Роль различных типов антиген-презентирующих клеток в регуляции апоптоза лимфоцитов и репликации ВИЧ-1 при ВИЧ-инфекции

С целью идентификации лиганд-рецепторных взаимодействий между профессиональными АПК и СD4⁺-Лф, инициирующих репликацию ВИЧ-1, были проведены эксперименты с использованием блокирующих мАТ. Было установлено, что культивирование ДК с СD4⁺-Лф в присутствии анти-CD80 и анти-CD86 мАТ к существенному подавлению вирусной репликации (p<0.001). Использование мАТ к молекулам МНС II класса также оказывало выраженный ингибирующий эффект (p<0.001).

Внесение в культуру ДК/СD4⁺-Лф анти-CD2 мАТ, а также анти-LFA1 мАТ не оказывало аналогичного эффекта. Блокада рецептора DC-SIGN с помощью мАТ приводила к умеренному подавлению вирусной репликации.

Роль дендритных клеток и макрофагов в регуляции апоптоза продуктивно инфицированных и неинфицированных СD4⁺ - лимфоцитов.

СD4⁺-Лф, культивированные с ДК или Мф, подвергаются апоптозу. Тем не менее, процент клеток, гибнущих по механизму апоптоза, в неинфицированных культурах был чрезвычайно малым. Внесение ВИЧ-1 в культуру ДК/СD4⁺-Лф или Мф/СD4⁺-Лф приводило к существенному повышению процента СD4⁺-Лф, погибающих по механизму апоптоза. Признаки программированной клеточной гибели наблюдались преимущественно у неинфицированных СD4⁺-Лф, культивированных с ДК или Мф. Максимальные значения апоптозных клеток были зарегистрированы у неинфицированной популяции СD4⁺-Лф на 6 и 9 сутки культивирования (для культур ДК/СD4⁺-Лф и Мф/СD4⁺-Лф, соответственно). В то же время наибольшее количество апоптозных клеток среди продуктивно инфицированных СD4⁺-Лф, культивированных с ДК и Мф наблюдалось на 9 и 12 сутки их совместного культивирования, соответственно (табл. 4 и 5). Количество клеток, подвергающихся апоптозу, среди инфицированных СD4⁺-Лф было существенно ниже по сравнению с неинфицированными клетками (р<0.01).

Таблица 4

Количество СD4⁺-Лф (в %), подвергающихся апоптозу при их культивировании с ДК

** - р<0.05 по сравнению с контролем.

Таблица 5

Количество СD4⁺-Лф (в %), подвергающихся апоптозу при их культивировании с Mф

** - р<0.05 по сравнению с контролем.

Роль белка ВИЧ-1 Nef в регуляции репликации ВИЧ-1.

Учитывая многочисленные литературные данные, свидетельствующие о роли белка ВИЧ-1 Nef в патогенезе ВИЧ-1 инфекции, обусловленные его способностью регулировать процессы вирусной репликации и апоптоза СD4⁺-Лф, представляло интерес изучить его свойства в использованных нами экспериментальных моделях вирусной репликации и апоптоза продуктивно инфицированных и неинфицированных СD4⁺-Лф.

Было выявлено, что несмотря на некоторое “запаздывание” процессов репликации Nef-, его содержание p24^gag в супернатантах ФГА-активированных Лф были сопоставимы с количествами p24^gag вируса, не имевшего в геноме делецию по вышеуказанному гену (Nef+) (рис.18). Также было выявлено отсутствие способности данного белка ВИЧ-1 влиять на количество продуктивно инфицированных клеток в культурах ФГА-активированных Лф (рис.17).

