Роль окислительного стресса в развитии и прогрессировании поздних осложнений сахарного диабета 2 типа. Возможности антиоксидантной терапии

Размещено на http://www.allbest.ru

На правах рукописи

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискании учёной степени доктора медицинских наук

РОЛЬ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА В РАЗВИТИИ И ПРОГРЕССИРОВАНИИ ПОЗДНИХ ОСЛОЖНЕНИЙ САХАРНОГО ДИАБЕТА 2 ТИПА. ВОЗМОЖНОСТИ АНТИОКСИДАНТНОЙ ТЕРАПИИ

14.01.04 - Внутренние болезни

Занозина Ольга Владимировна

Нижний Новгород 2010

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования « Нижегородская государственная медицинская академия»

Научные консультанты:

Доктор медицинских наук, профессор Боровков Николай Николаевич

Доктор медицинских наук, профессор, Балаболкин Михаил Иванович

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор Стронгин Леонид Григорьевич, Нижегородская государственная медицинская академия (г. Нижний Новгород)

Доктор медицинских наук Недосугова Людмила Викторовна, ФППОВ ФГУ ВПО Московская медицинская академия им. И. М. Сеченова (г. Москва)

Доктор медицинских наук, профессор Тихазе Алла Карловна, ФГУ «Российский кардиологический научно-производственный комплекс Росмедтехнологий» (Москва).

Ведущая организация:

Московский государственный медико-стоматологический университет

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Нижегородской государственной медицинской академии по адресу: 603146, г. Нижний Новгород, ул. Медицинская, д. 3а

Учёный секретарь диссертационного совета

кандидат медицинских наук Ю. А. Орлова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Сахарный диабет является (СД) одной из самых насущных проблем современности, учитывая прогрессирование распространённости патологии, тяжесть и полиорганность поражения, раннюю инвалидизацию и большую летальность вследствии прогрессирования макро и микроангиопатий (Дедов И. И., Шестакова М. В., 2010).

В настоящее время общепризнана роль хронической гипергликемии в развитии поздних осложнений СД. Гипергликемия натощак и в постпрандиальном периоде, а также острые колебания содержания глюкозы приводят к избыточному гликозилированию и активации окислительного стресса, что способствует развитию и прогрессированию осложнений сахарного диабета. (Аметов А.С. 2008,L.Monnier 2009, Zaccardi F. et al, 2009) Окислительному стрессу у больных сахарным диабетом 2 типа и его роли в генезе самого диабета и его поздних осложнений посвящены многочисленные исследования (Балаболкин М. И., 2000, 2004; Недосугова Л. В, 2006; Ланкин В. З., Тихазе А. К., Кумскова Е. М.., 2008,2009; Baynes J. W., 1991, 1996; RЦsen P. et al, .2001; Evans J. et al, 2002; Ceriello A., 1999,2000,2006,2008,2009;), тем не менее существует ряд нерешённых вопросов. Данные литературы об изменениях активности антиоксидантной системы и выраженности свободно-радикального окисления у больных СД 2 типа весьма противоречивы. До настоящего времени не существует единого мнения о терапевтической тактике ведения больных СД 2 типа с применением антиоксидантов с целью профилактики развития и прогрессирования диабетических осложнений и инсулиновой недостаточности. В то же время показана целесообразность использования антиоксидантов в лечении этих больных (Балаболкин М. И., Клебанова Е. М. 2004; Недосугова Л. В., 2006; Ланкин В. З., Тихазе А. К., Беленков Ю. Н. , 2006). Остаются не разработанными принципы дифференцированной антиоксидантной терапии в зависимости от выраженности осложнений, включая дозы препаратов и продолжительность курсов, не отслежено влияние антиоксидантной терапии на отдалённые результаты лечения больных. сахарный диабет осложнение антиоксидантный терапия

Таким образом, вопрос о роли свободно-радикального окисления в развитии и прогрессировании поздних осложнений сахарного диабета остаётся принципиально важным для выработки тактики ведения пациентов, страдающим сахарным диабетом 2 типа. Решению данной проблемы посвящена настоящая работа.

Цель исследования:

Оценить роль окислительного стресса в развитии и прогрессировании поздних осложнений сахарного диабета 2 типа и уточнить возможности медикаментозной антиоксидантной терапии в коррекции этих осложнений.

Задачи исследования:

1. Комплексно оценить параметры окислительного стресса у больных сахарным диабетом 2 типа в зависимости от компенсации углеводного обмена, длительности заболевания, уточнить их взаимосвязь.

2. Изучить состояние липидного обмена и взаимосвязь его параметров с основными показателями свободно-радикального окисления у больных СД 2 типа.

3. Уточнить взаимосвязь окислительного стресса с тромбоцитарно-сосудистым и плазменным гемостазом, дисфункцией эндотелия у больных СД 2 типа.

4. Проанализировать взаимосвязь параметров окислительного стресса с морфо-функциональными и структурными характеристиками хронических осложнений у больных СД 2 типа (микро-и макроангиопатий, полиневропатии, жировым гепатозом).

5. Оценить возможности дифференцированной антиоксидантной терапии (альфа - липоевая кислота, мексидол, их комбинация, дибикор) в коррекции окислительного стресса у больных СД 2 типа.

6. Исследовать влияние различных антиоксидантов (альфа - липоевая кислота, мексидол и их комбинация) на функциональные возможности инсулярного аппарата, вариабельность гликемии в течение суток, выраженность инсулинорезистентности, дислипидемию, дисфункцию эндотелия и на коагуляционный (тромбоцитарно - сосудистый и плазменный) гемостаз непосредственно в ходе комплексного лечения больных СД 2 типа.

7. Оценить динамику состояния больных СД 2 типа и лабораторно - инструментальных показателей через 1 год и 5 лет с использованием антиоксидантов (альфа - липоевая кислота, мексидол, комбинация этих препаратов)

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Сахарный диабет тип 2 характеризуется резкой интенсификацией процессов свободнорадикального окисления, коррелирующей со степенью компенсации углеводного обмена, длительностью заболевания.

2. Достижение компенсации углеводного обмена у больных СД 2 типа сопровождается снижением активности окислительного стресса, однако только достижения компенсации углеводного обмена недостаточно для нормализации свободно-радикального окисления, тромбоцитарно-сосудистого и плазменного гемостаза, липидного спектра, функции эндотелия, предотвращения прогрессирования поздних осложнений СД 2 типа.

3. Окислительная модификация белков при СД 2 типа является связующим звеном между перекисным окислением липидов и эндотелиальной дисфункцией.

4. Подключение к базисной терапии больных СД 2 типа антиоксидантов приводит к статистически значимому ограничению свободно - радикального окисления и повышению антиоксидантной активности у больных СД 2 типа.

5. Добавление к базисной сахароснижающей терапии антиоксидантов способствует улучшению гликемического контроля, сохранению секреторных возможностей инсулярного аппарата, снижению инсулинорезистентности, уменьшению вариабельности гликемических колебаний в течении суток, уменьшению степени и скорости агрегации тромбоцитов, улучшению показателей, характеризующих плазменный гемостаз, липидный спектр, функцию эндотелия, вегетативную регуляцию сердца, электронейромиографических показателей у больных СД 2 типа, позволяет замедлить прогрессирование полиневропатии.

Научная новизна исследования:

Проведена комплексная оценка выраженности окислительного стресса у больных сахарным диабетом 2 типа в зависимости от длительности заболевания, компенсации углеводного обмена.

Уточнена взаимосвязь составляющих окислительного стресса (молекулярных продуктов перекисного окисления липидов и ферментативной антиоксидантной защиты, спонтанной и индуцированной окислительной модификации белков, неферментативной антиоксидантной защиты).

