Основы деятельности провизора

* переноса транспозонов, несущих r-гены (или мигрирующих генетических последовательностей). Транспозоны могут мигрировать с хромосомы на плазмиду и обратно, а также с плазмиды на другую плазмиду. Таким образом, гены резистентности могут передаваться далее дочерним клеткам или при рекомбинации другим бактериям-реципиентам.

Реализация приобретенной устойчивости. Изменения в геноме бактерий приводят к тому, что меняются и некоторые свойства бактериальной клетки, в результате чего она становится устойчивой к антибактериальным препаратам. Обычно антимикробный эффект препарата осуществляется таким образом: агент должен связаться с бактерией и пройти сквозь ее оболочку, затем он должен быть доставлен к месту действия, после чего препарат взаимодействует с внутриклеточными мишенями. Реализация приобретенной лекарственной устойчивости возможна на каждом из следующих этапов:

* модификация мишени. Фермент-мишень может быть так изменен, что его функции не нарушаются, но способность связываться с химиопрепаратом (аффинность) резко снижается или может быть включен «обходной путь» метаболизма, т.е. в клетке активируется другой фермент, который не подвержен действию данного препарата.

* «недоступность» мишени за счет снижения проницаемости клеточной стенки и клеточных мембран или «эффлюко» - механизма, когда клетка как бы «выталкивает» из себя антибиотик.

* инактивация препарата бактериальными ферментами. Некоторые бактерии способны продуцировать особые ферменты, которые делают препараты неактивными (например, бета-лактамазы, аминогликозид-модифицирующие ферменты, хлорамфениколацетилтрансфераза). Бета-лактамазы - это ферменты, разрушающие бета-лактамное кольцо с образованием неактивных соединений. Гены, кодирующие эти ферменты, широко распространены среди бактерий и могут быть как в составе хромосомы, так и в составе плазмиды.

Для борьбы с инактивирующим действием бета-лактамаз используют вещества - ингибиторы (например, клавулановую кислоту, сульбактам, тазобактам). Эти вещества содержат в своем составе бета-лактамное кольцо и способны связываться с бета-лактамазами, предотвращая их разрушительное действие на бета-лактамы. При этом собственная антибактериальная активность таких ингибиторов низкая. Клавулановая кислота ингибирует большинство известных бета-лактамаз. Ее комбинируют с пенициллинами: амоксициллином, тикарциллином, пиперациллином.

Предупредить развитие антибиотикорезистентности у бактерий практически невозможно, но необходимо использовать антимикробные препараты таким образом, чтобы не способствовать развитию и распространению устойчивости (в частности, применять антибиотики строго по показаниям, избегать их использования с профилактической целью, через 10-15 дней антибиотикотерапии менять препарат, по возможности использовать препараты узкого спектра действия, ограниченно применять антибиотики в ветеринарии и не использовать их как фактор роста).

2. Возбудитель туляремии. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение туляремии

Туляремия (от названия местности Tulare в Калифорнии) - зоонозная инфекционная болезнь с природной очаговостью, вызываемая Francisella tularensis, характеризующаяся лихорадкой и поражением лимфатических узлов.

Возбудитель болезни открыт в 1911 г. Г. Мак-Коем и Х. Чепи-ном в Калифорнии и изучен Э. Френсисом. Семейство не определено.

Таксономия. F. tularensis относится к отделу Gracilicutes, роду Francisella.

Морфология и культивирование. Мелкие (0,3-0,5 мкм) грамот-рицательные бактерии, грациликуты, жгутиков не имеют, спор не образуют, вокруг бактерий выявляется капсу-лоподобный слизистый покров. F. tularensis - факультативный анаэроб, не растет на простых питательных средах; культивируется на средах с добавлением желтка или цистина. При культивировании происходят аттенуация бактерий и превращение их из вирулентной S-формы в авирулентную R-форму.

Эпидемиология. Туляремия распространена на многих континентах. Источником инфекции являются все виды грызунов, чаще водяная полевка, ондатра, домовая мышь, заяц и др. Передача возбудителя среди животных происходит чаще через кровососущих членистоногих: клещей, комаров, реже блох. Пути заражения человека - трансмиссивный (при укусах инфицированными клещами, комарами, слепнями), контактно-бытовой (через поврежденную кожу или слизистую оболочку глаз), пищевой (при употреблении зараженной воды или пищевых продуктов), воздушный (при вдыхании с воздухом пыли или капелек загрязненных выделениями грызунов). От человека человеку возбудитель не передается.

Микробиологическая диагностика. Основана на серологическом, биологическом и бактериологическом исследованиях материалов, взятых от больного (смывы, кровь, пунктат бубонов). Применяют РА с туляремийным диагностикумом, РИГА с эритроцитарным диагностикумом, а также РСК, РИФ, ИФА. Бактериологические исследования материала, взятого от больного, обычно безуспешны. Выделяют и идентифицируют возбудителя после заражения исследуемым материалом морских свинок или белых мышей.

