74

Размещено на http://www.allbest.ru/

74

Разработка и усовершенствование технологий получения микробиологических питательных основ и сред

03.00.07 - микробиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

Султанов Заман Зубаирович

Махачкала - 2008

Работа выполнена в ФГУП "НПО "Микроген" МЗ и СР РФ НПО "Питательные среды"

Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор

Меджидов Магомед Меджидович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Лариса Петровна Блинкова

доктор медицинских наук, профессор

Виктор Михайлович Бондаренко

доктор медицинских наук, профессор

Станислав Степанович Афанасьев

Ведущая организация: ФГУН ГосНИИ стандартизации и контроля медицинских и биологических препаратов им. Л.А. Тарасевича Роспотребнадзора

Защита диссертации состоится "25" сентября в 12⁰⁰ часов на заседании диссертационного совета Д 001.035.01 при ГУ НИИ вакцин и сывороток им.И. И. Мечникова РАМН по адресу: 105064, Москва, Малый Казенный переулок, д.5а.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ НИИ вакцин и сывороток им.И. И. Мечникова РАМН

Автореферат разослан "____"__________________

Ученый секретарь

диссертационного совета

кандидат биологических наук И.В. Яковлева

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. Задачи, стоящие перед отечественным здравоохранением по снижению уровня инфекционных болезней, тесно связаны с их бактериологической диагностикой, которая в значительной степени зависит от качества и ассортимента питательных сред.

Однако научные и практические учреждения нашей страны все еще недостаточно обеспечены стандартными питательными средами и поэтому вынуждены использовать среды лабораторного приготовления, которые получают с применением низкокачественных компонентов и не всегда проверяют с эталонными тест-штаммами, т.е. их применение происходит без необходимого контроля. Нестандартность питательных сред, приготовляемых в условиях лабораторий, отрицательно влияет на результаты диагностики инфекций. За рубежом используют только коммерческие питательные среды, имеющие соответствующие сертификаты качества (А.Г. Бойцов, О.Н. Ластова, А.А. Порин, 2000; National Committee for Clinical Laboratory Standards, 1990).

Одним из факторов, определяющих качество питательных сред, является наличие в их составе стандартных белковых основ. Питательными субстратами большинства сред служат белковые гидролизаты различного происхождения. При этом в качестве белкового сырья используют чаще всего мясо, рыбу, рыбную муку и казеин.

Основным белковым сырьем в промышленном производстве питательных сред в НПО "Питательные среды" является каспийская килька (М.М. Меджидов, 2003). Однако из-за экологических проблем Каспия ее улов значительно снизился и стал ощущаться дефицит этого сырья. Поэтому необходимы резервные источники сырья, позволяющие осуществить замену кильки на другие источники сырья без изменения конечных характеристик получаемых препаратов и условий на всех стадиях технологического процесса.

Одним из наиболее используемых компонентов питательных сред является ферментативный пептон. Промышленный выпуск сухого пептона в РФ был прекращен и в незначительных объемах начинает возрождаться. Пептоны производства Семипалатинского и Винницкого мясокомбинатов не отличаются стабильностью, что вызывает необходимость закупки дорогостоящих пептонов фирм, использующих в качестве сырья мясо высшей категории (В.И. Артюхин, А.П. Шепелин, Н.В. Киселева, 1990). В этой связи разработка технологии получения отечественного пептона, не уступающего по качеству зарубежным аналогам с использованием более дешевого сырья, является актуальной задачей.

За рубежом в составе коммерческих питательных сред для культивирования и выделения микроорганизмов широко используются гидролизаты сои (Culture Media Manual, bioMerieux, 1994; Microbiology Manual "Merck", 1990). В нашей стране до недавнего времени среды на основе сои не выпускались, что, прежде всего, связано с отсутствием разработок отечественных технологий получения соевых гидролизатов.

В приготовлении питательных сред в качестве стимулятора роста микроорганизмов широко используют экстракт кормовых дрожжей (ЭКД) (А.К. Баранова, 1978; Б.М. Раскин, 1982). Однако существующие технологии его получения не обеспечивают прозрачность растворов (Н.А. Ковчик, И.И. Литвиненко, 1980). Данный показатель является важным, особенно при использовании ЭКД в составе жидких сред, т.к. о наличии роста микроорганизмов судят по помутнению среды. Кроме того, водные растворы ЭКД, представляющие собой полидисперсную коллоидную систему, быстро забивают поры фильтрующего материала и скорость фильтрации резко падает. Отсюда вытекает необходимость совершенствования технологии получения ЭКД на этапе фильтрации и повышения степени прозрачности растворов препарата.

Известно, что выделение чистых культур микроорганизмов значительно осложняется, если в микробной ассоциации присутствует протей, способный к роению. Для подавления роения протеев обычно используют различные химические вещества. Однако данные вещества, препятствуя роению протеев, могут ингибировать и рост выделяемых микроорганизмов. Вместе с тем, роение протеев может быть устранено на средах, содержащих питательную основу с минимальным содержанием минеральных веществ - электролит-дефицитную (G. H. Sandus, 1960). В РФ питательные среды на электролит-дефицитной основе не выпускались, что было связано с отсутствием технологии ее получения.

В мировой практике при бактериологическом анализе мочи, помимо неселективной среды - электролит-дефицитной, используют также селективную среду и среду для определения антибактериальных субстанций в моче (Culture Media bioMerieux, 1994). Данный комплекс питательных сред позволяет осуществить быструю идентификацию возбудителей уроинфекций и оценить эффективность антимикробной терапии. Аналогичные питательные среды в РФ отсутствуют.

В последние годы в ряде стран отмечают вспышки эшерихиоза, вызванного высокопатогенными для человека E. coli O157: H7, продуцирующими шигаподобный токсин (Ю.А. Ратинер, В.М. Бондаренко, A. Siitonen, 1998; Griffin P. M., Ciclak P. R., 1994). В связи с высокой патогенностью и глобальным распространением данной инфекции задача совершенствования способов индикации E. coli O157: H7 весьма актуальна. При этом особое внимание следует уделить исследованиям, направленным на разработку селективных сред, способствующих получению чистой культуры.

Ввиду неуклонного роста численности больных и высокой летальности при инфекционных заболеваниях бактериемия и сепсис являются одной из актуальных проблем современной медицины (В.Б. Белобородов, 1998; В.А. Руднов, 2000; В.С. Савельев, Б.Р. Гельфанд, 2006).

