Роль стресса в патогенезе отравлений уксусной кислотой и коррекция возникающих альтернативных изменений (экспериментальное исследование)

Размещено на http://www.allbest.ru/

РОЛЬ СТРЕССА В ПАТОГЕНЕЗЕ ОТРАВЛЕНИЙ УКСУСНОЙ КИСЛОТОЙ И КОРРЕКЦИЯ ВОЗНИКАЮЩИХ АЛЬТЕРАТИВНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ (экспериментальное исследование)

14.00.16 - патологическая физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

ШАШКОВА ОЛЬГА НИКОЛАЕВНА

Иркутск 2009

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Иркутский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» и в «Учреждение Российской академии медицинских наук Научный центр проблем здоровья семьи и репродукции человека Сибирского отделения РАМН» (г. Иркутск).

Научные консультанты: академик РАМН Колесников Сергей Иванович доктор медицинских наук, профессор Изатулин Владимир Григорьевич

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Бодиенкова Галина Михайловна

доктор медицинских наук, профессор Корытов Леонид Иннокентьевич

доктор медицинских наук, профессор Бенеманский Виктор Викторович

Ведущая организация: ГОУ ВПО Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова Росздрава (г. Москва)

Защита состоится «___»_____________ 2009 г. в ____ часов на заседании диссертационного совета Д.001.038.02 при «Учреждение Российской академии медицинских наук Научный центр проблем здоровья семьи и репродукции человека Сибирского отделения РАМН» по адресу: г. Иркутск, ул. Тимирязева, 16.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке «Учреждение Российской академии медицинских наук Научный центр проблем здоровья семьи и репродукции человека Сибирского отделения РАМН».

Автореферат разослан «____»__________2009 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета,

доктор медицинских наук Шолохов Л.Ф.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Напряженность и социальные стрессы приводят к росту числа острых экзогенных отравлений, в том числе суицидальных попыток. Это ставит перед органами здравоохранения ряд сложных задач. Одна из них - это разработка новых эффективных методов лечения «химических болезней» [Алехнович А.В., 2008; Белова М.В., 2008; Каллойда Д.Ю., 2008; Лужников Е.А., 2008] с учетом психоневрологического статуса этой категории больных.

В литературе широко и подробно представлены метаболизм токсикантов, методы диагностики различных видов отравлений, их клиники и лечения, а также морфофункциональные изменения в основных внутренних органах [Лорченко Н.А., 1998; Ливанов Г.А. с соавт., 2003; Жданова Е.И. с соавт., 2005]

Анализ литературы показал, что в патогенезе острых экзогенных отравлений не учитывается такое важное звено, как стресс, имеющий самостоятельное значение в течении патологического процесса. Имеются лишь единичные исследования влияния патофизиологического фона, предшествующего отравлению, хотя известно, что суицидальным видам отравлений предшествует стрессовая психотравмирующая ситуация [Морозов Г.В., 1977; Снежневский А.В. с соавт., 1983; Бачериков Н.Е. с соавт., 1989; McClure G.M., 2001].

Острые отравления уксусной кислотой занимают первое место среди отравлений прижигающими ядами в России. Они характеризуются высокой летальностью (6-17 % от числа госпитализированных пациентов в различных регионах РФ), несмотря на интенсивное патогенетическое и симптоматическое лечение [Маркова И.В. с соавт., 1998; Лужников Е.А. с соавт., 2000].

Тяжесть отравления уксусной кислотой определяется степенью повреждения внутренних органов, что связано как со специфическим действием уксусной кислоты (гемоглобинурийный нефроз на фоне внутрисосудистого гемолиза эритроцитов), так и с экзотоксическим шоком. Наиболее существенные изменения наблюдаются в паренхиматозных органах (легкие, печень, почки), поражение которых в большей степени определяют клиническую картину и тяжесть заболевания в острый период отравления [Белькова Т.Ю., 2005; Seyffart G., 1997; Lecomte D., 1998].

Как установлено ранее многочисленными исследователями, стресс, несмотря на защитно-адаптационный характер, может оказывать выраженное неспецифическое повреждающее влияние на внутренние органы, являясь одним из звеньев патогенеза различных заболеваний [Малышев В.В. с соавт., 1981; Меерсон Ф.З. с соавт., 1983; Голуб И.Е., 1998; Васильева Л.С., 2005; Макарова О.А., 2003; Bennet W.M. et al., 1983; Bhatia V., 2005]. Однако в литературе роли стресса в патогенезе отравлений отводится достаточно скромное место, несмотря на то, что отравления вызывают особый вид стресса - токсический стресс [Голиков С.Н., 1986; Jollant F., 2005].

Анализ литературы показал, что влияние стресса на характер течения отравлений практически не изучено [Gross-Isseroff R., 1998; Kamali М., 2001; Mann J.J., 2002; Li X.Y., 2003]. Различная реактивность организма, связанная с разными стадиями стресс-реакции, на которые приходится отравление, продолжительность стресса перед отравлением, вероятно, должны влиять на клиническую картину.

Все это свидетельствует о том, что необходимы дальнейшие исследования, направленные на изучение влияния стресса при острых отравлениях уксусной кислотой.

Цель исследования состоит в изучении роли стресса в патогенезе отравления уксусной кислотой для патогенетического обоснования коррекции возникающих морфофункциональных изменений в некоторых паренхиматозных органах.

В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

1. Изучить влияние иммобилизационного и токсического стресса на морфофункциональные изменения в паренхиматозных органах животных (печень, почка, легкое, селезенка) при остром отравлении уксусной кислотой.

2. Изучить продолжительность стадий токсического стресса на фоне развития предшествующего иммобилизационного стресса и его влияние на процессы регенерации.

3. Провести сравнительную оценку проявлений токсического стресса на фоне предшествующего острого и хронического стресса.

4. Изучить уровень гормонов, продуктов ПОЛ, количества эозинофилов в крови животных при отравлении уксусной кислотой в разные стадии комбинированной токсическо-стрессорной альтерации.

5. Определить взаимосвязь между уровнем стрессорного воздействия и глубиной морфофункциональных изменений в исследуемых органах.

6. Выявить влияние комплекса препаратов (ГОМК, Мексидол, Нутролеин - ГМК) на течение отравлений в разные стадии стресс-реакции и степень их защитного действия на исследуемые органы и активацию стресс-лимитирующих систем организма.

7. Выявить влияние витаминно-минерального комплекса «Нутролеин» при хроническом стрессе и его влияние на морфологические изменения в органах.

Научная новизна исследования

Впервые доказано, что выраженность морфофункциональных изменений в паренхиматозных органах при отравлении уксусной кислотой зависит от типа стресс-реакции, сопутствующей отравлению.

