Размещено на http://www.allbest.ru/

137

МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ'Я УКРАЇНИ

НАЦІОНАЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

УДК: 615.28:638.135:615.451.16:619

15.00.01 - технологія ліків, організація фармацевтичної справи та судова фармація

Автореферат

дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата фармацевтичних наук

Розробка складу та технології ветеринарних паличок з настойкою прополісу та ципрофлоксацину гідрохлоридом

Ковальова Оксана Олександрівна

Харків-2011

Дисертацією є рукопис.

Робота виконана на кафедрі аптечної технології ліків ім. Д. П. Сала Національного фармацевтичного університету, Міністерства охорони здоров'я України (м. Харків).

Науковий керівник:

заслужений діяч науки і техніки України, академік Української академії наук, доктор фармацевтичних наук, професор ТИХОНОВ ОЛЕКСАНДР ІВАНОВИЧ, Національний фармацевтичний університет, завідувач кафедри аптечної технології ліків ім. Д. П. Сала.

Офіційні опоненти:

доктор фармацевтичних наук, професор ЗАЙЦЕВ ОЛЕКСАНДР ІВАНОВИЧ, Національний фармацевтичний університет, завідувач кафедри процесів та апаратів хіміко-фармацевтичного виробництва;

кандидат фармацевтичних наук, старший науковий співробітник

ПАШНЄВА РАЇСА ОЛЕКСАНДРІВНА,

Державне підприємство «Державний науковий центр лікарських засобів і медичної продукції» МОЗ України, м. Харків, старший науковий співробітник лабораторії таблетованих лікарських засобів.

Захист відбудеться «____» ___________2011 р. о ____ годині на засіданні спеціалізованої вченої ради Д 64.605.02 при Національному фармацевтичному університеті за адресою: 61002, м. Харків, вул. Пушкінська, 53.

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Національного фармацевтичного університету (61168, м. Харків, вул. Блюхера, 4).

Автореферат розісланий «____» _________ 2011 р.

Вчений секретар спеціалізованої вченої ради, доктор фармацевтичних наук, професор Д.І. Дмитрієвський

1. Загальна характеристика роботи

Актуальність теми. У забезпеченні населення країни продуктами харчування важливе значення відводиться м'ясо-молочному скотарству, необхідною умовою інтенсивного ведення якого є максимальне використання репродуктивного потенціалу маткового поголів'я. Але стримуючим чинником розвитку даного сектору господарства є високий відсоток безпліддя у тварин, що в більшості випадків обумовлено різними хворобами статевих органів, серед яких найчастіше реєструються ендометрити інфекційної етіології.

З існуючих підходів до проблеми лікування даного захворювання у великої рогатої худоби, найбільш поширеним є застосування антибіотиків, які діють не тільки на патогенну, але і на корисну мікрофлору. При їх тривалому використанні можливо утворення резистентних штамів бактерій, що супроводжується зниженням терапевтичного ефекту і збільшенням числа бактеріоносіїв серед тварин.

Незважаючи на велику кількість існуючих на сучасному фармацевтичному ринку ветеринарних препаратів для профілактики та лікування ендометритів, питання пошуку нових комбінацій діючих речовин для ефективної фармакотерапії цього захворювання залишається актуальним.

Приймаючи до уваги економічну та фізичну доступність, вміст активних компонентів, що поєднують у собі багатогранність, ефективність лікарської дії, продукти бджільництва, зокрема, прополіс, представляє певний інтерес, як лікарська сировина природного походження для виготовлення ветеринарних препаратів. При сумісному поєднанні прополісу з хіміотерапевтичними засобами антимікробної дії зменшується рівень їх токсичності та ризик виникнення резистентних штамів мікроорганізмів.

Тому створення нового ветеринарного препарату даної групи, що містить діючі речовини природного та синтетичного походження є своєчасним рішенням проблеми ефективної фармакотерапії ендометритів у великої рогатої худоби.

Зв'язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дисертаційна робота виконана відповідно до плану науково - дослідних робіт Національного фармацевтичного університету (НФаУ) (“Створення складу і технології одержання біологічно активних речовин та лікарських засобів природного походження (крім рослинних)” № держреєстрації 0103U000477) та проблемної комісії0 “Фармація” МОЗ та АМН України. Тема дисертаційної роботи затверджена на засіданні вченої ради НФаУ (протокол № 65 від 20. 10. 2010 р.)

