Антитела к антигенам сперматозоидов человека в норме и при нарушениях репродуктивной функции

Рис. 10 Активность связывания антител к БТШ90 с антигенами сеперматозоидов, выявляемая в сыворотках крови девушек (n=7), здоровых женщин, не имевших беременности (n=6), фертильных беременных женщин (n=18), фертильных женщин вне беременности (n=9) женщин с иммунным фактором бесплодия (n=7) и пациенток с угрозой прерывания беременности (n=8)

В ранние сроки нормально развивающейся беременности (первый триместр) активность антител к БТШ90 резко снижалась, а при высокой активности антител к БТШ90 диагностировалась угроза прерывания беременности. После нормально протекающей беременности и родов наблюдалось восстановление высокой активности антител. Снижение активности антител к БТШ90 при беременности также является маркером снижения толерантности иммунной системы матери к отцовским антигенам, так как уровень АСАТ, выявляемых в крови женщин при физиологической беременности (MAR%=55%, n=10) был существенно выше (р<0,0001), чем у фертильных женщин вне беременности (MAR%=4%, n=10). Известно, что высокий уровень антиотцовских антител при беременности способствует выживанию полуаллогенного плода (Orgad S. et al., 1999), и, таким образом, снижение толерантности к отцовским антигенам рассматривается в настоящее время как необходимый этап иммунорегуляции беременности.

У небеременных пациенток с диагнозом «привычное невынашивание беременности» активность антител к БТШ90 была существенно ниже (р<0,02), чем у фертильных женщин (18,1 УЕФ, n=15 и 37,1 УЕФ, n = 8, соответственно). У 15 женщин с привычным невынашиванием беременности активность антител к БТШ90 оценивалась до и после иммуноцитотерапии (ИЦТ) - трехкратного введения лейкоцитов мужа, проводившегося с интервалом в 2-3 дня женщинам вне беременности на фоне контрацепции. Сыворотки крови получали в день проведения первой ИЦТ и через 2-3 недели после проведения третьей ИЦТ, после чего женщины вели половую жизнь без контрацепции. В 7 (47%) случаев иммуноцитотерапия приводила к повышению, а в 8 (53%) случаев - к снижению активности антител к БТШ90. У 3 из 4 женщин с максимально высокой активностью антител к БТШ90, выявленной после ИЦТ, через 1-2 недели после ИЦТ наступила беременность, закончившаяся родами.

Увеличение активности антител к БТШ90 в сыворотке крови пациенток после ИЦТ и последующее восстановление репродуктивной функции у этих женщин является еще одним фактом, подтверждающим, что высокая активность антител к БТШ90 в сыворотке крови небеременных женщин является важным прогностическим показателем, определяющим высокую вероятность наступления беременности и успешное ее протекание. Суммируя полученные данные, можно утверждать, что активность антител к БТШ90 может рассматриваться как маркер иммунной регуляции процессов репродукции и являться прогностическим показателем при выявлении нарушений иммунорегуляции различных этапов репродукции.

Активность антител к БТШ90 может определяется взаимодействием белков теплового шока, экспрессируемых сперматозоидами и/или клетками репродуктивного тракта, и иммунокомпетентных клеток.

Был проведен анализ активности антител к БТШ90 в сыворотке крови и фенотипа лимфоцитов периферической крови пациентов с бесплодием неясного генеза. Как у мужчин, так и у женщин было выявлено снижение активности антител к БТШ90 при увеличении относительного содержания бв T-клеток (r= - 0,66, р=0,02, n=13 и r= - 0,48, р=0,01, n=26, соответственно) и CD4+ клеток (r=-0,79, р=0,01, n=12 и r= - 0,44, р=0,03, n=24, соответственно). У женщин наблюдалась также отрицательная корреляция между активностью антител к БТШ90 и как относительным, так и абсолютным содержанием CD8+ лимфоцитов (r= - 0,49, р=0,02, n=22 и r= - 0.47, р=0,05, n=19, соответственно). Была обнаружена отрицательная зависимость между абсолютным содержанием NKT клеток (CD3+/CD56/16+) в крови женщин и активностью антител к БТШ90 (r= _ 0,45, р=0,04, n=21). Не было выявлено зависимости между активностью антител к БТШ90 и как абсолютным, так и относительным содержанием гд Т-клеток, CD16+, CD3?CD56/16+ (NK-клеток), CD25+, CD4+/CD25+, CD19+ (В-клеток), CD19+/CD5+ (В1 клеток), CD95+ в периферической крови мужчин и женщин.