Определено, что стадия тревоги стресс-реакции, предшествующая отравлению уксусной кислотой, способствует снижению повреждения паренхиматозных органов и более быстрой их регенерации в сравнении с отравлением без предварительного стрессирования и отравлением в стадию истощения стресс-реакции. Это выражается в меньшей объемной доле некротических и дистрофических изменений в печени, почках, меньшей лейкоцитарной инфильтрации паренхимы печени и легких, большей объемной доле мелких и двуядерных гепатоцитов при отравлении в стадию тревоги стресс-реакции в сравнении с отравлением без предварительного стрессирования и отравлением в стадию истощения стресс-реакции.

Новыми являются данные о том, что наиболее тяжелое поражение паренхиматозных органов при остром отравлении уксусной кислотой отмечается в том случае, если отравление совпадает со стадией истощения стресс-реакции, предшествующей отравлению. Это проявляется в большей объемной доле очагов некроза и дистрофии в печени и почках; больших нарушениях гистоструктуры исследуемых паренхиматозных органов, в сравнении с отравлением без предварительного стрессирования и отравлением в стадию тревоги стресс-реакции.

Определено, что применение с целью коррекции стрессорной и токсическо-стрессорной альтерации витаминно-минерального комплекса «Нутролеин» и комплекса препаратов (ГОМК, Мексидол, Нутролеин) в значительной мере снижает деструктивные и усиливает репаративные процессы в органах и тканях. Применение комплекса препаратов гепатопротекторного антиоксидантного и стресс-лимитирующего действия позволяет не только предотвратить переход стадии резистентности в стадию истощения стресс-реакции, но и повысить компенсаторные возможности организма. токсический стресс регенерация морфофункциональный

Теоретическая и практическая значимость работы определяется тем, что при отравлениях уксусной кислотой выявлена патогенетическая роль в повреждении паренхиматозных органов стрессорной альтерации в различные стадии стресс-реакции, предшествовавшие отравлению. Показано, что при остром отравлении уксусной кислотой отмечаются не только поражения тех паренхиматозных органов, на которые она оказывает непосредственное действие, но и опосредованная стресс-индуцированная альтерация органов. Полученные теоретические сведения о патогенезе острых отравлений уксусной кислотой могут использоваться в лекционных курсах «Патологическая физиология», «Патологическая анатомия» и «Клиническая токсикология». Новые сведения о патогенезе острых отравлений имеют значение для практической токсикологии и открывают перспективы для дальнейшего изучения проблемы влияния стрессового состояния пациентов на выраженность повреждения внутренних органов и тяжесть отравления. Полученные данные морфологических изменений в паренхиматозных органах вследствие стрессорной альтерации и способы их коррекции также могут быть использованы специалистами для лечения большой группы психосоматических заболеваний, «болезней стресса».

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Отравление уксусной кислотой сопровождается токсическим стрессом и комбинированной токсическо-стрессорной альтерацией органов.

2. Морфофункциональное состояние паренхиматозных органов при острых отравлениях уксусной кислотой зависит от стадии стресс-реакции, предшествующей отравлению.

3. Наиболее выраженное повреждение паренхиматозных органов происходит при остром отравлении уксусной кислотой в стадию истощения стресс-реакции.

4. Витаминно-минеральный комплекс «Нутролеин» снижает альтеративные процессы в органах, обладает выраженным цитопротекторным и антиоксидантным действием.

5. Применение препаратов ГМК с целью комплексной направленной активации стресс-лимитирующих систем в значительной мере снижает деструктивные и усиливает репаративные процессы в органах и тканях при отравлении уксусной кислотой.

Апробация работы

По результатам исследований опубликовано 45 работ, в том числе 9 - в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ, и сделаны доклады на: научно-практической конференции «Скорая медицинская помощь. Догоспитальный и госпитальный этапы. Проблемы реформирования и их решение» (г. Екатеринбург, 2003); научно-практической конференции «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины» (г. Санкт-Петербург, 2004); международной научно-практической конференции «Актуальные аспекты экологической сравнительно-видовой, возрастной и экспериментальной морфологии» (г. Улан-Удэ, 2004); на 9-м съезде Федерации анестезиологов и реаниматологов (г. Иркутск, 2004); на 3-м съезде токсикологов России (Москва, 2008); на международной дистанционной научно-практической конференции, посвященной памяти В.Н. Парина (Пермь, 2008); на конференции «Традиции и современность», (Иркутск, 2008); на XIII Международной научной конференции «Здоровье семьи - ХХI век» (г. Хургада, Египет, 2009).

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 364 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, главы материалов и методов исследования, 3-х глав результатов собственных исследований, главы с обсуждением полученных результатов исследования, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы, включающего 392 источника (из них отечественных - 256, иностранных - 136), приложения. Работа проиллюстрирована 40 таблицами и 145 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперимент выполнен в осенне-зимний период на 480 беспородных белых крысах-самцах массой 180-220 г. Животные содержались в условиях вивария. Подопытные животные были разделены на следующие группы соответственно сериям эксперимента:

1-я группа (n = 20) - интактные животные;

2-я группа (n = 60) - модель острого стресса (стадия тревоги);

3-я группа (n = 60) - модель хронического стресса (стадия истощения);

4-я группа (n = 60) - отравление уксусной кислотой без предшествующего стрессирования;

5-я группа (n = 60) - отравление уксусной кислотой в стадию тревоги стресс-реакции;

6-я группа (n = 60) - отравление уксусной кислотой в стадию истощения стресс-реакции;

7-я группа (n = 40) - модель хронического стресса на фоне воздействия Нутролеина;

8-я группа (n = 60) - отравление уксусной кислотой в стадию тревоги стресс-реакции с последующим лечением комплексом препаратов (ГОМК, Мексидол, Нутролеин);

9-я группа (n = 60) - отравление уксусной кислотой в стадию истощения стресс-реакции с последующим лечением (ГОМК, Мексидол, Нутролеин).

Эксперименты проводились в соответствии с Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных (приказ № 755 МЗ СССР, 1977).

Для получения стадии тревоги стресс-реакции проводили 6-часовую иммобилизацию ненаркотизированных крыс в горизонтальном положении на спине. Для получения стадии истощения стресс-реакции на протяжении 14 суток проводили ежедневную 6-часовую иммобилизацию ненаркотизированных крыс в горизонтальном положении на спине по методике H.S. Kim с соавт. (2006). Стрессорное воздействие проводили в одно и то же время суток с 9 до 15 часов. Животных выводили из эксперимента на 1-е, 3-е, 5-е, 7-е, 10-е и 14-е сутки после токсического или стрессорного воздействия.