Проводят кожные аллергические диагностические пробы с тулярином - туляремийным антигеном. При положительной реакции на месте инъекции через 12-24 ч появляются краснота и отечность.

Профилактика. Профилактические меры сводятся к борьбе с грызунами, защите водоисточников, санитарно-просветительской работе.

Для создания активного иммунитета по эпидемическим показаниям применяют эффективную живую туляремийную вакцину, полученную из штамма №15 отечественными учеными Н.А. Гайским и Б.Я. Эльбертом.

3. Ротавирусная инфекция. Характеристика. Микробиологическая диагностика

Ротавирусы размножаются в эпителии слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки, вызывая массовую гибель клеток. Клинически при ротавирусной инфекции поражения проявляются рвотой (длится 2-6 сут) и выраженным диарейным синдромом. Инкубационный период не превышает 24-96 ч. Диарея продолжается не более 24-48 ч; прогноз заболевания благоприятный. У маленьких детей основным осложнением может быть дегидратация, приводящая к тяжёлым последствиям. Принципы микробиологической диагностики ротавирусной инфекции Основу диагностики ротавирусной инфекции составляют вирусоскопические и серологические методы. Ротавирусы обнаруживают в испражнениях с помощью электронной и иммунной электронной микроскопии.

Для экспресс-диагностики используют ИФА, РНК-зонды, РПГА с АТ-диагностикумом и др. Сывороточные AT определяют в РТПГА. Лечение и профилактика ротавирусной инфекции Средства этиотропной терапии ротавирусной инфекции отсутствуют; проводят симптоматическое лечение, направленное на смягчение явлений диареи, и профилактику дегидратации.

ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ №28

1. Серологические реакции, применяемые для диагностики инфекционных заболеваний

Иммунные реакции используют при диагностических и иммунологических исследованиях у больных и здоровых людей. С этой целью применяют серологические методы, т.е. методы изучения антител и антигенов с помощью реакций антиген-антитело, определяемых в сыворотке крови и других жидкостях, а также тканях организма.

Обнаружение в сыворотке крови больного антител против антигенов возбудителя позволяет поставить диагноз болезни. Серологические исследования применяют также для идентификации антигенов микробов, различных биологически активных веществ, групп крови, тканевых и опухолевых антигенов, иммунных комплексов, рецепторов клеток и др.

При выделении микроба от больного проводят идентификацию возбудителя путем изучения его антигенных свойств с помощью иммунных диагностических сывороток, т.е. сывороток крови гипериммунизированных животных, содержащих специфические антитела. Это так называемая серологическая идентификация микроорганизмов.

В микробиологии и иммунологии широко применяются реакции агглютинации, преципитации, нейтрализации, реакции с участием комплемента, с использованием меченых антител и антигенов (радиоиммунологический, иммуноферментный, иммунофлюоресцентный методы). Перечисленные реакции различаются по регистрируемому эффекту и технике постановки, однако, все они основаны на реакции взаимодействия антигена с антителом и применяются для выявления как антител, так и антигенов. Реакции иммунитета характеризуются высокой чувствительностью и специфичностью.

Особенности взаимодействия антитела с антигеном являются основой диагностических реакций в лабораториях. Реакция in vitro между антигеном и антителом состоит из специфической и неспецифической фазы. Вспецифическую фазу происходит быстрое специфическое связывание активного центра антитела с детерминантой антигена. Затем наступает неспецифическая фаза - более медленная, которая проявляется видимыми физическими явлениями, например образованием хлопьев (феномен агглютинации) или преципитата в виде помутнения. Эта фаза требует наличия определенных условий (электролитов, оптимального рН среды).

Связывание детерминанты антигена (эпитопа) с активным центром Fab-фрагмента антител обусловлено ван-дер-ваальсовыми силами, водородными связями и гидрофобным взаимодействием. Прочность и количество связавшегося антигена антителами зависят от аффинности, авидности антител и их валентности

2. Возбудители брюшного тифа и партатифов. Лабораторная диагностика

Брюшной тиф и паратифы А и В-острые кишечные инфекции, характеризующиеся поражением лимфатического аппарата кишечника, выраженной интоксикацией. Их возбудителями являются соответственно Salmonella typhi, Salmonella paratyphi А и Salmonella schottmuelleri.

Таксономическое положение. Возбудители брюшного тифа и паратифов А и В относятся к отделу Gracilicutes, семейству Enterobacteriaceae, роду Salmonella.

Морфологические и тинкториальные свойства. Сальмонеллы - мелкие грамотрицательные палочки с закругленными концами. В мазках располагаются беспорядочно. Не образуют спор, имеют микрокапсулу, перитрихи.

Эпидемиология. Брюшной тиф и паратиф А - антропонозные инфекции; источником заболевания являются больные люди и бактерионосители. Источником паратифа В могут быть также сельскохозяйственные животные. Механизм заражения фекально-оральный. Среди путей передачи преобладает водный.

