Молекулярні механізми імунного розпізнавання дифтерійного токсину
Особливості процесу взаємодії токсину з чутливими і нечутливими до токсину клітинами in vitro з використанням рекомбінантних флуоресцентних похідних ДТ, що здатні специфічно зв’язуватися з рецепторами клітин. Нові тести для виявлення циркулюючого ДТ.
| Рубрика | Биология и естествознание |
| Вид | автореферат |
| Язык | украинский |
| Дата добавления | 30.07.2015 |
| Размер файла | 4,1 M |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Получен ряд важных в практическом отношении рекомбинантных белков: субъединицы А и В ДТ, флуоресцентные производные субъединицы В, растворимая форма клеточного рецептора ДТ - гепарин-связывающего EGF-подобного ростового фактора (HB-EGF), функциональный фрагмент белка А золотистого стафилококка (SpA), рекомбинантные одноцепочечные антитела против ДТ. Тот факт, что антигенные свойства рекомбинантных субъединиц ДТ и фрагментов природного токсина аналогичны, обосновывает возможность использования рекомбинантных субъединиц в качестве антигенов для дифференциальной оценки уровня антител в иммунохроматографическом и иммуноферментном анализе, а также в качестве иммуногенов для получения антитоксических антител. Способность рекомбинантной субъединицы В формировать протективный антитоксический иммунитет может быть использована для получения токсин-нейтрализующих антител, в частности, при производстве противодифтерийной антитоксической сыворотки.
Показана принципиальная возможность использования флуоресцентных зондов, полученных на основе рекомбинантной субъединицы В ДТ, для оценки экспрессии рецепторов HB-EGF на клетках, а также для исследования особенностей взаимодействия ДТ с рецептором и внутриклеточного трафика этого комплекса. Разработан новый метод для определения токсин-нейтрализующих антител в сыворотке крови, который заключается в ингибировании связывания флуоресцентного производного субъединицы В ДТ с чувствительными к ДТ клетками in vitro.
Разработанные методики для выявления ДТ и антитоксических антител в сыворотках крови людей, а также для дифференциальной оценки уровня антител к разным субъединицам ДТ могут быть применены для создания соответствующих диагностических тест-систем. Предложенные иммуноферментные тест-системы и тест-системы в формате быстрого теста для выявления антител против отдельных субъединиц ДТ могут быть также использованы для исследования напряженности популяционного иммунитета к дифтерии среди здорового населения.
Таким образом, поднятая в диссертационной работе научная проблема выяснения молекулярных механизмов иммунного распознавания ДТ была решена благодаря использованию рекомбинантных производных и аналогов ДТ для исследования особенностей иммунного ответа и рецепции токсина клетками. В практическом аспекте это позволило разработать новые методы для дифференциальной оценки иммунного ответа при дифтерии и предложить новые подходы к усовершенствованию диагностики заболевания.
Ключевые слова: дифтерийный токсин, иммунное распознавание, молекулярные механизмы, рекомбинантные антигены и антитела.
SUMMARY
Kolybo D.V. The molecular mechanisms of diphtheria toxin immune recognition. - Manuscript.
Thesis for the degree of Doctor of Sciences in Biology by specialty 03.00.03 - Molecular Biology. - Institute of Molecular Biology and Genetics, National Academy of Sciences of Ukraine, Kyiv, 2011.
The work is devoted to delineating the role of molecular mechanisms of diphtheria toxin (DT) immune recognition, determined by the DT biological properties. This is important for the development of new tools for diphtheria diagnosis.
Recombinant derivatives of DT functional fragments were used to analyze the mechanisms of DT immune recognition as well as DT-specific immune response. It was shown that differences in the sensitivity to DT of mouse and monkey cells could be due not only to different toxin binding affinity to the cell receptors, but also to the processes that take place after toxin penetration into the cell. The role of DT in suppressing of DT-specific immune response was shown. The immunosuppressive effect of DT was also proved by mathematical model, which described different forms of the disease course flow close to reality. Immunoenzyme tests as well as rapid tests for the detection of DT and DT subunit-specific antibodies were developed in the course of the work, which could be used to improve the diphtheria diagnostics.
Keywords: diphtheria toxin, immune recognition, molecular mechanisms, recombinant antigens and antibodies.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Уявлення про клітину. Загальний план її будови. Основний білок мікрофіламентів. Швидкість росту мікрофіламентів при різних концентраціях вільного актину. Рух клітин і адгезійна взаємодія. Схема будови центріолі. Прогрес в розумінні механізму руху клітин.
реферат [3,4 M], добавлен 19.12.2014Сутність та завдання генної інженерії. Використання ферментів рестрикції у методі рекомбінантних ДНК. Механізми клонування генів і трансформації еукаріот. Методи гібридизації соматичних клітин. Структура та функції гена. Протиріччя критеріїв алелізму.
презентация [3,1 M], добавлен 04.10.2013Цитопатичні зміни інфікованих вірусом клітин. Неспецифічні ушкождення, причини цитопатичного ефекту і подальшої загибелі клітин. Характеристика та особливості цитолітичного ефекту. Виявлення біохімічних і цитохімічних змін при вірусних інфекціях.
презентация [694,3 K], добавлен 27.05.2019Будова і рівні регуляції репродуктивної системи ссавців. Доімплантаційний розвиток та роль стероїдних гормонів в імплантаційних процесах. Фізіологічні та молекулярні механізми імплантації. Роль білкових ростових факторів у становленні вагітності.
