Роль клеток крови в связи между толерантностью к тромбину, содержанием в кровотоке продуктов взаимодействия тромбин-фибриноген и липидпероксидацией

Рисунок 5. Изменения содержания маркеров НВСК и толерантности к тромбину в разные периоды года (в % к среднегодовым значениям)

На диаграммах рис. 5 видно, что сдвиги содержания маркеров НВСК сопровождались изменениями толерантности к тромбину, как ранее при кровопотере, или введении адреналина: содержание маркеров НВСК достоверно выше среднегодовых значений зимой и осенью, а весной и летом ниже их. Продемонстрированная с помощью полиномиальных трендов (их использование корректно для аппроксимации фазно изменяющихся величин) динамика сдвигов указывает, что толерантность к тромбину ниже в зимний и осенний сезоны, и выше - весной и летом, а содержание маркеров НВСК в те же периоды соответственно растет и падает.

Таким образом, в разных экспериментальных ситуациях (варьирование дозой тромбина, введение адреналина, кровопотеря, сезонные сдвиги) повышенному содержанию маркеров НВСК (или ВТФ) соответствуют уменьшенные значения толерантности к тромбину. Чтобы не перегружать рисунков, мы не обсуждаем здесь сдвиги косвенных показателей ВТФ (фф. Р ₃ и Р ₄): они ведут себя точно также, как ПДФ, РКМФ и D-димеры - их содержание повышено в тех случаях, когда толерантность к тромбину снижается, и наоборот - содержание тромбоцитарных факторов ниже в моменты повышения толерантности к тромбину.

В конечном счете, выявлена определенная закономерность: рост содержания прямых и косвенных показателей интенсивности ВТФ (или содержания маркеров НВСК) сопровождает снижение толерантности к тромбину, а уменьшение их содержания сопровождает рост толерантности к тромбину. Это проявляется и при экзогенной гипертромбинемии, и при гипертромбинемии, обусловленной ускоренным (под воздействием разных факторов) тромбиногенезом. Следовательно, ускорение НВСК, оцениваемое по приросту содержания определявшихся нами маркеров, сопровождается снижением толерантности к тромбину, т.е. повышением опасности внутрисосудистого тромбообразования. Видимо, определение уровня маркеров, прямо или косвенно отражающих интенсивность ВТФ в кровотоке, позволяет судить о степени "готовности" организма реагировать на гипертромбинемию.

Содержание маркеров НВСК и прокоагулянтная активность тромбоцитов при изменении скорости ЛПО. Внутрисосудистое свертывание крови, контролируемое по уровню маркеров НВСК, интенсифицируется при ускорении ЛПО [Умутбаева, 2004, 2005], в чем участвуют и клетки крови [Кубатиев, С.В. Андреев, 1981; И.В. Ральченко, 1998; Daniels e. a., 1992], особенно тромбоциты [Бродер, 2004; Э.Н. Согрин, 2004]. Изучая экспериментально (в связи с этими данными) гемостаз при торможении ЛПО димефосфоном или селмевитом, мы уточнили представление о роли тромбоцитов в связи гемостаз-ЛПО. В частности, мы наблюдали (рис. 6), что при введении селмевита или димефосфона в примерно равной мере снижается "высвобождающая", коагуляционная и агрегационная способность тромбоцитов одновременно с замедлением ЛПО (снижение уровня ДК и ТБК-продуктов) и ростом АОП (удлинение периода индукции и снижение скорости окисления).

Рисунок 6. Изменения показателей активности тромбоцитов, маркеров НВСК и показателей ЛПО (в % к контролю) при введении селмевита или димефосфона)

Та же связь между активностью тромбоцитов, содержанием маркеров НВСК и ЛПО выявлена нами и при угнетении ЛПО тиреостатиком. На рис. 7 видно, что снижение активности тромбоцитов и содержания маркеров НВСК выявляется одновременно с замедлением ЛПО и ростом АОП.

Следовательно, неодинаковые по природе воздействия, ограничивающие интенсивность ЛПО и повышающие АОП, сопровождаются снижением интенсивности НВСК.

Рисунок 7. Изменения активности тромбоцитов, содержания маркеров НВСК, ЛПО и показателей АОП (в % к контролю) при введении 6-МТУ в течение 15 или 30 дней

Наши экспериментальные данные, представленные рис. 8, позволяют увидеть, что активация ЛПО в тромбоцитах при введении ацетата свинца усиливает высвобождение фф. Р ₃ и Р ₄ и повышает агрегационную активность, и это сопровождается увеличением содержания маркеров НВСК.

Рисунок 8. Изменения активности тромбоцитов, маркеров НВСК и ЛПО (в % к контролю) при введении свинца или свинца с димефосфоном в течение 15 или 30 дней

Таким образом, мы экспериментально подтвердили предположение, согласно которому уровень маркеров НВСК связан с интенсивностью ЛПО, и предположение о зависимости между содержанием маркеров НВСК и активностью тромбоцитов.

Исключить, что влияние свинца на гемостаз обусловлено не только воздействием на ЛПО, но и его токсическими свойствами, нам удалось в экспериментах с введением этинилэстрадиола, способного активировать ЛПО [Шаповалов и др., 2001, 2003; А.И. Бродер, 2002]. У крыс, получавших этинилэстрадиол 15 и 30 дней, снижался АОП, ускорялась ЛПО, повышалась коагулоактивность тромбоцитов и уровень маркеров НВСК. Одновременное с этинилэстрадиолом введение димефосфона устраняло сдвиги ЛПО и гемостатические сдвиги. Особенностью полученных в этом эксперименте данных, явилось то, что в опытах с этинилэстрадиолом рост содержания продуктов НВСК и коагуляционной активности тромбоцитов обнаруживался на 15-й день в виде тенденции, и стал достоверным на 30-й день введения этинилэстрадиола. Из этого можно сделать вывод, что прирост содержания маркеров НВСК и повышение активности тромбоцитов совпадают во времени с ускорением ЛПО и снижением антиоксидантного потенциала. О связи двух первых явлений с активацией ЛПО свидетельствует отсутствие изменений гемостаза при введении этинилэстрадиола одновременно с антиоксидантом, единственный эффект которого - угнетение ЛПО и рост АОП.

Рассмотренные данные позволили предположить, что изменения интенсивности НВСК и коагулактивности тромбоцитов обнаруживаются одновременно с изменением скорости ЛПО (ускорение НВСК при активации ЛПО и замедление при её угнетении). Далее мы пытались выяснить последовательность появления этих сдвигов.

Последовательность изменения интенсивности НВСК и прокоагулянтной активности тромбоцитов при воздействиях, модифицирующих ЛПО. Чтобы установить, какие изменения (НВСК или ЛПО) развиваются раньше, и, следовательно, могут быть причиной последующих сдвигов, изучили последовательность появления этих изменений при воздействиях, модифицирующих ЛПО. Оказалось, что при уменьшенной дозе 6-МТУ и более частом отборе проб изменения ЛПО и гемостаза выявляются неодновременно. Как видно из диаграмм рис. 9, при замедленном развитии гипотиреоза вначале (20-й день введения 6-МТУ) появляются слабые признаки угнетения ЛПО и роста АОП в тромбоцитах, их коагуляционная активность и содержание маркеров НВСК в плазме в этот момент ещё не изменена.

