Новые бактериоцины лактококков и их практическое использование

Лактококки устойчивы к лизоциму, могут развиваться в яичном белке как субстрате, утилизировать его углеводы. Результаты исследований показали (рис.19), что полное удаление глюкозы прошло за 12 часов инкубирования лактококков в яичном белке как субстрате, при этом рН снизился до 5,2. Добавление дрожжевого автолизата как источника витаминов, пуринов и пиримидинов, необходимых для развития лактококков в яичном белке, ускорило рост и развитие бактерий: процесс ферментации сократился до 9 часов, значение рН снизилось до 5,0, количество лактококков за время инкубирования увеличилось от 2,1х10⁸ до 7,3х10⁹. Сухой яичный белок, предварительно обессахаренный штаммом F-116, отвечал требованиям стандарта по всем физико-химическим показателям (ГОСТ 30364.2 - 96).

Таким образом, в результате проведенных исследований показана возможность использования нетоксичных бактериоцинобразующих лактококков и их бактериоцинов в качестве биологических консервантов для увеличения сроков хранения продуктов питания и пищевого сырья.

Рис. 16. Влияние дрожжевого автолизата (1) на потребление глюкозы, изменение рН и синтез бактериоцина при инкубировании Lactococcus lactis subsp. lactis F-116 в яичном белке, подкисленном молочной кислотой (2).Обозначения --^-- глюкоза; --?-- pH; - -¦- - бактериоцин; К -- рН нативного яичного белка, подкисленного молочной кислотой.

Составлена коллекция активных бактериоцинобразующих лактококков, подобраны условия их хранения, что соответствует задачам таких программных документов, как конвенция «Сохранение биоразнообразия» и «Микробное разнообразие-ХХI», а также программе ФЦАТП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники».

Выводы

1. Из коровьего и кобыльего молока, из лечебно-профилактических национальных продуктов смешанного молочнокислого и спиртового брожений курунги и Doogh разных территориальных зон выделены и отобраны наиболее перспективные бактериоцинобразующие природные штаммы мезофильных лактококков: штамм 119х с низинсинтезирующей активностью 3700 МЕ/мл (а.с № I55I744) и штамм 194 с активностью 3600 МЕ/мл, синтезирующий антибиотический комплекс широкого антимикробного, включая и фунгицидное действие, что является неизвестным свойством для этих лактококков. Штаммы идентифицированы как Lactococcus lactis subsp. lactis.

2. С использованием метода клеточной инженерии и индуцированного мутагенеза получены новые эффективные бактериоцинобразующие штаммы L. lactis subsp. lactis. Установлено, что протопластирование, реверсия протопластов к клеточной форме и слияние протопластов могут служить методами селекции активных форм. Получены гибридные штаммы, в 10 - 14 раз превышающие активность родительских штаммов (а.с. № 1687616, серебряная медаль ВДНХ). Новые штаммы обладали ускореннным синтезом бактериоцина при изменении спектра потребляемых углеводов и чуствительности к разным группам антибиотиков.

3. Оптимизирован синтез бактериоцинов новыми штаммами лактококков при изменении состава среды и контроля рН: выход бактериоцинов был увеличен в 1,8 -1,9 раза и составил для природного штамма 194 - 6400 МЕ/мл, а для гибридного штамма F-116 - 8200 МЕ/мл. Показана возможность использования в качестве сред для производства бактериоцинов отходов ряда ферментных производств, что удешевляет их получение и представляет реальную возможность решения проблемы защиты окружающей среды.

4. Разработаны методы выделения и очистки новых бактериоцинов, синтезируемых штаммами L. lactis subsp. lactis разного происхождения, проведена их идентификация. Установлено, что антибиотический комплекс, синтезируемый гибридным штаммом F-116, представляет собой смесь биологически активных компонентов, относящихся к различным классам органических соединений: низина, а также веществ группы алкилароматических кетонов с широким спектром антибактериального действия. Природный штамм 194 образует комплекс биологически активных компонентов с низинподобным бактериоцином и низкомолекулярным алифатическим соединением, содержащим кетонную группу и обладающим широким спектром антимикробного действия. Антибиотические комплексы являются новыми, ранее не описанными природными соединениями, не имеющими аналогов в компьютерной базе данных природных биологически активных веществ BNPD.