2 4 6 8 10 12

Рис.17 Репликация ВИЧ-1 в ФГА-активированных - Лф (сплошная линия - Nef+; прерывистая - Nef-). По оси абсцисс - продолжительность культивирования клеток (дни), по оси ординат - количество р24^gag антигена в супернатантах (нг/мл)

а б

Рис.18. Количество продуктивно инфицированных Лф, преактивированных ФГА (в течение 2 дней) и инфицированных Nef- (А) и Nef+ (Б). Гистограмма Лф на пике вирусной репликации: для Nef+ - 6 день культивирования, для Nef- - на 10 день культивирования. По оси абсцисс - интенсивности флуоресценции мАТ к р24gag , меченых FITC, по оси ординат - количество клеток

Инфицирование клеточной линии СЕМх174 показало, что количество продуктивно инфицированных клеток, определяемых по внутриклеточному содержанию p24^gag, при их инфицировании Nef+ и Nef- достоверно не отличаются друг от друга (рис. 19). Аналогичные результаты были получены при инфицировании с помощью Nef+ и Nef- индикаторной клеточной линии СЕМ-GFP.

а б

Рис. 19. Количество продуктивно инфицированных клеток линии СЕМх174 на 6 сутки культивирования после внесения эквивалентных доз Nef+ (Б) и Nef- (А). По оси абсцисс - интенсивности флуоресценции мАТ к р24gag , меченых PE, по оси ординат - количество клеток

Внесение эквивалентных доз Nef- и Nef+ к СD4⁺-Лф, культивированным в различными типами АПК выявило существенные различия в динамике и уровне вирусной репликации, оцениваемой как по содержанию р24^gag антигена ВИЧ-1 в супернатантах клеточных культур, так и по количеству продуктивно инфицированных клеток. Пик репликации Nef в культуре ЭК/СD4⁺-Лф регистрировался на 12 сутки культивирования клеток. Уровень репликации вируса ВИЧ-1 с фенотипом Nef+ был в 100 раз выше по сравнению с его производным - Nef- (p<0.001). В ряде экспериментов уровень репликации Nef- даже не превышал фоновых значений (табл.6). Культивирование двух типов клеток по отдельности не индуцировало репликацию ВИЧ-1.

Аналогичные закономерность и динамика репликации Nef+ и Nef- в культуре ЭК/CD4⁺-Лф наблюдалась как для штамма NL4-3, полученного в результате трансфекции генома ВИЧ-1 в СЕМх174 клетки, так и для этого же штамма вируса, продуцентами которого были ФГА-активированные Лф серонегативных доноров.

Таблица 6

Влияние ЭК на уровень репликации ВИЧ-1 (Nef+; Nef-) в CD4⁺-Лф.

** - р<0.01, *** - р<0.001 по сравнению с Nef-.

Инфицирование СD4⁺-Лф, культивированных с профессиональными АПК (ДК или Мф), приводит к иным результатам. Было выявлено, что присутствие ДК и Мф способствует репликации в СD4⁺-Лф не только ВИЧ-1 с фенотипом Nef+ , но и вируса, в геноме которого имеется делеция по гену nef (Nef-) (рис.20). Количество корового белка ВИЧ-1 в супернатантах культур, инфицированных вирусами с фенотипом Nef+ и Nef- на пике вирусной репликации, достоверно не отличалось друг от друга.

Таким образом, результаты по изучению способности белка ВИЧ-1 Nef индуцировать вирусную репликацию в клетках-мишенях показали, что только при культивировании CD4⁺-Лф в присутствии ЭК, данный белок ВИЧ-1 способен существенным образом повлиять на этот процесс.

Все вышеизложенное свидетельствует о том, что сигналы, исходящие со стороны ЭК и получаемые инфицированными CD4⁺-Лф, способны инициировать вирусную репликацию. В то же время, отсутствие репликации вируса с фенотипом Nef- в CD4⁺-Лф в этой экспериментальной модели, позволяет предположить, что данный белок ВИЧ-1 способен усиливать сигналы, получаемые CD4⁺-Лф. Другим объяснением выявленного феномена может являться Nef-зависимое снижение порога чувствительности инфицированных CD4⁺-Лф к активационным сигналам со стороны полупрофессиональных АПК, а именно, ЭК. Отсутствие способности белка Nef усиливать процессы вирусной репликации в CD4⁺-Лф, культивированных с профессиональными АПК (ДК и Мф), может являться следствием эффективной ко-стимуляции клеток-мишеней со стороны ДК и Мф. Известно, что профессиональные АПК экспрессируют на своей поверхности значительно больший спектр ко-стимулирующих молекул по сравнению с ЭК.