На 25-й день, когда торможение ЛПО и рост АОП усиливаются, обнаруживается тенденция снижения активности тромбоцитов и содержания маркеров НВСК;

На 30-й день замедление ЛПО и рост АОП в тромбоцитах, снижение их коагулоактивности уже достоверны. Достоверно, хотя и в малой степени, падает и содержание маркеров НВСК.

На 35-й день угнетение ЛПО ещё заметнее и продолжается рост АОП, снижение уровня маркеров НВСК также становится заметнее.

Следовательно, изменения при медленно развивающемся гипотиреозе возникают в такой последовательности: угнетение ЛПО и рост АОП > снижение коагуляционной активности тромбоцитов > замедление процессов НВСК.

Анализ результатов, полученных в опытах с угнетением ЛПО уменьшенной дозой димефосфона, выявил в принципе ту же динамику сдвигов, что и при торможении ЛПО тиреостатиком (рис. 10): вначале замедляется ЛПО и растет АОП, затем падает активность тромбоцитов и лишь затем замедляется НВСК.

Рисунок 9. Изменения (в % к контрольному) содержания маркеров НВСК, активности тромбоцитов, ЛПО и АОП в них при введении 6-МТУ в уменьшенной дозе (150 мкг/кг) и частом отборе проб

Примечание: знаки 0 на диаграмме - изменений нет.

Рисунок 10. Изменения (в % к контрольному) содержания маркеров НВСК, активности тромбоцитов, ЛПО и АОП в них при введении димефосфона в уменьшенной дозе (1г/кг) и частом отборе проб

Примечание: знаки 0 на диаграмме - изменений нет.

Графический анализ данных, полученных при изучении последовательности появления гемостатических сдвигов при активации ЛПО уменьшенными дозами прооксидантов и более частым отбором проб, также показал, что вначале ускоряется ЛПО и падает АОП, а позднее выявляется активация тромбоцитов и НВСК (рис. 11)

Рисунок 11. Изменения (в % к контрольному) содержания маркеров НВСК, активности тромбоцитов, ЛПО и АОП в них при введении тироксина в уменьшенной дозе (8мг/кг) и частом отборе проб

Примечание: знаки 0 на диаграмме - изменений нет.

Таковы же результаты опытов, проведенных по аналогичной схеме с другим прооксидантом - ацетатом свинца (небольшая доза и частый отбор проб крови - рис. 12).



Рисунок 12. Изменения (в % к контрольному) содержания маркеров НВСК, активности тромбоцитов, ЛПО и АОП при введении свинца в уменьшенной дозе (50мг/кг) и частом отборе проб

Примечание: знаки 0 на диаграмме - изменений нет.

Здесь, как в опытах с тироксином, вначале появляются признаки активации ЛПО и снижения АОП, позднее - признаки активации тромбоцитов и ускорения НВСК.

В итоге можно констатировать, что при воздействиях, модифицирующих ЛПО и АОП в тромбоцитах, в первую очередь изменяется их коагуляционная активность, способность к высвобождению и агрегации. Позднее изменяется интенсивность НВСК, что проявляется сдвигом содержания маркеров ВТФ, который можно расценивать как признак изменения интенсивности НВСК.

Интенсивность сдвигов ЛПО в тромбоцитах, эритроцитах и лейкоцитах, при модификации ЛПО и их соотношение с содержанием маркеров НВСК. В опытах этой части работы у крыс сопоставляли сдвиги ЛПО и АОП в тромбоцитах, эритроцитах, моноцитах и нейтрофилах при введении про- и антиоксидантов, чтобы оценить участие клеток в связи ЛПО-НВСК, и установить, связаны ли сдвиги ЛПО в клетках со сдвигами уровня маркеров НВСК в плазме.

Использовали в этих опытах воздействия, которые обеспечивают постепенно развивающийся эффект. Это позволяло выявить очередность появления изменений и сопоставить их степень в разных клетках крови при одинаковых условиях опыта. Для повышения достоверности результатов всю совокупность показателей гемостаза и ЛПО определяли у каждой экспериментальной группы крыс.

Для угнетения ЛПО применили 6-МТУ (150 мкг/кг) и селмевит (1 г/кг), для активации - тироксин (8 мг/кг) и свинец (50 мг/кг) - все препарата в уменьшенных дозах.

Эффекты 6-МТУ, выраженные в виде интенсивных величин (табл. 4), свидетельствуют, что раньше других изменений (25-й день) выявляется рост содержания ДК и ТБК-продуктов, удлиняется ПИ и падает СО в тромбоцитах, и менее заметно - в моноцитах.

Таблица 4. Степень снижения (в % от контрольного значения) показателей НВСК, ЛПО и АОП в тромбоцитах (1-я строка), моноцитах (2-я строка), нейтрофилах (3-я строка) и эритроцитах (4-я строка) при введении 6-МТУ

Показатели	20-й день	25-й день	30-й день	35-й день
Р 3	0	0	7	12
Р 4	0	0	36	45
ПДФ	0	0	29	36
РКМФ	0	0	21	28
D-Д	0	0	25	35
ДК	0 0 0 0	31 16 0 0	47 41 23 19	49 50 30 24
ТБК	0 0 0 0	28 9 0 0	37 20 18 31	49 30 30 34
ПИ	7 0 0 0	25 6 0 0	37 14 17 12	40 23 22 15
СО	5 0 0 0	15 9 0 0	30 12 10 9	43 16 16 10

Приведены только статистически достоверные изменения, при их отсутствии - знак 0.

При этом удлинение ПИ выявляется в тромбоцитах на 20-й день, а на 30-й и 35-й дни то же обнаруживается уже во всех исследуемых клетках. На всех этапах наблюдений (кроме 20 дня, когда сдвиги ещё отсутствуют), ориентируясь на содержание ДК и ТБК-продуктов, степени уменьшения СО и удлинения ПИ клетки можно выстроить следующим образом:

Тромбоциты > моноциты > нейтрофилы > эритроциты.

Сдвиги содержания маркеров НВСК впервые выявлены на 30-й день, их степень к этому сроку ниже, чем сдвиги показателей ЛПО, и это сохраняется до конца наблюдений (до 35-го дня). Следовательно, тот факт, что изменения ЛПО и АОП в тромбоцитах, как уже показано выше, предшествуют изменениям интенсивности НВСК, подтвердилось. Кроме того, обнаружилось, что по интенсивности изменений ЛПО и АОП первое место принадлежит тромбоцитам, второе - моноцитам, третье - нейтрофилам и четвертое - эритроцитам.