В диагностике бактериемии и сепсиса особое значение имеют микробиологические исследования крови, которые являются обязательным компонентом даже при подозрении на сепсис. Вместе с тем, ряд исследователей отмечают низкий процент высеваемости гемокультур при использовании сред лабораторного приготовления (В.Д. Бадиков, Л.Е. Журавлева, В.Н. Болехан, 1998; П.В. Кулагин, Р.П. Савченко, В.С. Иванова, 2001). В связи с этим, разработка коммерческих готовых к употреблению сред для выделения гемокультуры является актуальной задачей.

В последние десятилетия особое внимание клиницистов обращено на роль условно патогенных микроорганизмов в полиорганной патологии человека, требующих значительного увеличения ассортимента селективных питательных сред (В.М. Бондаренко, 2007). Возросли случаи пищевых отравлений, вызываемых Bacillus cereus (Д. Диксон, 1983; Ф.С. Флуер, 2007; Kramer J. M., Gilbert R. J., 1989). При выделении B. cereus из клинического материала и контаминированных пищевых продуктов возникают трудности, связанные с наличием в образцах разнообразных микробов-ассоциантов (Р.С. Джалилова, 1987). Поэтому для выделения B. cereus из материалов, содержащих смешанную микрофлору, требуются высокоселективные среды.

Приведенные данные свидетельствуют о необходимости изыскания новых источников сырья, разработок новых питательных основ и сред, и в первую очередь, таких, как ферментативный пептон, электролит-дефицитная питательная основа, соевый гидролизат, среды для выделения возбудителей при токсико-септическом состоянии, уроинфекции, селекции различных видов энтеробактерий и бацилл.

Цель работы. Экспериментальное обоснование разработки и усовершенствования технологий получения микробиологических питательных основ и сред.

Задачи исследования:

1. В результате исследований выявить альтернативные источники белкового сырья для производства питательных сред.

2. Экспериментально обосновать и разработать промышленную технологию получения ферментативного пептона из рыбного сырья, изучить физико-химические и биологические свойства препарата.

3. Создать промышленную технологию получения электролит-дефицитной питательной основы, с использованием которой сконструировать питательные среды: для выделения, дифференциации и количественного определения бактерий в моче; для выделения и дифференциации E. coli O157: H7; для выделения и дифференциации энтеробактерий, а также изучить из физико-химические и биологические свойства.

4. Разработать технологию получения ферментативного гидролизата сои, изучить физико-химические и биологические свойства препарата.

5. Изыскать новые технологические решения получения желточной эмульсии, готовой к употреблению, с длительным сроком хранения и экстракта кормовых дрожжей с высокой степенью прозрачности.

6. Экспериментально обосновать состав и разработать сухую селективную среду для бактериологического анализа мочи, а также питательную среду для определения антибактериальных субстанций в моче. Изучить физико-химические и биологические показатели созданных сред.

7. Разработать комплекс питательных сред для накопления, выделения и субкультивирования гемокультур, изучить физико-химические и биологические характеристики сконструированных сред.

8. Разработать новую селективную питательную среду для выделения B. cereus, изучить физико-химические и биологические свойства препарата.

Научная новизна. В экспериментальных исследованиях выявлены альтернативные источники белкового сырья для получения питательных сред, позволяющие полноценно заменить каспийскую кильку на другие источники белкового сырья без изменения конечных характеристик получаемых основ и стадий технологического процесса.

Впервые экспериментально обоснована и разработана технология получения сухого ферментативного пептона из рыбного сырья, который по физико-химическим и биологическим показателям не уступает аналогичным препаратам ведущих зарубежных фирм, но превосходит пептон производства Семипалатинского мясокомбината и фирмы HiMedia.

Разработана технология получения электролит-дефицитной питательной основы из рыбного сырья. Показана способность данной основы подавлять роение протеев и одновременно способствовать росту других патогенных и условно патогенных микроорганизмов.

Разработана технология получения сухой питательной основы из отходов производства мяса криля. Питательный агар, приготовленный на данной основе, полностью соответствовал требованиям Фармакопейной статьи предприятия на питательный агар - ФСП № 42-0504-5807-04.

Изучены закономерности и определены оптимальные технологические параметры процессов получения гидролизата сои. Среды на основе этого гидролизата обладали высокой чувствительностью, способны выявить рост микроорганизмов при минимальной посевной дозе, что указывает на его высокие ростовые свойства.

Усовершенствована технология получения ЭКД, обладающего ростстимулирующей активностью в отношении тест-штаммов ауксотрофных по витаминам группы В, а также полной прозрачностью и высокой фильтруемостью.

Разработана технология получения желточной эмульсии для определения лецитиназной активности микроорганизмов в готовом к употреблению виде с длительным сроком хранения.

Научно обосновано новое направление в разработке отечественных сред на электролит-дефицитной питательной основе. На этом субстрате разработаны новые питательные среды: электролит-дефицитный питательный агар для выделения, дифференциации и количественного определения бактерий в моче, питательная среда для выделения и дифференциации E. coli O157: H7 и электролит-дефицитный агар с эозин-метиленовым синим для выделения и дифференциации энтеробактерий. Экспериментально показаны преимущества электролит-дефицитных сред, которые заключались в способности подавлять роение протеев и одновременно поддерживать рост выделяемых микроорганизмов.

Разработана сухая селективная среда для выделения и предварительной идентификации микроорганизмов в моче. В экспериментах установлено, что созданная среда совместно с неселективной средой при посеве мочи позволяет ускорить идентификацию микроорганизмов.

Разработана новая питательная среда для определения антибактериаль-ных субстанций в моче, обладающая высокой чувствительностью и способностью выявлять в моче низкие концентрации антибактериальных препаратов.

Разработан комплекс питательных сред для накопления, выделения и субкультивирования гемокультур. Показано преимущество разработанных сред по чувствительности и эффективности накопления основных возбудителей гемоинфекций, что способствует выделению гемокультуры при низкой напряженности бактериемии.

Разработана селективная среда для выделения B. cereus в чистой культуре из клинического материала и пищевых продуктов.

Основные положения научной новизны исследований подтверждены 15 патентами и авторскими свидетельствами.

Практическая значимость работы и внедрение результатов в практику. Предложены альтернативные источники рыбного сырья, позволяющие расширить сырьевую базу для производства питательных сред.

В промышленное производство внедрены новые технологии получения белковых основ и питательных сред, повышающие эффективность производства и расширяющие номенклатуру питательных сред.

Новые питательные среды, позволяют улучшить бактериологическую диагностику инфекционных заболеваний.

