Характеристика молекулярных признаков, ассоциированных с групповой принадлежностью крови в показателях метаболизма и клеточного состава крови в норме и патологии

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

Характеристика молекулярных признаков, ассоциированных с групповой принадлежностью крови в показателях метаболизма и клеточного состава крови в норме и патологии

14.00.46 - Клиническая лабораторная диагностика

доктора медицинских наук

Гусякова Оксана Анатольевна

Москва - 2009

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Самарский медицинский университет Росздрава»

Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Гильмиярова Фрида Насыровна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Баринов Виталий Григорьевич

член-корреспондент РАМН доктор медицинских наук, профессор Терентьев Александр Александрович

доктор медицинских наук, профессор Бородулин Владимир Борисович

Ведущая организация

Государственное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования «Российская медицинская академия постдипломного образования» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию

Защита состоится «____» _____________2009 г. в ___ часов на заседании диссертационного совета Д 208.072.08 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию по адресу: 117997, Москва, ул. Островитянинова, д. 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Российский медицинский университет» Росздрава по адресу: 117997, Москва, ул. Островитянинова, д. 1.

Автореферат разослан «____» ______________2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор Рылова Анна Константиновна

метаболический кровь гемостаз ротовой

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. Снижение уровня популяционного здоровья является в настоящее время кардинальной биомедицинской проблемой. Осуществляется поиск новых подходов, концентрация усилий теоретической и клинической медицины на их решении (Molaro G.L.,1987, Эмануэль В.Л., Пантелеев В.Г., 2004; Кишкун А.А, Назаренко А.П., 2005; Долгов В.В., Меньшиков В.В., 2006). Как известно, уникальность каждого человека и его набора генов определяет широкое варьирование физиологических и патофизиологических реакций в группе людей в ответ на воздействие одного и того же фактора. Это может быть и одной из причин клинического полиморфизма заболеваний. Информативность данных, получаемых при проведении диагностических исследований, является залогом качества диагностики и адекватности лечебных мероприятий (Долгов В.В., Эмануэль В.Л., 1997; Назаренко Г..И., Кишкун А.А., 2000). Следует отметить, что границы нормы и патологии зачастую очень условны. Именно поэтому представляется чрезвычайно важным изучение индивидуальных колебаний показателей разных видов обмена веществ, используемых в клинической лабораторной диагностике. Определение внутри- и межиндивидуальной вариации лабораторных результатов, связанных не только с такими различиями, как пол, возраст, крайне важно для принятия правильных клинических решений. Новое направление в клинической биохимии, клинико-лабораторной диагностике, раскрывающее биологическую вариабельность метаболизма при различных группах крови, основанное на индивидуализации референтных величин, составлении персонального метаболического и иммунологического паспорта здоровья, обеспечивает повышение точности и расширение перспективности для донозологической диагностики и мониторинга эффективности лечения.

Попытки исследователей связать заболеваемость с принадлежностью к определенной группе крови известны ранее. Результаты этих работ носят описательный фрагментарный характер (Ивашков Е.А., 2002; Герасимова Н.Д., 2003; Дашкова Н.Г, Расницын С.П., Рагимов А.А., 2005). Существует мнение, что различия в адаптивных возможностях лиц с разными группами крови системы АВО не имеют фатального характера, доля влияния групповой принадлежности крови на частоту связи с болезнями составляет от 10 до 30% (Айала Ф., Кайгер Д., 1988; Гехт Б.М. с соавт., 1995; Потемкин В.В. с соавт., 2006). Сведения о склонности или устойчивости к заболеваниям инфекционной и неинфекционной природы, связанной с групповой принадлежностью крови единичны (Громацкий Н.И. с соавт., 2002; Гармонов С.Ю., 2006; Островский В.К., 2006; Фрейдин М.Б. с соавт., 2006). Изучение группоспецифических метаболических особенностей как платформы для изучения патогенеза любого заболевания пока явно недостаточно.

Необходимость проведения исследований неинвазивными способами, связанная прежде всего с ростом гемотрансмиссивных заболеваний, обуславливает актуальность поиска альтернативных крови биологических сред. Ротовая жидкость является биологической жидкостью, которая обеспечивает полную неинвазивность, многократное, удобное и почти не ограниченное по объему взятие материала. Это создает возможность изучения показателей обмена в ротовой жидкости при проведении прежде всего скрининговых исследований.

Актуальность данного исследования продиктована необходимостью получения базы для клинико-лабораторной диагностики с целью развития превентивной, предиктивной, персонализированной медицины.

