Экстрапинеальный мелатонин в процессе старения
Функционально-морфологические изменения пинеальной железы при старении у человека. Организация экстрапинеальных источников мелатонина при старении. Изучение возможности локальной продукции мелатонина в неэндокринных опухолях у пожилых и старых людей.
| Рубрика | Медицина |
| Вид | автореферат |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 23.01.2018 |
| Размер файла | 74,3 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Размещено на http://www.allbest.ru/
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
Экстрапинеальный мелатонин в процессе старения
14.00.53 - геронтология и гериатрия
доктора медицинских наук
Князькин Игорь Владимирович
Санкт-Петербург, 2008
Работа выполнена в отделе клеточной биологии и патологии Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии Северо-Западного отделения РАМН
Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор Кветной Игорь Моисеевич
Официальные оппоненты:
академик РАМН, доктор медицинских наук, профессор Корнева Елена Андреевна
заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Райхлин Натан Танфелевич
доктор медицинских наук, профессор Смирнов Олег Алексеевич
Ведущая организация: ФГУ «Российский научно-исследовательский институт геронтологии Росздрава»
Защита состоится «_____»_______________ 2008 г. в _____ часов на заседании диссертационного cовета Д 601.001.01 в Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН по адресу: 197110, Санкт-Петербург, пр. Динамо, д. 3.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН (197110, Санкт-Петербург, пр. Динамо, д. 3).
Автореферат разослан «_____»____________________2008 г.
Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент Козина Л.С.
Общая характеристика работы
Актуальность работы. Многочисленными исследованиями показано, что при старении происходит выраженная инволюция пинеальной железы (эпифиза) [Reiter R.J., 1999, 2003]. При этом установлено, что морфологические изменения, развивающиеся в эпифизе в процессе возрастной инволюции, неразрывно связаны с резким падением уровня продукции мелатонина (МТ) - основного гормона пинеальной железы, координирующего биологические ритмы организма на всех уровнях его организации [Анисимов В.Н., Рейтер Р. , 1990; Charman W.N. , 2003].
МТ является гормоном широкого спектра действия - он участвует в регуляции иммунной и эндокринной систем, обладает пролиферотропным действием, модулируя дифференцировку и апоптоз клеток, участвует в регуляции зрительной функции, снижает уровень холестерина, повышает сопротивляемость организма стрессам и высоким физическим нагрузкам, способствует нормализации кровяного давления и подавляет действие свободных радикалов [Арутюнян А.В. и др., 2003; Reiter R.J. et al., 1998, 2002]. Эти свойства позволяют рассматривать МТ как перспективный для детального изучения эндогенный гормональный фактор, обладающий геропротекторными свойствами.
Важную роль МТ в процессах старения отражает демонстрация существенного снижения уровня ночной экскреции MT с мочой, как у старых животных, так и у пожилых людей [Arendt J., 1995; Bartsch et al., 2001].
При пинеалэктомии (общепринятая модель преждевременного старения) наблюдается иммуносупрессия, сходная с таковой при естественном старении, которая снимается введением экзогенного МТ [Maestroni G., Konti A., 2002]. Определенное значение для увеличения вероятности аутоиммунных расстройств при старении имеет снижение продукции MT - гормона, обладающего антиканцерогенными и антиоксидантными свойствами, а также способного ограничивать возрастной гиперкортицизм, защищающего клетки иммунной и нервной системы от окислительного стресса.
Более половины всех мужчин старше 50 лет страдают опухолевыми заболеваниями простаты, что нарушает половую функцию и мочеиспускание. Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что MT предупреждает развитие доброкачественной гиперплазии предстательной железы и задерживает атрофию половых органов, что обычно происходит при старении мужского организма. Учитывая широкий спектр биологической активности МТ и особенно его свойств ключевого регулятора биологических ритмов и мощного природного антиоксиданта, МТ можно рассматривать как важнейший фактор регуляции жизненно важных функций организма. Поэтому уровень продукции MT в организме имеет принципиальное значение для обеспечения его жизнедеятельности в различные возрастные периоды. экстрапинеальный мелатонин старение опухоль
Твердо установлено, что пинеальная железа не является исключительным органом, способным продуцировать МТ [Raikhlin N.T. et al., 1975; Raikhlin N.T., Kvetnoy I.M., 1978; Bubenik G. et al., 1985; Kvetnoy I.M., 1999; 2002]. Многочисленными исследованиями показано, что экстрапинеальный МТ широко распространен в организме человека и животных: клетки, продуцирующие МТ, обнаружены в слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта и дыхательных путей, в поджелудочной железе, надпочечниках, щитовидной железе, тимусе, мозжечке, мочеполовой системе, плаценте и других органах. Более того, показана активная продукция МТ в неэндокринных клетках - тучных клетках, естественных киллерах, эозинофильных лейкоцитах, тромбоцитах, эндотелиоцитах [Кветной И.М., Райхлин Н.Т., 1996, 1998; Кветной И.М. и др., 2002; Kvetnoy I.M., 1999]. Такое широкое распространение МТ в организме отражает его ключевую роль как межклеточного нейроэндокринного регулятора и координатора многих сложных и взаимосвязанных биологических процессов.
При возрастной инволюции пинеальной железы происходит снижение концентрации МТ в организме, что, в свою очередь, влечет изменение каскада многих метаболических процессов и негативно отражается на функции многих органов и систем. Однако при этом сведения о возрастных структурно-функциональных изменениях экстрапинеальных источников МТ и особенностях секреции экстрапинеального МТ при старении отсутствуют, что ограничивает понимание роли и значения МТ и свидетельствует о необходимости исследований в этом направлении.
Фундаментальные исследования, предпринятые на молекулярном и клеточном уровнях, будут способствовать познанию механизмов старения и разработке эффективных методов диагностики, лечения и профилактики патологии, ассоциированной с возрастом.
Целью диссертационного исследования является установление роли и значения экстрапинеального мелатонина в процессах старения организма.
Для достижения указанной цели были поставлены и последовательно решены следующие задачи:
1) исследовать функционально-морфологические изменения пинеальной железы при старении у человека;
2) выявить структурно-функциональную организацию экстрапинеальных источников мелатонина при старении у человека и экспериментальных животных;
3) описать степень и характер изменений мелатонин-содержащих энтерохромаффинных клеток желудка в биоптатах слизистой оболочки желудка у людей пожилого и старческого возраста с различной патологией (заболевания желудка и кишечника, болезнь Паркинсона);
4) выявить связь характера изменений содержания мелатонина в клетках предстательной железы с развитием опухолей, ассоциированных с возрастом (доброкачественная гиперплазия предстательной железы и рак простаты);
5) изучить возможность локальной продукции мелатонина в неэндо-кринных опухолях у пожилых и старых людей и оценить значение этого феномена в процессах опухолевой прогрессии;
6) проанализировать нейроэндокринные аспекты участия мелатонина в процессах старения и патогенезе заболеваний, ассоциированных с возрастом.
