Микроэкология полости рта и ее роль в этиопатогенезе стоматологических заболеваний у детей с хроническим гастродуоденитом: принципы комплексного лечения и профилактики

Совершенствование стоматологической помощи и обоснование концепции и алгоритма реабилитации у стоматолога детей различного возраста с хроническим гастродуоденитом на основании изучения микроэкологических особенностей различных биотопов полости рта.

Рубрика Медицина
Вид автореферат
Язык русский
Дата добавления 29.12.2017
Размер файла 497,9 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Во все возрастные периоды у больных детей сохраняется тенденция более высокого уровня встречаемости зубочелюстных аномалий и деформаций, но статистически значимой разницы не отмечается.

Установленные в результате исследования более интенсивные темпы регресса характеристик стоматологического здоровья у больных хроническим гастродуоденитом свидетельствуют о том, что факторы риска здоровью полости рта, сопровождающие данную соматическую патологию, оказывают выраженное влияние на ее состояние и способствуют в процессе онтогенеза прогредиентному течению стоматологических заболеваний. Определенная роль в регрессии признаков, характеризующих состояние твердых тканей зубов и пародонта у школьников с ХГД, так же принадлежит периоду пубертата, что согласуется с мнением И.В.Кобиясовой (2004).

С определенной долей уверенности можно сказать, что такие признаки, как:

· изменения СО различных отделов ПР в виде появления обильного налета, нарушения тургора, влажности и цвета,

· III степень активности кариозного процесса,

· появление кариеса на иммунных зонах зубов (оральные поверхности),

· поражение кариозным процессом резцов,

· выявление зубного камня у младших школьников,

должны рассматриваться в качестве стоматологических маркеров неблагоприятного прогноза динамики индивидуального уровня здоровья в процессе онтогенеза.

Микробиоценоз основных биотопов полости рта практически здоровых детей различного возраста

Изучение естественной микрофлоры отдельных локусов организма является важной задачей, т.к. несмотря на эволюционность ее формирования и условно принятые величины количества и качества, микробиоценозы человека подвержены существенным изменениям.

Первым этапом нашей работы явилось установление характера микробиоценоза 5 основных отделов ПР (ротовая жидкость, слизистая щеки и спинки языка, зубной налет и зубодесневой желобок) у практически здоровых дошкольников 4-6 лет и младших школьников (7 и10 лет) и старших школьников (подростки 12 и 15 лет).

Структура биоценоза ротовой жидкости (РЖ) у дошкольников 4-6 лет достаточно стабильна и немногочисленна, как в качественном, так и в количественном отношении Спектр микроорганизмов представлен 9 родами. Количество в 1 мл РЖ стрептококков, нейссерий, лактобацилл, пептострептококков и вейллонелл - от 6 до 7,8 lg КОЕ (рис.4).

Видовой состав доминирующей флоры биоценоза РЖ у младших школьников сохраняется, однако, пептострептококки регистрируются у всех детей, а энтеробактерии - у 4/5 школьников. С увеличением возраста определяется рост количества стафилококков, стоматококков и бацилл (на 1,6 - 2 lg КОЕ), грибов рода Candida (на 1,2 lg КОЕ), а количество лактобацилл снижается на 2,5 порядка (рис.4). У подростков (12 - 15 лет) по сравнению с младшими школьниками установлено снижение количества пептококков, микрококков и бацилл (соответственно, на 1, 1,46 и 2,4 lg КОЕ/мл) (рис.4).

Рис.4. Количество микроорганизмов в ротовой жидкости практически здоровых детей 4 - 6, 7-10 и 12-15 лет

У детей всех возрастных групп в 50 - 66,7% в РЖ выявляются грибы рода Candida в количестве, не превышающем 3 - 4,2 lg КОЕ/мл. Выделенные из РЖ микроорганизмы имеют узкий спектр ферментативной активности (гемолизин), а частота их выявления невысока. Цитотоксичности эти бактерии не проявляют. Определение протеинолитической активности микроорганизмов в РЖ у практически здоровых дошкольников и школьников свидетельствует об отсутствии дисбактериоза. Спектральных различий в микробиоценозе РЖ и эзофаго-гастро-дуоденальной области здоровых людей [В.В. Червинец, 2002] не наблюдается. Микроорганизмы встречались в ассоциациях с преобладанием стрептококков, стафилококков, микрококков, лактобацилл, пептококков, пептострептококков, вейллонелл и грибов рода Candida. Полученные данные согласуются с исследованиями Грудянова с соавт., (2006) и Hill M.J., (1985) о качественных и количественных характеристиках микроорганизмов в РЖ.

Спектр доминирующих микроорганизмов на СО щек у дошкольников представлен 3 родами: стрептококками, стафилококками и стоматококками. У младших школьников пептострептококки регистрируются в 92% (количество их возрастает на 1,6 lg КОЕ/см2), энтеробактерии встречаются в 2 раза чаще, но установлено снижение количества стоматококков, лактобацилл, аспергилл и грибов рода Candida (на 0,9-1,24 lg КОЕ/см2). Частота встречаемости и количество стрептококков, пептострептококков, стафилококков у школьников обеих возрастных групп практически не отличаются. У старших школьников реже регистрируют бифидобактерии, нейссерии и грибы рода Candida (на 7,6 - 16%), однако, количество их возрастает на порядок. Микроорганизмы обнаруживаются в ассоциациях от 2-х до 6-ти родов. Признаки патогенности у выделенных бактерий не установлены.

У младших школьников происходит учащение регистрации на слизистой спинки языка по сравнению с дошкольниками пептострептококков (в 2,6 раза), лактобацилл (на 17%) и вейллонелл (на 24,1%), которые переходят в доминирующие виды. Количество микроорганизмов, доминирующих родов, - от 2,8 до 4,8 lg КОЕ/см2 (рис.5). К подростковому возрасту на слизистой спинки языка увеличивается частота регистрации стрептококков и пептококков (на 28,6% и 9,8%) при незначительном падении их количества. В то же время возрастает количество лактобацилл и вейллонелл (на 0, 5 - 0,6 lg КОЕ/см2), грибов рода Candida (на 0,85 lg КОЕ/см2). Среди транзиторных родов встречаются бактероиды, порфиромонады и кандиды. Бактерий с признаками патогенности не обнаруживали, ассоциации микроорганизмов представлены пептострептококками, стрептококками, стафилококками, вейллонеллами, лактобациллами и др.