По данным аналогичного эксперимента с ингибитором ЛПО димефосфоном (табл. 5), отличающимся от 6-МТУ механизмом влияния, видно, что и в этих опытах выявлены такие же соотношения величин ЛПО, АОП и содержания маркеров НВСК.

Так, на 5-й день введения димефосфона выявился рост АОП в тромбоцитах, на 10-й день - угнетение ЛПО в них и в моноцитах, дальнейший рост АОП в моноцитах. На 15-й день в тромбоцитах и моноцитах сдвиги усилились, а в нейтрофилах и эритроцитах впервые появились, на 20-й день изменения ЛПО и АОП во всех клетках усилились, будучи максимально выражены в тромбоцитах, в меньшей мере - в моноцитах, нейтрофилах и эритроцитах.

Таблица 5. Степень снижения (в % от контрольного значения) показателей НВСК (плазма) и ЛПО в тромбоцитах, моноцитах, нейтрофилах и эритроцитах при введении димефосфона

Показатели	5-й день	10-й день	15-й день	20-й день
Р 3	0	0	15	15
Р 4	0	12	39	51
ПДФ	0	0	18	31
РКМФ	0	0	27	36
D-Д	0	0	17	33
ДК	0 0 0 0	34 28 0 0	57 38 28 20	64 53 36 25
ТБК	0 0 0 0	30 12 0 0	37 22 12 32	51 28 31 42
ПИ	5 0 0 0	27 11 0 0	37 23 15 12	44 79 17 16
СО	11 12 0 0	18 14 0 0	32 17 12 13	49 20 17 79

Приведены только статистически достоверные изменения, при их отсутствии - знак 0.

Изменения содержания маркеров НВСК происходили в такой последовательности: на 10-й день упал уровень только ф. Р ₄, на 15-й снизились значения всех остальных маркеров, и это стало еще более заметным к концу опыта.

Таким образом, подтвердилось, что, во-первых, скорость ЛПО и АОП меняются раньше, чем изменяется содержание маркеров НВСК, а, во-вторых, то, что исследованные нами клетки крови по их способности реагировать на введение соединений с антиоксидантными свойствами располагаются в последовательности:

тромбоциты > моноциты > нейтрофилы > эритроциты.

В этих же клетках показатели состояния ЛПО, АОП и гемостаза при введении малых доз прооксидантов (тироксина или свинца) изменялись с аналогичной динамикой в обратном направлении: вначале ускорение ЛПО и снижение АОП, а позднее увеличение коагулоактивности тромбоцитов и прирост уровня маркеров НВСК. Это четко прослеживается при рассмотрении интенсивных величин, рассчитанных при анализе результатов опытов с введением тироксина (табл. 6). Здесь видно, что на 3-й день его введения сдвиги отсутствуют, на 5-й день выявляется ускорение ллипидпероксидации в тромбоцитах, моноцитах и эритроцитах, и признаки снижения антиоксидантного потенциала в тромбоцитах и нейтрофилах, рост скорости окисления в тромбоцитах, моноцитах и нейтрофилах. К 7-дню все сдвиги ЛПО и АОП усилились, а на 9-й день стали ещё заметнее (исключение - нейтрофилы и Эритроциты, где отклонение показателей на 9-й день в них практически такое же, как на 7-й день).

Таблица 6. Степень снижения (в % от контроля) показателей НВСК (плазма) и ЛПО в тромбоцитах, моноцитах, нейтрофилах и эритроцитах при введении тироксина (8.0 мг/кг)

Показатели	3-й день	5-й день	7-й день	9-й день
Р 3	0	0	7	15
Р 4	0	0	28	44
ПДФ	0	0	16	53
РКМФ	0	0	0	23
D-Д	0	0	0	38
ДК	0 0 0 0	20 19 21 0	44 29 29 33	62 42 50 52
ТБК	0 0 0 0	24 6 0 21	29 19 15 28	61 31 21 32
ПИ	0 0 0 0	13 0 6 0	17 8 10 8	25 12 8 7
СО	0 0 0 0	15 6 12 0	24 11 15 8	32 12 17 39

Приведены только статистически достоверные изменения, при их отсутствии - знак 0.

Рост содержания маркеров НВСК выявился впервые на 7-й день опытов (ПДФ, РКМФ, фф. Р ₃ и Р ₄). Содержание D-димеров не изменилось. На 9-й день эти сдвиги усилились, и увеличилось содержания D-димеров. Таким образом, при введении тироксина вначале активируется ЛПО в клетках крови и падает их АОП, позже повышается содержание маркеров НВСК.

Такие же по динамике и направленности сдвиги выявлены при введении свинца - табл. 7 (отличия касаются только степени изменений), что подтверждает приоритетное значение изменений ЛПО относительно НВСК.

Таблица 7. Степень снижения (в % от контрольной величины) показателей НВСК (плазма) и ЛПО в тромбоцитах, моноцитах, нейтрофилах и эритроцитах при введении ацетата свинца (50 мг/кг)

Показатели	10-й день	12-й день	15-й день	18-й день
Р 3	0	0	19	43
Р 4	0	0	32	61
ПДФ	0	0	17	41
РКМФ	0	0	0	45
D-Д	0	0	50	94
ДК	19 18 28 0	33 27 43 24	50 45 65 33	81 51 74 38
ТБК	9 8 16 0	16 16 22 21	29 25 22 28	64 35 25 36
ПИ	9 4 3 0	14 6 4 6	18 19 6 11	34 12 7 10
СО	8 6 0 8	18 3 12 9	27 11 15 13	37 12 17 13

Приведены только достоверные изменения, при их отсутствии - знак 0.

Таким образом, два прооксиданта в малых дозах постепенно ускоряют ЛПО и снижают АОП в исследованных клетках крови, а содержание маркеров НВСК растет позднее. Механизмы действия свинца и тироксина на метаболизм неодинаковы, но сходны по результативному влиянию на ЛПО и АОП. Это позволяет рассматривать рост содержания маркеров ВТФ при введении прооксидантов, как процесс, зависимый от ускорения ЛПО. И это же подтверждается тем, что снижение интенсивности ЛПО и увеличение АОП сопровождаются снижением содержания маркеров НВСК.

Кроме того, из обсуждаемых наблюдений видно, что активация ЛПО, предшествующая росту интенсивности НВСК не только в тромбоцитах, но и в моноцитах, нейтрофилах и эритроцитах. Видимо, и эти клетки участвуют в обеспечении связи между ЛПО и НВСК.

Интенсивность НВСК после внутривенного введения крысам клеток, полученных из крови крыс, предварительно подвергшихся воздействию, изменяющему ЛПО. Так как продукты ЛПО, выделяемые клетками при экспозиции in vitro, активируют тромбоциты [Ральченко, 1998], можно было ожидать, что и в кровотоке эти клетки влияют на коагуляционную активность тромбоцитов, высвобождая в плазму липидпероксиды. Эту возможность мы изучали экспериментально, вводя в кровоток крыс клетки крови от крыс-доноров, получавших предварительно высокие дозы антиоксиданта или прооксиданта. Взвеси клеток вводили внутривенно в количестве, составляющем ? 10 % от их расчетного содержания в крови крысы-донора.

