Химиопрофилактика рака молочной железы в эксперименте

22

20/90,9

154,0±9,0

2. МНМ + мелоксикам

23

11/47,8***

201,7±11,6**

36,2**

Различия с контрольной группой достоверны: ** р<0,01;*** р<0,001.

При изучении возможных механизмов химиопрофилактического действия мелоксикама нами получены следующие данные. Добавление мелоксикама приводило к статистически достоверному снижению концентрации эстрадиола на 34% (р<0,05) по сравнению с контролем. Уровень ЛГ в группе был повышен на 26,6%. В группе, получавшей в качестве модификатора канцерогенеза мелоксикам, была выявлена также достоверная гипотриглицеридемическая активность и некоторое гипохолестеринемическое действие: уровень триглицеридов был снижен на 30% (р<0,05), концентрация общего холестерина 13% по сравнению с показателями в группе контроля (р<0,05). Корригирующее действие на нарушения липидного обмена при применении мелоксикама коррелировало со статистически значимым нормализующим влиянием на баланс в системе антиоксидантный статус - процессы ПОЛ. Мелоксикам наиболее эффективно, по сравнению с другими исследуемыми средствами, снижал содержание МДА на всех этапах исследования. При этом, уже к концу 2-ой недели химического канцерогенеза в группе животных, получавших мелоксикам, отмечалось достоверное увеличение содержания СОД в 2,7 раза, каталазы в 2,0 раза по сравнению с контрольной группой крыс (р<0,001). Эта тенденция сохранялась и на 6-ой неделе эксперимента. На 36-ой неделе канцерогенеза отмечалось некоторое снижение уровня СОД (на 20%), при значительном снижении активности каталазы (в 2,0 раза) по сравнению с 6-ой неделей. Однако и на данном этапе СОД в 2,1 раза, каталаза в 2,0 раза превосходили по активности соответствующие показатели в крови контрольных животных (р<0,01). Достаточно важным представляется факт достижения максимальных значений показателей антиоксидантной защиты на начальных этапах канцерогенеза, так как именно на этих этапах антиоксиданты действуют как антимутагены и антипромоторы, препятствуя злокачественной трансформации клеток. С данным эффектом может быть связано достоверное (р<0,01) удлинение латентного периода развития опухолей в группе животных, получавших мелоксикам. Спонтанная трансформация лимфоцитов составила на 28-й неделе эксперимента 3,5±0,03% (р<0,05), что было в 1,3 раза ниже, чем у интактных животных, но в 1,7 раза выше, чем у животных контрольной группы. При действии ФГА данный показатель составил на 28-й неделе 8,3±1,1%, против 12,6±0,72% в группе интактных животных (р<0,05), при действии КонА - 6,4±0,50% (р>0,05) против 7,98±0,68%. Коэффициент ФГА/КонА, позволяющий оценить дифференцировку Т-клеток, составил к 28-й неделе 1,3±0,08 против 1,6±0,1 у животных контрольной группы (р<0,05). Бласттрансформация B-лимфоцитов, стимулированная ЛПС, составила к концу исследования 8,4±1,1%, что было несколько выше показателя в контрольной группе (7,6±1,2%) (р>0,05). Число натуральных киллеров на 28-й неделе исследования в группе, получавшей мелоксикам, значимо не отличалось от показателя в интактной группе. Нами получены данные об отсутствии значимого защитного влияния мелоксикама в отношении функциональной активности НГ. Влияние на апоптоз лимфоцитов периферической крови проявлялось значимым, по сравнению с контрольной группой, повышением активационного апоптотического потенциала Т-лимфоцитов: ААИ_актив составил на 28-й неделе 17,2±1,1% против 15,7±1,3% (р<0,05). Исходя из полученных данных, можно сделать вывод о том, что мелоксикам обладает иммуномодулирующей активностью, прежде всего, в отношении клеточного иммунитета, что может играть определенную роль в реализации его химиопрофилактического действия. При изучении химиопрофилактической активности ингибитора АПФ каптоприла получены следующие данные (табл. 7).

Каптоприл не оказывал ингибирующего действия на возникновение индуцированных MНM опухолей молочной железы: частота возникновения новообразований и средний латентный период их развития достоверно не отличались от контрольных значений. В то же время препарат достоверно замедлял темпы роста развившихся опухолей (табл. 8) и увеличивал продолжительность жизни животных опытной группы по сравнению с контролем. Средняя продолжительность жизни животных с ОМЖ в данной группе составила 50,0±3,5суток против 32,0±2,4 суток в контрольной группе (p<0,001). Значительное снижение темпов роста опухолей при действии каптоприла обусловлено, по-видимому, антиангиогенными свойствами препарата, связанными с ингибированием образования ангиотензина II, угнетением рецепторов металлопротеиназ, ингибированием фактора роста эндотелия сосудов (Volpert O.V., 1996; Yoshiji H.,2002; Koh W.P., 2005).

