Роль апоптоза и оксида азота в патогенезе ревматоидного артрита
Состояние и динамика NO-синтазной функции у больных ревматоидным артритом. Взаимосвязь между нитрооксидпродуцирующей функцией, феноменом апоптоза и цитокиновым профилем у больных. Роль апоптоза в развитии экспериментального адъювантного артрита.
| Рубрика | Медицина |
| Вид | автореферат |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 10.04.2018 |
| Размер файла | 678,9 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Нами выявлена достоверная иммунореактивность к i-NOS в гиперпластической синовиальной ткани больных с ранним РА и мышей с адьювантным артритом в острой фазе (Табл. 6 и Табл. 9). Преимущественно экспрессия фермента отмечалась в поверхностном слое синовиальной оболочке и, в меньшей степени, хондроцитах. Параллельное изучение экспрессии i-NOS и n-NOS показало наличие i-NOS в синовиальной оболочке при РА и экспериментальном артрите, чего не было в контрольных образцах. Что касается экспрессии n-NOS, то предварительные исследования подтвердили ее присутствие в костных структурах [Ralston S.H., 1997], но не в синовиальной ткани. Согласно нашим данным n-NOS идентифицировалась в клетках синовиальной оболочки (Табл. 10).
Таблица 9
Количественная характеристика i-NOS в синовиальной оболочке человека при РА (в % от клеток, окрашенных гематоксилином и эозином)
|
Клетки |
Контроль n - 7 |
Ранний РА n - 70 |
Поздний РА n - 104 |
|
|
Лимфоциты воспалительных инфильтратов |
- |
24,3 ± 3,1 |
5,5 ± 2,1* |
|
|
Синовиоциты |
- |
36,3 ± 1,1 |
8,7 ± 1,8* |
Примечание: * - достоверность различия между группами р<0,01.
Наши данные соответствуют данным других авторов, выявивших наличие i-NOS и n-NOS с помощью Westrn blot анализа в модели SCW-индуцированного артрита [McCartney-Francis N., 2001]. Авторы выявили экспрессию i-NOS в мононуклеарных и полинуклеарных клетках воспалительного инфильтрата, i-NOS, n-NOS в мононуклеарах периферической крови и перитонеальных макрофагах.
Таблица 10
Доля n-NOS-иммунореактивных клеток в синовиальной оболочке человека при РА (в % от клеток, окрашенных гематоксилином и эозином)
|
Клетки |
Контрольn - 7 |
Ранний РАn - 70 |
Поздний РА n - 104 |
|
|
Лимфоциты |
- |
78,5 ± 3,3 ? |
43,6 ± 2,8*? |
|
|
Синовиоциты |
3,2 ± 1,5 |
56,4 ± 2,1 ? |
27,3 ± 2,3*? |
Примечание: * - достоверность различия между группами р<0,01;
? - достоверность различия с контролем р<0,05.
Таким образом, с помощью иммуногистохимического метода мы доказали присутствие всех изоформ NOS в синовиальной оболочке больных РА и мышей с адьювантным артритом на ранних стадиях развития патологического процесса с соответствующей топографией ферментов.
Поздняя стадия РА и хроническая фаза адьювантного артрита отличались изменением паттерна экспрессии NOS. Нами обнаружено снижение экспрессии i-NOS при сохраняющемся уровне экспрессии n-NOS и неизменной топографии ферментов.
Подобные изменения экспрессии NOS позволяют по-новому подойти к вопросам патогенетической роли каждой из синтаз в развитии воспаления в синовиальной оболочке. Снижение активности индуцибельной изоформы фермента в поздней стадии РА и хронической фазе экспериментального артрита дают основания поставить вопрос о содержании функции i-NOS.
Оценивая динамику интенсивности апоптоза и сопоставляя ее с динамикой экспрессии i-NOS и р53 молекулы, а также наличие признаков солокализации этих молекул в наших исследованиях можно сделать вывод о наличии мощной протективной компоненты у i-NOS. Сущность протективного эффекта состоит в сенсибилизации клеточных структур синовиальной оболочки к апоптозу с последующей его реализацией через р53 опосредованный механизм на поздней стадии эволюции РА. Некоторые авторы указывают, что р53 опосредованный апоптоз является маркером i-NOS индуцированного процесса [Kim Y.M. et al., 1999; Messmer U.K. et al., 1994]. Продемонстрировано полное совпадение локализации i-NOS и участков апоптоза в синовиальной оболочке больных РА [Van Hof R.J. et al., 2000].
В тоже время солокализация экспрессии NADPh-диафоразы и Bcl-2 молекулы говорит и об антиапоптотическом эффекте i-NOS, но проявляется он на ранней стадии развития РА. Такой дуализм функции i-NOS в развитии ревматоидного синовита не позволяет расценивать ее как мишень для терапевтических вмешательств.