У вступі наведено актуальність теми, сформульовано мету та основні завдання дослідження, визначено наукову новизну та практичне значення отриманих результатів.

У розділі 1 «Перспективи створення комбінованих ветеринарних препаратів на основі прополісу та ципрофлоксацину гідрохлориду для лікування ендометритів у корів» наведено узагальнені сучасні дані літератури стосовно розвитку ветеринарної фармації в Україні, етіології, патогенезу, проблем та перспектив фармакотерапії ендометритів у великої рогатої худоби. Проаналізовано фармацевтичний ринок ветеринарних препаратів України для лікування цього захворювання та визначено перспективність його розвитку. Розглянуто особливості технології внутрішньоматкових піноутворюючих паличок, відмічено основні ускладнення, які виникають при створенні даної лікарської форми. Доведено раціональність створення ветеринарного препарату для лікування ендометритів на основі бінарної композиції: природної сировини - настойки прополісу і хіміотерапевтичної субстанції - ципрофлоксацину гідрохлориду.

У розділі 2 «Обґрунтування загальної концепції та методів досліджень» представлено загальну концепцію досліджень, яка враховує особливості підходу до експериментального обґрунтування складу та технології ветеринарних внутрішньоматкових паличок. Наведено характеристику допоміжних та діючих речовин - ципрофлоксацину гідрохлориду (ДФУ 1-е вид., доп. 2, С. 587 ) та настойки прополісу 20 % (код СПЦ-ХДБФ-01-122009), які обумовлюють терапевтичну активність препарату “Антисепт-Апі”.

Обґрунтовано вибір методик для проведення фізичних, фізико-хімічних, фармако-технологічних, біофармацевтичних, мікробіологічних та фармакологічних досліджень, які дозволяють об'єктивно оцінювати якість дослідних зразків та готового лікарського засобу на підставі одержаних та статистично оброблених результатів.

У розділі 3 «Розробка складу та технології паличок з настойкою прополісу та ципрофлоксацину гідрохлоридом» наведено результати експериментальних досліджень з обґрунтування складу і технології внутрішньоматкових піноутворюючих ветеринарних паличок для лікування та профілактики ендометритів у корів.

На основі мікробіологічних досліджень, проведених на кафедрі мікробіології, вірусології та імунології Національного фармацевтичного університету під керівництвом професора та на базі Державної установи “Інститут мікробіології та імунології ім. І.І. Мечникова” нами було обрано раціональний вміст діючих речовин - ципрофлоксацину гідрохлориду (0,200 г) і настойки прополісу 20 % (0,5 мл/паличку).

З метою розробки оптимального складу лікарського засобу у формі паличок та прогнозування раціональної технології препарату, за методами ДФУ були проведені кристалографічні дослідження субстанції ципрофлоксацину гідрохлориду (метод світлооптичної мікроскопії, з подальшим візуальним аналізом), фізико-хімічні та фармако-технологічні дослідження: плинність (метод лійки з вібропристроєм), кут природного укосу, насипна густина, насипний об'єм, пресуємість, вологовміст та вологопоглинання. За результатами кристалографії, субстанція ципрофлоксацину гідрохлориду являє собою полідисперсний кристалічний порошок у вигляді подовжених призм і їх уламків. Поверхня часток грубо-шорстка. Середній розмір часток домінуючої фракції ципрофлоксацину гідрохлориду складає 380 - 440 мкм, формфактор К = 0,2, що вказує на їх анізометричність. Аналіз фізико-хімічних та фармако-технологічних характеристик ципрофлоксацину гідрохлориду, які наведені в табл. 1, показав, що субстанція не має плинності (тому відсутнє значення кута природного укосу), на що також вказує показник стисливості та коефіцієнт Гауснера субстанції, які визначені за методикою, наведеною в ДФУ 1-е вид., доп. 3, 2.9.36. С. 56.