Продемонстрирована отрицательная корреляция между количеством гд Т-клеточных рецепторов на поверхности гд Т-клеток и активностью aнтител к БТШ90 в сыворотке крови мужчин и женщин (рис. 11).

Так как снижение числа гд Т-клеточных рецепторов отражает созревание гд Т-клеток (Mincheva-Nilsson L., 2003), можно утверждать, что активность антител к БТШ90 увеличивается при возрастании зрелости гд Т-клеток, присутствующих в периферической крови.

Возможно, незрелые гд Т-клетки, продуцирующие преимущественно ФНОб и ИФг (Arck P. et al., 1999), блокируют синтез антител, в то же время зрелые клетки гд Т-клетки, продуцирующие, преимущественно ТФРв2 и ИЛ10 (Mincheva-Nilsson L., 2003), стимулируют синтез антител к БТШ90.

Рис. 11 Зависимость активности антител к БТШ90 от экспрессии Т-клеточных рецепторов (ТКРгд ) на гд Т-лимфоцитах периферической крови мужчин и женщин вне беременности

Известно, что предшественниками гд Т-клеток являются незрелые клетки костного мозга, экспрессирующие молекулы адгезии нейрональных клеток СD56, причем незрелые гд Т-клетки характеризуются фенотипом СD56+/ТCRгд+, а зрелые гд Т-клетки - фенотипом СD56-/ТCRгд+ (Mincheva-Nillson L. et al., 1997).

Рис. 12 Выявление зрелых (ТCRгд+/СD56-) и незрелых (ТCRгд+/СD56+) гд Т-клеток в периферической крови пациентки с бесплодием неясного генеза

Был проведен анализ гетерогенности гд Т-лимфоцитов (рис. 12) и выявлена зависимость активности антител к БТШ90 от содержания зрелых гд Т-клеток в периферической крови мужчин (r=0,65, p<0,05, n=10) и женщин (r=0,89, р<0,0006, n=10). В то же время содержание незрелых гд Т-клеток практически не влияло на активность антител.

Антигенсвязывающая активность антител к БТШ90 может являться показателем, отражающим взаимодействие белков теплового шока с регуляторными клетками. Особый интерес представляют гд Т-клетки, присутствующие как в периферической крови, так и в слизистых оболочках репродуктивного тракта мужчин (Munoz M.G. and Witkin S.S. 1995) и женщин (Mincheva-Nillson L., 2003). Известно, что белки теплового шока могут стимулировать гд Т-клетки, связываясь с ними посредством CD91 рецепторов и Toll-подобных рецепторов 2 и 4 типов, или взаимодействовать с Т-клеточными рецепторами гд Т-клеток как суперантигены (Binder R.G. et al., 2004). Установлено, что избыточная презентация БТШ90 стимулирует пролиферацию и созревание гд Т-клеток (Kunzmann V. et al., 2004). Обнаружено участие гд Т-клеток в формировании антител к белкам теплового шока (Pao W. et al., 1996; Lindroth К. et al., 2002).

