Эпидемиологический мониторинг и медико-генетические основы формирования здоровья детей участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской атомной электростанции

В проведенном исследовании высокий генотипический риск развития АГ был выявлен у 10 детей и 12 взрослых. При этом обращает на себя внимание тот факт, что из 24 пациентов, страдающих АГ, только 12 имели высокий генотипический риск. Это свидетельствует о высокой роли паратипических (внешнесредовых факторов) в развитии АГ. Во всей группе обследованных Г-САД составило 131±5 мм рт ст., Г-ДАД - 83±1 мм рт ст.

При корреляционном анализе Г-САД, Г-ДАД и возраста обследуемых достоверной связи выявлено не было. Это свидетельствует о стационарности генотипических значений АД в двух поколениях и отсутствии прогрессирования генетической отягощенности в процессе жизни. Однако связь носит характер тенденции (rСАД = -0,13, р=0,2; rДАД = -0,15, р=0,15). В связи с этим проведение аналогичного анализа в трех или четырех последующих поколениях, вероятно, позволило бы выявить модификацию генотипического риска, свидетельствующую о его прогрессировании в связи с присоединением спонтанных мутаций, накапливаемых и передаваемых из поколения в поколение.

Кроме того, в исследовании был проведен популяционно-генетический анализ определения значений Г-САД и Г-ДАД с использованием фенотипических значений АД, выровненных по возрастам 13 и 50-59 лет. При этом было установлено, что более высоким фенотипическим значениям АД в возрасте 50-59 лет соответствуют более высокие генотипические значения АД. Это является свидетельством возрастной модификации эффектов генов, вносящих вклад в формирование гемодинамических параметров.

С целью разработки популяционно-генетического алгоритма прогнозирования риска развития АГ у ДЛ первоначальной задачей является установление зависимости между Г-САД, Г-ДАД и прогнозируемыми фенотипическими значениями АД в возрасте 50-59 лет. В ходе проведенного сравнительного анализа было показано наличие достоверного влияния Г-САД и Г-ДАД на фенотипические значения АД в группе обследованных.

В ходе популяционно-генетического анализа были разработаны уравнения регрессии, позволяющие прогнозировать фенотипические значения АД у ДЛ при известных Г-САД и Г-ДАД.

Важным аспектом популяционно-генетического анализа является прогнозирование не только значений АД, но и вероятности развития АГ у ДЛ. При этом в ходе проведения логистического регрессионного анализа было показано, что с увеличением значений Г-САД и Г-ДАД возрастает риск развития АГ у ДЛ при отдаленном прогнозировании в возрасте 50-59 лет. Влияние Г-САД (ч = 27,3, р < 0,001) и Г-ДАД (ч = 13,9, р < 0,001) является достоверным.

Для удобства использования в практической деятельности, представленные уравнения преобразованы в таблицу, с помощью которой можно определять вероятность риска развития АГ у ДЛ.

Важным аспектом прогнозирования риска развития АГ у ДЛ является возможность оценки роли лучевого воздействия на генотип. Косвенным образом это воздействие представляется возможным оценить при сравнении Г-САД и Г-ДАД в группах ДЛ и детей, рожденных в семьях, в которых родители не принимали участия в работах по ликвидации последствий на ЧАЭС. С этой целью нами были определены Г-САД и Г-ДАД в контрольной семейной группе, состоящей из 200 человек: 96 детей и 104 их родителей. При расчете генотипических значений артериального давления было показано, что в контрольной группе отмечаются достоверно более низкие значения Г-САД и Г-ДАД у детей по сравнению с группой ДЛ. При этом разница между группами взрослых носила характер тенденции.

Поскольку наблюдаемая разница между генотипическими значениями АД в группах ассоциируется с фактом принадлежности детей к семьям ликвидаторов ЧАЭС, можно предположить, что она обусловлена повышением объема накопленных мутаций у потомков ликвидаторов вследствие ранее имевшего место лучевого воздействия.

При сравнении потенциального риска развития АГ у ДЛ и детей контрольной группы было установлено, что 10 из 74 ДЛ имеют высокий генотипический сердечно-сосудистый риск, что составило 13,5%. Вместе с тем, высокий генотипический риск у детей контрольной группы был отмечен только у 4 из 96, то есть в 4,2% случаев (р<0,05). Достоверная разница в распространенности высокого генотипического риска также ассоциируется с причастностью к ликвидации ЧАЭС.

Таким образом, при сравнении генотипических значений АД в группе ДЛ и контрольной группе детей были отмечены более высокие генотипические значения у ДЛ, что свидетельствует о влиянии лучевого воздействия на генотипический риск развития сердечно-сосудистых заболеваний.

Предложенный алгоритм оценки генотипического риска развития АГ позволит в дальнейшем сформировать систему профилактики АГ на популяционном уровне задолго до развития заболевания. Активное диспансерное наблюдение за детьми позволит зафиксировать дебют АГ и начать своевременную и эффективную терапию заболевания.

Ионизирующее излучение, а также другие факторы, модифицирующие ДНК, например 5-бромдезоксиуридин, увеличивают количество стабильных и нестабильных хромосомных аберраций в соматических и половых клетках облученных лиц. Структурные и количественные аберрации хромосом, несомненно, относятся к генетических нарушениям, которые вносят свой вклад в многофакторный процесс радиационно-индуцированной патологии. Нестабильные хромосомные аберрации такие, как дицентрики, кольца, фрагменты, приводят к гибели клеток. В то же время стабильные хромосомные аберрации (транслокации, инсерции), как известно, сопровождают онкогенез, а также могут влиять на жизненно важные функции клеток. При этом изменения количества хромосом в клетке предрасполагают как к гибели клеток, так и к развитию малигнизации.