Эксперименты с инфузией клеток, взятых у крыс-доноров, получавших димефосфон или ацетат свинца, показали, что введение тромбоцитов от доноров, получавших антиоксидант или прооксидант, т.е. отличавшихся низкой или соответственно высокой активностью ЛПО и угнетением или соответственно ростом АОП, вызвало снижение или прирост уровня маркеров НВСК. Таким же по направленности, но менее значительным был эффект моноцитов, нейтрофилов и эритроцитов.

При рассмотрении диаграмм рис. 14 видно, что инфузия тромбоцитов от доноров, получавших антиоксидант (димефосфон) не на много повысила содержание ПДФ, РКМФ и D-димеров (светлые столбцы против обозначения "Тромбоциты"). Тот же эффект инфузии тромбоцитов от доноров, получавших свинец, заметно выше (темные столбцы против обозначения "Тромбоциты").

Рисунок 14. Изменения (в % к контролю) содержания ПДФ, РКМФ и D-димеров (столбцы слева направо) в плазме крови крыс через 30 мин после в/в инфузии тромбоцитов, моноцитов, нейтрофилов или эритроцитов, взятых у крыс-доноров, получавших антиоксидант (светлые столбцы) или прооксидант (темные столбцы)

Знаки 0 указывают на отсутствие достоверных сдвигов.

Инфузия моноцитов от доноров, получавших димефосфон, повысила в небольшой мере содержание ПДФ, не изменила содержания РКМФ и повысила содержание D-димеров. Эффект инфузии моноцитов от доноров, получавших свинец, несравненно выше: на содержание ПДФ - в 6.6 раза, на содержание РКМФ - до 15 против нулевого значения, на содержание D-димеров в 3.6 раза, чем эффект инфузии клеток от доноров, получавших димефосфон. Инфузия нейтрофилов от доноров, получавших димефосфон, вообще не изменила уровня ПДФ, РКМФ и D-димеров.

Сопоставление уровня маркеров НВСК с толерантностью к тромбину после инфузии клеток крови крыс, получавших прооксидант или антиоксидант (рис. 15), выявило следующее:

1. Наиболее заметно снижает толерантность к тромбину инфузия тромбоцитов, в меньшей мере - моноцитов, в ещё меньшей мере - нейтрофилов; толерантность к тромбину после инфузии эритроцитов снижается в малой степени (при введении эритроцитов от доноров, получавших антиоксидант, толерантность к тромбину вообще не изменяется).

2. Толерантность к тромбину снижается после введения клеток от доноров, получавших антиоксидант, в меньшей степени, чем после введения клеток от доноров, получавших прооксидант.

Таким образом, клетки крыс, получавших димефосфон или свинец, располагаются по степени их влияния на толерантность к тромбину в такой же последовательности (тромбоциты > моноциты > нейтрофилы > эритроциты), какая найдена нами при оценке в них степени сдвига интенсивности ЛПО и АОП в ответ на введение антиоксидантов или прооксидантов.

Рисунок 15. Изменения в % к контролю (введение растворителя) содержания ПДФ, РКМФ, D-димеров и толерантности к тромбину (слева направо) через 30 мин после в/в инфузии тромбоцитов, моноцитов, нейтрофилов или эритроцитов, взятых у крыс-доноров, получавших антиоксидант (светлые столбцы) или прооксидант (темные столбцы)

Знаки 0 указывают на отсутствие достоверных сдвигов.

Следовательно, после введения тромбина растет содержание маркеров НВСК. На фоне предварительной инфузии клеток крови этот эффект тромбина становится выразительнее, а исследованные клетки по их способности усиливать эффект тромбина на НВСК ранжируются также, как и по степени сдвигов, вызванных модификацией ЛПО, или по степени их влияния на толерантность к тромбину:

тромбоциты > моноциты > нейтрофилы > эритроциты.

Учитывая данные о роли тромбоцитов в реализации связи ЛПО-гемостаз, [Галян, 1993; И.А. Дементьева, 1998; И.В. Ральченко, 1998; Н.Б. Баклаева, 2005] мы, выяснив, что и другие клетки участвуют в этом, изучили влияние моноцитов, нейтрофилов и эритроцитов на способность тромбоцитов активировать гемостаз. Для этого пытались установить 1) меняется ли влияние тромбоцитов на гемостаз и ЛПО при их введении с другими клетками крови, 2) связана ли реакция гемостаза на введение клеток с состоянием ЛПО и АОП у крыс-доноров. Результаты экспериментов, в ходе которых тромбоциты вводили совместно с одним из видов других исследуемых клеток сводятся к следующему (рисунки 16 и 17):

1. Инфузия тромбоцитов, взятых у крыс-доноров, не получавших прооксиданта, вызывает у крыс-реципиентов прирост содержания липидпероксидов, укорочение периода индукции и увеличение скорости окисления, т.е. инфузия тромбоцитов усиливает ЛПО и снижает АОП.

2. Инфузия тромбоцитов вместе с моноцитами усиливает эффект тромбоцитов (сдвиги в том же направлении, но выше, чем у группы, которой вводили только тромбоциты).

3. Инфузия тромбоцитов вместе с нейтрофилами или эритроцитами крыс, не получавших прооксиданта, практически не изменяет этих сдвигов (обнаруживается лишь тенденция).

4. Инфузия тромбоцитов от крыс-доноров, получавших прооксидант, вызывает изменения той же направленности, выраженные значительнее. При инфузии тромбоцитов с моноцитами от доноров, получавших прооксидант, усиливаются. При инфузии тромбоцитов с нейтрофилами или эритроцитами от тех же доноров сдвиги почти не превышают найденных при введении только тромбоцитов от реципиентов, получавших прооксидант, но выше тех, которые вызываются введением той же комбинаций клеток от крыс, не получавших прооксиданта.



Рисунок 16. Изменения в % к контролю содержания ДК, ТБК, ПИ и СО (столбцы слева направо) через 30 мин после в/в инфузии тромбоцитов, моноцитов, нейтрофилов или эритроцитов, взятых у крыс-доноров, не получавших (светлые столбцы) или получавших антиоксидант (темные столбцы), вводили внутривенно

Обозначения: ТЦ - тробоциты, МЦ - моноциты, НТ - нейтрофилы, ЭР - эритроциты.

Рисунок 17. Изменения в % к контролю содержания маркеров НВСК - ПДФ, РКМФ и D-димеров (столбцы слева направо) через 30 мин после в/в инфузии тромбоцитов, моноцитов, нейтрофилов или эритроцитов, взятых у крыс-доноров, не получавших (светлые столбцы) или получавших прооксидант (темные столбцы), вводили внутривенно

Обозначения: как к рис. 18

Наряду с изменением ЛПО и АОП у подопытных крыс в ответ на введение клеток растет содержание маркеров НВСК. При рассмотрении диаграмм рис. 17 видно, что у крыс, которым вводили тромбоциты, взятые у доноров, получавших прооксидант, прирост содержания маркеров НВСК существенно выше, чем у крыс, которым вводили клетки от доноров, получавших антиоксидант.