Таблица 7 Влияние каптоприла на возникновение ОМЖ, индуцированных у крыс МНМ

Группа	Показатель
	Эффективное число животных	Число животных с ОМЖ, абс/%	% ингибирования	Средний латентн. период, сутки	Средняя продть жизни живот.с опухолями, сутки	Увеличение прод-ти жизни опыт. живот.,%
МНМ	24	21 87,5%	-	119,0±7,4	32,0± 2,4	-
МНМ+ каптоприл	19	14 73,7%	15	124,0±8,9	50,0±3,5***	56,2

Различия с контрольной группой достоверны: *- р<0,05; **- р<0,005; ***- р<0,001.

Таблица 8. Оценка противоопухолевой активности каптоприла на основании определения процента торможения (Т/%), индекса эффективности (ИЭ) и коэффициента активности (Ка)

Группа, воздействие	Показатель	Недели после выявления опухоли
		2	4	8
МНМ + каптоприл	Т, %	48,7	53,7	31,8
	ИЭ, у.е.	1,9	2,1	1,5
	Ка, у.е.	0,5	0,5	0,3

Значимой с точки зрения влияния на канцерогенез следует признать выявленную нами способность каптоприла достоверно на 42,5% (р<0,05) понижать содержание триглицеридов в сыворотке крови. Нормализация липидного состава крови при действии каптоприла может быть обусловлено снижением продукции ангиотензина II, так как имеется прямая и значимая корреляция между повышенным уровнем холестерина и триглицеридов и активностью АПФ (Альтшулер Б.Ю., 2005). Препарат проявлял также определенную антиоксидантную активность, которая выражалась в повышении активности СОД и каталазы относительно соответствующих показателей в контроле в 1,4 раза (р<0,05) и понижению содержания МДА в 1,2 раза относительно контроля (р<0,05). Достоверного иммуномодулирующего действия в условиях проведенного эксперимента выявлено не было.



1-контроль (МНМ); 2-МНМ+тамоксифен; 3-МНМ+летрозол; 4-МНМ+ловастатин; 5-МНМ+мелоксикам; 6-МНМ+розиглитазон; 7-МНМ+каптоприл, 8-МНМ+щ-3 ненасыщенные жирные кислоты;9- МНМ+свиной жир

Различия с контрольной группой достоверны: * р<0,05; ** р<0,01.

Рис. 1. Влияние соединений синтетического происхождения на концентрацию эстрадиола, пролактина и гонадотропных гормонов гипофиза в сыворотке крови крыс при экспериментальном канцерогенезе молочной железы.

1-контроль (МНМ); 2-МНМ+тамоксифен; 3-МНМ+летрозол; 4-МНМ+ловастатин; 5-МНМ+мелоксикам;6-МНМ+розиглитазон;7-МНМ+каптоприл;8-МНМ+щ-3 ненасыщенные жирные кислоты; 9- МНМ+свиной жир. Различия с контрольной группой достоверны: * р<0,05; ** р<0,01.

Рис. 2. Влияние соединений синтетического происхождения на показатели липидного обмена в сыворотке крови крыс при экспериментальном канцерогенезе молочной железы (%).

2 неделя

6 неделя

30-36 неделя

1-интактный контроль; 2-контроль (МНМ); 3-МНМ+мелоксикам; 4-МНМ+ловастатин; 5-МНМ+каптоприл; 6-МНМ+розиглитазон.

Различия с контрольной группой достоверны: * р<0,05; ** р<0,01; *** р<0,001.

Рис. 3. Влияние ряда синтетических соединений на показатели ПОЛ-АОЗ.

Химиопрофилактическая активность соединений растительного происхождения и микронутриентов.

Результаты исследований химиопрофилактической активности соединений полифенольной структуры ресвератрола, куркумина и соевого протеина приведены в таблице 9.

Добавление в рацион животных ресвератрола и куркумина приводило к достоверному снижению частоты возникновения новообразований молочной железы с 90,9 % в контрольной группе до 40% (p<0,001) в группе, получавшей куркумин, и 47,7% в группе, получавшей ресвератрол (р<0,01). У крыс, получавших диету, обогащенную соевым протеином, частота возникновения опухолей молочной железы была снижена c 84% в контрольной группе до 43,4% в опытной (p<0,01). Средний латентный период развития опухолей при применении ресвератрола был увеличен по сравнению с контролем на 28% (p<0,01), при применении куркумина на 26% и при добавлении в корм соевого протеина на 12,5% (p<0,05). Индекс Айбела в группах, получавших куркумин и ресератрол, был снижен до 33,9% (p<0,001) и 40,7% (р<0,01) соответственно относительно контроля (0,59). В группе, получавшей соевый протеин, сроки выхода гистологически верифицированных опухолей отставали от контрольных значений на 45,3% (p<0,01). Отмечено достоверное увеличение продолжительности жизни животных и торможение роста развившихся новообразований в опытных группах по сравнению с контролем.

Таблица 9. Влияние куркумина, ресвератрола и соевого протеина на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс МНМ

Серия опытов	Группа,воздействие	Эффективное число крыс	Число животных с ОМЖ, абс /%	Средний латентный период, сутки	Увеличение продолжительности жизни, %
I	1. Контроль, МНМ	22	20/90,9	154,0±9,0
	2. МНМ + куркумин	20	8/40***	194,2±15,7*	51,2**
	3. МНМ + ресвератрол	19	9/47,7**	196,8±12,7**	49**
II	1. Контроль, МНМ	25	21/84	158,0±7,6
	2. МНМ + соевый протеин	23	10/43,4**	177,8±10,6*	68***

Различия с контрольной группой достоверны: * р<0,05; **р<0,01; ***р<0,001.