В качестве яда прижигающего действия использовался 30% водный раствор уксусной кислоты в количестве 0,5 мл, что в пересчете на чистое вещество составляет менее LD25 для крыс, вызывая отравление средней степени тяжести [Лужников Е.А., 2000; O'Neil M.J., 2001].

Гистологические, гистохимические и морфометрические
методы исследования

Забор материала осуществляли на 1-е, 3-е, 5-е, 7-е, 10-е и 14-е сутки экспериментов. Фрагменты органов фиксировали в 10% формалине с последующей проводкой по спиртам и заливкой в парафин. Для световой микроскопии изготавливали серийные срезы толщиной 8 мкм. Для изучения соединительнотканной стромы паренхиматозных органов микропрепараты окрашивали пикрофуксином по методу Ван-Гизона. Ретикулярные волокна окрашивали по Масону или импрегнацией азотнокислым серебром по методу Бильшовского в модификации Юриной. Количество макрофагов в селезенке определяли с помощью активности кислой фосфатазы по методу Гомори. Для выявления гликогена использовали ШИК-реакцию по Шабадашу (с контролем амилазой). Для окраски гемосидерина в селезенке применяли метод Тимана и Шмельцера [Меркулов Г.А., 1969] и окраску по Перлсу.

Световую микроскопию и морфометрические методы исследования срезов проводили при увеличении в 200 раз, используя сетку Автандилова и окуляромикрометр. Измерения проводили не менее чем в 20 полях зрения [Автандилов Г.Г., 1990].

В легких определяли объемную долю альвеол, межальвеолярных перегородок, внутриальвеолярного экссудата, кровеносных сосудов, количество коллагеновых и ретикулярных волокон, интенсивность лейкоцитарной инфильтрации.

В паренхиме печени определяли объемную долю клеток в состоянии баллонной дистрофии, объемную долю некрозов, сосудов, количество гепатоцитов с различными размерами и двуядерных гепатоцитов, коллагеновых и ретикулярных волокон, интенсивность лейкоцитарной инфильтрации. Количественное содержание гликогена оценивали по четырехбальной шкале.

В селезенке определяли объемную долю красной и белой пульпы, содержание эритроцитов и гемосидерина, макрофагов в красной пульпе, количество коллагеновых и ретикулярных волокон в белой пульпе.

В паренхиме почки определяли объемную долю и диаметр клубочков, ширину просвета капсулы, объемную долю нефроцитов в состоянии вакуольной дистрофии и некрозов, канальцев и сосудов коркового вещества почки, количество ретикулярных и коллагеновых волокон на границе коркового и мозгового вещества, интенсивность лейкоцитарной инфильтрации.

Клинические и биохимические методы исследования

Образцы крови для изучения динамики содержания эозинофилов при стрессе брали через 24 и 39 часов и на 3-е, 5-е, 7-е, 10-е и 14-е сутки после начала иммобилизации или введения токсического вещества. Подсчет эозинофилов на 1 мкл крови [Меньшиков В.В. с соавт., 1987] проводили в камере Горяева после окраски раствором Хинкельмана в течение 25-30 мин.

Тяжесть отравления оценивали по степени внутрисосудистого гемолиза гемоглобинцианидным методом с применением ацетоциангидрина. Концентрацию свободного гемоглобина выражали в граммах на 1 литр плазмы крови [Меньшиков В.В. с соавт., 1987].

Определяли содержание кортикостерона в крови по методу О.К. Ботвиньева и Ю.Е. Вельтищева в модификации В.В. Малышева с соавт. (1985). Содержание пролактина в крови определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа с помощью стандартного набора «ИФА-пролактин-01». Концентрацию кортикостерона и пролактина выражали в нмолях на 1 л крови.

Содержание в сыворотке крови и тканях гидроперекисей липидов (ГПЛ), определяли по В.Б. Гаврилову и М.И. Мишкорудной (1983). Содержание малонового диальдегида (МДА) - по методу И.Д. Стальной и Т.Г. Гаришвили (1977) с помощью тиобарбитуровой кислоты. Концентрацию ГПЛ и МДА выражали в нмоль на 1 мл крови или в нмоль на 1 г ткани, учитывая коэффициент мольной экстинкции. К = 2,2 Ч 10?⁵ М?¹ см?¹. Полученные числовые данные обработаны стандартными статистическими параметрическими методами с помощью t-критерия Стьюдента в Statistica 6.0. Результаты исследований представлены в виде рисунков, таблиц, диаграмм в тексте диссертации и приложении.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты исследований показали, что изменения гистоструктуры органов более выражены в стадию истощения стресс-реакции.

Так, во 2-й серии эксперимента (острый стресс) морфологическое исследование печени выявило, что в результате стрессорной альтерации к 3-м суткам наблюдения объемная доля клеток в состоянии дистрофии увеличивается в 12,56 раза, а в 3-й серии (хронический стресс) их доля превышает показатели контрольной группы в 13,03 раза. Количество гепатоцитов в состоянии некроза, превышает показатель 2-й группы в 1,51 раза.

Стабилизация процессов разрушения и проявление признаков репаративных процессов во 2-й серии начинается с 5-х суток, а в последующие сроки, с 7-х по 14-е сутки, наступает фаза резистентности с восстановлением структуры органа. Но к окончанию эксперимента еще остается сниженным количество гликогена, а объемная доля гепатоцитов в состоянии дистрофии превышает контрольные значения. В 3-й серии, с 5-х по 14-е сутки происходит резкое увеличение (в 14-15 раз) объемной доли гепатоцитов в состоянии вакуольной и баллонной дистрофии, а аналогичные значения 2-й серии меньше (в 1,36-7 раз). Объемная доля некрозов в 3-й серии постоянно увеличивается, достигая к 14-м суткам 9,20 ± 0,12 %, тогда как во 2-й серии к 7-м суткам некротизированные гепатоциты уже не выявляются (рис. 1).



Рис. 1 Динамика изменений объемной доли дистрофии и некрозов гепатоцитов у животных 2-й и 3-й серии эксперимента

Значительным изменениям подвергается и популяция гепатоцитов. Во 2-й серии до 3-х суток происходит увеличение числа мелких и больших гепатоцитов при снижении количества средних как в центре, так и на периферии долек. Снижается в первые сутки и объемная доля двуядерных клеток, но с 3-х суток их показатель повышается. В последующие сроки, начиная с 5-х суток, происходит увеличение гепатоцитов средних размеров и продолжает нарастать число двуядерных клеток при быстром уменьшении доли клеток мелких и больших размеров. К окончанию сроков исследования остается достоверно увеличенной лишь доля мелких гепатоцитов, популяция других клеток приближается к показателям нормы. В 3-й серии к 14-м суткам объемная доля гепатоцитов средних размеров снижена, а больших - превышает контроль. Клетки диаметром < 9 мкм превышают показатели контрольных значений в 10,47 и 32,96 раза соответственно центру и периферии долек. Объемная доля двуядерных гепатоцитов уменьшается в 2,89 раза (рис. 2).



