Лекарственный патоморфоз эндокринной части поджелудочной железы при экспериментальном сахарном диабете

В проведенных исследованиях установлено, что диабенол усиливает секрецию инсулина, усиливает биологическое действие инсулина на периферические ткани при СД и проявляет антиагрегантную активностью [Спасов А.А. с соавт., 1999; Kirpichnicov D. et al., 2002; Дедов И.И. с соавт., 2008; Fisman E.Z., Tenenbaum A., 2009]. Ранее полученные экспериментальные данные по изучению механизмов действия свидетельствуют о присутствии как панкреотропных, так и экстрапанкреатических эффектов у диабенола. В экспериментах по исследованию секретогенной активности диабенола в ответ на его внутривенное введение, наблюдалось увеличение инсулина в крови, сочетающееся с сахароснижающим эффектом, что является прямым доказательством инсулинотропного эффекта, основанного на стимулировании функционально способных В-клеток островков Лангерганса [Дудченко Г.П., 2001]. В наших исследованиях патогистологические изменения инсулярного аппарата в виде увеличения ОД островков, удельного количества и ОД В-клеток, увеличение площади ядер В-клеток, подтверждают возможность увеличения синтетической активности инсулиноцитов под влиянием диабенола.

Таблица 7 Динамика пролиферативной активности и индекса апоптоза эндокриноцитов панкреатических островков при стрептозотоцин-никотинамид-индуцированном диабете на фоне введения секретогенов (Диабенол).

* - достоверно по отношению к интактному контролю (р<0, 05).

Морфофункциональные изменения панкреатических островков под действием антиоксидантов (б-липоевая кислота) на модели стрептозотоцин-никотинамид-индуцированного диабета. При морфологическом исследовании в ранние сроки эксперимента в отдельных островках поджелудочной железы определялись признаки незначительного полнокровия, отека и перифокальной инфильтрацией макрофагами и единичными нейтрофильными гранулоцитами. К 21 суткам эксперимента в островках Лангерганса определялись участки очагового склероза. Происходило увеличение удельного количества В-клеток в панкреатических островках, особенно выраженные в желудочном и селезеночном отделах на 14, 2% и 13, 3% (р<0, 05). При этом, по сравнению с группой диабета, не обнаруживалось достоверного увеличения объёмной доли, а значимое уменьшение площади ядер отмечалось только в селезеночном отделе на 16, 0% (р<0, 05). Индексы апоптоза и пролиферации были сопоставимы с группой сахарного диабета (табл. 8). Таким образом, при курсовом пероральном введении антиоксидантов наблюдались мозаичные патогистологические изменения, достоверно увеличивалось удельное количество и ОД эндокриноцитов В по отношению к группе с сахарным диабетом, сохранялись признаки умеренной гипертрофии ядер инсулиноцитов. Введение антиоксидантов не препятствовало уменьшению объёмной доли панкреатических островков.

Таблица 8 Динамика пролиферативной активности и индекса апоптоза эндокриноцитов панкреатических островков при стрептозотоцин-никотинамид-индуцированном диабете на фоне введения антиоксидантов (б-липоевая кислота).

* - достоверно по отношению к интактному контролю (р<0, 05).

Учитывая низкий уровень содержания антиоксидантных ферментов, становится понятной, высокая чувствительность инсулиноцитов поджелудочной железы к повреждающему действию свободных радикалов, что влечет снижение экспрессии инсулина и активации апоптоза [Чистяков Д.А., 2000; Robertson R.P., 2004; Robertson R.P., 2007]. Являясь антиоксидантом, липоевая кислота способна реализовывать свое действие как в цитозоле, так и на уровне плазматической мембраны, препятствуя свободно-радикальным процессам вызванным введением цитотоксических агентов для моделирования СД [Biewenga G., 1997]. В эксперименте на моделях сахарного диабета 1 и 2 типа липоевая кислота проявляла гипогликемическую активность, вероятно связанную с активацией трансмембранного транспорта глюкозы и некоторых этапов сигнального каскада инсулина [Чепляева Н.И., 2012]. Способность ЛК предотвращать окислительное повреждение островков поджелудочной железы была продемонстрирована в экспериментах на животных. ЛК защищала клетки поджелудочной железы от токсического действия стрептозотоцина и тем самым способствовала снижению уровня глюкозы и гликозилированного гемоглобина [Budin S.B., 2007], что подтверждается в наших исследованиях структурными изменениями в виде увеличения удельного количества В-клеток в желудочном и селезеночном отделах железы.