В таблице 10 приводятся результаты исследований антиканцерогенной активности порошка брокколи.

Процент ингибирования канцерогенеза при применении порошка брокколи составил 41 (p<0,05), средний латентный период развития опухолей был увеличен на 30%, по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе (p<0,01), индекс Айбела также был значительно ниже (0,26), чем в контроле (0,59) (p<0,01). Выявлено достоверное увеличение продолжительности жизни животных-опухоленосителей (на 92,4%) и снижение темпов роста новообразований в опытной группе по сравнению с группой контроля.

Таблица 10.Влияние порошка брокколи на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс МНМ.

Группа,воздействие	Эффективное число крыс	Число животных с ОМЖ, абс /%	Средний латентный период, сутки	Увеличение продолжительности жизни, %
1. Контроль, МНМ	22	20/90,9	154,0±9,0
2. МНМ + брокколи	19	10/52,6*	200,2±15,2**	92,4***

Различия с контрольной группой достоверны: * р<0,05; **р<0,01; ***р<0,001.

При исследовании химиопрофилактической активности лимонена процент ингибирования канцерогенеза составил 36,8, средний латентный период возникновения опухолей был увеличен на 24,7% по сравнению с контролем (р<0,05). Задержка выхода опухолей по индексу Айбела составила 50,7% (0,37 против 0,73 в контроле) (р<0,05). Средняя продолжительность жизни животных с ОМЖ в контрольной группе достоверно уступала аналогичным показателям в опытной группе (табл. 11). При применении лимонена были также достоверно снижены темпы роста опухолей. Через два месяца после регистрации средний размер опухолей в контрольной группе был равен 14,8±0,6 см³, в опытной группе - 6,8±0,3 см³ (р<0,001).

Таблица 11.Влияние лимонена на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс МНМ.

Группа, воздействие	Эффективное число крыс	Число животных с ОМЖ, абс /%	Средний латентный период, сутки	Увеличение продолжительности жизни, %
1. Контроль, МНМ	24	21/87,5	119,0±7,4
2. МНМ + лимонен	18	10/55,6*	148,4±11,1*	40*

Различия с контрольной группой достоверны: * р<0,05.

Результаты эксперимента по изучению влияния комбинированного применения микронутриентов на возникновение новообразований молочной железы, индуцированных у крыс МНМ, представлены в таблице 12.

Противоопухолевое действие комплексного витаминного препарата «Каскатол» выражалось в снижении частоты возникновения опухолей на 36% (р<0,05). Показано, что «Каскатол» увеличивал среднюю продолжительности жизни животных с опухолями на 36,4% (р<0,05), а также тормозил рост возникших новообразований. Коэффициент ингибирования роста возникших опухолей через два месяца после выявления составлял 38,1%. Применение комплекса витамин Е-Se-метионин выражалось в достоверном снижении частоты возникновения опухолей у животных опытной группы на 36,8% по сравнению с животными контрольной группы при увеличении латентного периода их развития на 26% (р<0,05). Задержка выхода опухолей в данной группе, определяемая по индексу Айбела, составила 49,3% (р<0,01). В опытной группе отмечалось торможение роста возникших опухолей на 46,3% относительно размеров новообразований в контроле при увеличении средней продолжительности жизни животных с опухолями на 62,1%(р<0,01).

Значимая антиканцерогенная активность при комплексном применении микронутриентов обусловлена синергизмом действия входящих в них компонентов: бета-каротина, витаминов С, Е, селена, способных восстанавливать баланс половых гормонов, стимулировать иммунные реакции и антиоксидантную активность. Следует особо отметить, что противоопухолевая активность комплекса витамин Е-Se-метионин в значительной степени зависит от действия донатора метильных групп метионина, повышающего устойчивость клетки к опухолевой трансформации (Лихтенштейн А. В., 2001).

Таблица 12. Влияние «Каскатола» и комбинированного применения витамина Е, селена и метионина на возникновение ОМЖ, индуцированных у крыс МНМ.

Серия опытов	Группа,воздействие	Эффективное число крыс	Число животных с ОМЖ, абс /%	Средний латентный период, сутки	Увеличение продолжительности жизни, %
I	1. Контроль, МНМ	25	23/92	164,2±8,7
	2. МНМ + «Каскатол»	22	13/59*	171,2±9,8	36,4*
II	1. Контроль, МНМ	24	21/87,5	119,0±7,4
	2. МНМ + витамин Е- Se-метионин	20	11/55*	149,5±11,0*	62,1**

Различия с контрольной группой достоверны: * р<0,05; ** р<0,01.

Изучение возможных механизмов химиопрофилактической активности соединений растительного происхождения и микронутриентов выявило следующие закономерности.

Применение ресвератрола, куркумина и соевого протеина приводило к достоверному снижению уровня эстрадиола на 36,4%, 35% и 30% соответственно по сравнению с контролем (р<0,01). Тенденция к снижению уровня эстрадиола относительно контроля отмечена при применении лимонена (на 27%) и порошка брокколи (на 22%) При применении порошка брокколи выявлено также достоверное повышение концентрации ЛГ (р<0,05) (рис. 4).

