Влияние водорастворимых модуляторов перекисного окисления липидов на эффективность комплексной химиотерапии инфильтративного туберкулеза легких

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы

Результаты диссертационного исследования используются в учебном процессе на кафедрах фармакологии и фтизиопульмонологии ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», а также в клинической практике Челябинского областного клинического противотуберкулезного диспансера и Челябинского областного противотуберкулезного диспансера №6.

Публикации

Содержание работы

Материалы и методы. Для решения поставленных задач было проведено проспективное, плацебо-контролируемое, простое «слепое», рандомизированное исследование влияния аскорбиновой кислоты (г-лактона 2,3-дегидро-L-гулоновой кислоты) и эмоксипина (2-этил-6-метил-3-оксипиридина гидрохлорида) (табл.1) на динамику рентгенологических и клинических проявлений инфильтративного туберкулеза легких в сопоставлении с потребностью во фтизиохирургическом лечении, его исходами в течение 12-месячного курса стандартной противотуберкулезной химиотерапии и частотой выявления Mycobacterium tuberculosis в мокроте.

Таблица 1.

Примечания:- в левом столбце указаны торговые названия лекарственных препаратов; - в скобках обозначены химические названия лекарственных веществ и производители препаратов.

Работа выполнялась в 2005-2008 гг. на кафедрах фармакологии и фтизиопульмонологии ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», базе терапевтических отделений ГУЗ «Областной противотуберкулезный диспансер» и ГУЗ «Областной противотуберкулезный диспансер №6» г.Челябинска.

План исследования соответствовал положениям Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации (ВМА) последнего пересмотра (Эдинбург, Шотландия, октябрь 2000г.) с учетом разъясняющего примечания к параграфу 29, внесенного Генеральной Ассамблеей ВМА (Вашингтон, 2002г.) и был одобрен этическим комитетом ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (Протокол №5, 2007г.).

Аскорбиновая кислота и эмоксипин применялась в дозах и режимах, рекомендуемых для использования в урологической, неврологической и диабетологической практике (табл.2). Оба препарата вводили один раз в сутки внутривенно капельно. Перед инфузией аскорбиновую кислоту и эмоксипин разводили в 200 мл 5% раствора глюкозы. Длительность курсового применения данных лекарственных средств составила 10 дней.

Таблица 2.

Исходя из цели и задач исследования, первоначально была проведена оценка влияния аскорбиновой кислоты и эмоксипина на интенсивность свободнорадикального (перекисного) окисления липидов in vitro. С этой целью использовался метод И.А.Волчегорского и др. (2000г.), основанный на анализе переокисления липидов стандартизованного препарата гомогенатов головного мозга крыс.

Клинико-фармакологический раздел исследования осуществлялся в соответствии с клиническими критериями включения и исключения. Для исследования было отобрано 100 больных с впервые диагностированным инфильтративным туберкулезом легких в фазе распада (А15. и А16. по МКБ-10). Критериями исключения являлись: отказ от лечения; непереносимость противотуберкулезных препаратов; рецидив или обострение туберкулеза с повторным развитием инфильтративного поражения легких; наличие внелегочных форм туберкулеза; наличие ВИЧ инфекции; сахарный диабет; онкологические и психические заболевания; острый коронарный синдром; острые нарушения церебрального кровообращения; острая воспалительная патология нетуберкулезного генеза. От всех больных было получено письменное информированное согласие на участие в исследовании.

Для соблюдения принципа случайного отбора проводилась динамическая (альтернативная) рандомизация больных, включенных в исследование (Двойрин В.В., Клименков А.А., 1985). Использованная схема рандомизации обеспечивает случайный характер попадания больных в изучаемые группы, а также равенство выборок в группах на протяжении всего исследования. С помощью примененной процедуры рандомизации больные, включенные в исследование, были распределены на 3 равновеликие группы, сопоставимые по возрасту, половому составу, методам выявления туберкулеза легких, клинико-рентгенологическим параметрам, частоте бактериовыделения, чувствительности МБТ к противотуберкулезным препаратам, характеру базисной противотуберкулезной и патогенетической терапии (табл.3).