Рис. 2 Динамика изменения объемной доли двуядерных гепатоцитов печеночных долей у животных 2-й и 3-й серии

Полнокровие органа и лейкоцитарная инфильтрация в 3-й серии эксперимента превышает показатели контрольной группы в 1,92 и 2,83 раза соответственно, тогда как во 2-й серии аналогичные значения достоверно не отличаются от нормы.

Количество гликогена к окончанию сроков исследования в 3-й группе в 8,27 раза ниже нормы и в 7,43 раза ниже показателя 2-й серии. Также уменьшается и объемная доля коллагеновых волокон. Их показатель ниже контроля в 2,78 раза, а 2-й серии - в 2,37 раза.

Значительные различия изменения гистоструктуры почек также выявлены при сравнении результатов 2-й и 3-й серий эксперимента. У животных второй серии до 3-х суток включительно отмечается увеличение объемной доли клубочков, их диаметра и просвета капсулы. С 1-х по 3-и сутки снижается объемная доля клубочков с признаками некротических поражений. В 3-й серии увеличение сравниваемых параметров продолжается до 5-х суток, к 7-м суткам отмечается незначительное снижение этих показателей, а к 10-м суткам вновь происходит их повышение, хотя к 14-м суткам снижается только объемная доля клубочков. До 7-х суток в 3-й серии эксперимента также отмечается увеличение объемной доли клубочков с признаками некротических поражений, со снижением их количества к 10-м суткам и последующим увеличением до 3,37 ± 0,05 % к 14-м суткам эксперимента (рис. 3).

Рис. 3 Динамика изменений объемной доли некрозов в клубочках почки у животных 2-й и 3-й серии

К окончанию эксперимента у животных 2-й серии выявляются единичные клубочки с признаками фиброза, тогда как в 3-й серии объемная доля склерозированных клубочков составляет уже 1,68 ± 0,04 %.

В канальцах нефронов в 3-й серии эксперимента по 7-е сутки идет снижение их объемной доли до 9,24 ± 0,08 % от нормы, при этом до 5-х суток нарастает и количество нефроцитов в стадии дистрофии, превышая показатель контрольных значений в 27,53 раза, а значение соответствующего показателя 2-й серии - в 1,8 раза. К 10-14-м суткам объемная доля канальцев относительно увеличивается, но остается ниже, чем во 2-й серии, на 9,19 ± 0,25%, чем в контроле - в 1,07 раза. На 7-е сутки отмечается небольшое снижение, а с 10-х по 14-е сутки - достоверное повышение объемной доли вакуольной дистрофии нефроцитов до 36,05 ± 0,29 %, что в 33,69 раза выше нормы, и в 9,87 раз больше показателя 2-й серии. Количество нефроцитов в состоянии некроза во 2-й серии не определяется с 7-х суток, а в 3-й серии их объемная доля к 14-м суткам составляет 6,92 ± 0,29 % (рис. 4)

Рис. 4 Динамика изменений канальцевого нефротелия с признаками дистрофии и некроза в почках животных 2-й и 3-й серии

В гомогенатах почек 3-й серии к окончанию сроков эксперимента уровень ГПЛ в 1,99 раза, а уровень МДА - в 2,91 раза превышает показатели контроля, а во 2-й серии эти значения не отличаются от контроля.

В легких после первой иммобилизации показатели 2-й и 3-й серий достоверно не отличаются. Во второй серии к окончанию эксперимента лишь лейкоцитарная инфильтрация превышает показатели нормы на 36,62 ± 0,79 %. В 3-й серии при продолжающемся ежедневном стрессировании животных нарастает альтерация органа, и к окончанию сроков исследования объемная доля альвеол остается ниже контроля на 19,32 ± 0,72 %, а доля внутриальвеолярного экссудата превышает норму в 17,5 раза.

В гомогенатах легкого 2-й серии эксперимента к 3-м суткам уровень ГПЛ в 1,98 раза, а уровень МДА - в 1,13 раза превышает показатели контроля. В последующие сроки их значения достоверно не отличаются от нормы.

В 3-й серии содержание продуктов ПОЛ умеренно снижается на 7-е сутки, а в последующие сроки опять происходит повышение их содержания в гомогенатах легкого к 14-м суткам.

Объемная доля белой пульпы селезенки у животных 2-й серии в первые сутки снижается, а с третьих суток отмечается повышение данного показателя. К 10-м суткам эксперимента объемная доля белой пульпы приближается к показателям нормы. У животных 3-й серии этот показатель снижается с 1-х по 14-е сутки, и к окончанию сроков исследования он в 1,28 раза ниже контрольных, и в 1,29 раза ниже показателя 2-й серии (рис. 5).

Показатель объемной доли красной пульпы во 2-й серии снижается с 3-х суток, но к 10-м суткам не отличается от контроля. В 3-й серии повышается доля красной пульпы с 1-х по 3-и сутки, к 5-м суткам снижается, но с 7-х суток опять выявлено ее повышение. К 14-м суткам доля красной пульпы на 15,48 ± 0,57 % выше контрольных значений, и в 1,16 раза выше показателя 2-й серии.

Изменения в красной пульпе обусловлены повышением объемной доли эритроцитов, количества гемосидерина и числа макрофагов. Так, во 2-й серии эксперимента количество эритроцитов повышается до 5-х суток, а с 7-х по 14-е сутки этот показатель достоверно не отличается от показателей нормы. Объемная доля гемосидерина также увеличивается до 3-х суток с последующим снижением показателя и нормализацией содержания гемосидерина к 14-м суткам эксперимента. Доля макрофагов увеличивается к 7-м суткам эксперимента с последующим снижением их количества, начиная с 10-х суток, но к окончанию сроков исследования этот показатель все еще превышает аналогичное значение интактных животных в 1,21 раза.



Рис. 5 Динамика изменений объемной доли красной и белой пульпы селезенки у животных 2-й и 3-й серии

Также происходит и постоянное увеличение объемной доли гемосидерина. К окончанию сроков исследования этот показатель превышает норму в 2,99 раза, а аналогичные значения 2-й серии - в 2,46 раза.