Микробиологическая диагностика. Основной метод диагностики - бактериологический: посев и выделение S. typhi из крови (гемокультура), фекалий (копрокультура), мочи (уринокультура), желчи, костного мозга. РИФ для обнаружения антигена возбудителя в биологических жидкостях. Серологический метод обнаружения О- и Н - антител в РПГА. Бактерионосителей выявляют по обнаружению Vi-антител в сыворотке крови с помощью РПГА и положительному результату бактериологического; выделения возбудителя. Для внутривидовой идентификации применяют фаготипирование.

Профилактика. Санитарно-гигиенические мероприятия. Вакцинация - брюшнотифозная химическая и брюшнотифозная спиртовая вакцина, обогащенная Vi-антигеном. Для экстренной профилактики - брюшнотифозный бактериофаг.

3. Возбудители полиомиелита. Принципы лабораторной диагностики. Специфическая профилактика

Возбудитель полиомиелита. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

Таксономия.: семейство Picornaviridae, род Enterovims, вид Poliovirus.

Структура. По структуре полиовирусы - типичные представители рода Enterovirus. РНК-содержащие вирусы.

Морфология: мелкие, просто организованные вирусы, сферической формы, состоят из одноцепочечной РНК и капсида.

Культивирование: Хорошо репродуцируются в первичных и перевариваемых культурах клеток из тканей человека и сопровождается цитопатическим эффектом. В культуре клеток под агаровым покрытием энтеровирусы образуют бляшки.

Антигенные свойства: Различают 3 серотипа внутри вида: 1, 2, 3, не вызывающие перекрестного иммунитета. Все серотипы патогенны дл человека.

Патогенез и клиника. Естественная восприимчивость человека к вирусам полиомиелита высокая. Входными воротами служат слизистые оболочки верхних дыхательных путей и пищеварительного тракта. Первичная репродукция вирусов происходит в лимфатических узлах глоточного кольца и тонкой кишки. Из лимфатической системы вирусы проникают в кровь, а затем в ЦНС, где избирательно поражают клетки передних рогов спинного мозга (двигательные нейроны). Инкубационный период продолжается в среднем 7-14 дней. Различают 3 клинические формы полиомиелита: паралитическую, менингеальную (без параличей), абортивную (легкая форма). Заболевание начинается с повышения температуры тела, общего недомогания, головных болей, рвоты, болей в горле.

Иммунитет. После перенесенной болезни остается пожизненный типоспецифический иммунитет. Иммунитет определяется наличием вируснейтрализующих антител, среди которых важная роль принадлежит местным секреторным антителам слизистой оболочки глотки и кишечника (местный иммунитет). Пассивный естественный иммунитет сохраняется в течение 3-5 недель после рождения ребенка.

Микробиологическая диагностика. Материал для исследования - кал, отделяемое носоглотки, при летальных исходах - кусочки головного и спинного мозга, лимфатические узлы.

Вирусы полиомиелита выделяют путем заражения исследуемым материалом первичных и перевиваемых культур клеток. О репродукции вирусов судят по цитопатическому действию. Идентифицируют выделенный вирус с помощью типоспецифических сывороток в реакции нейтрализации в культуре клеток. Важное значение имеет внутривидовая дифференциация вирусов, которая позволяет отличить патогенные штаммы от вакцинных штаммов, выделяющихся от людей, иммунизированных живой полиомиелитной вакциной. Различия между штаммами выявляют с помощью ИФА, реакции нейтрализации цитопатического действия вируса в культуре клеток со штаммоспецифической иммунной сывороткой, а также в ПЦР.

Серодиагностика основана на использовании парных сывороток больных с применением эталонных штаммов вируса в качестве диагностикума. Содержание сывороточных иммуноглобулинов классов IgG, IgA, IgM определяют методом радиальной иммунодиффузии по Манчини.

Лечение. Патогенетическое. Применение гомологичного иммуноглобулина для предупреждения развития паралитических форм ограничено.

Профилактика. Основной мерой профилактики полиомиелита является иммунизация. Первая инактивированная вакцина для профилактики - создавала общий гуморальный иммунитет, не формировала местной резистентности слизистых оболочек ЖКТ, не обеспечивала надежную защиту.

Пероральная живая культуральная вакцина из трех серотипов штаммов. Используют для массовой иммунизации детей, она создает стойкийобщий и местный иммунитет.

Неспецифическая профилактика сводится к санитарно-гигиеническим мероприятиям.

ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ №29

1. Понятие об иммуномодуляторах. Принцип действия. Применение. Принципы иммунотерапии и иммунопрофилактики

Иммуномодуляторы - вещества, оказывающие влияние на функцию иммунной системы, изменяющие активность иммунной системы в сторону повешения (иммуностимуляторы) или понижения (иммунодепрессанты) её активности.