Таблиця 1 Фізико-хімічні та фармако-технологічні властивості субстанції ципрофлоксацину гідрохлориду

Значна різниця в параметрах насипного об'єму та насипної густини після усадки вказує на здатність порошку до грудкування з утворенням досить стійких до руйнування систем, що є небажаним у технологічному процесі.

Отже, ця субстанція не може бути використана для прямого пресування. Таким чином, оптимальною технологією для отримання паличок з ципрофлоксацину гідрохлоридом є метод вологого гранулювання з використанням допоміжних речовин.

Окрім ципрофлоксацину гідрохлориду, до складу препарату входить настойка прополісу 20 %, тому подальшим етапом нашої роботи було дослідження фізико-хімічних показників якості настойки прополісу 20 % (проміжний продукт, який виготовляє Харківська державна біологічна фабрика для виробництва ветеринарних препаратів).

Настойка прополісу 20 % - це прозора рідина коричневого кольору, зі специфічним запахом, з вмістом фенольних сполук не менше 4 %. За показником мікробіологічної чистоти, настойка прополісу 20 % відповідає нормам за категорією 2 ДФУ 1-е вид., п. 5.1.4, С. 303-305.

Отримані експериментальні дані з вивчення фізико-хімічних показників якості настойки прополісу 20 % були закладені до специфікації СПЦ-ХДБФ-01-122009.

Вибір допоміжних складових для створення внутришньоматкових піноутворюючих паличок ми здійснювали з урахуванням їх вартості, доступності, а також беручи до уваги перелік тих допоміжних речовин, що використовуються для виготовлення ТЛФ на Харківській державній біологічній фабриці, яка планує промисловий випуск розробленого нами ветеринарного препарату.

Виходячи із геометричних параметрів палички (довжина 55,0±1,0 мм, діаметр 9,0±0,5 мм), максимальна стійкість паличок до роздавлювання є важливим показником. Тому, при розробці складу ветеринарних піноутворюючих паличок, з метою забезпечення їх механічної міцності був вивчений вплив допоміжних речовин - наповнювачів таких, як лактоза моногідрат і магнію карбонат легкий.

Допоміжну речовину та її вміст визначали в залежності від параметру стійкості до роздавлювання. Результати наведені на рис. 1.

Рис. 1. Залежність стійкості до роздавлювання ветеринарних паличок від вмісту допоміжних речовин

З рис. 1 видно, що найбільші показники підвищення механічної міцності дає лактоза моногідрат у кількості 19 %, при цьому стійкість до роздавлювання складає 38,0 ± 2,0 Н. Однак цієї міцності недостатньо, бо при довжині паличок 55 мм, в процесі фасування вони будуть зазнавати руйнування. Для підвищення механічної міцності до складу паличок була введена мікрокристалічна целюлоза (МКЦ). Результати досліджень представлені на рис. 2.

Рис. 2. Залежність стійкості паличок до роздавлювання від вмісту МКЦ

З рис. 2. видно, що раціональна кількість МКЦ у паличковій суміші складає 16 %, при цьому стійкість паличок до роздавлювання складає 64,0±2,0 Н, що повністю задовольняє будь-які умови фасування та пакування на автоматичному обладнанні.

На основі проведених фізико-хімічних досліджень, з метою надання паличкам газопіноутворюючих властивостей та забезпечення оптимального часу їх розпадання, до їх складу вводили газоутворюючу суміш у кількості 43 % (кислота лимонна моногідрат, натрію гідрокарбонат у співвідношенні 1:1,25) та крохмаль картопляний у кількості 7 %. При цьому палички розпадалися протягом 15 хв., що задовольняє вимоги ДФУ до ТЛФ.

Враховуючи те, що до складу паличкової суміші входить гігроскопічна речовина - кислота лимонна моногідрат, яка має тенденцію до відволоження, нами була вивчена здатність паличкового грануляту поглинати вологу повітря при відносній вологості повітря 100 % і температурі (20±2) °С та досліджена залежність ряду фармако-технологічних показників від вологовмісту.

В результаті встановлено, що паличковий гранулят має високі вологосорбційні властивості та зі збільшенням вмісту вологи, погіршуються його фармако-технологічні характеристики.

Таким чином, вологосорбційні властивості є той фактор що значно впливає на якість паличок, що пресуються.