Во 2-й серии эксперимента с 5-х суток отмечается снижение содержания ГПЛ, а к 10-м суткам этот показатель достоверно не отличается от нормы. Также, с 5-х суток происходит уменьшение МДА, но к 7-м суткам его количество нормализуется. В 3-й серии после небольшого снижения ГПЛ с 7-х суток опять отмечается увеличение и ГПЛ, и МДА, и к концу сроков исследования эти показатели превышают норму и показатели 2-й серии.

В крови животных 3-й и 7-й серии в 1-е сутки исследования также выявлено повышение содержания продуктов ПОЛ. К 3-м суткам у животных 7-й серии отмечается уменьшение количества как ГПЛ, так и МДА, а в 3-й серии увеличение их количества происходит по 5-е сутки эксперимента, к 7-м суткам выявлено снижение показателя МДА, но с 10-х по 14-е сутки вновь выявлено повышение их содержания в крови. Количество ГПЛ в 3-й серии уменьшается с 7-х по 10-е сутки, а к 14-м суткам опять возрастает, превышая показатель контрольной группы в 1,76 раза. В 7-й серии выявлено повышение продуктов ПОЛ на 7-е сутки эксперимента.

Сравнительный анализ содержания гормонов и эозинофилов в крови экспериментальных животных 2-й и 3-й серии эксперимента показал, что к 10-м суткам стрессорного воздействия животные 3-й серии находятся в стадии истощения стресс-реакции, продолжающейся до конца сроков исследования. Отмечается дальнейшее снижение уровня кортикостерона, хотя количество пролактина, повышающееся с 1-х по 5-е сутки, к 10-м суткам вновь снижается, достигая исходных значений. Продолжительная эозинопения (с 5-х по 14-е сутки эксперимента) также указывает на наступление стадии истощения стресс-реакции у животных 3-й серии.

Аналогичные показатели у животных 2-й серии, подвергавшихся острому стрессу, подтверждают наличие стадии тревоги стресс-реакции в первые сутки после иммобилизации, переходящей в стадию резистентности к 3-м суткам эксперимента (рис. 6).

Размещено на http://www.allbest.ru/

Рис. 6 Динамика изменений уровня гормонов и эозинофилов в крови животных 2-й и 3-й серии

Динамика повреждений микроструктуры исследуемых органов в сочетании с изменением уровней гормонов и эозинофилов в крови животных показывает, что данные модели можно использовать для оценки степени поражения органов к моменту отравления.

Случайные отравления уксусной кислотой составляют от 2 до 3,3 % в структуре данных отравлений (по данным Иркутского токсикологического центра) и могут соответствовать 4-й серии нашего эксперимента.

Зависимость морфофункциональных изменений в исследуемых органах, содержание гормонов, эозинофилов, продуктов ПОЛ при отравлении уксусной кислотой на различных моделях отравлений представлена в 4-й, 5-й и 6-й сериях эксперимента.

Сравнительная оценка гистологической структуры печени показала, что в первые сутки отравления в 4-й и 5-й сериях достоверных отличий признаков поражения печеночной паренхимы не определяется, тогда как в 6-й серии количество гепатоцитов в стадии дистрофии превышает аналогичный показатель этих серий в 1,05 и 1,03 раза соответственно.

К 3-м суткам у животных 4-й серии отмечается повышение количества клеток с дистрофическими изменениями на 2,55 ± 0,08 %, а в 6-й серии - на 2,18 ± 0,05 %, но фактически не изменяется количество некротизированных гепатоцитов, в отличие от 4-й серии, где происходит снижение их числа в 1,2 раза. В 5-й серии эксперимента к 3-м суткам исследования оба показателя снижаются на 3,75 ± 0,19 и 33,62 ± 0,27 % соответственно. Количество гепатоцитов в стадии некроза в 6-й серии превышает показатели 4-й и 5-й серии в 2,04 и 2,36 раза соответственно. В последующие сроки исследования у животных сравниваемых серий отмечается снижение числа гепатоцитов как в состоянии дистрофии, так и в состоянии некрозов. Но к 14-м суткам их количество также превышает в 6-й серии данные показатели 4-5-й серий (рис. 7).



Рис. 7 Динамика изменений объемной доли дистрофии гепатоцитов и некрозов печеночной паренхимы у животных 4-й, 5-й, 6-й серий

Полнокровие органа и лейкоцитарная инфильтрация печеночной паренхимы наиболее выражена также в 6-й серии эксперимента. В первые сутки эти показатели в 1,36 и 1,44 раза и 1,86 и 1,57 раза больше, чем в 4-й и 5-й сериях соответственно. К окончанию сроков исследования у животных 6-й серии эксперимента объемная доля сосудов по-прежнему превышает аналогичные значения 4-й и 5-й серии на 3,95 ± 0,06 и 42,98 ± 0,21 %, а лейкоцитарная инфильтрация - в 1,86 и 2,45 раза соответственно.

Интенсивность снижения количества гликогена в гепатоцитах также характерна для животных 6-й серии. Так, к окончанию сроков исследования этот показатель достоверно ниже в 2,35 раза по отношению к ГХИ 4-й серии, и в 1,1 раза - по отношению к ГХИ 5-й серии.

Динамика изменения продуктов ПОЛ в гомогенатах печени животных 4-й, 5-й и 6-й серий подтверждает степень выраженности гистологических изменений в данных группах относительно сроков исследования.

Поражение почечной паренхимы при отравлении уксусной кислотой в первые сутки отравления определяется картиной гемоглобинурийного нефроза. Наличие в просвете канальцев и капсулы клубочков большого количества гемоглобина приводит к увеличению объемной доли клубочков с увеличением их диаметра, уменьшается объемная доля канальцев, нарастает количество нефроцитов в состоянии вакуольной дистрофии и доля некрозов канальцевого нефротелия.

При одинаковой дозе токсического вещества уже в первые сутки отравления у животных 4-й и 6-й серии объемная доля клубочков выше на 4,16 ± 0,02 %, чем в 5-й серии. Количество клубочков с признаками некротических поражений в 6-й серии эксперимента выше, чем в 4-й серии, почти в 2 раза, в 5-й серии - в 2,46 раза. Количество склерозированных клубочков к окончанию сроков исследования в 6 серии составляет 11,32 ± 1,27 %, что выше данного показателя 4-й и 5-й серии в 1,83 и 2,62 раза соответственно (рис. 8).