Морфофункциональные особенности панкреатических островков при введении инкретиномиметиков (экстракт гимнемы лесной) на модели аллоксан-индуцированного диабета. При патогистологическом исследовании отмечалось восстановление ОД островков кишечного отдела железы на 21 сутки эксперимента. Происходило увеличение ОД и удельного количества В-клеток желудочного, селезеночного отделов на 7, 14 и 21 сутки, с параллельным уменьшением ОД А-клеток желудочного, селезеночного отделов на 7 сутки и во всех отделах на 21 сутки наблюдения. При этом статистически значимое увеличение площади ядер В-эндокриноцитов отмечалась на 14 сутки только в желудочном отделе на 16, 9% (р<0, 05). Курсовое введение гимнемовых кислот способствовало достоверному снижению индекса апоптоза во все сроки эксперимента по сравнению с группой аллоксан-индуцированного диабета наиболее выраженному на 7 сутки (табл. 9). Происходило уменьшение Ki-67-позитивных эндокриноцитов наравне с увеличением PCNA-позитивных клеток (на 62, 3% и на 14, 6% соответственно), что свидетельствовало об активации репаративных процессов в инсулоцитах панкреатических островков с одной стороны, и активации пролиферации с другой [Karp G., 2010]. При сопоставлении динамики изменений в индексах апоптоза и пролиферации была выявлена статистически значимая (р<0, 05) обратная корреляционная зависимость (табл. 9).

Морфофункциональные особенности панкреатических островков при введении инкретиномиметиков (экстракт гимнемы лесной) на модели стрептозотоцин-индуцированного диабета. Микроскопически отмечалось достоверное увеличение ОД панкреатических островков во всех отделах железы на 21 сутки эксперимента. Определялось статистически значимое увеличение ОД и удельного количества эндокриноцитов В островков кишечного, желудочного и селезеночного отделов во все сроки наблюдения, с уменьшением ОД А-клеток во всех отделах на 14 и 21 сутки. Возникало достоверное снижение индекса апоптоза на 37, 8% в сочетании с достоверным увеличением индекса пролиферации во все сроки наблюдения максимально на 39, 1% по сравнению с группой иммунозависимого сахарного диабета (табл. 9).

Морфофункциональные особенности панкреатических островков при введении инкретиномиметиков (экстракт гимнемы лесной) на модели иммунозависимого диабета. На 7 сутки в панкреатических островках на фоне выраженной инфильтрации лимфоцитами, нейтрофильными гранулоцитами и макрофагами, полнокровия капилляров отмечалась выраженная деструкция эндокриноцитов. Изменения в ОД островков, их площади, ОД А-клеток были не достоверны по отношению к группе интактного контроля и группе иммунозависимого сахарного диабета на протяжении всего эксперимента, однако, ОД и удельное количество эндокриноцитов В достоверно увеличивались по отношению к группе иммунозависимого сахарного диабета во всех отделах железы. Ядра инсулоцитов находились в состоянии умеренной гипертрофии, о чем свидетельствовало увеличение, занимаемой ими площади. Инсулиноциты, с большим количество инсулин-позитивных включений, располагались поодиночке или в виде мелких скоплений в центральных отделах островков. Глюкагон-позитивные клетки визуализировались на периферии панкреатических островков. В период с 14 по 21 сутки эксперимента определялись единичные мелкие островки Лангерганса, которые располагались в тесной связи с внутридольковыми выводными протоками. Сохранялись явления полнокровия капилляров островков, неравномерного отёка и их воспалительной инфильтрации во всех отделах железы, однако эти изменения были менее выражены, чем в группе без фармакологической коррекции. В отдельных островках на 21 сутки наблюдения определялся очаговый склероз. Визуализировались островки содержащие только эндокриноциты В. Экспрессия факторов пролиферации носила выраженный характер: PCNA-позитивные клетки составляли 13, 1±1, 9% (р<0, 05), Ki-67-позитивные - 3, 2±0, 2% (р<0, 05), что на 12, 9% и 39, 1% было выше, чем в группе с СД (табл. 9). Выявлялись PCNA-позитивные и Ki-67-позитивные клетки эпителия протоков и единичные клетки, расположенные в ацинарной ткани и в непосредственной близости от островков. Известно, что белок PCNA, в отличие от протеина Ki-67, экспрессируется не только на протяжении всего цикла клеточного деления, но также активно участвует в репарации ДНК [Rosa M.A., Galli M., Fadda G. et al., 2000; Paunesku T., Mittal S., Proctiс M. et al., 2001], поэтому высокий уровень экспрессии PCNA в наших исследованиях, можно расценивать как подтверждение регенерации в ткани поджелудочной железы при моделировании сахарного диабета [Papadopoulos I., Rudolph P., Wirthetal B., 1996; Beer T. et. al., 1998]. Экспрессия белков p53, Bcl-2 носила слабо выраженный характер, Bax - негативное окрашивание. В большинстве В-клеток островков Лангерганса нарастала экспрессия протеина MDM2. В единичных В-инсулоцитах панкреатических островков отмечалась слабая экспрессия каспазы 3 и TRAIL, количество TUNEL-позитивных клеток было уменьшено (р<0, 05) по сравнению с группой диабета. Количество В-клеток в состоянии апоптоза по сравнению с животными с иммунозависимым СД достоверно уменьшалось (табл. 9). При ультрамикроскопическом исследовании, выявлено, достоверное уменьшение количества эндокриноцитов В по отношению к группам сравнения с признаками конденсации хроматина ядер, наличием липидных включений в цитоплазме, расширением и вакуолизацией компонентов ГЭС, КГ и отсутствием секреторных гранул. Секреторные гранулы располагались у одного из полюсов клетки и занимали ОД до 15, 6±1, 0%, диаметр секреторных гранул составлял 393, 2±41, 6 нм, что на 4, 6% и 3, 6% соответственно выше по сравнению с контрольной группой.