При изучении влияния исследуемых соединений на показатели липидного обмена достоверная гиполипидемическая активность отмечалась у полифенолов и монотерпенов. Ресвератрол снижал уровень общего холестерина на 34% (р<0,01), куркумин на 29% (р<0,05); уровень триглицеридов в данных группах снижался на 44%, 26%, содержание ЛПВП повышалось на 56% и 66% соответственно (р<0,01). Применение лимонена также достоверно снижало концентрацию общего холестерина на 27% (р<0,01), триглицеридов на 15% (р<0,05) по сравнению с контролем. В то же время, применение в качестве пищевой добавки порошка брокколи не приводило к каким-либо достоверным изменениям биохимических показателей.

В условиях нашего эксперимента выявлена определенная гиполипидемическая активность комплексных соединений микронутриентов. Применение «Каскатола» способствовало статистически значимому торможению гиперхолестеринемии на 27,3% и снижению уровня триглицеридов на 38,5% (р<0,05). При использовании комплекса витамин Е-Se-метионин уровень холестерина снижался относительно животных контрольной группы на 20% (р<0,05), триглицеридов на 10%.

Наиболее выраженная антиоксидантная активность из соединений растительного происхождения и микронутриентов в условиях нашего эксперимента выявлена для соединений полифенольной природы и порошка брокколи (рис.6).

В эксперименте, проведенном на 2-й неделе канцерогенеза, когда в контрольной группе животных отмечалась значительная активация свободнорадикальных процессов, в группе, получавшей ресвератрол, уровень МДА был снижен в 2,0 раза; в группе, получавшей куркумин - в 1,6 раза; при применении порошка брокколи - в 2,3 раза (р<0,01) относительно данного показателя в контрольной группе. Уровень каталазы был повышен в группах, получавших ресвератрол, куркумин и брокколи в 1,9, 1,7 и 1,6 раза (р<0,001) относительно контроля соответственно. Уровень СОД был повышен от 3,4 раза в группе, получавшей ресвератрол (р<0,001). Применение исследуемых соединений на 6-й неделе эксперимента сопровождалось дальнейшим снижением уровня МДА и ростом активности каталазы и СОД. У животных, получавших в качестве пищевой добавки полифенольные соединения, уровень МДА был снижен в 2,0 раза; в группе, получавшей порошок брокколи в 2,4 раза по сравнению с контрольной группой животных (р<0,001). В этот период во всех опытных группах отмечалась максимальная активность ферментов антиоксидантного звена. Так, в группе животных, получавших ресвератрол, соевый протеин, куркумин уровень СОД был повышен в в 3,2 2,8 и 2,7 раз относительно контроля (р<0,001) соответственно. У животных, получавших ресвератрол, куркумин и брокколи, уровень каталазы был повышен в 3,3, 2,9 и 3,0 раза относительно контроля (р<0,001) соответственно. Высокая антирадикальная активность изучаемых препаратов сохранялась и в конце канцерогенеза: уровень каталазы сохранялся повышенным в 3,0-3,5 раза, уровень СОД в 2,2-3,0 раза относительно контроля (р<0,001).

В проведенном исследовании в группе, получавшей в качестве пищевой добавки лимонен, были снижены окислительные процессы, свидетельством чего являлся статистически более низкий по сравнению с контролем уровень конечного продукта окислительных процессов МДА на всех этапах исследования (на 26, 46 и 34% соответственно) (р<0,01). Применение диеты, обогащенной лимоненом, стимулировало активность ферментов антиоксидантной защиты на всех этапах исследования, начиная со 2-й недели. Активность супероксиддисмутазы на протяжении всего периода наблюдения превосходила показатели в контрольной группе в 2,3 раза; активность каталазы повышалась от 1,3 раз в начале эксперимента до 2,9 раз в конце (р<0,01). Такое значительное повышение активности каталазы, возможно, происходило не за счет усиления ее синтеза, а в результате предупреждения ее ингибирования МДА, количество которого достоверно снижалось на фоне применения экспериментальной диеты.

Известно, что на самых начальных этапах канцерогенеза фактором защиты клеточного генома от повреждающего действия продуктов ПОЛ являются природные соединения токоферолов, селен, витамином С, флавоноиды, каротиноиды и другие вещества, являющиеся неферментативными компонентами антиоксидантной защиты организма.

В условиях нашего эксперимента было изучено влияние витаминного комплекса «Каскатол» и комбинированного применения токоферола с селеном и метионином на процессы ПОЛ-АОЗ, так как именно эта активность, по мнению ряда авторов, лежит в основе химиопрофилактического действия исследуемых соединений. Полученные данные представлены на рисунке 6 .

Снижение содержания МДА в опытных группах по сравнению с группой контроля наблюдалось, начиная со 2-й недели исследования и до конца эксперимента. На 2-й неделе его уровень в группе, получавшей комбинацию витамина Е с селеном и метионином, был снижен по сравнению с контрольной группой в 1,4 раза, в группе, получавшей «Каскатол» - 1,2 раза (р<0,01). В то же время активность каталазы в группе, получавшей витамин Е и селен, превышала соответствующий показатель в контрольной группе на 30%, активность СОД - на 15% (р<0,05). В группе, получавшей «Каскатол», уровень обоих ферментов был достоверно снижен относительно соответствующего показателя в интактной группе и соответствовал значению в контрольной группе, получавшей МНМ.