Настоящее исследование выполнено в рамках Федеральных программ:

· «Изучение свойств, состава, биологических эффектов, регуляторного потенциала экопротекторов нового поколения и разработка мер защиты здоровья населения и профилактики заболеваний» (№ гос. регистрации 1.20.03 08340).

· «Взаимодействие биологически активных веществ растительного и животного происхождения с системами жизнеобеспечения организма с учетом биологической вариабельности метаболизма, ассоциированной с групповой принадлежностью крови» № гос. регистрации 0120.0 809698)

Цель настоящего исследования заключается в повышении эффективности лабораторной диагностики за счет установления естественных границ метаболических колебаний и структурно-функциональных свойств клеток крови и ротовой жидкости, ассоциированных с группой крови.

Задачи:

1. У клинически здоровых лиц с 0(I) - AB(IV) группами крови в репрезентативной выборке исследовать основные лабораторно значимые показатели углеводного, липидного, белкового и минерального обменов. Оценить наличие особенностей метаболизма, ассоциированного с групповой принадлежностью крови.

2. Неинвазивно, в ротовой жидкости клинических здоровых обследуемых с 0(I) - АВ(IV) группами крови установить границы колебаний ключевых показателей обменных процессов, выявить особенности метаболизма, ассоциированные с групповой принадлежностью крови, провести многофакторный корреляционный анализ полученных результатов, оценить характер взаимосвязи между показателями обмена в ротовой жидкости, а также между параметрами метаболизма в ротовой жидкости и крови для аргументации информативности исследований ротовой жидкости в качестве альтернативы крови.

3. Охарактеризовать клеточный состав крови у мужчин и женщин с различными группами крови, оценив показатели гематологического общеклинического анализа: количество эритроцитов, средний объем эритроцита, распределение эритроцитов по объему, содержание гемоглобина, концентрацию и среднее содержание гемоглобина в эритроците, гематокрит; абсолютное и относительное содержание различных форм лейкоцитов; количественные показатели тромбоцитов, их средний объем и размер, соотношение субпопуляций тромбоцитов.

4. Провести исследование гемостаза, оценивая базовые показатели свертывающей и противосвертывающей систем у клинически здоровых лиц с 0(I) - АВ(IV) группами крови и выявить наличие группоспецифических особенностей.

5. Изучить содержание метаболитов, активность ферментов белкового, углеводного, липидного обменов, структурные и функциональные характеристики клеточного состава крови у больных с 0(I) - АВ(IV) группами крови с железодефицитной анемией разной степени тяжести, сопоставить с метаболическим паспортом 0(I) - АВ(IV) групп крови, выявить предикторы, оценить частоту заболеваемости среди носителей различных групп крови, охарактеризовать особенности лабораторных параметров у больных в динамике, выяснить значение установленных референтных пределов для повышения эффективности диагностики и мониторинга лечения.

6. На примере железодефицитной анемии исследовать связь выявленных метаболических и структурно-функциональных особенностей крови, ассоциированных с групповой принадлежностью и развитием патологического процесса с проведением многофакторного корреляционного анализа полученных результатов.

7. Сгруппировать результаты исследований показателей метаболизма, параметры, характеризующие клеточный состав крови, гемостазиологические показатели у клинически здоровых обследованных по принадлежности к 0(I) - АВ(IV) группам крови, разработав шкалу референтных величин с дополнительной градацией по группам крови. Индивидуализировать референтные величины группоспецифическим метаболическим паспортом.

Научная новизна. Впервые получена системная характеристика метаболических, коагулологических показателей, количественных и качественных характеристик клеточного состава крови с учетом градации не только по половому признаку, но и принадлежности к соответствующей группе крови.

У обследованных с 0(I) группой крови при сопоставлении с генеральной совокупностью выявлено более высокое содержание б₁, б₂, в-фракций глобулинов.

· Уровень мочевины, СРБ, фибриногена, иммуноглобулина А, активность ГГТ, ЛДГ, щелочной фосфатазы, показатели средней концентрации гемоглобина в эритроците, количество тромбоцитов, АПТВ, ПТИ имеют наибольшее значение.

· Уровень мочевой кислоты, кальция, глюкозы, ЛПВП и ЛПНП, активность ферментов АсАТ, КФК, КФК- МВ, количество эритроцитов, лейкоцитов, лимфоцитов, содержание гемоглобина - наименьшие.

Получены новые сведения, раскрывающие спектр особенностей обмена у лиц с A(II) группой крови: при нормальном уровне общего белка выявлена склонность к снижению уровня альбумина и г-фракции глобулинов.

