Эпидемиология и молекулярно-генетические основы наследственных заболеваний нервной системы в Республике Башкортостан

По характеру распределения частот аллелей локуса (CAG)n-повторов в гене HD наблюдается значительная популяционная неоднородность. По этим показателям популяции Волго-Уральского региона в большей степени сопоставимы с популяциями Европы.

В локусе (CCG)n-повторов обнаружено 6 вариантов аллелей, содержащих от 6 до 12 триплетов, за исключением аллеля (CCG)11. Во всех популяциях самыми частыми являются аллель (CCG)7, встречающийся в среднем с частотой 0.603, и (CCG)10- его частота составляет в среднем 0.333.

В результате регрессионного анализа сцепления полиморфных участков (CAG)n и (CCG)n, для популяций Волго-Уральского региона в целом установлена обратная нелинейная зависимость между числом повторов в этих участках на одной хромосоме. Аллели с семью CCG-повторами сцеплены с аллелями, содержащими в среднем 19.2 3.8 CAG-повторов, а (CCG)10 - с аллелями, содержащими 17.3 1.5 CAG-повторов (табл. 5).

Таблица 5. Среднее число (CAG)n повторов на хромосомах с различными вариантами аллелей (CCG)n и del2642 в популяциях Волго-Уральского региона

Примечания: 1непараметрический ранговый критерий Манна-Уитни, 2однофакторный дисперсионный анализ (ANOVA) для аллелей (CCG)6, (CCG)7, (CCG)8, (CCG)9, (CCG)10 и (CCG)12, 3ранговый непараметрический ANOVA Крускала-Уоллеса, так как в выборке не соблюдалась нормальность распределения согласно тесту Шапиро-Уилка.

При исследовании нейтральной полиморфной делеции del2642 гена HD в популяциях Волго-Уральского региона установлена ее достоверная ассоциация с аллелями (CAG)n локуса, содержащими в среднем 19.755.26 CAG -повторов, а отсутствие делеции (del-) - с аллелями, содержащими 17.923.0 CAG -повторов (см. табл. 5). Эти данные подтверждают предположение о возникновении данной делеции преимущественно на хромосомах с числом CAG повторов 20 [Almqvist E. et al., 1995; Иллариошкин С.Н., 2002].

В результате прямой молекулярно-генетической диагностики у 57 из 59 больных хореей Гентингтона выявлена экспансия (CAG)n- повторов в 1 экзоне гена HD. Число (CAG)n-повторов на мутантных хромосомах у больных ХГ варьировало от 39 до 75, составляя в среднем 46.47±5.70.

С целью изучения характера генетической нестабильности (CAG)n повторов проведен анализ передачи их аллелей с экспансией в поколениях в 17 семьях больных ХГ, показавший, что величина мутации зависит от величины исходного аллеля в большей степени при передаче по материнской линии и в меньшей степени - по отцовской.

Установлено сцепление экспансии (CAG)n - повторов с полиморфным вариантом (CСG)7 и нейтральной делецией del2642. В результате определения гаплотипов (анализ по трем исследуемым локусам оказался возможным в 39 семьях больных ХГ) у больных ХГ из Башкортостана выявлено три основных гаплотипа, сцепленных с мутацией: (CCG)7/del- (48.72% семей), (CCG)7/del+ (46.15%) и (CCG)10/del- (5.13%), что позволяет предполагать, как минимум, три различных источника происхождения хореи Гентингтона в республике. Выявленное неравновесие по сцеплению экспансии (CAG)n повторов с (CCG)7, и ассоциация в популяциях Волго-Уральского региона аллелей (CAG)n>20 с аллелем (CCG)7 свидетельствуют не только о различных источниках заболевания, но и о том, что (ССG)n тракт может играть роль цис-активного фактора, модифицирующего стабильность (CAG)n повторов. Исходя из полученных данных, можно предположить, что новые случаи экспансии, возникающие из переходных аллелей, будут появляться на хромосомах, имеющих определенный гаплотип: (CCG)7/del- или (CCG)7/del+. Подтверждению этому может служить случайно обнаруженная мутация de novo - (CAG)36 - в ходе популяционного анализа у индивида в возрасте 65 лет, не имевшего клинических признаков ХГ и с отрицательным семейным анамнезом по этому заболеванию. В данном случае экспансия была ассоциирована именно с гаплотипом (CCG)7/del-.

Проведен также анализ роли ряда генетических факторов на возраст появления первых признаков ХГ (табл.6). Установлено, что кроме величины экспансии CAG повторов (которая чем больше, тем раньше проявляется хорея), на возраст манифестации влияют также пол родителя - при передаче аллеля с экспансией от отца заболевание дебютирует, в среднем, на 4. 72 года раньше, чем при передаче от матери; наличие del2642 на хромосоме с экспансией (CAG)n, определяет более позднюю манифестацию ХГ. С возрастом появления первых клинических признаков заболевания ассоциированы и определенные генотипы локуса АроЕ: наличие генотипа е2е3 приводит к достоверному увеличению этого показателя. Вышеупомянутые факторы объясняют 88.71% возраста манифестации ХГ.

Комплексное определение этих факторов у носителей мутантного ХГ-аллеля, не имеющих клинических проявлений заболевания, может способствовать повышению эффективности медико-генетического консультирования и ведения таких пациентов.

Таблица 6. Регрессионный анализ зависимости между возрастом манифестации ХГ и размером нормального аллеля, путем вертикальной передачи, наличием делеции del2642 и генотипом АроЕ с учетом размера экспансии (CAG)n повторов

Примечание: 1р для (CAG)n во всех случаях <0.00001, 2передача аллеля с экспансией от отца, 3передача аллеля с экспансией от матери.

Прогрессирующая мышечная дистрофия Дюшенна-Беккера

Прогрессирующие мышечные дистрофии Дюшенна и Беккера- наиболее распространенные наследственные заболевания нервно-мышечной системы. Их частота составляет, соответственно, 1:3500 и 1:20000 рожденных мальчиков [Emery A. 1991]. Миодистрофия Дюшенна (МДД) - более тяжелая форма болезни, она начинается в возрасте 2-5 лет со слабости мышц тазового пояса и проксимальных отделов ног, быстро прогрессирует, приводя к обездвиженности. Большинство больных (около 90%) умирают до 20 лет от сопутствующих респираторных осложнений, связанных с нарушением дыхания [Гринио Л.П., 1976; Темин П.А. и др., 1997; Emery A. 1993; Specht L., Kunkel L., 1993]. Мышечная дистрофия Беккера (МДБ) - более «мягкая» форма МДД, характеризующаяся более поздним дебютом (в 10-20 лет) и доброкачественным течением.

