромосомные аберрации; диц+ц.к- дицентрики и центрические кольца; ф - ацентрические фрагменты; хрмт - хроматидные аберрации, Fp - частота транслокаций с участием только окрашенных хромосом.

также ацентрических фрагментов и маркеров радиационного воздействия-дицентриков и центрических колец с увеличением продолжительности КП.

Если в лимфоцитах крови космонавтов, принимавших участие в краткосрочных полетах (экспедиции посещения, ЭП), частота дицентриков и центрических колец в 2 раза превышает дополетный уровень, то после длительных полетов (основные экспедиции, ЭО) этот показатель выше почти в 4 раза (табл. 3).

Таблица 3 Результаты цитогенетического обследования космонавтов после первого КП

Группы	Число обследованных (число клеток)	Частота хромосомных аберраций на 100 кл ± m
		ХА	диц + ц.к	ф	хрмт
До 1-го полета	51 (44716)	1,20 0,05	0,10 0,01	0,43 0.03	0,62 0,043
После ЭП	17 (17373)	1,41 ± 0,09	0,19 ± 0,03*	0,54 ± 0,06	0,60 ± 0,06
После ЭО	20 (16478)	1,92±0,10*	0,38±0,05*	0,63 ± 0,06*	0,80 0,06

*- значения, достоверно отличающиеся от дополетного уровня, p<0,05, t-критерий Стьюдента.

При смене космической станции в 2001 году (переход космонавтов со станции «Мир» на МКС) радиационная нагрузка на космонавтов по данным физической дозиметрии снизилась примерно в 2,5 раза для ЭО и в 3 раза для ЭП. Данные цитогенетического анализа также свидетельствуют о снижении радиационной нагрузки - частота маркеров радиационного воздействия уменьшилась в 1,6 раза как у космонавтов, участвовавших в ЭП, так и у участников ЭО (рис. 1).

Рис. 1 Средняя частота дицентриков и центрических колец в лимфоцитах крови космонавтов после первого полета на станции «Мир» и МКС

Одним из дополнительных факторов, оказывающих влияние на уровень хромосомных аберраций, является внекорабельная деятельность космонавтов (ВКД). Анализ связи частоты хромосомных аберраций с длительностью работы в открытом космосе показал, что у космонавтов, которые находились в открытом космосе 18 и более часов, наблюдается статистически достоверное увеличение частоты дицентриков и центрических колец в лимфоцитах крови (рис. 2).

Рис. 2 Влияние продолжительности работы в открытом космосе на частоту хромосомных аберраций в лимфоцитах крови космонавтов.

Большинство обследованных космонавтов участвовали в полетах неоднократно. Длительность межполетных периодов у космонавтов, участвовавших в нескольких полетах, варьировала от 200 до 2000 дней. Это позволило проследить динамику частоты нестабильных аберраций хромосом (дицентриков и центрических колец) в группе космонавтов в послеполетном периоде (рис. 3). Видно, что уже в течение первого года после завершения полета происходит существенное снижение частоты клеток с дицентриками и центрическими кольцами. При этом частота хромосомных аберраций остается повышенной по сравнению с дополетным значением и сохраняется такой на протяжении всего периода наблюдения.

Рис. 3 Послеполетная динамика средней частоты дицентриков и центрических колец в лимфоцитах крови космонавтов (I - до первого КП; II- после первого КП: III - через 0,6-1,8 лет, IV - через 1,9-3,1 лет, V - через 3,4-5,9 лет)

Стабильные хромосомные аберрации. Индивидуальная частота транслокаций для большинства из 12 космонавтов, обследованных FISH методом, превышает контрольный уровень как в дополетном, так и послеполетном периоде. Причем следует отметить, что только у 3-х космонавтов были отмечены достоверные различия с контролем. Более высокий дополетный уровень транслокаций наблюдался у космонавтов, которые в период обследования участвовали в одном и более КП. Основываясь на данных физической дозиметрии во время КП, были выделены 3 группы космонавтов. Первую из них составили космонавты, обследованные до первого КП. Во вторую группу вошли космонавты, обследованные после первого и перед вторым КП. Третья группа объединила космонавтов, обследованных после второго и третьего КП. Следует отметить, что во всех трех группах средняя частота транслокаций достоверно превышает контрольный уровень (рис. 4). Для космонавтов, обследованных после второго и третьего КП, наблюдается достоверное, по сравнению с дополетным периодом, увеличение в 1,5 раза средней частоты транслокаций.