Рис.5. Количество микроорганизмов на слизистой оболочке спинки языка у практически здоровых детей 4-6, 7-10 и 12-15 лет

Структура биоценоза налета с поверхности зубов у дошкольников представлена 8 родами. Грибы рода Candida встречаются у 2/3 дошкольников и у 1/3 - регистрируются актиномицеты. Количество микроорганизмов в 1 г зубного налета, невелико (рис.6). У младших школьников в этом биотопе на 12 -24,1% увеличивается частота регистрации стрептококков и пептострептококков. В количественном отношении стрептококков становится почти на 2 порядка больше, появляются облигатные анаэробы (вейллонеллы, бактероиды, фузобактерии). У старших школьников растет частота встречаемости большинства родов микроорганизмов, кроме грибов рода Candida, для которых установлено снижение на 28% частоты выявления и на 1 lg КОЕ/г количества. Патогенных штаммов в данном биотопе не установлено. Микроорганизмы выделялись в ассоциациях от 4 до 10 родов.

Рис.6. Количество микроорганизмов зубного налета у практически здоровых детей 4-6, 7-10 и 12-15 лет

Резидентная флора зубодесневого желобка дошкольников представлена 3 родами бактерий (стрептококки, пептококки и энтеробактерии). Количество выявленных микроорганизмов незначительно. С увеличением возраста на 10 - 24% чаще регистрируют стрептококков, стафилококков, лактобактерий и пептококков. Рост частоты встречаемости сопровождается увеличением (на 0,5 - 0,7 lg КОЕ/г) количества стафилококков и лактобацилл и снижением на 1,3 lg КОЕ/г количества стрептококков. Количество строгих анаэробов увеличивается на 0,58 - 1 lg КОЕ/г. У старших школьников снижается частота выявления и количество стрептококков (на 14,3% и на 0,6 lg КОЕ/г), грибов рода Candida (в 2 раза, на 1 lg КОЕ/г), вейллонелл (в 2,5 раза и 1,3 lg КОЕ/г). Регистрируется увеличение встречаемости и количество лактобацилл, микрококков, пептострептококков, бактероидов, появляются актиномицеты, порфиромонады и бациллы. Количество микроорганизмов не превышает 4 lg КОЕ/г. Возрастная динамика изменения микробиоценоза зубодесневого соединения свидетельствует об увеличении микроорганизмов, обладающих протеолитической активностью, что значительно увеличивает риск и способствует развитию воспалительных и деструктивных поражений тканей пародонта.

Установленная структура микробного пейзажа в 5 основных отделах ротовой полости свидетельствует о наличии особенностей в каждом биотопе. Полученные качественные и количественные показатели могут быть использованы при анализе микробиоценоза соответствующего биотопа у детей различного возраста, как референтные показатели.

Характер микробиоценоза основных отделов полости рта практически здоровых детей при стоматологических заболеваниях

Изучение характера микробиоты различных отделов ПР при активном течении кариозного процесса и воспалении тканей пародонта имеет несомненный научный интерес и практическую значимость, т.к. позволит использовать в протоколах лечения и при проведении профилактических мероприятий индивидуально направленные подходы.

Декомпенсированное течение кариозного процесса у практически здоровых школьников сопровождается разнонаправленными изменениями частот регистрации и количества микрооранизмов в ротовой жидкости и преобладанием в микробиоценозе в значительном количестве (особенно у подростков) облигатных и факультатвных анаэробов и микроаэрофилов (рис.7).

Рис.7. Количество микроорганизмов в ротовой жидкости практически здоровых школьников 7-10 и 12-15 лет с декомпенсированным течением кариозного процесса

Так, у младших школьников установлено повышение частоты регистрации в РЖ энтеробактерий (на 17%), грибов рода Candida (на 5%). Количество стафилококков, стоматококков и лактобацилл увеличивается в среднем на 0,6-0,7 lg КОЕ/мл, а бацилл и вейллонелл снижается на 0,4-0,8 lg КОЕ. Появляется гемолитическая и лецитиназная активность у стафилококков и пептострептококков, количество которых достигает 7 lg КОЕ/мл. Размер зон просветления при определении протеолитической активности микроорганизмов составляет 6,5±0,44 мм (нормоциноз). В этом биотопе у подростков (12-15 лет) на 9,5% увеличивается частота регистрации грибов рода Candida, на 5-15% снижается частота выявления представителей доминирующих родов и наблюдается появление у 28,6% подростков стрептококков и стафилококков с признаками патогенности в количестве 6,9 lg КОЕ/мл. Средний размер зон просветления при анализе образцов РЖ на дисбактериоз - 7,2 ±0,44 мм (дисбактериоз 1 степени).

Характер установленных изменений биоценоза слизистых щеки и спинки языка при декомпенсированном течении кариозного процесса свидетельствует об избыточном росте условно-патогенных микроорганизмов, усиливающих молочно-кислое брожение (стрептококков, энтеробактерий и бактероидов; у подростков установлен рост стафилококков - на 5,8 порядка), наличии условий для их усиленного размножения и миграции в другие биотопы, что будет способствовать кислотному растворению эмали и лизису тканей пародонта. Признаки патогенности выявлены у стафилококков со СО щеки 14,3% подростков и у 28,6% детей этого же возраста со слизистой спинки языка.

При декомпенсированном течении кариеса в зубном налете выявленные изменения микробного биоценоза свидетельствуют о развитии в данном биотопе признаков дисбактериоза 1 - 2 степени. Так, у ПЗ младших школьников увеличивается на 14% частота регистрации стрептококков и лактобацилл, грибов рода Candida - в 1,6 раза, стафилококков - в 1,8 раза, пептококков, вейллонелл, стоматококков и коринебактерий - в 2 раза. Наблюдается увеличение на 1,1 порядка количества стафилококков и на 0,6 lg КОЕ/г - лактобацилл. Наличия факторов патогенности не установлено.

Спектр микроорганизмов зубного налета у подростков изменяется незначительно (рис.8). Снижается частота выявления лактобацилл и бифидобактерий. Грибов рода Candida и коринебактерии выявляют в 2 раза чаще, на 12,2 - 13,2% чаще изолируют стоматококков и порфиромонад. Зарегистрирован рост количества в 1 г налета стафилококков на 2,2 lg КОЕ, вейллонелл и лептотрихий - на 1,2 lg КОЕ, бифидобактерий, стрептококков, стоматококков и пептострептококков - на 0,4 - 0,8 lg КОЕ. У 14,3% ПЗ подростков с активным течением кариеса обнаруживают гемолитических стрептококков в количестве 5,3 lg КОЕ/г.