Анализ сопоставимости сформированных групп продемонстрировал их однородность по всем показателям (табл.3). В процессе исследования из него выбыло 6 больных, самовольно прекративших лечение. Большинство выбывших пациентов (5 человек) прекратили стационарное лечение в течение первых 4 месяцев фазы интенсивной терапии, 1 больной выбыл из исследования на амбулаторном этапе. В результате, к концу исследования, число пациентов в группе «активная плацебо-терапия» сократилось с 34 до 33 пациентов, в группе «аскорбиновая кислота» - с 33 до 29 пациентов, а в группе «эмоксипин» - с 33 до 32 пациентов.

Больным первой группы («активная плацебо-терапия») дополнительно проводили ежедневное внутривенное капельное введение 200 мл 5% раствора глюкозы. Данное воздействие рассматривалось как «активная плацебо-терапия» (Аведисова А.С., 2003). Больные второй группы («аскорбиновая кислота») ежесуточно получали внутривенные капельные инфузии 500 мг аскорбиновой кислоты (ОАО «Новосибхимфарм»), разведенной в 200 мл 5% раствора глюкозы. Больным третьей группы («эмоксипин») тем же путем ежедневно вводили 150 мг эмоксипина (ФГУП «Московский эндокринный завод») в 200 мл 5% раствора глюкозы.

Длительность инфузионной терапии во всех группах составила 10 дней. В дальнейшем больные продолжали получать базисную противотуберкулезную терапию вплоть до завершения стандартного 12-месячного курса лечения ИТЛ.

За день до начала терапии и через каждые 2 месяца, в течение всего периода комплексного лечения у больных проводилась рентгенологическая оценка динамики проявлений ИТЛ с обязательным ежемесячным контролем наличия M.tuberculosis в мокроте. Сразу по завершении курса инфузионной терапии у больных оценивали показатели функционального статуса циркулирующих нейтрофилов, показатели системы «перекисное окисление липидов-антиоксидантная защита» (ПОЛ-АОЗ) и уровнь провоспалительных цитокинов (ФНО-б, ИЛ-1в, ИЛ-8), а также концентрацию иммуноглобулинов (IgА, IgМ, IgG) и циркулирующих иммунных комплексов. Рентгенологическое и клинико-иммунологическое обследование больных было дополнено оценкой динамики показателей клинических проявлений ИТЛ и сопутствующих аффективных расстройств через 2 месяца с момента начала лечения. Параллельно с оценкой рентгенологической и клинической симптоматики ИТЛ отслеживалась динамика лейкоцитарного состава и биохимические показатели крови. Заключительным этапом исследования явилась оценка клинико-экономической эффективности включения аскорбиновой кислоты и эмоксипина в стандартное комплексное лечение ИТЛ.

Таблица 3.

Анализ сопоставимости групп больных инфильтративным туберкулезом легких, включенных в исследование

Примечание: - показатели возраста больных, индекс массы тела и давность ФОГ обследования до выявления ИТЛ представлены в виде средней арифметической и её стандартной ошибки (M±m); межгрупповые сопоставления проведены с использованием критерия Краскелла-Уоллиса;

- все остальные показатели представлены количеством больных, у которых был выявлен признак, обозначенный в соответствующей строке таблицы; межгрупповые сопоставления проведены с использованием критерия ч² Пирсона;

- показатели лекарственной устойчивости определяли для больных, у которых выделение M. tuberculosis было обнаружено при посеве мокроты (по 15 пациентов в каждой группе); при одновременном наличии устойчивости к изониазиду и рифампицину констатировали множественную лекарственную устойчивость; при устойчивости к двум и более препаратам констатировали полирезистентность; наличие устойчивости только к одному препарату свидетельствовало о монорезистентности;

*- назначение б-токоферола ацетата проводилось не ранее чем через 11 дней от начала комплексного лечения.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Для оценки динамики показателей рентгенологической и клинической симптоматики ИТЛ были разработаны ординальные (порядковые) шкалы квантифицированного учета этих проявлений заболевания. Разработка соответствующих шкал основывалась на анализе качественных описаний проявлений ИТЛ в 100 историях болезней. В результате было выявлено 11 важнейших рентгенологических показателей и 8 клинических симптомов заболевания, выраженность которых оценивалась с помощью шкал лайкертовского типа.