1 3 6 9 12 15

Рис.20. Уровень репликации Nef- и Nef+ в CD4⁺-Лф, культивированных с ДК и Мф. (ДК/СD4⁺ -Лф, инфицированные Nef+ и Nef- - А и Б, соответственно; Мф/СD4⁺-Лф, инфицированные Nef+ и Nef- - В и Г, соответственно). По оси абсцисс - продолжительность культивирования (дни), по оси ординат - количество р24gag антигена в супернатантах (нг/мл)

Для подтверждения выдвинутой гипотезы было проведено инфицирование CD4⁺-Лф, культивированных в присутствии ЭК и стимулирующих анти-CD28 мАТ. Известно, что именно с помощью рецептора CD28 на поверхности Т-Лф происходит восприятие ими главного ко-стимулирующего сигнала, исходящего со стороны профессиональных АПК, а молекулы пары CD80(86) - CD28 являются ключевыми для эффективной пролиферации клеток и дифференцировки “наивных” Т-Лф в клетки эффекторного звена (Pardi R., 1992, Linsley P.S., 1993).

Следовательно, отсутствие экспрессии молекулы CD28 на поверхности ЭК приводит к субпороговой активации клеток мишеней. Было сделано предположение, что в условиях дефицита факторов, обеспечивающих полноценную активацию клеток-мишеней, присутствие вирусного белка Nef в липидных плотах клеточных мембран клеток-мишеней могло являться фактором, снижающим требовательность к подобного рода активационным стимулам, исходящим со стороны молекул семейства В7 (а именно, CD80, 83 и 86). Подтверждением данной гипотезы явилось бы увеличение уровня репликации вируса с фенотипом Nef- в CD4⁺-Лф, стимулированных с помощью анти-CD28 мАТ и культивированных в присутствии ЭК.

Было обнаружено, что такого рода дополнительная стимуляция CD4⁺-Лф, культивированных в присутствии ЭК, приводит к усилению репликации вируса с фенотипом Nef+ (рис.21).

1 3 6 9 12 15

Рис.21. Уровень репликации Nef- и Nef+ в CD4⁺-Лф, культивированных с ЭК в присутствии или отсутствии анти-CD28-мАТ Nef+ - А (без мАТ) и Б (с мАТ) линии, соответственно; Nef- - В (без мАТ) и Г (с мАТ) линии, соответственно. По оси абсцисс - продолжительность культивирования (дни), по оси ординат - количество р24gag антигена в супернатантах (нг/мл)

Таким образом, способность белка ВИЧ-1 Nef усиливать вирусную репликацию в CD4⁺-Лф, культивированных в присутствии ЭК, не обусловлена его способностью “заменять” ко-стимулирующий сигнал, исходящий со стороны молекул семейства В7.

Учитывая традиционную точку зрения о взаимосвязи между процессами вирусной репликации и активации клеток-мишеней, а также существенные различия в уровне репликации Nef+ и Nef- в CD4⁺-Лф, культивированных в присутствии ЭК, было выдвинуто следующее предположение: вирусный белок Nef снижает порог чувствительности инфицированных клеток к активационным сигналам, исходящим со стороны ЭК. Это, в свою очередь, приводит к активации инфицированных Лф, даже в отсутствии проведения основных (CD80(6)-опосредованных) ко-стимулирующих сигналов, что, в свою очередь, неизбежно инициирует вирусную репликацию в Лф.