Воздействие радиации на генетический аппарат как соматических, так и половых клеток облученных индивидуумов, характеризуется увеличением уровня стабильных хромосомных аберраций в герминативных клетках, что в свою очередь может приводить к увеличению риска хромосомных синдромов у потомства облученных лиц.

В нашем исследовании выполнено кариотипирование 89 ДЛ. Контрольную группу составили 24 ребенка той же возрастной группы, родители которых не принимали участие в ликвидации последствий аварии на ЧАЭС и не проживали на загрязненных территориях. Всего цитогенетическому обследованию было подвергнуто 113 детей. Также было проведено кариотипирование 160 родителей ДЛ. В каждом случае в среднем проанализировано 62,1 метафазы на 1 человека.

В результате проведенного цитогенетического исследования было обнаружено, что у ДЛ 35,1% метафаз характеризовались гипоанеуплоидией.

В то же время в контрольной группе частота гипоанеуплоидных метафаз составила лишь 5,8%. Количество хромосом в гипоанеуплоидных метафазах варьировало от 20 до 45. Уровень стабильных и нестабильных структурных перестроек у ДЛ соответствовал контрольным данным (0,04%)

При кариотипировании родителей ДЛ у матерей количество гипоанеуплоидных метафаз составило 6,9%, тогда как у отцов-ликвидаторов - 29,5%. Уровень стабильных и нестабильных структурных перестроек у родителей также соответствовал контрольным данным (0,04%).

Таким образом, проведенные исследования свидетельствуют о том, что по сравнению с контрольными группами у отцов-ликвидаторов и их детей выявляется более высокая частота гипоанеуплоидных метафаз в культивируемых лимфоцитах крови. Выраженная нестабильность генетического аппарата клеток ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС может быть расценена как последствие воздействия радиации на соматические клетки. Появление в кариотипах ДЛ аналогичных хромосомных аномалий с высокой частотой свидетельствует о наследовании этой нестабильности, возникшей под влиянием радиации на гаметы отцов-ликвидаторов. Можно предположить, что нарушение расхождения хромосом может происходить не только в процессе митотического деления соматических клеток, но и в мейотическом делении половых клеток. Это, в свою очередь, может увеличивать вероятность риска рождения детей с хромосомными аномалиями в третьем и последующих поколениях. Учитывая тот факт, что уровень нестабильных и стабильных структурных перестроек хромосом соответствует контролю, можно предположить, что риск онкологических заболеваний у ДЛ невелик.

С целью выявления геномной нестабильности, а именно частоты молекулярных мутаций ДНК в первом поколении ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС, был проведен анализ уровня спонтанных мутаций в трех гипервариабельных локусах генома (D3S1531, D7S1482, UT250) методом ДНК секвенирования у 93 ДЛ (48-девочки и 45- мальчики), их отцов и матерей, а также, в ряде случаев, и их сибсов (12 человек). Возраст ДЛ на момент обследования составлял от 6 до 15 лет, их сибсов - 16-19 лет. При этом у 18 отцов-ликвидаторов (19,4%), обследованных методом ДНК секвенирования, имелся официальный документ, согласно которому индивидуальные поглощенные дозы составили от 0,9 до 24 бэр.

В результате проведенного исследования в трех микросателлитных локусах, изученных методом ДНК секвенирования, была обнаружена 41 мутантная аллель с наибольшим количеством мутаций в локусе D7S1482, локализованным в длинном плече хромосомы 7 в регионе 7q31.32.

Первый исследованный STS микросателлитный маркер UT250 (синонимы: D20S82, D20S448, HUMUT250) локализован в хромосоме 20 в регионе 20p12.3 между нуклеотидами 7110405 и 7111008.

Методом ДНК секвенирования в этом локусе генома ДЛ были обнаружены 11 мутаций. При этом в 10 случаях наблюдалась утрата или приобретение одного тетрануклеотидного повтора GAAA.

Второй изученный STS микросателлитный маркер D7S1482 (синоним: HUMUT5085) локализован в длинном плече хромосомы 7 в регионе 7q31.32 между нуклеотидами 121030442 и 121031015. Данный локус характеризовался особенно высоким уровнем вариабельности по количеству тетрануклеотидных повторов GAAA, а также повтора GGAA, следующими за последовательностью GGA. В проведенном исследовании среди изученных случаев генотипа ДЛ было обнаружено 25 мутантных хромосом.

Третий STS микросателлитный маркер D3S1531 (синоним: HUMUT874), включенный в исследование, локализован в длинном плече хромосомы 20 в регионе 1q23.3 между нуклеотидами 159678860 и 159679374.

Таким образом, в этом локусе генома ДЛ, методом ДНК секвенирования, были обнаружены 5 мутантных аллелей с утратой или приобретением одного тетрануклеотидного повтора GAAA.

