Разработка, обоснование и оценка современной биотерапии у больных солидными опухолями

Таким образом, из полученных данных можно сделать вывод о дисфункции противоопухолевого иммунитета у больных солидными опухолями до вакцинотерапии, положительной динамике показателей у пациентов, получавших вакцинотерапию с адъювантной целью и недостаточной активности изучаемого вида вакцинотерапии у больных c диссеминированным опухолевым процессом. Дисфункция противоопухолевого иммунитета (снижение активности одного звена и активация другого) требует дальнейшего изучения, например, у пациентов с “иммуногенными” и “слабоиммуногенным” опухолями. Восстановление функции противоопухолевого иммунного ответа будет эффективным, по-видимому, лишь в случае нормализации равновесия в системе, и, особенно, в механизме уклонения опухоли от иммунобиологического надзора. Избирательное воздействие на отдельные субпопуляции иммунорегуляторных клеток в нужном для клинического эффекта направлении может обеспечить излечение пациентов.

Оценка токсичности и клинической эффективности вакцинотерапии на основе аутологичных опухолевых клеток, модифицированных геном tag7, у больных диссеминированными солидными опухолями.

Низкая иммуногенность является основным недостатком аутологичных и аллогенных вакцин, в связи с чем, производится поиск способов повышения их антигенной специфичности. Наиболее подходящим представляется трансфекция генов (генотерапия). С этой целью используются трансформированные плазмиды, экспрессирующие гены иммуномодуляторов, в частности, лимфокинов (Киселёв О.И. и др., 2002). После трансфекции иммуногенность опухолевых клеток повышается в связи с продукцией нехарактерных для них белков и цитокинов, привлекающих и активирующих АПК. В результате наблюдается активация цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ), Т-хелперов 1-го типа (Тh1) клеток, Т-клеток памяти, иммунологически наивных Т-лимфоцитов, конечной целью которых является развитие устойчивого антиген-специфического “bystander” противоопухолевого эффекта (“эффект свидетеля”).

В экспериментах было показано, что продукт гена tag7, выделенный из клеток аденокарциномы молочной железы мыши, метастазирующей в печень, обладает свойством подавлять рост опухоли, причем степень подавления роста опухоли коррелирует со степенью экспрессии этого гена (Greten T.F. and E.M. Jafee, 1999). В 1998 г. в Институте биологии гена РАН клонирован человеческий аналог гена tag7, белок которого на 70% гомологичен с белком Tag7 мыши. Этот протеин обладает выраженной гомологией с каталитическим доменом лизоцима и слабой гомологией с членами семейства фактора некроза опухолей.

В исследование включено 59 больных с морфологически верифицированным диагнозом меланомы кожи (45 больных) и раком почки (14 больных), получавших лечение в ФГУ «НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова Росмедтехнологий» с 2001 по 2008 год. 41 пациент (31 больной меланомой кожи и 10 - раком почки) получил паллиативную вакцинотерапию (69%) и 18 больных - адьювантную (31%), из них 14 больных меланомой кожи после полных циторедуктивных операций и 4 больных раком почки после радикальной нефрэктомии.

На момент начала вакцинотерапии у 24 больных (58%) диагностированы висцеральные метастазы, невисцеральные поражения выявлены у 17 пациентов (42%).

Таблица 2. Клинический эффект лечебной вакцинотерапии аутологичными опухолевыми клетками, модифицированными геном tag 7 у больных меланомой кожи и раком почки

* - продолжительность эффекта

Медиана безрецидивной выживаемости больных меланомой кожи составила 8 мес. При этом 3 больных в настоящее время продолжают лечение. Медиана безрецидивной выживаемости больных раком почки не достигнута.

При анализе показателей общей выживаемости выявлено, что медиана выживаемости всех пациентов, получавших вакцинотерапию, составила 8 месяцев от начала лечения.

Выполнен сравнительный анализ общей выживаемости пациентов, получивших полный курс вакцинотерапии (6 и более введений), и больных, преждевременно выбывших из исследования по причине прогрессирования заболевания. Медиана выживаемости в первой группе составила 19 месяцев от начала терапии, во второй - 5 месяцев (р<0,05) (рис. 5).

Рис. 5. Общая выживаемость пациентов, получивших вакцинотерапию на основе опухолевых клеток, модифицированных геном tag7, в зависимости от количества введений вакцины (метод Каплана-Мейера): 1 группа - пациенты, получившие 6 и более введений вакцины; 2 группа - пациенты, получившие <6 введений вакцины

В местах инъекции модифицированных геном tag7 аутологичных опухолевых клеток в течение 48 часов регистрировалась местная реакция в виде участков гиперемии, которая расценивалась как реакция гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) при размере этих участков не менее 5-10 мм.

Реакция ГЗТ в ответ на введение вакцины развилась у 74% (31 из 42) больных меланомой кожи и 93% (13 из 14) больных раком почки. При этом, размер гиперемированного участка увеличился в среднем на 3-4 мм в процессе лечения. У 3 больных (5%) меланомой кожи во время проведения 1/2 цикла вакцинотерапии зарегистрирована реакция ГЗТ в контрольной точке - месте введения аутологичных немодифицированных опухолевых клеток (“bystander effect”).

В большинстве случаев выявили корреляцию между интенсивностью местной иммунной реакции в месте введения вакцины (ГЗТ) и наблюдаемыми клиническими эффектами.

Установлена взаимосвязь между размером и выраженностью выявляемых гиперемированных участков и эффектом лечения. Так, у пациентов со стабилизацией процесса наблюдали реакцию ГЗТ в среднем 15-20 мм, причем имела место тенденция к их увеличению. Больные с прогрессированием заболевания отвечали недостаточно на вводимый вакцинный препарат, реакция ГЗТ была невыраженной или отсутствовала.

Для более детального изучения иммунологической эффективности данного вида терапии проводили биопсии места введения вакцины и в качестве контроля - участков неизмененных кожных покровов пациентов. На гистологических срезах был обнаружен лимфоидный инфильтрат, который положительно окрашивался при выполнении иммуногистохимических тестов с помощью моноклональных антител к CD3, CD4, CD8, CD14, CD1a, CD83. Это подтверждало присутствие Т-лимфоцитов, макрофагов и дендритных клеток разной степени зрелости в месте появления реакции ГЗТ. В контрольных участках (неизмененные кожные покровы) подобная картина не наблюдалась.