Следовательно, инфузия тромбоцитов, в количестве, повышающем их содержание в кровотоке ? на 10 %, увеличивает содержание маркеров НВСК, т.е. ускоряет НВСК. Инфузия моноцитов усиливает вызываемые тромбоцитами изменения, а инфузия нейтрофилов или эритроцитов вызывает лишь тенденцию к усилению эффекта тромбоцитов на НВСК. Прирост содержания маркеров НВСК более значителен при инфузии клеток, взятых у доноров, получавших прооксидант, и выявляется одновременно с активацией ЛПО и снижением АОП. Бoльшим степеням активации ЛПО и снижения АОП сопутствуют более выраженные сдвиги НВСК. Введение клеток, в меньшей мере отражающихся на ЛПО и АОП, менее заметно отражается и на НВСК.

Липидпероксидация в тромбоцитах, моноцитах, нейтрофилах, эритроцитах, коагуляционная активность тромбоцитов и содержание маркеров НВСК у больных аденомой ПЖ и у больных ИЗСД. Обследованы больные с двумя существенно различающимися по этиологии и патогенезу заболеваниями - аденомой ПЖ и ИЗСД. Оба заболевания сопровождаются заметной активацией ЛПО и снижением АОП, а также признаками активации гемостаза - повышением общей свертываемости крови и коагулоактивности тромбоцитов [Галян и др., 1991, 1993; А.А. Нелаева и др. 1995, 1999, 2003, 2004; Э.Н. Согрин, 2005].

Из больных аденомой ПЖ обследованы лица с показаниями к аденомэктомии, подвергшиеся плановой операции (75 мужчин 55-70 лет, и 55 мужчин того же возраста без поражений ПЖ - контроль). Показаниями к оперативному вмешательству (согласно материалам Совещания Международного согласительного комитета по проблемам ДГПЖ-1995) служили: невозможность самостоятельного мочеиспускания уже после одной катетеризации, массивная повторная гематурия или почечная недостаточность, обусловленные гиперплазией ПЖ, камни мочевого пузыря, повторная инфекция мочевыводящих путей, большой дивертикул мочевого пузыря и неблагоприятный прогноз, не позволяющий ожидать достаточного клинического эффекта от консервативного лечения (увеличение средней доли ПЖ, выраженная интравезикальная обструкция, большой объем остаточной мочи), а также неэффективность терапии.

У обследуемых больных аденомой ПЖ мы выявили ускорение ЛПО и снижение АОП в тромбоцитах, моноцитах, нейтрофилах и эритроцитах, повышение коагулоактивности тромбоцитов и содержания маркеров НВСК. В ходе лечения в пред- и в послеоперационном периоде, наблюдались изменения, динамика которых представлена на рис. 18 в виде степени отклонений (в % от значений в контроле) ЛПО, АОП в тромбоцитах и уровня маркеров НВСК у больных с аденомой ПЖ на всех этапах наблюдения при обычном (традиционном) лечении. Обратило на себя внимание следующее: 1) росту, сменяющемуся снижением содержания ДК соответствуют рост и затем снижение содержания маркеров НВСК (ПДФ, РКМФ, D-димеров); 2) росту содержания ДК соответствует укорочение ПИ, а снижению - удлинение ПИ; 3) укорочению ПИ и последующему его удлинению соответствует рост и последующее снижение содержания маркеров НВСК.



Рисунок 18. Изменения у больных с аденомой ПЖ при обычном лечении (в % к контролю) содержания диеновых конъюгат /ДК/, длительности периода индукции /ПИ/ в тромбоцитах, плазменного содержания ПДФ, РКМФ и D-димеров

В области построения диаграммы обозначена принадлежность трендов определявшимся показателям (ДК, ПИ, ПДФ, РКМФ и Д-Д).

В моноцитах, нейтрофилах и эритроцитах, не представленных на рисунке, изменения качественно такие же - активация ЛПО и угнетение АОП выявляется с той же динамикой. Следовательно, у больных с аденомой ПЖ, как и при многих других патологических состояниях (Т.П. Шевлюкова, 2000; Ю.А. Владимиров, 2005; В.З. Ланкин и др., 2005; В.В. Потанина и др. 2005) ускорена ЛПО и снижен АОП. Эти явления нарастают в ранние сроки после операции, затем ослабляются, но не нормализуются к моменту выписки больного.

Одновременно с ускорением ЛПО и снижением АОП наблюдается интенсификация НВСК, ослабляющаяся в те периоды, когда замедляется ЛПО. Как и ЛПО, НВСК не нормализуется к моменту выписки больных из стационара.

Рисунок 19. Изменения (в % к контролю) у больных с аденомой ПЖ при лечении, дополненном селмевитом, содержания ДК, длительности ПИ в тромбоцитах, плазменного содержания ПДФ, РКМФ и D-димеров

У больных, которые получали селмевит в ходе предоперационной подготовки и после операции (рис. 19), сдвиги ЛПО и АОП, сдвиги содержания маркеров НВСК и активности тромбоцитов также обнаруживались. Однако на всех этапах наблюдений они менее значительны, чем у больных, не получавших антиоксиданта (сопоставить диаграммы рис. 19 и 18), а на 11-14 сут после операции активность тромбоцитов у них существенно приблизилась к донорским значениям, как и содержание маркеров НВСК (содержание ПДФ даже сравнялось со значением у доноров). Содержание ДК оказалось даже ниже исходного уровня, а значение ПИ не отличалось (сдвиг = 0) от величины, найденной у лиц без поражения ПЖ (контроль).

В области построения диаграммы обозначена принадлежность трендов (ДК, ПИ, ПДФ, РКМФ и Д-Д).

Сопоставив результаты, полученные у больных с аденомой ПЖ при обычном лечении (рис. 18) и лечении, дополненном антиоксидантом (рис. 19), мы можем утверждать следующее:

1. При аденоме ПЖ с показаниями к оперативному лечению интенсивность ЛПО в тромбоцитах, моноцитах, нейтрофилах и эритроцитах выше, а АОП ниже, чем у мужчин того же возраста без поражений ПЖ. Наряду с этим у них наблюдается рост коагуляционной активности тромбоцитов и ускоренное НВСК.

2. После оперативного вмешательства изменения усиливаются, постепенно ослабевают в последующем, но сохраняются до выписки больных из стационара. Назначение больным в пред- и послеоперационном периодах селмевита заметно ограничивает все сдвиги, минимизируя и отчасти устраняя их к моменту выписки больных.

3. Гемостатические сдвиги у больных с аденомой ПЖ до и после аденомэктомии коррелируют с изменениями ЛПО и находятся в обратной связи со сдвигами АОП в клетках крови.