К экзогенным иммуномодуляторам относится большая группа веществ различной химической природы и происхождения, оказывающих неспецифическое активирующее или супрессивное действие на иммунную систему, но являющихся чужеродными для организма. Антибиотики, левамизол, полисахариды, ЛПС, адъюванты.

Эндогенные иммуномодуляторы представляют собой достаточно большую группу олигопептидов, синтезируемых самим организмом, его иммунокомпетентными клетками, и способных активировать иммунную систему путем усиления функции иммунокомпетентных клеток. К ним относятся регуляторные пептиды: интерлейкины, интерфероны, гормоны тимуса.

Применение иммуномодуляторов: при первичных и вторичных иммунодефицитах различного происхождения, при онкологических болезнях, при трансплантации органов и тканей, при лечении иммунопатологических и аллергических болезней, в иммунопрофилактике и лечении инфекционных болезней.

Созданы препараты, обладающие иммуномодулирующим действием: интерферон, лейкоферон, виферон.

2. Лабораторная диагностика кишечного дисбактериоза

Лабораторная диагностика кишечного дисбактериоза.

На состав микробных сообществ различных полостей организма влияют самые разнообразные факторы: состав и качество пищи, курение и употребление алкоголя, нормальная перистальтика и своевременное опорожнение кишечника и мочевого пузыря, качество пережёвывания пищи и даже характер трудовой деятельности (сидячий или иной). Однако наибольшее воздействие оказывают заболевания, патогенез которых включает изменения физико-химических свойств эпителиальных поверхностей и приём антимикробных препаратов. Стойкие нарушения микробных ценозов называют дисбактериозами (дисмикробиоценозами), среди них, безусловно, превалируют поражения микрофлоры кишечника.

Показания для бактериологической диагностики дисбактериоза кишечника - длительно протекающие инфекции и расстройства, при которых не удаётся выделить патогенные энтеробактерии; затяжной период реконвалесценции после перенесённой кишечной инфекции; дисфункции ЖКТ на фоне или после проведённой антибиотикотерапии или у лиц, постоянно контактирующих с антимикробными препаратами. Исследования также следует проводить у больных с болезнями злокачественного роста, страдающих диспептическими расстройствами, у лиц, подготавливаемых к операциям на органах брюшной полости, а также у недоношенных или травмированных новорождённых и при наличии бактериемии и гнойных процессов, трудно поддающихся лечению (язвенные колиты и энтероколиты, пиелиты, холециститы и др.). Посевы изучают на наличие патогенных микроорганизмов и на нарушение соотношений микрофлоры. Для обогащения в качестве обязательных рекомендуют использовать среды Мюллера-Хитона, селенитовый бульон, магниевую среду; для культивирования - среды Плоскирева, Эндо и Левина (одна из них градиентная), КА, среду Цёйсслера, среду Сабуро, среду Блауртка или тиогликолевый бульон и др. Патогенные бактерии определяют на средах с антибиотиками; исследования на дисбактериоз проводят для получения основных критериев и показателей. Результаты исследования следует считать объективными при анализе роста изолированных колоний, у которых можно изучить морфологию и подсчитать их общее количество на чашку Петри. При сплошном росте анализ следует повторить, производя высев из больших разведении. Факультативные бактерии культивируют 24-48 ч при 37?С, бифидобактерии - 48 ч, анаэробы и бактероиды - 4-5 сут в анаэростате, посевы на среде Сабуро - 96 ч при 28-30?С. После идентификации производят пересчёт содержания микроорганизмов каждой таксономической группы на 1 г исследуемого материала. К оценке результатов следует подходить осторожно, т.к. состав кишечной микрофлоры подвержен различным колебаниям и необходимо отличать истинный дисбактериоз от дисбактериальных реакций (сдвиги в составе микрофлоры незначительны либо кратковременны и не требуют специфической коррекции). При истинном дисбактериозе нарушения микробного ценоза обычно коррелируют с клиническими проявлениями, и их нормализация достаточно длительна (20-30 сут.). При выдаче результатов следует указать на наличие или отсутствие патогенной микрофлоры и дать состав присутствующих микроорганизмов. При наличии дисбактериоза необходимо указать следующие параметры:

Содержание общего количества Escherichia coli, полноценных в ферментативном отношении.

Наличие гемолитических Escherichia coli (в%).

Наличие прочих условно-патогенных бактерий (в%).

Наличие ассоциаций грамотрицательных бактерий, плазма-коагулирующего стафилококка и других ассоциаций.

Наличие бактерий рода Proteus.

Наличие грибов рода Candida.

Наличие или отсутствие бифидобактерии, лактобактерий, бактероидов и прочих в минимальных разведениях фекалий.

Наличие ассоциаций аэробных и анаэробных бактерий.