Це обумовлює необхідність введення до складу суміші вологорегулюючих, ковзних та змащувальних речовин.

В якості адсорбенту вологи, нами була обрана суміш аеросилу і натрію сульфату декагідрату. препарат якість хімічний лікарський

Дослідження з метою вибору оптимальної концентрації аеросилу та натрію сульфату декагідрату в паличковій суміші проводили після витримки грануляту протягом 2 годин в ексикаторі при відносній вологості повітря 90 % і температурі 20±2 °С. Результати досліджень наведені в табл. 2.

Таблиця 2 Фармако-технологічні властивості паличкового грануляту з різним вмістом аеросилу та натрію сульфату декагідрату

Примітки: 1. кількість вимірювань n=5;

2. Крср - комплексний коефіцієнт розрахований як відношення показника пресуємості (Пр) до показника плинності (Пл) Пр/Пл.

Із табл. 2, видно, що навіть при підвищеному вологовмісті гранул з аеросилом і натрієм сульфатом декагідратом вони мають достатню плинність.

Показник пресуємості гранул знаходиться в зворотно пропорційній залежності від кількості вологорегуляторів у суміші. Виходячи з наведених значень показників пресуємості та плинності, розрахований коефіцієнт Кр при вмісті в суміші аеросилу 3 % і натрію сульфату декагідрату 1 % має максимальне значення. Враховуючи це, нами було обрано суміш з вмістом аеросилу 3 % і натрію сульфату декагідрату 1 %.

Гранули пресували в палички, отриману ТЛФ витримували в умовах 100 % вологості повітря. Впродовж часу досліджень - 5 год. - палички зберігали зовнішній вигляд, форму, не розтріскувались і не розпушувалися.

Газопіноутворення досягалося за рахунок виділення діоксиду вуглецю при реакції між кислотою лимонною моногідратом і натрію гідрокарбонатом, а для стабілізації піни необхідно було ввести до складу паличок поверхнево-активні речовини (ПАР), які підбиралися в залежності від властивостей дисперсійного середовища піни. Дисперсійним середовищем піни в даному випадку буде вода, оскільки ексудат матки тварини на 90-92 % складається з води.

Для стабілізації піни, що утворюється до їх складу паличок вводили емульгатор № 1 в різних співвідношеннях, але результати були незадовільними, бо піна, утворена паличками, що містять емульгатор № 1 у кількості 0,5 %, є стабільною лише 8,0±0,1 хв., а повинна бути стабільною не менше 15 хв. Для підвищення стабільності піни використовували моногліцерид дистильований та ПЕО- 400 у різних співвідношеннях. В результаті проведених досліджень була підібрана раціональна піноутворююча система: емульгатор № 1 : МГД : ПЕО-400 у співвідношенні 0,5 : 0,5 : 2.

На стадії пресування піноутворюючих паличок з ципрофлоксацину гідрохлоридом та настойкою прополісу 20 % спостерігалося значне прилипання паличкової маси до стінок матриць і пуансонів внаслідок тертя, що розвивалося в контактних зонах часток із прес-інструментом таблеткової машини та прогресувало у часі. Цей технологічний недолік паличкової маси пов'язаний з адгезійною властивістю кислоти лимонної моногідрату, яка збільшується при надмірній вологості грануляту. Для усунення або зменшення цих небажаних явищ застосовують антифрикційні речовини. В якості антифрикційних речовин нами були використані тальк та кальцію стеарат (2:1), при цьому вологість гранул знаходилася в межах від 0,45 до 0,6 % та було відсутнє прилипання до прес-форми. За таких умов були отримані якісні палички без тріщин і заглибин, із достатньою міцністю.

Таким чином, враховуючи дані експериментальних досліджень, було визначено раціональний склад внутрішньоматкових паличок “Антисепт-Апі” для лікування та профілактики ендометритів у корів:

При розробці технології препарату враховували експериментально отримані фізичні, фізико-хімічні, фармако-технологічні властивості діючих та допоміжних речовин. Критичні параметри технологічного процесу були опрацьовані у дослідно-промислових умовах Харківської державної біологічної фабрики, необхідні контрольні точки внесені до технологічної документації. Блок-схема технологічного процесу виробництва препарату “Антисепт-Апі” представлена на рис. 3.