На 6-ой неделе эксперимента наблюдалось снижение МДА в 2,2 раза в группе, получавшей комбинацию витамина Е с селеном и метионином, и в 1,7 раз в группе, получавшей «Каскатол» (р<0,01). Активность каталазы в группе, получавшей комбинацию витамина Е с селеном, и в группе, получавшей «Каскатол», превосходила уровень в контрольной группе в 1,3 и 1,2 раза соответственно (р<0,05). Уровень СОД в группе, получавшей витамин Е и селен, оставался прежним. В группе, получавшей «Каскатол», отмечалось повышение значения СОД на 20% по сравнению с предыдущим показателем, что соответствовало показателю СОД в контрольной группе.

К концу эксперимента в группе, получавшей «Каскатол», уровень МДА был максимально снижен относительно контрольной группы (в 2,4 раза), в группе, получавшей витамин Е с селеном и метионином - в 1,7 раз (р<0,01), что можно объяснить существенной активацией неферментативного звена антиоксидантной защиты.

Важным свойством потенциального химиопрофилактического средства является способность восстанавливать сниженный по тем или причинам уровень иммунного ответа. Исследование иммуномодулирующей активности ресвератрола выявило значимое его влияние на пролиферативный ответ Т-лимфоцитов (табл. 13). Ресвератрол препятствовал снижению спонтанной и стимулированной митогенами пролиферации Т-лимфоцитов в условиях канцерогенного воздействия. Спонтанная трансформация лимфоцитов составила на 28-й неделе эксперимента 3,4±0,1%, что было в 1,6 раза выше, чем в контроле (р<0,05). При действии ФГА данный показатель составил к концу эксперимента 8,9±1,2% (р<0,05), при действии КонА 7,2±1,1% против 4,4±0,80% в контрольной группе животных (р<0,01). Изучение возможностей использования микронутриентов с целью коррекции вторичной иммунной недостаточности в динамике канцерогенеза показало, что добавление в рацион животных, получавших МНМ, «Каскатола» или комбинации витамина Е с селеном и метионином оказывало выраженное иммуномодулирующее действие, сохраняя пролиферативный потенциал Т- и В-лимфоцитов, содержание натуральных киллеров и функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов и предотвращая развитие иммунодепрессии.

Механизм иммуномодулирующего действия микронутриентов до конца не изучен, хотя весьма аргументированным является предположение о том, что в его основе лежат антиоксидантные свойства, препятствующие иммунотоксическому действию продуктов ПОЛ (Лебедев В.В., 2002; Bendich A., 1990, 1991).

1-контроль (МНМ); 2-МНМ+ресвератрол; 3-МНМ+куркумин; 4-МНМ+соевый протеин; 5- МНМ+лимонен; 6-МНМ+брокколи; 7-МНМ+.«Каскатол»; 8-МНМ+вит.Е-Se-метионин. Различия с контрольной группой достоверны: * р<0,05; ** р<0,01.

Рис. 4. Влияние соединений растительного происхождения и микронутриентов на концентрацию эстрадиола, пролактина и гонадотропных гормонов гипофиза в сыворотке крови крыс при экспериментальном канцерогенезе молочной железы (%)



1-контроль (МНМ); 2-МНМ+ресвератрол; 3-МНМ+куркумин; 4-МНМ+соевый протеин; 5-МНМ+лимонен; 6-МНМ+брокколи; 7-МНМ+«Каскатол»; 8-МНМ+вит. Е-Se-метионин.

Различия с контрольной группой достоверны: * р<0,05; ** р<0,01.

Рис. 5. Влияние соединений растительного происхождения и микронутриентов на показатели липидного обмена в сыворотке крови крыс при экспериментальном канцерогенезе молочной железы (%).

2 неделя

6 неделя

30-36 неделя

1-интактный контроль; 2-контроль (МНМ); 3-МНМ+ лимонен; 4-МНМ+вит. Е+селен+метионин; 5- МНМ+брокколи; 6-МНМ+соевый протеин; 7-МНМ + куркумин; 8-МНМ+ ресвератрол; 9-МНМ+«Каскатол».

Различия с контрольной группой достоверны: * р<0,05; ** р<0,01;*** р<0,001.

Рис. 6. Влияние соединений растительного происхождения и микронутриентов на показатели ПОЛ-АОЗ.