Большое внимание в последнее время уделяется обсуждению роли БТШ и регуляторных клеток в формировании периферической толерантности к ауто- и аллоантигенам. Продемонстрировано, что преиммунизация экспериментальных животных бактериальными БТШ60 препятствует развитию артрита (Anderton S.M. et al., 1995, Paul A.G.A. et al., 2000). Распространенность аутоиммунных заболеваний в странах с высоким уровнем жизни связывают с низкой вероятностью контактирования жителей этих стран с микобактериями (King С. et al., 2004), так как бактериальные БТШ обеспечивают функциональную активность регуляторных клеток (Multhoff G., 2006, Qin Н.Y. et al., 2006). В то же время не вызывает сомнения патогенетическая роль белков теплового шока при рассеянном склерозе (Birnbaum G. and Kotilinek L., 1999), сахарном диабете (Weitgasser R. et al., 2003), и ревматоидном артрите (van Eden W., 1991).

Эти данные, а также результаты собственных исследований позволяют предположить, что формирование толерантности к алло- и аутоантигенам сперматозоидов обеспечивается сбалансированным взаимодействием белков теплового шока, экспрессируемых сперматозоидами и/или аутологичными клетками репродуктивного тракта, регуляторных Т-клеток, антиген-презентирующих клеток и клеток-эффекторов. Количество экспрессируемых белков теплового шока, количественный баланс и функциональные характеристики иммунокомпетентных клеток, участвующих в этих взаимодействиях могут определять направленность иммунной реакции - формирование толерантности к антигенам сперматозоидов или продукцию антиспермальных антител.

Антигенсвязывающая активность антител к БТШ90 может являться маркером, отражающим как состояние регуляторного клеточного звена иммунной системы, так и уровень антиспермальных антител в сыворотке крови и секретах репродуктивного тракта мужчин и женщин, и использоваться в качестве диагностического критерия при выявлении нарушений иммунорегуляции репродуктивной функции при бесплодии и невынашивании беременности.

Выводы

1. Разработан способ выявления антиспермальных антител на поверхности живых сперматозоидов с помощью проточной цитофлуорометрии. Установлено, что антиспермальные антитела, присутствующие в сыворотке крови и секретах репродуктивного тракта, гетерогенны по изотипу, температурному оптимуму связывания с антигенами, механизмам влияния на функции сперматозоидов.

2. Связывание антиспермальных антител, присутствующих в секретах репродуктивного тракта мужчин и небеременных женщин, с поверхностными антигенами живых сперматозоидов является маркером нарушения репродуктивной функции. Иммунный фактор бесплодия, обусловленный присутствием антиспермальных антител в семенной жидкости или цервикальной слизи, выявляется при бесплодии неясного генеза у 37% мужчин и у 39% женщин, соответственно.

3. Разработан объективный количественный способ определения основных параметров акросомного статуса сперматозоидов человека с помощью проточной цитофлуорометрии. Способ позволяет оценивать процент спонтанной и индуцированной ионофором А23187 акросомной реакции и диагностировать бесплодие, обусловленное нарушениями функций сперматозоидов, при нормальных показателях спермограммы.

4. Одним из патогенетических механизмов влияния антиспермальных антител на репродуктивную функцию является преждевременная функциональная и метаболическая активация сперматозоидов, покрытых антиспермальными антителами. При активации меняется траектория движения сперматозоидов, усиливается генерация свободных радикалов кислорода, увеличивается вероятность преждевременной акросомной реакции и снижается вероятность оплодотворения.

5. Активация сперматозоидов, покрытых антителами, сопровождается сбрасыванием поверхностных комплексов антиген-антитело, что определяет низкую чувствительность выявления антиспермальных антител с помощью метода проточной цитофлуорометрии и ограничивает возможность использования живых сперматозоидов для количественной оценки содержания антиспермальных антител в сыворотке крови и секретах репродуктивного тракта.

6. В сыворотке крови и секретах репродуктивного тракта фертильных мужчин и женщин присутствуют антитела к белкам теплового шока с молекулярным весом 90 кДа (БТШ90), взаимодействующие с антигенами сперматозоидов, сорбированными на поверхности латексных частиц. Метод проточной цитофлуорометрии является объективным количественным методом, позволяющим оценивать активность связывания антител к БТШ90 с антигенами сперматозоидов.