Блок-схема технологічного процесу виробництва паличок “Антисепт-Апі ” у промислових умовах

На препарат “Антисепт-Апі” розроблено проект ТПР, який апробовано в промислових умовах Харківської державної біологічної фабрики (акт апробації від 18.12.2009 р.).

У розділі 4 «Фізико-хімічні дослідження та стандартизація паличок “Антисепт-Апі”. Вивчення стабільності препарату» наведені результати фізичних, фізико-хімічних, біофармацевтичних та мікробіологічних досліджень препарату, які покладено в основу розробленого проекту МКЯ. Вивчено умови зберігання та встановлено термін придатності паличок “Антисепт-Апі”.

Одержаний препарат з піноутворюючими властивостями характеризували та стандартизували за такими показниками: зовнішній вигляд (оцінювали візуально), час розпадання, середня маса палички, стійкість до роздавлювання, стиранність, об'єм і стабільність піни, рН розчину паличок.

Визначення якісного складу діючих речовин проводили за допомогою класичних реакції ідентифікації (цианідинова проба по Бріанту, реакції: зі спиртовим розчином лугу, з 5 % розчином заліза (ІІІ) хлориду, з розчином свинцю (ІІ) ацетату основного) та методу тонкошарової хроматографії - на фенольні сполуки настойки прополісу 20 %; на хлорид-іон ципрофлоксацину гідрохлориду ідентифікацію проводили згідно ДФУ 1-е вид., доп. 2, С. 587.

Кількісне визначення фенольних сполук настойки прополісу 20 % у препараті проводили за допомогою УФ- спектрофотометрії з подальшою комп'ютерною обробкою результатів дослідження за допомогою програмного забезпечення “Спектр” для “Windows” . Вимірювали оптичну густину розчину досліджуваного зразку препарату на спектрофотометрі СФ-46 при довжині хвилі (290±2 нм) у кюветі з товщиною шару 10 мм, використовуючи як розчин порівняння спирт етиловий 96 %. Паралельно вимірювали оптичну густину розчину робочого стандартного зразка калію біхромату, використовуючи, як розчин порівняння, воду очищену.

Результати кількісного аналізу суми фенольних сполук настойки прополісу 20 % у препараті наведені в табл. 4.

Таблиця 4 Результати кількісного визначення вмісту суми фенольних сполук настойки прополісу 20 % у препараті “Антисепт-Апі”

За отриманими результатами кількісний вміст фенольних сполук у препараті “Антисепт-Апі” складає 0,022 ± 0,002 г/паличку.

Кількісне визначення ципрофлоксацину гідрохлориду в препараті проводили методом високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) згідно ДФУ, 1-вид, доп. 2. С. 587-589 на рідинному хроматографі фірми «GILSTON» (Франція) з подальшою комп'ютерною обробкою результатів дослідження за допомогою програми “МультіХром” для “Windows”. Результати кількісного визначення ципрофлоксацину гідрохлориду в препараті наведені в табл. 5.

Таким чином, кількісний вміст ципрофлоксацину гідрохлориду вкладається в допустимі норми від 0,190 до 0,210 г/паличку.

Для вивчення стабільності отриманий препарат було закладено на зберігання при кімнатній температурі (15 - 25 є С) у двох видах упаковки: контурно-чарункова упаковка на основі плівки ПВХ (ГОСТ 25250-88) та фольги алюмінієвої печатної лакірованої (ТУ 48-21-27088 або ГОСТ 745-79) і пластмасовий контейнер.

Таблиця 5 Результати кількісного визначення ципрофлоксацину гідрохлориду у препараті “Антисепт-Апі”

У процесі зберігання паличок визначали наступні показники: зовнішній вигляд, середню масу, розпадання, вміст тальку та аеросилу, стиранність, стабільність піни, кількість піни, утвореної при розпаданні палички, однорідність вмісту, мікробіологічну чистоту.

Мікробіологічні дослідження проводили на базі Державної установи “Інститут мікробіології та імунології ім. І.І. Мечникова”.

Також проводили якісне та кількісне визначення ципрофлоксацину гідрохлориду і суми фенольних сполук настойки прополісу 20 % у складі готового препарату.