Проведенное исследование позволило установить, что родительское происхождение и протяженность изученных микросателлитов варьировали в каждой мутантной аллели. При этом частота мутаций по отцовской и материнской линиям составила 29 отцовских против 7 материнских. Однако в 5 случаях происхождение мутантных аллелей установить не представилось возможным в связи с выраженной гомологией отцовских и материнских аллелей. Вместе с тем, частота мутаций (“mutation rate”) составила в исследуемой группе 0,1005 (41/408) на одну аллель потомка, причем частота мутаций отцовского происхождения составила 0,0710, а материнского - 0,0171. Частота мутаций в контрольной группе составила 0,0154, что соответствует имеющимся литературным данным (Dubrova Y.E. 2002). Таким образом, частота мутаций материнского происхождения соответствует общепопуляционным данным, тогда как частота мутаций отцовского происхождения увеличивается в 4,2 раза, что соответствует данным, полученным Dubrova Y.E. с соавторами (2002).

Проведенный эпидемиологический мониторинг состояния здоровья в популяции ДЛ позволил выявить определенные различия в структуре общей заболеваемости среди этой группы детей и ДРО, а также значительное превышение частоты распространенности болезней практически всех классов среди ДЛ разных возрастных групп по сравнению с аналогичными общепопуляционными показателями.

В связи с вышеизложенным методом Пирсона (Боровиков В., 2003) для анализа связи кариотипического статуса и показателей общей заболеваемости по отдельным классам болезней МКБ-Х в когорте ДЛ был проведен корреляционный анализ, результаты которого представлены в таблице 2.

Таблица 2

Вероятность частоты встречаемости заболеваемости по отдельным классами болезней в зависимости от стабильности хромосомного аппарата

обследованных ДЛ (%)

Параметры корреляции для определения вероятного наличия заболеваемости у ДЛ, полученные с помощью регрессионно-корреляционного анализа, представлены в таблице 3, а вид корреляционно-регрессионной зависимости на рисунке 1. Установленную регрессионную зависимость целесообразно использовать для прогнозирования уровня заболеваемости, при этом параметр гипоанеуплоидии может принимать два значения - 0 (нет) или 1 (есть).

Например:

если гипоанеуплоидия не выявлена, то этот параметр = 0. - В этом случае вероятность заболеваемости болезнями органов пищеварения = 0,82

если гипоанеуплоидия выявлена, то данный параметр = 1 - В этом случае вероятность заболеваемости болезнями органов пищеварения = 0,82 + 0,17=0,99

Таблица 3

Коэффициенты регрессии и корреляции при сопоставлении связи между исследованными показателями (Y=A+B·X) (где Y - заболеваемость, X - гипоанеуплоидия)

Примечание: достоверно * - р<0,05; ** - p<0,01; *** - p<0,001; недостоверно **** - p>0,05

Вместе с тем, была проанализирована и вероятность влияния стабильности хромосомного аппарата на прирост заболеваемости в когорте ДЛ. Согласно полученным данным минимальный прирост заболеваемости наблюдался у ДЛ для психических расстройств и вырос с 21,6‰ в 1994 году до 51,3‰ в 2004 году (в 2,40 раза), что было выше, чем в группе ДРО, где изменение этого параметра вообще не наблюдалось (коэффициент возрастания = 1,0). В то же время максимальный прирост наблюдался для болезней костно-мышечной системы, который вырос с 20,6‰ в 1994 году до 122,9‰ в 2004 году (в 5,9 раза), что было выше, чем в группе ДРО, где коэффициент возрастания составил 2,35 раза.

Рис. 1 Линейная зависимость прогнозируемой заболеваемости болезнями органов пищеварения и стабильности хромосомного аппарата обследованных ДЛ

На основе проведенных исследований были определены коэффициенты относительного риска прироста заболеваемости в группе ДЛ за изученный период (табл. 4). Параметр относительного риска, в отличие от абсолютного показателя коэффициента прироста, является вероятностной оценкой степени возрастания заболеваемости данной нозологической единицей в 2004 году по сравнению с аналогичным показателем в 1994 году.

Использование показателей коэффициентов возрастания заболеваемости различными нозологическими формами за период с 1994 по 2004 годы среди ДЛ позволило установить коэффициенты относительного риска прироста заболеваемости и его доверительные интервалы в этой когорте детей, которые представлены в таблице (табл. 4).

Таблица 4

Относительные риски прироста заболеваемости различными

нозологическими формами в когорте ДЛ за 1994-2004 гг.

Примечание: ОР - относительный риск; ДИ ОРmin и ДИ ОРmax - доверительный интервал минимальной и максимальной границ относительного риска.

Представленные в таблице 4 данные свидетельствуют о том, что первое ранговое место по величинам относительного риска прироста заболеваний занимают болезни органов пищеварения (ОР=1,52; ДИ =0,66 - 3,48). На втором месте находятся болезни эндокринной системы (ОР =1,48; ДИ = 0,83 - 2,61), на третьем - врожденные аномалии (ОР= 1,46; ДИ = 0,09 - 24,07), на четвертом и пятом местах - болезни нервной системы (ОР= 1,43; ДИ =0,88-2,34) и психические расстройства (ОР =1,41; ДИ = 0,53-3,72) соответственно.

Результаты проведенного сравнительного анализа абсолютных (К возрастания) и вероятностных (величина относительного риска развития заболеваемости) оценок прироста заболеваемости отдельными классами заболеваний представлены на рисунке (рис. 2). Полученные данные свидетельствуют о том, что динамика величин этих показателей неодинакова, поскольку они имели различные тенденции скорости роста или снижения заболеваемости за изученный период. Это свидетельствует в пользу того, что при проведении прогностических оценок целесообразно использовать не абсолютные показатели, а их вероятностные характеристики, которые позволят определить наиболее вероятную динамику развития патологических процессов при проведении популяционного анализа.