Миодистрофии Дюшенна и Беккера обусловлены мутациями в гене дистрофина (DMD) и являются аллельными формами заболевания [Kingston H. et al., 1983; Goodfellow P. et al., 1985; Monaco A. et al., 1986; Hoffman E., Kunkel L., 1989]. Ген DMD локализован на коротком плече хромосомы X (p21), он состоит из 2.5 млн.п.н. и содержит 79 коротких экзонов и 78 длинных интронов [Koenig M. et al., 1987; Roberts R. et al., 1992]. Основной функцией дистрофина является участие в поддержании целостности мембраны при сокращении мышечного волокна. Известно, что от 25% до 70% всех мутаций гена дистрофина составляют крупные делеции, захватывающие от одного до нескольких экзонов и расположенные обычно в двух «горячих» точках - в области 5'-конца гена (6-19 экзоны) и в 3'-конце (40-53 экзоны). Около 6% мутаций составляют крупные дупликации, а остальные мутации являются точковыми. Примерно в 30% случаев крупные делеции гена дистрофина возникают de novo, поэтому в 2/3 семей заболевание носит изолированный характер.

С использованием мультиплексной полимеразной цепной реакции синтеза ДНК нами изучен спектр делеций и распределение делеционных точек разрыва (ДТР) в гене дистрофина у 70 больных из 63 семей, проживающих в РБ (из 63 неродственного больного: русских -20 (31.7%); татар - 23 (36.6%); башкир - 12 (19.0%); чувашей - 3 (4.7%); марийцев - 2 (3.17%); украинцев - 2 (3.17%) и 1 кабардинец (1.59%). В 60 семьях больные имели диагноз МДД, в 3 - МДБ. «Семейная» форма МДД была точно зафиксирована в 10 из 63 обследованных семей (15.87%), в остальных 53 случаях заболевание носило изолированный характер.

Из 63 неродственных больных делеции длиной от одного до девяти экзонов обнаружены у 20 (русских - 4, татар - 11, башкир - 2, марийцев - 1; украинцев - 1; 1 - кабардинец), что составило 31.75% . 13 делеций (65.0%) локализовались в 3'-конце гена, 7 (35.0%) - в 5'-“горячем” районе гена: соотношение делеций в дистальном и проксимальном районах «горячих» точек составило 1.86:1. Участки локализации ДТР также распределились в районах двух «горячих» точек гена: в 5'-районе (до 19 экзона) зафиксировано 30% ДТР, в 3' - районе - 70% (рис.4).

Рисунок 4. Распределение делеционных точек разрыва в гене DMD у больных МДД из Башкортостана

Выявленные нами относительно высокие частоты ДТР в регионах гена между экзонами 44-45, 45-47 и 50-52 говорят об обоснованности применения известных высокополиморфных маркеров STR-44, STR-45, STR-49, STR-50 [Clemens P. et al., 1991] не только для косвенной, но и для прямой диагностики носительства делеций у родственниц больных с делециями.

Мы провели диагностику носительства делеций в 13 семьях с использованием внутригенных маркеров DYS [Feener C. et al.,], STR-44, 45, 49, 50 [Clemens P. et al.,1991], а также диаллельных маркеров pERT-878/TaqI, pERT-8715/ BamHI и 17 exon/TaqI [Евграфов О.В., Макаров В.Б., 1987, Евграфов О.В. и др., 1991], в результате которой носительство мутации подтверждено у 11 и отвергнуто у 14 родственниц больных.

У 43 больных МДД/МДБ без крупных делеций в гене DMD проведен поиск точковых мутаций методом SSCP-анализа и последующего секвенирования в тех же 20 участках гена, которые исследовались на их наличие/отсутствие. В результате этого исследования были идентифицированы две новые, ранее не описанные мутации и один известный полиморфизм. В 6-м экзоне у трех больных из двух неродственных семей русской этнической принадлежности выявлена делеция 4-х нуклеотидов - c.401_404delCCAA, приводящая к сдвигу рамки считывания и образованию стоп-кодона через 7 кодонов после мутации, терминирующего дальнейший синтез белка - (p.Thr134ThrfsX7) (рис. 5) Частота этой мутации в выборке неродственных больных из РБ составила 3.17%.

Рисунок 5. SSCP-анализ и секвенирование 6-го экзона гена DMD: выделенные фрагменты - образец с измененной подвижностью однонитевой ДНК; мутация c.401_404delCCAA (курсором отмечен нуклеотид, следующий за делецией); внизу - нормальная последовательность фрагмента ДНК

В 46-м экзоне у одного больного татарской этнической принадлежности выявлена делеция аденина в 6626 положении нуклеотидной последовательности гена - с.6626delA (рис. 6), приводящая к сдвигу рамки

Рисунок 6. SSCP-анализ и секвенирование 46-го экзона гена DMD: выделенный фрагмент - образец с измененной подвижностью однонитевой ДНК; мутация 6626delA ; внизу- нормальная последовательность фрагмента

считывания и образованию стоп-кодона через 11 кодонов в аминокислотной последовательности белка - p.Lys2210ArgfsX11. Частота данной мутации в выборке больных из РБ составила 1.6%.

В 53 экзоне гена DMD у одного больного выявлена ранее описанная нуклеотидная замена - с.7728T>C, обусловливающая синономичную замену в аминокислотной последовательности белка - Asn2575Asn. Функциональное значение данной нуклеотидной замены не установлено, скорее всего, она представляет собой нормальный полиморфизм.

Таким образом, в целом, с помощью доступных нам методов, для больных с миодистрофией Дюшенна/Беккера из РБ установлен несколько более низкий процент делеций в гене дистрофина, по сравнению с европейскими странами, но выявлены две новые мутации в неродственных семьях, в различных этнических группах. Выявление точковых мутаций в гене дистрофина в настоящее время имеет особое значение, т.к. именно для таких случаев уже сейчас разрабатываются методы генной терапии.

Наследственные моторно-сенсорные нейропатии

Наследственные моторно-сенсорные нейропатии, НМСН (болезнь Шарко-Мари-Тута, ШМТ) - генетически гетерогенная группа заболеваний периферической нервной системы. Основными клиническими проявлениями большинства форм НМСН являются прогрессирующая слабость и атрофия мышц дистальных отделов ног и, на поздней стадии - рук, угнетение сухожильных рефлексов, деформация стоп по типу pes cavus (полая стопа, «стопа Фридрейха»), расстройства чувствительности по полиневритическому типу [Harding A., 1980]. В основе болезни лежат дегенеративные изменения миелиновой оболочки или аксонов двигательных и чувствительных волокон периферических нервов и спинномозговых корешков. Соответственно этому, выделяют два основных типа заболевания: НМСН I - димиелинизирующий и НМСН II - аксональный, клиническая дифференциация которых возможна только на основе электронейромиографического исследования, выявляющего скорость проведения импульса (СПИ) по срединному нерву. Среди обоих типов НМСН встречаются аутосомно-доминатные, аутосомно-рецессивные и X-наследуемые формы [Dyck P. et al., 1993]. В настоящее время картировано более 25 локусов НМСН, идентифицировано 22 гена. Распространенность всех форм НМСН в разных популяциях мира различна, составляет от 10 до 40:100000 населения [Skre H., 1974; Emery A., 1991, Ionasescu V., 1995].