5. Лактококки синтезируют новые бактериоцины параллельно росту продуцентов, они термостабильны, устойчивы в интервале рН от 2,0-4,0, чувствительны к специфическим ингибиторам синтеза белка, что позволяет отнести их к пептидным бактериоцинам. Быстрое проявление антимикробной активности может свидетельствовать о мембранном механизме их действия.

6. Получен новый препарат -- бактериоцин ЛГС широкого спектра антимикробного действия по отношению к патогенным и условно-патогенным бактериям, развивающимся в пищевом сырье при хранении, что позволяет рекомендовать его в качестве биологического консерванта. Проведены испытания по использованию бактериоцина для увеличения срока хранения охлажденного пищевого сырья, обработанного препаратом: срок хранения рыбы увеличен с 5 до 15 дней, мяса - до 45 суток (Акт опытно-промышленных испытаний от 19.09.2007 г.).

7. Выделенные новые природные штаммы бактериоцинобразующих лактококков, гибридный штамм F-116 и мутантные низинобразующие штаммы №10, 11, 25, 52, полученные в результате индуцированного мутагенеза, являются непатогенными, не обладают токсичностью в отношении лабораторных животных. Показана возможность использования L. lactis subsp. lactis штамма 194, обладающего широким спектром антимикробного, в т.ч. фунгицидного действия, в качестве консерванта для увеличения срока хранения сырокопченых колбас (Акт испытаний штамма 194 от 16.06.2006 г.), а гибридного штамма F-116 - для обессахаривания яичного белка с целью увеличения срока его хранения, что дает основание рекомендовать бактериоцинобразующие лактококки для использования в пищевой промышленности в качестве биоконсервантов.

бактериоцин штамм протопласт

Список работ, опубликованных по теме диссертации

Обзоры и главы в книгах.

1. Стоянова Л.Г., Лобзов К.И. Воробьева Л.И. Ферментирование яичного белка // ЦНИИТЭИ Минмясололпрома СССР. 1974. В.6.

2. Стоянова Л.Г., Егоров Н.С., Полин А.Н. Слияние протопластов у молочнокислых стрептококков // Антибиотики и медицинская биотехнология. 1987. № 2. С. 89-97.

3. Воробьева Л.И, Стоянова Л.Г., Алексеева М.А. Микробные метаболиты. Изд. МГУ. 1979. С. 88- 101.

4. Стоянова Л.Г., Егоров Н.С., Полин А.Н. Использование метода слияния протопластов в селекции продуцентов низина // Антибиотики и химиотерапия. 1988. №3. С. 203-210

5. Stojanova L.G., Egorov N.S. Alteration of the physiology biochemical properties of nisin prodicing Strains of Streptococcus lactis after protoplasting // “Ingredients and Additives for Food Industry”. 1990. Singapore. P. 24 - 39.

6. Стоянова Л.Г. Низин и его использование в пищевой промышленности // АгроНИИТЭИПП. 1992. № 11. С. 15-23

7. Егоров Н.С., Баранова И. П. Стоянова Л.Г. Низин. Условия образования, получение препарата // Антибиотики и химиотерапия. 1997. 42. №3. С.37-44.

8. Стоянова Л. Г. Молочнокислые бактерии // Практикум по микробиологии. Под ред. А. И. Нетрусова. М. Изд. Академия. 2005. С. 467 - 486.

Экспериментальные статьи.

9. Козлова Е.И., Стоянова Л.Г. Углеродный oбмeн веществ бактерий, выделенных из ризосферы люцерны овса // Вестник Московского Университет. 1975. № 1. С. 70-75.

10. Стоянова Л.Г., Лобзов К.И., Воробьева Л.И. Ферментация как способ повышения качества сухих яйцепродуктов // Мясная индустрия. 1979. № 12. С. 23-25.

11. Стоянова Л.Г. Воробьева Л.И. Использование микроорганизмов для консервирования яичного белка и повышения его биологической ценности // Микробиологическая промышленность. 1979. №5. С. 7-9.

12. Стоянова Л.Г., Лобзов К.И., Воробьева Л.И. Бактериальная ферментация яичного белка // Птицеводство. 1980. В.6. С. 25-27.