Рис. 2 Показатели абсолютного прироста заболеваемости (КВ) и относительного риска (ОР) развития различных нозологических форм заболеваний в когорте ДЛ

Согласно современным представлениям, непосредственным биологическим эффектом радиационного воздействия является интенсификация свободнорадикальных процессов, повреждение биомембран, которые наряду с ДНК являются важнейшими мишенями ионизирующего излучения (Кудряшов Ю.Б., 1987; Барабой В.А. с соавт., 1991; Бурлакова Е.Б. с соавт., 1996; Зозуля Ю.А. с соавт., 2000). Радиационные поражения относят к свободнорадикальным патологиям этиологического типа, когда доминирующей причиной структурно-метаболических нарушений в организме является нескомпенсированная интенсификация свободнорадикального окисления (СРО) (Журавлев А.И., Пантюшенко В.Т., 1989). Полагают, что важнейшим компонентом стресс-реакции, индуцированной радиационным воздействием, является окислительный стресс, который определяют как состояние сдвига динамического равновесия в системе прооксиданты = антиоксиданты (ПО=АО) в сторону усиления СРО на фоне напряженности и дисбаланса компонентов антиоксидантной системы (Барабой В.А. с соавт., 1991; Зозуля Ю.А. с соавт., 2000; Зенков Н.К. с соавт., 2001; Prise K.M. , 2006).

В соответствии с вышеизложенным и поставленными ранее задачами было проведено исследование состояния свободнорадикальных процессов и баланса системы ПО=АО, изучение особенностей структурного состояния мембран эритроцитов, являющихся адекватной моделью плазматических мембран, исследование липидного профиля плазмы крови и динамика холестерина различных классов липопротеидов, а также изучение биохимических показателей, отражающих соотношение анаэробного и аэробного путей углеводно-энергетического метаболизма в крови 198 ДЛ. Контрольную группу сравнения составили 50 детей I-II групп здоровья, аналогичного возраста, проживающих в городе Ростове-на-Дону, родители которых не принимали участия в работах по ликвидации последствий аварии на ЧАЭС.

Проведенное клинико-биохимическое обследование когорты ДЛ позволило установить, что интенсивность H2O2-индуцированной люминол-зависимой хемилюминесценции возрастала на 230% в плазме крови ДЛ относительно контрольной группы (p<0,001).

Это с одной стороны свидетельствует о повышенной способности генерации активных форм кислорода - супероксидного анион-радикала, гидроксильного радикала, липидных радикалов, а с другой стороны является следствием недостаточной емкости антиокислительной активности крови.

При этом повышенная продукция АФК способствует интенсификации перекисного окисления липидов в крови ДЛ, что в свою очередь сопровождается накоплением молекулярных продуктов перекисного окисления липидов. В результате проведенного исследования было установлено, что в плазме крови ДЛ наблюдался существенный прирост содержания первичных и вторичных продуктов перекисного окисления липидов - диеновых конъюгатов и малонового диальдегида на 80% и 103% соответственно по сравнению с контрольной группой (p<0,001). Было также установлено, что в первом поколении отцов-участников ликвидации последствий аварии на ЧАЭС наблюдается интенсификация СРО в крови. В плазме крови ДЛ наблюдается повышение активности глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы на 34% и 72% соответственно и показана тенденция к увеличению активности каталазы на 30% (0,1<p<0,05) по сравнению с контрольной группой.

Таким образом, несмотря на активацию важнейших звеньев антиокислительной активности системы крови, у ДЛ наблюдался сдвиг динамического равновесия в системе ПО = АО в сторону усиления СРО. Таким образом, в крови обследованной группы ДЛ в результате проведенного исследования было диагностировано развитие окислительного стресса.

О нарушениях стабильности и структурной организации мембран эритроцитов ДЛ свидетельствуют обнаруженные в ходе исследования повышение микровязкости липидного бислоя и структурные перестройки мембранных белков. Подобные изменения структурного состояния мембран эритроцитов ДЛ могут привести к ухудшению вязко-эластических свойств мембран и снижению пластичности клетки. Это может вызвать задержку эритроцитов в микрососудистом русле, внутрикапиллярный гемолиз, выход прооксидантов (внеэритроцитарного гемоглобина, гемма, Fe2+) в плазму крови и вторичное усиление процессов перекисного окисления липидов.

Исследование липидного профиля плазмы крови ДЛ показывает, что на фоне близкого к норме содержания общих липидов, фосфолипидов и общего холестерина наблюдается значительное увеличение содержания триглицеридов, на 143% превышающее контроль.

В проведенном исследовании было обнаружено повышение на 41,0% содержания мочевой кислоты в плазме крови ДЛ по сравнению с контрольной группой. Это может быть следствием активации оксидоредуктазы, которая превращает ксантин и гипоксантин, продукты пуринового катаболизма, в мочевую кислоту. Фермент существует в виде двух форм - ксантиндегидрогеназы (КД) и ксантиноксидазы (КО). В условиях гипоксии, что показано в нашей работе, происходит конверсия КД в КО, которая наряду с мочевой кислотой продуцирует супероксидный анионрадикал (Зенков Н.К. с соавт., 2001). В крови ДЛ обнаружено развитие лактат-ацидоза вследствие активации анаэробного пути метаболизма углеводов и гиперурикемии плазмы как следствие активации ксантиноксидоредуктазы эндотелия и конверсия КД>КО, что относится к отличительным признакам гипоксических состояний.