Далее совместно с доктором медицинских наук профессором А.А. Нелаевой обследовали 55 больных ИЗСД без сосудистых осложнений в эндокринологическом отделении городской клинической больницы № 2 и в областной клинической больнице. Диагностику ИЗСД проводили на основании критериев ВОЗ (1985 г.) и клинической классификации сахарного диабета, одобренной Всесоюзным научным обществом эндокринологов (Дагомыс, 1991). Средний уровень С-пептида в сыворотке больных составил 0,40,01 нг/мл. Средний возраст пациентов - 280,5 лет (29 мужчин и 26 женщин). По социальному положению среди больных преобладали служащие (66,1 %), затем рабочие (24,3 %), студенты вузов и учащиеся СПТУ (9,6 %). Средняя длительность заболевания составила 7,90,5 г. У 54 % заболевание установлено через 2-3 недели после появления первых признаков, у 30 % - в первые 10 дней, и у 16 % пациентов позднее 1 мес. от начала болезни. Наиболее частая причина заболевания обследуемой группе - вирусная инфекция, затем психоэмоциональный стресс, реже - алкоголь, у 1 % пациентов причину заболевания установить не удалось. Отягощенная (по сахарному диабету) наследственность выявлена у 28 % больных. По анамнестическим данным у больных наблюдалась склонность к воспалительным заболеваниям: высокая частота заболеваний респираторно-вирусной этиологии - 37 %, органов дыхания - у 24 % и пиелонефритом - у 15 %. Основные жалобы обследованных больных - слабость, полидипсия, полиурия, потеря аппетита, похудание, боль в конечностях, дизурические расстройства, боль в поясничной области, никтурия, снижение работоспособности. При поступлении в стационар состояние у 84 % лиц обследуемой группы определено как средней тяжести, у 16 % - как тяжелое.

При объективном обследовании слабость, отсутствие аппетита выявлены у 29, бледность кожных покровов у 5, дистрофические изменения волос и ногтей - у 18, сухость и снижение тургора кожи - у 20, дефицит массы тела - у 1 %. Изменения сердечной деятельности установлены у 16 % больных (приглушенность сердечных тонов и тахикардия покоя). У 3 % пациентов обнаружена ортостатическая гипотония, что может быть проявлением диабетической вегетативной кардиальной нейропатии. Повышение артериального давления в пределах 150/90 мм. рт. ст. - у 11 % больных. При исследовании желудочно-кишечного тракта и гепато-билиарной системы обнаружено: у 24 % пациентов язык обложен белым налетом, у 11 % - метеоризм, у 20 % - болезненность при пальпации в эпигастральной области, у 1 % - болезненность в правом подреберьи, умеренное увеличение печени (пальпаторно) у 7 % больных, у 6 % пациентов - болезненность по ходу толстого кишечника.

У 37 % больных обнаружены функциональные изменения нервно-психического статуса в виде эмоциональной лабильности, раздражительности, плаксивости, у 7 % больных наблюдалась склонность к депрессии. У 29 % больных выявлена умеренная гипохромная анемия до 3,810¹² /л (цветной показатель 1,0). Количество лейкоцитов выше 8,010⁹ /л отмечено у 8 % больных, ускорение СОЭ выше 15 мм/час - у 24 % больных. Результаты исследования мочи на микроальбуминурию экспресс-методом отрицательны у всех обследуемых.

При биохимическом обследовании больных найдены изменения содержания мочевины, рост холестеролемии и уровня -липопротеидов у 24 % больных, гипопротеинемия у 21 и гипоальбуминемия - у 14 % больных.

Всех больных подвергли кардиографическому обследованию, ультразвуковому обследованию (почки и печень), радиоизотопной ренографии, допплерографии сосудов нижних конечностей.

При электрокардиографическом обследовании выявлено у 24 % изменение комплекса QRS, инверсия зубца Т, удлинение интервала Q-T, у 7 % - синусовая аритмия. Признаки гипертрофии левого желудочка были выявлены у 11 %. Электрокардиографические изменения миокарда более выражены у больных с неудовлетворительной компенсацией углеводного обмена. Компенсация течения сахарного диабета и восстановление метаболических параметров сопровождалось достоверным улучшением интервалов между систолами желудочков, регистрируемых по ЭКГ. Офтальмологическое исследование глазного дна при расширенных зрачках исключило у всех больных наличие диабетической ретинопатии.

Содержание гликилированного гемоглобина и характеристика гликемии у больных представлены в табл. 8.

Таблица 8. Содержание гликилированного гемоглобина (HbA1c) и уровень гликемии у обследуемых больных ИЗСД

Показатель	Здоровые, n - 36	ИЗСД без осложнений, n -112
НbA1с, натощак, %	5,550,24	8,980,33*
Гликемия натощак, ммоль/л	3,80,12	10,30,5*

Знак * - достоверные отличия.

Все пациенты получали заместительную терапию инсулином: однократное введение всей суточной дозы инсулина пролонгированного действия - 26 % больных, интенсифицированная базис-болюсная терапия у 21 % больных, остальным (51 %) - двукратно вводили препараты инсулина средней продолжительности.

Таким образом, клинические наблюдения за обследованными больными позволили установить, что в целом проявления ИЗСД соответствовали данным, представленным в литературе (А.Г. Мазовецкий, В.К. Великов, 1987; М.И. Балаболкин, 1994).

Эффект селмевита изучали, используя двойной слепой контроль. Обследуемых разделили случайным способом на 2 группы: 27 человек (группа сравнения) получали плацебо (таблетки с инертным наполнителем, идентичные селмевиту) и 28 человек (основная группа) получали селмевит. Селмевит (или плацебо) назначали по 1 табл. 2 раза в день в течение 14 дней на фоне традиционного лечения, включавшего инсулинотерапию. До начала лечения и после 14 дней у больных брали пробы крови для оценки показателей НВСК, ЛПО, АОП, коагулоактивности тромбоцитов. Одновременно те же исследования выполняли у здоровых лиц соответствующего возраста и пола (29 доноров - контрольная группа).

На рис. 20 видно, что до начала лечения у больных ИЗСД повышено содержание ДК и сокращен ПИ в тромбоцитах (активирована ЛПО и снижен АОП), изменения в других клетках сходны с таковыми в тромбоцитах.

После двух недель обычной терапии, включающей плацебо, эти сдвиги обнаружили тенденцию к уменьшению (все, хотя и статистически не подтверждающиеся изменения, имеют одинаковую направленность).

У больных, которые получали селмевит, к концу 2-й недели заметно снизилось содержание ДК в тромбоцитах, а ПИ удлинился в сравнении с контролем, что объясняется увеличением АОП под влиянием антиоксиданта. Следовательно, введение в комплекс лечения антиоксиданта оказало нормализующее влияние на ЛПО и несколько повысило АОП. Аналогичную направленность имеют изменения уровня ТБК-продуктов и скорости окисления не только в тромбоцитах, но и в других изучавшихся клетках.

