Многоцветный анализ в проточной цитометрии для медико-биологических исследований

Дополнительным признаком покоящихся CD4⁺CD45RA-CD45R0⁺ Т-лимфоцитов памяти человека принято считать присутствие в популяции CD28⁺ клеток. Действие иономицина на лимфоциты ПКЧ сопровождается значительным обогащением популяции CD4⁺CD45RA-CD45R0⁺CD28⁺CD29⁺CD62L^low Т-клетками. Неодинаковая чувствительность к иономицину CD62L^high и CD62L^low Т-лимфоцитов хорошо совпадает с общепринятым подразделением популяции CD4⁺ Т-клеток человека по путям миграции по организму. Для CD4⁺ Т-лимфоцитов человека имеются указания на различную чувствительность к апоптозу CD28- и CD28⁺ клеток - наиболее готовыми к апоптозу клетками принято считать CD4⁺CD95^highCD28- клетки. Согласно современной классификации, наиболее полно фенотип ИР CD4⁺ Т-клеток человека совпадает с популяцией «центрального ядра» Т-клеток памяти. В этой популяции CD4⁺ Т-лимфоцитов памяти представлены покоящиеся Т-клетки человека, полностью прошедшие зависимую от антигена дифференцировку в ходе первичного иммунного ответа. Данные клетки обладают ограниченной способностью к миграции по высоко-эндотелиальным венулам.

ИР Т-клетки были описаны ранее для селезенки и лимфатических узлов мыши. Использование лабораторных животных дает редкую возможность проводить эксперименты методом адоптивного переноса: выделенные и охарактеризованные популяции иммунных клеток доноров (мышей) переносят наивным сингенным реципиентам, в которых и проверяют in vivo функциональные свойства перенесенных клеток. Только выделенные ИР Т-клетки из селезенок переболевших или вакцинированных мышей-доноров оказались способны адоптивно переносить наивным реципиентам невосприимчивость к последующему заражению Mycobacterium tuberculosis и Neisseria meningitidis в соответствующих моделях. Приведенные данные прямо свидетельствуют о способности ИР Т-клеток к выполнению основных функций Т-лимфоцитов памяти, связанных с распознаванием антигенов возбудителя и быстрого и усиленного ответа на них in vivo, приводящего к эффективной защите реципиентов от патогена. Большинство специфичных к антигену Т-лимфоцитов селезенки и лимфатических узлов мыши также сосредоточено в ИР-фракции Т-клеток.

ИР Т-клетки человека сохраняют способность отвечать на стимуляцию смесью ФМА с иономицином. Для выделенных CD4⁺CD45R0⁺ Т-клеток памяти человека также показана значительно меньшая зависимость пролиферации и продукции IL-2 от концентрации ионов кальция в среде при стимуляции МА к CD3, по сравнению с наивными CD4+ Т-клетками того же донора. Следовательно, резистентность к действию иономицина Т-клеток памяти «не мешает» им осуществлять важнейшие функции Т-клеток памяти in vivo и in vitro.

Полученные экспериментальные данные суммированы в виде схемы, приведенной на Рис. 30, иллюстрирующей изменение гомеостаза ионов кальция в CD4⁺ Т-лимфоцитах в процессе их активации и дифференцировки in vivo. Данная схема носит гипотетический характер, так как не все стадии активации и дифференцировки CD4⁺ Т-клеток in vivo описаны одинаково подробно.

Ионы кальция всегда присутствуют в организме. Они необходимы для протекания множества биохимических реакций в клетках. При дифференцировке in vivo активированных Т-лимфоцитов роль ионов кальция постоянно меняется. Все покоящиеся наивные CD4⁺CD45RA⁺CD45R0- Т-клетки чувствительны к действию низких доз иономицина. Индукция активации наивных Т-лимфоцитов всегда приводит к повышению Ca²⁺ внутри клеток. На этой стадии активации Т-клетки сохраняют чувствительность к действию иономицина. Более поздние стадии активации значительно меньше зависят от присутствия ионов кальция, и часть активированных клеток приобретает резистентность к действию иономицина. Покоящиеся CD4⁺CD45RA-CD45R0⁺ Т-клетки памяти вообще резистентны к действию иономицина, но это не препятствует осуществлению ими своих физиологических функций, связанных с распознаванием антигенов возбудителя и быстрого и усиленного ответа на них in vivo, приводящего к эффективной защите организма от патогенов.

Рис. 30. Диаграмма, иллюстрирующая возникновение резистентности к действию иономицина, CD4⁺ Т-лимфоцитов памяти человека в ходе зависимой от антигена дифференцировки из наивных предшественников как результат нормального развития первичного иммунного ответа in vivo.

ВЫВОДЫ

1. Разработанный алгоритм оптимизации настройки приборов и создания протоколов цитометрического анализа для стандартизации исследований изучаемых параметров клеток иммунной системы применим для работы на большинстве проточных цитометров ведущих фирм производителей.