Таким образом, результаты цитогенетического обследования космонавтов показали, что КП приводят к увеличению частоты стабильных и нестабильных аберраций хромосом в лимфоцитах периферической крови. Частота дицентриков и центрических колец, являющихся маркерами радиационного воздействия, зависит от продолжительности КП и, соответственно, величины накопленной дозы космического излучения.

Рис. 4 Средняя частота транслокаций в лимфоцитах крови космонавтов до и после КП (I-контроль, II - до 1-го КП, III - после 1-го КП, IV - после 2-3-го КП)

Работа в открытом космосе приводит к дополнительному увеличению частоты цитогенетических нарушений и, следовательно, к увеличению радиационного риска для космонавтов. В межполетном периоде отмечается снижение частоты аберраций хромосом, однако даже через несколько лет после окончания полета в лимфоцитах крови космонавтов сохраняется повышенный уровень хромосомных аберраций.

2.1.2. Цитогенетическое обследование профессионалов г. Сарова. «Гамма» группа объединяет участников полигонных испытаний ядерных боеприпасов, а также сотрудников Всесоюзного научно-исследовательского института экспериментальной физики (ВНИИЭФ), работавших на исследовательских реакторах. Примерно у половины профессионалов (52%) суммарная доза, накопленная за период работы, не превышала 200 мЗв, остальные имели дозы более 500 мЗв, при этом у 7 из них доза превышала 1000 мЗв. «Бета» группа объединяет сотрудников ВНИИЭФ, которые подвергались воздействию бета-излучения трития и его окиси в процессе производственной деятельности. Суммарные дозы, накопленные за период работы, составили от 20 до 990 мЗв, при этом около 85% специалистов имели суммарные дозы менее 200 мЗв. Стаж работы в радиационно-опасных условиях производства для профессионалов обеих групп составляет в среднем 30 - 40 лет.

Нестабильные хромосомные аберрации. Общая частота хромосомных аберраций, частота ацентрических фрагментов, а также аберраций хроматидного типа в «гамма» и «бета» группах профессионалов примерно в 2 раза достоверно превышает аналогичные показатели в группе сравнения из г. Сарова и в 2,5 раза - в группе сравнения из Московского региона (табл. 4). Что касается маркеров радиационного воздействия - дицентриков и центрических колец, то их частота в «гамма» группе почти в 3 раза выше, а в «бета» группе в 2 раза выше контрольного уровня. Частота ацентрических фрагментов в обеих группах профессионалов превышает в 2 раза аналогичный показатель в группе сравнения из г. Сарова. Повышенная частота ацентрических фрагментов является результатом хронического воздействия малых доз радиации с низкой ЛПЭ и свидетельствует о пролонгированном характере облучения. Статистический анализ зависимости частоты дицентриков и центрических колец от суммарной дозы радиационного воздействия в «гамма» группе (были исключены курящие члены группы) выявил наличие достоверной корреляции - коэффициент корреляции 0,49 (р=0,003).

Исследование зависимости частоты хромосомных аберраций от накопленной за период работы дозы в «бета» группе показал, что подгруппы с наименьшими (< 36 мЗв) и наибольшими (>100 мЗв) значениями доз достоверно отличаются по частоте дицентриков и центрических колец. Частота этих обменных аберраций составила 0,14 0,02 в первой подгруппе и 0,24 0,04 на 100 клеток во второй подгруппе.

Таблица 4 Результаты цитогенетического обследования профессионалов г. Сарова

Группы	Число обследованных (число клеток)	Частота хромосомных аберраций на 100 клеток ± m
		ХА	диц+ц.к	ф"	хрмт
«гамма»	108 (104536)	1.82 0.04*	0.21 0.01*	0.61 0.02*	0.92 0.03*
«бета»	79 (65557)	1,79 ± 0,05*	0,17 ± 0,02*	0,63 ± 0,03*	0,94 ± 0,04*
Контроль (Саров)	49 (51893)	0,92 ± 0,04	0,08 ± 0,01	0,32 ± 0,02	0,51 ± 0,03
Контроль (Москва)	114 (51430)	0.66 0.04	0.02 0.01	0.23 0.02	0.41 0.03

*- значения, достоверно отличающиеся от аналогичных показателей в группах сравнения, p<0,05, t-критерий Стьюдента.