Рис. 8 Динамика изменений объемной доли некрозов в клубочках почки у животных 4-й, 5-й и 6-й серии

Доля нефроцитов в состоянии вакуольной дистрофии у животных 4-й и 5-й серии, соответственно, в 1,46 и 1,41 раза, а некроз канальцевого нефротелия - в 2,3 и 1,86 раза меньше, чем в 6-й серии (рис. 9). К окончанию сроков исследования наибольшие изменения паренхимы и стромы органа выявлены у животных 6-й серии.



Рис. 9 Динамика изменений канальцевого нефротелия с признаками дистрофии и некроза в почках животных 4-й, 5-й и 6-й серии

Объемная доля сосудов в 4-й серии снижается с 5-х суток эксперимента, а в 5-й серии - начиная с 7-х суток, но к 14-м суткам не отличается от контроля. В 6-й серии объемная доля сосудов выше сравниваемых серий.

В легких у животных сравниваемых серий снижение объемной доли альвеол происходит до 3-х суток включительно, но в 6-й серии этот показатель ниже 4-й и 5-й серий. В последующие сроки происходит увеличение объемной доли альвеол, и к окончанию эксперимента этот показатель у животных 4-й и 5-й серии не отличается от контроля. В 6-й серии доля альвеол ниже нормы.

Доля внутриальвеолярного экссудата к 3-м суткам эксперимента у животных 6-й серии в 43,2 раза превышает контроль, а показатели 4-й и 5-й серии - в 1,43 и 1,57 раза. Начиная с 5-х суток, отмечается уменьшение объемной доли экссудата во всех сериях. К 14-м суткам у животных 6-й серии данный показатель превышают аналогичные в 4-й и 5-й сериях в 2,24 и 1,74 раза соответственно, а показатели контроля - в 6 раз (рис. 10).



Рис. 10 Динамика изменений объемной доли экссудата и альвеол в ткани легкого у животных 4-й, 5-й и 6-й серии

Увеличение объемной доли сосудов во всех сравниваемых сериях эксперимента продолжается до 3-х суток эксперимента и наиболее выражено в 6-й серии.

Лейкоцитарная инфильтрация у животных 6-й серии нарастает до 3-х суток включительно, превышая норму в 2,42 раза, а показатели 4-й и 5-й серии - в 1,18 и 1,20 раза соответственно. В последующие сроки происходит уменьшение лейкоцитарной инфильтрации во всех сериях, и только в 6-й и 4-й сериях данный показатель остается выше контрольных значений.

Повышение продуктов ПОЛ во всех сериях отмечается по 3-и сутки включительно с последующим снижением к 14-м суткам. В 6-й серии эксперимента к окончанию сроков исследования показатели ГПЛ и МДА выше аналогичных значений 4-й и 5-й серий.

Структура селезенки у животных 4-й, 5-й и 6-й серий также имеет особенности. У животных 4-й серии на 1-е сутки после отравления выявлено уменьшение объемной доли белой пульпы всего на 0,39 ± 0,06 %, тогда как в 5-й и 6-й сериях - на 17,08 ± 0,26 и 40,51 ± 0,19 % соответственно. На 5-е сутки отмечается повышение объемной доли белой пульпы у животных 4-й и 5-й серии, а значимое увеличение в 6-й серии - на 7-е сутки. К окончанию сроков исследования в 4-6-й сериях данный показатель остается ниже контрольных значений

В селезенках 6-й серии, в отличие от сравниваемых серий, уже в первые сутки выявляются очаги кровоизлияний из разрушенных сосудов, снижающиеся лишь к 5-м суткам исследования. Увеличение количества лимфоцитов в зонах фолликулов выявлено лишь к 10-м суткам во всех сравниваемых сериях, но к окончанию сроков эксперимента сохраняется стойкое значительное угнетение лимфопоэза только в 4-й и 6-й сериях.

Увеличение объемной доли красной пульпы, обусловленное гемолизом эритроцитов и полнокровием органа, отмечается во всех сравниваемых сериях по 3-и сутки включительно. В 6-й серии эксперимента данный показатель выше, чем в 5-й серии, на 8,68 ± 0,16 %, а в 4-й серии - на 11,72 ± 1,21 %. В последующие сроки исследования выявлено снижение объемной доли красной пульпы, но к 14-м суткам данный показатель у животных 6-й серии в 1,08 раза выше, чем в контрольной группе, в 1,06 раза - чем в 5-й и в 1,05 раза - чем в 4-й серии.

Объемная доля гемосидерина во всех сравниваемых сериях повышается с 1-х по 3-и сутки включительно. С 5-х суток выявлено снижение его количества, а к 14-м суткам содержание гемосидерина у животных 4-6-й серий значительно превышает контроль.

В гомогенатах селезенки сравниваемых серий эксперимента отмечается снижение содержания продуктов ПОЛ с 3-х суток - в 4-5-й сериях, а в 6-й серии - с 5-х суток исследования, но к 14-м суткам нормализуется.

В крови животных во всех сравниваемых сериях уменьшение уровня ГПЛ выявлено с 3-х суток эксперимента. К 14-м суткам исследования содержание в крови ГПЛ в 4-6-й сериях превышает контрольные показатели. Уровень МДА также снижается с 3-х суток исследования во всех сериях, но к 14-м суткам в 4-й и 5-й серии МДА достигает нормы, а в 6-й серии остается выше контроля.

Анализ содержания гормонов и эозинофилов в крови животных 4-й, 5-й, 6-й серий показал, что в 4-й серии уровень кортикостерона снижен к 3-м суткам, а к 7-м суткам эксперимента отмечается нормализация его количества. Снижение содержания пролактина отмечается с 5-х суток исследования, но к 14-м суткам этот показатель все еще превышает контроль. Количество эозинофилов в крови животных имеет два пика повышения: 1-й пик - через 48 ч, 2-й - на 5-е сутки с момента отравления.

Рис. 11 Динамика изменений уровня гормонов и эозинофилов в крови животных 4-й, 5-й и 6-й серии

В последующие сроки исследования выявлено умеренное снижение их количества.

В 5-й серии содержание кортикостерона на 3-5-е сутки эксперимента выше значений 4-й серии. Нормализация содержания кортикостерона в крови отмечается с 10-х суток исследования. Уровень пролактина в крови животных 5-й серии снижается с 3-х суток эксперимента, а к окончанию сроков исследования этот показатель выше, чем в контроле. Пик эозинофилии отмечается на 3-и сутки исследования с последующим резким снижением количества клеток с 5-х по 7-е сутки эксперимента. На 10-е сутки отмечается значительное увеличение содержания эозинофилов в крови, что можно рассматривать как 2-й пик эозинофилии, а к 14-м суткам количество этих клеток снижается до уровня контрольной группы (рис. 11).