Експериментальні результати вивчення стабільності препарату “Антисепт-Апі” та обґрунтування вибору раціональної упаковки при температурі 15-25 єС наведені в табл. 6.

Встановлено, що в процесі зберігання палички “Антисепт-Апі” у контурно-чарунковій упаковці при температурі 15-25 єС мали незмінні фізико-хімічні та фармако-технологічні показники якості, значення яких вкладалися у норми, встановлені за проектом МКЯ на препарат. Затверджено технічні умови на препарат “Антисепт-Апі” ТУ У. 24.-4-35244569-014:2007.

Кількісний вміст діючих речовин коливався в межах помилки вимірювань протягом 27 місяців зберігання при температурі 15-25 єС. Палички “Антисепт-Апі” відповідали вимогам ДФУ до мікробіологічної чистоти.

У процесі зберігання паличок у пластмасових контейнерах при температурі (15-25 єС) спостерігалася зміна зовнішнього вигляду, середньої маси, розпадання та погіршувалися показники піноутворення. Це вказує на недостатню герметичність даного виду упаковки, через що у пластмасові контейнери проникала волога, яка спричиняла поступове руйнування ТЛФ.

Таблиця 6 Результати вивчення стабільності паличок “Антисепт-Апі” в процесі зберігання у контурно-чарунковій упаковці при температурі 15-25 С

Таким чином, раціональним видом упаковки є контурно-чарункова упаковка, в якій палички “Антисепт-Апі” стабільні протягом двох років зберігання при кімнатній температурі (15-25 єС).

У розділі 5 «Мікробіологічне, токсикологічне та фармакологічне дослідження паличок “Антисепт-Апі” представлені результати проведених на базі Державної установи “Інститут мікробіології та імунології ім. І.І. Мечникова” мікробіологічних досліджень in vitro, препарату “Антисепт-Апі” та препарату порівняння “Енрофлон” (ИП “ВИК Здоровье животных”, Білорусь). За результатами даних досліджень встановлено, що за показниками значень діаметрів затримки росту тест-штамів мікроорганізмів на поживних середовищах, антибактеріальна активність паличок “Антисепт-Апі” не поступається дії внутрішньоматкових паличок “Енрофлон”.За результатами проведених на базі ОСАО “Агрокомбінат Слобожанський” (м. Чугуїв) та Державного підприємства “Світанок” (м. Балаклія), токсикологічних та фармакологічних досліджень розробленого препарату, встановлена висока специфічна дія паличок “Антисепт-Апі” для профілактики і лікування ендометритів у великої рогатої худоби. Профілактичний ефект від застосування препарату становить 100 %, лікувальний - 90 %.

За результатами вивчення гострої токсичності, препарат “Антисепт-Апі” відноситься до V класу токсичності - до практично не токсичних речовин (ЛД50>5000 мг/кг).

Висновки

1. Вперше на основі проведених фізичних, фізико-хімічних, фармако-технологічних, біофармацевтичних, мікробіологічних та фармакологічних досліджень розроблено склад та технологію піноутворюючих внутрішньоматкових паличок “Антисепт-Апі” з настойкою прополісу 20 % та ципрофлоксацину гідрохлоридом для профілактики та лікування ендометритів.

2. За результатами мікробіологічних досліджень визначено раціональну кількість ципрофлоксацину гідрохлориду - 0,2 г та встановлено оптимальний вміст настойки прополісу 20 % - 0,5 мл (що у перерахунку за вмістом фенольних сполук складає 0,02 г/паличку). Досліджено фізичні та фізико-хімічні показники якості настойки прополісу 20 %, які включено до специфікації СПЦ-ХДБФ-01-122009.

3. Обґрунтовано вибір та вміст допоміжних речовин для виготовлення паличок: лактози моногідрату 0,955 г, мікрокристалічної целюлози 0,800 г, натрію гідрокарбонату 1,200 г, кислоти лимонної моногідрату 0,960 г, крохмалю картопляного 0,350 г, натрію сульфату декагідрату 0,060 г, кальцію стеарату 0,055 г, тальку 0,100 г та аеросилу 0,150 г. Вивчено їх вплив на фармако-технологічні властивості паличкових мас.