Механизм действия инкретиномиметиков заключается в стимулировании глюкозозависимой секреции инсулина и в значительной степени потенцировании инсулинотропной активности самой глюкозы; в замедлении скорости опорожнения желудка, снижении желудочной и панкреатической секреции. Инкретиномиметики влияют на прандиальный подъем уровня глюкозы; на регуляцию пищевого поведения через центральные механизмы регуляции центра насыщения; снижают апоптоз В-клеток, увеличивают массу В-клеток из клеток предшественниц эпителия панкреатического протока, способствуя трансформации неин-сулинпродуцирующих клеток в инсулинпродуцирующие, неогенезу и пролиферации островков из стволовых клеток поджелудочной железы [Mier J.J. et al., 2001; David J.A., 2005; Rummey C., 2006; Hou J. et al., 2007]. Экспериментально установлено, одним из направлений восстановления нарушенного каскадного механизма действия инсулина, сопровождающегося инсулинорезистентностью, является регуляция количества инкретинов, в частности GLP-1 [Karasik A. et al., 2006].

Таблица 9 Динамика пролиферативной активности и индекса апоптоза эндокриноцитов панкреатических островков на фоне введения инкретиномиметиков.

* - достоверно по отношению к интактному контролю (р<0, 05); ** - достоверно по отношению к группе СД (р<0, 05).

Способность инкретиномиметиков влияют на секрецию GLP-1, посредством которого усиливается секреторная активность, активируется регенерация В-клеток, а также ингибируется апоптоз подтверждена многими исследователями [Gymnema Lawrence Rev. 1993; Kieffer T.J., 2005; Kim D., 2005]. Полученные результаты вполне согласуются с литературными данными о способности инкретинов не только увеличивать уровень секреции инсулина, но и снижать скорость апоптоза В-эндокриноцитов, а также стимулировать их пролиферацию [Fushiki T. et al., 1992]. Предполагается, что фармакологические эффекты при применении инкретиномиметиков реализуются с помощью следующих механизмов: модуляция активности инкретинов; стимуляция секреции и высвобождения инсулина; регенерация В-клеток островков Лангерганса [Shanmugasundaram E.R., 1990]. Кроме того, в наших исследованиях на моделях аллоксан-, стрептозотоцин-индуцированного и иммунозависимого СД при применении инкретиномиметиков определены морфологические признаки достоверного увеличения секреторной активности и регенерации В-клеток со снижением индекса апоптоза инсулиноцитов. Возможность регенерации эндокриноцитов В путем неогенеза панкреатических островков из эпителия протоков, ациноинсулярной трансформации или по альтернативному пути - дифференцировке клеток-предшественниц, расположенных в панкреатических островках, обусловлена особенностями эмбрионального развития железы и сохранением клеток-предшественниц [Иванова В.Ф., Пузырев А.А., 2006].