2. Последовательное введение логически ограниченных зон при многоцветном анализе лимфоцитов выявляет наличие отдельных минорных субпопуляций, различие в плотности экспрессии маркеров внутри изучаемой субпопуляции клеток, стадию дифференцировки и степень их активации.

3. Результаты проведенных скрининговых исследований условно здоровых лиц в различных регионах России с определением среднестатистическиих значений параметров иммунного статуса сопоставимы со среднестатистическими значениями параметров иммунного статуса человека опубликованными в литературе.

4. Методологический подход, включающий введение в первичную панель скринигового исследования иммунной системы антител для выявления аутореактивных клонов В-клеток (В1, CD19+CD5+), улучшает диагностику и мониторинг за пациентами с аутоиммунными заболеваниями (аутоиммунный тиреоидит).

5. В клинико-диагностической практике наиболее предпочтителен четырехцветный цитометрический анализ по сравнению с двух- и трехцветным, что дает возможность получать достоверные данные, характеризующие как субпопуляционный состав, так и ряд функциональных параметров иммунокомпетентных клеток при уменьшении количества образцов и времени, затраченного на получение конечного результата.

6. Предложена и внедрена в практическую работу четырехцветная панель моноклональных антител к различным кластерам дифференцировки лимфоцитов периферической крови учитывающая степень активации различных субпопуляций Т-клеток, В-клеток и NK-клеток:

IgG/IgG/IgGCD45 - изотипический контроль;

CD19/CD5/CD27/CD45 - В1, В2, В-клетки памяти;

CD16/CD56/CD3/CD45 - субпопуляции NK-клеток;

CD8/CD4/CD3/CD45 - субпопуляции Т-клеток;

CD8/CD38/CD3/CD45 - активированные Т-цитотоксические и NK-клетки;

CD4/CD25/HLA-DR/CD45 - активированные Т хелперы;

CD45RA/CD45R0/CD4/CD45 - активированные Т хелперы и Т-клетки памяти;

TCR-бв/TCR-гд/CD3/CD45 - бв- и гд-Т-клетки;

CD4/CD25/CD127/CD45 - Т-регуляторные клетки.

7. Разработаные критерии применения многоцветных параметров для иммунофенотипирования клеток, в том числе при использовании первичной панели для скрининговых исследований и вторичной панели для более углубленного анализа включают: а) анализ гистограмм на наличие клеток с измененной экспрессией линейных маркеров; б) сравнение полученных значений с референтными; в) анализ плотности экспрессии значимых маркеров лимфоцитов; г) оценка степени активации иммунокомпетентных клеток.

8. Дифференцировка Т-лимфоцитов от наивных Т-хелперов (CD4⁺CD7⁺CD45RA⁺CD45R0-CD25-CD29-CD62L⁺CD69-CD95-HLA-DR-) к Т-клеткам памяти (CD4⁺CD7^-CD45RA-CD45R0⁺CD28⁺CD29⁺CD62L^low) сопровождается изменением рецепторного репертуара и перестройкой системы Ca²⁺-гомеостаза, что приводит к возникновению их резистентности к действию кальциевых ионофоров.

9. Обоснованное применение многоцветного цитометрического анализа значительно расширяет возможности клинико-диагностических и научных исследований иммунной системы человека и биологических объектов.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

Коллективные монографии и главы в книгах.

1. Дозморов И.М., Багаева Л.В., Коваленко Е.И., Кузин И.И., Литвинов И.С., Луцан Н.И., Луценко Г.В., Молотковская И.М., Петров Р.В., Прохорова А.Л., Рысева И.А., Хайдуков С.В., Сапожников А.М., Свирщевская Е.В. Альтернативность в действии гликопептидов бактериальной стенки на иммунную систему и ее компаненты. // Синтетические иммуномодуляторы. Под ред. Р.В. Петрова, М.: Наука, 1991 С. 38-96.

2. Nesmeyanov V.A., Khaidukov S.V., Komaleva R.L., Sumaroka M.V., Litvinov I.S., Dorodnikh E.G., Valyakina T.I., Malakhov A., Brisken K. The molecular mechanism of muramyl peptides' biological activity. // Haemotology and Blood Transfusion, Modern Trends in Human Leukemia IX, R.Neth et al. (Eds.), Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 1992, P. 290-293.

3. Vlasova E.V., Galanina O.E., Khaidukov S.V., Tuzikov A.B., Tzvetkov Y.E., Shashkov A.S., Nifant'ev N.E., Bovin N.V. Specificity of Workshop mAb S071-S076 towards synthetic selection receptors and cell lines A431 and HL-60. // Leucocyte Typing V. White Cell Differentiation Antigens. S.F. Schlossman et al. (Eds.), Oxford University Press vol. 1, 1995, P. 1534-1535.