Таблица 12 Показатели клеточного звена иммунитета крыс на модели канцерогенеза молочной железы, ндуцированного МНМ, через 28 недель от начала эксперимента

Иммунологические показатели	Группы животных
	I	II	III	IV	V
Спонтанная трансформация, %	4,7±0,49	2,1±0,04*	4,6±0,25#	3,8±0,76#	3,9±0,98#
ФГА, %	12.6±0,72	4,9±1,67*	12,8±0,47	12,0±1,09	12,3±1,01#
ИС ФГА / Спонтанная трансформация	2,68±0,22	2,3±0,12	2,78±0,15	3,2±0,20	3,2±0,14
КонА, %	7,98±0,68	4,4±0,80*	8,3±0,79#	8,5±0,68	8,2±0,87#
ИС Кон А/ Спонтанная трансформация	1,69±0,12	2,1±0,22	1,8±0,21#	1,77±0,12*	2,1±0,18**
ФГА / Кон А	1,59±0,09	1,1±0,08*	1,54±0,10#	1,81±0,11#	1,5±0,06#
ЛПС, %	10,0±0,84	7,6±1,2*	12,1±1,0	11,2±0,90	10,6±0,97
ИС ЛПС / Спонтанная трансформация	2,12±0,06	3,61±0,11*	2,63±0,18	2,94±0,09	2,7±0,12
БГЛ, %	4,62±0,38	1,9±0,21*	4,21±0,26#	3,9±0,23#	4,05±0,18#

Различия между группами достоверны, р<0,05. * - достоверность различий по отношению к интактному контролю; # - достоверность различий по отношению к группе животных, получавших МНМ. I группа - интактные животные (контроль); II группа - животные, получавшие МНМ; III группа - МНМ + ресвератрол; IV группа - МНМ + брокколи; V группа - МНМ + витаминный комплекс «Каскатол».

При сравнении химиопрофилактической активности изученных соединений максимальная и при этом практически одинаковая антиканцерогенная активность выявлена для средств с антиэстрогенной активностью тамоксифена и летрозола. При этом, с учетом преимуществ летрозола, таких как ингибирование канцерогенеза не только на стадии промоции/прогрессии, но и на стадии инициации, отсутствие побочных эффектов, обусловленных проэстрогенными свойствами тамоксифена, в том числе канцерогенной активности, данный препарат можно рассматривать как перспективное средство вторичной профилактики рака молочной железы в группах риска.

Достаточно высокую антиканцерогенную активность на данной экспериментальной модели рака молочной железы проявили также ловастатин, мелоксикам, куркумин, ресвератрол (рис.7, 8). Исходя из результатов собственных исследований, можно считать, что химиопрофилактическое действие ловастатина реализуется вследствие антиэстрогенной и антиоксидантной активности, прямо коррелирующей с его основным гиполипидемическим действием. Наши данные о химиопрофилактической активности ловастатина подтверждаются результатами, полученными в исследованиях in vitro, об ингибирующем действии статинов в отношении пренилирования Ras-онкогенов. Это способствует ингибированию процессов клеточной пролиферации и злокачественной трансформации, неоангиогенеза, а также стимуляции апоптоза в опухолевой ткани (Sіawinska A., 2008).

Основу антиканцерогенной активности мелоксикама составляет, по современным представлениям, подавление продукции простагландинов, тромбоксанов, индуцирующих процессы ангиогенеза в опухолевой ткани. Согласно полученным нами данным важную роль может играть антиоксидантная активность. Показано также антиэстрогенное действие препарата, что подтверждает имеющиеся данные о cнижении при действии ингибиторов ЦОГ-2 активности ароматазы, способствующей повышению ауто-и паракринного синтеза эстрогенов (Diaz-Cruz E.S., 2006; Wang D., 2006).

Что касается соединений природного происхождения, то наиболее высокая химиопрофилактическая активность показана для полифенолов. Это можно объяснить высокой антиоксидантной и значимой иммуномодулирующей активностью. Учитывая тот факт, что несостоятельность антиоксидантной и иммунной защиты являются важнейшими факторами, способствующими инициации цепи событий, приводящих к злокачественной трансформации (Якубовская Р.И., 2000), данные соединения следует считать перспективными для химиопрофилактики злокачественных новообразований как у женщин групп риска, так и в общей популяции женщин.

Определенная антиканцерогенная активность щ-3 ненасыщенных жирных кислот, микронутриентов с антиоксидантной активностью в сочетании с высокой безопасностью при длительном применении позволяют рекомендовать их дальнейшее клиническое изучение в качестве «универсальных» средств химиопрофилактики злокачественных новообразований.



Рис.7. Сравнительная оценка антиканцерогенной активности синтетических соединений.

Рис 8. Сравнительная оценка антиканцерогенной активности соединений растительного происхождения и микронутриентов.

Выводы

1. Впервые на модели рака молочной железы, индуцированного у крыс N-метил-N-нитрозомочевиной, установлен комплекс взаимосвязанных нарушений гормонально-метаболического и иммунного статуса в динамике экспериментального канцерогенеза молочной железы, включающий повышение содержания в крови эстрадиола и пролактина, снижение содержания ФСГ и ЛГ, повышение уровня триглицеридов, ОХС, ХС ЛПНП и ЛПОНП, развитие вторичного иммунодефицита по смешанному типу, усиление процессов ПОЛ при снижении активности ферментов антиоксидантной защиты.

2. Экспериментально обоснована система отбора потенциальных средств химиопрофилактики рака молочной железы, которая включает исследование антиканцерогенной активности на модели канцерогенеза молочной железы, индуцированного N-метил-N-нитрозомочевиной, и изучение возможных механизмов химиопрофилактического действия исследуемых средств по их влиянию на нарушенные параметры гормонально-метаболического статуса и иммунной защиты.