4. З метою надання паличкам властивості утворювати піну при розпаданні у водному середовищі, підібрано раціональну піноутворюючу систему допоміжних речовин: емульгатор №1, моногліцериди дистильовані, поліетиленоксид-400 у співвідношенні 0,5 : 0,5 : 2 % до паличкової маси.

5. Встановлено раціональний температурний режим сушіння вологого паличкового грануляту в сушарці псевдозрідженого шару: 14 хв. при температурі 50±5 С.

6. Опрацьовано показники якості препарату “Антисепт-Апі” та експериментально доведено стабільність паличок у контурній чарунковій упаковці протягом двох років при температурі 15-25 С. На підставі отриманих даних розроблено проекти методів контролю якості та технологічного промислового регламенту, які апробовано на базі Харківської державної біологічної фабрики (акт апробації від 18.12.2009 р.).

7. Визначена відносна нешкідливість та висока терапевтична ефективність паличок “Антисепт-Апі” для профілактики і лікування ендометритів у великої рогатої худоби. Профілактичний ефект від застосування препарату становить 100 %, лікувальний - 90 %.

8. За результатами проведеного комплексу досліджень розроблено та затверджено технічні умови на препарат “Антисепт-Апі” ТУ У 24.4-35244569-014:2007.

9. За одержаними результатами отримано патент “Комбінований ветеринарний препарат для лікування та профілактики ендометритів”№ 92933 від 27.12.2010 р.

10. Фрагменти роботи впроваджено до навчального процесу ряду вищих навчальних закладів України.

Список опублікованих праць за темою дисертації

Фахові публікації

1. Ковальова О. О. Розробка складу та технології лікарського препарату для ветеринарії у вигляді паличок з настойкою прополісу та ципрофлоксацином / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов // Вісник фармації. - 2007. - № 4 (52). - С. 16-19. (Особистий внесок - планування, проведення експериментальної частини, статистична обробка результатів, оформлення статті).

2. Ковальова О. О. Вивчення антибактеріальної активності піноутворюючих паличок “Антисепт-Апі” для лікування ендометритів у ветеринарії / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов, Л. Ф. Сілаєва // Запорожский мед. журн. - 2008. - № 5. - С. 68-70. (Особистий внесок - участь у проведенні експериментальної частини, статистична обробка результатів, оформлення статті).

3. Ковальова О. О. Вибір допоміжних речовин для розробки ветеринарного препарату “Антисепт-Апі” / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов, М. В. Руденко // Запорожский мед. журн. - 2009. - Т. 11, № 4. - С. 114-116. (Особистий внесок - проведення експериментальної частини, обробка результатів, оформлення статті).

4. Ковальова О. О. Використання методу високоефективної рідинної хроматографії для кількісного визначення ципрофлоксацину гідрохлориду у ветеринарному препараті / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов, М. В. Руденко // Фармац. журн. - 2009. - № 1. - С. 76-80. (Особистий внесок - участь у проведенні експериментальної частини, статистична обробка результатів, оформлення статті).

5. Ковальова О. О. Ідентифікація та кількісне визначення фенольних сполук у ветеринарному препараті з настойкою прополісу / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов // Збірник наукових праць співробітників НМАПО ім. П.Л. Шупика. - К., 2009. - Вип. 18, кн. 3. - С. 615-619. (Особистий внесок - підготовка зразків, участь у проведенні експериментальної частини, статистична обробка результатів, оформлення статті).

6. Ковальова О. О. Термографічне дослідження ветеринарних паличок “Антисепт-Апі” / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов // Вісник фармації. - 2010. - №2 (62). - С. 3-5. (Особистий внесок - підготовка зразків, участь у проведенні експериментальної частини, статистична обробка результатів, оформлення статті).

Патент

7. Патент 92933 України на винахід, МПК (2009) А61К 35/64, А 61 Р 31/04. Комбінований ветеринарний засіб для лікування та профілактики ендометритів / Н. В. Тоцька, М. В. Руденко, О. І. Тихонов, О. О. Ковальова. - № а 200811099; заявл. 12.09.2008; опубл. 27.12.2010, Бюл. 24. (Особистий внесок - патентний пошук, розробка складу та технології ветеринарних паличок, підготовка формули винаходу та опису до патенту, оформлення патенту).