4. Vlasova E.V., Kovalenko E.I., Lukin S.V., Khaidukov S.V., Nifant'ev N.E., Piskarev V.E., Bovin N.V. Myeloid Blind Panel biochemical analysis: Specificity of anti-carbohydrate MA submitted to Myeloid cells section. // Leucocyte Typing VI. White Cell Differentiation Antigens, Tadamitsu Kishimoto (Eds.), Garland Publishing, Inc. NY & London, 1997, P. 1038-1040

5. Избранные вопросы современной проточной цитометрии. // Под ред. Хайдукова С.В., Зурочки А.В. Челябинск, Издательство “Челябинская государственная медицинская академия”, 2007, 85 С.

6. Сибиряк С.В., Хайдуков С.В., Зурочка А.В., Черешнев В.А. Оценка апоптоза в иммунологических исследованиях: Краткое методическое руководство. // Екатеринбург, УрО РАН, 2008, 60 С.

7. Вопросы современной проточной цитометрии. Клиническое применение. // Под ред. Хайдукова С.В., Зурочки А.В. Челябинск. Издательство "Челябинская государственная медицинская академия". 2008, 196 С.

Статьи в журналах по перечню ВАК Министерства образования и науки Российской Федерации.

8. Юровский В.В., Сафонова Н.Г., Хайдуков С.В., Василов Р.Г., Демин В.В. Синтез и иммунохимическое изучение антигенной детерминанты H-2d-молекулы главного комплекса гистосовместимости мыши. // Биоорг. химия, 1986, 12(1), С. 89-99

9. Гиляревский С.Д., Хайдуков С.В., Лунева Н.М., Несмеянов В.А. Фенотипирование и функциональная характеристика линии клеток лимфосаркомы крысы. // Иммунология, 1987, 2, С. 33-36.

10. Несмеянов В.А., Хайдуков С.В., Комалева Р.Л., Андронова Т.М., Иванов В.Т.. Влияние N-ацетилглюкозаминил-в1-4-N-ацетилмурамоил-L-аланил-D-изоглутамина на экспрессию Ia-антигенов макрофагами мыши. // Биологические мембраны, 1989, 6(3), С. 245-249

11. Sumaroka M.V., Litvinov I.S., Khaidukov S.V., Golovina T.N., Kamraz M.V., Komal'eva R.L., Andronova T.M., Makarov E.A., Nesmeyanov V.A., Ivanov V.T. Muramyl peptide-binding sites are located inside target cells. // FEBS Lett. 1991, 295(1-3), P. 48-50.

12. Stratieva-Taneeva P.A., Khaidukov S.V., Kovalenko V.A., Nazimov I.V., Samochvalova L.V., Nesmeyanov V.A. Bispecific monoclonal antibodies to human Interleikin 2 and horseredish peroxidase. // Hybridoma, 1993, 12(3), P. 271-284.

13. Vlasova E.V., Byramova N.E., Tuzikov A.B., Zhegis L.S., Rapoport E.М., Khaidukov S.V., Bovin N.V. Monoclonal antibodies directed to synthetic carbohydrate antigen Le^y. // Hybridoma, 1994, 13(4), P. 295-301.

14. Pukhalsky A., Toptygina A., Khaidukov S. Interleukin-2 receptor в chain as a possibile target for low doses of mafosfamide. // Mediators of Inflammation, 1995, 4(3), P. 175-180.

15. Хайдуков С.В., Комалева Р.Л., Несмеянов В.А. Макрофаги - основная мишень дисахаридсодержащих мурамил-пептидов. // Иммунология, 1995, № 3, С. 26-30.

16. Марквичева Е.А., Мареева Т.Ю., Хайдуков С.В., Бронин А.С., Несмеянов В.А., Зубов В.П. Влияние иммобилизации в гранулы гидрогеля на структурно-функциональные особенности гибридных клеток в процессе культивирования. // Биологические мембраны, 1995, 12(2), С. 122-129.

17. Khaidukov S.V., Komaleva R.L., Nesmeyanov V.A. N-acetylglucosamine-containing muramyl peptides directly affect macrophages. // Int J Immunopharmacol. 1995, 17(11), P. 903-911.

18. Шиян С.Д., Пухальский А.Л., Хайдуков С.В., Топтыгина А.П., Бовин Н.В. Взаимодействие лейкоцитов периферической крови с a₁-кислым гликопротеином, его углеводными цепями и неогликоконъюгатами. // Гематалогия и трансфузиология, 1996, 41(2), C. 24-29.

19. Шебзухов Ю.В., Токсамбаева С.Ж., Хайдуков С.В., Мысякин Е.Б. Влияние фактора активации тромбоцитов и его синтетических аналогов на экспрессию Ia-антигенов перитонеальными макрофагами мыши. // Журнал Эпидемиологии, Микробиологии и Иммунобиологии, 1996, № 3, C. 114-117.