7. Изменение репродуктивного статуса фертильных женщин сопровождается изменением активности связывания антител к БТШ90 с антигенами сперматозоидов, выявляемой в сыворотке крови. Антигенсвязывающая активность антител к БТШ90 увеличивается при начале половой жизни, снижается на ранних сроках беременности и достигает исходного высокого уровня после родов.

8. Высокая антигенсвязывающая активность антител к БТШ90, выявляемая в сыворотке крови и/или секретах репродуктивного тракта, является маркером толерантности к аллоантигенам полового партнера у женщин и к аутоантигенам сперматозоидов у мужчин. Иммунный фактор бесплодия, обусловленный присутствием антиспермальных антител, диагностируется при низкой антигенсвязывающей активности антител к БТШ90.

9. Увеличение уровня антиспермальных антител в сыворотке крови на ранних сроках физиологической беременности наблюдается на фоне сниженной антигенсвязывающей активности антител к БТШ90. Высокая активность антител к БТШ90, выявляемая в сыворотке крови в ранние сроки беременности, является прогностическим показателем при диагностике угрозы прерывания беременности.

10. Продукция антиспермальных антител, выявляемых в сыворотке крови, зависит от состояния регуляторного клеточного звена иммунной системы. Снижение относительного содержания зрелых гд Т- лимфоцитов с фенотипом ТCRгд+/СD56? в периферической крови мужчин и женщин сопровождается снижением активности антител к БТШ90 и, соответственно, увеличением вероятности выявления антиспермальных антител.

Список основных работ, опубликованных по теме диссертации

1. Nikolaeva M.A., Ter-Avanesov G.V., Terekhina L.N., Pshenichnikova T.Ja., Sukhikh G.T. Antisperm antibody detection on the surface of the living spermatozoa // J. of Reprod. Imunol. - 1989.- Suppl.1. - P.61.

2. Николаева М.А., Терехина Л.Н., Волков Н.И., Федорова Т.А., Пшеничникова Т.Я., Сухих Г.Т. Выявление антиспермальных антител у супружеских пар с бесплодием неясного генеза и эндометриозом // Тез. 4 Всес. симп. "Иммунология репродукции".- Киев. - 1990. - C.53

3. Николаева М.А., Тер-Аванесов Г.В., Терехина Л.Н., Пшеничникова Т.Я., Сухих Г.Т. Выявление антиспермальных антител на поверхности живых сперматозоидов методом проточной цитофлуорометрии // Ж. «Бюллетень экспериментальной биологии и медицины». - 1990. - Т.109, №4.- С.379-382.

4. Nikolaeva M.A., Sukhikh G.T., Ter-Avanesov G.V., Terekhina L.N., Pshenichnikova T.Ja. Detection of antisperm antibodies on the surface of living spermatozoa using flow cytometry // Abstr. of V11 World Congress of human reproduction. - Helsinki, Finland. - 1990. - Abstr. 384.

5. Nikolaeva M.A., Terekhina L.N., Sukhikh G.T. Detection of antisperm antibodies in cervical mucus by flow cytometry // Abstr. of 7 World Congress of Cervical Pathology and Colposcopy. -Rome, Italy. - 1990. - P66.

6. Николаева М.А., Вербицкий М.Ш., Сухих Г.Т. Использование проточной цитофлуорометрии для определения антиспермальных антител методами спермоиммобилизации и спермотоксичности //Ж. «Бюллетень экспериментальной биологии и медицины». -1992. - Т114, №10. - С. 398-399.

7. Николаева М.А., Филиппова Р.Д., Голубева Е.Л., Сухих Г.Т. Антиспермальные антитела и состояние клеточного иммунитета у бесплодных женщин с эндометриозом // Тез. республиканской конференции по иммунологии репродукции. - Иваново. - 1993. - С.53.