В Республике Башкортостан распространенность всех форм НМСН составляет 10,3 на 100000 населения, установлена ее территориальная и этническая неравномерность.

Молекулярно-генетическое исследование проведено на выборке, представленной 173 больными НМСН из 131 семьи. По этнической принадлежности исследуемые семьи распределялись следующим образом: 42 русских, 37 татарских, 27 башкирских, 3 украинских, по одной семье чувашской, марийской и азербайджанской принадлежности. В 19-ти семьях пробанды происходили из межнациональных браков.

Дупликация гена PMP22, являющаяся наиболее частой причиной заболевания в большинстве европейских стран, обнаружена у 46 больных из 35 неродственных семей. В пересчете на неродственных больных, частота данной мутации составила 26.72% из НМСН всех типов. Несколько чаще она встречалась среди татар - 37.14% и русских - 31.43%, реже - среди башкир - 14.78%. У двух пациентов (1.53%) выявлена делеция гена PMP22, ведущая к развитию наследственной нейропатии со склонностью к параличам от сдавления.

В семьях больных без дупликации гена РМР22 проведен поиск точковых мутаций во всех кодирующих областях генов PMP22, MPZ, GJB1 и EGR2, также часто ответственных за развитие НМСН, причем, как 1-го, так и 2-го типа.

В гене PMP22 обнаружена одна новая нуклеотидная замена в области 3-го интрона- с.309-29 G>A. В гене MPZ у двух пациентов татарской этнической принадлежности обнаружена ранее описанная, но редкая миссенс - мутация - р.Ser88Ley (c.263С>G), у двух пациентов - синонимичная замена р.Ser238Ser. В гене EGR2 у наших больных изменений не обнаружено.

В гене коннексина 32 (GJB1), связанном с Х-сцепленной доминантной формой НМСН 1Х, в настоящее время известно > 300 различных мутаций. У больных из РБ были выявлены 4 различных мутации. С высокой частотой (10%) - обнаружена трансверсия c.259С>G, приводящая к замене аминокислоты пролина на аланин в 87 положении белка Сх32 (р. Pro87Ala). Наиболее часто данная миссенс-мутация встречается среди башкир - 33%, реже - среди русских (10%), и практически не обнаруживается среди татар. Анализ неравновесия по сцеплению мутации р.Pro87Ala с аллелями 5-и полиморфных микросателлитных ДНК-локусов, сцепленных с геном GJB1, показал, что у неродственных больных на 10 из 13 хромосом, несущих данную мутацию, обнаружен общий гаплотип по маркерам DXS8111-DXS983-DXS8107-DXS8052, что свидетельствует о ее распространении на территории РБ в результате эффекта основателя.

Вторая мутация - новая, ранее не описанная - нуклеотидная замена с.257С>Т, приводящая к замене треонина на изолейцин в 86 положении аминокислотной последовательности белка (р.Thr86Ile) (рис.7). Данная мутация обнаружена в одной татарской семье у больного с клиническим диагнозом НМСН и у его тети, внешне не имеющей выраженных признаков заболевания. В контрольной выборке (n=150) данная нуклеотидная замена не обнаружена. Относительно функциональной роли этой нуклеотидной замены мы предполагаем, что, скорее всего, она может оказывать определенное влияние на структуру и функцию белка Сх32, т.к. полярная аминокислота треонин, способная формировать сложные водородные связи в структуре молекулы белка, заменяется на неполярную аминокислоту изолейцин, обладающую, благодаря наличию углеводородного радикала, гидрофобными свойствами. Данное предположение основывается также на том, что известны и другие миссенс-мутации 86-го кодона, приводящие к заболеванию (р.Thr86Ala, р.Thr86Ser, р.Thr86Asn).

Рисунок 7. SSCP - анализ и секвенирование образца ДНК с мутацией с.257C>T (р.Thr86Ile) в гене GJB1. Дорожка 4 - одноцепочечный фрагмент ДНК больного НМСН с измененной электрофоретической подвижностью; 1,2, 3, 5, 6 - образцы ДНК без мутации.

Третья мутация - с.65G>A (р. Аrg22Gln), - обнаружена у трех больных из двух татарских семей. Ранее эта мутация была описана в семьях из разных стран, а также из России. Четвертая мутация - с.44G>A (Аrg15Gln) -, идентифицирована у двух неродственных больных. В целом, мутации в гене GJB1были выявлены у 18 из 131 неродственного больного НМСН, что составило 13.7%. В европейских популяциях НМСН 1Х также составляет 10-20% среди всех НМСН [Ionasescu V.et al., 1993].

Рисунок 8. Спектр и частота мутаций в генах PMP22, GJB1 и MPZ в выборке неродственных больных НМСН из РБ (n=131)

Таким образом, анализ 4-х генов у больных из РБ позволил выявить своеобразный спектр и частоту мутаций для отдельных этнических групп данного региона (рис.8), что необходимо учитывать при проведении ДНК-диагностики. Всего мутации были выявлены в 61 неродственной семье (47%). В этих семьях возможно проведение пресимптоматической и пренатальной ДНК-диагностики.

Болезнь Паркинсона

Болезнь Паркинсона (БП) - это хроническое прогрессирующее нейродегенеративное заболевание головного мозга, избирательно поражающее дофаминергические нейроны компактной части черной субстанции в среднем мозге, приводящее к дефициту дофамина в стриатуме и нарушению функционирования подкорково-корковых систем, регулирующих двигательные функции и проявляющееся в виде сочетания гипокинезии с ригидностью и/или тремором покоя и, в более поздней стадии, постуральной неустойчивостью. В популяциях мира БП встречается с частотой 60-187 на 100 000 населения, а среди лиц старше 50 лет частота заболевания составляет 2-4% Голубев В.Л., 1999.

В Республике Башкортостан распространенность БП составила 68.6 на 100 000 взрослого населения. Частота семейных форм - 5.95%,- в значительной степени соответствует среднемировым показателям.