Проведенное клинико-биохимическое исследование показывает, что в крови ДЛ наблюдаются нарушения свободнорадикального окисления и физико-химических свойств мембран.

Таким образом, сформирована система оценки функционального состояния организма у ДЛ, позволяющая не только прогнозировать развитие мультифакториальных заболеваний, но и разработать в дальнейшем схемы целенаправленного и комплексного лечения данной патологии у этой когорты детей (рис. 3).

Рис. 3 Система прогнозирования, ранней диагностики, профилактики и лечения в группе ДЛ.

Вышеизложенное позволяет создать когорто-ориентированную систему профилактических мер и при условии широкой диспансеризации ДЛ снизить заболеваемость в этой группе населения.

Предложенная система может эффективно функционировать в современных условиях и позволяет повысить качество оказания медицинской помощи семьям ликвидаторов ЧАЭС.

ВЫВОДЫ

1. Здоровье детей, рожденных в семьях ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС, характеризуется снижением удельного веса I-й группы здоровья с 40,0% в периоде раннего детства до 15,8% в юношеском возрасте и нарастанием удельного веса III-й группы здоровья с 26,7% в периоде раннего детства до 49,5% в подростковом периоде. У 93,3% детей ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС, выявлены нарушения нервно-психического развития.

2. В динамике за 1994-2004 годы в структуре общей заболеваемости детей ликвидаторов отмечен значительный и достоверный прирост новообразований (5,6 раз), болезней нервной системы (5,3 раза), болезней органов пищеварения (4,5 раза), психических расстройств (4,2 раза), болезней эндокринной системы (3,1 раза). Ранжирование показателей общей заболеваемости в 2004 году в этой когорте детей позволило установить, что 1-е ранговое место среди них занимали болезни органов дыхания; 2-е - болезни нервной системы, 3-е - болезни органов пищеварения, 4-е - болезни эндокринной системы, 5-е - болезни костно-мышечной системы. Среди детей, проживающих в Ростовской области в семьях, не имеющих отношения к ликвидации последствий аварии, столь значительного прироста заболеваемости зарегистрировано не было, при этом на 1-м ранговом месте в этой популяции находились болезни органов дыхания, на 2-м - болезни органов пищеварения, 3-м - болезни нервной системы, 4-м - болезни кожи и подкожной клетчатки и на 5-м - травмы и отравления

3. Анализ конституциональных особенностей детей участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС выявил нарушение непрерывности ряда варьирования соматических признаков как по габаритному уровню (первый период детства и подростковый возраст), так и по компонентному (первый и второй периоды детства и подростковый возраст), о чем свидетельствовали высокие проценты представителей контрастных соматотипов при общей тенденции к астенизации, преобладание мезосомного типа телосложения (у мальчиков от 44,5% до 51,7% и у девочек от 52,9% до 63,1% в период первого детства и в подростковом возрасте соответственно), отсутствие переходных типов телосложения, снижение габаритных характеристик, жировой и мышечной масс, высокие показатели выраженности костной массы в периоде раннего детства и, напротив, увеличение габаритных характеристик, снижение жировой массы и высокие показатели мышечной и костной масс в периоде второго детства и подростковом возрасте.

4. Морфофункциональное состояние сердечно-сосудистой системы детей, родившихся в семьях отцов - ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС, характеризуется достоверно большей распространенностью нарушений функций автоматизма, проводимости и процессов реполяризации, диспропорциональностью развития кардиальных структур в процессе роста, что на фоне повышенной вегетативной лабильности способствует формированию преимущественно гипо- и гиперкинетических вариантов гемодинамики, обуславливающих развитие напряженных адаптационных механизмов. Разработанный алгоритм оценки генотипического сердечно-сосудистого риска, позволяет с высокой вероятностью прогнозировать у 37,8% детей ликвидаторов, при достижении ими зрелого возраста, развитие артериальной гипертензии.

5. Цитогенетические исследования, проведенные в популяции детей, родившихся в семьях отцов - ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС, выявили нестабильность генома соматических клеток. Так, уровень гипоанеуплоидных метафаз в когорте детей ликвидаторов в 6,1 превышал аналогичный показатель в контрольной группе и составил 35,1% и 5,8% соответственно. При кариотипировании их родителей у матерей количество гипоанеуплоидных метафаз составило 6,9%, тогда как у отцов-ликвидаторов гипоанеуплоидия регистрировалась в 29,5% метафаз. Выявленная нестабильность генома ликвидаторов может быть следствием воздействия ионизирующей радиации. Появление в кариотипах их потомков аналогичных хромосомных аномалий с высокой вероятностью свидетельствует о наследовании этой нестабильности, возникшей под влиянием радиационного фактора на гаметы отцов-ликвидаторов.

6. Геном детей, рожденных в семьях отцов-ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС, характеризуется высокой частотой мутаций (“mutation rate”) - 0,1005 (41/408), о чем свидетельствует обнаружение в трех микросателлитных локусах 41 мутантного аллеля с наибольшим количеством мутаций в участке D7S1482, локализованном в длинном плече хромосомы 7 в регионе 7q31.32; причем частота мутаций отцовского происхождения была достоверно увеличена (в 4,2 раза) по сравнению с материнским, и составила 0,0710 и 0,0171 соответственно. При этом частота мутаций в контрольной группе составила 0,0154.