Определена взаимосвязь отдельных составляющих СРО, ферментативной антиоксидантной защиты с уровнем метаболитов оксида азота в плазме крови, характеризующими эндотелиальную дисфункцию.

.Показана взаимосвязь окислительного стресса, антиоксидантной защиты с тромбоцитарно-сосудистым и плазменным гемостазом, выявлена статистически достоверная корреляционная взаимосвязь компонентов плазменного гемостаза и активности антиоксидантных ферментов.

Оценена взаимосвязь окислительного стресса с морфо-функциональными и структурными характеристиками микро - и макроангиопатий у больных СД 2 типа. Оценены возможности комплексной терапии больных СД 2 типа с подключением дифференцированной антиоксидантной терапии (альфа - липоевая кислота, мексидол, их комбинация, дибикор) в коррекции окислительного стресса.

Проведёна комплексная оценка динамики лабораторно - инструментальных показателей в процессе курса терапии, а также отдалённых результатов через 1 год и в через 5 лет лечения пациентов СД 2 типа с использованием антиоксидантов (альфа - липоевая кислота, мексидол, комбинация этих препаратов)

Практическая значимость работы:

Результаты исследования обосновывают целесообразность назначения антиоксидантных препаратов (альфа - липоевой кислоты, мексидола, комбинация альф-липоевой кислоты и мексидола) в качестве патогенетической терапии как самого сахарного диабета 2 типа целью сохранения секреторной активности бета-клетки, снижения инсулинорезистентности, уменьшения вариабельности гликемических колебаний, так и для профилактики и лечения хронических осложнений диабета.

С помощью двойного - слепого исследования обоснована эффективная доза мексидола и длительность курса его применения.

Для оценки выраженности свободно-радикального окисления у больных сахарным диабетом, комплексной диагностики декомпенсации сахарного диабета типа 2 предложено использовать метод клиновидной дегидратации (уведомление о поступлении и регистрации заявки от 08.06.2009 № 2009121919/ 15 (030335).

Предложен метод диагностики ИБС у больных СД 2типа с помощью метода клиновидной дигидратации (уведомление о поступлении и регистрации заявки от 04.05.2009 № 2009116989/15 (023353).

Показан новый способ диагностики сахарного диабета (Заявка № 200910618/15 (008305). Решение о выдаче патента на изобретение от 09.06.2010.

Предложены лабораторные критерии, позволяющие в обычной клинической практике оценить интенсивность и направленность свободно-радикального окисления у больных СД 2типа в процессе лечения (отношение гаптоглобина к церулоплазмину, АЛАТ, Г Т, значение гематокрита)

Издано пособие для врачей « Окислительный стресс в развитии диабетической полинейропатии. Роль альфа-липоевой кислоты в коррекции нарушений», Н. Новгород, 2002г

Созданы методические рекомендации для врачей «Терапия метаболических нарушений у больных сахарным диабетом 2 типа пожилого возраста», Н. Новгород, 2004.

Издано учебно- методическое пособие « Диабетическая нейропатия. Вопросы патогенеза и патогенетической терапии. Н. Новгород, 2006г.

Реализации результатов исследования:

Результаты исследования внедрены в практику работы нейроэндокринологического и хозрасчётного отделений Нижегородской областной клинической больницы им. Н. А. Семашко, эндокринологического отделения МЛПУ « Городская больница № 4» г. Нижнего Новгорода, терапевтического отделения МЛПУ « Городская больница № 3» г. Нижнего Новгорода, в учебный процесс кафедры госпитальной терапии им. В. Г. Вогралика Нижегородской государственной медицинской академии, в обучающий процесс терапевтов, эндокринологов, неврологов г. Нижнего Новгорода и области по системе телемедицина, создание программы « Виртуальный кабинет эндокринолога»

Апробация работы

Материалы и основные положения диссертации доложены на международной конференции в Эссене (1999); конференции молодых учёных Поволжья и Северного Кавказа (Н. Новгород, 2000), IV Всероссийском конгрессе эндокринологов (Санкт - Петерберг, 2001г), 3-ем и 4-ом Всероссийских диабетологических конгрессах (Москва 2004 , 2006 соответственно), конференции « Достижения и трудности современной кардиологии», посвящённой памяти профессора В. П. Померанцева и 35-летию кафедры госпитальной терапии № 1 лечебного факультета Московского государственного медико- стоматологического университета» (Москва, 2005), днях диабета в Приволжском федеральном округе (Н. Новгород, 2005, 2008, 2009), конференции « Артериальная гипертензия в практике врача терапевта, кардиолога, эндокринолога» (г. Москва, 2006г., 3-е место в конкурсе); очередном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2006, диплом II степени в номинации « Лучшая научно-исследовательская работа года); областной конференции, посвящённой проблемам изучения артериальной гипертензии (Н. Новгород, 2007), Всероссийской конференции с международным участием « Тромбозы, кровоточивость, ДВС-синдром: современные подходы к диагностике и лечению» (Москва, 2008, 2009г), Российской конференции « Артериальная гипертония: спорные и нерешённые вопросы»: посвящена 65 - летию Ярославской государственной медицинской академии и 110 - летию со дня рождения А. Л. Мясникова (Ярославль, 2009), совместном заседании проблемной комиссии « Внутренние болезни ….» и сотрудников кафедры госпитальной терапии им. В. Г. Вогралика (г. Нижний Новгород, 2009), Всероссийском конгрессе « Современные технологии в эндокринологии» (Москва, 2009), V Всероссийском диабетологическом конгрессе (Москва, 2010), областной конференции врачей (г.Нижний Новгород, 26-27 июня 2010).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 64 печатных работ, в том числе 8 статей в журналах, включённых ВАК Минобрнауки России в «Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертаций на соискание учёных степеней доктора и кандидата медицинских наук».

Изданы 1 методические рекомендации для врачей , 2 пособия для врачей, оформлено 2 заявки на изобретение, получено 2 патента на изобретение.

Структура и объём диссертации

Диссертация изложена на 300 страницах машинописного текста. Она состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования, девяти глав собственных наблюдений, заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографии. Указатель литературы содержит 270 источников отечественных авторов и 333 - иностранных. Работа иллюстрирована 67 таблицами, 35 рисунками, 4 схемами.

Личный вклад исследователя

Исследователем лично проведено клиническое обследование и лечение пациентов, включённых в исследование, составление базы данных, статистическая обработка полученного материала.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Работа выполнена на базе кафедры госпитальной терапии Нижегородской государственной медицинской академии, нейроэндокринологического отделения, отделения функциональной диагностики, отделения лабораторной диагностики Нижегородской областной клинической больницы им. Н. А. Семашко (гл. врач - к.м.н. Р.М.Зайцев). Проведение исследования одобрено локальным этическим комитетом Нижегородской государственной медицинской академии (протокол № 4 от 09.04.2004 г.)

Исследование процессов свободно-радикального окисления проводилось на базе кафедры биологии Нижегородской государственной медицинской академии (зав. кафедрой - д.б.н., профессор Щербатюк Т. Г.)

Инфракрасный спектроскопический анализ выполнялся на кафедре общей химии Нижегородской государственной медицинской академии (зав. кафедрой - д.х.н., профессор Гордецов А.С.)

Настоящее исследование основано на результатах наблюдений 276 пациентов, страдающих сахарным диабетом 2 типа (СД 2)

Диагноз СД 2 и степень компенсации углеводного обмена устанавливалась согласно рекомендациям ВОЗ (1999) и « Национальным стандартам оказания медицинской помощи больным сахарным диабетом » (2002).

В работе использована классификация степеней тяжести сахарного диабета СД 2 типа и поздних осложнений сахарного диабета, согласно «Национальным стандартам оказания медицинской помощи больным сахарным диабетом » (2002).