Научная новизна и теоретическая значимость работы. Проведенные исследования позволили установить, что при естественном старении у человека, так же как в различных моделях преждевременного и ускоренного старения (пинеалэктомия и облучение сублетальными дозами), у животных наблюдаются изменения структурно-функциональной организации пинеальной железы и экстрапинеальных МТ-содержащих клеток.
Впервые установлено, что в то время как уровень секреции пинеального МТ прогрессивно снижается с возрастом, экстрапинеальная экспрессия МТ в различных органах стабильно сохраняется до 60 лет и только у более старых людей достоверно снижается. При этом наиболее устойчива в структурно-функциональном отношении популяция МТ-содержащих клеток бронхиального эпителия и надпочечников. Показано достоверное снижение накопления МТ в иммунокомпетентных клетках, сопровождающееся нарушением их структурно-функциональной организации.
Проведенные исследования показали неодинаковую реакцию гастроинтестинальных МТ-содержащих клеток в различных моделях старения, что свидетельствует о возможности активного участия экстрапинеального МТ в возрастной инволюции органов и тканей и компенсации нарушенных физиологических процессов при разных способах инициации старения.
Впервые получены данные о динамике распределения меченого МТ и антител к нему в организме молодых и старых животных. Установлены ключевые органы-мишени МТ и время поглощения МТ их паренхимой.
Детально описано морфофункциональное изменение экстрапинеальных источников МТ при заболеваниях, ассоциированных с возрастом, и опухолях различной локализации у пожилых и старых людей.
Теоретическая значимость исследования состоит в том, что оно существенно расширяет современные представления о нейроиммуноэндокринологии и геронтологии для понимания изменения структуры и функции пинеальной железы и значимости экстрапинеальных МТ-содержащих клеток при старении.
Практическая ценность работы. Впервые установлены диагностически и прогностически значимые изменения функциональной активности экстрапинеальных МТ-содержащих клеток при различной патологии у пациентов пожилого и старческого возраста (заболевания желудочно-кишечного тракта, нейродегенеративные процессы, опухолевый рост), позволяющие проводить оценку прогноза и выбор терапии, оптимизирующей нарушенные нейроиммуноэндокринные взаимодействия, усугубляющие течение патологического процесса при старении.
Установлено, что локальное нарушение синтеза МТ нейроэндокринными клетками простаты является важным патогенетическим фактором развития возрастных гиперпластических процессов в предстательной железе.
В злокачественных эпителиальных (раковых) опухолях гортани, легких, желудка и толстой кишки обнаружена эктопическая секреция МТ в клетках, локализованных в ткани опухоли. Установлено, что по мере прогрессии опухолей содержание МТ в опухолях снижается, достигая минимальных значений при распространенных метастазах, что может явиться информативным прогностическим маркером опухолевого процесса.
Выявление ключевых органов-мишеней МТ и определение времени его поглощения органами и выведения из организма может явиться предпосылкой для разработки геропротекторных лекарственных препаратов на основе МТ.
Положения, выносимые на защиту:
1. Экстрапинеальная популяция мелатонин-содержащих клеток сохраняет относительную структурно-функциональную стабильность в пожилом возрасте, что обусловливает возможность участия мелатонина в осуществлении регуляции физиологических процессов в стареющем организме, несмотря на выраженную инволюцию пинеальной железы.
2. Мелатонин-содержащие клетки являются важным звеном в нейро-иммуноэндокринных процессах старения организма.
3. Локальное нарушение продукции мелатонина нейроэндокринными клетками простаты является важным патогенетическим фактором развития возрастных гиперпластических процессов в предстательной железе.
4. Количество мелатонин-содержащих клеток в неэндокринных злокачественных опухолях коррелирует со степенью прогрессии опухолей и помогает прогнозировать развитие заболевания у пожилых и старых людей.
5. Структурно-функциональные изменения экстрапинеальных мелатонин-содержащих клеток являются важным компонентом в патогенезе соматических заболеваний, ассоциированных с возрастом.
Апробация диссертации. Основные результаты и положения диссертационной работы доложены и обсуждены на VI Научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге - 2002» (Санкт-Петербург, 2002), ХII Всероссийской конференции «Нейроиммунология» (Санкт-Петербург, 2003), XIII Европейском конгрессе по микроскопии (Антверпен, Бельгия, 2004), XII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2005), II Российском симпозиуме по химии и биологии пептидов (Санкт-Петербург, 2005), VI Международной конференции по нейроиммуномодуляции (Афины, Греция, 2005), II Всероссийской научно-практической конференции «Общество, государство и медицина для пожилых больных и инвалидов» (Москва, 2005), IV Национальном конгрессе геронтологов и гериатров Украины (Киев, 2005), II Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность» (Москва, 2005), XIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2006), Всероссийской конференции «Актуальные вопросы внутренних болезней» (Санкт-Петербург, 2006), II Международном экологическом симпозиуме (Полоцк, 2006), VII Международном симпозиуме «Биологические механизмы старения» (Харьков, 2006); Конференции «Перспективы фундаментальной геронтологии» (Санкт-Петербург, 2006), II Научно-практической конференции с международным участием по геронтологии и гериатрии, посвященной памяти Э.С. Пушковой (Санкт-Петербург, 2006).
Реализация результатов исследования. Результаты исследований изложены в двух главах «Руководства по нейроиммуноэндокринологии» (М., Медицина, 2006), которое рекомендовано Департаментом образования Минздравсоцразвития РФ в качестве учебника для студентов медицинских вузов. Они также используются в научной, педагогической и практической деятельности Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН, Санкт-Петербургского государственного университета, Института физиологии им. И.П. Павлова РАН, Медицинского радиологического научного центра РАМН, Института иммунологии ФМБА РФ, Российского онкологического научного центра им. Н.Н. Блохина РАМН, НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта РАМН.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 37 научных работ,
в том числе 11 статей, из них 8 статей в журналах по перечню ВАК Минобрнауки РФ, монографий - 5, глав в руководстве - 2, тезисов докладов - 19.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 4 глав результатов собственных исследований, главы обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы. Текст диссертации изложен на 244 страницах, содержит 13 таблиц и иллюстрирован 57 рисунками. Список литературы содержит 367 источников, из которых на русском языке - 95, на иностранных языках - 272.
Основное содержание работы
Пинеальная железа и экстрапинеальные источники МТ в висцеральных органах. Для изучения функциональной морфологии пинеальной железы и экстрапинеальных источников МТ при старении человека было проведено исследование образцов пинеальной железы, различных отделов желудочно-кишечного тракта, поджелудочной железы, надпочечников, предстательной железы, полученных как при аутопсиях, так и в процессе проведения диагностических биопсийных исследований. Были изучены образцы биоптатов различных органов, полученные от 175 человек мужского пола в возрасте от 16 до 84 лет.