13. Стоянова Л.Г., Воробьева Л.И., Лобзов К.И. Обессахаривание яичного белка микроорганизмами // Прикладная биохимия и микробиология», 1979. Т. ХП. № 1. С. 629- 679

14. Стоянова Л.Г., Понамарева О.Я. Антибиотическая активность натурального кумыса и консервированного сублимационной сушкой // Молочная промышленность. 1982. № 4. С. 32-35

15. Стоянова Л.Г., Воробьева Л.И., Лобзов К.И. Влияние полифосфатов на физико-химические свойства яичного белка // Сб. Новое в технике и технологии птицеперерабатывающей промышленности. 1975. Труды ВНИИМП Минмясомолпрома СССР. Т. ХIХ. С. 70-76

16. Стоянова Л.Г., Лобзов К.И., Воробьева Л.И. Улучшение пенообразующей способности яичного белка при использовании его в кондитерской промышленности // Хлебопекарная и кондитерская промышленность. 1982. №2. С. 24-26

17. Стоянова Л.Г., Лобзов К.И., Воробьева Л.И. Меланоидинообразование в сухом яичном белке // Сб. Совершенствование технологических процессов переработки птицеводческого сырья. Труды ВНИИМП Минмясомолпрома СССР. М. 1982, С. 40-44

18. Stojanova L.G, Ponаmoriovа O.I., Spiridonov V.А. Аntibiotiche eigenshuften von kumys // XXI World's milk congress. M. I982. V. I. P. 22-26.

19. Стоянова Л.Г., Ивлева Т.И., Черепанова Е.И. Технологический процесс промышленного получения ацидофильной пасты и творога фруктового сублимационной сушки на базе сублимационной установки периодического действия. Труды ВНИИМП Минмясомолпрома СССР. 1982. С. 35-37

20. Шумков Е.Г., Стоянова Л.Г., Богданов В.С., Ладодо К.С. Перспектива использования кобыльего молока в детском и диетическом питании // Материалы докладов Симпозиума стран-членов СЭВ «Производство и применение диетических продуктов” М. 1983. C. 30-33.

21. Стоянова Л.Г., Полин А.Н., Егоров Н.С. Повышение чувствительности к лизоциму в целях получения протопластов // Биотехнология. 1987. Т.3. №4. С. 454-460.

22. Стоянова Л.Г., Егоров Н.С. Влияние некоторых аминокислот на рост молочнокислых стрептококков и процесс их протопластирования // Известия АН СССР. 1988. № 6. С. 892-899.

23. Стоянова Л.Г., Абрамова Л.А., Ладодо К.С. Кобылье молоко сублимационной сушки и возможность его использования при создании продуктов детского и лечебного питания // Вопросы питания. 1988. № 2. С. 64-67.

24. Стоянова Л.Г., Полин А.Н., Егоров Н.С. Некоторые аспекты получения стабильных протопластов у Streptococcus lactis // Сб. «Технология и техника сыроделия». Госагропром СССР. Барнаул. 1989. С. 79-82.

25. Стоянова Л.Г., Егоров Н.С. Изменение физиолого-биохимических свойств некоторых штаммов Streptococcus lactis после протопластирования и регенерации. Материалы докладов Всесоюзной научно-технической конференции «Интенсификация производства и повышение качества сыра». Барнаул. 1989. С. 140-142.

26. Stojanova L.G., Egorov N.S. The fusion of protoplasts of two unactive strains of Lactococcus lactis for obtaine of active nisin producing strain // J. Food Biotechnology. I990. V. L. №. I. P. 559-560.

27. Стоянова Л.Г., Егоров Н.С. Некоторые аспекты получения протопластов у молочнокислых стрептококков Streptococcus lactis с помошью лизоцима. // Прикладная биохимия и микробиология. 1990. Т. 26. № 4. С. 566-572.

28. Егоров Н.С., Баранова И.П., Стоянова Л.Г. Кудряшов В.Л. Разработка питательной среды для низинпродуцирующих стрептококков с использованием отходов ряда биотехнологических производств. // Антибиотики и химиотерапия. 1994. № 38. С. 10 - 13

29. Кудряшов ВЛ., Сергеева И.Д., Стоянова Л.Г., Задорожная Т.И., Дурицкая Л.И. Синтез биоконсерванта низина на отходах и вторичном сырье ряда биотехнологических производств // Биотехнология. 1995. № 12. С. 25 - 28.