Полученные нами результаты вполне согласуются с материалами исследования, в котором авторы предложили, что применение инкретиномиметиков увеличивало уровень инсулина, за счет регенерации В-клеток поджелудочной железы, а не за счёт истощающей секреции инсулина [Chattopadhyay R.R., 1998; Ogawa Y., 2004]. Значит, есть вероятность того, что гипертрофия эндокриноцитов В происходит за счет повышения секреции GLP-1 и GIP [Murakami N., 1996].

Таким образом, результаты эксперимента свидетельствуют о том, что антидиабетические эффекты препаратов с инкретиномиметическим действием проявляются на различных моделях экспериментального диабета в виде повышения статистически достоверных структурных изменений: восстановления ОД островков на 21 сутки эксперимента; увеличения ОД и удельного количества В-клеток на 7, 14 и 21 сутки во всех отделах; уменьшения ОД А-клеток желудочного, селезеночного отделов на 7 сутки и во всех отделах на 21 сутки.

Курсовое введение инкретиномиметиков вызывало достоверное снижение индекса апоптоза и способствовало репаративной регенерации в-эндокриноцитов (увеличение индекса пролиферации) во все сроки наблюдения.

Изучение структурных преобразований в эндокринном аппарате поджелудочной железы при сахарном диабете представляет собой динамически развивающийся процесс, который требует исследования особенностей морфофункциональных изменений при разработке новых антидиабетических лекарственных средств.

Поэтому сопоставление структурных изменений в В-клетках в одном исследовании на всех моделях экспериментального сахарного диабета без лечения и при его фармакологической коррекции практически невозможно. Нами проведено выявление фенотипических особенностей эндокриноцитов В с использованием комплексного многоуровневого морфологического анализа, включающего иммуногистохимическое, электронно-микроскопическое исследование и количественную обработку данных, что позволило выявить на моделях цитотоксически-индуцированного сахарного диабета различные пути реализации повреждения В-клеток, в т.ч. апоптоза, а также охарактеризовать закономерности репаративных изменений в островковом аппарате поджелудочной железы с учётом её зональности.

ВЫВОДЫ

1. Морфофункциональные изменения при аллоксан-индуцированном сахарном диабете характеризуются патогномоничными клинико-лабораторными признаками, а также преобладанием некротических изменений в В-клетках с уменьшением их объёмной доли на 16, 7 и 35, 7% (р<0, 05) и удельного количества на 53, 3 и 56, 8% (р<0, 05) на 7 и 21 сутки соответственно в селезеночном отделе, относительным увеличением объёмной доли А-клеток и статистически значимым увеличением индекса апоптоза в 4, 5 раза (р<0, 05) на 7 сутки по сравнению с контрольной группой.

2. Структурные изменения при стрептозотоцин-индуцированном сахарном диабете сопровождаются достоверными изменениями динамики биохимических показателей, характеризуются сочетанием некротических изменений с активацией апоптоза В-клеток (увеличение индекса апоптоза в 8, 3 раза (р<0, 05) на 7 сутки по сравнению с контрольной группой). Во всех отделах поджелудочной железы происходит уменьшение объёмной доли, удельного количества и гипертрофия ядер эндокриноцитов В во все сроки наблюдения на фоне увеличения PCNA-позитивных и Ki-67 клеток (максимально в 6, 5 и 7, 8 раза соответственно на 7 сутки), а также увеличение объёмной доли А-клеток, что свидетельствует о селективном повреждении инсулиноцитов и активации в них регенераторных процессов.

3. Развитие иммунозависимого сахарного диабета по сравнению с контрольной группой сопровождается уменьшением объёмной доли эндокриноцитов В на 46, 7%, развитием воспалительной реакции (инсулитов) с инфильтрацией островков лимфоцитами, нейтрофильными гранулоцитами и макрофагами, выраженными некротическими изменениями на фоне активации апоптоза в В-клетках, начиная с 7 суток (увеличение в 7, 3 раза каспаза-3 и в 4, 3 раза TUNEL-позитивных клеток).

4. Морфофункциональные изменения при стрептозотоцин-никотинамид-индуцированном сахарном диабете характеризуются мозаичностью процессов повреждения эндокринного аппарата с наличием незначительных некротических изменений в отдельных островках, статистически достоверным уменьшением объёмной доли инсулиноцитов селезеночного отдела (на 7 и 21 сутки), уменьшением удельного количества, гипертрофией ядер и умеренной активацией апоптоза (увеличение TUNEL-позитивных клеток на 30 % по сравнению с контрольной группой) в В-клетках всех отделов поджелудочной железы.