Повторные исследования. Следует отразить имеющиеся позитивные или негативные сдвиги; при обнаружении патогенной микрофлоры необходимо изучить её чувствительность к антибактериальным препаратам или бактериофагам. При определении чувствительности следует отдать предпочтение антибиотикам узкого спектра действия для возможно более селективного подавления патогенов.

3. Цитомегаловирус. Характеристика. Методы лабораторной диагностики

Цитомегаловирус (ЦМВ) - это инфекционное заболевание, которое относится к семейству герпеса. Он широко распространен в популяции. Антитела к цитомегаловирусу обнаруживают у 10-15% подростков. К возрасту 35 лет эти антитела обнаруживают уже у 40% людей. Вирус имеет родство с тканью слюнных желез и при локализованных формах обнаруживаэтся только в этих железах.

Вирус герпеса человека 5 типа (ВГЧ-V) - возбудитель цитомегаловирусной инфекции (ЦМВ) вызывает заболевания, ассоциированные с первичной инфекцией: первичная ЦМВ-инфекция, врожденная ЦМВ-инфекция. При активации латентной инфекции отмечается хроническая ЦМВ-инфекция у иммунокомпетентных лиц; острая ЦМВ-инфекция у иммунодефицитных лиц; ретинит, колит, энцефалит (при пересадке органов и СПИДе).

ЦМВ сохраняется в организме пожизненно. ЦМВ не очень заразный. Цитомегаловирус был открыт сравнительно недавно - в 1956 г. Этот вирус еще недостаточно изучен. В научном мире он является предметом дискуссий; в практической медицине нередко становится предметом спекуляций. Попробуем разобраться в том, что такое цитомегаловирус, и чем он опасен.

Заражение цитомегаловирусом

Заражение цитомегаловирусом происходит через сперму, слизистую канала шейки матки, слюну, кровь и грудное молоко. Грудные дети заражаются от своих матерей во время родов или через грудное молоко. Дети заражаются один от другого в детских садиках (обычно через слюну). Взрослые нередко заражаются при половых контактах и поцелуях. Стоит отметить, что этот вирус не очень заразен. Для заражения обычно нужны длительное, тесное общение или многократные контакты.

Симптомы цитомегаловируса

Длительность инкубационного периода составляет от 20 до 60 дней. Острая фаза болезни длится от 2 до 6 недель: повышение температуры тела и появление признаков общей интоксикации, озноб, слабость, головная боль, боли в мышцах, явления бронхита. В ответ на первичное внедрение развивается иммунная перестройка организма. После острой фазы на протяжении многих недель сохраняется астенизация, иногда вегетативно-сосудистые расстройства. Множественное поражение внутренних органов. Наиболее часто ЦМВ-инфекция проявляется как: ОРВИ (острая респираторная вирусная инфекция). В этом случае больные жалуются на слабость, общее недомогание, быструю утомляемость, головные боли, насморк, воспаление и увеличение слюнных желез с обильным отделением слюны и белыми болячками на деснах и языке.

Генерализованная форма ЦМВ-инфекции с поражением внутренних (паренхиматозных) органов. Наблюдается воспаление печеночной ткани, надпочечников, селезенки, поджелудочной железы, почек. Это сопровождается частыми «беспричинными» пневмониями, бронхитами, плохо поддаются антибиотикотерапии; отмечается снижение иммунного статуса, уменьшается количество тромбоцитов в периферической крови. Нередки поражения сосудов глаза, стенок кишечника, головного мозга и периферийных нервов. Увеличение околоушных и подчелюстных слюнных желез, воспаление суставов, кожные высыпания. Поражение органов мочеполовой системы у мужчин и женщин проявляется симптомами хронического неспецифического воспаления. Если не установлена вирусная природа имеющейся патологии - заболевания плохо поддаются антибиотикотерапии.

Патология беременности, плода и новорожденного - наиболее серьезные осложнения ЦМВ-инфекции. Максимальный риск развития этой патологии возникает при инфицировании плода во время беременности. Однако, необходимо помнить, что проблемы нередко возникают и у беременных с активацией латентной ЦМВ-инфекции с развитием вирусемии (выход вируса в кровь) с последующим заражением плода.

ЦМВ - одна из наиболее частых причин невынашивания беременности. Внутриутробная ЦМВ-инфекция плода приводит к развитию тяжелых заболеваний и поражению центральной нервной системы (отставание в умственном развитии, глуховатость). В 20-30% случаев ребенок погибает.

Опасность цитомегаловируса

Таким образом, цитомегаловирус представляет опасность лишь в двух случаях:

· у лиц с ослабленным иммунитетом;

· при заражении плода во время беременности, которое происходит при заражении матери во время беременности.

У людей с нормальным иммунитетом цитомегаловирус в подавляющем большинстве случаев протекает бессимптомно, не причиняя никакого вреда.