Главным патогенетическим механизмом гибели дофаминергических нейронов считается повышенный уровень апоптоза, обусловленный развитием в клетках окислительного стресса, Среди причин развития здесь окислительного стресса рассматриваются нарушения внутриклеточной убиквитин-зависимой деградации поврежденных белков и блокада митохондриального комплекса I, приводящие к накоплению в клетках свободных радикалов, источниками которых могут являться различные эндогенные и экзогенные нейротоксины [Крыжановский Г.Н. с соавт., 2002]. В большинстве случаев болезнь Паркинсона носит спорадический характер и имеет многофакторную природу с определенной генетической предрасположенностью. Существуют и моногенные формы заболевания. В настоящее время картировано 11 генных локусов, связанных с отдельными наследственными формами БП, в шести из них идентифицированы гены.

Молекулярно-генетическое исследование болезни Паркинсона в РБ включало: 1) поиск у всех обследуемых больных мутаций в генах, связанных с моногенными формами БП - б-синуклеина (PARK1), паркина (PARK2) и дардарина (LRRK2); 2) анализ ассоциации спорадической БП с полиморфными вариантами ряда генов-кандидатов (Yb8NBC36 Alu-инсерционного локуса гена клиевого канала KCNJ6; делеционного полиморфизма генов глутатионтрансфераз GSTM1(0/0) и GSTT1(0/0); рестрикционных полиморфизмов Ile462Val гена цитохрома семейства р-450 CYP1A1, Gln191Arg гена параоксоназы 1 (PON1), Val108Met гена катехол-О-метилтрансферазы (COMT); 3'VNTR-полиморфизма гена дофаминового транспортера (DAT1), (TCAT)n-повторов в 1 экзоне гена тирозингидроксилазы (ТН)); 3) анализ мтДНК у пациентов с БП и в контрольных группах, включающий определение гаплогрупп мтДНК, поиск мутаций в гене цитохрома b; а также полное секвенирование мтДНК у 4-х больных с определенными гаплогруппами мтДНК.

При анализе частот генотипов и аллелей каждого локуса учитывались этническая принадлежность больных и здоровых доноров, а также возраст манифестации, форма заболевания и его тяжесть, определенная на основании унифицированной шкалы, предложенной Хеном и Яром (Hoehn and Yahr Rating Scale) и унифицированной оценочной шкалы болезни Паркинсона (Unified Parkinson's Disease Rating Scale).

В гене альфа-синуклеина (PARK1) проведен скрининг двух известных мутаций - р.Ala53Thr и р.Ala30Pro, - у 200 больных со спорадической и 8-и неродственных больных с наследственными формами БП: данные мутации у обследованных больных не обнаружены.

В гене белка паркина (PARK2), ответственного за развитие ювенильной рецессивной формы БП, проведен поиск мутаций во всех его кодирующих областях (12 экзонов). Методом полуколичественного анализа дозы отдельных экзонов у двух неродственных больных со спорадической БП, этнических русских, была выявлена не описанная ранее делеция 12-го (последнего) экзона в гетерозиготном состоянии. 12-й экзон гена кодирует С-концевой участок паркина, отвечающий за связывание паркина с убиквитин-конъюгирующим ферментом Е2, т.е. за один из наиболее важных моментов в процессе убиквитин-зависимого протеолиза. Исходя из этого, было сделано предположение о возможной роли гетерозиготного носительства найденной делеции в развитии спорадической БП.

Срующих областях (12 экзонов) анный характер.тве европейских стран, _________________ помощью SSCP-анализа и последующего секвенирования у 31 из 200 пациентов с БП выявлено 5 типов изменений нуклеотидной последовательности - в трех экзонах и двух интронах, однако все они были признаны нейтральными полиморфизмами как на основании сопоставления с литературными данными, так и на основании того, что они встречаются и в контрольной выборке (табл. 7).

Таблица 7. Изменения нуклеотидной последовательности в гене PARK2 у пациентов со спорадической формой идиопатической болезни Паркинсона

В гене LRRK2 (leucine-rich repeat kinase 2), связанном с аутосомно-доминантной формой БП, проведен скрининг трех известных, наиболее частых, мутаций у 341 пациента со спорадической БП (русских -129, татар - 156, башкир - 56) и у 360 человек из группы контроля (русских - 103, татар- 131, башкир -126). В результате данного исследования мутация Gly2019Ser в гетерозиготном состоянии (рис. 9) была выявлена у одной больной башкирской этнической принадлежности, имеющей акинетико-ригидно-дрожательную форму БП с манифестацией заболевания в 63 года. Частота данной мутации составила для башкир 1.79% (1/56). Примерно с такой же частотой данная мутация выявлена в популяциях Европы [Di Fonzo A. et al., 2006]. В контрольной выборке данная мутация не обнаружена.

Замена Gly2385Arg обнаружена у двух больных татарской этнической принадлежности с частотой 1.28% среди татар. В исследуемой группе контроля данный полиморфный вариант не выявлен. Одна из этих больных имела ригидно-дрожательную форму заболевания с манифестацией в 62 года, другой больной - акинетико-ригидно-дрожательную форму БП с манифестацией в 36 лет. В исследуемой группе контроля данный полиморфный вариант не обнаружен. Полиморфизм Gly2385Arg ранее был описан, он выявлен как среди больных, так и среди контроля в Тайване [Di Fonzo A. et al., 2006] и Сингапуре [Tan E. et al., 2007].

а) б)

Рисунок 9. Секвенирование гена LRRK2: а) мутация 6055G>A (Gly2019Ser); б) Gly2385Arg

Мутация Ile2020Thr в наших выборках пациентов с БП и контроля не обнаружена.

В результате исследования в группах больных и контроля полиморфизма 8-и указанных выше ядерных генов-кандидатов БП выявлена ассоциация заболевания с полиморфными вариантами трех генов.

Во всех исследованных этнических группах обнаружена ассоциация БП с инсерцией Yb8NBC36 гена калиевого канала KCNJ6: у пациентов с БП русской, татарской и башкирской этнической принадлежности по сравнению с соответствующими контрольными группами чаще встречался генотип *I/*I (62.96% и 38.38%, 76% и 37.08%, 72.22% и 32.40% соответственно) (рис.10). Различия оказались статистически значимыми для всех трех сравниваемых групп (р=0.007, OR=2.73, 95%CI=1.30-5.74; р=0.0005, OR=5.37, 95%CI=2.74-10.62; р=0.0059, OR=5.42, 95%CI=1.54-20.10, соответственно). Эта же закономерность верна и для аллеля *I: при р<0.05 для русских OR=1.95, 95%CI=1.07-3.62; для татар OR=3.36, 95%CI=1.92-5.93; для башкир OR=3.17, 95%CI=1.08-9.93.