Плацента. Объектом для изучения накопления МТ в плаценте человека и оценки его роли в старении плаценты был избран ворсинчатый хорион 57 доношенных и 14 переношенных плацент, полученных при родах в родильном отделении НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта РАМН у женщин разного возраста. Для исследования были отобраны плаценты первородящих женщин со срочными родами без осложнений. Материал был распределен по возрастам женщин на 5 групп (<18, 18-28, 29-35, 36-40 и >40 лет). В качестве группы сравнения была выбрана группа 2 - плаценты женщин нормального репродуктивного возраста (возраст от 18 до 28 лет).
Естественные киллеры (NK-клетки). NK-клетки были получены путем центрифугирования в градиенте фиколла. Для этого гепаринизированную кровь доноров (возраст 27-36 лет) или крыс линии Вистар (возраст 4 мес.) отстаивали в течение 50 мин для получения плазмы. Иммуногистохимическому и электронно-микроскопическому изучению подвергались как лимфоциты отдельных доноров, так и инкубированные совместно лимфоциты от разных доноров в течение 4 ч при температуре
+37 °С. Цель совместного инкубирования заключалась в провокации взаимодействия NK-клеток, принадлежащих разным донорам.
Эндотелий. Объектом исследования были избраны капилляры органов с хорошо развитой системой кровоснабжения (печени, селезенки, костного мозга) крыс линии Вистар.
Модель ускоренного (радиационного) старения. Исследование проведено на 40 самцах белых крыс линии Вистар массой 180-200 г. Все животные были разделены на 4 группы: 1 и 1а - интактные крысы; 2 и 2а - облученные крысы. Гамма-облучение выполнено на аппарате ЛУЧ-1 (источник 60Со; мощность дозы 17,16610-4 Гр/с). Животные получали ежедневную дозу 1,25 Гр в течение 5 дней. Животных 1 и 2-й групп выводили из опыта на 14-е сутки от начала облучения, а 1а и 2а групп - на 21-е сутки от начала облучения.
Модель преждевременного старения (пинеалэктомия). Исследование проведено на 40 самцах крыс линии Вистар в возрасте 3 мес., имеющих массу тела 130-140 г. Все животные были разделены на 2 группы по 20 особей. 1-я группа (контроль) была представлена интактными животными. У животных
2-й группы была произведена операция по удалению пинеальной железы - пинеалэктомия (ПЭ). Забой животных проводили на 30-е сутки после пинеалэктомии. Для изучения брали кусочки из зон наибольшего скопления энтерохромаффинных (ЕС) клеток - из пилорического и фундального отделов желудка.
Нокаутная линия мышей. Изучение МТ-иммунореактивных ЕС-клеток и взаимосвязи их поведения с пролиферацией и апоптозом эпителиоцитов при моделировании старения было выполнено на 48 эутимических мышах линии BALB/c-nu, полученных из Итальянского национального центра по изучению старения - INRCA, Анкона.
Были исследованы три группы животных различного возраста: 4, 21 и 34 мес. Буквы nu в названии линии животных указывают на наличие рецессивной мутации, введенной инбредным мышам линии BALB/c, путем их скрещивания с атимическими «обнаженными» (nu/nu) мышами. Термином BALB/c-nu была названа популяция, полученная из гетерозиготных и гомозиготных эутимических мышей.
Объектом исследования служили образцы слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки.
Исследована также динамика аккумуляции 3H-MT у старых мышей-самцов в органах желудочно-кишечного тракта, в сердце, в плазме крови, эндокринных железах, моче и фекалиях.
Методология изучения экстрапинеального накопления мелатонина при различных заболеваниях в пожилом и старческом возрасте. Исследования проведены на биоптатах слизистой оболочки желудка, полученных при диагностической биопсии из антрального отдела у 84 пациентов, а также на биоптатах слизистой оболочки толстой кишки, полученных при колоноскопии у 52 больных пожилого и старческого возраста (60-89 лет), страдающих хроническим гастритом, язвенной болезнью желудка, хроническим колитом, болезнью Крона, раком толстой кишки.
Кроме того, была сформирована отдельная группа больных для изучения количества ЕС-клеток желудка при болезни Паркинсона (26 человек в возрасте от 63 до 87 лет), у которых при исследовании гастробиоптатов не было обнаружено серьезной самостоятельной патологии органов пищеварения.
Для исследования предстательной железы были использованы образцы, полученные при биопсии или операции от 48 больных с доброкачественной гиперплазией предстательной железы (ДГПЖ) в возрасте старше 50 лет и от 32 больных раком предстательной железы (рак ПЖ) в возрасте старше 50 лет. В контрольной группе исследовался аутопсийный материал (предстательная железа), полученный от 22 мужчин в возрасте 25-69 лет, погибших от разных причин и не имевших патологии простаты.
Исследована также динамика аккумуляции 3Н-МТ у старых мышей-самцов в органах желудочно-кишечного тракта, сердце, плазме крови, эндокринных железах, моче и фекалиях.
Методология изучения содержания мелатонинсодержащих клеток в неэндокринных злокачественных опухолях у пациентов пожилого и старческого возраста. Для изучения количества и площади мелатонинсодержащих клеток в неэндокринных опухолях использовали биоптаты, полученные от 182 больных со злокачественными опухолями (мужчин - 101, женщин - 81): гортани (32), легких (23), желудка (44), толстой кишки (30), прямой кишки (53), диагностированных у пациентов пожилого и старческого возраста (60-89 лет). До проведения гистохимических, иммуногистохимических и электронно-микроскопических исследований во всех случаях производили патогистологическую верификацию опухолей согласно классификациям ВОЗ.
Гистологические и гистохимические методы. Материал фиксировали 10% нейтральным формалином (рН=7,2) и в жидкости Буэна. Парафиновые срезы (4-5 мкм) помещали на предметные стекла, покрытые пленкой из поли-L-лизина (Sigma). Гистологические и гистохимические исследования включали окраску гематоксилином-эозином, по Ван Гизону, толуидиновым синим, альциановым синим, аргирофильный метод Гримелиуса, аргентаффинный метод Массона.
Иммуногистохимические методы. Для изучения содержания МТ использовали кроличьи поликлональные специфические антитела к МТ, N-ацетилсеротонину и мексамину (все CIDtech. Res. Inc., титр 1:150) и серотонину (Dako, титр 1:200).
Пролиферативную активность клеток изучали с применением мышиных моноклональных антител к PCNA (клон РС10, Calbiochem, титр 1:50). Реакцию верифицировали АБП наборами для выявления кроличьих или мышиных иммуноглобулинов (Vectastain).
При иммунофлуоресцентной визуализации после инкубации с первыми антителами срезы промывали ФРК, наносили биотинилированные антитела к иммуноглобулинам животного-донора первых антител или антитела, связанные с флуорохромом (изотиоцианат флуоресцеина или родамин G) и инкубировали соответственно протоколам коммерческих наборов (Dako).