Диагностика цитомегаловируса

Диагноз ЦМВ-инфекции можно ставить (особенно при малосимптомной, атипичной и скрытой формах герпеса) только на основании выявления вируса в биологических жидкостях организма (кровь, моча, слюна, выделения половых путей) методом ПЛР или при специальном посеве на культуру клеток. ПЛР отвечает на вопрос: вирус обнаружен или нет, но не дает ответа об активности вируса. Посев на культуре клеток не только обнаруживает вирус, но и дает информацию о его активности (агрессивность). Анализ результатов посева на фоне лечения позволяет делать вывод об эффективности проведенной терапии.

Антитела IGM могут свидетельствовать или о первичной инфекции или о заострении хронической инфекции. Антитела IGG - говорят только о том, что человек с вирусом встречался, инфицирование произошло. IGG при герпесвирусных инфекциях сохраняются пожизненно (в отличии, например, от хламидиоза). Есть ситуации, в которых IGG имеют диагностическое значение. Исторически для диагностики ЦМВ использовался непрямой метод - выявление не самого вируса, а антител к нему. Однако это имеет свои трудности. Так при недостаточном антистельном ответе (например, при наличии иммунодефицита) возможно получение ошибочно негативных результатов - отсутствие выработки антител при наличии инфекции. Выявление антител не всегда позволяет диагностировать инфекцию у новорожденных - у них может не быть еще своих антител. Также, в некоторых случаях, повышение титра антител может быть следствием иммуностимулирующей терапии, а не цитомегаловирусной инфекции. Но необходимо отметить, что выявление антител к ЦМВ является основным методом выявления инфицированности (даже при отсутствии активной инфекции). Прямые методы выявления цитомегаловируса способны обнаруживать лишь активную инфекцию (первичное инфицирование или рецидив). К ним относится ПЛР (выявление ДНК вируса) и изоляция в культуре клеток. Эти методы позволяют непосредственно обнаруживать вирус в разных биологических образцах. Однако при этом большое значение имеет правильность выбора объекта для исследования (кровь из вены или пальца у маленьких детей, моча, слюна, соскобы), которое зависит от формы инфекции. В последнее время стало доступным количественное определение цитомегаловируса методом ПЛР. В последнее время стало возможным брать на анализ не только венозную кровь, но и капиллярную кровь из пальца.

«Достаточно лишь капли крови….» С появлением методик выделения ДНК и РНК на основе силикагела, резко сократился объем биологического материала, необходимого для исследования. Теперь, для анализа методом ПЛР достаточно лишь 100-200 микролитров крови (1/10 -1/5 миллилитра). Это позволяет брать на анализ кровь из пальца, а не из вены. Особенно это актуально для педиатрической практики, так как взятие у ребенка крови из вены связано с рядом трудностей. Также необходимо отметить, что одноразово взятой крови достаточно для выполнения всего спектра анализов методом ПЛР. При анализе методом ПЛР капиллярной крови используют дополнительный контроль выделения - анализ на наличие гена в-глобина человека. Присутствие гена в-глобина человека свидетельствует об успешном выделении ДНК и РНК Для капиллярной крови нужна отдельная пробирка. Пробирки для венозной и капиллярной крови - разные. Время выполнения анализа может увеличиваться на 1-3 дня.

Учитывая многообразие как форм цитомегаловирусной инфекции, так и методов диагностики, грамотная диагностика заболевания должна основываться на совокупности разных методов исследований с обязательным учетом клинических признаков.

Трактовка результатов ИФА

Интерпретация результатов требует знаний о клиническом и эпидемиологическом анамнезе пациента. Группа риска среди беременных - это женщины с негативным результатом IGG в ИФА, что свидетельствует об отсутствии иммунитета к ЦМВ. Такие женщины должны наблюдаться каждые 3 месяца на протяжении беременности, чтобы не пропустить первичное заражение ЦМВ. Как и в диагностике герпетичной инфекции, антитела IGG, обнаруженные одноразово, являются свидетельством иммунитета к вирусу ЦМВ, оказываются практически в 90-100% случаев и при отсутствии IGM не является показателем заболевания. Диагностически значимым результатом для постановки диагноза ЦМВ-инфекции может служить только 4-разовое нарастание титра антител IGG в парных сыворотках, взятых в интервале 1,5-2 недели. Больше всего диагностическое значение имеет выявление в крови пациента специфических IGM как показателя активного процесса: - у новорожденных (так как IGM не проходят через плаценту и являются собственными антителами ребенка), при остром заболевании (первичная инфекция), при рецидиве или реактивации. Во всех случаях трактовки результатов ИФА на антитела к ЦМВ должна сопоставляться с клиническими и эпидемиологическими данными. Если специфические антитела IGG и IGM к структурным антигенам ЦМВ постоянно оказываются в высокой концентрации и по окончании острой стадии инфекции или после проведенного лечения, то это свидетельствует о переходе болезни в латентное состояние. В данном случае необходимо дополнительное определение антител к так называемым «предранним» белкам ЦМВ и определение вирусной ДНК методом ПЛР. При оценке результатов ИФА-igm следует учитывать, что ложнопозитивные результаты может давать ревматоидный фактор класса М, который следует исключить.