По результатам выполненных исследований утверждены НД:

белковое сырье питательная основа среда

ФСП 42-0504-3426-04, ПР №58944705-03-06. Питательная среда для выделения и дифференциации E. coli O157: H7 и других энтеробактерий по признаку ферментации сорбита, сухая (ЭДКС-агар);

ФСП 42-0504-3162-04, ПР №58944705-02-06. Питательная среда для выделения, дифференциации и количественного определения бактерий в моче электролит-дефицитная сухая (ЭДПА);

ФСП 42-504-3427-04, ПР №58944705-01-06. Питательная среда для выделения и дифференциации энтеробактерий селективная, сухая (типа Макконки агара);

Промышленный регламент на производство питательного бульона для культивирования микроорганизмов (СПБ) №1681-05;

Регламент производства №148-88 - Питательный агар для культивирования микроорганизмов, сухой;

Регламент производства №1937-00, ФСП 42-3441-97, изменение 1. Экстракт кормовых дрожжей для микробиологических питательных сред, сухой.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Выявлены альтернативные источники белкового сырья для производства питательных сред, позволяющие осуществить замену одних видов сырья другими без изменений конечных характеристик препаратов и условий проведения стадий технологического процесса.

2. Экспериментально обоснована и разработана технология получения сухого ферментативного пептона из рыбного сырья.

3. Разработана сухая электролит-дефицитная питательная основа и научно обоснована целесообразность ее использования в составе сред для выделения, дифференциации и количественного определения бактерий в моче, для выделения и дифференциации различных видов энтеробактерий, включая энтерогеморрагические E. coli O157: H7.

4. Сконструированы сухие питательные среды для бактериологического анализа мочи - селективная среда для выделения и дифференциации энтеробактерий и среда для определения антибактериальных субстанций в моче.

5. Экспериментально обоснованы и разработаны питательные среды для накопления и выделения гемокультур.

6. Создана селективная среда для выделения B. cereus.

Апробация материалов диссертации. Основные результаты проведенных исследований доложены на:

VII съезде - Всесоюзном совещании "Биологически активные вещества гидробионтов - новые лекарственные, лечебно-профилактические и технические препараты". Владивосток. - 1992 г; Всероссийском обществе эпидемиологов, микробиологов и паразитологов.М., - 1997 г; Международной научной конференции "Разработка и производство диагностических питательных сред и микротест-систем", Махачкала, - 1998г; VI-Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство".М., - 1999 г; 3-й Международной научно-практической конференции "Актуальные вопросы разработки и производства диагностических питательных сред и тест-систем; Махачкала, - 2001 г; VIII Съезде Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов.М., - 2002 г; 4-й Международной научно-практической конференции "Разработка и стандартизация микробиологических питательных сред и тест-систем, Махачкала, - 2003 г; Научно-практической конференции "Новые технологии в медицине", Махачкала, - 2003 г; Всероссийской научной конференции посвященной 105-летию Пермского НПО "Биомед", Пермь, - 2003 г; Международном конгрессе "Ликвидация и элиминация инфекционных болезней - прогресс и проблемы", институт им.Л. Пастера Санкт-Петербург, - 2003 г; Всероссийской научной конференции "Актуальные вопросы разработки, производства и применение иммунобиологических и фармацевтических препаратов", Томск, - 2004 г; III Съезде Общества биотехнологов России им. Ю.А. Овчинникова.М., - 2005 г; Всероссийской научно-практической конференции "Вакцинология".М., - 2006г; I Всероссийской конференции: "Питательные среды и методы культивирования клеток для биологии медицины и биоиндустрии: фундаментальные и прикладные аспекты", Пущино, - 2007 г. Диссертация апробирована 05.10.07 г. на конференции в НПО "Питательные среды".

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 47 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 271 странице и состоит из введения, обзора литературы, 7 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы, включающего 205 источников, и приложения. Материалы исследований иллюстрированы 52 таблицами и 8 рисунками.

Содержание работы

Материалы и методы исследования.

В работе использовали следующие материалы: каспийскую кильку, минтай, хек, путассу, ставриду, панцирь криля мороженый, (ТУ 15-04-545-87), а также поджелудочную железу крупного рогатого скота ГОСТ 11285-93, пепсин ТУ 9219-560-00419779-2000, сухую желчь КРС ТУ-4970-85, панкреатин ОСТ 49-167-81, соевую муку СОПРО-УТБ фирмы ВОБЕКС-интерсоя, панкреатический гидролизат казеина РП №816-98, гидролизат казеина средней степени расщепления ФС 42-3528-98, питательный агар ФСП 42-0504-5807-04, питательный бульон ФС 42-0504564, пептоны и питательные среды фирм Difco, Oxoid, Merck, HiMedia, Serva, bioMerieux, экстракт кормовых дрожжей ФС 42-3441-97.

При проведении контроля разрабатываемых питательных сред использовали музейные тест-штаммы, полученные из ГИСК им. Л.А. Тарасевича: S. aureus FDA 209P, S. aureus Wood-46, S. aureus ATCC 25923, S. saprophiticus CCM 883, S. epidermidis ATCC 14990, S. pyogenes Dick 1, S. pyogenes 1521, S. pneumoniae LD, S. viridans 22, С. xerosis 1911, E. faecalis 775, S. enterica Typhi H901, S. enterica Typhimurium 79, S. enterica Paratyphi A525, S. enterica Paratyphi B506, S. flexneri 1a 8516, S. sonnei S-form, P. mirabilis 71/2, P. mirabilis 3177, P. mirabilis 46, P. vulgaris HX19, P. vulgaris 4636, K. pneumoniae 51, K. pneumoniae 4140, E. aerogenes 418, P. aeruginosa 27/99, S. marcescens 1, E. coli 3912/41 (O55: K59), E. coli ATCC 25922, E. coli Ewing (O124K72), E. coli 675, E. coli 168/59 (0111: K58), E. coli O157: H7-№4; 9; 12; 20; 25; 10; 63; 120; 122; 904; 23; 1282; 1330; 214, C. freundii 101/57, E. cloacae A-186, B. abortus 19BA, C. albicans ATCC 885/653, B. cereus 8035, B. cereus 2010, B. cereus 2527, B. subtilis ATCC 6051, B. megaterium 89, B. polymyxa 26, B. mycoides 587, H. influenzae 55, C. perfringens TAB6K28.