Кроме того, генотип *I/*I и аллель *I достоверно (р<0.01) преобладают при всех клинических формах заболевания по сравнению с контролем, а также для всех степеней тяжести заболевания. При разделении пациентов по возрасту начала БП статистически значимые отличия обнаружены в группах старше 40 лет. Мы пришли к заключению, что генотип *I/*I и аллель *I являются генетическими маркерами повышенного риска развития БП для людей разной этнической принадлежности (русских, татар и башкир) из республики Башкортостан.

Рисунок 10. Распределение частот генотипов Alu- инсерционного локуса Yb8NBC36 гена KCNJ6 у пациентов БП и в контроле в разных этнических группах

Теоретически, инсерция Alu-повторов может изменять транскрипцию гена путем изменения статуса метилирования его промотора, нарушения структуры промотора или внедрения добавочных регуляторных последовательностей, таких как связывающие сайты рецепторов стероидных гормонов, которые содержатся у некоторых членов Alu-семейств. Мы предполагаем, что Alu-инсерция Yb8NBC36 может изменять экспрессию гена KCNJ6, нарушая в какой-то степени функцию калиевого канала.

При исследовании роли генов дофаминовой системы выявлена ассоциация БП с полиморфными вариантами гена катехол-орто-метилтрансферазы (COMT) у татар. Частота генотипа *Н/*Н, детерминирующего активную форму фермента, была достоверно выше среди больных (45.54%) по сравнению с контролем (19.18%) (OR=3.52, 95%CI=1.95-6.38), так же, как и частота аллеля *Н - 65.63% и 51.,03%, соответственно (OR=1.83; 95%CI=1.26-2,67). Частота генотипа *L/*H, детерминирующего синтез фермента с промежуточным уровнем активности, среди больных составила 40,18%, среди контроля - 63,7% (OR=0,38, 95%CI=0.22-0.65). Следует отметить, что и в других исследуемых этнических группах (русских и башкир) наблюдается аналогичное изменение распределения частот и генотипов (увеличение частоты генотипа *Н/*Н и уменьшение частоты генотипа*L/*H), и аллелей (увеличение частоты аллеля *Н и уменьшение частоты аллеля *L) среди больных, по сравнению с контролем, хотя и не достигающее статистической значимости. Таким образом, можно предполагать, что генотип *Н/*Н и аллель *Н гена СОМТ являются факторами генетического риска, а генотип *L/*H и аллель*L - протективными факторами для развития болезни Паркинсона не только для татар, но и для других жителей Республики Башкортостан.

При анализе числа тетрануклеотидных повторов (TCAT)n в интроне 1 гена тирозингидроксилазы (TH) показана ассоциация генотипа *6/*8 с акинетико-ригидной формой БП (ч2=7.39, P=0.007, OR=4.75, 95%CI=1.43-15.33), третьей (ч2=4.53, P=0.03, OR=3.12, 95%CI=1.08-8.96) и четвертой степенями тяжести заболевания (ч2=5. 94, P=0.015, OR=3,04, 95%CI=1.21-7.70).

В результате исследования полиморфизма мтДНК, основанного на секвенировании гипервариабельного сегмента I и рестрикционном анализе 11 однонуклеотидных полиморфизмов кодирующего региона, в выборках татар (157 больных и 183 контроля) были выявлены достоверные различия, характеризующиеся значительным преобладанием среди больных гаплогруппы H (39.5% больных и у 20.0% контроля (OR=2.58, CI= 1.55-4.30, P=0.0008) и уменьшением частоты гаплогруппы U (16.6% и 34.4%, соответственно), (OR=0.38, CI= 0.22-0.66 P=0.0002). Протективные свойства гаплогрупп U, K, J, T для развития БП были показаны ранее и другими авторами [van der Walt J. et al., 2003; Wallace D., 2005]. Ассоциация гаплогруппы H с БП, выявленная нами только в популяции татар, ранее не описана.

В результате секвенирования гена митохондриального цитохрома В в выборках больных (n=58) и контроля (80) татарской этнической принадлежности было выявлено 16 миссенс-мутаций и 9 синонимичных нуклеотидных замен. Достоверно значимое различие было показано для мутации T15693C, обнаруженной только в контроле и не выявленной у больных, а также установлен гаплотип 15693С-15218А-14793А, ассоциированный с гаплогруппой U, который можно считать протективным для БП в популяции татар (OR=0.04, CI=0.006-0.65)

С целью более углубленного исследования природы выявленных ассоциаций гаплогрупп мтДНК с БП мы провели полное секвенирование мтДНК (16569 пн) у 4-х пациентов татарской этнической принадлежности, двое из которых имели гаплогруппу H, двое - кластер гаплогрупп UK; полученные результаты секвенирования сравнивались с Кембриджской последовательностью мтДНК (rCRS). Наиболее интересным результатом, на наш взгляд, оказалась выявленная у носителя субгаплогруппы H2 в гомоплазмическом состоянии миссенс-мутация 4659G>A (Ala64Thr) в высококонсервативном сайте гена ND2. А у пациента с гаплогруппой Uk1 была выявлена миссенс-мутация 7637G>A/G (Glu18Lys) в гене COII в гетероплазмическом состоянии (рис. 11). Обе эти мутации, предположительно, имеют функциональную значимость и могут обусловливать предрасположенность к БП у данных пациентов.

а) б)

Рисунок 11. Секвенирование мтДНК: а) мутация 7637G>A/G (Glu18Lys) в гене COII у пациента БП с гаплогруппой Uk1; б) мутация 4659G>A (Ala64Thr) в гене ND2 у пациента БП с субгаплогруппой H2

Таким образом, выявленные этноспецифические структурные особенности генов наиболее частых наследственных заболеваний нервной системы, определение демографических и генетических механизмов их распространения на территории РБ позволили разработать наиболее оптимальные для региона подходы их ДНК-диагностики. На основе этих результатов в РБ уже созданы и действуют национальные генетические регистры (компьютерные базы данных) по всем представленным заболеваниям, что реально способствует повышению эффективности медико-генетического консультирования в семьях больных.

ВЫВОДЫ

1. Республика Башкортостан является популяцией высшего иерархического уровня для своего автохтонного населения. В исследованных районах установлены высокие показатели индекса эндогамии - от 0.58 до 0.97. Основная доля браков в РБ является моноэтнической. Суммарно по шести районам, положительная этническая брачная ассортативность установлена для башкир (Н=13.6 на конец ХХ в.) и татар (Н=1.09), отрицательная - для русских (0.45). Этническая подразделенность населения и высокий уровень эндогамности в районах РБ являются основными факторами, способствующими сохранению имеющегося генетического разнообразия и территориальной неравномерности распространения наследственной патологии.