· Содержание иммуноглобулина А, общего билирубина, холестерина, ЛПВП, активность ГГТ, значение гематокрита, среднее содержание гемоглобина в эритроците, средний объем тромбоцита, АПТВ, уровень антитромбина III имеют наименьшее значение.

· Количество иммуноглобулинов G, M, триглицеридов, ЛПНП и коэффициент атерогенности, показатель тимоловой пробы - наибольшее значение; характерен максимальный показатель количества лейкоцитов, нейтрофилов, лимфоцитов.

Установлено, что лица с B(III) группой крови характеризуются следующими особенностями:

· в показателях белкового обмена: наименьшее значение уровня общего белка, склонность к снижению фракций б₁, б₂, в, г-глобулинов, также характерны наименьшие значения СРБ, иммуноглобулинов А, М, G, ЛПНП, триглицеридов, коэффициента атерогенности.

· Наибольший уровень холестерина, максимально удлиненное тромбиновое время, наиболее высокая активность АсАТ, КФК-МВ ЛДГ.

· Клеточный состав крови у носителей В(III) группы характеризуется наибольшим объемом тромбоцитов и самой высокой средней концентрацией гемоглобина в эритроците и зависимыми от пола отклонениями параметров эритроцитов: у мужчин максимальное количество эритроцитов с большим средним объемом и высокой концентрацией гемоглобина, у женщин - наименьшее количество эритроцитов с малым объемом и наименьшей концентрацией гемоглобина.

Получены новые данные, характеризующие группоспецифические особенности AB(IV) группы крови:

· наибольшее содержание общего белка, мочевой кислоты и наибольшая активность КФК, амилазы, антитромбина III.

· Наименьшие значения показателей тимоловой пробы, уровня мочевины, прямого билирубина, триглицеридов, щелочной фосфатазы; минимальная концентрация гемоглобина в эритроците и наименьший средний объем тромбоцитов, содержание нейтрофилов у мужчин и женщин и лимфоцитов у мужчин, тромбиновое время.

Полученные результаты позволяют по-новому подойти к оценке индивидуальных колебаний показателей метаболизма, составляющих молекулярную основу конституциональной специфики обмена.

На примере изучения группоспецифических особенностей при железодефицитной анемии выявлено повышение эффективности диагностики с учетом вариантов клеточного состава крови, метаболических особенностей. Определены метаболические предпосылки развития заболевания и критерии степени тяжести, к которым относятся содержание б-2 - глобулинов, холестерина, сывороточного железа, имеющего корреляционную взаимосвязь с содержанием общего белка. Установлено, что при развитии патологического процесса формируется новая система корреляционных взаимосвязей, отсутствующая у клинически здоровых лиц.

Получены новые сведения о составе ротовой жидкости улиц с 0(I) - AB(IV) группами крови, найдены корреляционные зависимости между метаболическими параметрами крови и ротовой жидкости, что обосновывает диагностическую информативность использования ротовой жидкости в качестве альтернативы крови.

Научно-практическая значимость работы состоит в получении новой базы данных для индивидуализации границ референтных величин основных биохимических, гематологических и гемостазиологических показателей с дополнительной их градацией по групповой принадлежности. Полученные новые фундаментальные данные, характеризующие специфику метаболических и структурно - функциональных особенностей крови, что позволит выделить группы риска в отношении предрасположенности к определенным заболеваниям и проводить профилактические мероприятия по предупреждению и раннему выявлению патологии эндокринной, сердечно-сосудистой, гепато-билиарной систем. Впервые детализированы особенности нарушений эритроцитарного звена гемограммы при железодефицитном состоянии в зависимости от групповой принадлежности крови, которые позволят по - новому подойти к вопросам мониторинга эффективности терапии данного заболевания. Полученные результаты могут быть использованы в качестве фактического материала для дополнительных критериев оценки степени тяжести железодефицитной анемии не только по содержания гемоглобина и эритроцитов в единице объема крови, но и с учетом изменений показателей метаболизма. Использование ротовой жидкости как альтеративного сыворотке крови материала для лабораторного анализа раскрывает новые возможности ее применения в медицине.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. База данных, раскрывающая особенности метаболизма, ассоциированные с групповой принадлежностью крови. Границы колебаний метаболических показателей: активности ферментов, содержания метаболитов углеводного, белкового, липидного и минерального обменов, параметров гуморального иммунитета у лиц с 0(I), A(II), B(III), AB(IV) группами крови.