Практически у всех пациентов с положительной клинической динамикой в процессе вакцинации нарастало абсолютное содержание в периферической крови CD3+, CD4+, CD8+, CD16+-лимфоцитов. К концу каждого курса вакцинотерапии наблюдалось увеличение функциональной активность преимущественно CD8+ Т-клеток. Одновременно выявляли увеличение размеров реакции ГЗТ. У пациентов, не ответивших на проводимое лечение, показатели содержания Т-лимфоцитов, NK-клеток, активированных Т- и В-лимфоцитов практически не изменились.

Таким образом, у больных диссеминированной меланомой кожи и метастатическим раком почки вакцинотерапия аутологичными опухолевыми клетками, модифицированными геном tag7, безопасна и не сопровождается клинически значимыми побочными эффектами. Введение tag7-модифицированной вакцины вызывает: 1) развитие реакции ГЗТ у 78,6% больных; 2) “bystander effect” - у 5% вакцинированных; 3) частичный регресс метастазов у 3(7,3%) пациентов (у двух больных раком почки (продолжительность эффекта 23 мес.+ и 9 мес.+) и у одного больного меланомой кожи (продолжительность эффекта 36 мес.)); 4) минимальный регресс метастазов (регресс <50%) - у двух больных раком почки (продолжительность эффекта 12 мес. и 4 мес.) и стабилизацию процесса - у 11(27%) пациентов (8 больных меланомой кожи и 3 больных раком почки), средняя продолжительность эффекта составила 6 месяцев (от 2 до 24 мес.). Положительная динамика в иммунологических тестах in vitro в процессе вакцинотерапии зарегистрирована у 95% пациентов. Вместе с тем, индукция Т-клеточного иммунного ответа происходила на фоне увеличенной продукции основных классов Ig во все сроки наблюдения, что, несомненно, тормозит устойчивость поствакцинальных цитотоксических реакций. Для повышения эффективности геномодифицированной вакцины перспективным представляется использование аутологичных опухолевых клеток с высоким индексом трансфецированных клеток (>50%) у больных после радикального лечения или циторедуктивных операций с минимальной резидуальной болезнью.

Оценка токсичности и клинической эффективности вакцинотерапии на основе аутологичных костно-мозговых предшественников ДК у больных диссеминированными солидными опухолям.

Всего вакцинотерапию на основе аутологичных костно-мозговых дендритных ДК получил 21 пациент. Шесть больных (29%) получили от 1 до 4 внутривенных введений ДК-вакцины Полный или частичный регресс зарегистрирован не был. Стабилизация опухолевого процесса в этой группе наблюдалась у 1 пациента продолжительностью 4 мес., прогрессирование - у 5 больных. В процессе лечения зарегистрированы следующие виды осложнений: лихорадка 1ст. в дни введения вакцины - у 1 больного, лихорадка 2 ст. в течение 4 дней после введения вакцины - у 3 больных, гипотония 2 ст. в дни введения - у 1 больного, слабость 2 ст. на протяжении всего курса лечения - у 1 больного, повышение уровня тромбоцитов в периферической крови 1 ст. в течение 14 дней - у 1 больного, повышение уровня трансаминаз (АЛТ, АСТ) I ст. в течение 6 дней - у 1 больного и повышение уровня трансаминаз (АЛТ, АСТ) 2 ст., сохранявшееся в течение 14 дней - у 1 больного. Осложнения 3 и 4 ст. зарегистрированы не были.

Восемь больных (38%) получили от 2 до 12 подкожных и/или внутрикожных инъекций ДК-вакцины. Из них 4 больных (50%) получали введения с декабря 2006 года по ноябрь 2007. Осложнения наблюдались только в последней группе в виде повышения температуры тела 1 ст. - у 1 больного, повышения температуры тела 2 ст. - у 2 больных, миалгии 1 ст. - у 2 больных, болезненности в месте введения вакцины 1 ст. - у 2 пациентов. Реакция ГЗТ зарегистрирована у 7 больных (88%), в том числе у 4 больных в контрольной точке («bystander effect»). Стабилизация опухолевого процесса - у 3 пациентов (38%) продолжительностью от 3 до 5 мес. У 2 больных меланомой кожи зарегистрирован минимальный регресс (<50%) метастазов в легких продолжительностью 5 мес.+

Двум пациентам (9%) внутрикожные инъекции аутологичной вакцины комбинировали с низкими дозами цитостатиков (5-фторурацил 500 мг + цисплатина 20 мг в/в 1-5 дни, с последующим введением ДК-вакцины или циклофосфан 300 мг/м2 за 3 дня до введения вакцины). Выполнено 4 введения ДК-вакцины. Осложнения и реакция ГЗТ не наблюдались. У больных в обоих случаях зарегистрировано прогрессирование заболевания.

Один больной (5%) получал внутрикожные введения ДК-вакцины в комбинации с IL-1?. Осложнения (лихорадка 1 cт., астения 1 cт.) наблюдались в течение первых часов после инъекции, купировались самостоятельно. После каждого введения вакцины в течение 48 часов регистрировалась выраженная реакция ГЗТ от 2 до 14 мм в диаметре. В результате лечения достигнут минимальный регресс метастазов в легких и плевре (<50%), который продолжался в течение 10 месяцев.

Двое больных (9%) (1 больная раком сигмовидной кишки и 1 больной меланомой кожи) получали внутрикожное введение вакцины в сочетании с IL-2. Осложнения наблюдались у 1 больного в виде головной боли 1 ст., лихорадки 1 ст., артралгии 1 ст., оссалгии 1 ст. в течение нескольких часов после введения вакцины. Реакция ГЗТ регистрировалась у обоих пациентов от 2 до 20 мм в диаметре. Эффект лечения оценен как стабилизация процесса продолжительностью 7 мес. у 1 больной раком толстой кишки. У больного меланомой кожи зарегистрирован частичный регресс продолжительностью 20 мес.

Один больной (5%) меланомой кожи получал введение вакцины в периферические лимфатические узлы в сочетании с системным введением IL-2. Осложнения, связанные с введением вакцины, зарегистрированы не были. Эффект - прогрессирование заболевания.

Один больной меланомой кожи (5%) получал введение вакцины в периферические лимфатические узлы. Осложнений введения не было. Эффект лечения оценен как прогрессирование.

Полный регресс зарегистрирован не был. Частичный регресс метастазов в мягких тканях выявлен у 1 больного меланомой кожи (5%) из 21, сохранявшийся в течение 20 мес. Стабилизация процесса наблюдалась у 6 больных (29%), продолжительностью от 3 до 7 месяцев. У 1 больного раком почки и 2 больных меланомой кожи зарегистрирован минимальный регресс (уменьшение размеров метастазов в легких на 30%), сохранявшийся в течение 10 мес. и 5 мес.+, соответственно.