Для проверки выдвинутой гипотезы были проведены исследования по изучению уровня активации Лф, в культурах ЭК/CD4⁺-Лф, инфицированных вирусами с фенотипами Nef+ и Nef-. В качестве критерия активации Лф использовали уровень секреции ими ИЛ-2, определяемого по его содержанию в супернатантах. Результаты проведенных исследований показали, что уровень секреции ИЛ-2 в супернатантах ЭК/CD4⁺-Лф, инфицированных вирусами с фенотипами Nef+ и Nef- не отличается существенным образом друг от друга (табл. 7).

Таблица 7

Уровень секреции ИЛ-2

Примечание: н.о. - неопределяемый уровень цитокина

Отсутствие различий в уровне ИЛ-2 между культурами, инфицированными Nef+ и Nef- могло быть следствием двух процессов. Во-первых, несмотря на отсутствие белка Nef в инфицированных Лф, последние реактивируются, но этого является недостаточным для запуска в них процессов вирусной репликации. Во-вторых, процессы вирусной репликации и активации клеток-мишеней могут быть разобщены друг с другом, и репликация ВИЧ-1 может происходить в клетках, не продуцирующих ИЛ-2. В пользу правомочности второй гипотезы свидетельствуют результаты проведенных исследований, свидетельствующие о том, что клетки-продуценты ВИЧ-1 в культурах ЭК/CD4⁺-Лф, представлены минимально активированными и непролиферирующими Лф.

Роль белка ВИЧ-1 Nef в регуляции апоптоза СD4⁺-Лф.

Изучение механизмов апоптоза продуктивно инфицированных и неинфицированных клеток в культурах клеточных линий и ФГА-активированных Лф показали, что оба типа клеток оказываются подверженными в равной степени апоптозу. Количество продуктивно инфицированных клеток, подвергающихся гибели по механизму апоптоза среди ФГА-активированных Лф, продуцирующих ВИЧ-1 с фенотипом Nef- было даже меньшим по сравнению с культурами ФГА-активированных Лф, являвшихся продуцентами ВИЧ-1 с фенотипом Nef+. Выявленная закономерность прослеживалась на всех сроках культивирования ФГА-активированных Лф и не изменялась при внесении больших или меньших инфекционных доз Nef+ и Nef.

Следующим этапом исследования явилось изучение способности вирусного белка Nef регулировать процессы апоптоза инфицированных и неинфицированных CD4⁺-Лф, культивированных с различными типами АПК.

Учитывая чрезвычайно низкий уровень репликации ВИЧ-1 с фенотипом Nef- в CD4⁺-Лф, культивированных с ЭК, была предпринята попытка увеличить количество продуктивно инфицированных клеток в данной экспериментальной модели за счет увеличения инфекционной дозы Nef-. Было обнаружено, что внесение больших инфекционных доз ВИЧ-1 с фенотипами Nef+ и Nef- приводит к некоторому усилению репликации ВИЧ-1 с фенотипом Nef- (р<0.05). В то же время, внесение в культуру ЭК/CD4⁺-Лф эквивалентных инфекционных доз Nef+ приводит в значительному увеличению уровня вирусной репликации (р<0.001).

Изучение механизмов программированной клеточной гибели у Лф, культивированных в присутствии ЭК, выявило, что при внесении в клеточную культуру ВИЧ-1 с фенотипом Nef- (в дозах 20 и 100 нг/мл) клетки-продуценты вируса погибают по механизму апоптоза. В то же время, Лф, продуцирующие ВИЧ-1 с фенотипом Nef+, оказываются по-прежнему резистентными к апоптозу (рис.23). Эта закономерность прослеживалась при изучении всех маркеров апоптоза ( фрагментации ДНК - (нижние правые квадраты рис.22 А, Б; экспрессии фосфатидилсерина - верхние правые квадраты рис.22 В, Г).