8. Nikolaeva M.A., Golubeva E.L., Philippova R.D., Volkov N.I., Sukhikh G.T. Antisperm antibodies and cell immunity of infertile women with endometriosis // Abstr. of Int. Symp. Immunology of Reproduction. - Kiev. - 1993. - P.113.

9. Nikolaeva M.A., Kulakov V.I., Ter-Avanesov G.V., Terekhina L.N., Pshenichnikova T.Ja., Sukhikh G.T. Detection of antisperm antibodies on the surface of living spermatozoa using flow cytometry: preliminary study // Fertility and Sterility. - 1993. - Vol.59, №3. - P.639-644

10. Николаева М.А., Терехина Л.Н., Филиппова Р.Д., Пшеничникова Т.Я., Сухих Г.Т. Антиспермальные антитела при бесплодии у женщин // Сб. научных трудов "Иммунологические аспекты репродуктивного здоровья". - М. - 1995. - С.205-212.

11. Nikolaeva M.A., Goukasian I.A., Philippova R.D., Sukhikh G.T. Using flow cytometry for acrosome status evaluation in human sperm // Abstr. of Int. Symp. on Human Sperm Acrosome Reaction. - France. -1995. - P.458-459.

12. Nikolaeva M.A., Goukasian I.A., Philippova R.D., Sukhikh G.T. Evaluation of stimulus-induced acrosome reaction by flow cytometry // Abstr. of 11 Int. Congress on Andrology. - Turkey. - 1995. - Abstr. A12.

13. Филиппова Р.Д., Николаева М.А., Гукасян И.А., Волков Н.И., Пшеничникова Т.Я., Сухих Г.Т. Антиспермальные антитела и состояние клеточного иммунитета у женщин с эндометриозом // Ж. «Акушерство и гинекология». - 1996. - №1. - С.34-36.

14. Nikolaeva M.A., Goukasian I.A., Philippova R.D., Korotkova I.V., Sukhikh G.T. Flow Cytometry study on the effect of serum and peritoneal fluid of women on sperm-binding activity of IgG antisperm antibodies // Abstr. of 3 International Forum of Reproductive Immunology. - Germany. - 1996. - P.9.

15. Nikolaeva M.A., Kuyavskaja D.V., Matveeva N.K., Goukasian I.A., Philippova R.D., Korotkova I.V., Sukhikh G.T., Adamyan L.V. Characterization of lymphocyte subpopulations and antisperm antibodies detection in the blood and peritoneal fluid of women with endometriosis // Abstr. of 3 International Forum of Reproductive Immunology. - Germany. - 1996. - P.18.

16. Nikolaeva M.A., Kuyavskaja D.V., Goukasian I.A., Philippova R.D., Korotkova I.V., Sukhikh G.T. Effect of spermatozoa's individual properties on results of antispermal antibodies detection in women's serum // Abstr. of Int. Symp. Immunology of Reproduction. - Ukraine, Kiev. - 1996. - P.72.

17. Nikolaeva M.A., Goukasian I.A., Philippova R.D., Korotkova I.V., Sukhikh G.T. Adaptation of flow cytometry method for detection of antisperm antibodies in women blood serum and peritoneal fluid // Abstr. of Int. Symp. Immunology of Reproduction. - Ukraine, Kiev. - 1996. - P.73.

18. Николаева М.А., Гукасян И.А., Филиппова Р.Д., Короткова И.В., Куявская Д.В., Сухих Г.Т. Выявление антиспермальных антител в сыворотке крови женщин при использовании сперматозоидов различных доноров // Ж. «Бюллетень экспериментальной биологии и медицины». -1997. - Т124, №7. - С. 89-91.

19. Николаева М.А., Гукасян И.А., Филиппова Р.Д., Короткова И.В., Куявская Д.В., Сухих Г.Т. Адаптация метода проточной цитофлуорометрии для выявления антиспермальных антител в сыворотке крови и перитонеальной жидкости женщин // Ж. «Бюллетень экспериментальной биологии и медицины». -1997. - Т124, №9. - С. 339-341.