7. Выявлено возрастание активных кислородных метаболитов более чем в 3 раза превышающее контрольные показатели, что коррелирует с установленным увеличением содержания первичных (диеновые конъюгаты), вторичных (малоновый диальдегид) и конечных (шиффовые основания) продуктов перекисного окисления липидов и холестерина в мембранах эритроцитов. Следствием развития окислительного стресса явилось нарушение структурно-функциональных свойств мембран эритроцитов, связанное с увеличением микровязкости фосфолипидного бислоя мембран и содержания холестерина, на фоне развития дислипопротеидемии, характеризующейся приростом триглицеридов и перераспределением холестерина между липопротеидами низкой плотности и липопротеидами высокой плотности, а также ингибированием активности антиоксидантных ферментов первой линии защиты (каталаза) и глутатионового цикла (глутатионредуктаза и глутатионпероксидаза).

8. Наличие ассоциаций генотипического риска с фактором воздействия ионизирующего излучения на отцов, а также геномной нестабильности с низкими, относительно контроля, показателями состояния здоровья и высокой общей заболеваемостью в когорте детей ликвидаторов, позволяют использовать данные методы для оценки вклада наследственного и внешнесредового, в частности радиационного, факторов в формирование мультифакториальных заболеваний в этой популяции детей.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Дети, рожденные в семьях отцов-ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС, должны быть включены в группу высокого риска по возможному раннему развитию мультифакториальной патологии, в том числе и у их последующих поколений.

При комплексном обследовании детей ликвидаторов рекомендуется шире применять генетические, в том числе популяционно-генетические исследования, включающие определение генотипических значений систолического и диастолического артериальных давлений с помощью компьютерной программы «ПРОКАРД-ГБ» с использованием уравнений регрессии генотипа пробанда на фенотипы его родственников и собственный фенотип.

В когорте первого и последующих поколений ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС целесообразно проводить длительный медико-генетический мониторинг с целью разработки долгосрочного дифференцированного подхода к составлению профилактических, лечебных и реабилитационных программ для улучшения качества их жизни.

Выявленные особенности формирования мультифакториальной патологии в когорте детей ликвидаторов могут быть рекомендованы к использованию в учебном процессе при изучении соответствующих разделов педиатрии и гигиены детей и подростков, а также в практической работе врачей первичного звена здравоохранения (участковых педиатров, врачей общей практики) и специалистов узкого профиля (генетиков, неврологов, эндокринологов и др.).

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Экологические карты г. Ростова-на-Дону и здоровье населения // Материалы II Всероссийской конференции, посвященной проблеме экологического обучения и воспитания студентов медицинских и фармацевтических вузов Российской Федерации. - г.Барнаул, 1992. - С. 152-154 (Кательницкая Л.И., Шамрай Т.П., Хомякова А.С., Ходарева Н.К., Шлык И.В., Сависько А.А.)

Космический медико-экологический мониторинг г. Ростова-на-Дону // Сборник научных трудов: «Актуальные вопросы внутренней патологии». - г.Ростов-на-Дону, 1993. - С. 30-38 (Чернышов В.Н., Кательницкая Л.И., Шамрай Т.П., Хомякова А.С., Ходарева Н.К., Кательницкий И.И., Шлык И.В., Сависько А.А.)

Экологические аспекты антропогенной загрязненности и ее влияние на структуру заболеваемости населения в г. Ростова-на-Дону // Материалы конференции: «Экологическая безопасность городов». - г.Санкт-Петербург, 1993. - С.101-102 (Чернышов В.Н., Кательницкая Л.И., Шамрай Т.П., Хомякова А.С., Кательницкий И.И., Сависько А.А., Шлык И.В.)

Влияние неблагоприятных факторов окружающей среды на динамику детской заболеваемости в городе Ростове-на-Дону // Тезисы докладов симпозиума: «Экологически обусловленные заболевания». - г.Ростов-на-Дону, 1993. - С. 5-8 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Куимчев Г.П., Мищенко И.А.)

Медико-экологические аспекты и состояние здоровья детского населения г. Ростова-на-Дону // - Сборник лекций и статей «Экопатология детского возраста». - г.Москва, 1995. - С. 164-165 (Чернышов В.Н., Сависько А.А.)

Показатели детской заболеваемости и антропогенное загрязнение атмосферы в г.Ростове-на-Дону по материалам 1994 года // Сборник тезисов научно-практической конференции «Среда обитания и здоровье населения Ростовской области». - г.Волгодонск, 1995. - С.11 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Родзянко М.Н.)

Некоторые аспекты формирования экозависимых заболеваний в г. Ростове-на-Дону // Сборник тезисов научно-практической конференции «Среда обитания и здоровье населения Ростовской области». - г.Волгодонск, 1995. - С. 12-13 (Кательницкая Л.И., Ахвердиева М.К., Лужецкая И.В., Литвинова Т.Н., Сависько А.А., Прилуцкий А.В.)

Развитие региональной политики профилактики основных неинфекционных заболеваний // Тезисы докладов научно-практической конференции (с международным участием) «Актуальные проблемы профилактики неинфекционных заболеваний». - г.Москва, 1995. - С.170-171 (Чернышов В.Н., Кательницкая Л.И., Новгородский В.Е., Сависько А.А.)