Для реализации поставленных задач работа осуществлялась в 4 этапа:

I-этап. Составление полной клинико-лабораторно - инструментальной характеристики больных СД типа 2 . Пациенты были разделены на 4 группы по степени компенсации углеводного обмена, длительности сахарного диабета 2 типа:

1 группа (n=64) - Компенсированный сахарный диабет, длительность заболевания менее 5 лет,

2 группа (n=48) - Компенсированный сахарный диабет, длительность заболевания более 5 лет,

3 группа(n=74) - Декомпенсированный сахарный диабет, длительность заболевания менее 5 лет

4 группа (n=90) - Декомпенсированный сахарный диабет, длительность заболевания более 5 лет

II - этап. Дополнительно к базисной терапии больным после 5- 7 дней нахождения в стационаре вводились антиоксидантные препараты:

А.альфа-липоевая кислота (n= 55)

Б. мексидол (n=84)

В. альфа-липоевая кислота и мексидол одновременно (n= 24)

Г. дибикор (n=20)

Д. мексидол в дозе 100 мг (n=12)

Е. плацебо (n=10)

До и после лечения проводился клинико- лабораторно- инструментальный контроль.

III этап. Оценка отдалённых результатов лечения через 1 год у пациентов, получавших антиоксидантную терапию препаратами альфа-липоевой кислоты, мексидолом, комбинацией этих препаратов.

IV этап. Пятилетняя оценка отдалённых результатов в группах пациентов, получавших терапию препаратами альфа-липоевой кислоты, мексидолом, комбинацией этих двух препаратов.

Группу сравнения составили 20 пациентов, которые не получали указанной антиоксидантной терапии. Для получения параметров нормы группу контроля составили 22 пациента, не имеющие сахарного диабета, не отличающиеся от групп наблюдения по возрасту и полу.

Методика применения препаратов в условиях стационара проводилась следующим образом. Препарат альфа-липоевой кислоты [(Тиоктацид (Щварц Фарма, Германия), Берлитион (Берлин Хеми), Тиогамма (Вёрваг Фарма)] вводился ежедневно в дозе 600 мг в вену капельно на 200 мл физиологического раствора натрия хлорида в течениe 2-х недель. В дальнейшем пациентам было рекомендовано принимать препарат в таблетированной форме по 600 мг в сутки в течение 2 месяцев, 2 курса в год.

Препарат мексидол (Фармасофт, Россия) вводился ежедневно в дозе 200 мг в вену капельно на 200 мл физиологического раствора натрия хлорида в течение 2-х недель. При выписке пациентам было рекомендовано принимать препарат в таблетированной форме в дозе по 0,125 мг в сутки 3 раза в день в течение 2 месяцев. Курсы - 2 раза в год. Кроме того, 12-ти больным препарат мексидол вводился ежедневно в дозе 100 мг в вену капельно на 200 мл физиологического раствора натрия хлорида в течение 2-х недель.

Препарат альфа-липоевой кислоты (Тиоктацид, Берлитион,Тиогамма) вводился ежедневно в дозе 600 мг в вену капельно на 200 мл физиологического раствора натрия хлорида в течении 2-х недель одновременно с препаратом мексидол в дозе 200 мг в вену капельно на 200 мл физиологического раствора натрия хлорида. В дальнейшем пациентам было рекомендовано принимать препарат альфа - липоевой кислоты в таблетированной форме по 600 мг в сутки и мексидол по 0,125 3 раза день в течение 2 месяцев, 2 курса к год.

Десяти пациентам, вошедшим в группу плацебо, в течение 2-недель вводили 200 мл физиологического раствора натрия хлорида внутривенно капельно.

Дибикор (Пик Фарма, Россия) применялся по 1 г в сутки (0,250 мг по 2 таблетки 2 раза в сутки) в течении 2,5 месяцев. В дальнейшем пациентам было рекомендовано принимать препарат по 1,0 г в сутки в течение 2-х месяцев, 2 курса в год.

Всем пациентам проводилось стандартное клиническое, лабораторное и инструментальное обследование. Клиническое обследование включало сбор жалоб, анамнеза заболевания, проведение объективного осмотра. Всем пациентам выполнены общий анализ крови, мочи, ЭКГ в 12 изменениях, проведён осмотр окулистом с для определения степени диабетической ретинопатии, неврологом для уточнения наличия диабетической полиневропатии и её выраженности.

У больных сахарным диабетом определяли:

- показатели углеводного и липидного обмена

- функциональные возможности инсулярного аппарата и чувствительность к инсулину

- выраженность окислительного стересса (молекулярные продукты перекисного окисления липидов, антиоксидантные ферменты и неферментативные антиоксиданты, окислительно-модифицированные белки)

- состояние тромбоцитарно-сосудистого и плазменного звеньев гемостаза,

- функциональное состояние эндотелия по уровню косвенных маркёров содержания оксида азота (NO) - нитритов и нитратов в сыворотке крови, наличию фактора фон Виллебранда, пробе с реактивной гиперемией

- маркёры воспаления (острофазовые белки), продукты переаминирования (печёночные ферменты).

Кроме того, с помощью электрофизиологических методов исследования оценивали:

Выраженность дистальной периферической полиневропатии, нарушения вегетативной регуляции сердца, цереброваскулярной недостаточности, состояние периферического кровотока в нижних конечностях, структурно-функциональное состояние сердечной мышцы.

Уровень глюкозы определялся в капиллярной крови глюкозооксидазным методом на анализаторе « Биосен 5030», на глюкометрах « Акучек Актив», « Элите» натощак, через 2 часа после еды и выражался в ммоль/л.

Суточный мониторинг глюкозы выполнялся c помощью CGMS (Continuous Glucose Monitoring System)- системы, производимой компанией « Medtronic MiniMed(США)».

Гликозилированный гемоглобин HbA1c определялся на жидкостном хроматографе Bio-Rad со стандартными наборами (France).

Базальный уровень С-пептида и инсулина измерялся в плазме венозной крови, взятой утром натощак в иммуноферментной лаборатории НОКБ им. Н. А. Семашко на люминометре-фотометре LM01A (Чехословакия). Уровень С-пептида оценивали с помощью диагностических иммуноферментных тест-систем « Mercodia C-peptide ELISA specific».

Уровень инсулина определялся с помощью иммуноферментного анализа с использованием ИФА набора « INSULIN» (Diagnostic System Laboratories).

Функциональную активность в -клеток (ФАБ) оценивали по формуле D.R.Matthews и соавт., 1985, где ФАБ= [ 20 х ИРИ (мкЕД/мл) ] / [ гликемия натощак (ммоль/л)-3,5]- (Matthews D.R., 1985).

Индекс инсулинорезистентности оценивали по Matthews D.., и соавт [гликемия натощак(ммоль/л) х ИРИ (мкЕД/ мл)]/ 22,5 (Matthews D.M., 1985).

Исследовался спектр жирных кислот в сыворотке крови с помощью газовой хроматографии. Общий анализ крови проводился на автоматическом анализаторе « ADVIA 60». Исследование липидного профиля, уровней аспартатаминотрасферазы (АСАТ), аланинаминотрансферазы (АЛАТ), мочевой кислоты, щелочной фосфатазы(ЩФ), глютатионтранспептидазы (ГТП) , фибриногена , церулоплазмина, гаптоглобина, С-реактивного белка оценивали проводили с помощью анализатора CONELAB 20 (Finland)

Уровень микроальбуминурии определяли в суточной моче турбометрическим методом на автоматическом анализаторе « Chem Well» с использованием диагностического набора « Microalbumin», США. Норма - ниже 30 мг в сут.