30. Стоянова Л.Г., Егоров Н.С. Получение низинпродуцирующих штаммов методом слияния протопластов двух родственных штаммов Lactoсоссus 1асtis subsp. lactis, низкоактивных по синтезу низину. // Микробиология. 1998. Т. 67. № 1. С. 38-44

31. Стоянова Л.Г., Егоров Н.С. Сравнительная характеристика новых штаммов Lactococcus lactis subsp. lactis, полученных методом слияния протопластов // Микробиология. 1999. Т. 68. № 2. С. 235-240.

32. Stoyanova L.G., Savelieva N.V., Egorov N.S., Netrusov A.I. Regulation of synthesis of bacteriocin from fusant strain of Lactococcus lactis subsp.lactis F-II9. In book “Food Microbiology & Hygiene'99”. Vandhoven. The Netherland. 1999. P. 313-315.

33. Стоянова Л. Г., Аркадьева З. А. Сравнение способов хранения молочнокислых бактерий // Микробиология. 2000. Т. 69. №1. С. 98-104.

34. Стоянова Л.Г., Сультимова Т. Д., Нетрусов А. И. Влияние фосфата и углеводов на синтез низина Lactococcus lactis subsp. lactis штамм 194 // Вестник Московского Университета. сер. Биология. 2003. Т. 16. №4. С.17-22.

35. Стоянова Л.Г., Сультимова Т.Д., Нетрусов А. И. Создание банка лиофильных бактериоцинпродуцирующих молочнокислых бактерий // Цитология. 2004. Т. 46. № 10, С. 865-867.

36. Стоянова Л. Г. Левина Н.В. Регуляция синтеза бактериоцина рекомбинантного штамма Lactococcus lactis subsp. lactis F-116 компонентным составом среды // Микробиология. 2006. Т. 75. №3. С.286 -291.

37. Стоянова Л. Г., Сультимова Т.Д., Ботина С.Г., Нетрусов А.И. Установление таксономического положения новых бактериоцинпродуцирующих штаммов Latococcus lactis // Вестник Московского Университета. сер. Биология. 2008. (в печати).

38. Стоянова Л.Г., Сультимова Т.Д., Ботина С.Г., Нетрусов А.И. Выделение и идентификация бактериоцинпродуцирующих штаммов Lactococcus lactis subsp. lactis из свежего молока // Прикладная биохимия и микробиология. 2006. Т.42. № 5. С. 560-568.

39. Стоянова Л.Г., Шарма Среоши, Егоров Н.С. Вариабельность низинсинтезирующего дикого штамма Lаctococcus lactis subsp. lаctis II9 под действием ультрафиолетовых лучей // Антибиотики и химиотерапия. 2006. Т.51. №11-12. С. 11-17.

40. Дибирасулаев М.А., О.В. Бальшаков, Дибирасулаев Д.М., Стоянова Л.Г, Нетрусов А.И., Адылов А.В., Алигаджиева Л.М. Применение дополнительных к холоду технологических средств для увеличения срока хранения охлажденного мяса // Сб. материалов научно-практической конференции «Интеграция фундаментальных исследований - основа развития современных аграрно-пищевых технологий». Углич. 2007. С. 81-84.

41. Стоянова Л.Г., Федорова Г.Б, Егоров Н.С., Нетрусов А.И., Катруха Г.С. Сравнение свойств бактериоцинов некоторых штаммов Lactococcus lactis subsp.lactis // Прикладная биохимия и микробиология. 2007. Т.43. №6. С.677-684.

42. Стоянова Л. Г., Сультимова Т. Д., Строева А.Р., Нетрусов А. И. Микробиологическая характеристика нового штамма Lactococcus. lactis subsp. lactis К-205, выделенного из национального бурятского напитка курунги // Журнал микробиологии, эпидимиологии и иммунологии. 2008. №1. С.60-63.

Тезисы докладов.