20. Nikolaeva M.A., Goukasian I.A., Filippova R.D., Korotkova I.V., Sukhikh G.T. Flow Cytometry study on the effect of serum and peritoneal fluid of women on the sperm-binding activity of IgG antisperm antibodies // Fertility and Sterility. - 1997. - Vol.67, №4. - P.680-686.

21. Nikolaeva M.A., Korotkova I.V., Golubeva Е.L., Bozedomov V.А.., Sukhikh G.Т. Interaction of the live antisperm antibodies-positive spermatozoa with antibodies to immunoglobulin G results in appearance of spermatozoa subpopulation without antisperm antibodies on their surface // Abstr. of Int. Symp. on Human Reproduction and Male Subfertility. - 1998. - Genk, Belgium. - P.60.

22. Nikolaeva M.A., Sukhikh G.Т., Golubeva Е.L., Korotkova I.V., Kulakov V.I. Induction of acrosome reaction in antisperm antibodies-positive spermatozoa after their interation with the antibodies // Abstr. of 8 Int. Symp. on Spermatology. - 1998. - Montreal, Canada. - Abstr. Р1-44.

23. Nikolaeva MA, Golubeva E.L., Kulakov V.I., Sukhikh G.T. Evaluation of stimulus-induced acrosome reaction by two-colour flow cytometric analysis // Molecular Human Reproduction. - 1998. - Vol.4, - №3. - P.243-250.

24. Nikolaeva M.A., Golubeva Е.L., Korotkova I.V., Sukhikh О.Т.Shedding of immune complexes from the sperm surface during detection of antisperm antibodies // Abstr. of European Meeting of Immunology and Reproduction. -1999. - Rome, Italy. - P.64

25. Голубева Е.Л., Короткова И.В., Николаева М.А., Сухих Г.Т. Нарушения акросомальной реакции в диагностике репродуктивной функции // Сб. матер. 1 межд. конф. "Хроноструктура и хроноэкология". - 2000. - М. С55.

26. Божедомов В.А., Сухих Г.Т., Николаева М.А. Способ фармакологического лечения аутоиммунного мужского бесплодия // Патент на изобретение № 2149021 от 20.05.2000. Российская Федерация.

27. Божедомов В.А., Лоран О.Б., Николаева М.А., Сухих Г.Т. Влияние антиспермальных антител на мужскую репродуктивную функцию // Ж. «Андрология и генитальная хирургия». - 2000. - N2. - С.25-33.

28. Nikolaeva M.A., Golubeva E.L., Korotkova I.V., Repin V.S., Krutskikh A.U., Sukhikh G.T. The effect of antisperm antibodies on the acrosome status of human spermatozoa // Abstr. of Second Int. Conf. on Ехрerimental and Clinical Reprod. Immunobiology. - 2000. - Amsterdam, Netherlands. - P.85.

29. Nikolaeva M.A., Kulakov V.I., Korotkova I.V., Golubeva E.L., Koujavskaja D.V., Sukhikh G.T. Antisperm antibodies detection by flow cytometry is affected by aggregation of antigen-antibody complexes on the surface of spermatozoa // Human Reproduction. - 2000. - Vol.15, №12. - P.2545-2553.

30. Божедомов В.И., Лоран А.Б., Николаева М.А., Сухих Г.Т. Влияние антиспермальных антител на мужскую репродуктивную функцию // Ж. «Андрология и генитальная хирургия». - 2000. - № 2. - С.25-33.

31. Короткова И.В., Николаева М.А., Божедомов В.А., Голубева Е.Л., Крутских А.Ю., Тер-Аванесов Г.В., Сухих Г.Т. Уровень генерации свободных радикалов в образцах эякулята бесплодных пациентов. // Ж. «Бюллетень экспериментальной биологии и медицины». - 2001. - Т131, №9. - С. 555-557.