Биологический контроль качества экстракта кормовых дрожжей проводили с помощью микроорганизмов ауксотрофных по витаминам группы В: Pichia fermentans Lodder BKM 1375-ауксотроф по витамину В₁, Debaryomyces disporus BKM 1575-ауксотроф по витамину В₆, Saccharomyces cerevisiae BKM 1168-ауксотроф по витамину В₃, Kluyveromyces marxianus BKM 1148-ауксотроф по витамину В₅. Тест-штаммы получены из коллекции непатогенных микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов РАН.

Физико-химические свойства питательных основ и сред оценивали в соответствии с ФС 42-3874-99 и МУК 4.1/4.2.588-96. Содержание пептонов определяли в биуретовой реакции (Л.Я. Телишевская, 2000), углеводов фенольным методом (О.А. Максименко, Л.А. Зюкова, Ф.М. Федорович, 1975), триптофана по Уденфриду (А.Н. Савицкий, В.М. Беликов, М.О. Рожанский, 1967). Аминокислотный состав препаратов изучали на автоматическом анализаторе фирмы "Биотроник" (ФРГ) по стандартной методике.

Биологические свойства разработанных питательных сред и основ проводили согласно "Методическим рекомендациям к контролю питательных сред по биологическим показателям" (М., 1980). Чувствительность среды оценивали по максимальному разведению культуры, при котором на засеянных чашках, пробирках обнаруживали рост микроорганизмов.

Для стандартизации посева определенного количества микробных клеток в жидкую или плотную питательную среду использовали бактериальный стандарт мутности (ОСО 42-28-85-07) ГИСК им. Л.А. Тарасевича на 10 ед.

При этом определяли характер роста культур в жидких средах, рост бактерий с равномерным помутнением среды, придонный рост, поверхностный рост бактерий, а также размер, форму, цвет, рельеф и структуру колоний на плотных средах. Дифференцирующие свойства среды определяли по выраженности изменения цвета колоний или цвета среды под колониями, ореол вокруг них, диаметр последнего. Показатель эффективности (кратность увеличения числа микробных клеток после инкубации посевов) определяли как отношение среднего количества колоний, выросших при высеве из среды обогащения, к среднему количеству колоний, выросших из посевной дозы:

Рэ= (n_t-n_о) ·К

n_о

где Рэ - показатель эффективности;

n_{t -} количество колоний, выросших на плотных средах после высева суспензии из среды обогащения;

n_o - количество жизнеспособных клеток в посевной дозе;

К - степень разведения суспензии.

Споровую культуру тест-штамма B. subtilis 6051 получали согласно ГФ XI СССР М., (1990).

Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам определяли согласно МУК 4.2.1890-04.

Для определения ростстимулирующей активности экстракта кормовых дрожжей к синтетической среде Ридер с сахарозой добавляли 0,3% препарата. Посев ауксотрофных микроорганизмов осуществляли из разведения 10^-5. Учет результатов производили через 48 ч инкубации посевов при 28⁰С путем измерения оптической плотности при длине волны 540 нм. Контролем являлась сахарозо-минеральная среда Ридер без добавления витаминного препарата.

Разработку основных режимов получения питательных основ и сред осуществляли в экспериментально-производственных условиях. Гидролиз сырья проводили в реакторах емкостью 1000 л, высушивание гидролизатов осуществляли на распылительной сушке ОС-20В НСШ-16. Для получения агаровых сред концентрированный гидролизат смешивали с агаром, гранулировали и высушивали в псевдокипящем слое в сушилке СП-100 при 70⁰С в течение 1 ч (А.М. Алиев и др., авт. свид. №638614). Для получения многокомпонентных сред сухие компоненты в определенной последовательности загружали в мельницу-смеситель согласно разработанной рецептуре и перемешивали в течение 1,5-2 ч.

Результаты полученных исследований обрабатывали статистически с использованием параметрических методов статистики, применяя компьютерную программу Stat. Достоверность различий (р) между средними арифметическими (м) определяли с помощью критерия Стьюдента. Достоверным считали результаты при р0,05.

Результаты исследований и их обсуждение.

Разработка технологий получения питательных основ из различных видов белкового сырья

Анализ литературных данных по химическому составу различных видов рыб (И.М. Скурихин, М.Н. Волгарев, 1987) позволил выявить источники рыбного сырья, которые могут служить альтернативой каспийской кильке.

Для подтверждения возможности использования выявленных источников рыбного сырья в производстве питательных основ проведен комплекс исследований по изучению химического состава и биологических свойств панкреатических гидролизатов минтая, хека, путассу и ставриды. При этом в основу получения панкреатических гидролизатов из данных видов рыб положены те же технологические приемы и режимы, что и при получении панкреатического гидролизата кильки.

Химический состав полученных гидролизатов из различных видов рыб представлен в табл.1.

Из данных таб.1 видно, что полученные препараты по содержанию общего, аминного азота, пептонов и по аминокислотному составу отвечают требованиям, предъявляемым к питательным основам и по этим показателям не отличаются от панкреатического гидролизата кильки.

Биологический контроль качества питательных агаров, сред Эндо, Левина на основе панкреатических гидролизатов из различных видов рыб показал, что по чувствительности, форме и размеру колоний, а также по дифференцирующим и селективным свойствам, они не отличались от контрольных сред и полностью соответствовали требованиям ФСП 42-0504-5807-04, ФСП 42-3504-98 и ФСП 42-3576-98.

Таким образом, полученные результаты исследований показали, что испытанные виды рыбного сырья могут служить полноценной заменой каспийской кильки в производстве питательных основ. Данная разработка защищена патентом РФ №2232187.

Таблица 1. Физико-химические свойства сухих панкреатических гидролизатов из различных видов рыб