2. Группоспецифические особенности показателей обмена белков, липидов, углеводов и электролитов в ротовой жидкости клинически здоровых обследованных. Корреляционные зависимости между лабораторными параметрами крови и ротовой жидкости. Обоснование информативности использования ротовой жидкости в качестве альтернативной крови биологической среды для лабораторного исследования.

3. Структурные и функциональные характеристики эритроцитов: их количество, средний объем, распределение по размерам, содержание гемоглобина, среднее содержание и средняя концентрация гемоглобина в эритроците, гематокрит, абсолютное и относительное процентное содержание различных форм лейкоцитов, количественные показатели тромбоцитов, их средний объем и размер, соотношение субпопуляций тромбоцитов, их взаимосвязь с группами крови. Показатели про- и антикоагулянтной систем, связь с групповой принадлежностью крови.

4. Информативность оценки данных лабораторного исследования с учетом индивидуально-групповых особенностей показателей метаболизма, структурных и функциональных параметров эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, про- и антикоагулянтных систем крови при железодефицитной анемии.

Апробация работы. Результаты исследований были представлены на

V, VII международных научно-практических конференциях «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2004, 2006), на научно-практической конференции молодых ученых (Санкт-Петербург, 2004), IX международной научной конференции «Здоровье семьи XXI век» (Далянь, Китай, 2005), межрегиональной научно-практической конференции «Новая идеология в единстве фундаментальной и клинической медицины» (Самара, 2005), на VIII Российском съезде травматологов и ортопедов «Травматология и ортопедия ХХI века» (Самара, 2006), на конференции «Ключевые проблемы совершенствования лабораторного обеспечения медицинской помощи» (Москва, 2007), межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 25-летию института последипломного образования Самарского государственного медицинского университета (Самара, 2008), на симпозиуме «Лабораторная медицина: инновационные технологии в аналитике, диагностике, организации, образовании» (Москва-2008), на IV съезде Российского общества биохимиков и молодых биологов (Новосибирск-2008), на научно-практической конференции «Технологии и инновации в лабораторной медицине» (Москва,2009), совместном заседании Самарского отделения Всероссийского биохимического общества, Ассоциации специалистов по клинико-лабораторной диагностике Самарской области, кафедр общей, бионеорганической и биоорганической химии и фундаментальной и клинической биохимии с лабораторной диагностикой (Самара,2009).

Внедрение результатов в практику. Результаты исследований используются в работе клинико-диагностической лаборатории Клиник Самарского государственного медицинского университета, в учебном процессе на кафедре фундаментальной и клинической биохимии с лабораторной диагностикой ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», на кафедре биохимии ГОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», на кафедре биохимии ГОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Публикации. Всего опубликовано 29 работ, в том числе 2 монографии, 4 патента, 8 работ - в ведущих рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной описанию материала и методов исследования, четырех глав собственных данных, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы.

Диссертация изложена на 360 страницах, иллюстрирована 64 рисунками, содержит 137 таблиц. В работе использовано 410 источников, из них 226 отечественных и 184 зарубежных авторов.

Материалы и методы

Работа состояла из нескольких этапов. На первом были отобраны 3678 здоровых лиц, их клиническое состояние здоровья подтверждалось отсутствием обострения хронических соматических и стоматологических заболеваний, а также латентных социально-значимых вирусных инфекций путем тестирования образцов крови методами ИФА, электрохемилюминесценции и полимеразной цепной реакции на вирусные гепатиты В и С, ВИЧ.

Далее проводилось комплексное биохимическое исследование крови и ротовой жидкости по 40 параметрам, автоматизированного общего анализа крови по 21 параметру, гемостазиограммы по 8 параметрам. Мы исследовали по той же схеме 285 человек с клиническим диагнозом железодефицитная анемия. Материалом служили цельная кровь, сыворотка и плазма крови и ротовая жидкость. Все пациенты с железодефицитной анемией были разделены на группы по степени тяжести исходя из содержания гемоглобина крови (Кончаловский А.В., 1976; Долгов В.В. с соавт., 2001). Определение группы крови по системе АВО проводили перекрестным способом и с помощью цоликлонов, в случаях сомнительной детекции группы крови использовались тест-системы на основе методов агглютинации и гель-фильтрации (Scangel) производства Bio-Rad (США). В сыворотке крови и в ротовой жидкости определяли концентрацию общего белка, альбумина, иммуноглобулинов А, G и М, мочевины, креатинина, мочевой кислоты, общего и прямого билирубинов, С-реактивного белка, активность аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, -глутамилтранспептидазы, креатинкиназы, креатинкиназы-МВ фракции, содержание общего холестерина, триглицеридов, липопротеинов высокой плотности, липопротеинов низкой плотности, определяли активность липазы, рассчитывали коэффициент атерогенности, исследовали концентрацию глюкозы, активность лактатдегидрогеназы, б-амилазы, щелочной фосфатазы, уровень магния, кальция, фосфора, железа. Исследования проводили на автоматическом биохимическом анализаторе «Hitachi - 902» , «Интегра 800» («Rochе», Япония) с помощью коммерческого набора реактивов фирмы «Rochе» (Германия). Внутрилабораторный контроль качества при выполнении исследований осуществляли с использованием контрольной сыворотки "Precinorm", "Precipat" («Rochе», Германия).