Інформаційні листи, статті в науково-практичних виданнях

8. Ковальова О. О. Методика визначення фенольних сполук у твердих лікарських формах з прополісом в умовах аптек : інформ. лист / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов. - К.: Укрмедпатентіформ, 2008. - № 214. - 4 с.

9. Ковальова О. О. Вивчення фізико-хімічних та технологічних показників субстанції ципрофлоксацину гідрохлориду / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов // Український вісник психоневрології. - 2008. - Т. № 16, вип. (56), (дод.). - С. 94-95.

Тези доповідей, матеріали конференцій

10. Ковальова О. О. Комбіноване застосування настойки прополісу та ципрофлоксацину для лікування ендометритів у корів / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов // Современные проблемы и пути их решения в науке, транспорте, производстве и образовании `2007 : сб. науч. тр. по материалам междунар. науч.-практ. конф., г. Одесса 15-25 дек. 2007 г. - Одесса, 2007. - Т. 18. - С. 3-4.

11. Ковальова О. О. Проблема лікування ендометритів у корів / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов // Наука и образование без границ - 2007 : материалы ІІІ Междунар. науч.- практ. конф., г. София, 16-27 дек. 2007 г. - София : Изд-во «Бял ГРАД-БГ» ООД, 2007. - Т. 15. - С. 23-24.

12. Ковальова О. О. Застосування прополісу як антимікробного засобу у ветеринарії / О. О. Ковальова, О. І Тихонов // Актуальні питання створення нових лікарських засобів : матеріали Всеукр. наук-практ. конф. студ. та молодих вчених, м. Харків 16-17 квіт. 2008 р. - Х.: Вид-во НФаУ, 2008.- С. 134.

13. Ковальова О. О. Актуальність застосування гомеопатичної терапії у сучасній ветеринарії / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов, С. В. Олійник // Сьогодення та майбутнє фармації : матеріали Всеукр. конгр., м. Харків 16-19 квіт. 2008 р. - Х.: Вид-во НФаУ, 2008. - С. 224.

14. Ковальова О. О. Актуальність впровадження фармакоекономічних досліджень у ветеринарну медицину / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов // Фармакоэкономика в Украине: состояние и перспективы развития: материали науч.-практ. конф., г. Харьков, 30 мая 2008 г. - Х.: Вид-во НФаУ, 2008. - С. 139-140.

15. Ковальова О. О. Ендометрит - причина розвитку безпліддя у корів /
О. О. Ковальова, О. І. Тихонов // Фармацевтична технологія. Історія розвитку та погляд у майбутнє: матеріали наук.-практ. конф. з міжнар. участю, присвяч.
85-річчю з дня народження ректора ХФІ (1971-1980 рр.), д-ра фармац. наук, проф. Сала Д.П., м. Харків, 26 листоп. 2008 р. - Х. : Вид-во НФаУ, 2008. - С. 98-103.

16. Ковальова О. О. Вивчення амінокислотного складу прополісу та його спиртової настойки 20 % / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов // Фармакогнозія ХХІ століття. Досягнення та перспективи : матеріали ювілейної наук.-практ. конф. з міжнар. участю, присвяч. пам'яті канд. фармац. наук, доц. Борисова М.І. (до 80-річчя з дня народж.), м. Харків 26 берез. 2009 р. - Х. : Вид-во НФаУ, 2009. - С. 219-220.

17. Ковальова О. О. Визначення ципрофлоксацину гідрохлориду у ветеринарному препараті / О. О. Ковальова, О. І. Тихонов // Сучасні проблеми судово-токсикологічної науки і практики : матеріали Всеукр. наук.- практ. конф. з міжнар. участю, м. Харків, 9-10 квіт. 2009 р. - Х. : Вид-во НФаУ, 2009. - С. 31-33.

18. Актуальность применения апипрепаратов в фармации / О. А. Ковалева, А. И. Тихонов, Л. М. Унгурян, С. В. Олейник, Е. В. Биличенко // Апитерапия сегодня : материалы XIV Всерос. научн.-практ. конф....