43. Стоянова Л.Г., Воробьева Л.И., Лобзов К.И. Консервирование яичного белка бактериальным способом. Материалы ХVI Всемирного конгресса по птицеводству. М. I978. C 31.

44. Стоянова Л.Г. Увеличение срока хранения яичного белка с использованием пропионовых бактерий Материалы VI съезда. Всесоюзного микробиологического общества. Рига. 25 - 28 марта. 1980. Т.4.С. 74.

45. Стоянова Л.Г., Воробьева Л.И., Лобзов К.И. Направленное культивирование пропионовых бактерий в яичном белке. Ш Всесоюзная конференция «Теория и практика управляемого культивирования». Киев. 29 сентября - I октября 1981. Изд. Наукова думка. ч.1. С. 37-39.

46. Агафонычев В.П., Стоянова Л.Г., Лысов В.С_. Разработка промышленного процесса производства творога фруктового сублимационной сушки. Тезисы докладов научной конференции «Основные направления рационального использования обезжиренного молока, пахты и сыворотки», Ставрополь, октябрь 1981. С. 21-22.

47. Стоянова Л.Г., Зараев А.В., Никифоров Л.Л.. Консервирование кобыльего молока методом сублимационной сушки Тезисы докладов молодых ученых, Труды ВНИИМП Минмясомолпрома СССР. М. 1982. 15-18 июня. С. 21-22.

48. Стоянова Л.Г., Полин А.Н., Егоров Н.С., Захарова Г.М. Oсобенности культивирования низинпродуцирующих штаммов молочнокислых стрептококков связи с получением протопластов. Тезисы докладов Всесоюзной конференции. «Создание химико-фармацевтических препаратов биотехнологическими методами». М. 1985. С. 123-124.

49. Стоянова Л.Г., Полин А.Н., Егоров Н.С., Захарова Г.М. Техника получение и регенерации протопластов низинпродуцирующих штаммов. Тезисы докладов Всесоюзной конференции. «Создание химико-фармацевтических препаратов биотехнологическими методами.» М. 1985. С. 21-23.

50. Стоянова Л.Г. Получение и регенерация протопластов молочнокислых стрептококков. Тезисы докладов VП съезда ВМО «Достижения микробиологии - практике». Алма-Ата. апрель 1983. Т.2. С. 141.

51. Стоянова Л.Г., Полин А.Н., Егоров Н.С. «Особенности формирования протопластов низинпродуцирующих штаммов Streptococcus lactis. Материалы конференции «МГУ - Главмикробиопрому». 4-5 февраля 1985. С. 14-15.

52. Стоянова Л.Г., Полин А.Н., Егоров Н.С. в-галактозидазная активность молочнокислых стрептококков. Материалы Ш Всесоюзной конференции «Биосинтез ферментов микроорганизмами». Кобулети апрель. 198б. С. 149-150.

53. Стоянова Л.Г., Агафонычев В.П., Абрамова Л.А. Липиды кобыльего молока, обезвоженного сублимационной сушкой, Тезисы докладов. Всесоюзной конференции «Биохимия липидов». Алма-Ата. 1987. апрель. C. 216.

54. Стоянова Л.Г., Князева М.В., Захарова Г.М., Егоров Н.С. Использование клеточной инженерии для получения гибридных штаммов низин-продуцируюших молочнокислых стрептококков. Материалы Всесоюзной конференции «Биосинтез вторичных метаболитов», Пушино, 20-22 октября 1987. С. 89-90.

55. Стоянова Л.Г., Полин А.Н., Егоров Н.С. Спектральные характеристики и биологические свойства низина и низинподобных пептидов, продуцируемых Streptococcus lactis и их гибридами», Тезисы докладов Всесоюзной конференции «Разработка и применение антибиотиков немедицинского происхождения». М. 1987. С.

56. Стоянова Л.Г., Егоров Н.С., Омельченко М.V. Получение новых штаммов молочнокислых стрептококков Streptococcus lactis. Тезисы докладов Всесоюзнной конференции «Микроорганизмы - ингибиторы и стимуляторы роста животных и растений». октябрь. 1989. Ташкент. С. 184.

57. Stojanova L.G., EgorovN.S, Polin A.N. Preparation of protoplasts and their fusion to abtaining hybrides of nisin-producing strains of Streptococcus lactis. Symposium “Genetics and Products formation in Streptomyces and Bacillus”. 4-9 May .1987. DDR. Waimar. P.67.

