Разработка состава и технологии мази с эфирным маслом иссопа для лечения простудных заболеваний

Соцветия богаче эфирным маслом, чем листья и стебли. Наибольшее количество эфирного масла содержится в начале цветения иссопа [114, 115, 116, 117].

Эфирное масло иссопа - это бесцветная или желтовато-зеленая жидкость со сладковатым, камфорным ароматом и пряным оттенком. Хорошо смешивается с маслом лаванды, розмарина, мирта, лавра, шалфея, мускатного шалфея, герани и цитрусовых [118, 119].

Диапазон содержания компонентов эфирного масла иссопа: мирцен 1,0 - 2,0%; лимонен 1,0 - 4,0%; пинокамфон 5,5 - 17,5%; изопинокамфон 34,5 - 50,0%; миртенилметиловий эфир 1,0 - 3,0%; спатуленол 0,5 - 2,0%; в-бурбонен 1,5 - 2,0%; в-кариофилен 1,0 - 3,0%; алоаромадендрен 1,5 - 2,0%; гермакрен D 2,0 - 3,0%; в-кадинен 2,0 - 2,5% [120, 121].

Кроме того, из эфирного масла иссопа лекарственного выделены другие терпены, такие как пинен, камфен и цинеол [122, 123].

Химический анализ разных партий эфирного масла показал, что в основном она состоит из цис-, транс-пинокамфона и пинокарвона, в меньших количествах присутствуют гермакрен D, бицикло гермакрен, елемол и спатуленол [124, 125].

Проведенные исследования показали, что содержание элементов в иссопе лекарственного составляет: железо 0,05%, калий 1,00%, натрий 0,02%, кальций 1,00%, магний 1,00%, алюминий 0,10%, силиций 0,30%, медь 0,0005%, цинк 0,002%, серебро 0,00001%, стронций 0,030%, фосфор 0,10%, марганец 0,020%, титан 0,010% [126, 127].

Из травы иссопа лекарственного выделены водорастворимые полисахаридные комплексы, пектиновые вещества, гемицеллюлоза А и В. Выход полисахаридов из сухого сырья иссопа лекарственного составляет 13,6 %. В комплексе выявлено 6 веществ моносахаридного характера - глюкоза, галактоза, арабиноза, рамноза, глюкуроновая и галактуроновая кислоты, с преимущественным содержанием глюкозы и галактозы. Выход пектиновых веществ составляет 13,9 % от массы воздушно-сухого сырья. В пектиновых веществах иссопа лекарственного обнаружены арабиноза, галактоза, глюкоза, ксилоза и галактуроновая кислота. Выход гемицеллюлозы А и В - соответственно 7,16 и 2,76 % [128].

Во многих странах иссоп используется в научной медицине (Франция, Португалия), а в Украине растение неофициальное. Государственная служба здравоохранения Германии отклонила применение данного растения, так как немцы считают, что целебное действие препаратов иссопа лекарственного еще недостаточно доказано [129, 130, 131].

Препараты иссопа лекарственного (настои, настойки, различные сборы) оказывают спазмолитическое, антисептическое, отхаркивающее, противовоспалительное, вяжущее действие. Чаще всего используют в виде сборов при хронических катарах верхних дыхательных путей (бронхиты, трахеиты, ларингиты) и хронических обструктивных заболеваниях легких (бронхиальная астма, хронический обструктивный бронхит, бронхиолит, эмфизема). Особенно хорошее действие оказывает при назначении его детям и пожилым людям, эффективен при старческом кашле, вызванном постоянной сухостью слизистой оболочки. Применяют также для лечения гипоацидного и анацидного гастритов (стимуляция выделения желудочного сока), хронических колитов, метеоризма, стенокардии, ревматизма, анемии, невроза, пиелонефрита. Наружно целесообразно применять для полоскания (стоматиты, фарингиты, ларингиты) [131].

Имеются сведения о эмбриотоксическом действии масла иссопа. Это масло обладает высоким содержание кетонов (туйон, пулегон, камфора, пинокамфен) в своем составе, а кетоны проявляют гормональную активность и способны стимулировать маточное кровотечение. Фенолы, которые проявляют сильное иммуностимулирующее, мочегонное и гепатотоксичное действие, также опасны при беременности, как и альдегиды, которые сильно раздражают слизистые оболочки и активно влияют на нервную систему [131].

Иссоп хорошо помогает при воспалительных процессах, синяках, порезах, дерматите, экземе. Облегчает мышечную боль, нормализует кровяное давление. Это отменное средство при простуде, катаре, кашле и тонзиллите. Адаптирует, повышает выносливость, дарит ощущение тепла и комфорта. Лечит мокнущую экзему, выводит мозоли и бородавки. Нормализует работу легких, устраняет воспалительные процессы, оказывает отхаркивающее действие (при бронхите, пневмонии, бронхиальной астме). Улучшает работу сердечно-сосудистой системы, устраняет явление ишемии. Оказывает выраженную противоаллергическую активность при сыпях, сенной лихорадке, аллергическом рините. Устраняет желудочные и кишечные колики, газообразование и атонию кишечника. Способствует растворению камней в почках [131].