Электронно-микроскопическое исследование проводили на материале, фиксированном в 2,5% глутаральдегиде с последующей дофиксацией 4% осмием. Материал заливали в смесь эпонов. Срезы (250-300 Е), полученные на ультратоме LKB-7A, контрастировали уранил-ацетатом и цитратом свинца, после чего изучали в электронном микроскопе JEM-100B (Jeol).
Радиоавтография. МТ, меченный тритием, был получен в лаборатории радиоактивных препаратов Медицинского радиологического научного центра РАМН. Исследования проводили с использованием самцов мышей в возрасте 3 мес. (молодые животные) с массой тела 18 г и в возрасте 18 мес. (старые животные) с массой тела 22 г. Для исследования характера распределения 3Н-МТ по органам и тканям интактных животных МТ вводили из расчета 3,7 мБк/г массы животного. Животных декапитировали через 5, 15, 30 мин, 1, 3, 6 ч и 1 сут. После введения кровь и органы радиометрировали на сцинтилляционном счетчике. Также было изучено перераспределение антител к МТ (АтМ). Специфичность иммунологической активности АтМ проверяли иммунопероксидазным методом на препаратах эпифиза и тонкой кишки интактных животных по положительной реакции пинеалоцитов и ЕС-клеток, являющихся основным местом продукции МТ, с АтМ. 125I-АтМ вводили в хвостовую вену в количестве 3,7 мБк/г массы животного. Животных декапитировали через 3, 6, 24 и 72 ч после введения 125I-АтМ, отбирали кровь, выделяли органы и ткани для радиометрии. Для оценки накопления 125I-АтМ в органах и тканях использовали тот же коэффициент дифференциального накопления (КДН), что и для МТ.
Морфометрия и компьютерный анализ микроскопических изображений. Морфометрические исследования выполнены с помощью системы компьютерного анализа микроскопических изображений Nikon с применением прикладной компьютерной лицензионной программы анализа микроскопических изображений Videotest Morpho-4 согласно основным принципам стереологии и морфометрии.
Статистическая обработка результатов. Результаты исследований обрабатывали с помощью компьютерных программ EXСEL и STATISTICA 5.0 (Statsoft).
Автор выражает искреннюю признательность сотрудникам Медицинского радиологического научного центра РАМН к.б.н. Г.А. Петровой и к.м.н. В.В. Южакову за помощь и консультации при моделировании радиационного старения, проведении радиографических и электронно-микроскопических исследований.
Функциональная морфология пинеальной железы человека при старении. При изучении пинеальной железы человека была обнаружена относительная стабильность массы эпифиза до 75-80 лет; уменьшение массы железы отмечено нами только у лиц старше 80 лет. Это связано с тем, что атрофированная паренхима замещается гиперплазированной стромой (соединительной тканью), особенно на периферии и в прослойках между железистой тканью, что приводит к изменению архитектоники и увеличению дольчатости железы.
При старении наблюдается полиморфизм и уменьшение размеров ядер пинеалоцитов. После 60 лет происходит изменение цитоархитектоники пинеальной железы в виде поляризации ядер пинеалоцитов, вследствие формирования розеток и клеточных фолликулов, которые обнаруживаются в 62% наблюдений у лиц старше 60 лет. Отмечается не только гиперплазия соединительной ткани, но и ее качественные изменения - в ней превалируют коллагеновые волокна, в то время как у людей молодого возраста - ретикулиновые.
При электронно-микроскопическом исследовании в паренхиме пинеальной железы обнаруживается два типа пинеалоцитов (в зависимости от их формы, структуры ядра и органелл, плотности цитоплазматического матрикса и расположения клеток по отношению к соединительной ткани). Пинеалоциты I типа имеют округлую или неправильную форму; крупное ядро содержит в основном диффузный хроматин, отличается более светлой кариоплазмой, имеет неправильную форму за счет многочисленных инвагинаций ядерной мембраны. Ядрышко крупное, расположено чаще по центру ядра. Цитоплазматический матрикс сравнительно электронно-светлый, с небольшим количеством секреторных гранул. Митохондрий много, они имеют округлые или овальные профили, содержат неплотно упакованные, поперечно расположенные кристы.
Пинеалоциты II типа отличаются удлиненной формой, наличием цитоплазматических отростков, которые не формируют сплошного поля, а проникают между пинеалоцитами I типа. Клетки II типа располагаются часто между паренхимой и стромой железы, как бы обрамляя капилляры своими отростками. Ядра пинеалоцитов II типа электронно-плотные, содержат гетерохроматин, располагающийся у ядерной мембраны. Цитоплазматический матрикс сравнительно электронно-плотный, содержит многочисленные секреторные гранулы. В цитоплазме выражен шероховатый эндоплазматический ретикулум (ШЭР), митохондрии имеют сравнительно плотный матрикс и поперечно расположенные кристы.
Возрастные изменения в пинеалоцитах II типа проявляются изменением формы ядра, которое также становится фестончатым за счет инвагинаций ядерной мембраны. Увеличивается доля гетерохроматина в ядре, которое становится еще более плотным. В некоторых митохондриях просветляется цитоплазматический матрикс, в клетках встречаются единичные набухшие органеллы. Характерно накопление зерен липофусцина и аутофагосом.
При старении прогрессивно снижается как общее количество пинеалоцитов, иммунопозитивных к МТ, так и их оптическая плотность, что свидетельствует об ослаблении продукции МТ в пинеальной железе.
Таким образом, при электронно-микроскопическом исследовании выявляются значительные изменения структуры пинеальной железы при старении, однако при этом сохраняется часть гормонально активной паренхимы и в пожилом возрасте, что обусловливает возможность сохранения функций пинеальной железы в стареющем организме.
Экстрапинеальные источники мелатонина при старении человека. Мелатонин-содержащие клетки желудка и кишечника. При иммуногистохимическом исследовании во всех отделах желудочно-кишечного тракта у человека была обнаружена положительная реакция энтерохромаффинных клеток с антителами к МТ и его предшественникам - серотонину, N-ацетилсеротонину и мексамину, что свидетельствует об активной продукции МТ в ЕС-клетках, а не о его пассивном накоплении.
Анализ результатов иммуногистохимических и морфометрических исследований накопления МТ в слизистой оболочке пилорического отдела желудка у людей мужского пола разных возрастных групп показал, что в то время как уровень секреции пинеального МТ прогрессивно снижается с возрастом, количество МТ-иммунопозитивных ЕС-клеток в слизистой оболочке желудка сохраняется практически стабильным до 60 лет (табл. 1).