5. Реализация запрограммированной клеточной смерти при аллоксан-индуцированном сахарном диабете осуществляется посредством активации внутреннего сигнального пути апоптоза при увеличении экспрессии митохондриального проапоптогенного белка Bax. При моделировании сахарного диабета введением стрептозотоцина индукция апоптоза происходит за счёт активации внешнего сигнального пути посредством TRAIL-рецепторов.

6. При введении бигуанидов и производных сульфонилмочевины 2-го поколения животным со стрептозотоцин-никотинамид-индуцированным сахарным диабетом в панкреатических островках сохраняются комплексные патогистологические изменения (мозаичность некротических изменений в отдельных островках, уменьшение объёмной доли и удельного количества В-клеток, гипертрофией их ядер и активацией апоптоза), характерные для данной модели заболевания, что свидетельствует о слабой выраженности лекарственного патоморфоза эндокринной части.

7. Структурные изменения эндокринной части поджелудочной железы при стрептозотоцин-никотинамид-индуцированном диабете на фоне введения сенситайзеров инсулина (ванадий содержащий комплекс) сопровождаются достоверным увеличением объёмной доли панкреатических островков, выраженной гипертрофией ядер В-клеток, сохранением высокого уровня каспаза-3 и TUNEL-позитивных клеток по сравнению с группой интактного контроля и сахарного диабета.

8. Морфофункциональные изменения у животных с моделью стрептозотоцин-никотинамид-индуцированного диабета при введении антиоксидантов характеризуется статистически значимым увеличением удельного количества и объёмной доли эндокриноцитов В на фоне гипертрофии их ядер по сравнению с крысами диабетиками. Происходит снижение степени выраженности апоптотических процессов на 13, 2% (р<0, 05) по сравнению с группой экспериментального диабета.

9. Лекарственный патоморфоз при стрептозотоцин-никотинамид-индуцированном диабете на фоне введения секретогенов характеризуется наличием морфологических изменений эндокринного аппарата поджелудочной железы характерных для индуцированного диабета с сохранением мозаичных структурных изменений В-эндокриноцитов и сопровождается гипертрофией их ядер с выраженным цитоплазматическим накоплением инсулинпозитивного материала.

10. При аллоксан-индуцированном, стрептозотоцин-индуцированном и иммунозависимом сахарном диабете на фоне введения инкретиномиметиков на 7 сутки достоверно снижается индекс апоптоза в 4, 5 раза (р<0, 05) и 3, 8 (р<0, 05) соответственно, определяемый с помощью выявления каспаза-3 и TUNEL-позитивных клеток. Происходит статистически значимое увеличение объёмной доли островков, удельного количества В-клеток, во все сроки наблюдения, увеличение количества PCNA-, Ki-67-позитивных эндокриноцитов В на 13, 1% и 3, 2% соответственно по сравнению с группой животных с сахарным диабетом, что отражает блокаду апоптоза (гиперэкспрессия MDM2, NF-kB) и активацию репаративной регенерации В-клеток.

11. При проведении комплексного сравнительного анализа для верификации патогистологических изменений, характерных для патоморфогенеза сахарного диабета и лекарственного патоморфоза эндокринного аппарата поджелудочной железы на экспериментальных моделях, наиболее информативными дифференциально-диагностическими критериями являются: объёмная доля, удельное количество, относительная площадь ядер В-клеток, индексы апоптоза и пролиферации (по результатам иммуногистохимического исследования и гибридизации in situ).

12. Фенотипическая вариабельность инсулиноцитов панкреатических островков в различных отделах поджелудочной железы позволяет рассматривать их как ключевой морфофункциональный субстрат реализации клеточного повреждения (некроз, апоптоз) при действии В-цитотоксических веществ и развитии лекарственного патоморфоза. На фоне введения различных групп противодиабетических лекарственных средств и лекарственных веществ отмечается различная степень изменений морфофункциональных показателей, активация компенсаторно-приспособительных процессов (гипертрофия ядер, увеличение объёмной доли В-клеток) и репаративной регенерации (увеличение индекса пролиферации и экспрессии PCNA).

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Снигур Г.Л. Использование экстракта гимнемы лесной в лечении сахарного диабета / А.А. Спасов, М.П. Самохина, В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур // Материалы научно-практической конференции. Состояние здоровья населения Волгоградской области и современные медицинские технологии его коррекции. - Волгоград. - 2005. - С. 104-105.