Стабильные хромосомные аберрации. С помощью FISH метода обследовано17 человек из «гамма» группы и 20 человек из «бета» группы (табл. 5). Средняя частота транслокаций для трех пар хромосом (Fp ) в «гамма» группе превысила аналогичный показатель в группе сравнения в 3,5 раза, а в «бета» группе - в 4 раза.

Интересным фактом является обнаружение инсерций у 12 человек из «бета» группы. При этом не выявлено зависимости уровня инсерций от поглощенной дозы, оцененной физическими методами дозиметрии. При цитогенетическом обследовании профессионалов «гамма» группы было обнаружено только две инсерции у одного пациента, который подвергся смешанному гамма-нейтронному облучению в дозе 408 мЗв. Предполагают (Brenner, Sachs, 1994), что при воздействии плотноионизирующего излучения с высокой ЛПЭ может возникать больше внутрихромосомных аберраций по сравнению с редкоионизирующим излучением с низкой ЛПЭ. Особенность излучений с высокой ЛПЭ индуцировать внутрихромосомные обмены (инсерции) легла в основу метода биоиндикации плотноионизирующих излучений (Griffin et al., 1995; Anderson et al., 2000, 2003; Barquinero et al., 2004). По мнению авторов, способность инсерций беспрепятственно переходить в последующее поколение клеток позволяет использовать этот тип хромосомных нарушений в качестве маркера хронического воздействия альфа-излучения. В этом свете факт обнаружения инсерций в лимфоцитах крови профессионалов, подвергавшихся длительному воздействию бета-излучения трития, заслуживает особого внимания. Учитывая, что средняя плотность ионизации бета-частиц трития, равная 4,7 КэВ/мкм, значительно превосходит соответствующие значения для рентгеновского излучения с энергией 200 КэВ (1,7 КэВ/мкм) и гамма-излучения 60Со (0,22 КэВ/мкм) (ICRU Report 16, 1970; Кеирим-Маркус, 1980), нет оснований считать выявленный факт случайным. Дополнительным свидетельством, подтверждающим образование большого числа внутрихромосомных обменов при воздействии излучения с высокой ЛПЭ, является обнаружение в крови профессионалов из «бета» группы клеток с комплексными хромосомными перестройками, частота которых составляет 0,08 на 100 клеток. Как известно, такие клетки с большей вероятностью и частотой встречаются при воздействии плотноионизирующих излучений (Tawn et al., 2006).

Таблица 5 Результаты цитогенетического анализа в группах профессионалов г. Сарова (FISH метод)

Группы	Число обследованных (число клеток)	Частота транслокаций Fpна 100 кл.±m	Частота инсерций Fр на 100 кл.±m	Частота клеток с комплексными аберрациям Fр на 100 кл.±m
«гамма»	17 (15561)	0,59±0,06*	0,01±0,01	0,01±0,01
«бета»	20 (46549)	0,67±0,09*	0,03±0,01	0,08±0,04
Контроль	16 (29043)	0,17±0,03	-	-

*- значения, достоверно отличающиеся от аналогичных показателей в группах сравнения, p<0,05, t-критерий Стьюдента

Транслокации, являясь стабильными хромосомными аберрациями, обладают способностью беспрепятственно проходить клеточное деление, и, естественно, накапливаться в течение жизни, отражая влияние генотоксических факторов на организм человека, т.е. они должны коррелировать с накопленной за период профессиональной деятельности дозой ионизирующего излучения. Статистический анализ выявил достоверную связь частоты транслокаций у профессионалов «гамма» группы и накопленной за период работы дозы ионизирующего излучения - коэффициент корреляции составил 0,50 (р=0,04). В тоже время каких-либо значимых закономерностей вплоть до дозы 500 мЗв в «гамма» группе не выявлено. Заметное, более чем пятикратное, превышение контрольного уровня наблюдалось только у двух профессионалов с накопленными дозами бета-излучения 645 и 994 мЗв. Учитывая, что нижний предел чувствительности FISH метода составляет около 250 мЗв (IAEA, 2001), полученные данные вполне объяснимы, т.к. большинство профессионалов данной группы (85%) имели накопленные дозы, не превышающие 200 мЗв.