20. Калашникова Е.А., Хайдуков С.В., Пухальский А.Л. Влияние разных доз дексаметазона и состава клеточной популяции на продукцию in vitro фактора некроза опухолей и интерлейкина-6 мононуклеарами периферической крови человека. // Бюллетени Экспериментальной Биологии и Медицины, 1996, № 6, C. 667-672

21. Еремеев В.В., Лядова И.В., Майоров К.Б., Хайдуков С.В., Мороз А.М., Апт А.С.. Получение и частичная характеристика специфических к антигенам микобактерий клонов Т-клеток от мышей с генетически различной чувствительностью к туберкулезу. // Бюллетени Экспериментальной Биологии и Медицины, 1997, 123(4), C. 431-434.

22. Хайдуков С.В., Бочарова И.В., Межлумова М.Б., Литвинов И.С., Яхин Р.Т., Никоненко Б.В. Иммунологическая память, индуцированная Mycobacterium bovis (BCG) у инбредных мышей. // Бюллетени Экспериментальной Биологии и Медицины, 1997, 123(11), C. 553-555.

23. Коваленко Е.И., Саблина М.А., Хирова Е.В., Хайдуков С.В., Бовин Н.В. Встраивание неогликолипидов в мембрану клеток K562. Модель для изучения углеводзависимого лизиса клеток-мишеней естественными киллерами. // Биоорг. Химия, 1998, 24(3), C. 224-228.

24. Водовозова Е.Л., Хайдуков С.В., Гаенко Г.П., Бондарчук Т.Н., Михалев И.И., Гречишникова И.В., Молотковский Юл.Г. Транспортировка цитотоксических липосом к злокачественным клеткам с помощью углеводных детерминант. // Биоорг. Химия, 1998, 24 (10) C. 760-767.

25. Pichugin A.V., Khaidukov S.V., Moroz A.M., Apt A.S. Capacity of murine T cells to retain long-term responsiveness to mycobacterial antigens is controlled by the H-2 complex. // Clin Exp Immunol. 1998, 111(2) P. 316-324.

26. Lyadova I., Yeremeev V., Majorov K., Nikonenko B., Khaidukov S., Kondratieva T., Kobets N., Apt A. An ex vivo study of T lymphocytes recovered from the lungs of I/St mice infected with and susceptible to Mycobacterium tuberculosis. // Infect Immun. 1998, 66(10), P. 4981-4988.

27. Рапопорт Е.М., Некрасов М.В., Хайдуков С.В., Свирщевская Е.В., Жигис Л.С., Козлов Л.В., Баталова Т.Н., Зубов В.П., Бовин Н.В. Изучение клеточной локализации галактозосвязывающего лектина из сыворотки крови человека. // Биохимия, 2000, 65(11), P. 1558-1563.

28. Lyadova I.V., Eruslanov E.B., Khaidukov S.V., Yeremeev V.V., Majorov K.B., Pichugin A.V., Nikonenko B.V., Kondratieva T.K., Apt A.S. Comparative analysis of T lymphocytes recovered from the lungs of mice genetically susceptible, resistant, and hyperresistant to Mycobacterium tuberculosis-triggered disease. // J Immunol. 2000, 165(10) P. 5921-5931.

29. Kondratieva T.K., Kobets N.V., Khaidukov S.V., Yeremeev V.V., Lyadova I.V., Apt A.S., Tam M.F., Stevenson M.M. Characterization of T cell clones derived from lymph nodes and lungs of Pseudomonas aeruginosa-susceptible and resistant mice following immunization with heat-killed bacteria. // Clin Exp Immunol. 2000, 121(2) P. 275-82.

30. Никоненко Б.В., Хайдуков С.В., Литвинов И.С., Бочарова И.В., Апт А.С. Иммунологическая память у мышей линий CBA и CBA/N при вакцинации Mycobacterium bovis (BCG). // Бюллетень Экспериментальной Биологии и Медицины, 131(6), 2001, С. 649-651.

31. Сащенко Л.П., Козырь А.В., Лукьянова Т.И., Габибов А.Г., Сучков С.В., Бобик Т.В., Хайдуков С.В., Алекберова З.С., Гнучев Н.В.. Каспаззависимая цитотоксичность ДНК-аутоантител. // Доклады Академии Наук, 2001, 380(1), C. 117-119.

32. Lyadova I.V., Vordermeier H.M., Eruslanov E.B., Khaidukov S.V., Apt A.S., Hewinson R.G. Intranasal BCG vaccination protects BALB/c mice against virulent Mycobacterium bovis and accelerates production of IFN-gamma in their lungs. // Clin. Exp. Immunol. 2001 126(2) P. 274-9.

33. Blishchenko E.Y., Kalinina O.A., Sazonova O.V., Khaidukov S.V., Egorova N.S., Surovoy A.Y., Philippova M.M., Vass A.A., Karelin A.A., Ivanov V.T. Endogenous fragment of hemoglobin, neokyotorphin, as cell growth factor. // Peptides. 2001, 22(12), C. 1999-2008.