Показатели, %	Панкреати-ческий гидролизат минтая (М±m)	Панкреати-ческий гидролизат хека (М±m)	Панкреати-ческий гидролизат путассу (М±m)	Панкреати-ческий гидролизат ставриды (М±m)	Панкреати-ческий гидролизат кильки (М±m)
Влажность	5,9±0,4	6,2±0,3	6,2±0,2	5,8±0,2	5,8±0,3
Зола	15,5±1,0	14,4±0,85	13,2±1,2	14,5±1,0	13,5±1,2
Хлориды	9,7±1,2	7,0±1,5	8,0±1,0	9,1±1,3	8,5±1,3
Аминный азот	4,9±0,3	5,0±0,3	4,9±0,4	5,1±0,3	4,9±0,25
Общий азот	12,2±0,7	12,1±0,6	10,2±0,5	11,5±0,6	10,5±0,5
Углеводы	1,2±0,15	1,2±0,18	0,9±0,1	1,1±0,1	1,2±0,12
Пептоны	48±1,5	49,0±1,2	51,0±2,0	50±2,0	48,0±1,8
рН 2-% раствора	7,1±0,2	7,0±0,2	7,0±0,1	7,1±0,2	7,0±0,2
Аминокислоты: Аспарагиновая кислота	1,2±0,25	1,06±0,2	1,3±0,2	1,25±0,3	0,96±0,2
Треонин	1,2±0,1	0,85±0,09	0,6±0,15	0,78±0,08	0,8±0,15
Серин	0,45±0,1	0,35±0,08	0,44±0,1	0,36±0,06	0,5±0,08
Глутаминовая кислота	1,3±0,15	1,3±0,1	1,5±0,15	1,46±0,18	1,3±0,2
Глицин	0,27±0,09	0,25±0,1	0,29±0,1	0,3±0,09	0,55±0,1
Аланин	1,0±0,2	1,3±0,2	0,9±0,2	1,1±0,2	0,6±0,12
Валин	1,6±0,2	1,8±0,2	1,2±0,3	1,5±0,4	1,7±0,3
Метионин	0,9±0,3	1,2±0,2	0,9±0,1	1,1±0,2	0,85±0,1
Изолейцин	1,3±0,25	1,5±0,3	1,2±0,2	1,4±0,3	1,3±0,2
Лейцин	3,5±0,4	3,2±0,4	3,5±0,2	3,8±0,5	3,2±0,4
Тирозин	1,7±0,25	2,0±0,3	1,8±0,25	1,6±0,2	1,5±0,3
Фенилаланин	2,2±0,2	2,6±0,2	2,1±0,15	2,4±0,25	1,8±0,2
Лизин	3,0±0,25	2,7±0,2	2,5±0,3	2,6±0,2	2,5±0,3
Гистидин	0,50±0,1	0,39±0,09	0,35±0,08	0,35±0,09	0,9±0,1
Аргинин	3,0±0,4	3,2±0,35	3,2±0,4	3,3±0,4	2,6±0,3
Триптофан	0,24±0,05	0,37±0,04	0,33±0,08	0,34±0,05	0,35±0,07

Следующий этап работы включал разработку технологии получения сухого ферментативного пептона из рыбного сырья.

На основании экспериментальных данных по оптимизации процесса гидролиза установлено, что для получения пепсинового гидролизата с высоким содержанием пептонов 4,0-5,0% необходима предварительная термическая обработка сырья, инактивирующая содержащиеся в рыбном сырье ферменты типа пептидаз (Р.В. Берзинь-Берзит, П.М. Путера, 1991; Т.Н. Пивненко, Л.М. Эпштейн, 1991; Л.Я. Телишевская, 2000). При этом выявлены оптимальные соотношения компонентов гидролизуемой смеси (субстрат: фермент: вода) равные - 1,0: 0,01: 2,0, определена оптимальная продолжительность процесса гидролиза (18-20 ч), обеспечивающая необходимую степень расщепления белка, оптимизирован процесс очистки пептона, включающий обработку его при различных значениях рН - сначала в кислых условиях при pH-3,8 - 4,2, а затем в основных при pH-7,8-8,2, с последующей термической обработкой при каждом из указанных значений pH и фильтрацией, что гарантировало высокую степень прозрачности пептона и отсутствие осадка после стерилизации. Отработаны оптимальные режимы сушки: 180-200⁰С на входе в сушильную камеру и на выходе 100-110⁰С, обеспечивающие получение продукта с влажностью не более 7,0 %.

В табл.2 представлена сравнительная физико-химическая характеристика разработанного пептона и пептонов различных фирм.

Таблица 2. Сравнительная физико-химическая характеристика разработанного пептона и пептонов различных фирм

Показатели в %	Пептон разработан-ный (M±m)	Bacto Peptone "Difco" (M±m)	Peptone "Oxoid" "Р" (M±m)	Peptone "HiMedia" (M±m)	Пептон Семипала-тинский (M±m)
рН - 2% раствора	6,90,1	7,00,1	7,10,1	6,60,1	6,50,2
Аминный азот	2,560,25	3,00,3	2,80,3	4,50,2	3,50,2
Общий азот	11,90,9	13,01,0	12,01,0	12,01,2	12,01,0
Пептоны	81,03,0	80,92,5	792,5	70,53,0	72,72,6
Триптофан	0,350,04	0,360,04	0,340,03	0,150,02	0,40,05
Углеводы	0,90,1	2,80,2	1,00,16	1,50,15	1,20,12
Индол	отсутствует	отсутствует	отсутствует	отсутствует	отсутствует
Степень расщепления белка	23,01,5	23,01,0	23,31,6	34,82,2	29,02,0

Из данных табл.2 видно, что полученный препарат характеризуется высоким содержанием пептонов (81,03,0%) и неглубокой степенью расщепления белка (23,01,5%), что характерно для пепсиновых гидролизатов (Л.Я. Телишевская, 2000). По количественному показателю пептонов, а также по уровню аминного и общего азота разработанный препарат статистически сопоставим с пептонами фирм "Difco" и "Oxoid". Аминокислотный состав полученного пептона представлен 17 аминокислотами.

Результаты изучения биологических свойств разработанного пептона и некоторых коммерческих препаратов пептонов представлены в табл.3.

Из данных табл.3 видно, что разработанный пептон, присутствующий в питательном бульоне, по чувствительности не уступает пептонам фирм "Difco", "Oxoid" и превосходит пептон Семипалатинский и "HiМedia".

Полученный пептон обеспечивал в бульоне четкое образование индола тест-штаммом S. flexneri 1a 8516 и сероводорода штаммами S. typhi H901 и P. vulgaris HХ19. Наиболее слабое образование индола отмечено в бульоне с пептоном "HiМedia", что объясняется низким содержанием в нем триптофана (0,150,02%).