Таблица 3. Эффективность вакцинотерапии аутологичными костно-мозговыми предшественниками ДК

Медиана выживаемости на фоне проведения вакцинотерапии составила 9,5 мес. (95% CI 5,5-14,4 мес.) от начала лечения.

Медиана выживаемости пациентов, получивших полный курс вакцинотерапии, составила 12,5 мес. (95% CI 2,9-26,4 мес.). Медиана выживаемости пациентов преждевременно выбывших из исследования по причине прогрессирования заболевания составила 4 мес. (95% CI 4,2-9,8 мес.) (p<0,05).

Уровень иммунологической реактивности больных диссеминированными солидными опухолями, получавших данный вид вакцинотерапии, до начала лечения, как это было показано в предыдущих разделах настоящего исследования, в значительной мере индивидуален, а все последующие изменения иммунологических показателей под влиянием активной специфической иммунотерапии происходят, естественно, исходя из первоначальных величин. Последнее, поэтому, имеет принципиальное значение для иммунологического мониторинга, если иметь ввиду под этим термином оценку эффективности лечения и прогноза диссеминированной солидной опухоли на основании результатов анализа тех или иных параметров иммунитета в динамике паллиативной вакцинотеарпии.

В этом разделе работы исследование иммунологических показателей у больных диссеминированными опухолями проводили до начала вакцинотерапии, в процессе специфической иммунотерапии и через 3 недели после завершения лечения.

До лечения установлено снижение абсолютного содержания лимфоцитов, CD3+, CD4+, CD8+ Т-клеток, снижение их функциональной активности в нагрузочных тестах с митогеном ФГА и КонА и увеличенное содержание IgM, IgG, IgA, ЦИК по сравнению со здоровыми лицами. Однако уже после первой вакцинации у этой категории больных выявлена тенденция к увеличению содержания CD3+ Т-лимфоцитов и клеток, экспрессирующих маркеры активации: HLA DR, CD25, CD38, CD71, маркер апоптоза CD95. Одновременно у этих же больных наблюдалась тенденция к увеличению функциональной активности Т-клеток в нагрузочных тестах с митогеном ФГА и КонА и снижение содержания основных классов Ig в периферической крови. Несомненно, это является хорошим прогностическим фактором, так как свидетельствует об иммуногенности приготовленной ex vivo вакцины и отсутствии у больных глубокого Т-клеточного иммунодефицита.

Таким образом, наше исследование показало, что вакцинотерапия аутологичными костно-мозговыми предшественниками ДК обладает иммунологическим и клиническим эффектом, хорошо переносится больными.

Обсуждение результатов исследования

В настоящее время известны результаты клинических и иммунологических исследований I-II фазы вакцин, приготовленных на основе опухолевых клеток, модифицированных генами цитокинов, таких как GМ-CSF, IL-2, -7, -12, применяющихся для лечения больных меланомой кожи и раком почки. Геномодифицированные вакцины формировали у ряда больных реакцию ГЗТ и вызывали активацию противоопухолевого клеточного и гуморального иммунитета, однако их клиническая эффективность не была значительной. В частности, применение вакцины, модифицированной геном GM-CSF для лечения больных меланомой кожи, характеризовалось стабилизацией процесса продолжительностью от 20 до 36 месяцев у 3 из 33 пациентов, в случае лечения рака почки, и у 1 из 16 больных зафиксирован частичный регресс множественных метастазов в легких.

В нашем исследовании небольшое число объективных клинических эффектов от проводимой терапии (частичный регресс у 3(7,3%) из 41 больных, продолжительность эффекта 9+, 23+ и 36 мес.) может быть связано с рядом причин: распространенностью опухолевого процесса, наличием метастатического поражения жизненно важных органов (61,9%), ослабленным общим статусом больных (на момент начала лечения 42,9% пациентов имели статус 2 в соответствии с критериями ВОЗ), предшествующим лечением (химио- или лучевой терапией). Кроме того, известно, что эффективность использования модифицированных цитокином опухолевых клеток для индукции противоопухолевого иммунитета зависит от количества продуцируемого цитокина. Поэтому одной из причин отсутствия выраженных клинических эффектов от проводимой терапии может быть недостаточная эффективность применявшегося липосомного метода трансфекции опухолевых клеток геном tag 7.

Очевидно, что иммунотерапия аутологичной вакциной будет более эффективна у больных с небольшой опухолевой массой, а также у больных с высоким риском развития рецидива после хирургического лечения. Учитывая наличие соответствующего иммунологического эффекта, именно эта группа больных должна быть объектом для вакцинотерапии с помощью геномодифицированных опухолевых клеток, например, модифицированных геном tag7.

Вместе с тем, сравнительный анализ иммунологической активности вакцин на основе аутологичных немодифицированных опухолевых клеток с адъювантом BCG и IL-1?, tag7-геномодифицированных клеток у больных меланомой кожи и раком почки, получавших вакцинотерапию с адъювантной или лечебной целью; при прогрессировании или стабилизации опухолевого процесса выявил незначительные различия в наблюдаемой активации различных субпопуляций Т-клеточного звена иммунной системы, которые практически нивелировались после окончания курса лечения.

Хотя различий в усредненных величинах иммунокомпетентных клеток в процессе вакцинотерапии немодифицированными и геномодифицированными опухолевыми клетками у больных сопоставимых групп по типу опухоли, распространенности и ответу на лечение не установлено, по мере распространенности процесса отмечено их снижение. Кроме того, при полной циторедукции и адъювантном лечении рака показатели в пределах нормы обнаруживались чаще, чем при диссеминированных формах.

Положение о том, что прогрессирующе растущая опухоль является следствием иммунологической недостаточности и что своевременная коррекция такой недостаточности может обеспечить контроль над опухолевым ростом, открывает реальные перспективы эффективной иммунотерапии при злокачественных опухолях у человека. Учитывая центральную роль ДК и СD8+ ЦТЛ в противоопухолевом иммунном ответе в организме, наиболее подходящими для этой цели могут оказаться вакцины на основе геномодифицированных опухолевых клеток и ДК пациента с генетически индивидуальной опухолью (Bergman P.J., 2007; Kawakami Y. et al., 2008).