32. Николаева М.А., Крутских А.Ю., Короткова И.В., Голубева Е.Л., Кулаков В.И., Сухих Г.Т. Антиспермальные антитела и бесплодие - неразрешимая проблема или перспективное направление исследований? // Ж. «Бюллетень экспериментальной биологии и медицины». -2001. - Т131, №1. - С. 33-38.

33. Nikolaeva M.A., Golubeva E.L., Korotkova I.V., Koujavskaja D.V., Sukhikh G.T. Production of free radicals in semen samples of autoimmune infertile men // Am.J.Reprod.Immunol. - 2001. - Vol.46, N1. - P51.

34. Божедомов В.А. Николаева М.А.,.Голубева Е.Л. Короткова И.В Сухих Г.Т. Теодорович О.В. Мужское бесплодие при нормозоозооспермии // Тезисы Всеросс.конф. «Мужское здоровье». - 2003. - М. - С.15.

35. Божедомов В.А., Николаева М.А., Логинова Н.С., Матвеева Н.К., Верясов В.Н., Сухих Г.Т., Теодорович О.В. Особенности клеточного, гуморального иммунитета и системы интерферонов у мужчин с аутоиммунными реакциями против сперматозоидов // Тезисы Всеросс.конф. «Мужское здоровье». - 2003. - М. - С.19-20.

36. Божедомов В.А., Николаева М.А., Теодорович О.В. Нормализация акросомальной реакции в результате комплексной терапии карнитином, фруктозой и лимонной кислотой // Ж. «Проблемы репродукции». - 2003. - №6. Р.49-52

37. Nikolaeva M.A., Korotkova I.V., Golubeva E.L., Sukhikh G.T. Detection of semen antisperm antibodies using indirect flow cytometry test // J. of Reprod. Imunol. - 2003. - Vol.58, N2. - P.136.

38. Nikolaeva M.A., Alexinskaja M.A., Elistratova O.S., Sukhikh G.T. The kinetic of spermatozoa interaction with antisperm antibodies in sera of fertile women // Am.J.Reprod.Immunol. - 2004. - Vol.51, N6. - P.486.

39. Николаева М.А. Ауто- и изо-антитела к антигенам сперматозоидов человека в норме и при нарушениях репродуктивной функции // Russian Journal of Immunology. - 2005. - Vol.9, Suppl.2. - P.56-60.

40. Николаева М.А., Голубева Е.Л., Короткова И.В., Сухих Г.Т., Назаренко Е.Г. Влияние лимфоцитотерапии на динамику уровня антиспермальных антител в цервикальной слизи женщин при бесплодии // Тез. II Российской конф. по иммунотерапии и иммунореабилитологии. - 2005. - М. - С.189

41. Алексинская М.А., Николаева М.А., Данилов С.М., Елистратова О.С., Сухих Г.Т. Количественная оценка тестикулярной изоформы ангиотензин-превращающего фермента на поверхности сперматозоидов человека // Ж. «Бюллетень экспериментальной биологии и медицины». - 2006. - Т.141, №1. - С. 41-44.

42. Алексинская М.А., Николаева М.А., Данилов С.М., Кузьмичев Л.Н., Левчук Т.Н., Елистратова О.С., Сухих Г.Т. Зависимость скорости движения сперматозоидов от экспрессии тестикулярной изоформы ангиотензин-превращающего фермента на их поверхности // Ж. «Бюллетень экспериментальной биологии и медицины». - 2006. - Т.141, N.2. - С. 198-201.

43. Nikolaeva M.A., Balyasnikova I.V., Alexinskaya M.A., Metzger R., Franke F.E., Albrecht R.F.II, Kulakov V.I., Sukhikh G.T., Danilov S.M. Testicular isoform of angiotensin I-converting enzyme (ACE, CD143) on the surface of human spermatozoa: revelation and quantification using monoclonal antibodies // Am.J.Reprod.Immunol. - 2006. - Vol.55, №1.- P54-68.

Размещено на Allbest.ru