Рис.8. Спектр и частота встречаемости микроорганизмов зубного налета практически здоровых школьников 7-10 и 12-15 лет с декомпенсированным течением кариозного процесса

Декомпенсированное течение кариозного процесса у ПЗ школьников сопровождается изменениями биоценоза десневой жидкости, которое характеризуется снижением количества НМФ, ростом анаэробной флоры с выраженными протеолитическими свойствами. В этом биотопе у ПЗ младших школьников определяется увеличение на 14,3 - 21,4% частоты регистрации пептострептококков, коринебактерий, стрептококков, стафилококков, лактобацилл и стоматококков, у 14,3% школьников установлены стафилококки с гемолитической активностью. У подростков при этом виде стоматологической патологии в десневой жидкости увеличивается на 7-14,3% частота регистрации стафилококков, бифидобактерий, стоматококков и лептотрихий. Количественные изменения проявляются в увеличении в 1г десневого содержимого на 0,6 lg КОЕ пептококков, грибов рода Candida - на 1,35 lg КОЕ. У 14,3% подростков выявлены гемолитические пептококки и пептострептококки.

Наличие локализованного катарального гингивита приводит у ПЗ детей младшего школьного возраста к изменениям микробиоценоза ротовой жидкости, которые выражаются в увеличении регистрации на 8-9% нейссерий, пептококков, аспергилл, лептотрихий и ростом в 1 мл РЖ количества бацилл (на 1,6 lg КОЕ), стоматококков и микрококков (на 0,84 - 1 lg КОЕ), стафилококков, лактобацилл и вейллонелл (на 0,4 -0,6 lg КОЕ) (рис.9).

Рис. 9. Количество микроорганизмов ротовой жидкости практически здоровых школьников 7-10 и 12-15 лет с локализованным катаральным гингивитом

Бактерий с признаками патогенности не обнаруживается. Анализ протеолитической активности РЖ свидетельствует о сохранении в этом биотопе состояния нормоциноза. В РЖ подростков чаще на 9-16,5% выявляются пептострептококки, лептотрихии, лактобациллы, бациллы, вейллонеллы, микрококки и грибы рода Candida, в 2,7 раза реже выявляются стоматококки. Установлено увеличение в 8 раз количества в 1 мл РЖ энтеробактерий и стоматококков, в 11 раз - микрококков. Также зарегистрировано появление у 28,6% подростков этой группы стафилококков с признаками патогенности в количестве 5,5 ±0,65 lg КОЕ/мл. У подростков 12-15 лет с локализованным катаральным гингивитом при определении протеолитической активности микроорганизмов в РЖ размер зон просветления составляет 7,3±0,25 мм (1 степень дисбактериоза).

Результаты изучения микробиоценоза РЖ при воспалении десны свидетельствуют о выраженном снижении представителей НМФ, увеличении бактерий с протеолитической активностью и росте дрожжеподобных грибов рода Candida.

Микробиоценоз СО щеки при локализованном катаральном гингивите у младших школьников характеризуется увеличением в 1,3 -1,5 раза частоты выявления стафилококков и лактобацилл; на 1,1-1,2 lg КОЕ/см2 - количества стрептококков и аспергилл, а микрококков, грибов рода Candida и энтеробактерий - на 0,5- 0,7 lg КОЕ/см2. Появляются признаки патогенности у стафилококков 17% детей этой группы. В данном биотопе у 20% подростков появляются аспергиллы, на 16,4% чаще регистрируют вейллонелл и в 2,2 раза - грибов рода Candida. Снижается количество стафилококков, бактероидов, лептотрихий, вейллонелл; установлено увеличение в 2,5 раза количество лактобацилл, в 8 раз - стоматококов и в 4,5 раза - энтеробактерий. Бактерий с признаками патогенности на СО щек не выявлено.

На слизистой спинки языка у ПЗ школьников установлена более частая регистрация строгих анаэробов и бактерий с протеолитической активностью. В 7-10 лет достоверно чаще встречаются стафилококки, вейллонеллы, бациллы, микрококки, пептострептококки и энтеробактерии, у подростков в 2,2 раза возрастает регистрация пептострептококков, бацилл, лептотрихий и грибов рода Candida и снижается в 2,3 раза встречаемость стоматококков и энтеробактерий, в 1,6 раза - вейллонелл. При выраженном росте частоты выявления количество практически всех родов микроорганизмов имеет тенденцию к уменьшению, кроме пептострептококков и лактобацилл (повышение на 0,8 lg КОЕ/см2 и 1,5 lg КОЕ/см2, соответственно). У 16,7% бактерий рода Staphylococcus имеются признаки патогенности. Таким образом, СО спинки языка является резервуаром УПМ, которые могут мигрировать с поверхности языка в другие биотопы.

В налете с поверхности зубов у ПЗ младших школьников определяется увеличение в 2,3-2,4 раза частоты обнаружения вейллонелл, нейссерий, коринебактерий, фузобактерий и порфиромонад, на 21,4% - пептострептококков, на 2 lg КОЕ/г снижается количество нейссерий, а стафилококков, лактобацилл и микрококков - на 0,3-0,5 lg КОЕ/см2. В 12-15 лет в 2,2 раза чаще регистрируют грибы рода Candida и порфиромонады, снижается на 17,9% частота регистрации стафилококков, на 10,3-12,5% - пептококков, пептострептококков и бактероидов. Количественные изменения микрофлоры характеризуются ростом на 0,35 - 0,45 lg КОЕ/г стафилококков и вейллонелл, и на 1,2 lg КОЕ/г - лептотрихий. Признаков патогенности у бактерий не выявлено.

В содержимом зубодесневого соединения практически здоровых школьников возрастает частота встречаемости строгих и факультативных анаэробов. У младших школьников на 31% увеличивается частота выявления бактероидов, на 19-21,3% - грибов рода Candida и пептострептококков, на 9,6-14,3% - стрептококков, стафилококков, коринебактерий и лептотрихий. Частота выявления лактобацилл снижается на 9,5%. Количество микроорганизмов невысокое (рис.10).