3. Установлено, что летрозол оказывает ингибирующее влияние на канцерогенез молочной железы, которое проявляется в снижении частоты (процент ингибирования канцерогенеза 59,8), темпов роста новообразований, удлинении латентного периода их развития. Высокая антиканцерогенная активность летрозола, обусловленная ингибированием канцерогенеза на стадии инициации, определяет его преимущество в качестве средства химиопрофилактики рака молочной железы перед первым зарегистрированным по данному показанию средством тамоксифеном - ингибитором стадий промоции и прогрессии.

4. Показано, что средства, регулирующие жировой обмен, ловастатин и омеганол, оказывают хиимопрофилактическое действие на модели рака молочной железы, которое проявляется достоверным снижением частоты возникновения злокачественных новообразований (коэффициент ингибирования канцерогенеза 49,4% для ловастатина и 40% для омеганола).

5. Установлено, что агонист PPAR-г-рецепторов розиглитазон проявляет химиопрофилактическую активность в отношении индуцированных опухолей молочной железы, которая выражается в достоверном снижении частоты возникновения новообразований (процент ингибирования 40) и удлинении на 29,3% латентного периода их развития.

6. Показано, что селективный ингибитор ЦОГ-2 мелоксикам оказывает выраженное химиопрофилактическое действие на модели индуцированного N-метил-N-нитрозомочевиной рака молочной железы, которое проявляется ингибированием канцерогенеза на 46,7% при удлинении латентного периода возникновения опухолей молочной железы на 31% и торможении темпов развившихся новообразований.

7. Впервые в эксперименте установлена антиканцерогенная активность каптоприла, которая проявляется на стадии прогрессии канцерогенеза молочной железы достоверным снижением темпов роста развившихся новообразований и увеличением продолжительности жизни животных-опухоленосителей.

8. Соединение полифенольной природы куркумин оказывает наиболее выраженное среди изученных средств растительного происхождения и микронутриентов химиопрофилактическое действие, которое проявляется в достоверном снижении частоты возникновения опухолей (процент ингибирования канцерогенеза 55,6), увеличении сроков развития гистологически верифицированных новообразований на 26%.

9. Комплексная оценка влияния исследуемых препаратов на разные звенья патогенеза индуцированных опухолей молочной железы с изучением в динамике нарушений гормонально-метаболического и иммунного статуса позволила определить наиболее перспективные для дальнейшей разработки подходы к химиопрофилактике рака молочной железы и, возможно, других гормонозависимых новообразований. Выбор конкретного химиопрофилактического средства в «группах риска» определяется доминирующим механизмом антиканцерогенного действия.

10. Результаты исследований позволяют рекомендовать дальнейшее доклиническое изучение летрозола, ловастатина, мелоксикама, розиглитазона с целью применения в качестве средств вторичной профилактики рака молочной железы.

11. Выявленная химиопрофилактическая активность щ-3 ненасыщенных жирных кислот, соединений растительного происхождения куркумина, ресвератрола, лимонена, брокколи и микронутриентов с антиоксидантной активностью дает основание рекомендовать их дальнейшее изучение для применения в качестве средств первичной и вторичной профилактики рака молочной железы.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Применение разработанной на экспериментальной модели рака молочной железы методики комплексной оценки химиопрофилактической активности лекарственных средств и биологически активных веществ различного происхождения целесообразно на моделях гормонозависимого канцерогенеза эндометрия, яичников, предстательной железы.

2. Полученные результаты служат обоснованием для проведения дальнейших исследований возможности применения изученных соединений в качестве химиопрофилактических средств, понижающих риск возникновения злокачественных новообразований молочной железы, как в общей популяции женщин, так и в группах повышенного онкологического риска.

ОСНОВНЫЕ РАБОТЫ, ОПУБЛИКОВАННЫЕ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1.Влияние каскатола на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс N-метил-N-нитрозомочевиной // Материалы международного научного форума “Онкология на рубеже XXI века.”-Москва.-1999.- С. 441-442 (соавт. Джиоев Ф.К.).

2. Влияние высокожировой диеты на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс N-метил-N -нитрозомочевиной // Материалы Всероссийской научно-практической конференции “Человек и ноосфера” -Краснодар.- 1999.- С. 101-103 (соавт. Джиоев Ф.К.).

3. Влияние диеты, содержащей соевый протеин, на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс N-метил-N -нитрозомочевиной //Тезисы III международного конгресса “Парентеральное и энтеральное питание.”- Москва.-1999.-С. 28 (соавт. Джиоев Ф.К.).

4. Влияние препарата “Бетакламин” на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс N-метил-N -нитрозомочевиной // International Journal on Immunorehabilitation.-1999. -№14.- С.66 (соавт. Джиоев Ф.К.).

5. Влияние антиэстрогенного препарата “Тамоксифен” на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных N-метил-N -нитрозомочевиной у крыс // Южно-российский мед. журнал.- 1999.- № 6.- С. 69-71 (соавт. Джиоев Ф.К.).