58. Stojanova L.G., Egorov N.S, Polin A.N. Сell engineering for selection nisin-producing strains of Streptococcus lactis // Second Symposium on Lactic Acid Bacteriаs. The Netherlands. Wageningen. 1987. Sept. 22-25.

59. Stojanova L.G. Egorov N.S, Polin A.N. Effect of protoplasting on the physiology properties of some strains of Streptococcus lactis. Second International Symposium on Overproduction of microbial products. Сzechoslоvakia. 3-9 July. 1988. P.1987.

60. Stojanova L.G., Licov V., Polin А.N, Egorov N.S. Spectral Characteritics and Biological properties of nisin and similar nisin peptides producing Streptococcua lactis and their hybrids. 1-st Internaticnal Symposium of Chiral Molecules. Paris. France. 1988. 31 May-2 June. P. 43.

61. Stojanova L.G., Egorov N.S. Fusion of protoplasts of two inactive nisin-producing strain of Streptococcus lactis. Inter.Conference “Biotechnology and Food”. Stuttgart. February 20-24. 1989. P. 67.

62. Kudriayshov V.L, Stoyanova L.G., Zadorojnay T.I., Sergeeva I.D., Durizkay N.The biosynthesis of nisin on wastes of fermentative and alcoholic industries. «Научно-технический прогресс в перерабатывающих отраслях АПК». Москва, 16-18 мая. 1992. Р. 96-97.

63. Stoyanova L.G., Egorov N.S., Omelchenko M.V. The effect of selective components on the getting of nisin producing fusant strains L. lactis. The Forth Symposium of Lactic Аcid Bacteria. The Netherlands, I993. Sept.5-9. P.54.

64. Stoyanova L.G., Egorov N.S., Katrucha G.S., Fedorova G.M. Isolation and characterisation of new lantibiotics derived from fusant strain of Lactococcus lactis F-116. The 2-nd Workship оn Lantibiotics. Arnhem. The Netherlands. 20 - 23 Nov. 1994. P. 63

65. Кудряшов В.Л., Сергеева И.Д., Стоянова Л.Г. Пути повышения производства и применения низина. Научно-практическая конференция «Научные основы прогрессивных технологий хранения и переработки сельскохозпродукции для создания продуктов питания человека». Углич. 9-I2 октября. 1995. С. 270-272

66. Стоянова Л.Г., Шарма Среоши, Егоров Н.С., Получение высокопродуктивных штаммов низинпродуцирующих бактерий с помощью мутагенов. Конференция Северо-Кавказского региона «Современные достижения биотехнологии». Ставрополь. 20-22 сентября. 1995. С. 78.

67. Стоянова Л.Г., Егоров Н.С., Баранова И.П., Кудряшов В.Л. Использование отходов биотехнологических производств как основы ферментационных сред для получения низина // Конференция Северо-Кавказского региона «Современные достижения биотехнологии». Ставрополь. 20-22 сентября. 1995. С. 77.

68. Kudriayshov V.L, Stoyanova L.G., Sergeeva I.D., Zadorojnay T.I. Effectivity of production and application of nisin. Международная конференция «Прикладная биотехнология на пороге ХХI века». Москва. 13-15 апреля. 1995. Р. 145- I46.

69. Egorov N.S., Stoyanova L.G., Baranova I.P., Kozlova U.I. Optimithation of the temperature regimes for incubation of nisin, producing strains of Lactococcus lactis. Международная научно-техническая конференция «Пища. Экология. Человек». Россия. Москва. Декабрь. 1995. Р.76.

70. Stoyanova L.G., Egorov N.S., Kudriyschov V.L. Synthesis of biopreservative of nisin on the raw and wastes of biotechnological industries. Международная научно-техническая конференция «Пища. Экология. Человек». Россия. Москва. Декабрь. 1995. Р. 103.

71. Stoyanova L.G., Baranova I.P., Egorov N.S., Kudriyschov V.L. Effect of aeration on Lactococcus lactis. Международная научно-техническая конференция «Пища. Экология. Человек». Россия. Москва. Декабрь. 1995. Р. 41.