Таблица 1. Накопление мелатонина в клетках слизистой оболочке желудка людей различного возраста
|
Возраст (лет) |
Средняя площадь МТ-содержащих клеток (%) |
Оптическая плотность (OpD, у.е.) |
|
|
20 - 30 |
7,65±0,05 |
0,241±0,005 |
|
|
31 - 40 |
6,93±0,05 |
0,263±0,003 |
|
|
41 - 50 |
6,65±0,04 |
0,258±0,012 |
|
|
51 - 60 |
6,26±0,05 |
0,233±0,007 |
|
|
61 - 70 |
4,05±0,03* |
0,245±0,010 |
|
|
71 - 80 |
3,11±0,02* |
0,261±0,015 |
|
|
более 80 |
1,05±0,03* |
0,254±0,004 |
Примечание: *p<0,05 по сравнению с показателем у людей в возрасте 20-30 лет.
По результатам морфометрического анализа установлено, что оптическая плотность МТ-иммунопозитивных ЕС-клеток не меняется с возрастом, но наблюдается уменьшение количества ЕС-клеток в слизистой оболочке желудка у людей старше 60 лет.
Мелатонин в нейроэндокринных клетках бронхиального эпителия. В эпителии бронхов у человека встречаются клетки, дающие положительную реакцию с антителами к серотонину, МТ, N-ацетилсеротонину и мексамину.
МТ-иммунопозитивные одиночные нейроэндокринные клетки диффузно рассеяны среди бронхиального эпителия. Форма клеток различная - треугольная, трапециевидная, грушевидная, веретенообразная, у некоторых клеток, так же, как и у ЕС-клеток в желудочно-кишечном тракте, на апикальном конце выявляется антенновидный отросток. Ультраструктура МТ-продуцирующих клеток бронхиального эпителия сходна с ЕС-клетками в кишечнике.
При старении популяция МТ-содержащих клеток бронхиального эпителия проявляет себя более устойчивой, чем в пинеальной железе и желудочно-кишечном тракте.
Достоверное снижение площади накопления и оптической плотности
МТ-содержащих клеток в них отмечается только у лиц старше 70 лет (табл. 2).
Таблица 2. Накопление мелатонина в бронхиальном эпителии людей различного возраста
|
Возраст (лет) |
Средняя площадь МТ-содержащих клеток (%) |
Оптическая плотность (OpD, у.е.) |
|
|
20 - 30 |
4,42±0,02 |
0,222±0,006 |
|
|
31 - 40 |
4,26±0,02 |
0,220±0,004 |
|
|
41 - 50 |
4,39±0,01 |
0,226±0,012 |
|
|
51 - 60 |
3,86±0,02 |
0,219±0,007 |
|
|
61 - 70 |
3,62±0,03 |
0,208±0,009 |
|
|
71 - 80 |
1,09±0,01* |
0,195±0,011* |
|
|
более 80 |
0,95±0,01* |
0,157±0,003* |
Примечание: *p<0,05 по сравнению с показателем у людей в возрасте 20-30 лет.
Мелатонин-иммунопозитивные клетки поджелудочной железы. В эпителии выводных протоков и ацинусов поджелудочной железы человека нами обнаружены клетки, дающие положительную реакцию с антителами к МТ и его предшественникам. Морфометрическое исследование показало достоверное изменение показателей только в двух сводных возрастных группах (20-50 лет и старше 50 лет).
Мелатонин-иммунореактивные клетки коркового и мозгового слоев надпочечников. Под капсулой, а также на границе надпочечников человека верифицируются клетки, дающие положительную реакцию со специфическими антителами к серотонину, МТ, мексамину и N-ацетилсеротонину. Компьютерный анализ микроскопических изображений не показал достоверных изменений морфометрических показателей в зависимости от возраста.
Мелатонин-иммунореактивные клетки предстательной железы. В большинстве нейроэндокринных клеток предстательной железы во всех изученных возрастных группах было отмечено выраженное накопление МТ и серотонина. Площадь МТ-содержащих клеток достоверно снижалась с увеличением возраста. Так, у людей в возрасте 20-30 лет их площадь в среднем составила 5,33±0,03%, что в 4 раза больше, чем у людей старше 80 лет. Между возрастом пациентов и значениями площади МТ-содержащих клеток выявлена положительная корреляция. В то же время, не отмечалось достоверных изменений площади накопления серотонина в зависимости от возраста людей.
Оптическая плотность МТ и серотонина достигает максимального значения у лиц в возрасте 20-30 лет, у пациентов пожилого возраста наблюдается достоверное снижение этого показателя. Полученные данные свидетельствуют о снижении содержания серотонина и МТ в нейроэндокринных клетках предстательной железы человека с увеличением возраста (p<0,05).
Мелатонин-иммунопозитивные клетки плаценты. При иммуногистохимическом исследовании плацент у родильниц разных возрастных групп накопление МТ была выявлена во всех структурных элементах ворсинчатого хориона - синцитиотрофобласте (СТБ), синцитиокапиллярных мембранах, синцитиальных почках и узлах, единичных клетках стромы и эндотелии сосудов.
Площадь МТ-содержащих клеток в плацентах родильниц 1, 3, 4 и 5-й групп была достоверно меньше, чем в плаценте родильниц 2-й группы (группы сравнения) (р<0,05). Так, у юных родильниц (<18 лет) их площадь составила 0,39±0,01%, что в 17,7 раза меньше, чем в группе 2.
В плаценте женщин 29-35-летнего возраста (3-я группа) площадь накопления МТ была почти в 2 раза меньше (3,78±0,04%), чем у женщин нормального репродуктивного возраста (6,89±0,02%). С увеличением возраста площадь МТ-содержащих клеток в плаценте уменьшается.
Между возрастом родильницы и значениями площади МТ-содержащих клеток выявлена положительная корреляция. Оптическая плотность МТ достигает максимального значения у женщин 2-й группы (0,34±0,01 у.е.), а у женщин старше 36 лет (4 и 5-я группы) наблюдается достоверное снижение этого показателя (р<0,05).
Мелатонин в естественных киллерах (NK-клетках). При окрашивании NK-клеток азур-эозином в них выявлялись азурофильные гранулы, которые вступали в положительную реакцию с нитратом серебра по методу Гримелиуса. При электронно-микроскопическом исследовании изучаемые клетки представляли собой лимфоциты с круглым или почкообразным ядром, глыбчатым хроматином. Клетки имели относительно большую цитоплазму, крупные митохондрии, изолированные профили ШЭР.
Кроме того, выявлялись определенные, характерные для данных клеток, но не для лимфоцитов вообще, многочисленные везикулы, разбросанные по всей цитоплазме или сконцентрированные в углублении ядра, хорошо развитый пластинчатый комплекс и, наконец, плотные осмиофильные гранулы, которые являются своеобразным маркером NK-клеток.
Таким образом, впервые были получены данные, свидетельствующие о присутствии в секреторных гранулах естественных киллеров высокоактивных гормональных веществ - МТ и серотонина.
При старении отмечалась дегрануляция многих NK-клеток, при этом площадь и оптическая плотность МТ-иммунопозитивных NK-клеток снижались почти в 2 раза.