Лечение цитомегаловируса

Сразу следует сказать, что ни один из современных методов лечения не позволяет полностью избавиться от этого вируса. При бессимптомном течении инфекции у людей с нормальным иммунитетом в лечении нет необходимости. Поэтому выявление цитомегаловируса или антител к нему у лиц с нормальным иммунитетом нет показанием к лечению. Эффективность иммунотерапии (циклоферон, полиоксидоний и т.д.) не доказана. Применение иммунотерапии при этой инфекции обычно обусловлено не медицинскими, а коммерческими рассуждениями. Лечение цитомегаловируса у лиц с ослабленным иммунитетом сводится к длительному приему противовирусных препаратов (ганцикловир, фоскарнет, цидофовир). При других формах заболевания (мононуклеозообразный синдром, врожденная цитомегаловирусная инфекция) эффективность противовирусных препаратов не доказана.

Профилактика цитомегаловируса

Презервативы снижают риск заражения при половых контактах. Профилактика врожденного цитомегаловируса сводится к отказу от случайных половых связей во время беременности.

вирус микроб лекарственный провизор

ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ №30

1. Вакцины. Определение. Классификация. Требования, предъявляемые к вакцинам. Живые вакцины

Вакцина - медицинский препарат, предназначенный для создания иммунитета к инфекционным болезням.

Классификации вакцин:

Живые вакцины - препараты, действующим началом в которых являются ослабленные тем или иным способом, потерявшие свою вирулентность, но сохранившие специфическую антигенность штаммы патогенных бактерий. Примером таких вакцин являются БЦЖ и вакцина против натуральной оспы человека, в качестве которой используется непатогенный для человека вирус оспы коров.

Инактивированные (убитые) вакцины - препараты, в качестве действующего начала включающие убитые химическим или физическим способом культуры патогенных вирусов или бактерий, (клеточные, вирионные) или же извлечённые из патогенных микробов комплексы антигенов, содержащие в своём составе проективные антигены (субклеточные, субвирионные вакцины). В препараты иногда добавляют консерванты и адъюванты.

Молекулярные вакцины - в них антиген находится в молекулярной форме или даже в виде фрагментов его молекул, определяющих специфичность т.е. в виде эпитопов, детерминант.

Корпускулярные вакцины - содержащие в своем составе протективный антиген

Анатоксины относятся к числу наиболее эффективных препаратов. Принцип получения - токсин соответствующей бактерии в молекулярном виде превращают в нетоксичную, но сохранившую свою антигенную специфичность форму путем воздействия 0.4% формальдегида при 37t в течение 3-4 недель, далее анатоксин концентрируют, очищают, добавляют адъюванты.

Синтетические вакцины. Молекулы эпитопов сами по себе не обладают высокой иммуногенностью для повышения их антигенных свойств эти молекулы сшиваются с полимерным крупномолекулярным безвредным веществом, иногда добавляют адъюванты.

Ассоциированные вакцины - препараты, включающие несколько разнородных антигенов.

Требования, предъявляемые к современным вакцинам:

Иммуногенность;

Низкая реактогенность (аллергенность);

Не должны обладать тератогенностью, онкогенностью;

Штаммы, из которых приготовлена вакцина, должны быть генетически стабильны;

Длительный срок хранения;

Технологичность производства;

Простота и доступность в применении.

Живые вакцины. Получение, применение, достоинства и недостатки.

Живые вакцины - препараты, действующим началом в которых являются ослабленные тем или иным способом, потерявшие свою вирулентность, но сохранившие специфическую антигенность штаммы патогенных бактерий. Аттенуация (ослабление) возможна путём воздействия на штамм химических (мутагены) и физических (температура) факторов или посредством длительных пассажей через невосприимчивый организм. Так же в качестве живых вакцин используются дивергентные штаммы (непатогенные для человека), имеющие общие протективные антигены с патогенными для человека микробами. Примером такой вакцины является БЦЖ и вакцина против натуральной оспы.

Возможно получение живых вакцин генно-инженерным способом. Принцип получения таких вакцин сводится к созданию непатогенных для человека рекомбинантных штаммов, несущих протективные антигены патогенных микробов и способных при введении в орг. человека размножаться и создавать иммунитет. Такие вакцины называют векторными. Вне зависимости от того, какие штаммы включены в вакцины, бактерии получают путём выращивания на искусственных питательных средах, культурах клеток или куриных эмбрионах. В живую вакцину, как правило, добавляют стабилизатор, после чего подвергают лиофильному высушиванию. В связи с тем, что живые вакцины способны вызывать вакцинную инфекцию (живые аттенуированные микробы размножаются в организме, вызывая воспалительный процесс проходящий без клинических проявлений), они всегда вызывают перестройку иммунобиологического статуса организма и образование специфических антител. Это так же может являться недостатком, т.к. живые вакцины чаще вызывают аллергические реакции.