Рис.10. Количество микроорганизмов в десневой жидкости практически здоровых школьников 7-10 и 12-15 лет с локализованным катаральным гингивитом

У подростков (12-15 лет) на 28,6% растет частота выявления стафилококков, на 7 - 9,6% - энтеробактерий, лактобацилл и бактероидов. Увеличивается на 1,35 lg КОЕ/г количество грибов рода Candida и уменьшается количество стафилококков, лактобацилл, энтеробактерий и стрептококков. Микроорганизмов с признаками патогенности в этом биотопе у школьников не установлено. Результаты исследования показывают, что при активном течении стоматологических заболеваний в основных отделах ПР наблюдаются изменения микробиоценоза, которые характеризуются избыточным ростом бактерий, появлением признаков патогенности, усиленным размножением условно-патогенных микроорганизмов с возможностью миграции в другие биотопы. Возникающие изменения обусловлены видом биотопа, характером и степенью тяжести стоматологической патологии и возрастными особенностями.

Особенности микробиоценоза основных биотопов полости рта у школьников с хроническим гастродуоденитом

Срыв адаптации при соматической патологии может быть обнаружен с помощью показателей, учитывающих и степень отклонения от средних значений, и степень нарушения их взаимодействия. Одним из таких показателей является характер микробиоценоза ПР, ведь бактерии, формирующие микробиоценоз, сосуществуют как единый механизм и отвечают на стресс изменением спектра, количества и повышением вирулентности. Актуальность изучения микробиоценоза полости рта у детей и подростков с хроническим гастродуоденитом обусловлена важнейшей ролью микрофлоры в расшифровке этиологии, прогнозировании течения и успеха лечения, как болезней ЖКТ, так и полости рта. В связи с этим нами был изучен микробиоценоз основных биотопов ПР у младших школьников (7-10 лет) и старших школьников (подростки 12-15 лет) с ХГД, а также особенности микробиоценоза этих биотопов при декомпенсированном течении кариозного процесса и катаральном гингивите.

Микробиоценоз ротовой жидкости школьников 7-10 лет с ХГД представлен 15 родами микроорганизмов и 1 семейством энтеробактерий (табл.4). Количество доминирующих видов микроорганизмов значительно превышало 4 lg КОЕ/мл. Бактерии выделялись в ассоциациях от 5 до 9 (в среднем - 6,85± 0,55) родов. Изменение микробиоценоза РЖ у больных детей этого возраста по сравнению с ПЗ характеризуется увеличением на 23,8% частоты встречаемости и на 0,4 lg КОЕ количества в 1мл РЖ стафилококков, на 11,9-15,4% микрококков и бацилл (количество снижается на 1 lg КОЕ). У больных детей отмечается снижение в 1,7-1,8 раза нейссерий и грибов рода Candida, вейллонелл - в 1,4 раза. Установлено уменьшение на 1 lg КОЕ/мл количества бифидобактерий; количество коринебактерий и энтеробактерий увеличивается на 0,7 lg КОЕ/мл. У трети младших школьников с ХГД выявляются стафилококки с гемолитической и лецитиназной активностью (количество 5,5 lg КОЕ/мл), а у 10% больных детей в этом биотопе выявляются стрептококки и пептострептококки с гемолитической активностью (количество в 1 мл - 5,6-6,3 lg КОЕ). В отличие от ПЗ детей у больных школьников регистрируются (хоть и при небольшой частоте) клостридии и порфиромонады в количестве 5,5 lg КОЕ/мл. При определении протеинолитической активности микроорганизмов РЖ зона просветления составляет 7,8±0,30 мм (1 степень дисбактериоза).

У младших школьников с ХГД на СО щек определяется нарушение структуры биоценоза, проявляющееся в изменении количества представителей НМФ, увеличении количества строгих анаэробов, появлении представителей УПМ и резидентных микроорганизмов с признаками патогенности, что может приводить к нарушению колонизационной резистентности слизистой оболочки ПР. В этом биотопе у больных школьников 7-10 лет выделено 13 видов микроорганизмов и 1 семейство энтеробактерий.

Таблица 4

Структура микробиоценоза, частота встречаемости и количество микроорганизмов в ротовой жидкости у школьников с хроническим гастродуоденитом

возраст

7-10 лет

12-15 лет

Микроорганиз

мы

Структура биоценоза

Частота встречаемости (%)

Количество

(lg КОЕ/мл)

Структура биоценоза

Частота встречаемости (%)

Количество

(lg КОЕ/мл)

Доминирующие

Стрептококки

Пептострептококки

Стафилококки

Лактобациллы

Микрококки

Энтеробактерии

95,2±2,4

90,5±2,25

90,5±3,0

66,7±2,15

57,1±3,0

48,0±2,0

6,60±0,33

6,80±0,45

5,60±0,67

4,40±0,54

4,10±0,28

4,60±0,30

Пептострептококки

Стафилококки

Стрептококки

Вейллонеллы

92,0±2,9

92,0±3,0

88,00±1,95

48,0±2,7

7,10±0,28

5,70±0,33

6,84±0,44

5,90±0,20

Добавочные

Пептококки

Кандиды

Бациллы

Вейллонеллы

42,9±2,7

38,1±3,2

28,6±3,6

28,60±2,75

6,20±0,42

3,60±0,21

4,70±025

5,70±0,22

Пептококки

Кандиды

Энтеробактерии

Лактобациллы

Микрококки

44,0±3,4

44,0±2,5

44,0±2,3

40,0±3,2

36,0±2,75

5,80±0,19

3,700±0,22 4,90±0,34 4,30±0,45 3,30±0,28

Транзиторные

Стоматококки

Клостридии

Нейссерии

Коринебактерии

Порфиромонады

Бифидобактерии

19,1±3,4

9,5±2,8

4,76±1,7

4,76±1,5

4,76±1,8

4,46±2,00

5,50±0,46

5,50±0,33

6,10±0,26

5,00±0,30

5,60±0,26

5,70±0,41

Бациллы

Нейссерии

Стоматококки

Порфиромонады

20,0±3,1

16,00±1,75

12,00±2,45

4,00±1,45

4,70±0,76

5,30±0,44 4,60±0,36 6,30±0,23

Количество микроорганизмов не превышало 4 lg КОЕ/см2, ассоциации представлены от 4 до 9 (в среднем - 6,21± 1,14) родами бактерий. Наличие хронической патологии желудка и двенадцатиперстной кишки приводит к более частой регистрации лактобацилл, микрококков и бацилл, снижается на 15,5% частота регистрации нейссерий и пептострептококков, на 20-25% - стрептококков и грибов рода Candida и в 2,3 раза - энтеробактерий. Как транзиторный род появляются актиномицеты. У младших школьников с ХГД на слизистой щек снижено на 0,4-0,7 lg КОЕ/см2 количество стрептококков, стоматококков, нейссерий, энтеробактерий и вейллонелл, на 1 lg КОЕ/см2 - грибов рода Candida. Гемолитическую и лецитиназную активность выявляли у стафилококков 14,3% больных детей младшего школьного возраста (1,13 lg КОЕ/см2) и гемолитическую у пептострептококков 9,5% школьников (2,78 lg КОЕ/см2).