Анализ аффективного статуса базировался на квантифицированном учете выраженности тревоги и депрессии при госпитализации и через 2 месяца от начала лечения с помощью стандартизованных шкал самооценки (опросников), которые превосходят по чувствительности структурированные клинические интервью и могут быть использованы специалистами общемедицинской практики без привлечения психиатра (Белова А.Н., Шепетова О.Н., 2002; Смулевич А.Б., 2003).

Для изучения тревожных реакций пациентов применяли опросник Спилбергера-Ханина (ОСХ) (Белова А.Н., Шепетова О.Н., 2002), позволяющий проводить раздельную регистрацию тревожности как конституциональной черты личности (личностная тревожность; ЛТ) и тревогу как преходящее клиническое состояние (тревога ситуативная; ТС). Оценка депрессивной симптоматики основывалась на применении опросника депрессии Бека (ОДБ) с раздельной регистрацией выраженности 21 категории симптомов и жалоб, наиболее значимых для клинической характеристики депрессии (Белова А.Н., Шепетова О.Н., 2002).

Клинико-гематологические методы исследования проведены в соответствии с Приказом МЗ СССР №290 «Об унификации лабораторных методов исследования» (1972) и приказом МЗ РФ №109 «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации» (2003). Проводился традиционный развернутый анализ крови (Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., 1994). По результатам изучения лейкоцитарного состава периферической крови рассчитывался индекс Кальф-Калифа (Амбарцумян Р.Г., Бекбергенова Б.М., 1986) и лимфоцитарный индекс (Чиркина А.А. и др., 1993).

Состояние иммунной системы оценивалось по показателям функционального статуса фагоцитирующих клеток (нейтрофилов), концентрации основных классов иммуноглобулинов в сыворотке крови (IgА, IgМ, IgG), а также по уровню циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) и их размерам. Определение концентрации иммуноглобулинов классов А, М, G проведено методом радиальной иммунодиффузии в геле по G.Mancini в модификации А.А.Тихомирова (1977). Концентрация ЦИК оценивалась методом Гашковой (1978), размеры ЦИК-методом Константиновой (1985).

Функциональный статус нейтрофилов крови изучали с помощью оценки фагоцитоза частиц полистирольного латекса и проведения теста восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-теста). Помимо регистрации базальных («спонтанных») показателей состояния нейтрофилов учитывались параметры фагоцитарной реакции и НСТ-теста в условиях стимуляции продигиозаном in vitro (Виксман М.Е., Маянский А.Н., 1980; Нагоев Б.С. 1986).

Одновременно осуществлялось изучение уровня провоспалительных цитокинов ФНО-б, ИЛ-1в и ИЛ-8. Содержание ИЛ-1в и ИЛ-8 в сыворотке крови определялось иммуноферментным методом с помощью стандартных тест-систем ООО «Цитокин» (С-Петербург). Уровень ФНО-б регистрировали с помощью тест-системы «Вектор-Бест» (Новосибирск).

Функциональное состояние печени и почек оценивалось по концентрации билирубина, общего содержания белка, сиаловых кислот, креатинина и мочевины в сыворотке крови, а также по параметрам тимоловой пробы (Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., 1994; Комаров Ф.И. и др., 1998). Биохимическое обследование больных проводилось одновременно с рентгенологическим контролем.

Уровень продуктов ПОЛ в сыворотке крови определялся спектрофотометрически с раздельной регистрацией липопероксидов в гептановой и изопропанольной фазах липидного экстракта (Волчегорский И.А. и др., 1989). Результаты выражены в единицах индексов окисления (е.и.о.) - Е₂₃₂/Е ₂₂₀ (относительное содержание диеновых коньюгатов; ДК) и Е₂₇₈/Е₂₂₀ (уровень кетодиенов и сопряженных триенов; КД и СТ). О состоянии АОЗ судили по содержанию б-токоферола (б-ТК) (Спиричев В.Б. и др., 1979] и церулоплазмина (ЦП) (Колб В.Г., Камышников В.С.,1976) в сыворотке крови.