Рисунок 20. Изменения к концу лечения (в % к контролю) содержания ДК и длительности ПИ в тромбоцитах, содержания ПДФ, РКМФ и D-димеров в плазме больных с ИЗСД (столбцы слева направо), получавших селмевит или плацебо на фоне обычного лечения

Содержание всех исследованных маркеров НВСК до начала лечения у больных группы сравнения достоверно выше, чем в контроле, и оставалось повышенным почти в той же степени после проведения обычной терапии с плацебо. В группе, получавшей селмевит, содержание маркеров НВСК после лечения сравнялось с контрольными величинами (степень изменения равна нулю).

Следовательно, у больных ИЗСД, как и у больных аденомой ПЖ, наблюдается активация ЛПО и снижение АОП в тромбоцитах, моноцитах, нейтрофилах и эритроцитах, и это сопровождается ростом содержания маркеров НВСК, как это наблюдалось и у больных аденомой ПЖ. Дополнение обычной терапии достаточно сильным антиоксидантом, ограничивающим активацию ЛПО и практически предупреждающим снижение АОП, сдержало и прирост интенсивности НВСК.

Можно сделать вывод о том, что зависимости, найденные при экспериментальном ускорении процессов перекисного окисления липидов, характерны и для лиц, с патологическими состояниями, сопровождающимися активацией этих процессов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Создавая в эксперименте условия, вызывающие рост частоты гибели животных при внутривенном введении тромбина, мы разработали приём, позволяющий за короткий срок на небольшом числе крыс количественно оценивать толерантность к тромбину по степени изменения фибриногенемии после дозированного внутривенного введения тромбина. Используя разработанный приём, установили, что в разнообразных ситуациях (эфирный наркоз, пробуждение от наркоза, кровопотеря, сезонные факторы) увеличению содержания маркеров НВСК сопутствует снижение толерантности к тромбину, а снижению содержания маркеров соответствует рост толерантности к тромбину. Следовательно, существует зависимость между изменением содержания ПДФ, РКМФ, D-димеров, фф. Р ₃ и Р ₄ с одной стороны и изменением толерантности организма к тромбину - с другой. Это указало на необходимость и возможность изучать роль клеток крови в реализации связи между ЛПО и плазменным содержанием маркеров НВСК, которое в свою очередь согласуется с величинами толерантности к тромбину, следовательно, отражает степень "готовности" организма к выживанию при воздействиях, сопровождающихся гипертромбинемией.

Сведения о важной роли тромбоцитов в формировании связи между гемостазом и ЛПО и косвенные данные об участии в этом других клеток крови обосновали необходимость уточнить зависимость между интенсивностью ЛПО в тромбоцитах и содержанием маркеров НВСК в плазме и толерантностью к тромбину. Модифицируя ЛПО и АОП в тромбоцитах с помощью разных воздействий (торможение путем введения димефосфона, селмевита или 6-метилтиоурацила, активация тироксином, этинилэстрадиолом или свинцом), установили, что прирост содержания маркеров НВСК и рост активности тромбоцитов совпадают в времени с ускорением ЛПО и снижением АОП. Зависимость между содержанием маркеров НВСК, коагуляционной активностью тромбоцитов с одной стороны, и активацией ЛПО - с другой, подтверждается отсутствием изменений гемостаза при введении прооксидантов (этинилэстрадиола или свинца) одновременно с антиоксидантами (димефосфоном или селмевитом).

Изучение связи между ЛПО и гемостазом в опытах с небольшими дозами модификаторов ЛПО и частым отбором проб для исследований, позволило установить, что при воздействиях, ускоряющих или замедляющих ЛПО, изменения её скорости предшествуют изменениям активности тромбоцитов, а изменения активности тромбоцитов, в свою очередь, предшествуют появлению признаков ускорения НВСК.

На воздействия, активирующие или снижающие интенсивность ЛПО, реагируют также моноциты, нейтрофилы и эритроциты. Оценив роль этих клеток в обеспечении связи между ЛПО и НВСК, мы установили, что скорость ЛПО и АОП меняется раньше, чем содержание маркеров НВСК, а клетки по способности реагировать на прооксиданты располагаются в последовательности: тромбоциты > моноциты > нейтрофилы > эритроциты. Реакция животных на инфузию этих клеток проявляется ростом содержания маркеров НВСК и снижением толерантности к тромбину. Это в наибольшей степени выражено после введения тромбоцитов, в меньшей мере - после введения моноцитов, затем нейтрофилов, и совсем слабо - после введения эритроцитов. Эффект со стороны НВСК на введение клеток значительнее, если доноры исследуемых клеток получали прооксиданты, и слабее - если доноры получали антиоксиданты. Следовательно, степень изменения НВСК при инфузии клеток крови пропорциональна содержанию в них липидпероксидов и обратно пропорциональна АОП.

При экзогенной тромбинемии растет содержание маркеров НВСК, предварительное введение клеток крови усиливает этот эффект тромбина.

По способности усиливать эффект тромбина клетки крови ранжируются также, как и по степени сдвигов, вызванных модификацией ЛПО, или по их влиянию на толерантность к тромбину: тромбоциты > моноциты > нейтрофилы > эритроциты.

Инфузия тромбоцитов, в количестве, увеличивающем их содержание в кровотоке примерно на 10 %, ускоряет НВСК. Инфузия моноцитов усиливает изменения, вызываемые инфузией тромбоцитов, а одновременная (с тромбоцитами) инфузия нейтрофилов или эритроцитов вызывает лишь тенденцию к ускорению НВСК. Прирост содержания маркеров НВСК значительнее при инфузии клеток крови доноров, получавших прооксидант, и сопровождается активацией ЛПО при одновременном снижении АОП. Бoльшим степеням активации ЛПО (и снижению АОП) сопутствуют более выраженные сдвиги уровня маркеров НВСК. Введение клеток, слабее отражающихся на ЛПО и АОП, менее заметно влияет и на интенсивность НВСК.

Градация клеток по степени их участия в связи между ЛПО и НВСК, свидетельствует ещё и о зависимости между интенсивностью ЛПО и НВСК.

У больных с аденомой ПЖ и у больных с ИЗСД - заболеваниях, протекающих с активацией ЛПО и снижением АОП в тромбоцитах, моноцитах, нейтрофилах и эритроцитах - повышено содержание маркеров НВСК. Дополнение обычной терапии антиоксидантом, ограничивающим активацию ЛПО и практически предупреждающим снижение АОП, ограничивает и прирост интенсивности НВСК.

Видимо, зависимости, найденные при экспериментальной модификации интенсивности ЛПО, характерны и для лиц, с патологическими состояниями, сопровождающимися активацией ЛПО. На этом основании можно считать перспективным изучение эффективности применения антиоксидантов в дополнение к обычной терапии состояний, протекающих с явлениями гипероксидации и связанным с этим ускорением НВСК, которое, как показано нами экспериментально, сопровождается снижением толерантности к тромбину. В качестве таких средств могут использоваться, в частности, витамины с антиоксидантной активностью, в особенности витаминные комплексы, отличающиеся выраженным антиоксидантным действием.