72. Кудряшов В.Л., Стоянова Л. Г., Сергеева И.Д., Задорожная Т.И. Области и эффективность применения консерванта-бактериоцина низина для производства продуктов питания повышенной пищевой и биологической ценности. 2-ая Всероссийская конференция. «Прогрессивные и экологически безопасные технологии хранения и комплексной переработки сельхозпродукции». Углич. I -4 октября. I996. C. 320-32I.

73. Stoyanova L.G., Egorov N.S. Synthesis of biopreservative ,by fusant strains of Lactococcus lactis subsp.lactis F-II9.Int. Symposium “ Biotechnology аnd Food”. Budаpest. Sept. I996.P.46.

74. Stoyanova L.G., Egorov N.S., Omeltchenko M.V. Intergenetic protoplast fusion involing Lactococcus lacis and Bacillus strain. Fifth symposium on Lactis acid bacteria: “ Genetic. Metabolism and application”. Veldhoven. The Netherlands. 1996. September. P. 12

75. Stoyanova L.G., Egorov N.S., Netrusov A.I. New food biopreservatives from fusant strains of Lactococcus lactis subsp.lactis // Ann. Nutr. Metabolit. Vienna. 2001. V. 45. № 1. P.558-559.

76. Stoyanova L G., Netrusov A.I., Egorov N.S. Bacteriocines from different strains of Lactococcus lactis subsp. lactis.18 th Int.ICFMH Symp. FOOD MICRO - 2002. Norwey. Lillihammer, August. 2002.H-36

77. Stoyanova L., Netrusov A.,. Egorov N, Sultimova T. New bacteriocin of Lactococcus lactis subsp. lactis for food safety. International Congress “Poverty Food & Health in Welfare”, July 1-4, Lisbon, Portugal, 2003, p. 121.

78. Stoyanova L.G., A.I. Netrusov, T.D. Sultimova, M.A. Dibirasulaev, D.M. Dibirasulaev. New bacteriocin from fusant strain of Lactococcus lactis for meat preservation. 19^th International ICFMH Symposium - FOOD MICRO 2004. September 12 -16, 2004, Slovenia, р.61.

79. Савельева Т.Н., Глухова Л.П., Праслова Н.Т., Стоянова Л.Г, Нетрусов А.И. Использование электромагнитного процесса для выделения низина. Всероссийская научная конференция «Мембраны-2004» (с международным участием). 4-8 октября 2004. М. С.168.

80. Стоянова Л. Г, Мохаммед Индрис С., Савельева Н.А. Селекция бактериоцин-продуцирующих штаммов Lactococcus lactis subsp. lactis с использованием техники слияния протопластов. Всероссийский симпозиум «Биотехнология микробов» (с международным участием). 20-23 октября, 2004. М. изд. МАКС Пресс. С. 85

81. Сультимова Т.Д., Стоянова Л.Г, Нетрусов А.И. Изучение физиолого-биохимических свойств бактериоцин-продуцирующего штамма 194 Lactococcus lactis subsp. lactis. Всероссийский симпозиум «Биотехнология микробов» (с международным участием). 20-23 октября 2004. М. Изд .МАКС Пресс. С. 87.

82. Стоянова Л. Г., Сультимова Т. Д., Нетрусов А. И. Создание банка лиофильных бактериоцинпродуцирующих молочнокислых бактерий. Материалы международной конференции «Сохранение генетических ресурсов» г. Санкт-Петербург. 19-22 октября. 2004. С. 865.

83. Sultimova T.D., Stoyanova L.G., Netrusov A.I. Isolation and characterization of Lactococcus lactis subsp. lactis from North Asian traditional fermented drink kurunga. 8'th Symposium on Lactic Acid Bacteria. The Netherlands, August 28 to September 1, 2005, Р. 123.

84. Сультимова Т.Д., Стоянова Л.Г., Ботина С.Г. Скрининг бактериоцинпродуцирующих штаммов Lactococcus lactis subsp. lactis // Тезисы Молодежной школы-конференции «Актуальные проблемы современной микробиологии», ИНМИ, 1-3 ноября 2005 г. // М., Изд-во Макс-Пресс, 2005 г. стр. 107.