а б

в г

Рис. 22. Признаки фрагментации ДНК (А, Б) и экспрессии фосфатидилсерина (В, Г) на продуктивно инфицированных (правые квадраты dot-plot) и неинфицированных (левые квадраты dot-plot) Лф, культивированных с ЭК. Инфицирование Nef+ (А, В) и Nef- (Б, Г) в дозе 20 нг/мл. По оси абсцисс - интенсивность флуоресценции мАТ к p24 gag; По оси ординат - интенсивность флуоресценции пропидиум йодида (А, Б); Аннексина V (В, Г)

Таким образом, инфицирование CD4⁺-Лф, культивированных с ЭК, индуцирует репликацию ВИЧ-1. Кроме того, клетки-продуценты ВИЧ-1 являются устойчивыми к апоптозу. Оба этих феномена (репликация ВИЧ-1 и резистентность к апоптозу у продуктивно инфицированных Лф) являются Nef-зависимыми.

Способность белка ВИЧ-1 Nef обуславливать резистентность к апоптозу у продуктивно инфицированных Лф была исследована при их культивировании с другими типами АПК (ДК и Мф). Количество клеток с признаками фрагментации ДНК у клеток-продуцентов ВИЧ-1 с фенотипом Nef+ было меньшим по сравнению с клетками, являвшимися продуцентами ВИЧ-1 с фенотипом Nef- (рис.23). Аналогичная закономерность была выявлена и при исследовании величины митохондриального потенциала и экспрессии фосфатидилсерина.

Различная чувствительность к апоптозу у Лф, продуцирующих Nef+ и Nef-, была выявлена и у CD4 ⁺ -Лф, культивированных с Мф. По-прежнему, клетки-продуценты Nef+ обладали большей устойчивостью к апоптозу, по сравнению с Лф, являвшимися продуцентами ВИЧ-1 с фенотипом Nef- (р< 0.05). Эта закономерность наблюдалась при инфицировании CD4⁺-Лф как малыми (10 нг/мл), так и большими (100 нг/мл) инфекционными дозами ВИЧ-1.

Рис.23. Количество Лф с признаками фрагментации ДНК при их культивировании с ДК и инфицировании Nef+ или Nef- в дозе 20 нг/мл

Наряду с выявленной устойчивостью к апоптозу у продуктивно инфицированных Лф, культивированных с АПК, было установлено, что неинфицированные Лф интенсивно погибают по механизму апоптоза. Данный феномен был подтвержден и на клеточной линии CEM-GFP (рис.25). Количество клеток со сниженным митохондриальным потенциалом (?_m^low-клеток) у неинфицированной (GFP-негативной) популяции клеток линии CEM-GFP (левые нижние квадраты рис.25А) было существенно выше по сравнению с неинфицированной (GFP-позитивной) популяцией. Неинфицированные клетки экспрессировали значительно больше ФС (верхние правые квадраты рис.25Б) по сравнению с инфицированными.

а б

Рис.25. Величина ?_m (А) и экспрессия ФС (Б) у инфицированных (GFP+) и неинфицированных (GFP-) клеток линии СЕM-GFP на 5 сутки культивирования

Изучение способности белка ВИЧ-1 Nef влиять на апоптоз неинфицированных Лф показало, что в культурах Лф, инфицированных ВИЧ-1 с фенотипом Nef-, количество неинфицированных клеток, подвергающихся программированной клеточной гибели, существенно ниже по сравнению с культурами Лф, инфицированными вирусом с фенотипом Nef+ (p<0.001). Эта закономерность была выявлена как в культуре ФГА-активированных Лф, так и при культивировании Лф с различными типами АПК, в частности, ЭК и ДК.

Результаты исследования коррелирует с данными о возможности индукции апоптоза неинфицированных клеток белком Nef, высвобождающимся во внеклеточное пространство (James, 2004).

Таким образом, результаты проведенных исследований по изучению взаимосвязи репликации ВИЧ-1 и апоптоза выявили, что репликация ВИЧ-1 сопровождается подавлением программы апоптоза инфицированных клеток, что создает условия для персистенции вируса и его репликации. Ослабление программы апоптоза инфицированных Лф, культивированных с ЭК, обусловлено белком Nef. Данный белок ВИЧ-1 играет также важную роль в индукции апоптоза неинфицированных СD4⁺-Лф, что приводит к быстрому снижению их количества, являющегося одним из основных признаков прогрессирования ВИЧ-инфекции.