Таблица 3. Сравнительная характеристика роста тест-штаммов в питательных бульонах, приготовленных на основе различных пептонов

Тест-штаммы	Чувствительность бульонов с различными пептонами
	Пептон разработан-ный	Peptone "Oxoid"	Пептон Семипала- тинский	Peptone "HiMedia"	Peptone "Difco"
S. pyogenes Dick 1	10-4	10-4	10-3	10-3	10-4
S. aureus Wood-46	10-6	10-6	10-5	10-5	10-6
E. faecalis 775	10-6	10-6	10-5	10-5	10-5
S. epidermidis 14990	10-6	10-6	10-5	10-5	10-6
S. entericaTyphi H901	10-7	10-7	10-6	10-6	10-7
S. flexneri 1a 8516	10-6	10-6	10-5	10-5	10-6
P. aeruginosa 27/99	10-7	10-7	10-6	10-6	10-7
S. sonnei S-form	10-6	10-6	10-6	10-6	10-6
E. coli 3912/41 (O55: K59)	10-7	10-7	10-6	10-6	10-7
C. xerosis 1911	10-6	10-6	10-5	10-5	10-6

При сравнительном изучении показателей эффективности различных пептонов в отношении тест-штаммов E. coli 3912/41, S. flexneri 1a 8516, S. enterica Typhi H901, E. faecalis 775, S. aureus 209P, S. epidermidis 1499 выявлено, что разработанный пептон превосходил пептон Семипалатинский и HiMedia в 1,8-2,0 раза в зависимости от вида микроорганизмов и не уступал пептонам фирм "Oxoid" и "Difco".

Таким образом, комплекс проведенных исследований показал, что разработанный пептон может быть использован для выращивания микроорганизмов различных таксономических групп. На разработанный пептон составлена нормативная документация (НД) - регламент производства (РП) и фармакопейная статья предприятия (ФСП). Разработка защищена патентом РФ №2235770.

Существующие технологии получения питательных основ в виду использования в технологическом процессе кислот и щелочей предопределяют наличие в них солей. Поэтому для получения электролит-дефицитных питательных сред в первую очередь необходимо было разработать питательную основу с минимальным содержанием солей.

Указанная цель достигнута путем модификации существующей технологии обработки рыбного сырья (Промышленный регламент №1681-05 на производство питательного бульона), при которой из технологического процесса исключались вещества, способствующие минерализации основы, в частности соляной кислоты на стадии подкисления и первой фильтрации, а также замене едкого натрия на водный раствор аммиака на стадии подщелачивания и второй фильтрации.

Модифицированная технология включала следующие основные операции: гидролиз рыбного сырья при гидромодуле 1: 2 с помощью поджелудочной железы или панкреатина в течение 5,0-6,0 ч до содержания аминного азота 0,5-0,6%; кипячение смеси в течение 15-20 мин и фильтрацию; подщелачивание фильтрата водным раствором аммиака до рН - 8,2-8,4; кипячение гидролизата в течение 15-20 мин и фильтрацию; концентрирование гидролизата до 12-15% сухих веществ; высушивание концентрированного гидролизата на распылительной сушилке при температуре на входе 180-200⁰С, на выходе 100-110⁰С.

Полученная по модифицированной технологии сухая питательная основа содержала 5,4±0,2% аминного азота, 9,5±0,46% общего азота, 52,0±4,0% пептонов, 1,0±0,1% минеральных веществ, рН 2% раствора 7,1±0,1. Аминнокислотный состав был представлен 17 аминокислотами (в %): аспарагиновая кислота - 0,86±0,07, треонин - 0,8±0,08, серин - 0,7±0,06, глутаминовая кислота - 1,05±0,15, глицин - 0,7±0,04, аланин - 0,45±0,02, цистин-следы, валин - 1,4±0,08, метионин - 0,8±0,06, изолейцин - 1,2±0,08, лейцин - 2,8±0,4, тирозин - 1,6±0,08, фенилаланин - 1,75±0,2, лизин - 2,5±0,2, гистидин - 1,0±0,15, аргинин - 2,2±0,3, триптофан - 0,35±0,05.

В целом, по химическому составу полученная основа равноценна классическим ферментативным основам (Л.Я. Телишевская, 2000).

Однако низкое содержание минеральных веществ (1,0±0,1%) позволило нам рассматривать ее как электролит-дефицитную, что было подтверждено в биологических опытах при посеве тест-штаммов роящихся форм протеев (табл.4).

Из данных табл.4 видно, что на разработанной основе тест-штаммы P. vulgaris HX19 и 4636, P. mirabilis 71/2, 3177 и 46 росли в виде отдельных колоний в О-форме (отсутствие роения), в то время как на питательном агаре они образовали сплошной вуалеобразный налет (роение, Н-форма). Подавляя роение протеев, полученная основа одновременно способствовала росту других патогенных и условно патогенных бактерий E. coli 3912/41 (055: К59), S. aureus FDA 209-Р, S. enterica Typhi Н901, S. sonnei S form, E. faecalis 775, S. epidermidis 14990, P. aeruginosa 27/99, S. flexneri 1а 8516, не уступая по количеству и размеру выросших колоний питательному агару.

Уникальная способность данной основы подавлять роение протеев и поддерживать при этом рост широкого круга микроорганизмов позволили в последующих исследованиях использовать ее при разработке новых электролит-дефицитных питательных сред.

При переработке морепродуктов образуется большое количество отходов, представляющих серьезную экологическую и экономическую проблему. Одним из направлений утилизации отходов рыбной промышленности является использование их в качестве сырья для производства питательных сред.

Таблица 4. Рост тест-штаммов из разведени1 10^-6на электролит-дефицитной основе и питательном агаре

Тест-штаммы	Рост тест-штаммов на электролит-дефицитной основе (М±m)	Рост тест-штаммов на питательном агаре Контроль (М±m)
	КОЕ	Форма и размер (d) колоний	КОЕ	Форма и размер (d) колоний
P. vulgaris HX19	42,0±3,0	О 1,0±0,2	сплошной вуалеобразный налет	Н (роение)
P. vulgaris 4636	39,0±4,0	1,1±0,15	сплошной вуалеобразный налет	Н
P. mirabilis 71/2	46,0±5,0	О 1,2±0,3	сплошной вуалеобразный налет	Н
P. mirabilis 46	38,0±3,0	О 2,1±0,2	сплошной вуалеобразный налет	H
P. mirabilis 3177	44,0±5,0	О 1,8±0,15	сплошной вуалеобразный налет	Н
E. coli 3912/41 (O55: K59)	41,0±3,0	S 2,2±0,25	40,0±3,0	S 2,3±0,2
S. aureus FDA 209Р	36,0±3,0	S 2,1±0,2	35,0±3,0	S 2,2±0,2
S. flexneri 1a8516	32,0±4,0	S 1,4±0,2	33,0±3,0	S 1,3±0,15
S. enterica Ttyphi H901	39,0±5,0	S 1,6±0,25	40,0±5,0	S 1,7±0,2
S. sonnei S form	45,0±5,0	S 1,9±0,2	42,0±5,0	S 2,0±0,2
E. faecalis 775	32,0±4,0	S 2,2±0,15	30,0±3,0	S 2,3±0,18
S. epidermidis ATCC 14990	38,0±5,0	S 2,0±0,2	40,0±5,0	S 2,0±0,2
P. aeruginosa 27/99	32,0±4,0	S 1,8±0,2	30,0±4,0	S 1,9±0,2
K. pneumoniae 4140	35,0±3,0	2,0±0,2	37,0±4,0	2,1±0,2