Таким образом, представленные результаты цитогенетического обследования профессионалов г. Сарова, подвергавшихся длительному воздействию гамма- и бета-излучения, позволяют заключить, что в отдаленные сроки, через 50 и более лет после начала работы в радиационно-опасных условиях производства, средняя частота хромосомных аберраций стабильного и нестабильного типов достоверно превышает контрольный уровень. При этом частота маркеров радиационного воздействия - дицентриков и центрических колец - в 2-3 раза превышает аналогичный показатель в группе сравнения и коррелирует с величиной дозы ионизирующего излучения, накопленной за период профессиональной деятельности. Частота стабильных хромосомных аберраций - транслокаций превышает уровень дицентриков и центрических колец и также коррелирует с величиной накопленной дозы. В группе профессионалов, подвергшихся воздействию бета-излучения трития, выявлен повышенный уровень инсерций, что может служить индикатором хронического воздействия ионизирующего излучения с высокой ЛПЭ.

2.2. Население, подвергшееся радиационному воздействию в результате аварийных и чрезвычайных ситуаций и проживающее на территориях, загрязненных радионуклидами

Радиоактивное загрязнение окружающей среды в результате испытания ядерного оружия, а также аварий на атомных станциях и предприятиях атомной промышленности обусловило облучение значительных контингентов населения как в малых, так и, в отдельных случаях, в относительно высоких дозах. Для людей, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях, характерно длительное комбинированное воздействие внешнего и внутреннего излучения в сочетании с нерадиационными факторами. Следует подчеркнуть, что из-за неоднородности загрязнения и разного радионуклидного состава выпавших осадков, а также широкого диапазона биогеохимических характеристик местности, цитогенетическое обследование населения с целью оценки повреждающего действия радиации имеет особую актуальность.

2.2.1. Жители Алтайского края и Казахстана, подвергшиеся облучению в результате ядерных взрывов на Семипалатинском полигоне.

Нестабильные хромосомные аберрации. Спустя 40-45 лет после первого ядерного взрыва на Семипалатинском полигоне в 1949г. у жителей всех обследованных населенных пунктов Алтайского края (Угловское, Лаптев Лог, Топольное, Зеленая Дубрава, Беленькое и Наумовка), за исключением с. Озерное-Кузнецово, выявлена повышенная частота нестабильных аберраций хромосом, в первую очередь, дицентриков и центрических колец (рис. 5).

Установлена достоверная связь (коэффициент корреляции 0,70, р<0,05) частоты клеток с дицентриками и центрическими кольцами в группе жителей Алтайского края с величиной средней эффективной дозы.

Рис. 5 Средняя частота дицентриков и центрических колец в лимфоцитах крови жителей Алтайского края (1 - Тюменцево, 2 - Озерное-Кузнецово; 3 - Зеленая Дубрава; 4 - Беленькое; 5 - Топольное; 6 - Наумовка; 7 - Лаптев Лог; 8 - Угловское).

Стабильные хромосомные аберрации.

Средние значения частоты транслокаций, измеренные FISH методом, для жителей трех наиболее пострадавших населенных пунктов Алтайского края достоверно превышают контрольный уровень (р<0,05) - в 2,4 раза для жителей с.Лаптев Лог и с.Топольное и в 3,3 раза для жителей с.Беленькое (рис. 6).

Рис. 6 Средняя частота транслокаций (FISH метод).

у жителей населенных пунктов Алтайского края (I-контроль, II- Лаптев Лог, III - Беленькое, IV - Топольное)

Примерно 80% дозы внешнего облучения пришлось на взрыв 1949 года, поэтому люди, родившиеся до 1949 года, получили наибольшую дозовую нагрузку. Так, в группу обследованных жителей с.Лаптев Лог вошли люди, родившиеся до 1949 г. и позже. Средняя частота транслокаций для людей, родившихся до 1949 года, более чем в 5 раз превышает аналогичный показатель в группе сравнения (р<0,05, t- критерий Стьюдента). Показано также, что для жителей, родившихся после 1949 г., частота стабильных хромосомных аберраций не отличается от контрольного уровня (рис. 7).



Рис. 7 Средняя частота транслокаций (FISH метод) у жителей с. Лаптев Лог Алтайского края (I - рожденные до 1949 г.; II - рожденные после 1949 г.)

Цитогенетическое обследование, проведенное в четырех населенных пунктах Казахстана (Долонь, Знаменка, Караул, Кайнар) FISH методом показало, что средняя частота транслокаций у жителей всех населенных пунктов достоверно превышает контрольный уровень (группа сравнения из Павлодарского района).