Мелатонин в эндотелиальных клетках. Проведенные исследования показали присутствие полиморфных осмиофильных гранул различной величины в эндотелии капилляров печени, селезенки и костного мозга. Размеры, форма и строение гранул были различными, однако наиболее часто встречались гранулы трех типов:
- I тип - гомогенные электронно-плотные гранулы овальной или бобовидной формы с очень узким светлым ободком вокруг электронно-плотной сердцевины или без него;
- II тип - «перстневидные» гранулы характерного вида: электронно-плотная сердцевина расположена центрально или смещена к одному из полюсов с широким светлым ореолом вокруг нее;
- III тип - крупные гранулы округлой формы с электронно-плотной сердцевиной и тонким светлым ореолом вокруг нее.
В некоторых эндотелиальных клетках гранулы располагались
в непосредственной близости от цитоплазматической мембраны, обращенной
в просвет сосуда. Встречались участки набухшего эндотелия, которые образовывали почковидные выпячивания, в их верхушках располагались одна или несколько секреторных гранул. Обнаруженные гранулы овальной или бобовидной формы характерны для МТ и его основного предшественника - серотонина. «Перстневидные» гранулы по своему строению идентичны секреторным гранулам В-клеток поджелудочной железы, ответственных за продукцию инсулина. Крупные округлые гранулы третьего типа подобны катехоламинсодержащим гранулам клеток мозгового вещества надпочечников.
Проведенные электронно-микроскопические исследования позволили впервые установить, что местом локализации эндокринных секреторных гранул являются эндотелиальные клетки капилляров печени, селезенки и костного мозга. Идентификация секреторных гранул свидетельствует о том, что кроме присутствия в нейронах и пептидергических нервных волокнах, обнаруженных в сосудистой стенке, продукция гормонов возможна непосредственно в отдельных эндотелиальных клетках. Преобладающим типом гранул в эндотелиальных клетках являются секреторные нейроэндокринные гранулы, характерные для МТ. При старении количество секреторных гранул в эндотелиальных клетках резко уменьшается, во многих эндотелиоцитах отмечается картина экзоцитоза.
Радиоавтография органной кинетики мелатонина и антител к нему в организме старых мышей и крыс:
Мыши. Результаты исследования динамики аккумуляции 3Н-МТ у старых мышей-самцов показывают, что уже через 5 мин после введения меченого МТ самые высокие концентрации его зарегистрированы в органах желудочно-кишечного тракта, сердце, плазме крови. При этом в органах желудочно-кишечного тракта наблюдалась максимальная аккумуляция 3Н-МТ: в слизистой оболочке желудка - через 30 мин после введения меченого гормона; в двенадцатиперстной кишке - через 5 мин, продолжала увеличиваться к 15 мин и оставалась высокой к 30 мин; в тонкой кишке - самое высокое содержание 3Н-МТ по сравнению со всеми остальными исследуемыми органами было через 30 мин, незначительно снижаясь к 6 ч; в толстой кишке - через 30 мин, снижаясь к 1 ч, возрастала к 3 ч и через 1 сут. По абсолютной величине коэффициент дифференциального накопления (КДН) снижался, но оставался более высоким, чем в других органах. В сердце мышей высокое содержание МТ наблюдалось 30 мин, в плазме крови максимум содержания меченого гормона регистрировался к 30 мин.
Крысы. У старых животных наблюдался динамический спад поглощения 125I-АтМ тканью печени. Картина изменения уровня КДН у молодых и старых животных показала, что в почках у старых животных обмен не нарушен. Самый высокий КДН был зарегистрирован в легких, как молодых, так и старых крыс через 6 ч после введения меченой фракции АтМ, при этом у старых животных усиленная аккумуляция 125I-АтМ наблюдалась уже к 3 ч.
В тимусе динамика накопления АтМ у молодых и старых животных была различна: к 3 ч КДН у старых животных был в 4 раза выше, чем у молодых, и постепенно увеличивался в течение суток. У молодых животных аккумуляция 125I-АтМ происходила более интенсивно и через сутки была значительно выше, чем у старых крыс. Через 3 сут. АтМ не были обнаружены в тимусе обеих групп животных. В течение суток в сердце во все сроки (3, 6 и 24 ч) КДН у старых крыс был выше по сравнению с молодыми особями.
В гипофизе 125I-АтМ не были выявлены во все сроки исследования. Высокие уровни КДН 125I-АтМ были обнаружены в желудочно-кишечном тракте у животных обеих групп: в пищеводе, слепой и двенадцатиперстной кишке - к 1 сут.; в пилорическом отделе желудка - к 3 ч; в тонкой кишке - к
6 ч после введения 125I-АтМ. В желудочно-кишечном тракте самый высокий КДН был зарегистрирован через 3 ч в слизистой оболочке пилорического отдела желудка, более низкий - в слизистой оболочке двенадцатиперстной кишки. К 24 ч и далее КДН почти не изменялся в течение суток в тонкой кишке как старых, так и молодых крыс.
В плазме крови уровень 125I-АтМ снижался, и к 3 сут. обнаружено более чем 6-кратное снижение его у старых и 5-кратное снижение у молодых крыс.
Таким образом, впервые получены данные о динамике распределения антител к МТ после его введения молодым и старым животным. Они показали неодинаковую степень поглощения и утилизации МТ различными органами как у молодых, так и, тем более, у старых животных.
Мелатонин-продуцирующие гастроинтестинальные клетки в моделях преждевременного старения
Радиационная модель старения. Эпителий слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта находится в состоянии постоянного обновления, основу которого составляет пролиферация стволовых и дифференцирующихся клеток генеративной зоны. Количество МТ-иммунопозитивных клеток в слизистой оболочке двенадцатиперстной кишки крыс при радиационном старении обусловлено высоким индексом пролиферативной активности PCNA (44,8%) и митотическим индексом (2,9%), которые отражают высокий уровень физиологической регенерации эпителия двенадцатиперстной кишки животных 1-й (контрольной) группы (табл. 3).
Таблица 3. Морфометрические показатели клеток слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки крыс при радиационном старении
|
Группа животных и условия эксперимента |
IPCNA (%) |
IМИТ (%) |
сСЕР (%) |
NEC/ мм2 |
ОПEC (усл. ед.) |
NТК/ мм2 |
|
|
1-я (контроль) |
44,8±0,2 |
2,9±0,1 |
0,64±0,02 |
162±4 |
0,205±0,002 |
169±23 |
|
|
2-я (гамма-облучение) |
46,5±0,7* |
4,2±0,4* |
0,43±0,08* |
130±12* |
0,209±0,005 |
18±2* |
Примечания: *p<0,05 по сравнению с контролем. СЕР - серотонин-иммунопозитивные клетки; ЕС - энтерохромаффинные клетки; ТК - тучные клетки.
Иммуногистохимические исследования показали, что в слизистой оболочке двенадцатиперстной кишки позитивную реакцию на МТ дают энтерохромаффинные клетки, локализующиеся в эпителиальном слое крипт и ворсинок, а также часть тучных клеток в собственной пластинке слизистой оболочки.