Нами проведены исследования по изучению возможности использования в производстве питательных сред отходов, образующихся при производстве мяса криля. При исследовании процесса ферментативного гидролиза отходов мяса криля с помощью поджелудочной железы и панкреатина установлены оптимальные соотношения сырья: фермент: вода - 1,0: 0,1: 3,0, обеспечивающие через 4,0-5,0 ч гидролиза содержание общего азота 0,9-1,0 %, аминного азота - 0,26-0,32 %, что соответствовало степени расщепления белка 29,0-32,0 %.

Однако при испытании полученного гидролизата в составе питательного бульона и питательного агара, отмечено отсутствие роста контрольных тест-штаммов S. flexneri 1а 8516, S. enterica Typhi Н901, S. pyogenes Dick 1.

Высказано предположение, что ингибирующий эффект гидролизата связан с присутствием в нем ионов кальция, которые образуются в результате взаимодействия соляной кислоты, используемой при подкислении гидролизата, с углекислым кальцием из панциря криля. Анализ гидролизата на наличие ионов кальция подтвердил данное предположение. Содержание ионов кальция в гидролизате составляло довольно высокую величину - 1,20,2 % в сравнении с рыбным аналогом - 0,10,015 %.

Для очистки гидролизата использовали способность ионов кальция образовывать с фосфат - ионами нерастворимые соединения в виде фосфатов кальция. При этом оттитрована доза фосфорнокислого натрия (0,45 кг на 100 л гидролизата), а также значения рН гидролизата (7,8-8,2), температура (100⁰С) и время термической обработки (10 мин), обеспечивающие полное осаждение ионов кальция. Дальнейшая обработка гидролизата включала известные технологические приемы получения сухих питательных основ. Полученный сухой гидролизат по содержанию общего азота - 10,20,5%, аминного азота - 4,00,4%, пептонов - 52,02,0%, углеводов - 0,90,2% и по аминокислотному составу (16 аминокислот) отвечал основным требованиям, предъявляемым к питательным основам, что подтверждено результатами биологического контроля питательного агара на основе гидролизатов из отходов переработки мяса криля (табл.5).

Из данных табл.5 видно, что питательный агар на основе панкреатического гидролизата отходов переработки мяса криля полностью соответствовал требованиям ФСП на препарат. Разработка защищена авторским свидетельством №1587678 и внедрена в производство.

Задачей следующего этапа исследований явилась разработка промышленной технологии получения гидролизата сои.

В сое содержится пять и более ингибиторов протеаз (В.Б. Толстогузов, 1987).

Для инактивации ингибиторов протеаз применяли термическую денатурацию. Установлено, что обработка суспензии соевой муки при 70-80⁰С в течение 20-30 минут обеспечивала полную инактивацию ингибиторов протеаз. Так, при гидролизе с помощью поджелудочной железы суспензии соевой муки, предварительно подвергнутой термической обработке, содержание аминного азота в гидролизате составляло 0,23-0,25 %, пептонов - 2,5-3,0 %, тогда как без термической обработки было соответственно 0,13-0,15 %, 0,5-0,6 %.

Таблица 5. Биологический контроль качества питательного агара на основе панкреатического гидролизата из отходов переработки мяса криля

Тест-штаммы	Биологические показатели роста на средах
	Питательный агар на основе гидролизата из отходов мяса криля	Сухой питательный агар (Контроль) ФСП-42-0504-5807-04
S. flexneri 1а 8516	Рост тест-штамма при посеве 0,1мл микробной взвеси из разведения 10-6 в виде бесцветных прозрачных колоний d-1,0-1,5 мм в S форме.	Рост тест-штамма при посеве 0,1мл микробной взвеси из разведения 10-6 в виде бесцветных прозрачных колоний d-1,0-1,5 мм в S форме.
S. sonnei S-form	Рост тест-штамма при посеве 0,1мл микробной взвеси из разведения 10-6 в виде бесцветных прозрачных колоний d-1,0-1,5 мм в S форме.	Рост тест-штамма при посеве 0,1мл микробной взвеси из разведения 10-6 в виде бесцветных прозрачных колоний d-1,0-1,5 мм в S форме.
S. enterica Typhi Н901	Рост тест-штамма при посеве 0,1мл микробной взвеси из разведения 10-6 в виде бесцветных прозрачных колоний d-1,0-1,5 мм в S форме.	Рост тест-штамма при посеве 0,1мл микробной взвеси из разведения 10-6 в виде бесцветных прозрачных колоний d-1,0-1,5 мм в S форме.
P. aeruginosa 27/99	Сплошной рост с образованием сине-зеленого пигмента при посеве 0,1 мл микробной взвеси по стандарту мутности 10 ед.	Сплошной рост с образованием сине-зеленого пигмента при посеве 0,1 мл микробной взвеси по стандарту мутности 10 ед.
S. marcescens 1	Сплошной рост с образованием красного пигмента при посеве 0,1 мл микробной взвеси по стандарту мутности 10 ед.	Сплошной рост с образованием красного пигмента при посеве 0,1 мл микробной взвеси по стандарту мутности 10 ед.

Подобные документы

• Роль медицинского лабораторного техника в приготовлении питательных сред в современной микробиологической лаборатории

  Состав питательных сред для культивирования микроорганизмов. Физиологические функции элементов, используемых для их приготовления. Качественное преимущество промышленных питательных сред. Технология и многостадийный контроль качества их производства.
  
  контрольная работа [27,8 K], добавлен 12.02.2015
  

• Исследование микрофлоры тела сомов Clarias batrachus и антибиотических свойств их кожной слизи

  Состав и направления деятельности кафедры микробиологии и иммунологии. Принципы работы в микробиологической лаборатории. Подготовка посуды и инструментов. Техника отбора проб, посева и приготовления питательных сред. Методы идентификации микроорганизмов.
  
  отчет по практике [28,8 K], добавлен 19.10.2015
  

• Исследование ферментативного гидролиза лигноцеллюлозных материалов из недревесного растительного сырья

  Характеристика целлюлозы и ее производных. Ферментативный гидролиз лигноцеллюлозных материалов в ацетатном буфере и в водной среде. Зависимость эффективности ферментативного гидролиза от условий перемешивания, от концентрации субстрата, от сырья.
  