На слизистой оболочке спинки языка у младших школьников с ХГД появляются неидентифицированные грамположительные нити (G+ нити) (табл.5). По сравнению с ПЗ детьми того же возраста происходит увеличение на 28,6% частоты регистрации стрептококков и на 33,4% - стафилококков, снижение частот выявления лактобацилл, грибов рода Candida, вейллонелл и стоматококков. Количество лактобацилл и стоматококков у больных детей выше (соответственно, на 0,47 lg КОЕ/см2 и 0,77 lg КОЕ/см2). Микроорганизмы представлены в ассоциациях от 4 до 9 родов (в среднем - 5,9±0,86) с преобладанием стрептококков, стафилококков, микрококков, лактобацилл, пептококков, пептострептококков, вейллонелл и бифидобактерий. У 38,1% больных детей этого возраста на СО спинки языка встречаются стафилококки с лецитиназной и гемолитической активностью (количество 3,54 ±0,40 lg КОЕ/см2) и у 4,76% больных - пептострептококки с гемолитической активностью (количество 4,7±0,23 lg КОЕ/см2). Сравнительный анализ структуры биоценоза СО спинки языка детей 7-10 лет с ХП ГДЗ свидетельствует о появлении строгих анаэробов с выраженными протеолитическими свойствами, бактерий с признаками патогенности и микроорганизмов, несвойственных данному биотопу.

Хроническая патология желудка и 12-перстной кишки приводит у школьников 7-10 лет к достаточно выраженному изменению структуры микробиоценоза зубного налета (табл.6). В этом биотопе встречаются актиномицеты, G+ нити и геликобактерии (у 4,8% в количестве 2,3 lg КОЕ/г). В количественном отношении превалируют анаэробы. Микроорганизмы выделяли в ассоциациях от 3 до 9 штаммов (в среднем - 6,43±0,44). В зубном налете у 19,1% больных детей обнаружены стафилококки с наличием гемолизина и лецитиназы в количестве 2,77±0,29 lg КОЕ/г. Сравнительный анализ микробиоценоза данного биотопа ПЗ и больных младших школьников показал, что у больных наблюдается увеличение в 3,4 раза частоты регистрации бацилл, в 2 раза - вейллонелл. Стрептококков, стафилококков и вейллонелл в 1 г налета выявляется на порядок меньше. Установлено снижение частоты выявления и количества лактобацилл (в 1,7 раза и на 0,4 lg КОЕ/г), грибов рода Candida (в 2,5 раза и на 0,4 lg КОЕ/г) и лептотрихий (в 5 раз и на 0,9 lg КОЕ/г).

Результаты исследования свидетельствуют, что в зубном налете у больных школьников 7-10 лет на фоне снижения количества НМФ происходит выраженный рост строгих анаэробов и ацидогенной флоры, появление признаков патогенности у стафилококков, регистрация G+ нитей в большом количестве и выявление в образцах геликобактерий. Активизации УПМ приводит к снижению рН среды, повышению концентрации внеклеточных микробных токсинов и ферментов, что потенцирует рост патологии твердых тканей зубов и тканей пародонта.

Содержимое зубодесневого соединения у детей в возрасте 7-10 лет, но разного уровня здоровья имеет выраженные микроэкологические особенности, проявляющиеся у больных ХГД школьников, учащением на 26-28,6% частоты выявления стафиллококков и пептококков, на 19,1% - лактобактерий, рост количества которых составляет 0,54 lg КОЕ/г. Стрептококки, бактероиды, энтеробактерии, грибы рода Candida, бифидобактерии и коринебактерии у больных школьников 7-10 лет выявляются реже, уменьшается количество бифидибактерий и грибов рода Candida (соответственно, на 0,48 lg КОЕ/г и 2 lg КОЕ/г). Заболевание накладывает отпечаток и на спектральные характеристики микробиоценоза этого биотопа. Так, почти в четверти образцов зарегистрировано наличие порфиромонад и у 14,3% - бацилл, а признаки патогенности (гемолитическая активность) присутствуют у стафилококков (частота выявления 9,5%, количество - 3,05 lg КОЕ/г) и у коринебактерий, бактероидов и пептострептококков (частота регистрации 4,76%, количество 3,7 lg КОЕ/г).

Таблица 5

Структура микробиоценоза, частота встречаемости и количество микроорганизмов на слизистой оболочке спинки языка у школьников с хроническим гастродуоденитом

возраст

7-10 лет

12-15 лет

Микроорганизмы

Структура биоценоза

Частота встречаемости (%)

Количество

(lg КОЕ/ см2)

Структура биоценоза

Частота встречаемости (%)

Количество

(lg КОЕ/ см2)