2. Снигур Г.Л. Морфологические особенности панкреатических островков крыс при моделировании стрептозотоцин-индуцированного иммунозависимого сахарного диабета на фоне применения экстракта гимнемы лесной / В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Самохина, А.Е. Буланов // Материалы II Всероссийской конференции с международным участием «Клинико-морфологические аспекты эндокринопатий». - Белгород. - 2006. - С. 88-92.

3. Снигур Г.Л. Использование раствора - gewf для макроскопической оценки поджелудочной железы у крыс с экспериментальным сахарным диабетом / Г.Л. Снигур, М.П. Самохина // Бюллетень Волгоградского научного центра РАМН и Администрации Волгоградской области. - 2006. - №4. - С. 23-24.

4. Снигур Г.Л. Влияние Диа-в на регенерацию в-клеток поджелудочной железы / М.П. Самохина, А.А. Спасов, Г.Л. Снигур, В.Б. Писарев, В.А. Косолапов // Информационный бюллетень Российского НИИ здоровья. - 2006. - №1. - С. 6-7.

5. Снигур Г.Л. Гипогликемические свойства экстракта Гимнемы лесной / А.А. Спасов, М.П. Самохина, В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, Д.Ю. Агарков, Е.В. Сорокина, А.Е. Буланов // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. - 2007. - №1. - (21).- С.79-82.

6. Snigur G.L. Antidiabetic properties of Dia-в: experimental and clinical investigation. The next of defense / A.A. Spasov, V.A. Kosolapov, M.P. Samokhina, V.B. Pisarev, G.L. Snigur, A.E. Bulanov, M.E. Balabolkin // Intertational conference on diabetes. Synergy and strategy. - 2007. - Р. 11-12.

7. Снигур Г.Л. Влияние гимнемы лесной на регенерацию в-клеток поджелудочной железы / В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Самохина, В.А. Косолапов, А.Е. Буланов // XIV Национальный конгресс «Человек и лекарство». - 2007. - С. 863.

8. Снигур Г.Л. Противодабетические свойства Диа-в: экспериментальные и клинические исследования / А.А. Спасов, В.А. Косолапов, М.П. Самохина, В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, А.Е. Буланов, М.И. Балаболкин // Материалы международной научной конференции «Лекарственные средства и биологически активные соединения». - Гродно. - 2007. - С. 152-154.

9. Снигур Г.Л. Особенности распределения панкреатических островков крыс в норме и при моделировании сахарного диабета / Г.Л. Снигур, П.О. Матвеев, В.Н. Довженко, А.В. Новикова, М.П. Озёрина // Материалы 65-й итоговой научной конф. студентов и молодых учёных ВолГМУ. - Волгоград. - 2007. - С. 181-182.

10. Снигур Г.Л. Влияние на регенерацию в-клеток поджелудочной железы комплексного препарата «Диа-в» / М.П. Самохина, А.А. Спасов, Г.Л. Снигур, В.Б. Писарев, А.Е. Буланов // Материалы II международной научной конференции «Химия, технология и медицинские аспекты природных соединений». - Алмата. - 2007. - С. 135.

11. Снигур Г.Л. Влияние препарата «Диа-в» стимуляцию секреции инсулина, ингибирование апоптоза и стимуляцию репаративных процессов в эндокриноцитах / А.А. Спасов, М.П. Самохина, Г.Л. Снигур, В.Б. Писарев, А.Е. Буланов // Материалы III съезда фармакологов России. Фармакология - практическому здравоохранению. - Санкт-Петербург. - 2007. - Т.7 (2). - С. 1964.

12. Снигур Г.Л. Ультраструктурные изменения в-клеток поджелудочной железы крыс при моделировании сахарного диабета на фоне введения препарата "Диабета" / А.А. Спасов, Г.Л. Снигур, М.П. Самохина, А.Е. Буланов, А.Я. Почепцов // Морфология. - 2008. - Т.133. - №2. - С. 127.

13. Снигур Г.Л. Влияние препарата «Диабета» на апоптоз в-эндокриноцитов / Г.Л. Снигур, В.Б. Писарев, А.А. Спасов, М.П. Самохина, А.Е. Буланов // Морфология. - 2008. - Т.133. - №4. - С. 93.