С целью ограничения повреждений органов вследствие стрессорного воздействия нами был использован витаминно-минеральный комплекс Нутролеин (7-я серия), который по содержанию антиоксидантов можно отнести к парафармацевтикам.

Применение Нутролеина уже в первые сутки приводило к снижению объемной доли гепатоцитов в состоянии дистрофии и некроза. К 5-м суткам у животных 3-й серии происходит нарастание объемной доли гепатоцитов в состоянии дистрофии и некроза, в то время как в 7-й серии отмечается их снижение. На 7-е сутки и в 3-й и 7-й сериях наблюдается уменьшение сравниваемых величин, но в последующие сроки у животных 3-й серии (в отличие от 7-й) вновь нарастают деструктивные процессы, что выражается в увеличении объемной доли гепатоцитов в состоянии дистрофии и некроза (рис. 12).

Рис. 12 Динамика изменений объемной доли дистрофии гепатоцитов и некрозов печеночной паренхимы у животных 3-й и 7-й серии эксперимента

Объемная доля сосудов у животных 7-й серии эксперимента повышается до 5-х суток исследования с последующим снижением данного показателя, тогда как в 3-й серии отмечается постоянное увеличение данного параметра.

Аналогичные изменения происходят по уровню лейкоцитарной инфильтрации органа. Также происходит снижение этого параметра у животных 7-й серии с 7-х суток эксперимента, и к окончанию сроков исследования лейкоцитарная инфильтрация в 2,16 раз меньше, чем в 3-й серии.

Наиболее значимые изменения при применении Нутролеина отмечаются в показателях количества гликогена. Так, в 7-й серии уже с 3-х суток выявлено повышение его количества, а в 3-й серии этот показатель продолжает снижаться до конца эксперимента (в 8 раз ниже контрольных значений). В 7-й серии к окончанию исследования количество гликогена ниже нормы, но выше показателя 3-й серии в 6,2 раза.

Уменьшение объемов некрозов и степени выраженности застойных явлений в печени у животных 7-й серии приводит к наименьшим, по сравнению с 3-й серией, изменениям структуры печеночных балок.

Количество ГПЛ и МДА нарастает с 1-х по 14-е сутки в 3-й серии, тогда как у животных 7-й серии уже с 3-х суток выявлено снижение данных показателей. К окончанию сроков эксперимента уровень ГПЛ в 1,26 раза, а МДА - в 1,44 раза ниже, чем в 3-й серии, но эти показатели остаются выше, чем в контроле.

У животных 7-й серии уменьшается объемная доля нефроцитов канальцев в стадии вакуольной дистрофии. К 14-м суткам эксперимента данные показатели по отношению к значениям 3-й серии значительно снижаются (рис. 13).



Рис. 13 Динамика изменений канальцевого нефротелия с признаками дистрофии и некроза в почках животных 3-й и 7-й серии

Следствием дистрофических изменений в клубочках почек является выявление некротизированных клубочков почек. Объемная доля некрозов у животных 7-й серии снижается к 5-м суткам эксперимента и составляет 1,66 ± 0,06 %, что ниже, чем в 3-й серии, в 1,69 раза. В последующие сроки происходит быстрое снижение данного показателя в 7-й серии, а у животных 3-й серии до окончания сроков исследования объемная доля некрозов клубочков увеличивается и составляет 3,37 ± 0,05 %, что выше, чем в сравниваемой серии, в 12,96 раз. Соответственно уменьшению доли некрозов снижается и количество склерозированных клубочков. Так, к окончанию эксперимента у животных 3-й серии их количество составляет 1,85 ± 0,03 %, а в 7-й серии выявляются лишь единичные склерозированные клубочки.

Увеличение объемной доли кровеносных сосудов в 3-й серии эксперимента отмечается с 1-х по 14-е сутки и сопровождается дистрофическими изменениями эндотелия сосудов и его десквамацией. В просветах сосудов выявляются тромбы. При применении Нутролеина во время иммобилизационного стресса у животных 7-й серии увеличение полнокровия органа возрастает до 3-х суток включительно. Полнокровие клубочковых капилляров не сопровождается признаками некроза эндотелия, в сосудах перетубулярной сети и междольковых сосудах тромбов нет. В последующие сроки исследования выявляется снижение полнокровия органа, и к 14-м суткам данный показатель достоверно не отличается от контрольных значений, тогда как в 3-й серии превышает норму в 1,72 раза.

Поражение почечной паренхимы сопровождается повышением продуктов ПОЛ в гомогенатах почек. Так, в 3-й серии эксперимента к окончанию сроков исследования содержание ГПЛ превышает норму в 1,99 раза, а в 7-й серии - в 1,76 раза, количество МДА - в 2,91 и 2,46 раза соответственно.

Сравнивая динамику изменения гистологической структуры легкого у животных 3-й и 7-й серии эксперимента, мы выявили схожие закономерности. Так, к 3-м суткам исследования у животных 7-й серии отмечается увеличение объемной доли альвеол, коллагеновых и ретикулярных волокон, снижается объемная доля экссудата, доля микрососудов, толщина межальвеолярных перегородок, уменьшается лейкоцитарная инфильтрация. У животных 3-й серии выявляется нарастание деструктивных процессов до 7-х суток включительно. К 10-м суткам отмечается относительная стабилизация деструктивных процессов, но к окончанию сроков исследования вновь усиливаются процессы разрушения паренхимы органа. У животных 7-й серии эксперимента к 14-м суткам объемная доля альвеол в 1,14 раз выше, чем в 3-й серии, а доля внутриальвеолярного экссудата в 3,27 раза ниже показателя сравниваемой серии.

В легких животных 7-й серии объемная доля микрососудов и лейкоцитарная инфильтрация, соответственно, в 1,36 и 1,48 раза ниже показателей 3-й серии.

К окончанию сроков исследования у животных 3-й серии объемная доля коллагеновых и ретикулярных волокон ниже значений контроля. В 7-й серии к 14-м суткам аналогичные показатели достоверно не отличаются от нормы.

Сравнивая динамику изменения содержания продуктов ПОЛ в гомогенатах легкого, мы выявили, что количество ГПЛ у животных 3-й серии нарастает и к 14-м суткам превышает норму в 2,38 и 1,55 раза соответственно, чем в 7-й серии, а уровень МДА - в 1,69 и 1,36 раза соответственно.

В селезенке уже на 1-е сутки исследования отмечаются достоверные улучшения показателей у животных 7-й серии эксперимента. Так, объемная доля белой пульпы в 1,02 раза выше показателя 3-й группы, а объемная доля красной пульпы - ниже на 1,56 ± 0,12 %. Уменьшаются и показатели доли эритроцитов, гемосидерина и количества макрофагов.