34. Ночевный В.Т., Хайдуков С.В. Культура клеток кожи перепелиных эмбрионов. // Аграрная наука, 2001, № 6, C. 22-24,

35. Петрова Е.Э., Валякина Т.И., Хайдуков С.В., Несмеянов В.А. Эндогенный фактор некроза опухолей демаскирует на поверхности клеток меланомы центры связывания N-ацетилглюкозаминил-(в1-4)-N-ацетилмурамоил-аланил-D-изоглутамина. // Биоорг. Химия, 2001, 27 (4) C. 249-256.

36. Гаенко Г.П., Козлов А.М., Сапрыкина Н.С., Доротникова Е.Б., С.В. Хайдуков, Молотковский Ю.Г. Некоторые характеристики фенотипа клеток карциномы легкого Льюис. // Бюллетень Экспериментальной Биологии и Медицины, 2002, Том 134(10): С. 443-446.

37. Хайдуков С.В., Холоденко И.В., Литвинов И.С. Иономицин-резистентная субпопуляция CD4⁺ Т-лимфоцитов периферической крови человека. Фенотипическая характеристика. // Цитология, 2003, 45(3), С. 249-254.

38. Хайдуков С.В., Литвинов И.С. Иономицин-резистентная субпопуляция CD4⁺ Т-лимфоцитов периферической крови человека. Функциональная характеристика. // Биологические мембраны, 2003, т. 20(4), С. 333-340.

39. Хайдуков С.В., Литвинов И.С. Фенотипическая характеристика CD4⁺ Т-лимфоцитов периферической крови человека, экспрессирующих белки множественной лекарственной устойчивости. // Биологические мембраны, 2003, 20(5), С. 381-385.

40. Rapoport E., Khaidukov S., Baidina O., Bojenko V., Moiseeva E., Pasynina G., Karsten U., Nifant'ev N., LePendue J., Bovin N. Involvement of the Galbeta1 - 3GalNAcbeta structure in the recognition of apoptotic bodies by THP-1 cells. // Eur J Cell Biol. 2003, 82(6) P. 295-302.

41. Sashchenko L.P., Dukhanina E.A., Yashin D.V., Shatalov Y.V., Romanova E.A., Korobko E.V., Demin A.V., Lukyanova T.I., Kabanova O.D., Khaidukov S.V., Kiselev S.L., Gabibov A.G., Gnuchev N.V., Georgiev G.P. Peptidoglycan recognition protein tag7 forms a cytotoxic complex with heat shock protein 70 in solution and in lymphocytes. // J Biol Chem. 2004, 279(3) P. 2117-24.

42. Коваленко Е.И., Хирова Е.В., Молотковская И.М., Овчинникова Т.В., Саблина М.А., Сапожников А.М., Хайдуков С.В., Бовин Н.В. Модификация поверхности клеток с помощью липофильных гликоконъюгатов и взаимодействие модифицированных клеток с натуральными киллерами // Биоорг. химия. 2004, 30(3) C. 281-292.

43. Гаенко Г.П., С.В. Хайдуков, Молотковский Ю.Г. Экспрессия коллагена IV типа клетками карциномы легкого крысы. // Бюллетень Экспериментальной Биологии и Медицины, 2004, 137(1), С. 78-80.

44. Колышкин В.М., Ночевный В.Т., Юрков С.Г., С.В. Хайдуков, Виолин Б.В. Проточная цитометрия для стандартизации линии клеток фибробластов и эмбрионов кур. // Аграрная наука, 2004, № 3, С. 27-29.

45. Хайдуков С.В., Литвинов И.С. Изменение гомеостаза ионов кальция в CD4⁺ Т_лимфоцитах периферической крови человека в процессе дифференцировки in vivo. // Биохимия, 2005, 70(6), С. 838 - 849.

46. Хайдуков С.В., Агафонова С.А., Литвинов И.С. Сравнительный анализ фенотипических характеристик наивных Т-клеток и Т-клеток памяти селезенки мышей линии СВА. // Биологические мембраны, 2005, 22(6), С. 482-491.

47. Кирилина Е.А., Суворов Н.И., Попова С.С., Хайдуков С.В., Рапопорт Е.М., Фонина Л.А., Михайлов А.А. Индукция дифференцировки в лейкозных клеточных линиях под влиянием миелопептида-4. // Бюллетень Экспериментальной Биологии и Медицины, 2005, 140(11), С. 565-569.

48. Гурьянов С.А., Кирилина Е.А., Хайдуков С.В., Суворов Н.И., Молотковская И.М., Михайлова А.А. Специфическое связывание и проникновение внутрь клетки-мишени флуоресцентно меченного миелопептида-4, обладающего дифференцировочной активностью. // Биоорг. химия 2006, 32(6) C. 574-578.