Оценка выделения M.tuberculosis с мокротой проводилась стандартным методом прямой микроскопии мокроты и с помощью культурального (бактериологического) метода (Приказ МЗ РФ №109, 2003). Исследование материала включало окраску по методу Ziehl-Neelsen (Приказ МЗ РФ №109, 2003) с последующей световой микроскопией. Культуральный метод осуществлялся путем посева материала на стандартные среды (Левенштейна-Йенсена, Мордовского, Финна-II) с регистрацией результата через 3 месяца. Определение лекарственной устойчивости M.tuberculosis проводилось методом "абсолютных концентраций" (Приказ МЗ РФ №109, 2003). Контроль динамики бактериовыделения осуществлялся ежемесячно.

Фармакоэкономический раздел работы проводился на основании полученных клинических результатов, которые оценивались путем сопоставления показателя «затраты/эффективность» и оценки минимизации затрат на стационарное лечение (Авксентьева М.В. и др., 2000; Воробьев П.А. и др., 2004). С этой целью проводился расчет затрат на курс стандартной интенсивной химиотерапии в стационаре, хирургическое лечение больных и дополнительные расходы на приобретение изучаемых лекарственных средств (аскорбиновая кислота и эмоксипин).

Статистический анализ полученных данных проведен с использованием пакетов прикладных компьютерных программ SPSS 14.0 и Statistica 6.0.

Количественные (интервальные) и порядковые (ординальные) данные обработаны дескриптивными методами и представлены в виде средней арифметической и её стандартной ошибки (M±m). Для оценки исходной сопоставимости сформированных групп по соответствующим параметрам применялся критерий множественных сравнений Краскелла-Уоллиса. Анализ динамики соответствующих показателей в отдельных группах проводился с помощью парного критерия Вилкоксона, предназначенного для суждения о значимости различий в связанных выборках. О достоверности межгрупповых различий по количественным и порядковым показателям на заключительном этапе исследования судили по U-критерию Манна-Уитни.

Исходные межгрупповые сопоставления по качественным (номинальным) параметрам осуществлялись с помощью критерия ч² Пирсона. Анализ динамики номинальных показателей в каждой группе проводился по критерию ч² Мак-Немара. О достоверности качественных межгрупповых различий на заключительных этапах исследования судили по точному критерию Фишера.

Для исключения статистических ошибок I-го рода (Двойрин В.В., Клименков А.А.,1985) результаты терапии считались значимыми только при параллельном выявлении достоверных различий с исходным уровнем в группах с применением изучаемых препаратов и с конечными показателями в группе «активная плацебо-терапия» (Волчегорский И.А. и др., 2005-2008).

Изучение взаимосвязей проводилось путем расчета коэффициентов корреляции по Спирмену (r_s). Возможность прогнозирования закрытия полостей распада в туберкулезных инфильтратах и потребности во фтизиохирургическом лечении изучалась с помощью дискриминантного анализа, логистической регрессии и математической технологии «нейронных сетей» (Нейронные сети, 2005). Оценка внутренней согласованности ординальных шкал рентгенологической и клинической симптоматики ИТЛ выполнялась с помощью расчета коэффициента б Кронбаха. Проверка статистических гипотез проводилась при критическом уровне значимости Р=0,05.

Результаты собственных исследований

В результате проведенного исследования была установлена неоднозначная роль свободнорадикальных процессов в регуляции иммунного статуса больных ИТЛ, а также течения и исходов этого заболевания. Было продемонстрировано, что исходные параметры системы «ПОЛ-АОЗ» достоверно отражают как распространенность деструкции в туберкулезных инфильтратах, так и сопутствующие поражения плевры. Следует подчеркнуть парадоксальный, на первый взгляд, характер зависимости между уровнем гептанофильных КД и СТ и распространенностью деструкции в туберкулезных инфильтратах. Эти показатели характеризовались отрицательной направленностью регрессионной зависимости (табл.4). Линейный регрессионный анализ взаимосвязи между содержанием продуктов ПОЛ в крови и показателями иммунного статуса позволил объяснить феномен снижения распространенности деструкции по мере нарастания вторичных гептанофильных продуктов ПОЛ. Было установлено снижение фагоцитарной функции нейтрофильных гранулоцитов крови и их способности к респираторному взрыву по мере нарастания уровня переокисленных гептанрастворимых липопероксидов. Известно, что нейтрофильные грунулоциты играют ключевую роль в процессах тканевой деструкции в очаге воспаления (Найда I.В., 2001; Eruslanov E.B. et al., 2005). Вполне возможно, что угнетающее действие гептанрастворимых интермедиатов ПОЛ в отношении нейтрофильных гранулоцитов ограничивает процессы деструкции в туберкулезных инфильтратах, оказывая своеобразное "противовоспалительное" действие. О правомерности этогоТаблица 4.