Вакцины данного типа, как правило, вводятся однократно.

Примеры: сибиреязвенная вакцина, чумная вакцина, бруцеллёзная вакцина, БЦЖ вакцина, оспенная дермальная вакцина.

2. Возбудитель сыпного тифа. Характеристика. Лабораторная диагностика. Болезнь Брилля

Эпидемический сыпной тиф - острый антропоноз с трансмиссивным механизмом распространения платяными вшами. Клинически характеризуется лихорадкой, тяжелым течением в связи с поражением кровеносных капилляров с нарушением кровоснабжения жизненно важных органов (мозг, сердце, почки), появлением сыпи.

Таксономия и общая характеристика: Возбудитель - R. prowazekii, род Rickettsia семейство Rickettsiaceae; паразитирует только в цитоплазме чувствительных клеток. Хорошо культивируется в организме платяных вшей, желточных мешках, обладает гемолитическими свойствами, способен формировать негативные колонии («бляшки») в культуре клеток; при окраске по Здродовскому окрашивается в красный цвет. Устойчив к действию факторов внешней среды; длительно сохраняется в высохших фекалиях инфицированных вшей.

Эпидемиология и механизм заражения. Заражение реализуется либо втиранием фекалий инфицированных вшей через расчесы кожи, либо путем вдыхания пылевидного аэрозоля из высохших инфицированных риккетсиями фекалий.

Диагностика: осуществляется по клинико-эпидемиологическим данным, подкрепляется лабораторным исследованием на специфические антитела (РСК, РНГА, ИФА и др.).

Профилактика. Изоляция завшивленных больных, дезинфекция препаратами, содержащими перметрин. Для специфической профилактики разработана живая вакцина из штамма Е, которая применяется в комбинации с растворимым антигеном риккетсии Провачека (живая комбинированная сыпнотифозная вакцина из штамма), а также инактивированная вакцина из растворимого антигена.

Болезнь Бриля - рецидив после ранее перенесенного эпидемического сыпного тифа.

Возбудитель - R. prowazekii.

Клинически протекает как эпидемический тиф легкой и средней тяжести.

Патоморфология инфекционного процесса та же, что и при эпидемической форме. Различие заключается в эпидемиологии (нет переносчика, отсутствует сезонность проявления, источник и реализация способа заражения) и патогенезе начальной стадии болезни. Она возникает вследствие активации латентно «дремлющих» риккетсий.

Микробиологическая диагностика. Затруднена неопределенностью симптоматики на первой неделе заболевания (до появления сыпи) и ее сходством с симптомами при инфекциях, чаще брюшнотифозной. Диагноз устанавливается на основании клинико-эпидемиологических данных с учетом анамнеза больного и подкрепляется серологическим исследованием со специфическим антигеном. При отсутствии переносчика в очаге лечение может осуществляться без изоляции больного, в зависимости от его состояния. Прогноз благоприятен даже в отсутствии лечения антибиотиками.

Профилактика Меры профилактики те же, что и при эпидемической форме. Специфическая профилактика невозможна.

3. Кишечные вирусные инфекции. Характеристика. Методы лабораторной диагностики

Лабораторная диагностика кишечных инфекций включает комплекс исследований, направленных на выявление возбудителя и его чувствительности к антибактериальным препаратам. Тесты позволяют уточнить диагноз и подобрать оптимальный вариант лечения для более быстрого выздоровления.

Кишечные инфекции - одно из самых распространенных в мире заболеваний. В качестве инфекционных агентов обычно выступают бактерии. Наиболее восприимчивы к патогенам дети и люди преклонного возраста - у них снижена естественная защита организма.

Инкубационный период обычно составляет от 6-ти часов до двух суток, иногда дольше. Для острых кишечных инфекций характерна следующая симптоматика:

· подъем температуры до субфебрильных цифр и выше,

· слабость, головокружение, ломота в теле,

· тошнота и рвота,

· боли в области живота,

· частый стул - сначала кашицеобразный, потом жидкий,

· болезненная дефекация.

Если вовремя не принять меры, возможно развитие серьезных осложнений - обезвоживания, инфекционно-токсического шока, пневмонии, острой почечной недостаточности. Избежать последствий при кишечных инфекция поможет своевременная лабораторная диагностика. Она включает несколько методов:

· копрологический - позволяет установить локализацию патологического процесса в ЖКТ;

· вирусологический - применяется при подозрении на вирусное поражение, предполагает использование ИФА;

· бактериологический - дает возможность точной постановки диагноза, включает анализ крови, мочи, рвотных масс и испражнений;

· серологический - для обнаружения специфических антител в крови.

Объем лабораторной диагностики кишечных инфекций в каждом конкретном случае определяет врач.

Размещено на Allbest.ru

...