Исследование спонтанной агрегации тромбоцитов со статистической оценкой флуктуации светопропускания обогащённой тромбоцитами плазмы проводили по методике З. А. Габбасова и соавт., исследование индуцированной агрегации тромбоцитов проводили турбометрическим методом G. V.R.Born в модификации J.R.O' Brien на двухканальном лазерном анализаторе агрегации (230 LA, НПФ « Биола», РФ) с использованием в качестве индукторов динатриевой соли АДФ (ООО « Технология-стандарт», РФ) в конечных концентрациях 0,5 х10-6 М, 2 х10-6 М, 5 х10-6 М. .Определялось содержание фактора фон Виллебранда на формалинизированных тромбоцитах. Проводилась комплексная оценка коагулограммы.

Интенсивность (Imax), светосумма (S) и ОАА определялись методом индуцированной хемилюминесценции. Imax- максимальная интенсивность свечения, свидетельствуюшая о свободнорадикальноий активности, измеряемая в mV., S- светосумма в относительной степени отражает содержание радикалов, соответствующих обрыву цепи свободнорадикального окисления. Эта величина обратно пропорциональна антиоксидантной активности пробы. ОАА измерялась в относ.ед Молекулярные продукты ПОЛ плазмы крови (диеновые конъюгаты (ДК), триеновые конъюгаты (ТК), малоновый диальдегид (МДА) определялись на аппарате Helios (Thermo Spectronic, USA). Измерялись в ед. опт.пл/ г ткани. Для определения окислительной модификации белков (ОМБ) был использован метод, предложенный Levine (1990) в модификации метода Е.Е. Дубининой (1995). Оценивали ОМБ по уровню карбонильных производных, выявляемых в реакции с 2,4 - динитрофенилгидразином: альдегид-динитрофенилгидразоны (АДФГ) и кетон-динитрофенилгидразоны (КДФГ) Спонтанную и металл-зависимуюиндуцированную (индуцированную) окислительную модификацию белков анализировали одновременно. Оптическая плотность образовавшихся соединений регистрировалась при длинах волн 270 и 363 нм, измерение проводилось в относ ед. Для расчёта применялся коэффициент молярной экстинкции 22х 10 -3 М-1 см-1.

Для определения активности супероксиддисмутазы (СОД) использовался метод, разработан Nishicimi (1972), в адаптации Дубининой Е. Е. и др. (1988). Для определения активности каталазы (КАТ) использовался метод, разработанный Aebi (1970), в адаптации Королюк и др. (1988), Чевари и др. (1991). Определение активности глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы проводили по методике А.Г. Гаврилова (1986). Активность выражали в ед. активности на мг гемоглобина в минуту (ед. акт./мг Hb мин)

Для определения оксида азота в плазме крови нами использована методика определения NO по восстановление нитрата до нитрита по реакции Грисса (Green L. S et al., 1982). Концентрация NO выражалась в мкг/мл.

В данной работе для оценки выраженности окислительного стресса был использован метод клиновидной дегидратации (Шабалин В. Н., Шатохина С. Н. 1996,1999) позволяющий оценить структурные изменения сыворотки крови и сделать выводы о процессах, протекающих во всём организме: Под микроскопом изучались микроструктуры (фации) высушенной в течение 24 часов сыворотки крови больных СД. Оценивали наличие патологических структур, характеризующих острые и хронические воспалительные процессы (языковые микроструктуры), процессы склерозирования (листовидные структуры), напряжённости адаптационных механизмов гомеостаза (трещины « закрутки»), а также морщины, конкреции, прозрачность и подложку (Шабалин В. Н., Шатохина С. Н., 1999, 2000,2001). Для характеристики выраженности патологических процессов использовалась бальная оценка от 1 до 3-х (Щербатюк Т.Г, 2008). Проводилось фотографирование фаций с помощью микроскопа Leica DMLS и CCD- камеры Digital KOCOM, соединённой с компьютером Pentium III .Использовали увеличения в 25 раз.

С целью разработки новых методов диагностики сахарного диабета и окислительного стресса нами был использован метод инфракрасной спектроскопии, разработанный проф. А. С. Гордецовым (Нижегородская медицинская академия). Метод официально рекомендован Минздравом ЗФ (04/2001) для дифференциальной диагностики различных заболеваний. Изучалась суспензия высушенной в течение 24 часов и размельчённой сыворотки больного. Исследования выполнялись на инфракрасных - спектрометрах «Specord 75 IR»(Carl Ceiss Jena) с фотометрической погрешностью 0,2%. Инфракрасный спектроскопический анализ выполнялся в области 1200-1000 см -1. Результаты обрабатывались с помощью уникальных авторских программ. Определялись высоты пиков поглощения на наиболее информативных частотах, которые впоследствии преобразовывались в координаты трёхмерного пространства. При проекции этих точек на переднюю зрительную поверхность получалась фигура в виде многогранника, которую называют «компьютерным образом болезни».

Компьютерный анализ вариабельности ритма сердца осуществлялся при помощи прибора и программы « Полиспектр» (« Нейрософт», РФ). Осуществлялась оценка статистических показателей временного анализа, рекомендованных Европейским обществом кардиологии и Североамериканского общества стимуляции и электрофизиологии (Heart rate variability.). Проводилось суточное ЭКГ - мониторирование с определением суточной вариабельности сердечного ритма (ВСР) с использованием системы холтеровского мониторирования « Астрокард» (Россия). Показатели ВСР оценивались во временных (SDNN- стандартное отклонение величин интервалов NN за весь рассматриваемый период, SDANN- стандартное отклонение величин усреднённых интервалов NN, полученных на все 5-ти минутные участки регистрации,SDNNi - среднее значение стандартных отклонений по всем 5-минутным участкам периода наблюдения, pNN50 - количество пар последовательных интервалов NN, различающееся более, чем на 50 миллисекунд, полученное за весь период записи) - и частотных областях (TotP - полный спектр частот,ULF - ультранизкие частоты<0,003 Гц,VLF - очень низкие частоты от 0,15 до 0,04 Гц, LF - низкие частоты от 0,04 до 0,150 Гц, HF - высокие частоты от 0,150 до 0,400 Гц, L/H - коэффициент вагосимпатического баланса)

Исследование анатомических характеристик, контрактильной и насосной функции ЛЖ сердца оценивали с помощью эходопплерокардиографии (ЭХО-КГ) на аппарате « ALOKA SSD-4000 - ProSound» (Япония) ультразвуковым датчиком 3,5 МГц в М-модальном и двухмерном режимах в стандартных ЭхоКГ позициях. Систолическая функция левого желудочка оценивалась по фракции выброса (ФВ), фракционной сократимости (ФС). Для изучения диастолической дисфункции измерялись следующие скоростные и временные показатели:E- максимальная скорость раннего диастолического наполнения левого желудочка (м/с), А- максимальная скорость позднего диастолического наполнения (м/c), Их отношение - E/А. Норма составляет 1,0 - 1,2. Оценивали DTe - время замедления раннего диастолического наполнения (мсек) и IVRT - время изоволюметрического расслабления (мсек)

Изучали гемодинамику в магистральных артериях головы, экстра - и интракраниальных отделах методом ультразвуковой допплерографии с помощью аппаратов « Ангиодин» и « Премьер» (фирма БИОСС, Москва, Россия)в волновом допплеровским режиме датчиком 4 МГц с использованием переднее - шейного доступа. Исследование проводилось после 5 - минутной адаптации обследуемого. Качественную оценку допплерограмм кровотока осуществляли визуально по характеру огибающей кривой и концентрации частот вблизи максимума. Количественный анализ спектра допплеровского сдвига часто проводили путём компьютерной обработки на экране ультразвуковой системы и с помощью расчёта характеристик сосудистого допплеровского исследования . (Куликов В. П., 1997). К последним относились следующие параметры линейной скорости кровотока, определённые по огибающей кривой: S- максимальная (пиковая) систолическая , M- средневзвешанная во времени линейная скорость кровотока, D- конечная (пиковая) диастолическая скорость кровотока, PI - пульсативный индекс Gosling - отношение между разностью систолической и диастолической скоростей (от пика до пика) и средней скоростью, RI - резистивный индекс или индекс циркуляторного сопротивления Pourcelot - отношение между разностью систолической и диастолической скоростей (от пика до пика) к систолической скорости, S/D - - отношение между максимальными значениями систолической и диастолической скоростей, характеризующее сосудистую эластичность SB- отношение между средней арифметической систолической скоростью (частотой), замеренной на вершине систолического пика и максимальной систолической скоростью. Оценивали толщину интима - медиа (ТИМ). Кроме того, в работе нами был использован метод транскраниальной допплерографии (ТКДГ), проводился часовой мониторинг.