2. Высокая распространенность миотонической дистрофии Россолимо-Куршмана-Штейнерта-Баттена среди зауральских башкир (35 - 40 на 100000 населения) обусловлена эффектом основателя и дрейфом генов, о чем свидетельствует общий гаплотип, сцепленный с экспансией (CTG)n повторов в гене миотонинпротеинкиназы (DMPK) ((Hha1(-)/Hinf1(+)/CTGexp)). Корреляции между частотой нормальных аллелей с высоким числом тринуклеотидных повторов ((СTG)19-35) и распространенностью заболевания в популяциях не выявлено. На основании анализа наследования данного локуса в семьях здоровых доноров подтверждена нестабильность аллелей с числом CTG повторов >19, частота мутирования составила 5х10-3.

3. Распространенность хореи Гентингтона в Башкортостане составляет 2.6 на 100000 населения, что соответствует таковой в среднем в европейских популяциях. Экспансия (CAG)n повторов в гене хореи Гентингтона (HD) обнаруживает практически полное неравновесие по сцеплению с аллелем (CCG)7 и делецией del2642. На мутантных хромосомах выявлено три гаплотипа: (CCG)7/del-, (CCG)7/del+ и (CCG)10/del-, что позволяет предположить, как минимум, три различных источника происхождения ХГ в Республике Башкортостан. Показана роль (CCG)n тракта как цис-активного фактора, модифицирующего стабильность (CAG)n повторов. Величина и вектор мутации зависят от исходного числа (CAG)n повторов и от пола больного родителя: более выраженная экспансия наблюдается при наследовании ХГ от отца. Наличие делеции del2642 на хромосоме с экспансией и аллеля е2 гена АpoE ассоциировано с более поздним началом болезни.

4. Анализ распределения частот генотипов и аллелей высокополиморфных локусов (CTG)n в гене DMPK и (CAG)n в гене HD у народов Волго-Уральского региона выявил высокий уровень их гетерозиготности и значительную неоднородность исследованных популяций как на уровне этносов, так и на уровне этногеографических групп одного этноса (башкир). По характеру полиморфизма локуса (CTG)n популяции Волго-Уральского региона занимают промежуточное положение между популяциями Европы и Азии, а по локусу (CAG)n выявляют значительное сходство с популяциями Европы.

5. У больных мышечной дистрофией Дюшенна из Башкортостана частота делеций в гене дистрофина составляет 31.75%. Определен спектр и частота делеционных точек разрыва гена, высокая частота которых в регионах между экзонами 44-45(10%), 45-47(13%) и 50-52(23%) обосновывает применение высокополиморфных маркеров STR-44, STR-45, STR-49 и STR-50 для прямой диагностики носительства делеций у родственниц больных. Выявлены две новые мутации: c.401_404delCCAA (p.Thr134ThrfsX7), с частотой 3.17% во всей выборке больных (10% среди русских) и с.6626delA (p.Lys2210ArgfsX11) (1.59% во всей выборке и 4.35% - среди татар).

6. Распространенность наследственных моторно-сенсорных нейропатий различных типов в Республике Башкортостан составляет 10.3 на 100000 населения. На основании молекулярно-генетического исследования установлено, что среди всех типов НМСН частота НМСН 1А типа составляет 26%, НМСН 1Х типа - 13.7%. Установлены региональные и этнические особенности спектра и частот мутаций в генах периферического белка миелина (PMP22), структурного белка миелина (MPZ) и коннексина 32 (GJB1). В гене MPZ выявлена миссенс-мутация р. Ser88Ley (с. 263С>G) (0.8%) и синонимичная замена р.Ser238Ser (с.714C>T) (1.6%). В гене GJB1 обнаружены 4 миссенс-мутации: p.Pro87Ala (c.259C>G) (10%), p.Arg22Gln (c.65G>A) (2.98%); p.Arg15Gln (c.44G>A) (1.5%) и p.Thr86Ile (c.257C>T) (0.8%), последняя из которых ранее не описана. Частая мутация Pro87Ala, наиболее распространенная среди башкир (33% среди всех случаев НМСН), сцеплена с общим гаплотипом, что свидетельствует о ее распространении в РБ в результате эффекта основателя.

7. Распространенность болезни Паркинсона в Республике Башкортостан (68.6 на 100 000 взрослого населения) и частота семейных форм (5.95%),- сопоставимы с современными показателями в мире. Установлено неравномерное территориально-этническое распределение заболевания, преобладание среди пациентов лиц татарской этнической принадлежности.

8. Показано, что мутации в генах, ответственных за моногенные формы БП, вносят определенный вклад в развитие спорадической БП: в гене PARK2 выявлена новая мутация - делеция 12-го экзона в гетерозиготном состоянии с частотой 5.26%; в гене LRRK2 обнаружены миссенс-мутация р.Gly2019Ser (1.79% среди башкир), и р.Gly2385Arg (1,28% среди татар).

Генетическим фактором риска развития БП для всех исследованных этнических групп населения Башкортостана является Alu-инсерция Yb8NBC36 гена калиевого канала KCNJ6 (генотип *I/*I и аллель *I). У татар маркерами повышенного риска развития БП являются генотип *Н/*Н и аллель *Н гена катехол-орто-метилтрансферазы, детерминирующие активную форму фермента. Генотип *6/*8 полиморфного локуса (TCAT)n гена тирозингидроксилазы ассоциирован с акинетико-ригидной формой заболевания.

9. Установлено, что в популяции татар гаплогруппа H мтДНК является генетическим маркером повышенного риска, а гаплогруппа U - маркером пониженного риска развития спорадической формы болезни Паркинсона. В гене митохондриального цитохрома В выявлен гаплотип 15693C-15218A-14793A, ассоциированный с гаплогруппой U, не обнаруженный у пациентов с БП. В результате полного секвенирования мтДНК у 4-х пациентов БП татарской этнической принадлежности у носителя субгаплогруппы H2 выявлена мутация Ala64Thr в гене ND2 в гомоплазмическом состоянии, а у носителя гаплогруппы Uk1- мутация Glu18Lys в гене COII в гетероплазмическом состоянии.

10. На основе полученных результатов разработаны оптимальные для этнически подразделенного населения Республики Башкортостан алгоритмы ДНК-диагностики моногенных заболеваний нервной системы (миотонической дистрофии, хореи Гентингтона, мышечной дистрофии Дюшенна/Беккера, наследственных моторно-сенсорных нейропатий); и спорадической формы болезни Паркинсона.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ РАБОТЫ В РЕЦЕНЗИРУЕМЫХ НАУЧНЫХ ЖУРНАЛАХ

Хидиятова И.М., . Хуснутдинова Э.К., Иващенко Т.Э., Рафиков Х.С ПДРФ-анализ локусов МЕТ и D7S23, сцепленных с геном муковисцидоза, в популяции башкир и коми // Генетика. 1993. N 12. С. 329-334.