Правила безопасности требуют, чтобы новые иммунотерапевтические методы изучались у пациентов с распространенным опухолевым процессом, устойчивых к стандартным методам лечения или в случае их отсутствия. Эти исследования определяют токсичность, иммунологическую и клиническую эффективность. Однако, даже самый оптимальный иммунный ответ, в конечном счете, может не преодолеть опухолевую прогрессию. Поэтому важным является проведение безопасных исследований у пациентов с наименьшим распространением опухолевого процесса, у которых реально можно оценить клиническую и иммунологическую эффективность, разработать дальнейшую тактику использования противоопухолевых вакцин.

Трудным аспектом иммунологических протоколов является идентификация иммунологических маркеров, которые коррелируют с клинической эффективностью. Показателем эффективности является объективный клинический ответ, безрецидивная выживаемость и время до прогрессирования, но для этого требуется достаточно много времени. Поэтому возникает необходимость в поиске “суррогатных маркеров”, коррелирующих с клинической эффективностью.

Прогрессу вакцинации против инфекционных болезней способствовало определение уровня антител как “суррогатных маркеров”, видимо, прогресс вакцинации против рака может быть связан с углубленным изучением “суррогатных маркеров” Т-клеточных реакций вакцинированных лиц. Кроме того, клиническая оценка эффективности вакцинотерапии злокачественных опухолей еще недостаточно изучена и нуждается в разработке критериев включения и исключения в исследование, большей градации в оценке клинического эффекта. Например, увеличение времени до прогрессирования у ряда пациентов с IV стадией меланомы кожи может быть менее претенциозным, но более существенным клиническим признаком, чем совсем небольшое число пациентов с полным регрессом опухоли.

Кроме того, еще остаются неизученными механизмы, способствующие разрушению опухоли у пациентов с полным объективным ответом. Нет ответа на два вопроса: 1) почему у некоторых пациентов не развивается иммунный ответ и 2) почему у большинства пациентов не выявляется клинический эффект? Возможно, объяснение заключается в качестве вакцин, включая тип ДК. Другое объяснение может заключаться в том, что Т-клетки некоторых пациентов не могут развивать адекватный иммунный ответ на сложные опухолеассоциированные антигены in vivo. Однако эксперименты in vitro демонстрируют, что Т-клетки большинства пациентов отвечают на индукцию сложных меланомаассоциированных антигенов и дифференцируются в ЦТЛ. В то же время, даже если Т-клетки отвечают in vivo, у пациентов с прогрессированием заболевания опухолевое микроокружение может увеличить агрессивность и способствовать элиминации опухоль-специфических Т-клеток in situ (Mantovani A. et al., 2008). Ответом на этот вопрос может быть дальнейшее изучение CD4+ Т-клеточного иммунитета. Не исключено, что у пациентов с прогрессирующим опухолевым ростом могут быть нарушения в системе СD4+ Т-клеток, которые влияют на индукцию антиген-специфических CD8+ Т-клеток. В противоположность этому, прогрессия опухоли может быть ассоциирована с регуляторными клетками, такими как NKT или Tr1-клетки (Zhang C. et al., 2006; Terable M. & J.A. Berzofsky, 2007). Предполагается, что эти иммунокомпетентные клетки регулируются различными субпопуляциями ДК (Ullrich E. et al., 2008). Поэтому крайне важно дальнейшее изучение генерации субпопуляций ДК с различными линейными признаками (миелоидные, плазмоцитоидные), полученных из моноцитов в присутствии GM-CSF, IL-4, IL-6, IFN- или выращенных из костно-мозговых предшественников в присутствии GM-CSF.

Вместе с тем, ДК, генерированные ex vivo как вакцина с помощью различных методов, представляют собой различные клеточные популяции, и это, несомненно, затрудняет оценку клинической и иммунологической эффективности ДК-вакцины (Guida M. & G. Colucci, 2007; Kochenderfer J.N. & R.E. Gress, 2007; Kawakami Y. et al., 2008). Прогресс в области эффективного клинического использования ДК требует стандартизации апробированных методов с целью дальнейшего изучения у больных с максимальным уменьшением объема опухолевой массы (циторедуктивные операции), минимальной остаточной болезнью, достаточной иммунокомпетентностью.

В заключение, следует еще раз подчеркнуть, что изученные нами современные противоопухолевые вакцины у больных диссеминированными солидными опухолями вызывают иммунологический и объективный клинический ответ. С практической точки зрения принципиально важным является тот факт, что иммунная система пациентов с распространенным опухолевым процессом отвечает, в определенной степени, на индукцию цитотоксических Т-клеточных реакций. В связи с этим, становится возможным перестройка иммунной системы онкологических больных с помощью высокоспецифичных противоопухолевых вакцин.

Более того, в настоящее время ведется поиск средств и способов избирательного воздействия на отдельные звенья и регуляторные субпопуляции клеток иммунной системы. Это современное направление, получившее в зарубежной литературе термин “биотерапия” (Devita et. al., 1995), подразумевает коррекцию иммунного ответа на опухоль с помощью различных молекулярно-биологических и иммунологических методов. Имеющийся в рамках этого клинического исследования материал уже сейчас позволяет считать, что каждое новообразование обладает специфическими особенностями взаимодействия с клетками иммунной системы, зависящими от огромного количества факторов, характеризующих опухолевый процесс у конкретного индивидуума. Поэтому, накопление сведений, характеризующих особенности реакций иммунокомпетентных клеток на опухоль той или иной локализации в динамике процесса, является необходимым этапом для разработки иммуногенетических методов лечения злокачественного новообразования и, как следствие, к повышению выживаемости онкологических больных.

Выводы

1. Вакцинотерапия на основе немодифицированных и геномодифицированных опухолевых клеток, а также костно-мозговых предшественников дендритных клеток является эффективным методом биотерапии и оказывает клинически значимый противоопухолевый эффект у 46,2% больных распространенными солидными опухолями (полный и частичный регресс - 5,9%, минимальный регресс и стабилизация опухолевого процесса - 40,2%).

2. Противоопухолевая вакцинотерапия хорошо переносится больными и не вызывает тяжелых местных и общих токсических реакций. Осложнения 1-2 степени отмечены у 57,1% пациентов.

3. Введение генетически модифицированной вакцины и вакцины на основе дендритных клеток сопровождается развитием гиперчувствительности замедленного типа у 79% больных, “bystander effect” - у 10%, иммунологическим ответом в лабораторных тестах in vitro - у 95%, клиническим ответом - у 42%, средней продолжительностью 6 мес.