Общий анализ крови проводился с помощью автоматического гематологического анализатора «Sysmex КХ - 21» («Rochе», Япония) с помощью коммерческого набора реактивов фирмы «Rochе» (Германия). Получали кривые распределения по размеру эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, а также аналитические результаты по 18 параметрам: количество эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, содержание гемоглобина, гематокрита, средний объем эритроцитов и тромбоцитов, среднее содержание и средняя концентрация гемоглобина в эритроците, ширина распределения эритроцитов и тромбоцитов по объему, относительное и абсолютное содержание нейтрофилов, средних клеток и лимфоцитов, показатель соотношения крупных тромбоцитов. Морфологическое исследование форменных элементов крови проводили с помощью светового микроскопа «Zeiss» по унифицированной методике, принцип которой состоит в микроскопии окрашенных мазков крови с дифференцированием различных форм лейкоцитов. Скорость оседания эритроцитов определяли по унифицированной микрометодике Панченкова. Плазменное звено свертывающей системы крови исследовалось с помощью автоматического анализатора STA-Compact («Roche», Франция) с использованием реактивов «Roche» (Франция); определяли протромбиновый индекс (% по Квику), активированное парциальное тромбопластиновое время (АПТВ) (Гаен с соавт. 1968), тромбиновое время, фибриноген, антитромбин III (Hesse R. et al.,1981), плазминоген. Функциональные возможности тромбоцитов оценивались методом визуальной детекции времени начала агрегации с различными индукторами (АДФ, с универсальным индуктором агрегации (УИА), коллагеном).

Статистическая обработка результатов исследований проводилась с использованием персонального компьютера с применением программ MS Office 2003, MS Excel 2000, S-Plus 2000, Statistica 7.0. Определялись следующие статистические характеристики: средняя арифметическая (М), стандартная ошибка от средней арифметической (m), медиана (Ме). В зависимости от формы распределения совокупностей применялось два вида статистических критериев: параметрические (t - критерий Стьюдента) и непараметрические (U - критерий Уилкоксона) (Платонов А.Е., 2000; Боровиков В. А., 2001; Реброва О.В., 2002; Мидлтон М.Р., 2005). Для сравнения здоровых лиц по группам крови применялся однофакторный дисперсионный анализ. Поскольку формы распределения признаков часто отличались от нормальной, а также наблюдались различные величины дисперсий, к которым чувствителен классический дисперсионный анализ, также использовался его непараметрический аналог -- анализ Краскела - Уолллиса (Платонов А.Е., 2000; Реброва О.В., 2002). Если дисперсионный анализ выявлял статистически значимые различия, проводили второй этап статистического анализа, так называемые апостериорные тесты. В настоящем исследовании применялся критерий Даннета, как один из менее чувствительных к различиям дисперсий в сравниваемых группах. Для показателей, имеющих значительные выбросы, при которых некорректно применять классический ANOVA, использовался тест Манна-Уитни (для парных сравнений) с поправкой Бонферони (Боровиков В., 2001; Реброва О.В., 2002). Расчёты проводили в среде статистического пакета SPSS 12.0 (statistical package for social sciences). Критическое значение уровня значимости принимали равным 0,05. Для изучения взаимосвязей метаболических и структурно - функциональных показателей сыворотки крови, ротовой жидкости, форменных элементов крови применялся ранговый корреляционный анализ Спирмена (Платонов А.Е., 2000).

Результаты и их обсуждение

На современном этапе развития медицины, в целях обеспечения здоровья настоящего и будущего поколений, особую значимость приобретает профилактическое направление. Предиктивную медицину, в отличие от медицины лечебной и даже превентивной, уместно рассматривать как первый и наиболее ранний этап активного воздействия человека на свой организм с целью своевременной коррекции потенциально возможной патологии (Baranova H., 2001).