Доминирующие

Стрептококки

Стафилококки

Пептострептококки

Пептококки

100

90,50±3,45

85,70±2,00

71,4±2,75

4,32±0,40

3,76±0,31

4,76±0,56

3,94±0,40

Стафилококки

Пептострептококки

Стрептококки

Пептококки

92,00±2,75

92,0±1,8

76,0±3,3

68,00±2,65

3,70±0,37

4,90±0,33

4,88±0,43

3,83±0,32

Добавочные

Микрококки

Лактобациллы

Вейллонеллы

Энтеробактерии

Бациллы

47,60±2,50

42,90±2,90

38,10±3,15

38,02±3,40

33,30±2,75

2,63±0,23

3,27±0,34

4,08±0,21

3,40±0,19

2,45±0,64

Микрококки

Вейллонеллы

Лактобациллы

44,0±2,1

40,0±3,0

36,00±1,95

2,61±0,28

3,90±0,33

3,40±0,45

Транзиторные

Кандиды

Стоматококки

Бифидобактерии

Бактероиды

Порфиромонады

G+ нити

9,52±1,9

9,52±2,00

9,52±2,50

9,50±1,80

4,76±2,00

4,76±1,85

2,54±0,32

4,27±0,27

3,19±0,23

3,3±0,44

4,60±0,42

3,47±0,45

Кандиды

Энтеробактерии

Порфиромонады

Коринебактерии

Бифидобактерии

Стоматококки

G+ нити

Бактероиды

20,0±2,4

20,00±2,35

8,0±1,7

8,0±2,4

4,0±1,4

8,0±2,5

4,0±1,8

4,0±1,5

2,50±0,65

2,84±0,30

4,54±0,33

3,40±0,24

3,70±0,41

4,58±0,35

4,78±0,35

4,00±0,28

Таблица 6

Структура микробиоценоза, частота встречаемости и количество микроорганизмов налета с поверхности зубов у школьников с хроническим гастродуоденитом

возраст

7-10 лет

12-15 лет

Микроорганизмы

Структура биоценоза

Частота встречаемости (%)

Количество

(lg КОЕ/ г)

Структура биоценоза

Частота встречаемости (%)

Количество

(lg КОЕ/ г)

Доминирующие

Стрептококки

Стафилококки

Пептострептококки

Пептококки

85,7±3,4

76,2±3,0

76,20±2,85

71,40±1,95

2,93±0,32

2, 67±0,54

5,70±0,33

5,03±0,23

Стрептококки

Стафилококки

Пептококки Пептострептококки

Лактобациллы

92,0±3,4

84,0±3,5

76,0±3,0

72,0±2,34

72,0±2,25

3,92±0,32

3,20±0,60

5,00±0,44

5,00±0,37

3,2±0,4

Добавочные

Микрококки

Лактобациллы

Бациллы

Энтеробактерии

47,6±2,4

42,9±3,3

33,3±3,0

29,00±2,15

2,35±0,56

3,60±0,53

2,54±0,20

3,30±0,22

Микрококки

Энтеробактерии

Кандиды

Вейллонеллы

Бациллы

40,00±2,95

32,00±3,15

32,0±3,2

32,00±3,45

28,0±3,0

1,9±0,2

2,20±0,21

2,40±0,37

5,20±0,20

2,77±0,22

Транзиторные

Вейллонеллы

Нейссерии

Кандиды

Актиномицеты

Геликобактер

Бактероиды

G+ нити

Порфиромонады

19,1±2,5

9,52±3,00

4,76±2,15

4,76±2,20

4,76±2,00

8,0±2,8

9,52±3,20

14,3±2,4

6,10±0,46

1,75±0,44

2,26±0,28

2,90±0,24

2,60±0,32

5,50±0,35

5,03±0,44

6,30±0,45

Бактероиды

G+ нити

Порфиромонады

Лептотрихии

Коринебактерии

Бифидобактерии

Стоматококки

12,0±1,8

12,0±2,5

12,0±3,4

8,00±1,65

8,0±2,0

4,0±2,0

4,0±2,1

4,30±0,45

4,51±0,33

6,00±0,33

1,90±0,19

2,60±0,42

5,30±0,34

3,47±0,31

Результаты сравнительного анализа свидетельствуют, что у детей младшего школьного возраста с ХП ГДЗ в исследуемых биотопах ПР изменяется спектр и возрастает количество микроорганизмов с признаками патогенности, появляются микроорганизмы не свойственные нормобиоценозу ПР, т.е. во всех биотопах ПР формируются микробные ассоциации, которые потенциально могут привести к различным заболеваниям челюстно-лицевой области.

«Сложности» переходного периода роста, отягощенные наличием хронического заболевания желудка и двенадцатиперстной кишки, приводят к разнонаправленным изменениям микробиоценоза ПР у школьников в возрасте 12-15 лет.

В ротовой жидкости больных подростков 12-15 лет количество микроорганизмов, формирующий биоценоз, значительно превышало 4 lg КОЕ/мл (табл.4). У 44% больных подростков 12-15 лет выявляются стафилококки с гемолитической и лецитиназной активностью (количество 5,66±0,44 lg КОЕ/мл), у 4% - стрептококки и пептострептококки с гемолитической активностью (количество 5,70±0,38 и 7,70±0,55 lg КОЕ/мл, соответственно). Микроорганизмы представлены в ассоциациях от 2 до 10 (в среднем 6,33±1,71) штаммов.

Изменения микробиоценоза РЖ у подростков с ХГД в сравнении с ПЗ характеризуются увеличением частоты встречаемости в 2,9 раза пептококков, в 2,6 раза - бацилл, на 22,8% - стафилококков. Рост количества всех вышеописанных видов микроорганизмов так же статистически значимый. В тоже время в этом биотопе отмечается снижение частоты выявления в 1,9 раза - лактобацилл, на 21,2% - вейллонелл, на 17,5% - грибов рода Candida, на 9,8-12% - стрептококков и энтеробактерий. При анализе протеолитичекой активности бактерий установлен размер зоны просветления 8,5±0,35 мм (дисбактериоз 1 степени).

На слизистой оболочке щеки у больных подростков 12-15 лет количество идентифицированных бактерий ниже 3 lg КОЕ/см2. Микроорганизмы образовывали ассоциации от 3 до 9 (в среднем 5,92±0,7) штаммов. Стафилококки с лецитиназной и гемолитической активностью обнаружены у 20% обследованных в количестве 1,15±0,19 lg КОЕ/см2 и у 4% установлено наличие гемолитической активности у стрептококков и вейллонелл в количестве 1,14±0,19 и 2,6±0,22 lg КОЕ/см2, соответственно. В отличие от ПЗ сверстников у больных подростков на СО щек стрептококки, стафилококки, микрококки и энтеробактерии регистрируются на 14 - 20% чаще, но их количество на 1 см2 поверхности СО щеки снижается на 0,3 - 0,5 lg КОЕ, кроме стрептококков, его количество увеличивается на порядок. Наблюдается снижение регистрации в 1,8 раза вейллонелл, в 2,3 раза бактероидов, грибов рода Candida и коринебактерий, в 4,6 раза - стоматококков. Одновременно установлено снижение количества на 1 см2 СО щеки бактероидов (на 1,3 lg КОЕ), стоматококков (на 1,1 lg КОЕ). У 16% больных школьников выявлены порфиромонады.