49. Petrova E.E., Valyakina T.I., Simonova M.A., Komaleva R.L., Khaidukov S.V., Makarov E.A., Blokhin D.Y., Ivanov P.K., Andronova T.M., Nesmeyanov V.A. Muramyl peptides augment cytotoxic effect of tumor necrosis factor-alpha in combination with cytotoxic drugs on tumor cells. // Int Immunopharmacol. 2006, 6(9), P. 1377-86.

50. Ponomarenko N.A., Vorobiev I.I., Alexandrova E.S., Reshetnyak A.V., Telegin G.B., Khaidukov S.V., Avalle B., Karavanov A., Morse H.C. 3rd, Thomas D., Friboulet A., Gabibov A.G. Induction of a protein-targeted catalytic response in autoimmune prone mice: antibody-mediated cleavage of HIV-1 glycoprotein GP120. // Biochemistry. 2006, 45(1), P. 324-30.

51. Хайдуков С.В., Зурочка А.В. Проточная цитометрия как современный метод анализа в биологии и медицине. // Медицинская иммунология, 2007, 9(4-5), С. 373-378.

52. Хайдуков С.В. Подходы к стандартизации метода проточной цитометрии для иммунофенотипирования. Настройка цитометров и подготовка протоколов для анализа. // Медицинская иммунология, 2007, 9(6), С. 569-574.

53. Sashchenko L.P., Dukhanina E.A., Shatalov Y.V., Yashin D.V., Lukyanova T.I., Kabanova O.D., Romanova E.A., Khaidukov S.V., Galkin A.V., Gnuchev N.V., Georgiev G.P. Cytotoxic T lymphocytes carrying a pattern recognition protein Tag7 can detect evasive, HLA-negative but Hsp70-exposing tumor cells, thereby ensuring FasL/Fas-mediated contact killing. // Blood. 2007, 110(6), P. 1997-2004.

54. Kovalenko E.I., Abakushina E., Telford W., Kapoor V., Korchagina E., Khaidukov S., Molotkovskaya I., Sapozhnikov A., Vlaskin P., Bovin N. Clustered carbohydrates as a target for natural killer cells: a model system. // Histochem Cell Biol. 2007, 127(3), P. 313-26.

55. Хайдуков С.В., Зурочка А.В. Расширение возможностей метода проточной цитометрии для клинико-иммунологической практики. // Медицинская иммунология, 2008, 10(1), С. 5-13.

56. Blishchenko E., Sazonova O., Surovoy A., Khaidukov S., Sheikine Y., Sokolov D., Freidlin I., Philippova M., Vass A., Karelin A., Ivanov V. Antiproliferative action of valorphin in cell cultures. // J Pept Sci. 2002, 8(8), P. 438-452.

57. Sashchenko L.P., Gnuchev N.V., Lukjanova T.I., Redchenko I.V., Kabanova O.D., Lukanidin E.M., Blishchenko E.Yu., Satpaev D.K., Khaidukov S.V., Chertov O.Yu. Time-dependent changes of LAK cell phenotypes correlate with the secretion of different cytotoxic proteins. // Immunol Lett., 1993, 37(2-3), P. 153-157.

58. Kozyr A.V., Sashchenko L.P., Kolesnikov A.V., Zelenova N.A., Khaidukov S.V., Ignatova A.N., Bobik T.V., Gabibov A.G., Alekberova Z.S., Suchkov S.V., Gnuchev NV. Anti-DNA autoantibodies reveal toxicity to tumor cell lines. // Immunol Lett. 2002, 80(1), P. 41-47.

59. Хайдуков С.В., Зурочка А.В. Многоцветный цитометрический анализ. Идентификация B-клеток. // Российский Иммунологический Журнал, 2007, 1(10), 3-4, С. 220-228.

60. Хайдуков С.В., Зурочка А.В. Многоцветный цитометрический анализ. Идентификация NK-клеток. // Российский Иммунологический Журнал, 2008, 2(11), 1, С. 20-30.

61. Хайдуков С.В., Зурочка А.В., Черешнев В.А. Многоцветный цитометрический анализ. Идентификация Т-клеток и их субпопуляций по экспрессии бв-TCR и гд-TCR.// Медицинская иммунология, 2008, 10(2-3), C. 115-124.

62. Иммунокорригирующие свойства дипептида ГБ-115. Шипаева Е.В., Коваленко Л.П., Хайдуков С.В., Колик Л.Г., Гудашева Т.А., Дурнев А.Д., Середенин С.Б. // Бюллетень Экспериментальной Биологии и Медицины, 2008 г., Том 145, № 5 С. 548-551.

Публикации (тезисы докладов и статьи) в журналах по перечню ВАК Министерства образования и науки Российской Федерации.

63. Kovalenko E.I., Khaidukov S.V., Sablina M.A., Khirova E.V., Bovin N.V. The model system for the study of carbohydrate-dependent NK cells-mediated cytotoxicity. // Immunology, Supplement 1, Abstracts 6th Annual Congress of the British Society for Immunology, Harrogate, UK, 1-4 December 1998, Vol. 95, P. 105.