4. Вакцинотерапия немодифицированными аутологичными опухолевыми клетками с иммунологическим адъювантом BCG или IL-1? обеспечивает иммунологический ответ у 90% пациентов, однако, объективный регресс опухоли достигается только у 5% больных средней продолжительностью 6,4 мес.

5. Внутрикожное введение вакцины на основе дендритных клеток имеет преимущество перед внутривенным, так как не вызывает выраженных побочных эффектов и сопровождается клиническим ответом у 66,7% больных, средней продолжительностью 5 мес.

6. Адъювантная вакцинотерапия немодифицированными опухолевыми клетками больных меланомой кожи и раком почки с высоким риском рецидива опухоли сопровождается иммунологическим эффектом у 98% пациентов и позволяет достичь медианы безрецидивной выживаемости в 39,6 мес.

7. Специфическое влияние вакцинотерапии в лабораторных тестах in vitro выявлено у 95% обследованных пациентов. Это может быть связано с увеличением абсолютного содержания CD3+ и CD8+ цитотоксических Т-лимфоцитов (р<0,01), снижении количества функционально неполноценных Т-лимфоцитов (р<0,02), устранении дисбаланса основных иммунорегуляторных субпопуляций лимфоцитов (р<0,04).

Практические рекомендации

1. При планировании лечения больных диссеминированной меланомой кожи и метастатическим раком почки целесообразно рассматривать возможность использования вакцинотерапии.

2. Вакцинотерапия может рассматриваться как метод адъювантной терапии больных меланомой кожи и раком почки с высоким риском рецидива заболевания.

3. Вакцины на основе костно-мозговых ДК рекомендуется вводить внутрикожно.

4. Обязательным условием вакцинотерапии злокачественных опухолей является клинический и иммунологический мониторинг больных.

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации

1. Балдуева И.А., Моисеенко В.М., Хансон К.П. Дендритные клетки: происхождение, созревание, функциональная активность // Материалы II съезда иммунологов России, Сочи, 1999.-- C.37

2. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Хансон К.П., Орлова Р.В., Проценко С.А., Семенова А.И., Ермакова Н.А., Михайличенко Т.Д., Старикова Э.А., Ржевцева Т.А., Мухина М.С., Щекина Л.А. Активная специфическая иммунотерапия предшественниками дендритных клеток больных злокачественными опухолями // Материалы II съезда иммунологов России, Сочи, 1999.-- C.252

3. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Хансон К.П., Орлова Р.В., Ржевцева Т.А., Семенова А.И., Мухина М.С., Щекина Л.А., Ермакова Н.А., Проценко С.А., Михайличенко Т.Д., Старикова Э.А. Иммунотерапия аутологичными вакцинами больных злокачественными опухолями // Материалы II съезда иммунологов России, Сочи, 1999.-- C.338

4. Балдуева И.А., Моисеенко В.М., Хансон К.П. Система дендритных клеток и её роль в регуляции функциональтной активности Т- и В-лимфоцитов человека // Вопр. онкол.--1999. Т.45 (5).--C. 473--483

5. Балдуева И.А., Моисеенко В.М., Хансон К.П. Противоопухолевые дендритные вакцины // Материалы Европейской школы по онкологии, Москва, 1999.--С.25--28

6. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Хансон К.П. Вакцинотерапия больных солидными опухолями // Вопр. онкол.--1999. Т.45 (3).--С.327--332

7. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Хансон К.П., Орлова Р.В., Проценко С.А., Семенова А.И., Кочнев В.А., Щукин В.В., Гафтон Г.И., Воробьев А.В., Петров В.Г., Михайличенко Т.Д., Ермакова Н.А., Старикова Э.А., Ржевцева Т.А., Щекина Л.А. Применение активной специфической иммунотерапии аутологичными предшественниками дендритных клеток у больных солидными опухолями // Тезисы III ежегодной Российской онкологической конференции. -- СПб., 1999.--С.191--192

8. Тоталян А.А., Балдуева И.А., Бубнова Л.Н., Закревская А.В., Зуева Е.Е., Калинина Н.М., Лисицина З.Н. Стандартизация методов иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга человека // Мед. иммунология.--1999. Т.1 (5).-- C.21--43

9. Балдуева И.А., Моисеенко В.М., Хансон К.П. Система дендритных клеток и ее роль в регуляции функциональной активности Т- и В-лимфоцитов человека // Материалы III научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге'99», CПб., 1999 // Мед. иммунология.--1999. Т.1 (3--4).--С.8

10. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Хансон К.П. Клинические аспекты современной биотерапии у больных злокачественными опухолями // Материалы IV научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге'2000», СПб, 2000 // Мед. иммунология.--2000. Т.2 (2).--С.225--226

11. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Хансон К.П., Орлова Р.В., Проценко С.А., Семенова А.И., Солдатенков В.Е., Кочнев В.А., Щукин В.В., Гафтон Г.И., Воробьев А.В., Петров В.Г., Сердюк О.П., Михайличенко Т.Д., Ермакова Н.А., Старикова Э.А., Ржевцева Т.А., Щекина Л.А. Лечебные противоопухолевые вакцины на основе дендритных клеток // Материалы IV научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге'2000», СПб., 2000 // Мед. иммунология.--2000. Т.2 (2).--С.226--227

12. Балдуева И.А. Вакцины на основе дендритных клеток в лечении злокачественных опухолей // Материалы V Российской онкологической конференции, Москва, 2001.--С. 55--56

13. Балдуева И.А. Иммунологические особенности взаимоотношения опухоли и организма при меланоме кожи // Практ. онкол.--2001.--Т. 4(8).--С.37--41

14. Балдуева И.А., Моисеенко В.М., Хансон К.П. Иммунология опухолей: достижения, перспективы // Материалы V научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге'2001», СПб., 2001 // Мед. иммунология.--2001. Т.3 (2).--С.263

15. Моисеенко В.М., Хансон К.П., Балдуева И.А. Современная биотерапия солидных опухолей // Сборник докладов I Международного конгресса «Новые медицинские технологии», СПб., 2001.--С.81--83

16. Моисеенко В.М., Орлова Р.В., Балдуева И.А., Антимоник Н.Ю. Применение интерферона-альфа в лечении онкологических больных // Пособие для врачей, 2001.--17 с.