В процессе исследования получен спектр распределения групп крови по системе АВО у клинически здоровых лиц (табл. 1). Обращает на себя внимание, что несколько большую часть обследуемых составили лица со A (ІІ) группой крови - 34,2%. Женщин с О (І) и B (ІІІ) группами крови оказалось немного больше, чем мужчин с соответствующими группами крови.

Таблица 1. Распределение доноров по группам крови по системе АВО

Были получены данные о наличии и характере отклонений от генеральной совокупности по базовым лабораторным тестам в связи с различной групповой принадлежностью крови. У обследованных с 0(I) группой крови установлены особенности в белковом спектре сыворотки крови: более высокое по сравнению с другими группами крови и генеральной совокупностью б_1- ,б_2- (+20,2%), в- и г-глобулинов, низкий альбумино-глобулиновый коэффициент (табл.2).

Эти данные отражают напряжение неспецифических и специфических защитных механизмов; системы антипротеиназных ингибиторов, опсонинов, участвующих в формировании острофазного ответа, а также иммуноглобулинов, в частности, за счет секреторного иммуноглобулина А. Обследованные нами лица с 0(I) группой крови характеризуются средним от генеральной совокупности уровнем общего холестерина в крови. Следует отметить, что содержание липопротеинов высокой плотности у них несколько ниже, чем в других группах. Интенсивный обмен азотсодержащих соединений характеризуют более высокий уровень мочевины (+10,4%), более высокая активность аланин-, аспартатаминотрансфераз, г-глутамилтранспептидазы. Низкий уровень креатинфосфокиназной активности (-17,1%) и дефосфорилированного продукта обмена креатинфосфата свидетельствует о возможном несоответствии потребностей в резервных макроэргических субстратах и реальным их образованием.

Концентрация глюкозы, которая служит активно метаболизирующимся соединением: медиана ниже, чем в генеральной совокупности (-11,6%), при других группах крови. При этом амилолитический распад гликогена является реальным поставщиком этого метаболита. Активный вклад в этот процесс вносит анаэробный путь катаболизма.

Нами выявлены отличия по полу в связи групповой принадлежностью. Установлено, что у мужчин с 0(I) группой крови на более низком уровне, чем в генеральной совокупности содержится альбумин (-32,9%), иммуноглобулин М (-14,7%), глюкоза (-27,9%) и железо (-22,0%), выше концентрация иммуноглобулина А (+58,4%), мочевины (+24,9%), липопротеинов высокой плотности (+37,8%), активность аспартатаминотрансферазы (+86,8%), г-глутамилтранспептидазы (+40,1%). Метаболические процессы у женщин характеризуются другими тенденциями. В крови содержание иммуноглобулина М существенно превышает медианы в генеральной совокупности (+36,8). Активность аланинаминотрансферазы, МВ-фракция креатинфосфокиназы (-24,5%), находятся на более низком уровне.

При анализе общего содержания эритроцитов и их параметров у клинически здоровых лиц с О(I) группой крови установлено, (табл. 3) что у них отмечается относительно низкое (по сравнению с генеральной совокупностью) количество эритроцитов при сравнительно небольшом среднем объеме клеток. Вариабельность объема эритроцитов ограничена, косвенно свидетельствуя о преимущественной однородности клеток среднего объема. У мужчин О(I) группы отмечается тенденция к более низкому уровню гемоглобина. При этом заполненность каждого эритроцита гемоглобином максимальна. Относительно низкое содержание эритроцитов, преобладание клеток среднего объема обеспечивает полноценный транспорт газов кровью высокой степенью насыщения клеток гемоглобином. Скорость оседания эритроцитов относительно генеральной совокупности невысока. У женщин 0(I) группы крови установлено относительно низкое содержание лейкоцитов и лимфоцитов (табл. 4). Абсолютное содержание нейтрофилов достаточно высоко. У обследованных обоих полов отмечается наибольшее содержание базофилов (+40,7%). Базофилия, тенденция к лейкопении, лимфоцитопении, монцитозу (+14%) - свидетельство наличия эндогенных или экзогенных патогенов и иммунологической памяти на предшествующие антиген-антительные взаимодействия, более низкий иммуно-регуляторный потенциал клеточного звена.