14. Снигур Г.Л. Структурные изменения в островках Лангерганса при экспериментальном сахарном диабете на фоне введения биологически активной добавки на основе гимнемы лесной / Г.Л. Снигур, М.П. Самохина, В.Б. Писарев, А.А. Спасов, А.Е. Буланов // Морфология. - 2008. - Т. 133. - №1. - С. 60-64.

15. Снигур Г.Л. Фармакологическая коррекция апоптоза Гимнемовыми кислотами / В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, М.П. Самохина, А.Е. Буланов // Материалы IV всероссийского диабетологического конгресса. - Москва. - 2008. - С. 335.

16. Снигур Г.Л. Механизмы токсического действия стрептозотоцина на в-клетки островков Лангерганса / В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Самохина, А.Е. Буланов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2009. - Т.148. - №12. - С. 700-702.

17. Снигур Г.Л. Влияние экстракта гимнемы лесной на регенерацию В-клеток панкреатических островков при экспериментальном сахарном диабете / В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Самохина, А.Е. Буланов // Материалы всероссийской научно-практической конференции. Актуальные проблемы клинической и экспериментальной медицины. - Чита. - 2008. - С. 202-203.

18. Снигур Г.Л. Структурные изменения эндокриноцитов поджелудочной железы при диабете на фоне введения гимнемовых кислот / В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Самохина, А.Е. Буланов // Проблемы и перспективы современной морфологии. Сб. науч. трудов 1. - Томск. - 2008. - С. 40-41.

19. Снигур Г.Л. Особенности цитотоксического действия аллоксана на В-клетки панкреатических островков / В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Самохина // Проблемы и перспективы современной морфологии. Сб. науч. трудов 1. - Томск - 2008. - С. 41-42.

20. Снигур Г.Л. О возможности применения автоматизированного морфометрического анализа микропрепаратов при проведении иммуногистохимического исследования эндокриноцитов панкреатических островков / Г.Л. Снигур // Бюллетень Волгоградского научного центра РАМН. - 2008. - №3. - С. 59.

21. Снигур Г.Л. Клеточная гибель В-эндокриноцитов панкреатических островков, обусловленная аллоксановой цитотоксичностью / В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Самохина // Бюллетень Волгоградского научного центра РАМН. - 2008. - №4. - С. 24-25.

22. Снигур Г.Л. Ультрамикроскопические изменения в-эндокриноцитов при сахарном диабете на фоне введения гимнемовых кислот / В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Самохина, А.Е. Буланов // Материалы всероссийской научной конференции, посвященной 150-летию кафедры патологической анатомии Военно-медицинской академии им. С.М.Кирова. - СПб. - 2009. - С. 96-98.

23. Снигур Г.Л. Ультраструктурные изменения В-клеток панкреатических островков при сахарном диабете на фоне введения БАД Диабета / В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Самохина, А.Е. Буланов // Морфологические ведомости. - 2010. - №1. - С. 78-81.

24. Снигур Г.Л. Влияние гимнемовых кислот на гибель и репарацию В-эндокриноцитов при стрептозотоци-индуцированном диабете / В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Воронкова, А.Е. Буланов // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. - 2010. - №1 (33). - С. 38-40.

25. Снигур Г.Л. Пролиферативные и антиапоптогенные свойства гимнемовых кислот / А.А. Спасов, В.Б. Писарев, Г.Л. Снигур, М.П. Воронкова // Сборник научных трудов. Актуальные вопросы экспериментальной и клинической морфологии / под ред. В. И. Петрова. - Волгоград. - 2010. - С. 132-136.

26. Снигур Г.Л. Профилактика сахарного диабета типа 1 с помощью антиоксидантных веществ в эксперименте / Е.В. Тибирькова, В.А. Косолапов, А.А. Спасов, Г.Л. Снигур, В.А. Анисимова // Сборник научных трудов / Актуальные вопросы экспериментальной и клинической морфологии / под ред. В. И. Петрова. - Волгоград. - 2010. - С. 139-145.

27. Снигур Г.Л. Особенности развития апоптоза эндокриноцитов островков Лангерганса при экспериментальном сахарном диабете / Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Воронкова // Морфология. - Т 137. - №4 - 2010. - С. 175.

28. Снигур Г.Л. Особенности повреждения и регенерации В-клеток панкреатических островков при экспериментальном сахарном диабете / Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Воронкова, А.Е. Буланов // Сборник научных трудов VIII Всероссийской конференции по патологии клетки. - Москва. - 2010. - С. 232-233.