Наш вывод подтверждают данные, полученные на различных моделях экспериментального артрита. Авторам удалось показать, что применение селективных ингибиторов i-NOS приводило к ухудшению течения эрозивного артрита [McCartney-Francis N., 2001; Veihelmann A. et al., 2002]. Делеция гена i-NOS в мутантных линиях мышей повышала чувствительность к развитию адьювантного [Gilkeson G.S. et al., 1997], септического [McInnes I.B. et al., 1998] артрита.
В тоже время, согласно нашим результатам, монотонная экспрессия конститутивной формы NOS (n-NOS) на всех стадиях развития патологического процесса (Табл.10), как при РА, так и при экспериментальном артрите (Табл.6), определенно указывает на их участие в патогенезе РА. Повышение содержания метаболитов NO в синовиальной жидкости происходило параллельно с нарастающей гиперэкспрессией конститутивной формы n-NOS. Очевидно, что в условиях снижения экспрессии i-NOS, сохраняющаяся экспрессия конститутивной формы является основным источником метаболитов NO в синовиальной жидкости, а, следовательно, и свидетельством их активного участия в поддержании воспалительного процесса в синовиальной оболочке.
Регрессия воспаления в синовиальной оболочке при лечении неселективными блокаторами NOS, при неэффективной селективной блокаде i-NOS, иллюстрирует патологическую роль конститутивных форм NOS [Veihelmann A. et al., 2002]. Это подтверждается применением селективного блокатора нейрональной NOS 7-нитроиндазола, сопровождавшееся значительной регрессией признаков адьювантного артрита [Pozza M. et al., 1998].
Следовательно, обнаруженная нами экспрессия конститутивной формы NOS в синовиальной оболочке больных РА обеспечивает персистирование воспаления на всех этапах развития воспалительного процесса.
Выявленная нами многочисленность и устойчивость связей уровня метаболитов NO в синовиальной жидкости с ЧБС (r=0,99 в группе «раннего» РА при р<0,05), ЧВС (r=0,80, р<0,05 в общей группе больных), DAS28 (r=0,67 в общей группе больных возрастал до 0,92 в группе «позднего» РА при р<0,05) в разных группах больных позволяет расценивать уровень метаболитов NO в синовиальной жидкости как надежный показатель активности, тяжести РА и эффективности проводимой терапии. Максимальное падение количества метаболитов NO в синовиальной жидкости на фоне лечения в группе «раннего» РА (Табл. 11) и отсутствие подобной динамики в группе «позднего» РА (Табл. 12) подтверждает оптимальность, рекомендуемых в последнее время, сроков начала базисной терапии.
Таблица 11
Метаболиты NO на фоне лечения в группе «раннего» РА
|
Показатель |
Контрольn-40 |
До леченияn-70 |
После леченияn-70 |
|
|
NO2-ser |
1,30 ± 0,11 |
3,29 ± 0,76 |
3,99 ± 0,73 |
|
|
NO3-ser |
1,17 ± 0,08 |
1,69 ± 0,66 |
2,37 ± 0,84 |
|
|
NO-ser |
2,47 ± 0,10 |
4,98 ± 1,17 |
6,38 ± 1,29 |
|
|
NO2-m |
1,12 ± 0,31 |
9,11 ± 1,05* |
19,11 ± 1,25*? |
|
|
NO3-m |
0,58 ± 0,09 |
16,10 ± 4,63* |
26,10 ± 3,23* |
|
|
NO-m |
1,71 ± 0,12 |
25,20 ± 4,83* |
45,20 ± 2,82*? |
|
|
NO2-sin |
1,08 ± 0,07 |
8,60 ± 0,93* |
1,23 ± 0,32 ? |
|
|
NO3-sin |
0,58 ± 0,04 |
1,67 ± 1,31 |
0,08 ± 0,03* |
|
|
NO-sin |
1,66 ± 0,11 |
10,20 ± 1,21* |
2,31 ± 0,13*? |
Примечание: n - число больных в каждой группе; *- достоверность различия с контрольной группой р<0,05; ?- достоверность различия между группами р<0,05.
По-видимому, именно низкие концентрации NO на поздней стадии РА, обеспечиваемые идентифицированной нами экспрессией конститутивной формы NOS, осуществляют поддержку Th1 типа иммунного ответа в синовиальной оболочке. Убедительные доказательства такого эффекта низких количеств NO были приведены в литературе ранее [Niedbala W. et al., 2002]. Авторы указывают, что за модуляцию пролиферативного Th1 сигнала NO несут ответственность цитокины.