У обследованных с О(I) группой крови были выявлены (табл. 5) самые высокие значения уровня фибриногена (+17,6%), что соответствует и более низкому показателю альбуминово-глобулинового коэффициента. Видимо, эти данные скорее отражают напряжение специфических и неспецифических защитных механизмов, участвующих в системе острофазного ответа. Анализ базовых коагуляционных тестов показал максимальные значения АПТВ из всех групп крови системы АВО и высокие значения тромбинового времени. Все это можно расценить как некоторую гипокоагуляционную направленность гемостаза в границах нормы. С этим вполне согласуются данные об относительно низкой агрегационной способности тромбоцитов, несмотря на их максимально высокое число у женщин.

У обследованных с 0(I) группой крови (табл.7) отчетливо увеличено в ротовой жидкости содержание альбумина (+77,7%), Ig M (+12,5%), Ig G (+12,7%), железа (+16,6%), повышена активность аланинаминотрансферазы (+22,4%), креатинфосфокиназы (+18,2%), лактатдегидрогеназы (+15,8%), щелочной фосфатазы (+17,6%). Наблюдается дефицит секреторного Ig А (-25%), магния (-16,6%), снижение активности аспартатаминотрансферазы (-14,8%), липазы (-40,3%). Избыток железа создает условия для активации свободнорадикальных процессов, универсального механизма повреждения биомолекул и структур, звена патогенеза различных соматических и стоматологических заболеваний. А снижение иммунной защиты в полости рта отражает уменьшение содержания Ig А. Однотипная направленность сдвигов относительно генеральной совокупности, а именно их снижение в крови и ротовой жидкости характерно для мочевой кислоты, активности аспартатаминотрансферазы и липазы.

Определенная специфика установлена в связи с половыми различиями для ряда показателей обмена в ротовой жидкости у носителей 0(I) группы крови. Для мужчин характерно высокое содержание иммуноглобулина М (+150%), мочевины(+22,1%), креатинина (+18,8%), активность аланинаминотрансферазы (+46,6%) и щелочной фосфатазы (+17,6%) и превышает медиану в генеральной совокупности.

Таблица 2

Показатели белкового, углеводного, липидного и минерального обменов в сыворотке крови обследованных с различными группами крови

* р<0,05

У женщин обращает внимание более высокий уровень альбумина (+88,9%), иммуноглобулина А (+25%), мочевой кислоты (+33,1%), активности креатинфосфокиназы (+18,2%) и ее МВ-фракции (+37,1%), лактатдегидрогеназы (+66,2%). Содержание креатинина (-25%), триглицеридов (-25,1%), магния (-23,3%) имеет более низкие величины, активность липазы (-50%) существенно меньше Ме в генеральной совокупности. В ротовой жидкости женщин отмечено высокое содержание С-реактивного белка (-120%) и показателя тимоловой пробы (+40,1%). Такая же закономерность наблюдается и при A(II) группе крови, в то время как при B(III) и AB(IV) группах тенденция противоположная.

Характеристика A(II) группы крови. Анализ липидного спектра у обследованных с A(II) группой (табл. 2) показал превышение среднего уровня триглицеридов (+17,5%), липопротеинов низкой плотности, самую низкую концентрацию липопротеинов высокой плотности и соответственно большую величину коэффициента атерогенности (+19,2%).

Эта особенность подтверждает наличие генетических компонентов факторов риска развития атеросклероза, как основного биохимического и морфологического субстрата заболеваний сердечно-сосудистой системы.

Очевидно, носительство A(II) может расцениваться как потенциальный риск формирования этой патологии, превышающий среднестатистическую возможность. Хотя молекулярная генография различна, картирование факторов риска развития инфаркта миокарда определено в 14 хромосоме, а АВ0 антигены - в девятой, сцепленность особенностей метаболического статуса по отклонениям от генеральной совокупности параметров липидного обмена очевидна.

Обследованные с A(II) группой также характеризуются относительно низкой обеспеченностью магнием (-11,7%), кальцием. Более низкий уровень альбумина, одного из транспортеров кальция и магния в крови, создает предпосылки для менее удовлетворительного обеспечения организма важнейшими макроэлементами, выполняющими наряду со структурной функцией важную регуляторную роль. Эти данные служат основанием для дополнительного наблюдения, скринингового обследования лиц с A(II) группой крови на предмет возможности развития остеопороза, функциональных нарушений сократимости, нервно-мышечной возбудимости сердечной и скелетных мышц. Активность щелочной фосфатазы служит, как известно, маркером остеобластов, их анаболической активности, так как обеспечивает остеогенез оптимальным содержанием фосфатов, необходимых для минерализации. Ее активность наиболее близка к данным генеральной совокупности в отличие от максимальной в 0(I). У мужчин с A(II) группой крови отмечены большие значения медианы для мочевой кислоты (+15,3%), активности аланинаминотрансферазы (+26,1%), аспартатаминотрансферазы (+22,0%), г-глутамилтранспептидазы (+17,1%) и щелочной фосфатазы (+26,3%), низкие - для липазы (-17,2%). Содержание фосфора (-23%), С-реактивного белка (-56,2%), показатель тимоловой пробы (-16,6%) значительно ниже, чем медиана в генеральной совокупности. У женщин той же группы крови отличия показателей обмена выражаются в более высоких цифрах медианы для иммуноглобулина М (+30,5%), триглицеридов (+20,0%), липопротеидов низкой плотности (+22,5%), коэффициента атерогенности (+23,6%), низкого уровня активности аланинаминотрансферазы (-33,8%), аспартатаминотрансферазы (-25,4%), г-глутамилтранспептидазы(-42,9%). У мужчин и у женщин однонаправлена тенденция отклонений от медианы генеральной совокупности содержания С-реактивного белка (-46,8%), концентрация которого значительно ниже.