В последующие сроки исследования в 3-й серии выявляется снижение объемной доли белой пульпы, но в 7-й серии эксперимента она повышается, и не отмечается резкого снижения количества лимфоцитов в зонах фолликулов. Отсутствуют очаги кровоизлияний.

В красной пульпе селезенки у животных 7-й серии к окончанию эксперимента объемная доля красной пульпы, доля эритроцитов, гемосидерина и макрофагов меньше, чем в сравниваемой серии

В гомогенатах селезенки у животных сравниваемых серий также значительны различия по содержанию продуктов ПОЛ. Так, к 14-м суткам уровень ГПЛ у животных 3-й серии превышает показатель контрольной группы в 2,02 раза, аналогичные значения 7-й группы - в 1,21 раза, количество МДА - в 2,28 и 1,23 раза соответственно.

Процессы нарушения структуры исследуемых органов сопровождаются и изменением содержания продуктов ПОЛ в крови исследуемых животных. Количество ГПЛ у животных 3-й серии нарастает с 1-х по 5-е сутки эксперимента. На 7-е сутки отмечается снижение данного показателя до 106,28 ± 3,35 нмоль/л, но в последующие сроки и до окончания эксперимента вновь выявлено повышение их количества в крови, и к 14-м суткам данный показатель превышает контрольные значения в 2,56 раза, а 7-й серии - в 1,21 раза. Содержание МДА в крови экспериментальных животных 3-й серии также повышается до 5-х суток с последующим уменьшением до 2,94 ± 0,14 нмоль/л к 7-м суткам и дальнейшим увеличением к 14-м суткам исследования. Его содержание к окончанию сроков эксперимента выше нормы в 1,77 раза, а аналогичного показателя 7-й серии - в 1,19 раза.

У животных 7-й серии уже с 3-х по 7-е сутки выявлено снижение содержания ГПЛ в крови, но с 7-х по 14-е сутки вновь отмечается повышение данного показателя, и к окончанию сроков исследования уровень ГПЛ остается выше контроля в 2,12 раза, но ниже, чем в 3-й серии, в 1,21 раза. Изменение содержания в крови МДА аналогичны. Так, в 3-й серии повышение его количества выявлено по 5-е сутки с последующим снижением до 10-х суток включительно. На 14-е сутки отмечается повышение содержания МДА по отношению к предыдущим суткам на 10,75 ± 0,26 %, что выше контрольных показателей на 77,58 ± 0,62 %. В крови животных 7-й серии эксперимента с 3-х по 7-е сутки выявлено уменьшение содержания МДА. На 10-е сутки вновь отмечается повышение данного показателя на 2,88 ± 0,06 % по отношению к предыдущему значению, а к 14-м суткам уровень МДА составляет 2,59 ± 0,26 нмоль/л, что на 16,18 ± 0,23 % меньше, чем в 3-й серии, но в 1,49 раза выше, чем в контроле.

Анализ содержания гормонов и эозинофилов у животных сравниваемых серий показал, что количество кортикостерона у животных 3-й серии повышается по 5-е сутки, а в 7-й серии - по 3-и сутки включительно. В последующие сроки в обеих сериях выявлено снижение данного показателя: к 14-м суткам у животных 3-й серии количество кортикостерона ниже, чем в контрольной группе, на 33,90 ± 0,43 %, а в 7-й серии соответствует норме. Уровень пролактина в крови животных 3-й серии на 3-и сутки исследования в 4,27 раза выше контрольных значений и на 9,43 ± 0,15 % выше аналогичного показателя 7-й серии. К окончанию сроков исследования уровень пролактина у животных 3-й серии ниже показателя контрольной группы на 13,27 ± 0,12 %, а у животных 7-й серии - выше контроля на 24,67 ± 0,37 %.

Динамика изменения количества эозинофилов в крови животных сравниваемых серий выявила, что к 3-м суткам исследования в обеих сериях отмечается значительное повышение их числа относительно предыдущих суток. Так, у животных 3-й серии количество клеток повышается в 4,1 раза, а в 7-й серии - в 5,21 раза. К 5-м суткам вновь количество эозинофилов снижается с последующим увеличением содержания этих клеток в крови до 14-х суток включительно. Но к окончанию сроков исследования их количество ниже, чем в 7-й серии, на 17,52 ± 0,15 % (рис. 14).

Рис. 14 Динамика изменений уровня гормонов и эозинофилов в крови животных 3-й и 7-й серии

Изучение морфофункциональных изменений в паренхиматозных органах с лечением комплексом препаратов ГМК при отравлении уксусной кислотой показало, что как в стадию тревоги, так и в стадию истощения стресс-реакции, отмечается значительное улучшение структуры и функции органов.

Так, у животных 8-й серии эксперимента (отравление уксусной кислотой в стадию тревоги стресс-реакции) уже через сутки от начала лечения в 1,17 раза уменьшается число клеток с признаками дистрофических изменений, а объемная доля некрозов на 31,64 ± 0,46 % меньше, чем в 5-й серии (рис. 15).

Рис. 15 Динамика изменений объемной доли дистрофии гепатоцитов и некрозов печеночной паренхимы у животных 5-й и 8-й серии эксперимента

Наиболее значительно различие в количестве гликогена. Выявлено, что этот показатель в 6,64 раза выше, чем в 5-й серии.

Уже с 3-х суток у животных 8-й серии отмечены признаки регенерации, что проявляется не только в уменьшении очагов дистрофии и некроза, но и в значительных изменениях пула гепатоцитов. Так, численность двуядерных гепатоцитов возрастает как в центре долек, так и на периферии (в 1,32 и 1,28 раза соответственно), по сравнению с показателями 5-й серии. Достоверно и снижение объемной доли сосудов и лейкоцитарной инфильтрации.

Количество гликогена в печени животных 8-й серии на 3-и сутки эксперимента выше, чем в 5-й серии, в 4,54 раза.

В последующие сроки наблюдения у животных как 5-й, так и 8-й серии выявлено уменьшение деструктивных и увеличение репаративных процессов в печени. Так, количество гепатоцитов в состоянии дистрофии, по сравнению с предыдущим сроком, на 5-е сутки у животных 5-й серии снижается на 7,05 ± 0,15 %, у животных 8-й серии - на 13,79 ± 0,19 %, на 7-е сутки - на 18,48 ± 0,49 и 22,90 ± 0,18 % соответственно. К 14-м суткам исследования у животных 8-й серии число гепатоцитов в состоянии дистрофии ниже, чем в 5-й серии, в 1,93 раза, а количество некрозов - в 9,94 раза.

...