Наибольшая частота стабильных хромосомных аберраций зарегистрирована у жителей пос. Долонь (в 2,2 раза выше, чем в группе сравнения), для которых была определена с помощью расчетных методов дозиметрии и наибольшая средняя эффективная доза - 670 мЗв (рис. 8).



Рис. 8 Средняя частота транслокаций (FISH метод) у жителей населенных пунктов Казахстана (I - контрольная группа из Павлодарского района; II - Долонь;. III - Знаменка; IV - Караул; V - Кайнар; VI - вся обследованная группа)

2.2.2. Жители с. Муслюмово, расположенного на берегах реки Теча в Челябинской области.

В конце сороковых годов на Южном Урале создано производственное объединение (ПО) «Маяк», задачей которого было получение оружейного плутония и переработка радиоактивных продуктов.

Процесс интенсификации производства плутония на предприятии в 1948-55 гг., а также отсутствие надежных технологий переработки и хранения радиоактивных отходов привели к тому, что с 1949 г. часть сточных вод, содержащих радиоактивные вещества, сбрасывалась в открытые водоемы бассейна реки Теча.

Это привело к значительному радиоактивному загрязнению речной системы Теча-Исеть-Тобол и облучению жителей прибрежных населенных пунктов.

Среди не выселенных сел наиболее серьезная радиационная обстановка в период проведения цитогенетического обследования (1993-1994 гг.) сохранялась в с. Муслюмово, находящемся в 78 км от ПО «Маяк».

Рис. 9 Средняя частота дицентриков и центрических колец у жителей с. Муслюмово (I -контрольная группа; II - жители, родившиеся до 1949 г. (начало загрязнения реки Теча) и проживающие в с.Муслюмово постоянно; III - жители, родившиеся в период с 1949 по 1956 гг.(период, характеризующийся наиболее высоким уровнем загрязнения реки Теча); IV - жители, родившиеся после 1957 г; V- мигранты, т.е. люди, приехавшие в с.Муслюмово в разное время, в том числе эвакуированные из деревень, подвергшихся радиоактивному загрязнению)

Нестабильные хромосомные аберрации. В соответствии с задачами исследования все жители были разделены на группы (рис. 9). Средняя частота маркеров радиационного воздействия во всех группах значительно превышает контрольный показатель (в 5-10 раз), что может свидетельствовать о продолжающемся облучении. Наиболее высокая частота дицентриков и центрических колец отмечена в первой и второй группах, т.е. у жителей, подвергшихся облучению в первые годы функционирования ПО «Маяк».

Стабильные хромосомные аберрации. Статистически достоверное превышение в 4 раза средней частоты транслокаций по сравнению с группой сравнения (2,24 и 0,54 на 100 клеток соответственно) было зарегистрировано при цитогенетическом обследовании с помощью FISH метода у 6 жителей с. Муслюмово.

2.2.3. Жители Брянской области, проживающие на территории, загрязненной радионуклидами в результате аварии на Чернобыльской АЭС. Среди радиационных аварий, приведших к загрязнению окружающей среды, самой значительной по количеству выброшенных радионуклидов, по площади загрязненных территорий, а также по числу пострадавших является авария на Чернобыльской АЭС. Нестабильные хромосомные аберрации. Цитогенетическое обследование жителей Брянской области, проживающих в районах, загрязненных радионуклидами, выявило повышенный уровень хромосомных аберраций - общая частота хромосомных аберраций в 2 раза превышает аналогичный показатель в группе сравнения, а частота дицентриков и центрических колец в 5 раз выше по сравнению с контрольным уровнем.

2.2.4. Население, проживающее в окрестности атомной электростанции Три Майл Айленд (США). 28 марта 1979 г. на атомной станции Три Майл Айланд (ТМА), (Пенсильвания, США), на блоке N2 произошла авария. Согласно официальным данным, изложенным в докладе Комиссии по ядерному регулированию США в 1980 г. (Nakao, 1980) никаких последствий от этой аварии на население, флору и фауну не ожидается. Однако, расчеты специалистов о масштабах возможных выбросов радиоактивных инертных газов, обнаружение в окружающей среде радиоактивного йода, а также научные публикации о наблюдаемых радиационных эффектах при обследовании деревьев и животных до сих пор не позволяют однозначно оценить масштабы и последствия этой аварии (NUREG-0738 EPA 600/4-80-049, 1980)

Нестабильные хромосомные аберрации. Цитогенетическое обследование жителей окрестности АЭС ТМА показало, что на фоне относительно нормального общего уровня хромосомных аберраций наблюдается значительное увеличение частоты маркеров радиационного воздействия - дицентриков и центрических колец (рис. 10). Этот показатель в 10 раз превышает аналогичный показатель в группе сравнения из Московского региона. Так как не представлялось возможным получить данные по спонтанному уровню хромосомных аберраций для жителей того же региона, где проводилось обследование, то данные цитогенетического анализа сравнивали с контрольными значениями, полученными при обследовании жителей с. Тюменцево, г. Сарова и Павлодарского района Казахстана.