6. Ингибирующее влияние препарата в-каротина “Бетакламин” на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс N-метил-N -нитрозомочевиной // Южно-российский мед. журнал.- 2000.- №2.- С. 68-72 (соавт. Джиоев Ф. К., Сергеев А. В.).

7. Влияние в-каротина и комплексного препарата“Бетакламин” на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс N-метил-N -нитрозомочевиной // Мат. международног экологического симпозиума “Белые ночи-2000”. Санкт-Петербург.- 2000.- С. 288-289 (соавт. Джиоев Ф. К., Болиева Л. З., Басиева Т. С.).

8. Изучение роли фактора питания в развитии индуцированного рака молочной железы в эксперименте у крыс // Вопросы питания.-2000.-?5.-C.31-33 (соавт. Джиоев Ф. К.).

9. Изучение возможностей химиопрофилактики РМЖ в эксперименте // Сборник “Актуальные проблемы теоретической и клинической медицины”.- Владикавказ.- 2001.- С. 94-99 (соавт. Джиоев Ф. К.).

10. Влияние высокожировой диеты на экспериментальный канцерогенез в молочной железе и уровень эстрогенов в крови подопытных животных // Тезисы V международного конгресса “Парентеральное и энтеральное питание.”- Москва.-2001.-С. 27 (соавт. Джиоев Ф. К., Болиева Л. З.).

11. Использование витаминов-антиоксидантов как один из возможных путей химиопрофилактики рак молочной железы // Владикавказский медико-биологический вестник.-2005.Т.5.-Вып.9-10.-С.67-69 (соавт. Джиоев Ф. К., Болиева Л. З.).

12. Ингибирующий эффект лимонена в отношении развития ОМЖ индуцированных N-метил-N -нитрозомочевиной у крыс // Современные наукоемкие технологии.-2006.- №6.- С.80-81.

13. Антиканцерогенное действие ловастатина в отношении индуцированных опухолей молочной железы у крыс // Успехи современного естествознания.- 2006.- №11. - С. 57.

14. Влияние б-токоферола и селенометионина на возникновение ОМЖ //Аллергология и иммунология. Т.7.- №3.- С. 269-270.

15. Экспериментальное изучение возможностей применения препаратов с антиэстрогенной активностью в профилактике рака молочной железы // Известия ВУЗов. Северо-Кавказский регион.-2006.-Приложение 9. - С.110-113.

16. Торможение роста экспериментальных опухолей молочной железы у крыс-самок ингибитором АПФ-каптоприлом //Сборник научных работ “Естествознание и гуманизм”. Томск.-2006.- Т.3, №2.- С.110.

17. Антиканцерогенное действие биологически активной добавки к пище“ Омеганол” // Материалы I-го Всероссийского съезда диетологов и нутрициологов. Москва.-2006.-C.125 (соавт. Джиоев Ф. К., Болиева Л. З.).

18. Перспективы профилактики РМЖ путем коррекции диеты //Сибирский медицинский журнал.-2006.- Т.21, №4. - С.51-54.

19. Влияние микронутриентов с антиоксидантной активностью на возникновение ОМЖ у крыс, индуцированных МНМ // Известия ВУЗов. Северо-Кавказский регион.-2006.-Cпец. выпуск. Вопр. клин. медицины. - С. 5-8 (соавт. Болиева Л. З., Джиоев Ф. К., Алборова Б. Г.).

20. Изучение летрозола как препарата с потенциальной химиопрофилактической активностью //Материалы XIV Российского национального конгресса “Человек и лекарство”. -Москва.-2007.-C.896.

21. Выявление ингибиторов канцерогенеза молочной железы в эксперименте и их применение в терапии фиброзно-кистозной болезни Там же. - С.818 (соавт. Джиоев Ф. К., Болиева Л. З., Алборова Б. Г.).

22. Корригирующее действие флавоноидов и монотерпенов на экспериментальный канцерогенез у крыс // Материалы VI Международной конференции “Инновационные технологии для устойчивого развития горных территорий”. Владикавказ.-2007.-C.380-381 (соавт. Джиоев Ф. К., Болиева Л. З., Басиева Т. С.).

23. Изучение влияния ловастатина на липидный спектр крови крыс на модели рака молочной железы // Материалы 65-ой научно-практической конференции “Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины”.- Волгоград.-2007.- С. 153-154

24. Угнетающее влияние мелоксикама на индуцированный канцерогенез молочной железы // Успехи современного естествознания.- 2007.- №9. - С. 64.

25. Тормозящий эффект куркумина на развитие индуцированных метилнитрозомочевиной опухолей у крыс // Фундаментальные исследования.- 2007.- №8.- С. 64 (соавт. Джиоев Ф.К., Басиева Т.С.).

26. Изучение возможностей химиопрофилактики злокачественных новообразований молочной железы // Успехи современного естествознания.- 2006.- №1.- С. 65-66 (соавт. Джиоев Ф.К., Болиева Л.З., Алборова Б.Г.).

27. Влияние селективных ингибиторов циклооксигеназы-2 на экспериментальный канцерогенез молочной железы // Владикавказский медико-биологический вестник.- 2007.- Т.7., Вып. 13.- C. 343-346 (соавт. Болиева Л. З., Джиоев Ф. К., Басиева Т. С.).

Размещено на Allbest.ru

...