85. Сультимова Т.Д., Стоянова Л.Г., Нетрусов А.И. Изучение антимикробного спектра действия национального молочнокислого напитка курунги // Тезисы из материалов Всероссийского симпозиума с международным участием “Автотрофные микроорганизмы” памяти академика РАН Е. Н. Кондратьевой, МГУ им. М.В. Ломоносова, биологический фак-т, 21-24 декабря 2005 г. // М., изд-во Макс-пресс,2005 г. C. 45.

86. Сультимова Т.Д. Изучение бактериоцинпродуцирующей активности у диссоциантов нового штамма 194 Lactococcus lactis subsp. lactis. // 10-я Пущинская школа-конференция молодых ученых 17-21 апреля 2006 г. // Пущино, 2006 г. C. 398.

87. Стоянова Л.Г., Е.С. Милько, Н.С. Егоров. Комбинированное действие ультрафиолетовых лучей и химических мутагенов на дикий бактериоцинобразующий штамм Lаctococcus lactis subsp. lаctis II9 и его протопласты. Пущино. 2006 г. C. 198.

88. Stoyanova L.G., Fedorova G.M., Katrucha G.S., Netrusov A.I. New antibiotical complex of Lactococci as a bopreservative.The International scientific and practical conference Biotechology. Water and food stuffs. Moscow. 2008. P. 182.

Изобретения.

89. Стоянова Л.Г., Лобзов К.И. Воробьева Л.И. Способ хранения яичного белка. а/с №5П928. Официальный бюллетень по делам изобретений и открытий. № 16. I976.

90. Стоянова Л.Г., Лобзов К.И. Воробьева Л.И. Новый способ консервирования яичного белка. а/с № 542501 Официальный бюллетень по делам изобретений и открытий.№ 2. 1977.

91. Стоянова Л.Г., Пушкарева Е.И. «Способ получения бактериального концентрата». а/с. №II566I4. Официальный бюллетень по делам изобретений и открытий. 1985.

92. Стоянова Л.Г., Егоров Н.С., Пятницына И.Н., 3адояна С.Б. Штамм Streptococcus lactis II9x- продуцент антибиотика-консерванта низина. № I55I744. Официальный бюллетень по делам изобретений и открытий. № 11. I990.

93. Стоянова Л.Г., Егоров Н.С. Штамм Streptococcus lactis F-116 - продуцент антибиотика низина. а/с. № 1687616.1991.

94. Стоянова Л.Г., Федорова Г.Б, Егоров. Н.С., Катруха Г.С., Нетрусов А. И. Штамм Lactococcus lactis subsp. lactis F-119- продуцент двухкомпонентного антибиотика LGS и способ получения антибиотика. Получено положительное решение на патент (заявка № 2007148649/13 (053309) от 28.12.2007).

Нормативно-техническая документация.

95. Лобзов К.И, Волик В. ,Стоянова Л.Г. «Порошок яичный ферментированный» Технические условия ТУ 49802-80 (взамен ТУ 49320-76 на опытную партию). Минмясомолпром, 1980.

96. Барминцев Н.,И, Мироненко М., Стоянова Л.Г. «Молоко кобылье. Требование при заготовках». Отраслевой стандарт ОСТ 46 128-82. Минсельхоз СССР. 1982.|

97. Стоянова Л.Г., Суворова Л.Г., Богданов В.С. Продукт сухой молочный «Кобомил», Технические условия ТУ 49 983-83. Минмясомолпром. 1983.

98. Кудряшов В.Л., Сергеева И.Д., Стоянова Л.Г. «Получение низина штаммом Lactococcus lactis №10 с помощью мембранной техники». Технические условия ТУ 10-0334585-25-93.

99. Стоянова Л.Г., Нетрусов А.И. Лабораторный регламент на процесс синтеза бактериоцина LGS гибридным штаммом Lactococcus lactis subsp. lactis F-116. ГУ ВНИХИ. МГУ. 2004.

100. Стоянова Л.Г., Сультимова Т.Д., Нетрусов А.И. Лабораторный регламент на ферментационный процесс синтеза бактериоцина штаммом Lactococcus lactis subsp. lactis 194. МГУ. 2005.

Размещено на Allbest.ru