Оценка эндотелийзависимой вазодилатации (ЭЗВД) проводилась с помощью механического теста (манжеточной пробы) - временной окклюзии сосуда с последующим измерением поток-зависимой реакцией его на ишемию. Использовали дуплексное сканирование плечевой артерии по методике D.Celermajer с соавт., 1992 (Кунцевич Г. И., 2006) на ультразвуковом сканере « ALOKA 4000» (Япония) c помощью ультразвукового линейного датчика частотой 7,5 МГц. В манжете создавали давление, превышающее систолическое артериальное давление в плечевой артерии на 50 мм. рт. ст. Компрессию сохраняли в течение 5 мин, затем проводили быструю декомпрессию. В ходе исследования диаметр плечевой артерии измеряли: в покое, через 4,5 мин после наложения манжеты на область плеча в пробе с реактивной ни гиперемией, через 30 с, 60 с, 90 с после декомпрессии. Усреднённую за цикл скорость кровотока оценивают в покое и сразу после декомпрессии. Измерение диаметра просвета артерии проводили с использованием двух точек: одной - на границе адвентиция-медиа передней стенки артерии, другой - на границе медиа-адвентиция задней стенки. Диаметром плечевой артерии считали среднюю величину, вычисленную по трём сердечным циклам. В ходе исследования диаметр плечевой артерии измеряли в покое (0), через 4.5 мин наложения манжеты, через 30 секунд, 60 секунд, 90 секунд после декомпрессии в миллиметрах (мм). Поток-зависимую дилатацию как характеристику эндотелий - зависимого ответа рассчитывали как отношение изменения диаметра плечевой артерии в течение реактивной гиперемии к диаметру артерии в покое, выраженному в процентах к исходному диаметру. За норму принимали значение, равное 10±3,3 % (Celermajer D.S. et al 1993).

Электронейромиография (ЭНМГ) осуществлялась на аппарате « MBN-нейромиограф» (Россия) при помощи стимулирующего поверхностного пластинчатого электрода (катод-дистально, анод-проксимально), а отведение -стандартным набором монополярных, пластинчатых электродов диаметром 5 мм. Исследовались моторные порции малоберцовых нервов с определением амплитуды М-ответа, латентности М-ответа, площади М-ответа, скорости распространения волны (СРВ)

Полученные в ходе исследования результаты обрабатывались статистически общепринятыми методами статистики на компьютере IBM PC при помощи пакета прикладных программ для обработки медицинской и биологической информации « STATISTICA 6.0» (StatSoft,Inc.,США). Осуществлялось определение средней (М), стандартного отклонения (SD). Характер распределения определялся при помощи критериев Шапиро - Вилко и Колмогорова - Смирнова. Параметрические данные описывались в виде средней (М) и стандартного отклонения (SD)в формате М ± SD. Непараметрические данные описывались в виде медианы, нижнего квартиля (25 процентиль) и верхнего квартиля (75 процентиль) в формате (Мe [25p;75p]). При нормальном распределении переменных для определения различий между двумя зависимыми и независимыми группами использовался парный и непарный t-критерий Стьюдента, а при непараметрическом - критерий Вилкоксона и Манна-Уитни соответственно. В случае множественных сравнений проводили попарное сравнение групп с использованием непараметрического теста Манна Уитни, применяя поправку Бонферрони при оценке значения р. (пересчёт уровня значимости для множественных сравнений по формуле po/ n, где po- 0,005, а -n - часло парных сравнений. Для оценки статистической значимости наблюдаемых различий 3 связанных (зависимых) групп и более на разных этапах динамического наблюдения при распределении, отличном от нормального, использовался непараметрический метод Фридмана с вычислением коэффициента конкордации Кендалла.

Различие между долями оценивали при помощи критерия чІ в таблицах сопряжённости. Сравнение относительных частот внутри одной группы проводили с использованием двустороннего критерия статистической значимости. При описании связанных групп исследований до и после воздействия применялся МакНемара чІ. Для анализа взаимосвязи двух признаков использовали корреляционный анализ по Пирсону (для параметрических критериев) и по Спирмену (для непараметрических критериев) с обязательным визуальным контролем диаграмм рассеяния. При изучении связи нескольких признаков применялась корреляционная матрица. Использовалась следующая классификация силы корреляции в зависимости от значения коэффициента корреляции r : при величине r _< 0,25- слабая корреляция, при 0,25<r<0,75- умеренная корреляция, а при r>_0,75- сильная корреляция. Корреляции считалась значимой при p<0,05. В ходе исследования проводили проверку статистических гипотез о равенстве коэффициентов корреляции, полученных в разных группах объектов исследования. Для отбора наиболее значимых независимых переменных при нормальном распределении признаков применяли метод множественной пошаговой линейной регрессии (Реброва О. Ю., 2006)

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ.

Ниже представлена общая клиническая характеристика больных (табл.1)

Таблица 1

Общая клиническая характеристика больных.

Показатель	Компенсирный СД тип 2 до5 лет, человек % (n=64) 1 группа	Компенсирный СД тип 2 более 5 лет (n=48) 2 группа	Декомпенсирный СД тип 2 до5 лет (n=74) 3 группа	Декомпенсный СД тип 2 более5 лет (n=90) 4 группа
Возраст, лет	55[50;62]	58,5[56;64]	55[50;63]	58[54;65]
ДлительностьССД типа 2, лет	4,05 ±1,87 p1-3=0,74	10,07± 1,28 р2-4 = 0,68	4,01±1,64	9,8 ± 2,27
HbA1c,%	6,29±0,63 p1-2=0, 86	6,25[5,3;6,0]	8[7,2;9] P3-4=0, 86	8,56±1,27
Средняя cт. тяжести, чел-к	55 (85,9%)	32 (66,7%)	65 (87,8 %)	55(61,1%)
Тяжёлый СД, человек	9 (14,1%)	16(33,3%)	9 (12,2%)	35(38,9%)
Диабет-кая ретинопатия, всего человек I ст IIст III ст	25 (39%) 25 (39%) 0 0	33 (68,8%) 22 (45,8%) 9 (18,8%) 2 (4,2%)	45(60,8%) 34 (45,9%) 8(10,8%) 3(4,05)	68(75,5 %) 48 (53,3%) 14 (15,6%) 6 (6,6%)
Диабет-кая нейропатия, всего человек	48 (75%)	42 (87,5 %)	63 (85,1%)	89 (98,9%)
Диабет-кая нефропатия, всего человек I ст II ст III ст	24 (37,5%) 24(37,5%) 0 0	27 (56,25%) 21(43,75%) 6 (12,5%) 0	40 (54,05%) 36 (48,65%) 4 (5,40%) 0	66 (73,3%) 46 (51,1%) 16 (17,8%) 4 (4,4%)
ИБС (стенокардия напряжения), всего человек II КФК. III КФК.	18 (28,13%) 18 (28,13%) 0	26 (54,2%) 25 (52,08) 1(2,12%)	28 (37,83%) 24 (32,43%) 4 (5,40%)	46 (51,11 %) 40 (44,44%) 6(6,67%)
ОИМ в анамнезе, всего человек	0	1 (2,08%)	7 (9,46%)	9 (10%)
ДЭ, всего человек	10(15,62%)	12 (25 %)	18 (24,3%)	28 (31,1%)
ОНМК в анамнезе, всего человек	2 (3,12%)	2 (4,16%)	3(4,05%)	5 (5,55%)
ХОЗАНК, всего человек	4 (6,25 %)	7 (14,58%)	11 (14,87%)	16 (17,77%)
Диабетическая стопа, всего, человек	0	2 (4,27%)	4 (5,41%)	9 (10%)
Жировой гепатоз, всего	26 (40,62%)	27 (56,25%)	46 (62,16)	63 (70%)
АГ, всего человек	42 (65,62%)	40(83,3%)	62(83,7%)	79(87,77%)

Все группы были сопоставимы по полу и возрасту.