В этом случае также наблюдали достоверное превышение частоты дицентриков и центрических колец в группе жителей окрестности атомной станции ТМА (соответственно в 3, 2,5 и 1,25 раз).

Рис. 10 Средняя частота дицентриков и центрических колец в группе жителей окрестности АЭС ТМА и группах сравнения (I - Московский регион, II - с. Тюменцево; III - г. Саров; IV - Павлодарский район; V - окрестности АЭС ТМА, США)

Стабильные хромосомные аберраций. Для 6 жителей из обследованной группы был проведен анализ частоты стабильных хромосомных аберраций, который показал, что средняя частота транслокаций в пересчете на весь геном достоверно превышает аналогичный показатель для группы сравнения из Московского региона почти в 3 раза (1,49 и 0,54 на 100 клеток соответственно).

Таким образом, анализ результатов цитогенетического обследования населения, пострадавшего вследствие радиационных аварий, позволяет заключить, что повышенный уровень хромосомных аберраций стабильного и нестабильного типов, выявленный спустя десятилетия после облучения, свидетельствует о продолжающемся мутагенном воздействии на организм человека факторов радиационной природы.

2.3. Участники ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС

Ликвидаторы являются наиболее облученной и многочисленной категорией населения, пострадавшего в результате аварии на Чернобыльской АЭС. При выполнении работ в зоне аварии они подвергались, в основном, воздействию внешнего гамма-излучения с разной мощностью дозы, в меньшей степени - воздействию внешнего бета-излучения на кожные покровы, а также внутреннему облучению за счет ингаляции изотопов йода. Дозы радиационного воздействия, полученные ликвидаторами, особенно в первые месяцы после аварии, были определены с высокой степенью неопределенности. Погрешность в оценке доз, по данным специалистов, могла составлять в зависимости от использованного метода от 50 до 500 % (Иванов В.К., Цыб, Иванов С.И., 1992).

Нестабильные хромосомные аберрации. При анализе результатов цитогенетического обследования из всей базы ликвидаторов были сформированы 4 группы - в зависимости от времени первого въезда в зону аварии - с 1986 по 1989 гг. (табл. 6). Такое разделение соответствовало радиационной обстановке, которая существенно изменялась в Чернобыле в указанные периоды. Наиболее сложной и опасной радиационная обстановка была в 1986 г. в период сооружения «Саркофага».

По всем цитогенетическим показателям (исключение составляет частота дицентриков и центрических колец в группе ликвидаторов 1989 г.) были выявлены статистически значимые различия между группой сравнения и всеми группами ликвидаторов, независимо от времени первого въезда в зону аварии. Общая частота хромосомных аберраций, а также частота ацентрических фрагментов и аберраций

Таблица 6 Результаты цитогенетического обследования ликвидаторов, принимавших участие в восстановительных работах в разные годы после аварии

Время работы, год	Число обследованных (число клеток)	Частота хромосомных аберраций на 100 клеток m
		ХА	диц.+ц.к	ф"	хрмт
1986	788 (304883)	1,810,02*	0,110,01*	0,620,01*	1,000,02*
из них:
однократно	692 (269015)	1,770,03	0,110,01	0,600,01	0,980,02
многократно	96 (35868)	2,100,08	0,140,02	0,730,05	1,170,06
1987	205 (70107)	1,630,05*	0,090,01*	0,540,03*	0,930,04*
1988	41 (13657)	1,350,10*	0,070,02*	0,440,06*	0,800,08*
1989	10 (2935)	2,350,28*	0,070,05	0,480,13*	1,700,24*
Контроль (Москва)	114 (51430)	0,660,04	0,020,01	0,230,02	0,410,03

*- значения, достоверно отличающиеся от аналогичных показателей в группе сравнения, p<0,05, t-критерий Стьюдента.

...