Изучение механизмов формирования экологозависимых патологических процессов в Ростовском регионе и разработка реабилитационных мероприятий // Итоги I научной сессии факультета усовершенствования врачей: «Актуальные вопросы клинической, экспериментальной и профилактической медицины». - г.Ростов-на-Дону, 1995. - С. 14-20. (Кательницкая Л.И., Чернышов В.Н., Шамрай Т.П., Хомякова А.С., Прилуцкий А.В., Сависько А.А., Литвинова Т.Н., Голиусова С.В., Голубева Г.Г., Ахвердиева М.К., Кательницкий И.И.)

Структура и динамика детской заболеваемости в г. Ростове-на-Дону за 1991-1995 гг. // Тезисы докладов Всероссийской научной конференции «Экологические интоксикации: биохимия, фармакология, клиника. - г. Чита, 1996. - С. 212-213 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Родзянко М.Н., Аверкиева А.А.)

Клинико-инструментальная характеристика врожденных «малых» аномалий сердца у детей в возрасте от 1 месяца до 15 лет по данным эхокардиографии // Материалы II международного симпозиума: «Клиническая эхокардиография». - г.Санкт-Петербург, 1996. - С. 103-104 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Вощинская Н.В., Арапова Н.А.)

Эколого-медицинский мониторинг г.Ростова-на-Дону // Методические рекомендации // г.Ростов-на-Дону, 1997. - 39 с. (Чернышов В.Н., Кательницкая Л.И., Кондратенко Т.А., Пахарин В.И., Лужецкая И.В., Михайлова Т.Н., Яицкова Н.Н., Литвинова Т.Н., Ахвердиева М.К., Сависько А.А., Иноземцева Г.А.)

Динамика экозависимой патологии среди детей и подростков в г. Ростове-на-Дону с 1991 по 1997 годы // (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Мальцев С.В.) - Матер. VIII съезда педиатров России «Современные проблемы педиатрии», г. Москва, 1998. - С. 54.

Динамика показателей здоровья детей и подростков Первомайского и Ворошиловского районов г. Ростова-на-Дону // Сборник научных трудов: «Актуальные вопросы медицины, труда и экологии». - г.Ростов-на-Дону, 1998. - С. 131-133 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Кательницкая Л.И., Иноземцева Г.А., Козырева Н.О., Кавтасенкова О.В.)

Дезорганизация соединительно-тканной структуры кардио-васкулярной системы, как маркер экологического неблагополучия в условиях крупного индустриального города // Тезисы докладов IУ Всероссийской научно-практической конференции «Образование и здоровье». - г.Калуга, 1998. - С. 272-273 //(Чернышов В. Н., Сависько А.А., Гребенкина Н. А., Тараканова Т. Д.)

Особенности формирования типов гемодинамики как критерий дифференцированной оценки и прогнозирования состояния здоровья школьников // Тезисы докладов IV Всероссийской научно-практической конференции «Образование и здоровье». - г.Калуга, 1998. - С.274-275 (Чернышов В.Н., Тараканова Т.Д., Вощинская Н.В., Сависько А.А.)

Мониторинг здоровья детского населения Ворошиловского и Первомайского районов города Ростова-на-Дону // Тезисы докладов П научной сессии Ростовского государственного медицинского университета. - г.Ростов-на-Дону, 1998. - С. 96 (Сависько А.А., Козырева Т.Б., Касьян М.С., Старунова В.М., Сало С.С.)

Экологически обусловленные керосотропные реакции у детей с функциональной кардиоваскулярной патологией // Материалы III конгресса педиатров России: Экологические и гигиенические проблемы педиатрии. - Москва, 1998. - С. 167. (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Теплякова Е.Д., Мальцев С.В.)

Определение степени эндотоксикоза в организме человека путем использования неинвазивной технологии // Клиническая лабораторная диагностика. - 1999. - № 11. - С. 49-50. (Чернышов В.Н., Пустовалова Л.М., Сависько А.А., Гребенкина Н.В.)

Роль факторов окружающей среды в формировании хронической неинфекционной кардиоваскулярной патологии у детей и подростков // Труды Ш научной сессии Ростовского государственного медицинского университета. - г.Ростов-на-Дону, 2000. - С. 195 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Мальцев С.В., Теплякова Е.Д., Гребенкина Н.А.)

Клинико-эпидемиологический мониторинг состояния здоровья детей, рожденных в семьях участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Монографический сборник: «Здоровье детей и радиация: актуальные проблемы и решения». - Москва, 2001. - С. 142-144 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Тупицына Л.И.)

Цитогенетическиое исследования детей с пороками развития, рожденных в семьях участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС // Монографический сборник: «Здоровье детей и радиация: актуальные проблемы и решения». - Москва, 2001. - С. 175-177 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Петренко Л.И., Куцев С.И.)

Cytogenetic examination of children with malformations, born in families of Chernobyl liqudators // Abs. developing research for a common future 1-st scientific symposium. - Koln, Germany, 2001. - P. 47 (Chernishov V.N., SaviskoA.A., Kutsev S.I., Teplyakova E.D.)

Цитогенетические исследования лимфоцитов крови у детей, рожденных в семьях участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС // Детская онкология. - 2001. - № 2 - С. 196 (Чернышов В.Н., Куцев С.И., Сависько А.А., Петренко Л.И., Мусонова Н.М.)