Группы 1 и 2, а также 3 и 4 были сопоставимы по уровню гликозилированного гемоглобина. Группы 1 и 3, а также 2 и 4 были сопоставимы по длительности заболевания.

С увеличением длительности сахарного диабета при наличии хорошего гликемического контроля (группы 1-2) увеличивалась и частота развития ретинопатии, (чІ= 3,02, p=0,08), полиневропатии (чІ= 4,16,p=0,04), нефропатии (чІ= 5,46, p=0,01), ИБС (чІ= 15,21, p<0,001), ДЭ (чІ= 13,32, p<0,001), поражений сосудов нижних конечностей (чІ= 14,17, p<0,001), а также артериальной гипертензии (чІ= 5,09, p=0,02) и жирового гепатоза (чІ= 14,24, p=0,0002).

При небольшой длительности заболевания у больных с плохим гликемическим контролем (группы по сравнению с пациентами с компенсированным углеводным обменом статистически значимо чаще развивалась нефропатия (чІ= 14,24, p=0,02), полиневропатия (чІ= 6,42, p=0,01), ИБС (стенокардия напряжения) (чІ= 13,32, p<0,001), ХОЗАНК (чІ= 16,05, p<0,001).

Сравнительный анализ встречаемости диабетической ретинопатии (39%), нефропатии (37,5%), ИБС (стенокардии напряжения) (28,13%) при компенсированном СД 2 типа продолжительностью менее 5 лет не выявил статистически значимых различий между ними (p > 0, 05), подтверждая одновременность их возникновения, что согласуется с литературными данными (Богданова А. А., 2007). Следует заметить, что у пациентов данной группы не было статистически значимых различий в частоте встречаемости жирового гепатоза и диабетической ретинопатии (p= 0,90), жирового гепатоза и диабетической нефропатии (р=0,73), жирового гепатоза и ИБС (стенокардии напряжения) (р=0,12). Эти данные позволяют предположить патогенетическую общность микро- и макроангиопатий и жирового гепатоза, которая формируется у больных СД 2 типа при небольшой длительности заболевания и при компенсированном на данный момент углеводном обмене. При увеличении длительности сахарного диабета при сохранении компенсации углеводного обмена также отсутствую различия в частоте встречаемости ретинопатии и нефропатии (р=0,19), нефропатии и ИБС (р=0,84), исчезают различия в частоте встречаемости ХОЗАНК и ДЭ (р=0,22). В этой группе также не было статистически значимых различий между относительной частотой встречаемости жирового гепатоза и диабетической ретинопатии (p= 0,19), жирового гепатоза и диабетической нефропатии (р=1,00), жирового гепатоза и ИБС (стенокардии напряжения) (р=0,844). Таким образом, при увеличении длительности диабета прогрессируют микро и макроангиопатий, вероятно, за счёт гликозилирования и повышения активности окислительного стресса.

С целью уточнения механизмов возникновения и прогрессирования поздних осложнений СД 2 типа нами проведён анализ выраженности перекисного окисления липидов у пациентов, страдающих СД 2 типа, с различной степенью компенсацией углеводного обмена при различной длительности заболевания. Нами показано что активация свободно-радикального окисления статистически значимо по сравнению с контролем присутствует даже при компенсированном недлительно текущем СД 2: интенсивность свободно-радикального окисления по сравнению с контролем была увеличена на 27%., а антиоксидантная активность снижена на 32 %. При увеличении длительности заболевания, а также при декомпенсации углеводного обмена происходит дальнейшее, статистически значимое нарастание интенсивности свободно радикального окисления и снижение общей антиоксидантной активности (Рис. 1а, 1б)

А) Б)

Рисунок 1

А) Интенсивность свободно-радикального окисления у больных СД 2 типа в зависимости от компенсации углеводного обмена и длительности заболевания.

Б) Общая антиоксидантная активность у больных СД 2 типа в зависимости от компенсации углеводного обмена и длительности заболевания

Примечание:

И1 - интенсивность СРО в 1-ой группе, ОАА 1- общая антиоксидантная активность в 1-ой групппе

И2 - интенсивность СРО во 2-ой группе, ОАА 2- общая антиоксидантная активность в 2-ой групппе

И3 - интенсивность СРО в 3 -ей группе, ОАА 3- общая антиоксидантная активность в 3-ей групппе

И4 - интенсивность СРО в 4-0й группе, ОАА 4- общая антиоксидантная активность в 4-0й групппе

р1-2 =0,001,

Р1-3 <0,001 р1-2 =0,09

Р2-4<0,001 Р1-3<0,001

Р3-4<0,001 P2-4<0,001

p3-4 =0,84

Содержание ДК, ТК, МДА у больных сахарным диабетом 2 типа (1 группа) превышало содержание аналогичных показателей у пациентов из группы контроля на 51%, 73,3%, 64% соответственно. При увеличении длительности СД, в период декоменсации углеводного обмена имело место статистически значимое прогрессирующее первичных и промежуточных продуктов пероксидации, достигая своего апогея при длительно текущем декомпенсированном сахарном диабете. Активность антиоксидантных ферментов достоверно снижалась с течением длительности заболевания, а также при декомпенсации углеводного обмена, вероятно, вследствие гликозилирования (табл. 2, Рис.2а, б)

Таблица2

Молекулярные продукты перекисного окисления липидов и антиоксидантные ферменты у больных СД 2 типа (М ± SD)