64. Хайдуков С.В., Литвинов И.С., Дедкова Е.Н., Агафонова С.А. Зинченко В.П. Особенности Са²⁺-зависимой внутриклеточной сигнализации в Т-лимфоцитах памяти. // Медицинская иммунология, Материалы III конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 99” 18-20 мая 1999, Том 1, № 3-4, С. 17.

65. Хирова Е.В., Коваленко Е.И., Саблина М.А., Хайдуков С.В., Бовин Н.В.Модельная система для изучения роли углеводов поверхности клеток-мишеней на цитотоксическую активность естественных киллеров человека. // Медицинская иммунология, Материалы III конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 99” 18-20 мая 1999, Том 1, № 3-4, С. 26-27.

66. Агафонова С.А., Котельникова О.В., Литвинов И.С., Хайдуков С.В., Несмеянов В.А Клеточный иммунный ответ к возбудителю менингита группы В - Neisseria meningitidis. фенотипический анализ “протективных” субпопуляций. // Медицинская иммунология, Материалы III конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 99” 18-20 мая 1999, Том 1, № 3-4, С. 91.

67. Блищенко Е.Ю., Карелин А.А., Хайдуков С.В., Филиппова М.М., Калинина О.А., Сазонова О.В., Яцкин О.Н., Пивник А.В., Иванов В.Т. Компаненты тканеспецифических пептидных комплексов тканей: биологическая роль при норме и патологии. // Медицинская иммунология, Материалы IV конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2000” 23-25 мая, 2000, Том 2, № 2, С. 122.

68. Коваленко Е.И., Хирова Е.В., Овчинникова Т.В., Хайдуков С.В., Бовин Н.В. Изучение влияния углеводов на цитотоксическую активность NK-клеток человека с использованием липофильных гликоконъюгатов. // Медицинская иммунология, Материалы IV конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2000” 23-25 мая, 2000, Том 2, № 2, С. 130-131.

69. Коваленко Е.И., Хайдуков С.В., Хирова Е.В., Поклонский Д.Л., Литвинов И.С. NK-клетки человека резистентны к низким дозам иономицина. // Медицинская иммунология, Материалы IV конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2000” 23-25 мая, 2000, Том 2, № 2, С. 131.

70. Хайдуков С.В., Чудакова Д.А., Агафонова С.А., Литвинов И.С. Фенотипическая характеристика Т-клеток памяти мышей. // Медицинская иммунология, Материалы IV конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2000” 23-25 мая, 2000, Том 2, № 2, С. 141-142.

71. Тонеев В.В., Поклонский Д.Л., Хирова Е.В., Чудакова Д.Л., Хайдуков С.В., Литвинов И.С. Различная чувствительность субпопуляций Т-клеток человека к низким дозам иономицина. // Медицинская иммунология, Материалы IV конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2000” 23-25 мая, 2000, Том 2, № 2, C. 141.

72. Блищенко Е.Ю., Карелин А.А., Филиппова М.М., Калинина О.А., Сазонова О.В., Яцкин О.Н., Шейкин Ю.А., Соколов Д.И., Хайдуков С.В., Фрейдлин И.С., Иванов В.Т. Компоненты тканеспецифических пептидных комплексов тканей: негативные регуляторы пролиферации клеток. // Медицинская иммунология, Материалы V конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2001” 21-24 мая 2001, Том 3, № 2, С. 120-121.

73. Сазонова О.В., Блищенко Е.Ю., Калинина О.А., Хайдуков С.В., Карелин А.А., Иванов В.Т. Пролиферативный эффект эндогенных фрагментов гемоглобина: роль в тканевой регуляции. // Медицинская иммунология, Материалы V конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2001” 21-24 мая 2001, Том 3, № 2, С. 130-131

74. Хирова Е.В., Хайдуков С.В., Коваленко Е.И., Овчинникова Т.В., Сапожников А.М. Увеличение опосредованного натуральными киллерами лизиса клеток К562 и RAJI, модифицированных с помощью липофильных гликоконьюгатов, не связано с экспрессией белков теплового шока на поверхности клеток-мишеней. // Медицинская иммунология, Материалы V конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2001” 21-24 мая 2001, Том 3, № 2, С. 133.

75. Поклонский Д.Л., Беляева Т., Хайдуков С.В., Литвинов И.С. Изучение механизма действия CA²⁺-ионофора - иономицина на субпопуляции Т-клеток периферической крови человека. // Медицинская иммунология, Материалы V конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2001” 21-24 мая 2001, Том 3, № 2, С. 151.

76. Хайдуков С.В., Поклонский Д.Л., Литвинов И.С. Фенотипическая характеристика иономицин резистентных CD4⁺ Т-клеток человека. // Медицинская иммунология, Материалы V конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2001” 21-24 мая 2001, Том 3, № 2, С. 155.