Разработка индивидуальных режимов проведения гипербарической оксигенации // Анестезиология и реанимация. - 2002. - № 6. - С. 70-72 (Женило В.М., Чернышов В.Н., Куртасов А.А., Внуков В.В., Сависько А.А., Чардаров К.Н., Бычков А.А.)

Комплексная оценка нервно-психического развития детей, рожденных от отцов - участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Материалы Межрегиональной научно-практической конференции: «Актуальные проблемы формирования здорового образа жизни и охраны здоровья населения». - г.Липецк, 2003. - Часть 1. - С. 102-103 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Теплякова Е.Д., Казбанова О.В.)

Показатели состояния здоровья детей, рожденных в семьях участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Материалы IX конгресса педиатров России: «Актуальные проблемы педиатрии». - Вопросы современной педиатрии . - г.Москва, 2004. - Т. 3. - Приложение № 1. - С. 361 (Сависько А.А.)

Нарушения сердечного ритма и проводимости у детей, рожденных от ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС, ассоциированные с кардиальными соединительно-тканными дисплазиями // Труды IV научной сессии Ростовского государственного медицинского университета. - г.Ростов-на-Дону, 2004. - С. 193-194 (Сависько А.А., Теплякова Е.Д. Пармон С.П., Носова Е.В., Тарасова Е.А.)

Современные достижения и перспективы цитогенетических исследований при хромосомных болезнях // Сборник научных трудов: «Современные достижения генетических исследований: клинические аспекты». - г.Ростов-на-Дону, 2004. - Выпуск 2. - С. 91-92. (Куцев С.И., Чернышов В.Н., Дегтярева Е.В., Сависько А.А., Мусонова Н.М., Амелина С.С., Морданов С.В., Шокарев Р.А., Теплякова Е.Д.)

Цитогенетическое исследование детей с пороками развития, рожденных в семьях ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Сборник научных трудов: «Современные достижения генетических исследований: клинические аспекты». - г.Ростов-на-Дону, 2004. - Выпуск 2. - С. 92-93 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Петренко Л.И., Куцев С.И.)

Анализ структуры заболеваемости детей и подростков Советского района г. Ростова-на-Дону за 1999-2003 гг. // Материалы I конференции врачей общей практики (семейных врачей) Южного Федерального Округа. - г.Ростов-на-Дону, 2004. - С. 60 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Павленко В.Д., Тараканова Т.Д., Гончаров С.Г., Давыденко А.А., Полукеева С.Н., Калашникова И.И.)

Состояние здоровья детей ликвидаторов ЧАЭС // Сборник научных трудов, посвященных юбилею кафедры эпидемиологии: «Региональные проблемы окружающей среды, здоровья населения и санитарно-эпидемиологического благополучия». - г.Ростов-на-Дону, 2006. - Выпуск 2. - С. 98-100 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Павленко В.Д., Тараканова Т.Д., Гончаров С.Г., Голубчикова Н.В., Шкильнюк Н.Е., Тарасова Е.А.)

Соматотипические особенности детей Ростовской области, рожденных в семьях ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Известия высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион. Естественные науки. - 2006. - приложение 10. - С. 124-127 (Сависько А.А.)

Характеристика нервно-психического развития детей, рожденных в семьях ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Журнал «Фундаментальные исследования». - 2006. - № 6. - С. 44-46 (Сависько А.А.)

Характеристика групп здоровья детей, рожденных в семьях ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Фундаментальные исследования. - 2006. - № 7. - С. 43-45 (Сависько А.А.)

Нестабильность кариотипа у детей, рожденных в семьях ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Материалы научно-практической конференции: «Новая технологическая платформа биомедицинских исследований (биология, здравоохранение, фармация)». - г. Ростов-на-Дону, 2006. - С. 32-33 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Куцев С.И.)

Характеристика отдельных показателей сердечно-сосудистой системы у детей рожденных в семьях ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Современные наукоемкие технологии. - 2006. - № 7. - С. 61-62 (Сависько А.А.)

Влияние физиологических и средовых факторов на уровень артериального давления детей подросткового возраста // Материалы V Российского конгресса: «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии». - г.Москва, 2006 - С. 93 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Тараканова Т.Д., Павленко В.Д., Гончаров С.Г., Буштырева М.Ю.)

Динамика отдельных показателей состояния здоровья детей Ростовской области, родившихся от отцов - участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Известия высших учебных заведений, Северо-Кавказский регион. Естественные науки. - 2007. -№ 1. - С. 106-109 (Сависько А.А.)

Особенности развития сердечно-сосудистой системы детей, рожденных в семьях ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Материалы VI съезда кардиологов ЮФО: «Качественная диагностика, лечение, реабилитация и диспансеризация - залог успеха кардиологии в достижении активного творческого долголетия, улучшения качества жизни и уровня здоровья Российской нации». - г.Ростов-на-Дону, 2007. - С. 252-253 (Чернышов В.Н., Сависько А.А., Тараканова Т.Д.)

Способ определения индивидуальной чувствительности к гипербарической оксигенации // Патент на изобретение РФ N 2146050 от 03.03.1999 г. (Лукаш А.И., Чернышов В.Н., Внуков В.В., Ананян А.А., Сависько А.А., Куртасов А.А.)

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ

Размещено на Allbest.ru