17. Тоталян А.А., Балдуева И.А., Бубнова Л.Н. и др. Стандартизация методов иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга человека. Часть 1. Доаналитический этап. Часть 2. Метод непрямой иммунофлюоресценции / Тотолян А.А., Балдуева И.А., Бубнова Л.Н. и др. // Клин. лаб. диагностика.-- 2001. № 8.-- С.38--45

18. Балдуева И.А. Особенности формирования противоопухолевого иммунного ответа при меланоме // Материалы VI научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге'2002», СПб., 2002 // Мед. иммунология.--2002. Т.4 (2).--С.290

19. Балдуева И.А. Противоопухолевые вакцины на основе дендритных клеток. Опыт НИИ онкологии им.проф.Н.Н.Петрова // Материалы I Всероссийской научно-практической конференции «Биотерапия рака», Москва, 2002.--С.10--12

20. Балдуева И.А. Роль цитокинов в онкогенезе // Материалы международной научно-практической конференции «Цитокины. Воспаление. Иммунитет», СПб., 2002.--С.158

21. Данилов А.О., Данилова А.Б., Балдуева И.А., Моисеенко В.М. Современные технологии получения противоопухолевых вакцин // Материалы I Всероссийской научно-практической конференции «Биотерапия рака», Москва, 2002.--С.26--27

22. Моисеенко В.М., Орлова Р.В., Балдуева И.А., Михайличенко Т.Д., Савина И.А., Антимоник Н.Ю. Применение Интерлейкина-2 в лечении онкологических больных // Пособие для врачей, СПб, 2002.--16 с.

23. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Орлова Р.В., Семёнова А.И., Данилов А.О., Данилова А.Б., Проценко С.А., Михайличенко Т.Д., Щёкина Л.А., Улейская Г.И., Хансон К.П. Активная специфическая иммунотерапия аутологичными предшественниками дендритных клеток больных диссеминированной меланомой кожи, раком почки и толстой кишки. Опыт НИИ онкологии им.проф.Н.Н.Петрова // Тезисы конференции «Проблемы онкоиммунологии: научные и прикладные аспекты». Онкология.--2003. Т.5 (2).--С.175--176

24. Моисеенко В.М., Данилов А.О., Ларин С.С., Балдуева И.А., Киселёв С.Л., Щёкина Л.А., Барчук А.С., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Хансон К.П. Активная специфическая иммунотерапия с помощью вакцин на основе аутологичных модифицированных опухолевых клеток у больных диссеминированной меланомой кожи и метастатическим раком почки // Тезисы конференции «Проблемы онкоиммунологии: научные и прикладные аспекты» // Онкология.--2003. Т.5 (2).--С.176

25. Щёкина Л.А., Балдуева И.А., Моисеенко В.М., Хансон К.П., Орлова Р.В., Проценко С.А., Семёнова А.И., Данилов А.О., Данилова А.Б., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Щукин В.В., Барчук А.С., Анисимов В.В., Моисеенко В.М., Улейская Г.И. Динамика иммунологических показателей в процессе активной специфической иммунотерапии больных с солидными опухолями // Тезисы конференции «Проблемы онкоиммунологии: научные и прикладные аспекты» // Онкология.--2003. Т.5 (2).--С.176

26. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Данилов А.О., Щёкина Л.А., Орлова Р.В., Семёнова А.И., Проценко С.А., Михайличенко Т.Д., Кочнев В.А., Гафтон Г.И., Молчанов О.Е., Хансон К.П. Иммунотерапия аутологичными предшественниками дендритных клеток больных диссеминированной меланомой кожи и метастатическим раком почки: опыт НИИ онкологии им.проф.Н.Н.Петрова // Материалы VII Всероссийского форума с международным участием им. акад. Иоффе В.И. «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге», СПб., 2003 // Мед. иммунология.--2003. Т.5 (3-4).--С.359--360

27. Щёкина Л.А., Балдуева И.А., Моисеенко В.М., Данилов А.О., Данилова А.Б., Улейская Г.И., Хансон К.П. Динамика иммунологических показателей в процессе активной специфической иммунотерапии больных солидными опухолями // Материалы VII Всероссийского форума с международным участием им. акад. Иоффе В.И. «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге», СПб., 2003 // Мед. иммунология.--2003. Т.5 (3-4).--С.370--371

28. Моисеенко В.М., Данилов А.О., Балдуева И.А., Ларин С.С., Данилова А.Б., Семёнова А.И., Щёкина Л.А., Киселёв С.Л., Барчук А.С., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Молчанов О.Е., Хансон К.П. Применение вакцин на основе аутологичных генетически модифицированных опухолевых клеток для лечения больных диссеминированной меланомой кожи и метатстатическим раком почки // Материалы VII Всероссийского форума с международным участием им. акад. Иоффе В.И. «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге», 23-26 июня 2003 // Мед. иммунология.--2003. Т.5 (3-4).--С.360--361

29. Балдуева И.А. Противоопухолевые вакцины // Практ. онкол.--2003. Т.4(3).--С.157--166

30. Hanson K.P., Moiseyenko VM, Baldueva IA, Orlova R,Semenova A, Protcenko S, Mikhajlichenko T, Danilov A, Danilova A Active specific immunotherapy of advanced malignant melanoma, renal and colon cancer with using autologous dendritic cell precursors // Proc.book 14th Inter Congress on anti-Cancer Treatment, 2003.--P.236

31. Данилов А.О., Ларин С.С., Данилова А.Б, Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Киселев С.Л., Барчук А.С., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Хансон К.П. Оптимизация метода приготовления вакцин на основе аутологичных генетически модифицированных опухолевых клеток для лечения больных диссеминированной меланомой кожи // Рос. Биотер. Журнал.--2003. Т.2 (3).--С.47--53

32. Данилов А.О., Ларин С.С., Данилова А.Б., Моисеенко В.М. Балдуева И.А., Киселёв С.Л., Туркевич Е.А., Барчук А.С., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочненв В.А., Хансон К.П. Усовершенствование методжа приготовления аутологичных модифицированных противоопухолевых вакцин для активной специфической иммунотерапии больных с диссеминированными солидными опухолями // Вопр. онкол.--2004. Т.50 (2).--С.219--227

33. Моисеенко В.М., Данилов А.О., Ларин С.С., Данилова А.Б., Балдуева И.А., Тюкавина Н.В., Киселев С.Л., Семенова А.И., Орлова Р.В., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Барчук А.С., Канаев С.В., Хансон К.П., Георгиев Г.П. Генотерапия больных диссеминированными солидными опухолями на основе аутологичных опухолевых клеток, модифицированных геном TAG7 // Материалы III съезда ВОГиС «Генетика в ХХI веке: современное состояние и перспективы развития», Москва, 2004.--С.34