Таблица 12
Метаболиты NO на фоне лечения в группе «позднего» РА
|
Показатель |
Контрольn-40 |
До леченияn-104 |
После леченияn-104 |
|
|
NO2-ser |
1,30 ± 0,11 |
2,07 ± 0,33 |
2,80 ± 0,59 |
|
|
NO3-ser |
1,17 ± 0,08 |
0,87 ± 0,17 |
1,85 ± 0,79 |
|
|
NO-ser |
2,47 ± 0,10 |
2,86 ± 0,43 |
4,66 ± 1,14 |
|
|
NO2-m |
1,12 ± 0,31 |
9,28 ± 2,41* |
29,35 ± 2,37* |
|
|
NO3-m |
0,58 ± 0,09 |
13,94 ± 3,97* |
32,43 ± 2,63* |
|
|
NO-m |
1,71 ± 0,12 |
23,22 ± 3,90* |
61,19 ± 3,23*? |
|
|
NO2-sin |
1,08 ± 0,07 |
10,10 ± 2,34* |
3,20 ± 1,35 |
|
|
NO3-sin |
0,58 ± 0,04 |
15,68 ± 5,54* |
0,46 ± 0,06 |
|
|
NO-sin |
1,66 ± 0,11 |
25,78 ± 7,48* |
3,66 ± 1,02 |
Примечание: n - число больных в каждой группе; *- достоверность различия с контрольной группой р<0,05; ?- достоверность различия между группами р<0,05.
Наши исследования цитокинового профиля сыворотки крови и синовиальной жидкости у больных РА показали более яркие изменения последнего в синовиальной жидкости (Табл. 13). Подобные данные были получены другими авторами. Так Hata H., и соавторы сообщают, что методом ELISA им удалось определить содержание IL-6 только у 20% животных в эксперименте [Hata H. et al., 2004]. Matsuno H. с соавторами указывают, что уровень интерлейкинов в сыворотке крови становится доступным для определения только после различного типа стимуляции (введение рекомбинантных форм интерлейкинов, трансплантация синовиальной оболочки больных РА) [Matsuno H. et al., 2002]. Приведенные факты имеют теоретическое обоснование. Общим свойством цитокинов является то, что они не депонируются в клетках в виде молекул-предшественников. Их синтез стимулируется импульсно, по сигналу и начинается с транскрипции иРНК цитокинов с соответствующего гена. По мнению Игнатьевой Г.А., в системной циркуляции можно выявить только 4 цитокина, а именно TNF, IL-1, IL-6 и G-CSF, но не в норме, а при тяжелых септических процессах [Актуальные проблемы патофизиологии. М., 2001].
Напротив, синовиальная жидкость больных РА по нашим данным содержала повышенные количества TNF-б, IL-1в, IL-6, что не противоречит аналогичным исследованиям других авторов [Arend W.P., 2001; Feldmann M. et al., 1996; Harris E.D., 1997]. TNF-б, IL-1в, IL-6 синергично опосредуют синовит и деструкцию хряща и кости. Считают, что TNF-б, IL-1в стимулируют секрецию клетками IL-6 [Feldmann M. et al., 1996; Harris E.D., 1997].
Таблица 13
Цитокиновый профиль в группах «раннего» и «позднего» РА
|
Показатель |
Контрольn - 40 |
Ранний РАn - 70 |
Поздний РАn - 104 |
|
|
IL-1-ser |
1,65 ± 0,03 |
0,67 ± 0,30 |
1,03 ± 0,20 |
|
|
IL-6-ser |
2,47 ± 0,03 |
35,20 ± 19,33 |
83,32 ± 41,20 |
|
|
IL-10-ser |
0,21 ± 0,02 |
0,40 ± 0,23 |
0,60 ± 0,39 |
|
|
TNF-ser |
2,17 ± 0,07 |
4,35 ± 1,93 |
3,09 ± 1,46 |
|
|
IL-1-sin |
1,95 ± 0,91 |
11,95 ± 2,60* |
1,02 ± 0,40 ? |
|
|
IL-6-sin |
3,48 ± 1,12 |
1335,30 ± 182,04* |
1552,37 ± 101,39* |
|
|
IL-10-sin |
1,11 ± 1,02 |
2,65 ± 0,87 |
12,61 ± 1,64*? |
|
|
TNF-sin |
4,12 ± 2,03 |
117,86 ± 14,24* |
192,42 ± 28,05* |
Примечание: n - число больных в каждой группе; *- достоверность различия с контрольной группой р<0,05; ?- достоверность различия между группами р<0,05.
Обращает на себя внимание обнаруженная нами особенно высокая концентрация IL-1в в синовиальной жидкости в сравнении с остальными цитокинами на ранних стадиях РА (Табл.13). При этом IL-1в обнаружил положительную корреляционную связь с ЧВС (r=0,74 при р<0,05).
Синхронная гиперэкспрессия Bcl-2, высокие значения IL-1в и низкая интенсивность апоптоза на ранней стадии РА свидетельствуют об антиапоптотической активности IL-1в. Подобный эффект цитокина в отношении хондроцитов был успешно показан в работе [Kuhn K. et al., 2000]. Антиапоптотическое действие IL-1в не связано с NO, поскольку блокада синтеза оксида азота не влияет на этот эффект [Blanco B.C. et al., 1995].