Khusnutdinova E.K., Khidiyatova I.M., Ivachenkо Т.E. et al..Polymorphism of MET and D7S23 loci linked to the cystic fibrosis gene in Bashkir and Komi populations.// Human Heredity. 1994. V.44. P.191-195..

Хуснутдинова Э.К., Хидиятова И.М., Просняк М.И., Лимборская С.А. Анализ полиморфизма ДНК, выявляемого методом геномной дактилоскопии на основе ДНК фага М13, в популяциях башкир и коми // Генетика. 1994. N 12. С. 1621-1625.

Хуснутдинова Э.К., Хидиятова И.М., Погода Т.В., Просняк М.И., Лимборская С.А Анализ аллельных вариантов гипервариабельного локуса аполипопротеина В в популяциях башкир и коми.//Генетика.1994.№7.С.995-1000.

Каlnin V.V., Kalnina O.V., Khidiyatova I.M., Prosnjak M.I., Limborska S.A., Khusnutdinova E.K..Use of DNA fingerprints for human population genetic studies.// Molecular and General Genetics. 1995. V. 247. P.488-493.

Хуснутдинова Э.К., Хидиятова И.М., Галеева А.Р., Гринчук О.В., Лимборская С.А Анализ полиморфизма гипервариабельного локуса гена аполипопротеина- В в популяциях народов Волго-Уральского региона.// Генетика. 1996. Т. 32. № 12. С.1678-1682.

Хуснутдинова Э.К., Викторова Т.В., Хидиятова И.М., Фатхлисламова Р.И., Иващенко Т.Э..Аллельный полиморфизм ДНК-локусов МЕТ и D7S23, сцепленных с геном муковисцидоза, в популяциях Волго-Уральского региона.// Генетика. 1997. Т.33. № 9. С. 1290-1296.

Хуснутдинова Э.К., Хидиятова И.М., Фатхлисламова Р.И., Викторова Т.В., Гринчук О.В Рестрикционно-делеционный полиморфизм V-области митохондриальной ДНК в популяциях Волго-Уральского региона.// Генетика. 1997. Т.33. № 7. С. 996-1001.

Гринчук О.В., Киселев А.В., Хидиятова И.М., Магжанов Р.В., Хуснутдинова Э.К Анализ делеций в гене дистрофина у больных мышечной дистрофией Дюшенна в Башкортостане // Генетика. 1999. T. 35. №4. C. 551-555.

Хуснутдинова Э.К., Хидиятова И.М., Викторова Т.В., Фатхлисламова Р.И., Лимборская С.А. Анализ полиморфизма ДНК, выявляемого методом геномной дактилоскопии на основе фага М13, в популяциях Волго-Уральского региона// Генетика. 1999. T. 35. №4 C. 509-515.

Хуснутдинова Э.К., Хидиятова И.М., Викторова Т.В., Фатхлисламова Р.И Рестрикционный полиморфизм главной некодирующей области митохондриальной ДНК в популяциях народов Волго-Уральского региона// Генетика. 1999. T. 35. №5. C. 695-702.

Хуснутдинова Э.К., Хидиятова И.М., Викторова Т.В., Фатхлисламова Р.И., Галеева А.Р., Лимборская С.А. Оценка генетических расстояний и таксономический анализ популяций народов Волго-Уральского региона на основе данных о полиморфизме ДНК // Генетика. 1999. T. 35. № 7. C. 982-987.

Фатхлисламова Р.И., Хидиятова И.М., Попова С.Н., Сломинский П.А., Хуснутдинова Э.К., Лимборская С.А.. Анализ полиморфизма CTG-повторов в гене миотонической дистрофии в популяциях Волго-Уральского региона // Генетика. 1999. T. 35. №7. C. 988-993.

Хидиятова И.М., Р.И.Фатхлисламова, Р.В.Магжанов, С.Н.Попова, П.А.Сломинский, С.А.Лимборская, Э.К.Хуснутдинова. Изучение экспансии и частоты мутирования CTG повторов гена миотонической дистрофии. //Генетика.-2000.- V.36.-№10.-С.1181-1183.

Хидиятова И.М., Фатхлисламова Р.И., Магжанов Р.В., Попова С.Н., Сломинский П.А., Лимборская С.А., Хуснутдинова Э.К. Анализ CTG повторов гена миотонинпротеинкиназы у больных миотонической дистрофией из Башкортостана. // Журнал неврологии и психиатрии.- 2001.№3.С.54-59.

Хидиятова И.М, Джемелева Л.У., Хабибуллин Р.М., Хуснутдинова Э.К. Анализ частоты мутации 35delG в гене коннексина 26(GJB2) у больных с несиндромальной аутосомно-рецессивной глухотой из Башкортостана и в популяциях народов Волго-Уральского региона. // Молекулярная биология. 2002, том 36, №3, с.438-441.

Dzhemileva L.U., Khidiyatova I.M., Khabibullin R.M., Khusnutdinova E.K. Novel mutations and haplotype analysis of genomic polymorphisms of GJB2 and GJB3 genes associated with profound and moderately severe hearing loss in patients from Bashkortostan// Balkan Journal of Medical Genetics. 2003. V.6. P.43-46.

П.А.Сломинский, Милосердова О.В., Попова С.И., Гилязова И.Р., Хидиятова И.М., Магжанов Р.В., Хуснутдинова Э.К., Лимборская С.А. Анализ делеционных мутаций в гене паркина у больных идиопатической формой болезни Паркинсона //Генетика.2003 №2. С.223-228.

Кутуев И.А., Фатхлисламова Р.И., Хидиятова И.М., Хуснутдинова Э.К. Анализ полиморфных локусов гена IT15 у народов Волго-Уральского региона //Молекулярная биология 2003. Т.37. №6. С.961-970.

Хидиятова И.М., Хуснутдинова Э.К. Геномная структура и ДНК-диагностика наследственных моногенных заболеваний в Волго-Уральском регионе //Молекулярная биология. 2004. Т.38. №1. С.139-149.

Хидиятова И.М., Ишмухаметова А.Т., Хуснутдинова Э.К. Анализ полиморфизма гена HLA-DRB1 в популяциях Волго-Уральского региона //Генетика. 2004. Т.40. №2. С.203-208.

Кутуев И.А., Хусаинова Р.И., Хидиятова И.М., Магжанов Р.В., Хуснутдинова Э.К. Анализ гена IT15 в семьях больных хореей Гентингтона //Генетика. 2004. Т.40. № 8. С.919-926.