Показатель	Компенсированный СД 2 тип до 5 лет Группа 1 (1) (n= 28)	Компенсированный СД 2 тип более 5 лет Группа 2 (2) (n= 22)	Декомпенсированный СД 2 тип до 5 лет Группа 3 (3) (n= 36)	Декомпенсированный СД 2 тип более 5 лет Группа 4 (4) (n= 42)	Контроль (n=12)
ДК, ед. опт.пл/ г ткани.	0,027 ±0,004 P1-2 =0,002 P1-3 <0,001 P1-4 <0,001	0,038 ± 0,012 P2-1= 0,002 P2-3 =0,41 P2-4 =0,199	0,041±0,011 P3-1 <0,001 P3-2 =0,41 P3-4 =0,56	0,044±0,013 P4-1 <0,001 P4-2 =0,199 P4-3 =0,56	0,013±0,007 Pк - 1=0,032 Р к - 2<0,001 Р к - 3<0,001 Р к - 4<0,001
ТК, ед. опт.пл/ г ткани.	0,031±0,007 P1-2 =0,311 P1-3 =0,005 P1-4 <0,001	0,042± 0,011 P2-1= 0,311 P2-3 =0,462 P2-4 =0,199	0,047 ±0,012 P3-1 =0,005 P3-2 =0,462 P3-4 =0,560	0,055±0,004 P4-1 <0,001 P4-2 =0,199 P4-3 =0,56	0,008±0,003 Pк - 1=0,027 Р к - 2<0,001 Р к - 3<0,001 Р к - 4<0,001
МДА, ед. опт.пл/ г ткани.	2,46±0,541 P1-2 <0,001 P1-3 <0,001 P1-4 <0,001	4,43±0,468 P2-1<0,001 P2-3 =0,253 P2-4 =0,001	4,839±1,208 P3-1 <0,001 P3-2 =0,253 P3-4 =0,034	5,98±0,487 P4-1 <0,001 P4-2 =0,001 P4-3 =0,034	0,173± 0,050 Pк - 1=0,006 Р к - 2<0,001 Р к - 3<0,001 Р к - 4<0,001
СОД, ед. акт./мг Hb мин	64,92±8,02 P1-2 =0,003 P1-3 =0,001 P1-4 <0,001	51,92±12,25 P2-1=0,003 P2-3 =0,573 P2-4 =0,018	49,01±14,48 P3-1 =0,001 P3-2 =0,573 P3-4 =0,128	42,14± 7,54 P4-1 <0,001 P4-2 =0,018 P4-3 =0,128	86,43± 4,491 Pк - 1=0,041 Р к - 2=0,032 Р к - 3<0,001 Р к - 4<0,001
КАТ, ед. акт./мг Hb мин	0,125±0,019 P1-2 =0,166 P1-3 =0,022 P1-4 <0,001	0,20±0,021 P2-1= 0,166 P2-3 =0,358 P2-4 =0,020	0,152±0,036 P3-1 =0,022 P3-2 =0,358 P3-4 <0,001	0,065±0,026 P4-1 <0,001 P4-2 =0,02 P4-3 <0,001	0,112±0,024 Pк - 1=0,473 Р к - 2 =0,052 Р к - 3 = 0,624 Р к - 4 = 0,032

Примечание: ДК - диеновые конъюгаты

ТК - триеновые конъюгаты

МДА - малоновый диальдегид

СОД - супероксиддисмутаза

КАТ - каталаза

Рисунок 2а. Содержание молекулярных продуктов ПОЛ в различных группах

Рисунок 2б. Содержание антиоксидантных ферментов у больных СД 2 типа в различных группах

Примечание: ДК - диеновые конъюгаты в 1-4 группах

ТК - триеновые конъюгаты в 1-4 группах

МДА - малоновый диальдегид в 1-4 группах

СОД - супероксиддисмутаза в 1-4 группах

КАТ - каталаза 1- 4 группах

Интенсивность свободно-радикального окисления у больных СД 2 типа определась степенью компенсации углеводного обмена (r=0,41,p<0,01), длительностью заболевания (r=0,20,p=0,048).

Доказано, что наличие дефицита активности антиоксидантных ферментов является одной из важных причин развития окислительного стресса (Lankin V., Tikhaze A.,2003), компенсация углеводного обмена у больных сахарным диабетом 2 типа сопровождается безусловным снижением интенсивности свободнорадикальных процессов (Недосугова Л. В., 2006). По нашим данным, при недлительно текущем СД 2 при достижении компенсации углеводного обмена происходит достоверное снижение содержания молекулярных продуктов перекисного окисления липидов(ДК на 35%, ТК - на 14,69%, МДА - на 49,1%. Одновременно происходит повышение содержание супероксиддисмутазы на 80,5% (p<0,001) При улучшении гликемического контроля у больных с длительно текущим сахарным диабетом 2 типа имеет место снижение уровня ДК на 8,1%, ТК - на 18,5%, МДА - на 28,6%. Активность СОД повышается на 21,8 %.

Несмотря на снижение молекулярных продуктов ПОЛ и увеличение активности антиоксидантных ферментов при улучшении гликемических показателей окислительный стресс не редуцируется полностью: по сравнению с контролем уровень ДК повышен на 51,8% (p=0,032), МДА - на 29,6 % (p =0,006), активность СОД снижена на 33,1 % (p=0,041), что требует дополнительного терапевтического воздействия с целью коррекции выраженности свободно-радикального окисления и восстановления равновесия между генерацией свободных радикалов и антиоксидантной защитой.

Нами проведён анализ выраженности окислительной модификации белков у пациентов с различной компенсацией углеводного обмена при различной длительности заболевания. Окислительная модификация белков признаётся в настоящее время одним из ранних, но наиболее надёжных индикаторов поражений ткани при свободно-радикальном окислении (Губский Ю. И. и соавт., 2005г, Е. Е. Дубинина Е. Е., 2008). Нами отмечено, что по сравнению с контролем у пациентов, недлительно страдающих СД 2 типа и в настоящий момент имеющих компенсацию углеводного обмена, статистически значимо повышено содержание ранних маркёров окислительной деструкции белка как в покое (АДФГ с) - на 33% (p= 0,001), так и индуцированных (АДФГи) на 75 %(p=0,0186). У пациентов, имеющих СД 2 менее 5 лет, содержание поздних маркёров окислительной деструкции белка (КДФГ) даже в покое превышает таковую у группы сравнения на 80%, а при индукции возрастает в 2 раза. При увеличении длительности заболевания, декомпенсации обмена происходит достоверное прогрессивное увеличение содержания окисленно модифицированных белков, особенно поздних маркёров окислительной деструкции (табл. 3, Рис. 3а, б)

Таблица 3.

Содержание ОМБ у больных СД 2 типа в различных группах.

(Мe [25p;75p]); (М ± SD)

Показатель	1 (n= 14)	2 (n=14)	3 (n=14)	4 (n=14)	Контроль (n=11)	P Контроль и группы
АДФГ с, относ ед	0,0004 [0,0004;0,0004], p1-2=0,158 p1-3=0,034 p1-4=0,021	0,0005 [0,0004;0006] p2-1=0,158 p2-3=0,743 p2-4=0,33	0,0005 [0,0005;0,0006] p3-1=0,034 p3-2=0,743 p3-4=0,138	0,0005 [0,00046;0,001] p4 -1=0,021 p4-2=0,33 p4 -3=0,148	0,0003 [0,0002;0,0003]	Рк-1=0,001 рк-2=0,018 Рк-3<0,001 рк-4=0,003
АДФГ и, относ ед	0,0007 [0,0006;0,0007] p1-2=0,844 p1-3=0,613 p1-4=0,638	0,001 [0,0009;0,001] p2-1=0,844 p2-3=0,688 p2-4=0,721	0,001 [0,0007;0,0014] p3-1=0,613 p3-2=0,688 p3-4=0,991	0,0009 [0,0008;0,0012] p4 -1=0,638 p4-2=0,721 p4 -3=0,991	0,0004 [0,0003;0,0008]	рк-1=0,0186 рк-2=0,023 Рк-3=0,007 рк-4=0,025
КДФГ спонт, относ ед	0,0036 ± 0,00084 p1-2=0,210 p1-3=0,856 p1-4=0,039	0,0042 ± 0,0011 p2-1=0,210 p2-3=0,274 p2-4=0,195	0,0036 ± 0,0014 p3-1=0,856 p3-2=0,274 p3-4=0,053	0,005 ± 0,0002 p4 -1=0,039 p4-2=0,195 p4 -3=0,053	0,0004 ± 0,00001	Рк-1< 0,001 рк-2<0,001 Рк-3<0,001 рк-4,0,001
КДФГ и, относ ед	0,0039 ± 0,0011 p1-2=0,125 p1-3=0,134 p1-4=0,0004	0,0049 ± 0,0018 p2-1=0,125 p2-3=0,783 p2-4=0,029 ...