29. Снигур Г.Л. Алгоритм патогистологического исследования эндокринного аппарата поджелудочной железы при экспериментальном сахарном диабете / Г.Л. Снигур, А.В. Смирнов // Бюллетень Волгоградского научного центра РАМН. - 2010. - №3 - С. 58-59.

30. Снигур Г.Л. К вопросу стандартизации патогистологической диагностики сахарного диабета / Г.Л. Снигур, А.В. Смирнов // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. - 2010. - Т.35. - №3. - С. 112-115.

31. Снигур Г.Л. Свободнорадикальные процессы в ткани поджелудочной железы при моделировании экспериментального диабета типа 2 / Н.И. Чепляева, М.В. Чепурнова, Г.Л. Снигур, М.П. Воронкова // Сб. науч. трудов «Инновационные достижения фундаментальных и прикладных медицинских исследований в развитии здравоохранения Волгоградской обл.». - Волгоград. - 2010. - С. 240-241.

32. Снигур Г.Л. Структурные изменения в поджелудочной железе при алиментарном дефиците магния / Е.С. Голубева, Г.Л. Снигур // Сб. науч. трудов 68 научно-практической конф. молодых ученых и студентов «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины». - Волгоград. - 2010. - С. 220.

33. Снигур Г.Л. Протекторное действие нового производного [1, 2-А]бензимидазола при интоксикации стрептозотоцином / Е.В. Тибирькова, Г.Л. Снигур // Сборник научных трудов 68-й открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины». - Волгоград. - 2010. - С. 184.

34. Снигур Г.Л. Патоморфоз экспериментального сахарного диабета / Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Воронкова // Университетская наука: Взгляд в будущее / Материалы итоговой научной конференции сотрудников КГМУ, Центрально-Черноземного научного центра РАМН и отделения РАЕН, посвящённой 76-летию Курского гос. мед. университета / Курск. - 2011. - Т.I.- С. 383-386.

35. Снигур Г.Л. Лекарственный патоморфоз экспериментального сахарного диабета / Г.Л. Снигур, А.В. Смирнов, А.А. Спасов, М.П. Воронкова // Вестник новых медицинских технологий. - 2011 - Т.ХVIII. - № 2 - С. 169-173.

36. Снигур Г.Л. Экспериментальная модель сахарного диабета типа 2 / А.А. Спасов, М.П. Воронкова, Г.Л. Снигур, Н.И. Чепляева, М.В. Чепурнова // Биомедицина. - 2011. - №3. - С. 12-19.

37. Снигур Г.Л. Гимнема лесная, как источник для создания гипогликемических средств / А.А. Спасов, М.П. Воронкова, Г.Л. Снигур // Вестник ВолгГМУ: приложение (Материалы Российско-Индийской выставки-семинара «От генериков к инновационным препаратам»). - Волгоград. - 2011. - С. 41-43.

38. Снигур Г.Л. Особенности структурных изменений поджелудочной железы при фармакологической коррекции экспериментального сахарного диабета / Г.Л. Снигур, А.В. Смирнов // Морфология. - 2011. - Т.140. - №5. - С. 115-116.

39. Снигур Г.Л. Изучение влияния сулодексида на эндотелий зависимую вазодилатацию мозговых сосудов у животных со стрептозотоцин-индуцированным сахарным диабетом / И.Н. Тюренков, А.В. Воронков, А.А. Слиецанс, Е.В. Петрова, Г.Л. Снигур // Сахарный диабет. - 2011. - Т.52. - №3. С. 12-15.

40. Снигур Г.Л. Влияние мексидола и сулодексида на уровень специфических маркеров развития эндотелиальной дисфункции у животных с экспериментальным сахарным диабетом / И.Н. Тюренков, А.В. Воронков, А.А. Слиецанс, Г.Л. Снигур // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2012. - №5. - Т. 75. - С. 14-16.

41. Снигур Г.Л. Апоптоз В-инсулоцитов панкреатических островков и пути его фармакокоррекции / Г.Л. Снигур, А.А. Спасов, М.П. Воронкова // Бюллетень Волгоградского медицинского научного центра. - 2012. - №2 - С 6-8.

Монографии:

1. Снигур Г.Л. Гимнема лесная (ботаника, фармакогнозия, фармакология, клиническая эффективность): Монография / А.А. Спасов, М.П. Воронкова, Г.Л. Снигур, Д.Ю. Агарков // под общей редакцией академика РАМН А.А. Спасова. - Волгоград: Изд-во ВолгГМУ. - 2012. - 200 с.

Размещено на Allbest.ru