  дипломная работа [993,2 K], добавлен 19.01.2016
  

• Химическая структура, биохимические свойства и ферменты бактерий

  Химические элементы, входящие в состав живой материи. Синтез микроорганизмами различных ферментов. Физиология и принципы культивирования микроорганизмов. Метаболизмы, дыхание микроогранизмов, краткая характеристика питательных сред, рост и размножение.
  
  реферат [26,1 K], добавлен 21.01.2010
  

• Выделение, изучение свойств микроорганизмов и их использование для выполнения подготовительных процессов переработки овчинно-мехового сырья

  Механизм воздействия прокариотических микроорганизмов на спав и липазу. Щелочные протеиназы рода Bacillus. Методика выделения, изучение свойств концентрированного ферментного препарата и порядок его применения в процессе обезжиривания меховой овчины.
  
  дипломная работа [169,7 K], добавлен 27.11.2010
  

• Кометаболизм ЭДТА и глюкозы у бактериального штамма LPM-4

  Хелатирующие соединения. Строение и комплексообразование ЭДТА. Бактериальная деградация ЭДТА. Кометаболизм. Периодическое культивирование и его условия. Методика приготовления питательных сред. Вычисление энергетического выхода роста штамма LPM-4.
  
  дипломная работа [77,4 K], добавлен 15.12.2008
  

• Исследование роста микромицетов на различных источниках углеродного питания

  Исследование использования углерода и различных природных веществ микроскопическими грибами. Методы выделения и идентификации плесневых грибов, принципы составления питательных сред для них. Рост микромицетов на различных источниках углеродного питания.
  
  дипломная работа [778,3 K], добавлен 11.09.2010
  

• Получение белка пищевого и кормового назначения при помощи высших базидиомицетов

  История получения белка с помощью микроорганизмов. использование высших базидиальных грибов для получения белка кормового, пищевого назначения. Получение белка путем глубинного культивирования на питательных средах. Сохранение и усиление грибного аромата.
  
  реферат [28,9 K], добавлен 13.03.2019
  

• Получение моноклональных антител

  Изучение метода получения моноклональных антител путем слияния клеток мышиной миеломы с В-лимфоцитами. Основные среды, употребляемые при получении гибридов. Приготовление отдельных компонентов сред для культивирования. Процесс клонирования гибридом.
  
  контрольная работа [40,6 K], добавлен 22.01.2015
  

• Биологическая роль витаминов, липидов, процессов брожения

  Обзор классификации, свойств и биологической роли витаминов, анализ их основных природных источников и антагонистов. Изучение липидов, процесса брожения и его типов. Характеристика физико-химических свойств белков и уровней организации белковых молекул.
  
  шпаргалка [53,8 K], добавлен 16.05.2010
  

• Уксуснокислое и лимоннокислое брожение

  Обзор анаэробного метаболического распада молекул питательных веществ без окисления. Возбудитель уксуснокислого брожения. Развитие уксуснокислых бактерий в напитках. Способ получения столового уксуса. Промышленное получение и применение лимонной кислоты.
  
  реферат [110,3 K], добавлен 01.03.2014
  

• Функциональная система, поддерживающая постоянный уровень питательных веществ в крови

  Принцип саморегуляции функциональной системы. Формирование пищевой мотивации. Роль процессов, протекающих в полости рта во время приема пищи в поддержании оптимального для метаболизма уровня питательных веществ в крови. Механизм сенсорного насыщения.
  
  презентация [2,8 M], добавлен 24.02.2015
  

• Изучение потребностей прокариот в питательных веществах

  Минеральные соли, соединения углерода, азота, кислорода, водорода, серы, фосфора, как источники основных биогенных химических элементов, необходимых для построения, функционирования и метаболизма прокариотической клетки. Факторы роста микроорганизма.
  
  курсовая работа [298,4 K], добавлен 23.01.2015
  

• Механизм питания и дыхания микроорганизмов

  Типы дыхания микроорганизмов. Транспорт электронов при дыхании и различных типах анаэробного способа получения энергии. Наиболее доступные источники углерода для бактерий. Механизм поступления питательных веществ. Использование неорганического азота.
  
  реферат [799,3 K], добавлен 26.12.2013
  

• Болезни растений, вызываемые недостатком питательных веществ

  Нарушение определенных функций растений, болезненные явления и симптомы, вызываемые недостатком питательных веществ. Причины голодания растений. Признаки азотного, фосфорного, марганцевого и калийного голодания. Подкормка растений недостающим элементом.
  
  презентация [2,9 M], добавлен 06.01.2016
  

• Практикум по методам биохимических исследований

  Методы исследования физико-химических свойств, тканевой и субклеточной локализации основных представителей биологических молекул, методы их выделения и очистки. Квалификационная характеристика специалиста-биохимика. Область профессиональной деятельности.
  
  учебное пособие [24,8 K], добавлен 19.07.2009
  

• Представители семейства бобовых как источники биофлавоноидов

  Изучение отдельных представителей семейства бобовых, выявление содержания в них флавоноидов, установление диапозона лечебных свойств лекарственного растительного сырья, богатого флавоноидами. Лекарственные растения, травы и растительные препараты.
  
  курсовая работа [40,9 K], добавлен 19.06.2008
  

• Механизм действия ферментов

  Изучение ферментов, их свойств и механизма биологического действия. Проведение исследования современных представлений о механизме ферментативного трансаминирования. Разработка общей теории пиридоксалевого катализа. Строение фермент-субстратного комплекса.
  
  реферат [189,0 K], добавлен 14.03.2015
  

• Биохимия ферментов

  Ускорение химических реакций с помощью катализаторов. Особенности ферментов (энзимов) как высокоспецифичных белков, выполняющих функции биологических катализаторов. Строение ферментов, их специфичность и классификация. Этапы ферментативного катализа.
  
  презентация [3,4 M], добавлен 20.11.2014
  

• Биологические ресурсы мира

  Описания источников и предпосылок получения, необходимых людям материальных и духовных благ, заключенных в объектах живой природы. Животный мир - один из важнейших биологических ресурсов. Исследование месторасположения северного и южного лесного пояса.
  
  презентация [1,4 M], добавлен 20.06.2014
  

• главная
• рубрики
• по алфавиту
• вернуться в начало страницы
• вернуться к началу текста
• вернуться к подобным работам