Подобные документы

• Клинико-фармакологический подход к выбору групп и конкретных лекарственных препаратов для терапии сахарного диабета

  Особенности протекания и симптомы сахарного диабета. Прибор для замера уровня глюкозы в крови. Лечение сахарного диабета легкой и средней тяжести. Диета и медикаментозная терапия. Клинико-фармакологические подходы к лечению сахарного диабета I типа.
  
  реферат [144,7 K], добавлен 21.07.2014
  

• Фармакоэкономическое исследование лечения сахарного диабета

  Основные проявления сахарного диабета. Основные отличия сахарного диабета I и II типа. Лабораторная диагностика сахарного диабета. Классификация диабета и нарушений толерантности к глюкозе. Содержание глюкозы в крови при глюкозотолерантном тесте.
  
  курсовая работа [64,8 K], добавлен 27.11.2013
  

• Морфологические особенности сахарного диабета у детей. Синдром Мориака

  Морфология почек и печени при сахарном диабете. Классификация осложнений сахарного диабета. Внешние факторы, способствующие развитию диабета у детей. Аплазия и атрофия Лангергансовых островков. Систематическое введение инсулина в места липодистрофий.
  
  презентация [946,9 K], добавлен 28.02.2014
  

• Фитотерапия в комплексном лечении сахарного диабета II типа

  Рассмотрение причин развития сахарного диабета; острые и хронические осложнения заболевания. Последствия дефицита инсулина в организме человека. Обоснование эффективности компонентов фитотерапии в комплексном лечении сахарного диабета второго типа.
  
  презентация [7,2 M], добавлен 06.05.2013
  

• Морфологические особенности сахарного диабета у детей. Синдром Морика

  Абсолютная или относительная инсулиновая недостаточность. Морфология почек и печени при сахарном диабете. Классификация осложнений сахарного диабета. Ведущие внешние факторы, способствующие развитию диабета у детей. Атрофия Лангергансовых островков.
  
  презентация [919,5 K], добавлен 26.05.2015
  

• Все о сахарном диабете

  Эпидемиология сахарного диабета, метаболизм глюкозы в организме человека. Этиология и патогенез, панкреатическая и внепанкреатическая недостаточность, патогенез осложнений. Клинические признаки сахарного диабета, его диагностика, осложнения и лечение.
  
  презентация [1,3 M], добавлен 03.06.2010
  

• Первичная профилактика сахарного диабета II типа

  Задачи, методы и средства профилактики сахарного диабета. Избыточная масса тела и ожирение - основная причина распространения заболеваемости сахарным диабетом. Особенности сахарного диабета II типа. Формирование концепции здорового образа жизни населения.
  
  презентация [8,9 M], добавлен 10.09.2013
  

• Анализ заболеваемости сахарным диабетом в г. Набережные Челны и значение самоконтроля в профилактике развития осложнений

  Приоритетные направления государственной политики в области эндокринологии. Распространенность сахарного диабета и характеристика болезни. Осложнения сахарного диабета, роль самоконтроля за состоянием здоровья, разработка анкет и проведение исследований.
  
  курсовая работа [864,9 K], добавлен 12.08.2009
  

• Роль фельдшера в ранней диагностике сахарного диабета

  Этиология сахарного диабета, его ранняя диагностика. Тест на толерантность к глюкозе. Распространенность сахарного диабета в России. Анкета "Оценка риска заболевания сахарным диабетом". Памятка для фельдшеров "Ранняя диагностика сахарного диабета".
  
  курсовая работа [1,7 M], добавлен 16.05.2017
  

• Принципы лечения сахарного диабета

  Особенности лечения сахарного диабета I типа. Использование диетотерапии, физической нагрузки, инсулинотерапии. Критерии компенсации сахарного диабета. Рекомендации по режиму физических нагрузок. Хроническая передозировка инсулина (синдром Сомоджи).
  
  презентация [2,4 M], добавлен 23.09.2016
  

• Сахарный диабет 2-го типа на инсулине, декомпенсация

  Характеристика 2-го типа сахарного диабета. Стадии развития заболевания. Обоснование данного диагноза и осложнений на основании осмотра органов и систем пациента, данных лабораторных и дополнительных исследований. Формирование схемы лечения больного.
  
  история болезни [31,1 K], добавлен 10.11.2015
  

• Биохимическое исследование ювенильного сахарного диабета 1 типа

  Осложнения сахарного диабета и их мониторинг. Гипогликемические состояния, их описание. Биохимическое исследование глюкозы в крови. Критерии диагностики сахарного диабета. Исследование суточной мочи на глюкозурию. Альбумин в моче (микроальбуминурия).
  
  курсовая работа [217,4 K], добавлен 18.06.2015
  

• Хирургические аспекты лечения синдрома диабетической стопы

  Определение сахарного диабета, анализ динамики распространенности его осложнений. Описание изменений в развитии нижних конечностей - диабетической стопы. Показания и противопоказания к выполнению реконструктивных и реваскулирующих сосудистых операций.
  
  презентация [5,6 M], добавлен 25.06.2015
  

• Сахарный диабет 1 типа

  Изучение основных причин, симптомов, патогенеза и осложнений сахарного диабета 1 типа. Нарушение утилизации глюкозы и гипергликемия. Диагностика и мониторинг заболевания. Антитела к инсулину. Лечебные процедуры для больных. Питание при сахарном диабете.
  
  презентация [584,8 K], добавлен 15.03.2016
  

• Заболевания эндокринной системы в гериатрии

  Развитие и симптомы гипотиреоза у пожилых людей. Патогенетические методы лечения и профилактики заболеваний эндокринной системы. Проведение инсулинотерапии или комбинированной терапии при лечении осложнений сахарного диабета и сопутствующих болезней.
  
  реферат [9,2 K], добавлен 03.10.2014
  

• Лечение сахарного диабета у детей

  Факторы риска развития диабета у детей, его симптомы. Основная цель современной инсулинотерапии, ее возможные осложнения. Терапия сахарного диабета 1 типа. Инсулины, применяемые в детской практике: хумалог, новоРапид, лантус, подбор необходимой дозы.
  
  презентация [654,4 K], добавлен 05.10.2016
  

• Диабетическая ретинопатия: патогенез, патоморфологическая характеристика, исходы

  Диабетическая ретинопатия как микроангиопатия, одно из наиболее тяжелых осложнений сахарного диабета, знакомство с видами: непролиферативная, препролиферативная, пролиферативная. Общая характеристика основных осложнений диабетической ретинопатии.
  
  презентация [1,3 M], добавлен 06.12.2016
  

• Лечение сахарного диабета II типа

  Лечение больных с нарушениями углеводного обмена, вызванными преимущественной инсулинорезистентностью и относительной инсулиновой недостаточностью. Диетотерапия сахарного диабета II типа, особенности потребления витаминов и некалорийных сахарозаменителей.
  
  презентация [1,2 M], добавлен 11.02.2015
  

• Сахарный диабет 1 типа

  Изучение особенностей аутоиммунного заболевания эндокринной системы. Клинические проявления сахарного диабета 1 типа. Патогенез деструкции В-клеток поджелудочной железы. Метаболические маркеры сахарного диабета. Идиопатический диабет. Дефицит инсулина.
  
  презентация [520,4 K], добавлен 01.10.2014
  

• Лабораторная диагностика сахарного диабета

  Клиническое описание сахарного диабета как одного из самых распространенных заболеваний в мире. Изучение факторов риска и причин развития. Признаки сахарного диабета и его проявления. Три степени тяжести заболевания. Методы лабораторных исследований.
  
  курсовая работа [179,2 K], добавлен 14.03.2016
  

• главная
• рубрики
• по алфавиту
• вернуться в начало страницы
• вернуться к началу текста
• вернуться к подобным работам