ВЫВОДЫ

1. Репликация ВИЧ-1 в CD4-лимфоцитах является результатом их межклеточных взаимодействий как с профессиональными, так и полу-профессиональными антиген-презентирующими клетками.

2. Ведущим фактором репликации ВИЧ-1 в лимфоцитах взаимодействующих с различными типами антиген-презентирующих клеток, являются лиганд-рецепторные взаимодействия.

3. Репликация ВИЧ-1 в лимфоцитах, взаимодействующих с эндотелиальными клетками, не сопровождается появлением классических признаков их активации и пролиферации.

4. Эндотелиальные клетки индуцируют устойчивость к апоптозу продуктивно инфицированных лимфоцитов, в то время как профессиональные антиген-презентирующие клетки (дендритные клетки и макрофаги) не обладают данной способностью.

5. Устойчивость продуктивно инфицированных лимфоцитов к апоптозу обусловлена их лиганд-рецепторными межклеточными взаимодействиями с эндотелиальными клетками.

6. Способность эндотелиальных клеток инициировать репликацию ВИЧ-1 в лимфоцитах является результатом экспрессии в инфицированных клетках вирусного белка Nef. Дендритные клетки и макрофаги инициируют репликацию ВИЧ-1 в лимфоцитах Nef-независимым путем.

7. Устойчивость к апоптозу у продуктивно инфицировнных лимфоцитов, взаимодействующих с эндотелиальными клетками, обусловлена вирусным белком Nef.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Модели индукции и оценки апоптоза лимфоцитов периферической крови могут быть использованы в качестве комплексного анализа предполагаемых нарушений регуляции апоптоза и его механизмов.

2. Методы индукции и оценки апоптоза, использованные в настоящей работе, могут быть применены в качестве тест-систем для оценки эффективности терапии ВИЧ-инфекцией.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Boichuk S.V., Mustafi I.G., Makarova M.V. Vascular endothelial cells (ECs) promote apoptosis resistance // Abstr. XVI International AIDS Conference, Toronto, Canada.. - 13-18 August 2006, Toronto, Canada. - Abstract book, Vol.1. - P.295.

2. Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Макарова М.В. Роль эндотелиальных клеток в регуляции апоптоза инфицированных ВИЧ-1 CD4+ лимфоцитов //Медицинская иммунология. - 2006. - № 8(4) - C.523-530.

3. Макарова М.В., Бойчук С.В., Мустафин И.Г. Интерлейкин-7 в процессах репликации ВИЧ-1, активации и апоптоза продуктивно инфицированных лимфоцитов //VI съезд аллергологов и иммунологов СНГ, Российский Национальный конгресс аллергологов и иммунологов, III Российская конференция по иммунотерапии. - Москва, 11-14 сентября 2006. - Аллергология и иммунология. - 2006. - Том 7, №3. - С.404.

4. Макарова М.В., Бойчук С.В., Мустафин И.Г. Причинно-следственные взаимоотношения между процессами активации лимфоцитов, репликации ВИЧ-1 и апоптозом клеток-продуцентов //Российская науч-практ. конф-ция, посвящ-я 110-летию кафедры инф-х.болезней ВМА им.С.М.Кирова. - С-Петербург. - 22-24 марта 2006 г. - С.200-201.

5. Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Макарова М.В., Дунаев П.Д. Изучение роли ИЛ-7 в репликации ВИЧ-1 in vitro //IX Всероссийский научный форум с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге». - Медицинская иммунология. - 2006. - 8(2-3). - С.120-121.

6. Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Макарова М.В. Роль эндотелиальных клеток в регуляции апоптоза неинфицированных и инфицированных CD4+ лимфоцитов // IX Всероссийский научный форум с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге». - Медицинская иммунология. - 2006. - 8(2-3). - С.121.

7. Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Макарова М.В., Дунаев П.Д. Интерлейкин-7 (IL-7) способен модулировать процессы апоптоза неинфицированных и инфицированных ВИЧ-1 лимфоцитов // IX Всероссийский научный форум с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге». - Медицинская иммунология. - 2006. - 8(2-3). - С. 121-122.

8. Хасанова Г.Р., Макарова М.В., Анохин В.А., Романенко О.М., Назарова О.А. Анализ эффективности проведения химиопрофилактики ВИЧ-инфекции в г.Казани //Казанский медицинский журнал. - 2006 . - Т. 87, приложение. - С. 91.

9. Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Макарова М.В. Роль интерлейкина-7 в регуляции апоптоза и репликации ВИЧ-1 //Нижегородский медицинский журнал. - 2006. - №4. - С.34-38.

10. Макарова М.В., Бойчук С.В., Мустафин И.Г. Некоторые механизмы репликации ВИЧ-1: роль процессов активации и апоптоза лимфоцитов и клеточных линий //V Симпозиум с международным участием “Физиология иммунной системы. Перспективные подходы к диагностике и терапии иммунопатологий и аллергических заболеваний” - Москва, 17-18 октября, 2006. - C.45-46.

11. Хасанова Г.Р., Абросимова А.А., Макарова М.В., Степанова Е.Ю., Романенко О.М. Анемия у детей, рожденных ВИЧ-инфицированными женщинами //Казанский медицинский журнал. - 2006. - Том 87, приложение. - C.92.

12. Макарова М.В., Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Романенко О.М. Роль антигенпрезентирующих клеток в репликации ВИЧ-1 //V Всемирный конгресс по иммунопатологии и аллергии, V Европейский конгресс по астме. Москва, 22-25 апреля 2007. - Аллергология и иммунология. - 2007. - Том 8, №1. - С.100.

13. Макарова М.В., Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Романенко О.М. Роль антигенпрезентирующих клеток в репликации ВИЧ-1 //VIII Конгресс «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии». - Российский аллергологический журнал. - 2007. - №3, прил.1 - 322-323.

14. Макарова М.В. Различная чувствительность продуктивно инфицированных ВИЧ-1 и не инфицированных клеток к апоптозу //Российский биотерапевтический журнал. - 2007. - №3, том 6. - С. 67-70.

15. Хасанова Г.Р., Степанова Е.Ю., Макарова М.В. Анемия у ВИЧ-инфицированных пациентов //Неврологический вестник том ХХХ1Х вып.3. Материалы IV региональной научно-практической конференции «Педиатрия и детская хирургия в Приволжском Федеральном округе», 2007. - С.191-192.

16. Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Макарова М.В., Дунаев П.Д. Некоторые механизмы репликации ВИЧ-1 и апоптоза CD4+лимфоцитов //VIII Конгресс «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии». - Российский аллергологический журнал. - 2007. - №3, прил.1 - C.319-320.

17. Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Макарова М.В., Дунаев П.Д., Л.Александер Механизмы репликации ВИЧ-1 в CD4+Лф: роль антигенпрезентирующих клеток //Иммунология. - 2007. - №4. - С.196-200.

18. В.А.Анохин, В.Д.Менделевич, Д.А.Бикмухаметов, М.В.Макарова, О.М.Романенко, Л.И.Бадриева, Ю.Г.Юденков, Р.Р.Таипова Приверженность пациента к антиретровирусной терапии //Казанский медицинский журнал. - 2007. - Том 88, №4 . - С. 305-310.

19. Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Макарова М.В. Перспективы применения некоторых цитокинов в качестве иммунноадъювантной терапии ВИЧ-инфекции //VI Национальный конгресс «Человек и лекарство», Москва, 16-20 апреля 2007 - С.532-533.