77. Холоденко И.В., Хайдуков С.В., Сеферян К.Р., Литвинов И.С. Изучение взаимодействия конканавалина а и фитогемоглютинина фасоли с субпопуляциями Т-клеток периферической крови человека. // Медицинская иммунология, Материалы V конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2001” 21-24 мая 2001, Том 3, № 2, С.156.

78. Хайдуков С.В., Хирова Е.В., Чудакова Д.А., Литвинов И.С. Фенотипическая характеристика субпопуляций Т-клеток человека, различающихся по чувствительности к иономицину в низких дозах. // Цитология, Материалы конференции, Том 43, № 4, 2001, С. 408.

79. Сазонова О.В., Блищенко Е.Ю., Карелин А.А., Филиппова М.М., Калинина О.А., Яцкин О.Н., Шейкин Ю.А., Соколов Д.И., Хайдуков С.В., Фрейдлин И.С., Иванов В.Т. Компоненты тканеспецифических пептидных комплексов: ингибиторы роста тканей. // Медицинская иммунология, Материалы VI всероссийской научной конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2002” 20-23 мая 2002, Том 4, № 2, С. 132-133.

80. Хайдуков С.В., Холоденко И.В., Литвинов И.С. Функциональная характеристика резистентных к Са²⁺-ионофору - иономицину - CD4⁺ Т-клеток периферической крови человека. // Медицинская иммунология, Материалы VI всероссийской научной конференции “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2002” 20-23 мая 2002, Том 4, № 2, С. 134-135.

81. Хайдуков С.В., Литвинов И.С. Изменение систем поддержания гомеостаза ионов Ca²⁺ в процессе дифференцировки Т-клеток памяти ПКЧ из наивных предшественников в ходе первичного иммунного ответа. // Медицинская иммунология, Материалы VII всероссийского научного Форума “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2003” 23-26 июня 2003, Том 5, № 3-4, С. 220.

82. Валякина Т.И., Петрова Е.Э., Симонова М.А., Комалева Р.Л., Хайдуков С.В., Несмеянов В.А. Комбинация ГМДП, цисплатина и TNF- обладаетпротивоопухолевым действием и влияет на иммунный статус мышей опухоленносителей. // Медицинская иммунология, Материалы VII всероссийского научного Форума “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2004” 23-26 июня, Том 6, № 3-4, С. 350-351.

83. Хайдуков С.В., Литвинов И.С. Изменение гомеостаза ионов кальция в Т-регуляторной популяции CD4⁺ Т-лимфоцитов периферической крови человека. Медицинская иммунология, Материалы VIII всероссийского научного Форума “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2004” 23-26 сентября 2004, Том 6, № 3-5,

84. Хайдуков С.В., Литвинов И.С. Различная чувствительность популяций CD4⁺ Т лимфоцитов к концентрации внеклеточного [Ca²⁺]. // Медицинская иммунология, Материалы IХ всероссийского научного Форума “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2005” 23-26 мая 2005, Том 7, № 2-3, С. 125.

85. Васюнина Н.Ю., Ростовская М.С., Коржикова С.В., Чупикова Н.И., Шарифуллина С.З., Тепляшин З.А., Тепляшин А.С., Хайдуков С.В., Савченкова И.П. Влияние различных условий культивирования на экспрессию поверхностных маркеров гемопоэтических стволовых клеток пуповинной крови. // Медицинская иммунология, Материалы Х всероссийского научного Форума “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2006” 29 мая - 1 июня, 2006, 2006, том 8, № 2-3, С. 416.

86. Хайдуков С.В. Иммунофенотипирование. Стандартизация метода проточной цитометрии. // Russian Jornal of Immunology. 2-я конференция “Иммунология репродукции”, Сочи, 15-18 мая, 2007, Vol. 9, Supplement 4, С. 143-144.

87. Кабанова О.Д., Лукьянова Т.И., Духанина Е.А., Шаталова Ю.В., Яшин Д.В., Романова Е.А., Хайдуков С.В., Гнучев Н.В., Сащенкo Л.П. Лимфоциты человека узнают и убивают HLA-опухолевые клетки: новая функция белка TAG7 (PGPP-S). // Медицинская иммунология, Материалы ХI всероссийского научного Форума “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2007” 28-31 мая, 2007, том 9, № 2-3, С. 141.

88. Хайдуков С.В. Иммунофенотипирование клеток периферической крови при помощи проточной цитометрии. Стандартизация методов. // Медицинская иммунология, Материалы ХI всероссийского научного Форума “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2007” 28-31 мая, 2007, том 9, № 2-3, С. 342.

89. Зурочка А.В., Хайдуков С.В. Изменение представлений об оценке иммунного статуса человека, новые проблемы и подходы к их решению. // Медицинская иммунология, Материалы ХI всероссийского научного Форума “Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2007” 28-31 мая, 2007, том 9, № 2-3, С. 339-340.

Размещено на Allbest.ru