Основными клеточными элементами синовиальной среды, продуцирующими IL-1в являются макрофаги и синовиальные фибробласты [Ulfgren A.K. et al., 2000]. Не исключено, что более высокая концентрация IL-1в может быть объяснением успешной анти- TNF-б терапии только у 30-40 % больных РА [Feldmann M., Maini R.N., 2001]. Последнее обстоятельство дает возможность объективизировать показания и прогнозировать успех при назначении лечения моноклональными антителами к TNF-б.
Таким образом, ранняя стадия РА характеризуется повышенным содержанием IL-1в в синовиальной жидкости суставов, оказывающим антиапоптотический эффект.
Как было показано ранее, хронизация воспалительного процесса происходит при активном участии IL-6 [Rose-John S., 2003]. По нашим данным развитие РА характеризуется стойким повышением концентрации IL-6 в системном кровотоке и в синовиальной жидкости, особенно в группе «позднего» РА, что, позволяет характеризовать IL-6 как маркер хронического течения воспалительного процесса. Это подтверждается и наличием корреляций между IL-6 и содержанием метаболитов NO в синовиальной жидкости и моче как на ранней, так и на поздней стадии РА (соответственно r=0,99 и r=0,97 при р<0,05). IL-6 участвует в развитии резистентности Т-клеток к программированной клеточной смерти, тем самым, поддерживая персистенцию патологического процесса.
Увеличение концентрации IL-10 способствует снижению продукции TNF-б и IL-6 макрофагами, синовиоцитами, Т-клетками, как было показано в ряде экспериментальных работ [Katsikis P.D. et al., 1994; Persson S. et al., 1996; Walmsley M. et al., 1996]. В нашем исследовании уровень IL-10 в синовиальной жидкости и крови был повышен на ранней стадии РА и еще более повышался на фоне успешной терапии (Табл.14), что позволяет расценивать IL-10 как показатель эффективности лечения и развития компенсаторных реакций при наличии корреляций с рентгенологической стадией РА (r=0,58 в общей группе при колебаниях от 0,61 в группе «раннего» РА до 0,74 в группе «позднего раннего» РА, р<0,05) и уровнем экскреции метаболитов NO с мочой (r= -0,93, p<0,05).
Увеличение содержания IL-10 в системном кровотоке в группе «раннего» артрита на фоне лечения при отсутствие подобного эффекта на более поздних этапах эволюции РА, а также возрастание в этот же период уровня IL-1в, подтверждает выдвинутый тезис о наличии у больных РА оптимального «терапевтического окна» в дебюте заболевания (Табл.14).
Таблица 14
Цитокиновый профиль на фоне лечения в группе «очень раннего» РА
|
Показатель |
Контрольn - 40 |
До лечения n - 33 |
После леченияn - 33 |
|
|
IL-1-ser |
1,65 ± 0,03 |
0,64 ± 0,43 |
0,37 ± 0,28* |
|
|
IL-6-ser |
2,47 ± 0,03 |
18,74 ± 14,77 |
8,85 ± 1,58* |
|
|
IL-10-ser |
0,21 ± 0,02 |
0,28± 0,19 |
0,70 ± 0,48 |
|
|
TNF-ser |
2,17 ± 0,07 |
5,41 ± 2,69 |
32,10 ± 24,81 |
|
|
IL-1-sin |
1,95 ± 0,91 |
17,38 ± 1,68* |
3,18 ± 1,18 ? |
|
|
IL-6-sin |
3,48 ± 1,12 |
1366,33 ± 209,46* |
1666,43 ± 109,72* |
|
|
IL-10-sin |
1,11 ± 1,02 |
2,02 ± 0,57 |
22,42 ± 0,84*? |
|
|
TNF-sin |
4,12 ± 2,03 |
123,35 ± 21,77* |
23,75 ± 1,77*? |
Примечание: n - число больных в каждой группе; *- достоверность различия с контрольной группой р<0,05; ?- достоверность различия между группами р<0,05.
В общем, цитокиновый профиль синовиальной жидкости на разных стадиях РА отличается гетерогенностью. На ранней стадии РА доминирует антиапоптотическое влияние IL-1в, на поздней - противовоспалительное влияние IL-10 и, стабилизирующее персистенцию воспаления, влияние IL-6.
Итак, нам удалось вывить новые патогенетические звенья развития воспаления в синовиальной оболочке пораженных суставов при РА, отличающиеся специфическими особенностями на ранней и поздней стадии патологического процесса, подтвержденные в экспериментальной модели адьювантного артрита у линейных мышей C57Black6.