При изучении клеточного состава (табл. 3) крови А(II) группы отмечено невысокое значение гематокрита, наличие однородных эритроцитов (показатель анизоцитоза меньше медианы генеральной совокупности), наименьшее среднее содержание гемоглобина в эритроците, средний объем тромбоцитов, максимальный показатель количества лейкоцитов, лимфоцитов (+11,5%) от абсолютного числа относительно генеральной совокупности по медиане. У женщин с А(II) группой крови установлено самое высокое содержание эритроцитов. При этом отчетливо выражены различия по полу по среднему объему эритроцитов: у мужчин он минимален относительно других групп крови, а у женщин после носителей О(I) группы крови находится на втором месте. У женщин со А(II) группой крови популяция эритроцитов однородна по объему.

Характерно, что у них среднее содержание гемоглобина в эритроците несколько меньше, чем уровень у лиц с другими группами крови. Скорость оседания эритроцитов у женщин сопоставима с генеральной совокупностью и с О(I) группой крови. Параметры крови у женщин этой группы крови характеризуются также наиболее высоким содержанием лейкоцитов (+16,1%). Абсолютное содержание нейтрофилов выше, а палочкоядерных нейтрофилов сопоставима с показателями у лиц с другими группами крови (табл.4). Установленная тенденция к появлению мелких тромбоцитов, функционально менее полноценных, чем крупные клетки, также характерна для женщин с А(II) группой крови. Мужчины с А(II) группой крови характеризуются самым большим абсолютным содержанием лимфоцитов и высоким - базофилов, что позволяет допустить активацию этого клеточного звена развития аллергических и защитных процессов за счет наличия в них комплекса биологически активных веществ, протеаз, в том числе коллагеназы, эластазы, нуклеаз, глюкуронидазы, а также оксидоредуктаз, участвующих в образовании активных форм кислорода. В то же время у доноров со А(II) группой крови отмечалась картина склонности к гиперкоагуляции (табл.5), которая формируется сдвигами скрининговых коагуляционных тестов: самые низкие значения АПТВ в сочетании с самыми низкими же значениями естественного антикоагулянта - антитромбина III. Кроме того, при самых низких результатах оценки уровня фибриногена наблюдалась самая высокая фибринолитическая направленность по уровню плазминогена. Вместе с особенностями липидного обмена, характерного для А(II) группы крови - с превышением среднего уровня липидов, липопротеидов низкой плотности, с самой низкой концентрацией липопротеидов высокой плотности - все это создает условия, благоприятствующие развитию сердечно-сосудистых катастроф. Очевидно, носительство А(II) группы крови может расцениваться как риск формирования этой патологии, несмотря на низкие цифры независимого предиктора - СРБ.

В ротовой жидкости (табл.7) у лиц со A(II) группой отмечена более значительная активность трансфераз (+16,7%), лактатдегидрогеназы (+13,7%), амилазы (+36,6%), липазы (+17,3%), соотносимая с генеральной совокупностью - щелочной фосфатазы. Характерна картина содержания электролитов: увеличена концентрация магния (+23,3%), фосфора (+16,7%), железа (+16,6%) при отсутствии параллелизма в крови. Очевидно, это - локальный процесс ротовой полости. Магний, как известно, является кофактором, активирующим многие ферментативные процессы, связанные с аккумуляцией энергии, биотрансформацией углеводов и унифицированных субстратов. Кроме того, наряду с фосфором он служит фактором структурообразования, минерализации эмали.

Следовательно, при наличии A(II) группы крови ротовая жидкость способна более активно связывать и накапливать минерал...