При радиационном старении пролиферативный показатель по PCNA в криптах кишки возрастает до 46,5%, а митотический индекс - до 4,2%. Эти данные свидетельствуют о том, что восстановление эпителиального слоя слизистой оболочки у выживших животных протекает очень быстро, а пул стволовых клеток кишечного эпителия в этот период находится на стадии регенерации. Гистологическое изучение препаратов также указывает на то, что архитектоника эпителиальной выстилки начинает нормализоваться. Однако численная плотность ЕС-клеток еще не достигает ее уровня у контрольных животных. Содержание тучных клеток в собственной пластинке слизистой оболочки снижается почти в 10 раз.
Через 3 ч и 1 сут. после облучения животных сублетальной дозой 5 Гр отмечается тенденция к снижению общего содержания МТ-иммунопозитивных клеток в пилорическом отделе желудка. На 3-и сут. их количество достигает минимального уровня и достоверно отличается от контроля (р<0,05). В последующие сроки число МТ-продуцирующих клеток увеличивается и через 4 мес. лишь на 7% отличается от контрольных показателей (различие статистически недостоверно).
Количественные изменения ЕС-клеток в двенадцатиперстной кишке имеют следующие особенности. При воздействии дозой 5 Гр максимальное снижение числа клеток обнаруживается также на 3-и сутки после облучения. К 7 и 21-м суткам их количество увеличивается, но даже в отдаленные сроки (через 4 мес.) не достигает уровня, характерного для контрольных животных. Через 21 сут. и 4 мес. после облучения сублетальной дозой в эндокринных клетках визуализируется умеренная вакуолизация эндоплазматического ретикулума, единичные миелиновые структуры и липофусциновые гранулы.
Пинеалэктомия как модель старения. У животных контрольной группы при окраске гематоксилином-эозином поверхность слизистой оболочки желудка в пилорическом и фундальном отделах образует ямки, которые выстланы цилиндрическим эпителием и имеют однородный вид, отличаясь глубиной в различных отделах. Железы, располагающиеся в различных отделах, также имеют особенности.
В пилорическом отделе - желудочные ямки значительно глубже, а железы, связанные с ними, более короткие, чем в фундальном отделе.
Помимо эпителиоцитов в исследуемых отделах желудка при окраске по методу Гримелиуса обнаруживаются эндокринные клетки (апудоциты). Они имеют неправильную форму и располагаются в нижних отделах пилорических и фундальных желез. Обращает внимание явное преобладание апудоцитов в фундальном отделе по сравнению с пилорическим.
Морфометрический анализ показал, что общее число апудоцитов на 1 мм2 слизистой оболочки фундального отдела желудка более чем на 20% превышает их содержание в пилорическом отделе (14815 и 12012 клеток в 1 мм2 соответственно). При иммуногистохимическом исследовании установлено, что МТ-продуцирующие клетки, составляющие основную массу апудоцитов, локализуются преимущественно в пилорическом отделе желудка, где их количество составляет 26223 на 1мм2.
При моделировании старения (через один месяц после пинеалэктомии) при светооптическом исследовании изменений гистологического рисунка пилорического и фундального отделов желудка на препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином, не обнаруживается. В то же время, количественный анализ позволил выявить значительные изменения в количестве апудоцитов слизистой оболочки желудка по сравнению с интактными крысами.
Так, плотность распределения эндокринных клеток в 1 мм2 слизистой оболочки в пилорическом и фундальном отделах возрастает более чем на 50%, достоверно отличаясь от контроля. Аналогичные изменения обнаружены и при морфометрии МТ-иммунопозитивных клеток в желудке, где после пинеалэктомии данный показатель возрастает до 32325 клеток на 1 мм2 в пилорическом отделе и до 410±24 клеток на 1 мм2 в фундальном отделе. Поскольку пинеалэктомия - наиболее адекватная модель нормального процесса старения, такую динамику следует признать близкой к природной.
Нокаутная долгоживущая линия мышей:
Желудок. Общее количество нейроэндокринных клеток возрастает
с увеличением продолжительности жизни животных (60442 в 4, 70553 в 21 и 75353 в 34 мес. жизни). Подобная тенденция наблюдается и со стороны ЕС-клеток: количество серотонин/МТ-содержащих ЕС-клеток составляло 32552 в 4, 34549 в 21 и 38946 в 34 мес.
Двенадцатиперстная кишка. Общее количество нейроэндокринных клеток здесь (как и в желудке) возрастает с увеличением продолжительности жизни животных (19614 в 4, 31114 в 21 и 30311 в 34 мес.), хотя к 34-му месяцу отмечается тенденция к снижению количества ЕС-клеток по сравнению с 21 месяцем жизни. Со стороны ЕС-клеток отмечается выраженная гиперплазия с увеличением возраста: 1867 в 4, 37221 в 21 и 43122 в 34 мес. При этом пролиферативная активность эпителиоцитов с возрастом практически не изменяется (PCNA индекс составлял 15,70,7% в 4, 15,70,8% в 21 и 17,61,1% в 34 мес.). Напротив, индекс апоптоза с возрастом увеличивался (от 0,48±0,02% в 4 до 0,85±0,03% в 34 мес.).
Таким образом, проведенные исследования показали неодинаковую реакцию гастроинтестинальных МТ-продуцирующих клеток в различных моделях старения. При радиационном старении отмечалась выраженная гипоплазия МТ-иммунореактивных клеток в двенадцатиперстной кишке и особенно остро реагировала популяция тучных клеток, численность которых в опытной группе снижалась по сравнению с контрольной почти в 10 раз. В то же время при пинеалэктомии и в нокаутной долгоживущей линии мышей популяция ЕС-клеток достоверно возрастала. Такое разночтение результатов, по-видимому, объясняется менее физиологичным (более жестким) действием радиации на пул стволовых клеток желудочно-кишечного тракта, чем влияние пинеалэктомии, которая более мягко (приближенно к реальности) моделирует процессы старения.
Мелатонин-содержащие клетки слизистой оболочки при патологии желудочно-кишечного тракта в пожилом и старческом возрасте
Гастрит и язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки.
С целью выяснения участия МТ-содержащих ЕС-клеток слизистой оболочки желудка в процессе старения проведено изучение функциональной морфологии слизистых оболочек желудка и двенадцатиперстной кишки у пожилых и старых людей в норме, при язвенной болезни и гастрите.
Контрольная группа. ЕС-клетки обычно имеют веретеновидную, неправильную или треугольную форму с длинным апикальным отростком, обеспечивающим контакт ЕС-клеток с их микроокружением. ЕС-клетки, кроме аргирофильных свойств, присущих всем другим апудоцитам, обладают также аргентаффинными свойствами. При иммуногистохимическом исследовании большинство из них вступают в положительные реакции с антителами к серотонину и МТ, однако часть клеток обнаруживает иммунопозитивные свойства только к какому-либо одному гормону - серотонину или МТ. Среднее количество ЕС-клеток на 1 мм2 слизистой оболочки в норме составляет 200,5±17,1 (для серотонин-содержащих) и 130,6±14,0 (для МТ-содержащих).