Ранняя стадия РА отличается низкой активностью апоптоза синовиальных клеток и, содержащихся в синовиальной оболочке лимфоцитарных инфильтратов. Низкая апоптотическая активность обусловлена несколькими факторами. Прежде всего, это гиперэкспрессия молекулы Bcl-2, стабилизирующая мембраны митохондрий и препятствующая реализации митохондриального пути апоптоза. Помимо этого низкая экспрессия проапоптотической молекулы р53, обусловленная двумя основными причинами: супрессирующим влиянием Bcl-2 и высокой концентрацией растворимого рецептора Fas, связывающим лиганды Fas и, таким образом, отменяющим Fas-зависимый путь развития апоптоза и активации экспрессии р53. Помимо этого, повышенная секреция IL-1в оказывает мощный антиапоптотический эффект, реализуемый через повышенную экспрессию молекулы Bcl-2, стабилизируемой экспрессией NOS.
Таким образом, на ранней стадии РА оказывается отмененным второй тип Fas-опосредованного апоптоза (митохондриальный), что обеспечивает неконтролируемую пролиферацию синовиальной оболочки.
Вместе с тем, уже на ранней стадии РА закладываются основы для индукции массивного апоптоза синовиальных клеток. Этот процесс связан с гиперэкспрессией i-NOS при участии которой генерируются большие количества локального NO, оказывающего генотоксическое воздействие и стимулирующего экспрессию р53 молекулы. Известно, что одной из основных функций р53 является контроль постоянства генетического аппарата клеток.
Поздняя стадия РА отличается значительным снижением экспрессии Bcl-2 и нарастающей гиперэкспрессией р53, предвестником активного апоптоза. По принципу отрицательной регуляторной петли р53 репрессирует синтез i-NOS, что в свою очередь вносит вклад в дестабилизацию митохондриальной мембраны, которая и без того утратила защитный потенциал Bcl-2. Это приводит к полной активации второго типа Fas-зависимого апоптоза и реализации его эффектов на морфологическом уровне, что мы наблюдали на этой стадии РА.
Кроме того, активизация синтеза IL-10 оказывает противовоспалительное действие, снижая активность воспалительной компоненты в синовиальной оболочке и отменяя стимулированную экспрессию i-NOS клеточными элементами синовиальной оболочки. Вместе с тем, перманентная экспрессия конститутивной формы нитрооксидсинтазы поддерживает Th1 пролиферацию и хроническую персистенцию умеренного воспаления на фоне постоянного синтеза IL-6, способствующего хронизации воспаления.
Таким образом, в процессе эволюции РА мы наблюдаем работу своего рода «молекулярного реостата» Bcl-2/р53, модулируемого воздействием интерлейкинов, нитрооксидсинтаз и определяющего неодинаковую интенсивность апоптоза на разных стадиях заболевания, что является причиной неконтролируемой пролиферации клеточных элементов синовиальной оболочки с соответствующими клиническими последствиями.
Сопоставление собственных результатов с литературными данными позволило создать принципиальную схему межклеточных коммуникаций в синовиальной оболочке человека при реализации механизмов апоптотической гибели на разных стадиях развития РА.
Рисунок 28. Принципиальная схема регуляции интенсивности апоптоза клеток синовиальной оболочки на ранней и поздней стадиях РА
Примечание: Стрелки серого цвета - усиление эффекта
Стрелки черного цвета - ослабление эффекта
ВЫВОДЫ
1. Патогенетическая значимость различной интенсивности апоптоза клеток синовиальной оболочки доказана на модели адъювантного артрита и при различных стадиях ревматоидного синовита по данным иммуноморфологических исследований операционных биоптатов больных РА.
2. Интенсивность апоптоза клеток синовиальной оболочки в эксперименте и у больных РА зависит от длительности и стадии синовита, уровня экспрессии NO-синтаз и баланса молекул, имеющих анти-апоптотическую (Bcl-2) или про-апоптоптическую (р53) активность.
3. Низкий апоптотический индекс синовиоцитов на ранней стадии адьювантного артрита и РА определяется гиперэкспрессией Bcl-2 и низким уровнем экспрессии р53.
4. Максимальный апоптотический индекс синовиоцитов характерен для поздней стадии РА. Он обусловлен противоположным ранней стадии РА паттерном распределения р53 и Bcl-2 молекул: гиперэкспрессией р53 и низким уровнем экспрессии Bcl-2.
5. Изменение уровня sFas достоверно коррелирует с апоптотическим индексом (r=-0,75), экспрессией р53 (r=-0,99), степенью активности (r=0,62) и функциональным классом (r=0,83) больных РА, что позволяет использовать его как интегративный показатель напряженности происходящих в синовиальной оболочке процессов программированной клеточной смерти.
6. Ранняя стадия адьювантного артрита и РА характеризуется высокой активностью NADPH-диафоразы (NADPH-d), конститутивной NOS (сNOS) и индуцибельной NOS (iNOS) в макрофагальных и фибробластических синовиоцитах. На поздней стадии РА количество iNOS-позитивных клеток достоверно снижается в 4 раза, синтез NO поддерживается за счет активности сNOS.