Параметры регрессионных зависимостей между показателями системы «перекисное окисление липидов - антиоксидантная защита» (Х), рентгенологическими признаками деструкции в туберкулезных инфильтратах, поражением плевры, показателями общего анализа крови и иммунным статусом больных (Y)

Примечание: в таблице представлены параметры уравнений линейной регрессии -y=ах1+bх2+сх3+…+dхn+константа; в таблице приведены только статистически значимые (р<0,05) коэффициенты регрессии, в остальных случаях поставлен прочерк; в строке р указан уровень статистической значимости каждого из представленных уравнений.

Размещено на http://www.allbest.ru/

положения свидетельствуют также отрицательная направленность регрессионных зависимостей между уровнем гептанрастворимых липопероксидов, провосполительного монокина ИЛ-1в и показателя СОЭ (табл.4). Вместе с тем, результаты регрессионного анализа не позволяют прийти к однозначному выводу о благоприятной (протекторной) роли накопления продуктов ПОЛ в крови больных ИТЛ. В первую очередь это связано с прямой зависимостью интенсивности туберкулезного поражения плевры от содержания гептанрастворимых липопероксидов (табл.4). Таким образом, полученные данные позволяют считать, что гептанрастворимые продукты ПОЛ, циркулирующие в крови больных ИТЛ, играют двоякую роль в развитии экссудативно-деструктивных процессов в зонах туберкулезного воспаления. С одной стороны, продукты ПОЛ могут оказывать угнетающее действие в отношении фагоцитов крови и за счет этого ограничивать процессы вторичной альтерации (деструкции) в туберкулезных очагах. С другой стороны, липопероксиды могут способствовать увеличению проницаемости сосудистой стенки (Биленко М.В., 1989; Romero F.J. et al., 1998) и, возможно, за счет этого потенциировать вовлечение плевры в процесс туберкулезного поражения.

Важно подчеркнуть, что в отличие от содержания продуктов ПОЛ, показатели компонентов АОЗ крови не отражали непосредственно выраженность туберкулезного поражения. Тем не менее, результаты регрессионного линейного анализа продемонстрировали причастность АОЗ к регуляции иммунного статуса больных ИТЛ. Прежде всего, это касается содержания ИЛ-1в зависимого белка острой фазы церулоплазмина, уровень которого прямо отражал способность нейтрофильных гранулоцитов к фагоцитозу и респираторному взрыву (табл.4). Одновременно была выявлена отрицательная зависимость между содержанием церулоплазмина в крови и лейкоцитозом. Установленные факты укладываются в рамки представлений о способности церулоплазмина модулировать функции фагоцитов и ограничивать их эмиграцию в зону воспаления (Волчегорский И.А. и др., 1997). Правомерность этого положения иллюстрируется отрицательной регрессионной зависимостью между содержанием ФНО-б и церулоплазмина в крови больных ИТЛ.