При электронно-микроскопическом исследовании ЕС-клетки имеют крупное овальное ядро с хорошо выраженным хроматином и ядрышком. В их цитоплазме обнаруживаются хорошо развитый ШЭР и гладкий эндоплазматический ретикулум (ГЭР), митохондрии, рибосомы, пластинчатый комплекс с признаками различной функциональной активности, лизосомы, вакуоли.
Основным отличительным признаком ЕС-клеток служит присутствие в их цитоплазме многочисленных нейроэндокринных секреторных гранул, которые являются местом окончательного образования и хранения МТ, серотонина и пептидных гормонов (мотилина, вещества Р). При электронно-микроскопическом исследовании в цитоплазме ЕС-клеток выявляются полиморфные, округлые, гантелеобразные и ракетообразные гранулы с сердцевиной различной электронной плотности.
...Подобные документы
Действия мелатонина в зубном развитии и применение при кариесе. Применение мелатонина в качестве противовоспалительного средства в полости рта при пародонтозе, инфекции герпеса, кандидозе. Цитотоксичность и генотоксичность стоматологических материалов.
реферат [43,8 K], добавлен 22.09.2016Биологический возраст человека. Изменения, развивающиеся в иммунной системе при старении. Моторные структуры желудка. Состояние эмоциональной сферы. Изменения нейроэндокринных механизмов регуляции. Возрастные изменения в сердечно-сосудистой системе.
презентация [254,1 K], добавлен 24.03.2015Строение хрящевой ткани человека, ее изменение в процессе старения. Образование мышечной ткани ребенка в период его развития, инволютивные изменения мышечных волокон у пожилых людей. Структура костной ткани в детском возрасте и ее изменения с возрастом.
презентация [337,3 K], добавлен 27.01.2015Основы биологии старения человека, физиологические особенности достигшего периода старости организма, его реакции на болезнетворные и лечебные факторы внешней среды. Первичные механизмы старения, их взаимосвязь в процессе жизнедеятельности организмов.
реферат [40,4 K], добавлен 18.07.2014Изучение особенностей применения лекарственных средств лицами пожилого возраста в амбулаторных условиях. Физиологические особенности организма при старении. Фармакотерапия и фармакодинамика лекарственных средств (всасывание и распределение) у пожилых.
курсовая работа [219,7 K], добавлен 23.04.2015Болезнь Паркисона как нейродегенеративное заболевание. Оценка морфологических особенностей, количественных показателей и пространственного распределения нейронов и нейроглии в компактной части черной субстанции среднего мозга человека в пожилом возрасте.
дипломная работа [4,1 M], добавлен 27.01.2018Функции, классификация эндокринной системы человека. Схема желез внутренней секреции. Гормоны: виды, механизмы действия. Гормональные функции, патологии, диагностика, лечение эпифиза (шишковидной железы). Серотонин и мелатонин. Опухоли шишковидной железы.
презентация [2,4 M], добавлен 18.11.2015Общее содержание старения как общебиологического эндогенного разрушительного процесса, нарастающего с возрастом и снижающего приспособительные возможности организма. Особенности дыхательной, сердечнососудистой, пищеварительной систем в пожилом возрасте.
презентация [15,8 M], добавлен 15.05.2019Этиология и патогенез, особенности клиники и диагностики хронической сердечной недостаточности. Возрастные изменения органов и систем. Методы нефармакологического и хирургического лечения заболевания. Планирование сестринского ухода за пациентами.
контрольная работа [60,6 K], добавлен 16.09.2014Принципы построения режима питания пожилых людей. Соотношение белков, жиров, углеводов для пожилых людей. Продукты диетического питания и их назначение. Обогащение пищевых продуктов витаминами, минеральными веществами. Специфика лечебного питания.
реферат [21,4 K], добавлен 24.07.2010Доброкачественные и злокачественные опухоли щитовидной железы. Морфологические варианты аденомы щитовидной железы, их характеристика, клинические симптомы, особенности диагностики и лечения. Классификация злокачественных новообразований щитовидной железы.
презентация [3,1 M], добавлен 02.04.2017Лапароскопическая хирургия поджелудочной железы, ее преимущества, позволяющие избежать проведения большого лапаротомного разреза. Лапароскопическая резекция поджелудочной железы при злокачественных опухолях. Варианты проведения дистальной панкреатэктомии.
презентация [643,4 K], добавлен 13.10.2016Макроскопическое строение и топография поджелудочной железы как особенной железы пищеварительной системы, ее функциональные возможности и значение. Экзокринная и эндокринная часть данной железы, принципы и механизмы ее кровоснабжения и иннервации.
презентация [184,0 K], добавлен 22.04.2014Оценка транскрипционной активности генов синтаз оксида азота в сетчатке крыс разного возраста, оценка возможной связи развития ретинопатии с изменением генерации NO. Изменение генерации оксида азота при старении и развитии связанных с ним заболеваний.
курсовая работа [980,8 K], добавлен 27.06.2013Клиническая картина острой и крупозной пневмонии у пожилых и старых людей, причины ее возникновения и принципы лечения. Особенности течения бронхита и туберкулеза у гериатрических больных. Диагностика бронхиальной астмы, профилактика возможных осложнений.
презентация [1,6 M], добавлен 09.01.2012Функции единой нейроэндокринной системы организма. Основные эндокринные железы. Схема гипоталамо-гипофизарных механизмов регуляции их активности. Поджелудочная железа и образование инсулина. Эпифиз и восприятие света. Гормоны "неэндокринных" органов.
презентация [1,9 M], добавлен 29.08.2013Особенности геронтологии как науки о биологических, социальных и психологических аспектах старения человека. Причины процессов старения и способы борьбы с ним. Вклад в развитие геронтологии И.И. Мечникова, Н.М. Амосова. Признаки старения и его виды.
презентация [22,6 M], добавлен 28.03.2012Исследование строения и основных функций щитовидной железы. Недостаток йода в организме человека. Струма, обусловленная недостатком йода. Характеристика причин эндемического зоба. Изучение методов лечения гиперфункции и гипофункции щитовидной железы.
презентация [1,0 M], добавлен 18.03.2014Сущность и причины старения организма. Физиологические изменения организма с возрастом. Старение опорно-двигательного аппарата, возрастные изменения кожи и внутренних органов. Особенности питания и комплекс физических упражнений для пожилого человека.
реферат [754,5 K], добавлен 13.02.2011Понятие и сущность биологического и паспортного возраста человека. Физиология и анализ старения организма. Особенности проявления и течения болезней у стариков по Н.Д. Стражеско. Сравнительная характеристика преждевременного и физиологического старения.
контрольная работа [25,7 K], добавлен 07.04.2010