7. Bcl-2 и р53 частично со-локализованы с NADPH-d, что указывает на наличие NO-зависимого апоптоза. На ранней стадии РА NO действует как антиапоптотический фактор, который работает в функциональном тандеме с Bcl-2. Уровень экспрессии Bcl-2 достоверно коррелирует с ЧВС (r=0,67) и функциональным классом больных РА (r=0,71) и может быть использован в оценке прогноза течения РА.
8. Уровень метаболитов NO в синовиальной жидкости является надежным показателем активности, тяжести РА и эффективности проводимой терапии поскольку имеет многочисленные устойчивые связи с ЧБС, ЧВС, DAS28 индексом.
9. Уровень IL-1в в синовиальной жидкости достоверно коррелирует с ЧВС (r=0,74), а концентрация IL-6 в системном кровотоке и синовиальной жидкости - с содержанием метаболитов оксида азота в синовиальной жидкости, моче (r=0,99; r=0,97), СОЭ (r=0,62), тогда как содержание IL-10 в синовиальной жидкости связано с выраженностью эрозивного артрита (r=0,58; p<0,05), а его динамика - с развитием эффекта по критериям EULAR.
10. Изученные пути реализации механизмов апоптотической гибели на разных стадиях заболевания позволяют предложить схему межклеточных коммуникаций в синовиальной оболочке суставов и обосновать необходимость раннего начала базисной терапии больных РА.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Определение метаболитов оксида азота в синовиальной жидкости у больных РА рекомендуется использовать для оценки активности РА и эффективности проводимой терапии. За границы нормы при определении содержания в синовиальной жидкости метаболитов оксида азота следует считать (в мкМ/мл): NO2 - 1,08 ± 0,07; NO3 - 0,58 ± 0,04; суммарный NO - 1,66 ± 0,11. Особенно высокое их содержание отмечается при эрозивном РА (суммарный NO - 25,73 ± 3,78 мкМ/мл). Снижение уровня метаболитов коррелирует с улучшением клинического состояния больного.
2. Рекомендуется использовать определение концентрации IL-6 как прогностический маркер эволюции РА: стойкое сохранение высокого уровня IL-6 в системном кровотоке характерно для хронического прогрессивного течения РА.
3. Определение уровня IL-10 в системном кровотоке может служить критерием степени тяжести течения РА, а содержание IL-10 в синовиальной жидкости пораженных суставов на фоне лечения - критерием эффективности проводимой терапии.
4. Доступность определения sFas в клинической практике в сравнении с р53 и Bcl-2 молекулами позволяет рекомендовать мониторинг sFas у больных РА с целью контроля за эффективностью проводимой терапии и определения прогноза.
5. Базисную терапию у больных РА рекомендуется назначать в дебюте заболевания, что является патогенетически обоснованным подходом.
ПУБЛИКАЦИИ
монография
1. Дубиков А.И. Ревматоидный артрит, апоптоз, оксид азота: новые аспекты патогенеза. - Владивосток: Издательство Дальневост. ун-та, 2004. - 197 с.
статьи
2. Дубиков А.И. Роль оксида азота в деградации хрящевого матрикса у больных остеоартрозом // Ревматология. - 2003. - № 2 (Приложение: Тезисы Конгресса ревматологов России, Саратов. 2003.). - С. 31.
3. Дубиков А.И., Череповский А.В., Белоголовых Л.А., Медведь Е.Э., Никулин С.В. Роль оксида азота в патологии опорно-двигательного аппарата (Часть I) // Научно-практическая ревматология. - 2004. - № 3. - С. 78-82.
4. Дубиков А.И., Череповский А.В., Белоголовых Л.А., Медведь Е.Э., Никулин С.В. Роль оксида азота в патологии опорно-двигательного аппарата (Часть II) // Научно-практическая ревматология. - 2004. - № 4. - С. 53-56.
5. Дубиков А.И., Белоголовых Л.А., Медведь Е.Э. Апоптоз как механизм развития аутоиммунного воспаления в коленном суставе человека // Бюлл. экспериментальной биологии и медицины. - 2004. - Т.137. - № 12. - С. 641-644.
6. Дубиков А.И., Шуматова Т.А., Белоголовых Л.А., Медведь Е.А. Оксид азота как медиатор апоптоза при патологии опорно-двигательного аппарата // Сибирский медицинский журнал. - 2004. - № 3 (Т. 19). - С. 118-121.
7. Череповский А.В., Никулин С.В., Дубиков А.И., Белоголовых Л.А., Медведь Е.Э. Современные представления о патогенезе остеоартроза: роль оксида азота // Сибирский медицинский журнал. - 2004. - № 3 (Т. 19). - С. 121-125.
8. Дубиков А.И. Нитрооксидергические механизмы индукции апоптоза при патологии опорно-двигательного аппарата. - Владивосток, 2004. - 17 с. - Деп. в ВИНИТИ 20.05.2004, № 867-В2004.