Весьма вероятно, что это скажется на частоте и выраженности сопровождающих гипероксидацию тромбогеморрагических осложнений.

Выводы:

1. Определение степени снижения фибриногенемии в плазме при дозированном внутривенном введении тромбина позволяет в опытах с малым числом животных (крыс) количественно оценить толерантность к тромбину; результаты, полученные этим приемом, отличающимся экономичностью и специфичностью, согласуются с результатами известного способа, основанного на учете частоты выживания животных после введения тромбина в кровоток.

2. Между толерантностью к тромбину, устанавливаемой предложенным способом, и плазменным содержанием маркеров НВСК в разнообразных экспериментальных ситуациях существует обратная зависимость: рост толерантности к тромбину сопровождает снижение содержания маркеров НВСК, снижение толерантности к тромбину сопровождает рост содержания маркеров НВСК.

3. При активации ЛПО и снижении АОП тромбоцитов растет их коагуляционная активность, способность к агрегации и высвобождению фф. Р ₃ и Р ₄; при снижении ЛПО и увеличении АОП тромбоцитов их коагуляционная активность, способность к агрегации и высвобождению фф. Р ₃ и Р ₄ умеренно ограничивается.

4. Активация (или угнетение) ЛПО и сопутствующее ей снижение (или повышение) АОП, сопровождаются снижением (соответственно повышением) интенсивности внутрисосудистого свертывания крови.

5. Изменение ЛПО и АОП в тромбоцитах предшествует (во времени) изменениям их активности, которые в свою очередь предшествуют изменениям интенсивности внутрисосудистого свертывания крови.

6. Одновременно с изменениями ЛПО и АОП в тромбоцитах при воздействии про- и антиоксидантов, в том же направлении изменяется ЛПО и АОП в моноцитах, нейтрофильных лейкоцитах и эритроцитах.

7. Инфузия тромбоцитов, моноцитов, нейтрофилов или эритроцитов здоровым животным в количестве, повышающем их содержание в кровотоке примерно на 10 %, ускоряет внутрисосудистое свертывание крови и снижает толерантность к тромбину. Эти эффекты усилены при инфузии тромбоцитов доноров, получавших прооксидант, и ослаблены при инфузии тромбоцитов доноров, получавших антиоксидант. По степени влияния на ЛПО и на толерантность к тромбину клетки располагаются в последовательности "тромбоциты > моноциты > нейтрофилы > эритроциты".

8. Инфузия тромбоцитов одновременно с моноцитами, нейтрофилами или эритроцитами повышает степень изменений НВСК, вызываемых тромбоцитами; более значим эффект, вызываемый инфузией клеток от доноров, получавших прооксидант, и ослаблен при инфузии клеток от доноров, получавших прооксидант.

9. У лиц с заболеваниями, сходными лишь в том, что они сопровождаются гипероксидацией и гемостатическими сдвигами (аденома ПЖ и ИЗСД), повышено содержание липидпероксидов в тромбоцитах, моноцитах, нейтрофилах и эритроцитах, ускорено внутрисосудистое свертывание крови. Эти изменения ослабляются при обычном лечении и особенно заметно при лечении, дополненном комплексом витаминов с антиоксидантными свойствами (селмевитом).

Практические предложения:

1. Можно рекомендовать предложенный нами способ "Определение толерантности к тромбину" для экспериментальной оценки влияния разного рода воздействий на степень "готовности" организма к ответу на сдвиги, создающие или повышающие угрозу внутрисосудистого свертывания крови.

2. Целесообразно контролировать у больных с патологией, сопровождающейся активацией свободнорадикальных процессов, содержание плазменных маркеров взаимодействия тромбин-фибриноген.

3. Имеет смысл расширить исследования, направленные на уточнение характера связи между интенсивностью липидпероксидации в клетках крови, особенно в тромбоцитах, и содержанием маркеров внутрисосудистого свертывания крови.

ПЕЧАТНЫЕ РАБОТЫ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

В журналах, рекомендованных ВАК РФ для публикации материалов докторских диссертаций:

1. Способ определения толерантности животных к тромбину / А.Ш. Бышевский, Л.В. Михайлова, … Р.Г. Алборов и др // Патент № 2219546, приоритет от 04.05.2000, зарегистрирован в Госреестре изобретений РФ 20.12.2003.

2. Оксидативный стресс и тромбоцитарно-коагуляционный гемостаз у больных сахарным диабетом типа 1 с диабетической нефропатией /Ю.В. Нелаева, А.Ш. Бышевский, … Р.Г. Алборов и др // Сахарный диабет. - 2003. - 3. - С. 10-13.

3. Непрерывное внутрисосудистое свертывание крови при изменениях липопероксидации / А.Ш. Бышевский, С.Л. Галян, … Р.Г. Алборов и др.) // Вестник Тюменского Государственного университета - 2003. - 5. - С. 248-255.

4. Влияние селмевита на мембраны и коагулоактивность тромбоцитов у больных сахарным диабетом / Р.Г. Алборов // Сахарный диабет. - 2004. - 3. - С. 38-40.

5. Витамины и антиоксиданты в коррекции гемостатических сдвигов при оксидативном стрессе /А.Ш. Бышевский, С.Л. Галян, …Р.Г. Алборов и др. // International J. on immunoreabilitation. - 2004. - 6. - 1. - P.38.

6. Фармакологическая реабилитация после медицинского аборта / В.А. Полякова, И.А. Карпова, … Р.Г. Алборов и др.// International J. on immunoreabilitation - 2004. - 6. - 1. - P.110.

7. Зависимость толерантности к тромбину от взаимодействия тромбин-фибриноген / Р.Г. Алборов //Аллергология и иммунология. - 2004. т. 5. - 3. - С. 500-501.

8. Неперывное внутрисосудистое свертывание крови и липопероксидация / А.Ш. Бышевский, М.К. Умутбаева, Р.Г. Алборов // Гематол. и трансфузиол. - 2004. - 49. - 5. - С. 39-43.

9. Липопероксидация и гемостаз: взаимодействие и механизмы /Г.А. Сулкарнаева, П.Я. Шаповалов … Р.Г. Алборов и др. // Аллергология и иммунология. - 2004. - 5. - 3. - С. 501-502.

10. Гемостатические сдвиги при аорто-бедренном и бедренно-подколенном шунтировании у больных облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей, их коррекция селмевитом / А.Ш. Бышевский, С.Л. Галян, Р.Г. Алборов и др. - Хирургия. - 2004. - 10. - С. 38-41.

11. Коррекция антиоксидантами взаимодействия тромбин-фибриноген при активации гемостаза у женщин / А.Ш. Бышевский, В.А. Полякова, … Р.Г. Алборов и др. // Вестник Тюменского Государственного университета. - 2004. - 3. - С. 120-125.

12. Клетки крови - фактор связи между липопероксидацией и взаимодействием тромбин-фибриноген / Р.Г. Алборов // Экология человека. - 2005. - 1. - С. 13-16.

...