Не меньший интерес вызывает регрессионный анализ показателей концентрации б-ТК и параметров иммунного статуса больных ИТЛ. Выполненный нами регрессионный анализ продемонстрировал снижение способности нейтрофильных гранулоцитов к фагоцитозу по мере нарастания токоферолемии у больных ИТЛ (табл.4). Одновременно было установлено, что повышение содержания б-ТК в крови больных связано с нарастанием концентрации иммуноглобулина G, который является эффектором вторичного иммунного ответа. Сложный и зачастую противоречивый характер зависимости между показателями системы «ПОЛ-АОЗ», показателями иммунного статуса и рентгенологическими проявлениями туберкулезного поражения свидетельствовал о целесообразности использования множественного нелинейного анализа для исчерпывающей характеристики роли ПОЛ-АОЗ в развитии туберкулезного процесса. Наиболее подходящим для решения этой задачи является статистическая технология «нейронных сетей» (Нейронные сети, 2005). Применение этого подхода позволило разработать высоко информативный алгоритм прогнозирования течения и исходов ИТЛ по интегральной совокупности изученных нами показателей системы «ПОЛ-АОЗ». В результате нам удалось осуществить правильный прогноз закрытия полостей деструкции в динамике первых 4-х месяцев лечения у 75% обследованных больных. В 86% случаев нейросетевой анализ позволил осуществить правильное прогнозирование потребности в хирургическом лечении. При этом оба прогностических алгоритма характеризовались чрезвычайно высокими показателями отношения шансов (?11 в обоих случаях) при вполне приемлемых значениях чувствительности (0,786-0,852) и специфичности (0,67-0,75). Данный алгоритм имеет, несомненно, практическое значение, но не позволяет составить однозначного представления о роли системы «ПОЛ-АОЗ» в патогенезе ИТЛ. Ярким подтверждением такой неопределенности является сложная нелинейная форма зависимости между потребностью в хирургическом лечении и показателями системы «ПОЛ-АОЗ» (рис.1 и 2).

Таким образом, вопрос об эффективности целенаправленного усиления или ограничения свободнорадикальных процессов остается открытым. В связи с этим в нашей работе была поставлена цель изучения влияния разнонаправленных модуляторов свободнорадикального (перекисного) окисления липидов на эффективность стандартной химиотерапии ИТЛ. В качестве модуляторов липидной пероксидации нами использовались зарегистрированные и разрешенные к медицинскому применению в РФ средства - аскорбиновая кислота и эмоксипин. Выбор аскорбиновой кислоты был продиктован тем обстоятельством, что она является распространенным компонентом системы индукции ПОЛ in vitro (Tamba M., O'Neil P., 1991; Martin A., Frei B., 1997; Chen K. et al., 2000; Naidu K.A, 2003) и дозозависимо увеличивает содержание липопероксидов при внутривенном введении человеку (Волчегорский И.А., Васильков А.Ю., 2000). Выбор эмоксипина был связан с тем, что это лекарственное средство обладает антиоксидантным действием как in vitro (Клебанов Г.И. и др., 2001), так и in vivo (Суслина З.А. др., 2000; Гусев Е.И., Скворцова В.И., 2001; Волчегорский И.А., Местер Н.В., 2007).

С целью верификации данных литературы о разнонаправленном влиянии аскорбиновой кислоты и эмоксипина на процессы ПОЛ была выполнена специальная серия модельных экспериментов по изучению влияния этих лекарственных средств на спонтанное переокисление липидов в гомогенатах головного мозга крыс in vitro. Выбор использованной модели был обусловлен особой чувствительностью ткани мозга к индукции ПОЛ в связи с большой потребностью этого органа в кислороде, относительно низким содержанием ферментных и неферментных антиоксидантов и высоким уровнем полинасыщенных липидов (Волчегорский И.А. и др., 2000, 2005; Sayre L.M. et al., 2005).

Полученные данные продемонстрировали, что аскорбиновая кислота оказывает заметное прооксидантное действие в диапазоне концентраций 10^-7-10^-4М. Важно подчеркнуть, что наибольшая выраженность прооксидантного эффекта аскорбиновой кислоты проявилась в диапазоне концентраций (рис.3, А), соответствующих содержанию витамина С в крови человека (Меньшикова Е.Б. и др., 2006).

Рисунок 1. Зависимость потребности в торакальном вмешательстве к 4 месяцам у больных ИТЛ от уровня диеновых коньюгатов изопропанольной фазы и б-ТК.

Рисунок 2. Зависимость потребности в торакальном вмешательстве к 4 месяцам у больных ИТЛ от уровня содержания кетодиенов и сопряженных триенов изопропанольной фазы и б-ТК.

Эмоксипин продемонстрировал однонаправленное антиоксидантное действие с наиболее выраженным подавлением генерации ТБК-реактивных веществ в диапазоне 10^-7-10^-6 М (рис.3,Б). Важно отметить, что указанный диапазон концентраций соответствует уровню важнейшего жирорастворимого антиоксиданта (б-ТК) в сыворотке крови (Волчегорский И.А., Харченкова Н.В., 2003; Меньшикова Е.Б. и др., 2006).