9. Дубиков А.И., Череповский А.В., Белоголовых Л.А., Медведь Е.Э., Никулин С.В. Нитрооксидергические механизмы патологии опорно-двигательного аппарата. Ч. 1. - Владивосток, 2004. - 17 с. - Деп. в ВИНИТИ 20.05.2004, № 865-В2004.
10. Дубиков А.И., Череповский А.В., Белоголовых Л.А., Медведь Е.Э., Никулин С.В. Нитрооксидергические механизмы патологии опорно-двигательного аппарата. Ч. 2. - Владивосток, 2004. - 24 с. - Деп. в ВИНИТИ 20.05.2004, № 866-В2004.
11. Дубиков А.И., Белоголовых Л.А., Медведь Е.Э., Череповский А.В., Никулин С.В. Апоптотические механизмы патологии суставов. - Владивосток, 2004. - 25 с. - Деп. в ВИНИТИ 20.05.2004, № 868-В2004.
12. Дубиков А.И., Шуматова Т.А., Белоголовых Л.А., Медведь Е.Э. Топохимия NADPH-диафоразы в структурах коленного сустава человека и крыс и ее изменения при экспериментальном артрите // Морфология. - 2004. - № 5. - С.69.
13. Дубиков А.И., Белоголовых Л.А., Медведь Е.Э., Шуматова Т.А., Череповский А.В., Никулин С.В. Влияние селективных и неселективных ингибиторов циклооксигеназ на нитрооксинтазную активность хряща и синовии при аутоиммунном артрите // Человек и лекарство. XI Российский национальный конгресс. Тез. докладов. - Москва, 2004. - С. 783.
14. Дубиков А.И., Медведь Е.Э., Белоголовых Л.А., Шуматова Т.А., Никулин С.В., Череповский А.В. Влияние инфликсимаба на продукцию оксида азота клетками хряща и синовиальной оболочки суставов при адьювантном артрите // Человек и лекарство. XI Российский национальный конгресс. Тез. докладов. - Москва, 2004. - С. 783-784.
15. Череповский А.В., Дубиков А.И., Никулин С.В., Белоголовых Л.А., Медведь Е.Э. Активность нитрооксидсинтазы синовиальной оболочки в условиях индуцированного остеоартроза // International Journal of Immunorehabilitation. - 2004. - Vol. 6., № 1 (IX Междунар. конгресс по клинической патологии. Бангкок, Таиланд. 15 - 23 февраля 2004.). - С. 78-79.
16. Череповский А.В., Дубиков А.И., Никулин С.В., Белоголовых Л.А., Медведь Е.Э. Активность нитрооксидсинтазы и дисметаболия хряща в эксперименте // International Journal of Immunorehabilitation. - 2004. - Vol. 6., № 1: IX Международный конгресс по клинической патологии. Бангкок, Таиланд. 15 - 23 февраля 2004. - С. 79.
17. Dubikov A.I., Cherepovsky A.V., Belogolovyh L.A., Medvedev E.E., Nikulin S.V. Effects of the Anti-TNF-antibody Infliximab on Nitric Oxide (NO) Synthesis by Synovial Membrane and Cartiladge in Adjuvant Arthritis // Annals of the Rheumatic Diseases. - 2004. - July. - Vol. 63, Supplement 1. - P. 163.
18. Cherepovskii A.V., Dubikov A.I., Nikulin S.V., Belogolovykh L.A., Medved E.E. Nitroxide Synthase Activity as a Marker of Early Stages of Experimental Cartilage Dysmetabolism // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2004. - May. - Vol. 137, № 5. - P. 517 - 520.
19. Cherepovsky A.V., Dubikov A.I., Nikulin S.V., Belogolovyh L.A., Medved E.E. Chronic Posttraumatic Knee Synovitis: Nitric Oxide Synthase Activity and Apoptosis // 9th World Congress of the Osteoarthritis Research Society International. - In: Osteoarthritis and Cartilage. - 2004. - Vol. 12, № 1002. - P. 38.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Этиология, патогенез, классификация, проявления ревматоидного артрита. Изучение рабочей классификации клинических форм ревматоидного артрита. Рассмотрение особенностей применения лечебной физкультуры с целью физической реабилитации больных детей.
реферат [31,2 K], добавлен 11.01.2015Органы и системы, поражаемые артритом. Физическая реабилитация больных ревматоидным артритом. Двигательная активность как способ лечения артрита. Пассивные упражнения для суставов. Растяжение связочного аппарата пораженных суставов и укрепление мышц.
реферат [1,0 M], добавлен 08.11.2009Симптомы ревматоидного артрита: боль в суставах и их припухлость. Клинические особенности поражения ревматоидным процессом отдельных суставных групп. Классификация "ревматоидной кисти". Комплексное обследование при подозрении на ревматоидный артрит.