Изучение количества и спектра микроорганизмов, населяющих слизистую оболочку спинки языка, у подростков 12-15 лет с ХГД показало, что в количестве выше 4 lg КОЕ/см2 со СО спинки языка изолировали стрептококков, пептострептококков, грампозитивные нити, порфиромонад, стоматококков (табл.5). В данном биотопе микроорганизмы встречались в ассоциациях от 4 до 9 (в среднем 5,92±1,65) штаммов (табл.5). Признаки патогенности (лецитиназная и гемолитическая активность) установлены у стафилококков 48% больных подростков (количество - 3,68±056 lg КОЕ/см2); у пептострептококков - 8% и у коринебактерий (гемолитическая активность) 4% школьников основной группы (количество, соответственно, 4,9±0,34 и 3,7±0,23 lg КОЕ/см2). При сравнении с характером данного биоценоза ПЗ подростков установлено, что при хроническом гастродуодените чаще и в большем количестве на 1 см2 СО регистрируют стафилококков (на 30,5% и 0,8 lg КОЕ) и пептококков (на 29,5% и 0,4 lg КОЕ), так же увеличивается частота выявления микрококков (в 2,9 раза), лактобацилл (на 12,9%) и грибов рода Candida (на 4,6%). Реже выявляются вейллонеллы, энтеробактерии, стрептококки, коринебактерии, бактероиды и стоматококки. Однако количество стрептококков, энтеробактерий, стоматококков, коринебактерий и бактероидов увеличивается на 0,5 - 1,4 lg КОЕ/см2, в 5 раз возрастает количество порфиромонад, а грибов рода Candida - снижается на 0,75 lg КОЕ. Изменения спектра микроорганизмов в этом биотопе характеризуются появлением с достаточно высокой частотой регистрации пептострептококков, бифидобактерий и G+ нитей.

В налете с поверхности зубов у подростков основной группы в количественном отношении превалировали (4,3-6 lg КОЕ/г) анаэробные стрептококки, порфиромонады, пептококки, бифидобактерии, вейллонеллы, G+ нити, бактероиды (табл.6). Ассоциации микроорганизмов в среднем образаваны 6,64 ±0,48 родами бактерий. С лецитиназной и гемолитической активностью выявлены стафилококки в количестве 3,0±0,28 lg КОЕ/г у 24% больных школьников, у 8% - пептококки (количество 5,30±0,47 lg КОЕ/г), у 4% - пептострептококки (количество 5,9±0,51lg КОЕ/г). Сравнительный анализ микробиоценоза налета с поверхности зубов школьников 12-15 лет с различным уровнем соматического здоровья выявил, что у больных подростков наблюдается увеличение частоты регистрации пептококков (на 14,5%), бацилл (в 3,6 раза) и грибов рода Candida (в 4,2 раза). В 1 г зубного налета определяется больше на 0,5 lg КОЕ пептококков, на 0,8 lg КОЕ - грибов рода Candida. Снижается частота выявления энтеробактерий и лептотрихий (в 1,9 раза), бактероидов (в 3,84 раза), бифидобактерий (в 5,8 раза) и стоматококков (в 7,7 раза) и количество энтеробактерий, стрептококков, вейллонелл, бифидобактерий и бактероидов (на 0,6-0,9 lg КОЕ) и лептотрихий - на 2,4 lg КОЕ.

Количество микрофлоры, колонизирующей зубодесневой желобок у больных старших школьников в пределах 4 lg КОЕ/г и менее. Бактерии образуют ассоциации (в среднем 5,88±0,35 рода). У 12% школьников 12-15 лет с ХГД в содержимом зубодесневого желобка встречаются стафилококки с гемолитической активностью (количество 3,21±0,30 lg КОЕ/г), у 8% - пептострептококки и пептококки (количество 4,2±0,28-3,0±0,34 lg КОЕ/г), у 4% - вейллонеллы (3,8±0,40 lg КОЕ/г) с признаками патогенности. Разница биоценоза зубодесневого желобка ПЗ и больных ХГД подростков проявляется в учащении регистрации у больных - стрептококков, стафиллококков, грибов рода Candida и вейллонелл и увеличении в 1 г десневой жидкости количества стрептококков, вейллонелл и порфиромонад (на 0,7-0,84 lg КОЕ/г). Энтеробактерии и бактероиды у старших школьников с ХГД выявляются реже и в меньшем количестве, чем у ПЗ. Заболевание накладывает отпечаток и на спектральные характеристики микробиоценоза этого биотопа (в половине проб зарегистрировано наличие пептококков, у 8% - G+ нитей). Анализ характера микробиоценоза зубодесневого желобка у больных подростков свидетельствует о наличии изменений, способствующих развитию и прогрессированию, как воспалительных, так и деструктивных процессов в этой области ПР и характеризует ситуацию, как дисбактериоз 1-2 степени.

Сравнение структуры микробиоценоза различных отделов ПР у школьников с хроническим гастродуоденитом с увеличением возраста и длительности соматического заболевания так же выявило ряд особенностей.

Изменения микробного пейзажа РЖ проявляются увеличеним количества порфиромонад (на 0,7 lg КОЕ/мл) и частоты регистрации вейллонелл (на 20%), нейссерий (на 11,2%), стафилококков с признаками патогенности, снижением регистрации лактобацилл. Пептострептококки с признаками патогенности у подростков выявляются реже, хотя их количество увеличивается на 1,4 порядка.

Увеличение длительности соматического заболевания и возрастные физиологические изменения приводят на слизистой оболочке щек к учащению выявления стрептококков, стафилококков, пептострептококков, вейллонелл и энтеробактерий, у 16% больных подростков появляются порфиромонады. В этом биотопе на 5,7% чаще выявляют стафилококков с гемолитической и лецитиназной активностью, появляются стрептококки и вейллонеллы, но исчезают пептострептококки с признаками патогенности.

На СО спинки языка с увеличением возраста школьника с ХГД наблюдается увеличение частоты регистрации грибов рода Candida (в 2,1 раза), порфиромонад (в 1,7 раза) и увеличение выявления стафилококков и пептострептококков с признаками патогенности, к 12-15 годам у 7,7 - 15% больных на СО спинки языка определяются нейссерии, лептотрихии, а так же коринебактерии с признаками патогенности. Выявленные особенности свидетельствуют о достаточно выраженном изменении микроэкологии слизистых, приводящему к снижению колонизационной резистентности и возможности роста воспалительных поражений в ПР.