Хидиятова И.М., Гилязова И.Р., Байтимеров А.Р., Магжанов Р.В., Хуснутдинова Э.К. Поиск мутаций в генах PARK1 и PARK2 у пациентов со спорадической и наследственными формами болезни Паркинсона из Башкортостана //Медицинская генетика. 2004. № 6. C.280-284.

Кутуев И.А., Хусаинова Р.И., Хидиятова И.М., Хуснутдинова Э.К. Анализ взаимодействия повторяющихся последовательностей в гене хореи Гентингтона//Медицинская генетика. 2004. №9. С.451-455.

Ишмухаметова А.Т., Хидиятова И.М., Магжанов Р.В., Хуснутдинова Э.К. Анализ ассоциации миастении с полиморфиными локусами (AT)n, +49A/G, -318C/T гена белка 4 цитотоксических Т-лимфоцитов (CTLA4) //Медицинская генетика. 2005. Т.4. №3. С.128-133.

Хуснутдинова Э. К., Хидиятова И. М., Хусаинова Р.И., Карунас А.С., Исламгулов Д.В., Валиев Р.Р., Мурзабаева С.Ш. Молекулярно-генетическое изучение наследственной патологии в Волго-Уральском регионе // Вестник ВОГиС. 2005. №6. С. 102-123.

Ишмухаметова А.Т., Мусин Р.Г., Хидиятова И.М., Магжанов Р.В, Хуснутдинова Э.К. Эпидемиологическое исследование миастении Гравис в Республике Башкортостан // Неврологический журнал. 2006. № 6. С. 16-21.

Крупина Н.Б., Хидиятова И.М., Латыпова Э.Г., Сайфуллина Е.В., Магжанов Р.В., Хуснутдинова Э.К. Клинико-эпидемиологическое исследование наследственных моторно-сенсорных нейропатий и скрининг дупликации гена PMP22 у больных в Республике Башкортостан // Медицинская генетика. 2006. №11. С. 126-128.

Gilyazova I., Khidiyatova I. Akhmetova V., Baitimerov A., Magzhanov R., Khusnutdinova E. Alu-insertion Yb8NBC36 of KCNJ6 gene is a risk factor for Parkinson's disease development // Balkan Journal of medical genetics. 2006. V.9. (1&2). P.33-37.

Зинченко С.П., Кириллов А.Г., Абрукова А.В., Сорокина Т.В., Шаронова Е.И., Хидиятова И.М., Джемилева Л.У., Шокарев Р.А., Близнец Е.А., Зинченко Р.А., Гинтер Е.К. Генетико-эпидемиологическое исследование наследственных (изолированных и синдромальных) нарушений слуха в Республике Чувашии // Медицинская генетика. 2007. Т.6. №5. С. 19-29.

Ельчинова Г.И., Хидиятова И.М., Тереховская И.Г., Хуснутдинова Э.К., Зинченко Р.А. Индекс эндогамии и его изменение во времени в некоторых популяциях Волго-Уральского региона // Генетика, 2007, Т.43., №8. - С.1146-1148.

Зинченко Р.А., Морозова А.А., Галкина В.А., Хидиятова И.М., Хлебникова О.В., Кононов А.Б., Федотов В.П., Хуснутдинова Э.К., Гинтер Е.К. Медико-генетическое изучение населения Республики Башкортостан. Сообщение I. Отягощенность наследственной патологией в трех районах Республики // Медицинская генетика, 2007. - Т.6, № 6. - С. 17-22.

Зинченко Р.А., Морозова А.А., Галкина В.А., Хидиятова И.М., Хлебникова О.В., Кононов А.Б., Федотов В.П., Хусаинова Р.И., Ахметова В.Л., Джемилева Л.У., Щагина О.А., Хуснутдинова Э.К., Гинтер Е.К. Медико-генетическое изучение населения Республики Башкортостан. Сообщение II. Разнообразие наследственной патологии в трех районах Республики // Медицинская генетика, 2007. - Т.6, №7. - С. 18-25.

Ельчинова Г.И., Хидиятова И.М., Морозова А.А., Тереховская И.Г., Хуснутдинова Э.К., Зинченко Р.А. Медико-генетическое изучение населения Республики Башкортостан. Сообщение III. Временная динамика этнической ассортативности зауральских башкир // Медицинская генетика, 2007. - Т.6, №7. - С. 43-47.

Тереховская И.Г., Ельчинова Г.И., Хидиятова И.М., Морозова А.А., Хуснутдинова Э.К., Зинченко Р.А. Медико-генетическое изучение населения Республики Башкортостан. Сообщение IV. Репродуктивные характеристики популяций семи сельских районов // Медицинская генетика, 2007. - Т.6, № 8. - С. 14-21.

Ельчинова Г.И., Хидиятова И.М., Морозова А.А., Тереховская И.Г., Хуснутдинова Э.К., Зинченко Р.А. Медико-генетическое изучение населения республики Башкортостан. Сообщение V. Эндогамия и изоляция расстоянием зауральских башкир // Медицинская генетика, 2007. - Т.6, № 9. - С. 42-45.

Хидиятова И.М., Багаутдинова Э.Г., Галиева Д.В., Крупина Н.Б., Щагина О.А., Тибрукова Т.Б., Магжанов Р.В., Поляков А.В., Хуснутдинова Э.К. Спектр и частота мутаций в гене коннексина 32 (GJB1) у больных с наследственной моторно-сенсорной нейропатией 1Х типа из Башкортостана // Генетика, 2008. - Т.44, №10. - С.1385-1391.

Гилязова И.Р., Хидиятова И.М., Ахметова В.Л., Байтимеров А.Р., Магжанов Р.В., Хуснутдинова Э.К. Исследование ассоциации полиморфных вариантов ряда генов метаболизма дофамина с идиопатической болезнью Паркинсона в Республике Башкортостан// Медицинская генетика, 2008. - №1. - С. 39-49.

Khusnutdinova E., Gilyazova I., Ruiz-Pesini E., Derbeneva O., Khusainova R., Khidiyatova I., Magzhanov R. and Wallace D. A Mitochondrial Etiology of Neurodegenerative Diseases: Evidence from Parkinson's Disease //Annals of the New York Academy of Sciences, 2008 - V3, N11.- P. 447-467.

Джемилева Л.У., Хуснутдинова Э.К., Хидиятова И.М., Хабибуллин Р.М., Тазетдинов А.М. Способ выявления мутаций в гене GJB2, сопровождающихся развитием несиндромальной аутосомно-рецессивной глухоты. Патент на изобретение №2317547. - Зарегистрировано в Гос.реестре изобретений РФ 20 февраля 2008г.

Размещено на Allbest.ru