20. Мустафин И.Г., Макарова М.В., Бойчук С.В. Репликация ВИЧ-1 и апоптоз лимфоцитов при их инфицировании in vitro //Объединенный иммунологический форум, Санкт-Петербург, апрель-сентябрь 2008. - Российский иммунологический журнал. - 2008.- Т.2(11), №2-3.- С.269.

21. Макарова М.В., Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Дунаев П.Д. Роль различных типов антигенпрезентирующих клеток в репликации ВИЧ-1 // Объединенный иммунологический форум, Санкт-Петербург, 30 июня - 5 июля 2008. - Российский иммунологический журнал. -2008. - Т.2(11), №2-3.- С.269.

22. Хасанова Г.Р., Мухарямова Л.М., Назарова О.А., Анохин В.А., Макарова М.В., Романенко О.М. Этические аспекты перинатальной профилактики ВИЧ-инфекции //Вестник Уральской медицинской академической науки. - 2008. - N2(20). - С.153-158.

23. Бойчук С.В., Иванова А.В., Мустафин И.Г., Макарова М.В., Дунаев П.Д., Александер Л. Различная чувствительность продуктивно инфицированных ВИЧ-1 и неинфицированных клеток к апоптозу //Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 2008. - №4 - 7-9.

24. Макарова М.В., Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Иванов А.В., Дунаев П.Д., Александер Л. Апоптоз продуктивно инфицированных ВИЧ-1 и неинфицированных лимфоцитов in vitro //Астраханский медицинский журнал. - 2008. - Т.3, №3. - С.113-116

25. П.Д. Дунаев, А.В. Иванкова, С.В. Бойчук, И.Г. Мустафин, М.В. Макарова Инфицирование ВИЧ-1 лимфоцитов in vitro, преинкубированных с цитокинами (ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-7, ФНО-б), снижает их активацию //Х Международный конгресс «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии», посвященный 100-летию со дня рождения академика АМН А.Д. Адо. 20-23 мая 2009г. Тезисы докладов. - Казань: Идел-Пресс, 2009. - С.219.

26. Макарова М.В., Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Дунаев П.Д. Эндотелиальные клетки и репликация ВИЧ-1 //Международная конференция «Физиология и патология иммунной системы», IV Международная конференция по иммунотерапии,Москва, 15-17 сентября 2008. - Аллергология и иммунология. - 2008. - Том 9, №3. - С.300

27. Макарова М.В., Мустафин И.Г., Бойчук С.В., Дунаев П.Д., Иванкова А.В. Роль белка ВИЧ-1 NEF в регуляции апоптоза CD4 лимфоцитов //VII съезд аллергологов и иммунологов СНГ, II Всемирный Форум по астме и респираторной аллергии, Санкт-Петербург, 26-28 апреля 2009. - Аллергология и иммунология. - 2009. - Том 10, №2. - С.240

28. Макарова М.В., Бойчук С.В., Мустафин И.Г., Иванкова А.В., Иванов А.В., Александер Л. Роль эндотелиальных клеток и белка Nef в репликации ВИЧ-1 //Инфекционные болезни. - 2009. - Т.7, № 3. - С.18-24.

29. Иванкова А.В., Бойчук С.В., Мустафин С.В., Макарова М.В. Роль ВИЧ-1 белка Nef в патогенезе ВИЧ-инфекции //Казанский мед. ж. - 2010. - Том 91, №1.- С.79-85.

30. Иванкова А.В., Дунаев П.Д., Бойчук С.В., Макарова М.В., Мустафин С.В. Наличие в структуре ВИЧ-1 белка Nef обуславливает неблагоприятное течение инфекции в условиях цитокин-индуцированной активации Т-лимфоцитов //Труды Межрегионального форума «Актуальные вопросы аллергологии и иммунолгии - междисциплинарные проблемы», С-Петербург, 27-30 сентября 2010 - Российский аллергологический журнал. - 2010. - №5, вып.1 - С.124-125.

Размещено на Allbest.ru