34. Моисеенко В.М., Данилов А.О., Балдуева И.А., Данилова А.Б., Тюкавина Н.В., Ларин С.С., Киселев С.Л., Орлова Р.В., Семенова А.И., Туркевич Е.А., Щекина Л.А., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Барчук А.С., Канаев С.В., Хансон К.П., Георгиев Г.П. I-II фаза клинической оценки эффективности генотерапии на основе аутологичных опухолевых клеток, модифицированных геном tag7 у больных с диссеминированными солидными опухолями // Вопр. онкол.-- 2004. Т.50 (3).--С.293--303

35. Хансон К.П., Моисеенко В.М., Балдуева И.А. Использование клеточных технологий в онкологии // Вестник Рос. Акад. Мед. Наук.--2004. №9.--С.58--61

36. Балдуева И.А., Данилова А.Б., Данилов А.О., Тюкавина Н.В., Семенова А.И., Орлова Р.В., Туркевич Е.А., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев А.В., Барчук А.С., Канаев С.В., Хансон К.П., Щекина Л.А., Моисеенко В.М. I-II фаза клинической оценки эффективности вакцинотерапии на основе аутологичных опухолевых клеток с иммунологически адъювантом интерлейкин-1? у больных меланомой кожи и раком почки // Материалы межрегиональной научно-практической конференции «Комбинированные и комплексные методы лечения в онкологии», Барнаул, 2004.--С.14--16

37. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Данилова А.Б. и др. Шестилетний опыт вакцинотерапии злокачественных опухолей // Мед. иммунология.--2004. Т.6 (3-5).--С.458

38. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Данилова А.Б., Данилов А.О., Тюкавина Н.В., Ларин С.С., Киселев С.Л., Орлова Р.В., Анисимов В.В., Семенова А.И., Щекина Л.А., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Барчук А.С., Канаев С.В., Хансон К.П., Георгиев Г.П. Генотерапия больных диссеминированной меланомой кожи и метастатическим раком почки с помощью аутологичных опухолевых клеток, модифицированных геном tag7 // Сибирский онкологический журнал.--2004. Т.2-3 (10-11).--С.55--65

39. Моисеенко В.М., Данилов А.О., Данилова А.Б., Балдуева И.А., Тюкавина Н.В., Орлова Р.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Анисимов В.В., Барчук А.С., Канаев С.В., Ларин С.С., Киселев С.Л., Георгиев Г.П., Хансон К.П. Применение генотерапии на основе аутологичных опухолевых клеток, модифицированных геном tag7, для лечения больных диссеминированной меланомой кожи и метастатическим раком почки // Материалы научно-практической конференции «Современное состояние и перспективы развития экспериментальной и клинической онкологии», Томск, 2004.--С.140--141

40. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Данилов А.О. и др. Получение дендритных клеток из костно-мозговых предшественников у больных диссеминированными злокачественными опухолями // Материалы конференции «Стволовые клетки, регенерация, клеточная терапия», СПб., 2004.--С.930

41. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Данилов А.О., Тюкавина Н.В., Семенова А.И., Орлова Р.В., Туркевич Е.А., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Барчук А.С., Канаев С.В., Хансон К.П., Щекина Л.А. I-II фаза клинической оценки эффективности вакцинотерапии на основе аутологичных опухолевых клеток с иммунологическим адъюванто интерлейкин-1? у больных меланомой кожи и раком почки // Рос. онкол. журнал.--2004. №6.--С.12--18

42. Хансон К.П., Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Данилов А.О., Данилова А.Б. Вакцинотерапия злокачественных опухолей // Материалы III съезда онкологов и радиологов СНГ, Минск, 2004.-- С.420

43. Данилов А.О., Данилова А.Б., Ларин С.С., Балдуева И.А., Бычкова Н.В., Киселев С.Л., Колосов М.Л., Канаев С.В., Моисеенко В.М., Хансон К.П. Оптимизация методов получения культур клеток меланоы кожи и рака почки для приготовления аутологичных и аллогенных противоопухолевых вакцин // Материалы VIII Всероссийского форума с международным участием им. акад. Иоффе В.И. «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге», СПб., 2004 // Мед. иммунология.--2004. Т.6 (3-5).--С.445--446

44. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Данилов А.О., Данилова А.Б., Орлова Р.В., Тюкавина Н.В., Семенова А.И., Киселев С.Л., Ларин С.С., Щекина Л.А., Улейская Г.И., Проценко С.А., Барчук А.С., Анисиов В.В. Шестилетний опыт вакцинотерапии злокачественных опухолей // Материалы VIII Всероссийского форума с международным участием им. акад. Иоффе В.И. «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге», СПб., 2004 // Мед. иммунология.--2004. Т.6 (3-5).--С.458

45. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Щекина Л.А., Тюкавина Н.В., Данилова А.Б., Данилов А.О., Орлова Р.В., Семенова А.И., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Барчук А.С., Пожарисский К.М., Канаев С.В., Хансон К.П. I/II фаза клинической эффективности эффективности вакцинотерапии на основе аутологичных опухолевых клеток в сочетании с адъювантом BCG у больных диссеминированными солидными опухолями // Рос. Биотер. Журнал.--2005. Т.4 (3).- С.122--130

46. Моисеенко В.М., Данилов А.О., Данилова А.Б., Ларин С.С., Тюкавина Н.В., Балдуева И.А., Киселев С.Л., Орлова Р.В., Туркевич Е.А., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Барчук А.С., Канаев С.В., Хансон К.П., Георгиев Г.П. Применение аутологичных вакцин на основе цельных опухолевых клеток, модифицированных геном tag7, для лечения больных диссеминированной меланомой кожи и метастатическим раком почки // Материалы IV Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Отечественные противоопухолевые препараты», Москва, 2005 // Рос. биотер. журнал.--2005. Т.4 (1).-- С.14--15

47. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Данилова А.Б., Данилов А.О., Тюкавина Н.В., Семенова А.И., Орлова Р.В., Проценко С.А., Киселев С.Л., Ларин С.С., Щекина Л.А., Улейская Г.И., Барчук А.С., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Канаев С.В., Хансон К.П., Георгиев Г.П. Эффективность вакцинотерапии меланомы кожи // Материалы научно-практической конференции онкологов СЗФО «Меланома кожи. Современное состояние диагностики и лечения», Вел. Новгород, 2005.-- С.49--52