В зубном налете возрастные изменения микробиоценоза у школьников с ХГД проявляются в росте частоты выявления грибов рода Candida (в 6,7 раза), на порядок увеличивается количество стрептококков; но на 0,9 -1 lg КОЕ/г снижается количество энтеробактерий и вейллонелл. Стафилококков с признаками патогенности с увеличением возраста становится больше. Количество G+ нитей и порфиромонад возрастает до 4,5-6 lg КОЕ/г. Следует отметить, что в зубном налете у больных ХГД школьников 7-10 лет в ассоциациях выделяется H.pylori.

В десневой жидкости с возрастом чаще регистрируют стрептококков, стафиллококков и вейллонелл, частота выявления грибов рода Candida становится больше в 7,6 раза, а количество - в 10 раз. Появляются признаками патогенности у пептококков и вейллонелл, а частота выявления стафилококков и пептострептококков с признаками патогенности возрастает.

Выраженные изменения микробиоценоза различных отделов ПР, развивающиеся у школьников с увеличением возраста и длительности заболевания, характеризуют снижение активности компенсаторных и адаптационных реакций и отсутствие возможностей противостоять микробной агрессии в связи с нарушением колонизационной резистентности. Все вышеперечисленные изменения способствуют росту воспалительных поражений СОПР, активизации процессов деминерализации эмали и снижению защитных свойств слюны, а также поддерживают патогенный микробный потенциал СО гастродуоденальной зоны ЖКТ.

Оценка обстоятельств и условий становления заболеваний ПР, возникающих на фоне хронического гастродуоденита, а так же морфофункциональные изменения на этапах их развития, позволяют сформировать взгляд на хронический гастродуоденит, как на заболевание с несколькими органами-мишенями, одной из которых является полость рта. Эта концепция позволит обеспечить научно обоснованный подход к методам диагностики, терапии и реабилитации стоматологических заболеваний у детей с этой патологией, основным объектом воздействия которых должна стать ПР, как целостная экосистема.

Характер микробиоценоза основных отделов полости рта школьников с хроническим гастродуоденитом при стоматологических заболеваниях

Декомпенсированное течение кариозного процесса у школьников с ХГД характеризуется выраженными изменениями микробиоценоза всех основных отделов ротовой полости.

В ротовой жидкости детей 7-10 лет с ХГД и декомпенсацией кариозного процесса (рис.11) возрастает на 11-23% частота регистрации лактобацилл, грибов рода Candida, вейллонелл и бацилл, на 28% снижается - энтеробактерий. На 0,4-0,5 lg КОЕ/мл увеличивается количество вейллонелл и грибов рода Candida, снижается на 0,4 lg КОЕ/мл количество лактобацилл и пептострептококков, на 0,9 lg КОЕ/мл - бацилл и на 2 порядка - энтеробактерий. Признаки патогенности (лецитовителаза) обнаруживали у стафилококков 20% обследованных в количестве 5,0±0,44 lg КОЕ/мл. При анализе образцов РЖ школьников данной группы был установлен размер зоны просветления - 8,4±0,40 мм (дисбактериоз 1 степени).

Рис.11. Количество микроорганизмов в ротовой жидкости школьников 7-10 и 12-15 лет с ХГД и декомпенсированным течением кариозного процесса

В ротовой жидкости больных старших школьников с III степенью активности кариеса признаки патогенности были обнаружены у стафилококков 50% обследованных детей и у стрептококков 6,25% школьников (количество 5,70±0,40 lg КОЕ/мл). Количество значительного числа выделенных микроорганизмов составляло 4,5-7,1 lg КОЕ/мл (рис.11). При анализе протеолитической активности микроорганизмов РЖ установлен размер зоны просветления 8,80±0,45 мм (дисбактериоз 1 степени). При наличии декомпенсированного течения кариеса у подростков с ХГД снижается на 15-17% частота выявления вейллонелл и лактобацилл, на 6% чаще встречаются признаки патогенности у стафилококков.

Хронический гастродуоденит у детей 7-10 лет, имеющих декомпенсированное течение кариеса зубов, приводит к изменениям микробиоценоза СО щек (рис.12), проявляющихся ростом от 15% до 30% частоты всех доминирующих видов. На 0,4-0,7 lg КОЕ/см2 повышается количество пептококков, энтеробактерий и вейллонелл, на 1,5 lg КОЕ/см2 увеличивается количество нейссерий, однако количество лактобацилл снижается на 0,5 lg КОЕ/см2. Признаки патогенности обнаруживаются у стафилококков 20% обследованных в количестве 1,1±0,18 lg КОЕ/см2. При сходной степени активности кариеса у больных младших школьников по сравнению с ПЗ в 2 раза чаще выявляются лактобациллы, в 3 раза - пептококи и на 29% - стафилококки.

Наличие у подростков с ХГД III степени активности кариозного процесса характеризуется увеличением на СО щек на 7-10% частоты регистрации бифидобактерий, вейллонелл, пептострептококков и лактобацилл, на 19% - пептококков. Повышается на 0,6 lg КОЕ/см2 количество коринебактерий и на 1,35 lg КОЕ/см2 - бактероидов (рис.12). Выраженных изменений в регистрации признаков патогенности микроорганизмов СО щек при декомпенсированном течении кариеса у больных подростков не установлено.

Рис.12. Спектр и частота встречаемости микроорганизмов на слизистой оболочке щеки школьников 7-10 и 12-15 лет с ХГД и декомпенсированным течением кариозного процесса

Различия микробиоценза СО щек больных и ПЗ подростков с III степенью активности кариеса проявляются появлением в спектре у больных пептококков, коринебактерий, порфиромонад и бифидобактерий; ростом частоты регистрации лактобацилл, стрептококков, энтеробактерий, микрококков и стафилококков и количества на 0,5 lg КОЕ/см2 нейссерий и микрококков, снижением лактобацилл, бацилл, энтеробактерий, стоматококков, и стафилококков. Частота встречаемости стафилококков с признаками патогенности у этой группы школьников выше в 1,3 раза по сравнению с ПЗ.

...

Подобные документы

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.