реферат [48,8 K], добавлен 09.02.2011Компоненти якірних контактів еритроцитів. Представники інтегринової родини. Адгезивні компоненти системи білка Rac-1. Рецепторно-опосередкована взаємодія типу "ліганд-рецептор". Патологія міжклітинних контактів при гострому еритромієлозі. Білок смуги 3.1.
курсовая работа [4,2 M], добавлен 31.01.2015Основні процеси, за допомогою якого окремі клітини прокаріотів і еукаріотів штучно вирощуються в контрольованих умовах. Здатність перещеплених клітин до нескінченного розмноженню. Культивування клітин поза організмом. Основні види культур клітин.
презентация [1,3 M], добавлен 16.10.2015Фізико-хімічні, біологічні, фармакологічні властивості і застосування металів нанорозмірів. Методи отримання та характеристика наночастинок золота, їх взаємодія з білками, з бактеріальними клітинами; вплив на ферментативну активність пухлинних клітин.
презентация [362,3 K], добавлен 20.09.2013Потенціал дії клітин. Особливості фази швидкої деполяризації, реполяризации, слідових потенціалів. Дослідження впливу входу натрію на внутрішньоклітинну концентрацію. Безперервне та сальтаторне розповсюдження нервового імпульсу. Фіксація потенціалу.
реферат [452,1 K], добавлен 19.06.2010Вивчення механізмів зміни, розмноження та реплікації генетичної інформації. Особливості організації, будови та функції клітин. Забезпечення редуплікації ДНК, синтезу РНК і білка. Характеристика еукаріотів та прокаріотів. Кінцеві продукти обміну речовин.
реферат [1,0 M], добавлен 19.10.2017Основна структурно-функціональна одиниця всіх живих організмів. Основні типи клітин. Будова, розмноження клітин та утворення білка. Колоніальні та багатоклітинні організми. Заміщення відмерлих та пошкоджених тканин організму. Способи поділу клітин.
презентация [5,6 M], добавлен 18.12.2011Особливості та основні способи іммобілізації. Характеристика носіїв іммобілізованих ферментів та клітин мікроорганізмів, сфери їх застосування. Принципи роботи ферментних і клітинних біосенсорів, їх використання для визначення концентрації різних сполук.
реферат [398,4 K], добавлен 02.10.2013Типи клітинної організації. Структурно-функціональна організація еукаріотичної клітини. Вплив антропогенних чинників на довкілля. Будова типових клітин багатоклітинного організму. Ракція клітин на зовнішні впливи. Подразливість та збудливість клітин.
курсовая работа [4,0 M], добавлен 02.12.2012Кросинговер як явище обміну ділянками гомологічних хромосом після кон’югації у профазі-1 мейозу. Аналіз проміжних структур в сумчастих грибів. Основні способи розділення структур Холлідея. Розгляд особливостей молекулярних механізмів кросинговеру.
курсовая работа [1,8 M], добавлен 12.03.2013Стовбурові клітини як прародительки всіх без винятку типів клітин в організмі, знайомство з функціями. Загальна характеристика методу виділення клітин, вирощування органів на поживних середовищах. Аналіз найвідоміших прикладів наукових досягнень.
презентация [871,2 K], добавлен 02.02.2014Структура класичних кадгеринів. Роль Т-кадгерину в регуляції росту кровоносних судин. Молекулярні компоненти, які задіяні в клітинних контактах типу десомосоми. Білки проміжних філаментів. Взаємодія кадгеринів, катенінів і актинових мікрофіламентів.
курсовая работа [45,3 K], добавлен 19.05.2013Сутність і визначення основних понять учення про інфекцію. Інфекційна хвороба як крайній ступінь розвитку патологічного процесу, етапи її розвитку. Характеристика збудників. Класифікація мікроорганізмів за їх впливом на організм, механізми їх передачі.
контрольная работа [149,2 K], добавлен 20.01.2017Біотехнологічні процеси з використанням ферментів. Характеристика грибів Penicillium funiculosum, їх морфолого-культуральні ознаки, біохімічні властивості. Синтез вортманніну, що може бути використаний як протипухлинний засіб. Методи рекомбінантних ДНК.
курсовая работа [607,3 K], добавлен 22.03.2015Характеристика компонентів адгезивної міжклітинної комунікації олігодендроцитів та нейронів. Класифікація неоплазій, що виникають у головному мозку ссавців. Патологія міжклітинних контактів гліоцитів і нейронів при дисембріогенетичних новоутвореннях.
курсовая работа [2,3 M], добавлен 31.01.2015Коннекторный и рестриктазно-лигазный методы конструирования рекомбинантных молекул ДНК in vitro, их применение в генной инженерии. Реакция лигирования; рестриктазные операции. Использование метода амплификации сегментов ДНК в полимеразной цепной реакции.
презентация [985,3 K], добавлен 17.08.2015Структура дезоксирибонуклеїнової та рібонуклеїнової кислоти. Здатність молекул ДНК самовідтворюватися. Хромосоми еукаріот. Мітоз - основний спосіб розмноження еукаріотичних клітин. Стадії мейотичного ділення. Роль ядра в спадковості, генетичний код.
реферат [1,9 M], добавлен 02.06.2011