реферат [5,3 M], добавлен 08.11.2009Эпидемиология ревматоидного артрита, этиология, патогенез и патологическая анатомия. Разработка комплексной программы физической реабилитации женщин, страдающих ревматоидным артритом с учетом эмоционального состояния пациентов; проверка эффективности.
дипломная работа [476,7 K], добавлен 01.04.2012Апоптоз - генетическая клеточная гибель: цитологические признаки, молекулярные процессы. Механизм умирания клетки: причины, стадии. Морфологические проявления апоптоза, заболевания, связанные с его нарушением, роль в защите от онкологических заболеваний.
презентация [2,9 M], добавлен 25.12.2013Клинические, рентгенологические, лабораторные признаки ревматоидного артрита. Диагностические критерии ревматоидного артрита. Особенности применения артроскопии, компьютерной томографии и ультразвукового сканирования для диагностики заболевания.
презентация [1,0 M], добавлен 18.02.2013Морфология апоптоза - физиологической гибели клеток в живом организме. Структура и функции белков, участвующих в его регуляции. Цитопротекторы - лекарственные средства, защищающие здоровые клетки от цитотоксического действия лекарственных препаратов.
презентация [1,5 M], добавлен 14.03.2017Жалобы больного при поступлении на стационарное лечение, общее состояние, результаты обследований. Дневник курации больного ревматоидным артритом, план лечения с позиций доказательной медицины, назначенные медикаментозные препараты и курс физиотерапии.
история болезни [96,5 K], добавлен 29.09.2014Особенности санаторного и поликлинического этапов физической реабилитации детей, страдающих ревматоидным артритом. Влияние возраста, формы заболевания, степени ее активности на комплексное лечение больных. Реализация и успешное решение намеченных задач.
реферат [27,3 K], добавлен 11.01.2015Генетические факторы, формы (варианты) клинических проявлений ревматоидного артрита, его отличие от деформирующего остеоартроза и инфекционного полиартрита. Рабочая классификация ревматоидного артрита, принятая пленумом Всесоюзного общества ревматологов.
реферат [1,4 M], добавлен 15.09.2010Эпидемиология и этиология ревматоидного артрита - системного заболевания соединительной ткани с поражением суставов. Наследственная склонность к аутоиммунным реакциям. Варианты клинического течения ревматоидного артрита. Симптомы и течение заболевания.
презентация [633,1 K], добавлен 11.12.2014Эпидемиология, этиология, патологическая анатомия и патогенез, клиническая картина, внесуставные проявления ревматоидного артрита. Слабость мышц и их атрофия. Течение и прогноз при ревматоидном артрите. Диагностика и лечение ревматоидного артрита.
реферат [51,6 K], добавлен 22.01.2015Медико-биологические показатели организма, больных реактивным артритом. Возникновение, развитие реактивного артрита и инфекции вызывающие заболевание. Метод интервальных оценок. Различие показаний уровня CD-антигена между группой женщин и мужчин.
курсовая работа [137,9 K], добавлен 10.08.2010Соотношение мужчин и женщин среди больных ревматоидным артритом. Генетическая предрасположенность больных. Поражение локтевого сустава. Оценка функциональных возможностей больного. Выбор базисной терапии и реабилитации. Основные критерии инвалидности.
презентация [825,5 K], добавлен 21.12.2014Предоперационный и интраоперационный период у больных с переломами бедра, проблема выбора методики анестезии. Этапы и осложнения тотального эндопротезирования тазобедренного сустава. Особенности, системные проявления и протекание ревматоидного артрита.
реферат [17,1 K], добавлен 07.01.2010Этиология и патогенез ревматоидного артрита - хронического иммуновоспалительного заболевания соединительной ткани, характеризующегося эрозивно-деструктивным поражением преимущественно периферических суставов. Диагностические критерии и стадии артрита.
презентация [1,2 M], добавлен 23.12.2015Апоптоз как физиологическая смерть клетки, представляющая собой своеобразную генетически запрограммированную самоликвидацию, история исследования, механизм действия. Роль апоптоза в процессах старения, его фазы и причины патологического усиления.
реферат [380,2 K], добавлен 04.05.2015Особенности применения нестероидных противовоспалительных средств при ревматоидном артрите. Лечебный эффект от использования лекарственных препаратов, возможность развития побочных действий, индивидуализация выбора. Факторы риска гастротоксичности.
презентация [167,0 K], добавлен 21.12.2014Оценка транскрипционной активности генов синтаз оксида азота в сетчатке крыс разного возраста, оценка возможной связи развития ретинопатии с изменением генерации NO. Изменение генерации оксида азота при старении и развитии связанных с ним заболеваний.
курсовая работа [980,8 K], добавлен 27.06.2013Противопоказания к назначению УФО. Ультразвуковая терапия в подостром периоде при ревматоидном артрите. Аппликационные варианты грязелечения. Применение гидротерапии при реабилитации суставных заболеваний. Аэрогелиотерапия как метод закаливания.
реферат [16,9 K], добавлен 08.11.2009