48. Моисеенко В.М., Балдуева И.А.,. Данилова А.Б., Данилов А.О., Тюкавина Н.В., Орлова Р.В., Туркевич Е.А., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Барчук А.С., Канаев С.В., Хансон К.П. Оценка клинической эффективности вакцин на основе аутологичных опухолевых клеток с иммунологическим адъювантом интерлейкин-1 у больных меланомой кожи и раком почки // Материалы IX Всероссийского форума с международным участием им.акад.Иоффе В.И. “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге”, СПб., 2005 // Мед. иммунология.--2005. Т.7 (2-3).--С.205--206

49. Данилова А.Б., Данилов А.О., Бычкова Н.В., Туркевич Е.А., Балдуева И.А., Моисеенко В.М. Изучение экспрессии антигенов и пролиферативной активности клетками меланомы кожи, культивируемых для приготовления противоопухолевых вакцин // Материалы I Российско-американской конференции «Биотехнология и онкология», СПб., 2005 // Сб.тезисов. --С.96--98

50. Данилов А.О., Данилова А.Б., Ларин С.С., Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Киселев С.Л., Барчук А.С., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Канаев С.В., Хансон К.П., Георгиев Г.П. Оптимизация методов приготовления генетически модифицированных вакцин для лечения диссеминированной меланомы кожи и метастатического рака почки // Материалы I Российско-американской конференции «Биотехнология и онкология», СПб., 2005 // Сб.тезисов. --С.98--99

51. Моисеенко В.М., Данилов А.О., Тюкавина Н.В., Балдуева И.А., Киселев С.Л., Ларин С.С., Орлова Р.В., Туркевич Е.А., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Барчук А.С., Канаев С.В., Хансон К.П., Георгиев Г.П. Исследование эффективности аутологичных вакцин на основе цельных опухолевых клеток, модифицированных геном tag7, у больных диссеминированной меланомой кожи и раком почки // Материалы I Российско-американской конференции «Биотехнология и онкология», СПб., 2005 // Сб.тезисов. --С.119--120

52. Балдуева И.А., Моисеенко В.М., Данилов А.О., Данилова А.Б., Тюкавина Н.В., Щекина Л.А., Семенова А.И., Орлова Р.В., Проценко С.А., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., К.П.Хансон. Приготовление вакцин на основе аутологичных костно-мозговых предшественников дендритных клеток для лечения больных злокачественными опухолями // Материалы I Российско-американской конференции «Биотехнология и онкология», СПб., 2005 // Сб.тезисов. -- С.118--119

53. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Данилова А.Б., Данилов А.О., Орлова Р.В., Тюкавина Н.В., Семенова А.И., Киселев С.Л., Ларин С.С., Щекина Л.А., Улейская Г.И., Проценко С.А., Анисимов В.В., Барчук А.С., Кочнев В.А., Канаев С.В., Хансон К.П., Георгиев Г.П. Семилетний опыт вакцинотерапии злокачественных опухолей // Материалы Российской научно-практической конференции с международным участием «Новые технологии в онкологической практике», Барнаул, 2005. --С.91--92

54. Данилова А.Б., Данилов А.О., Туркевич Е.А., Балдуева И.А., Моисеенко В.М. Особенности антигенной экспрессии клеток меланомы кожи, культивируемых для приготовления противоопухолевых вакцин// Материалы Российской научно-практической конференции с международным участием «Новые технологии в онкологической практике», Барнаул, 2005. --С.218

55. Moiseyenko V.M., Baldueva I.A., Danilov A.O., Danilova A.B. Xenovaccination of patients with skin melanoma: phase II clinical trial // The 6th World Congress on Melanoma, Vancouver, Canada, 2005. -- Р.24

56. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Данилова А.Б. Иммунотерапия опухолей: результаты клинических исследований // Immune-mediated diseases from theory to therapy, Moscow, 2005 // J. Association Pediatric Allergists & Immunologists of Russia. -- 2005. Vol.6. -- P.259--260

57. Moiseyenko V.M., Danilov A.O., Baldueva I.A., Tyukavina N.V., Larin S.S., Kiselev S.L., Orlova R.V., Anisimov V.V., Semenova A.I., Shchekina L.A., Gafton G.I., Kochnev V.A., Barchuk A.S., Kanaev S.V., Hanson K.P., Georgiev G.P. Phase I/II Trial of Gene Therapy with the Autologous Tumor Cells Modified with the tag7/PGRP-S Gene in Patients with the Disseminated Solid Tumors // Ann. Oncol.--2005. Vol.16.--P.162--168

58. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Орлова Р.В., Семенова А.И. Патент на изобретение №2203683 Способ иммунотерапии костно-мозговыми дендритными клетками больных солидными опухолями. Приоритет от 20.09.2001. Зарегистрирован в Государственном реестре изобретений РФ, Москва , 10.05.2003

59. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Орлова Р.В., Семенова А.И., Симбирцев А.С.

Патент на изобретение № 2267326 «Способ иммунотерапии опухолевым лизатом с

адъювантом Беталейкин больных солидными опухолями». Зарегистрирован в Государственном реестре изобретений РФ, Москва , 10.01.2006.

60. Данилова А.Б., Данилов А.О., Туркевич Е.А., Бычкова Н.В., Балдуева И.А., Моисеенко В.М. Изучение антигенных и пролиферативных свойств опухолевых клеток в культуре для приготовления аллогенной вакцины меланомы кожи // Вопр. онкол.--2005. Т.51 (1).-- Р.8--9

61. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Данилова А.Б., Данилов А.О., Тюкавина Н.В., Семенова А.И., Орлова Р.В., Проценко С.А., Киселев С.Л., Ларин С.С., Щекина Л.А., Улейская Г.И., Барчук А.С., Анисимов В.В., Гафтон Г.И., Кочнев В.А., Канаев С.В., Хансон К.П., Геолргиев Г.П. Эффективность вакцинотерапии меланомы кожи // Материалы научно-практической конференции онкологов СЗФО «Меланова кожи. Современное состояние диагностики и лечения», СПб., 2005. --С.49--52

62. Moiseyenko V., Baldueva I., Danilov A., Danilova A. Xenovaccination of patients with skin melanoma: phase I/II clinical trial // Abstracts XXXIII Meeting of the International Society for Oncodevelopmental Biology and Medicine (ISOBM 2005), Rhodes, Greece. --Р.44, abst. 0-81