Препараты надземной части растения применяют для уменьшения потоотделения, особенно у больных туберкулезом легких и у женщин в климактерическом периоде, при хронических воспалительных заболеваниях желудочно-кишечного тракта, а также в виде полосканий [131].

Психоэмоциональное действие масла иссопа - адаптирует к внешним факторам, повышает выносливость и психоэмоциональную устойчивость, устраняет растерянность, безволие, повышает концентрацию внимания, повышает коммуникабельность и независимость от чужого мнения. Способствует гармонии преобразования жизненного опыта в жизненную энергию [131].

1.4 Биофармацевтические аспекты технологии мягких лекарственных форм

Фармацевтические факторы (путь введения ЛС, вид ЛФ, физико-химическое состояние АФИ, вспомогательные вещества, технология изготовления) определяют эффективность и безопасность ЛС и являются базисом фармацевтической разработки [132, 133, 134].

Выбор лекарственной формы. Состав и конструкция ЛФ являются компромиссом между жёсткими требованиями к ЛФ и уровнем развития современных технологий. Требования, предъявляемые к ЛФ, зависят от вида заболевания, локализации очага патологического процесса, свойств АФИ, способа введения препарата, наличия дополнительных требований [135, 136].

На сегодняшний день номенклатура ЛФ особенно не расширилась, но появились разновидности с модифицированным высвобождением АФИ (пролонгированным или ускоренным). Исследования в области создания ЛФ с заданными фармакокинетическими характеристиками привели к изобретению множества различных типов микро- и наноносителей АФИ - систем доставки лекарств [137, 138]. Анализ типов и структур наноносителей, а также классификация вспомогательных веществ для систем доставок по их функциональному признаку уже приводятся в работах ученых [134, 135, 139, 140].

Таким образом, биофармацевтическое развитие понятия ЛФ в настоящее время дает возможность для создания ЛС с высокими характеристиками эффективности и безопасности.

Физико-химические свойства АФИ. Это касается измельченности, полиморфизма, кристалличности, оптических свойств АФИ. Химическая модификация вещества значительно сказывается на кинетике всасывания и высвобождения его из организма [141]. Для изменения свойств АФИ используют общие методы фармацевтики: образование солей, сокристаллов, гидратов, сольватов, полиморфных модификаций [142, 143].

В последнее время субстанции многих АФИ выпускают на рынок в виде твердых дисперсий (дисперсия вещества в водорастворимом носителе), в которых в качестве носителя используют полиэтиленгликоль, поливинилпирролидон (ПВП), гидроксипропилметилцеллюлозу, поливиниловый спирт и др. [144].

Вспомогательные вещества, их природа и количество оказывают влияние на терапевтическую активность АФИ и физико-химические характеристики ЛФ в процессе их изготовления и хранения [145, 146, 147, 148].

Международные фармацевтические организации (ICH, IPEC, FDA) предложили отнести вспомогательные вещества наряду с АФИ к особой градации веществ «для фармацевтического применения», а контроль их качества осуществлять по соответствующим фармакопейным статьям [144].

В настоящее время в мире при производстве ЛС используют более 500 наименований вспомогательных веществ. Большая часть из них включена в национальные и международные фармакопеи (Eur.Ph., Br.Ph., USP, JP) или национальные справочники (Inactive Ingredients Guide's of the FDA, Handbook of Pharmaceutical Excipients и другие) [144].

Особенно широк ассортимент вспомогательных веществ в технологии МЛС, где их значение и роль в качестве основ весьма важны и разнообразны [149].

Известно несколько классификаций основ МЛФ, принцип построения которых имеет значение для способа их изготовления: это степень сродства свойств АФИ и основ, возможность растворения АФИ в основе. В соответствии с этим принципом все мазевые основы делят на три группы: липофильные, гидрофильные, липофильно-гидрофильные.

К липофильным (гидрофобным) основам относят: а) жировые основы (животные и растительные жиры - свиной жир, гусиный жир, говяжий жир, миндальное масло, абрикосовое, персиковое, подсолнечное, оливковое и др.), жиры гидрогенизированные (продукты промышленной переработки жиров и растительных масел); б) углеводородные основы (вазелин, парафин, петролатум, вазелиновое масло, нафталанская нефть, озокерит, церезин); в) силиконовые (полидиметилсиликоновая жидкость, полидиэтилсиликоновая жидкость, полиметилфенилсиликоновая жидкость, аэросил, эсилон - 4, 5, эсилон - аэросильная основа).

Общим недостатком жировых и углеводородных основ является лёгкая прогоркаемость на воздухе, особенно в присутствии воды. Фармакологическая индифферентность жиров находится в прямой зависимости от их свежести, прогорклые жиры раздражают кожу и слизистые оболочки. Кроме того, жирные основы имеют неприятный запах и пачкающие свойства, снижают скорость высвобождения АФИ, подвергаются микробной обсеменённости, являются дефицитными пищевыми продуктами и непригодны для приготовления мазей, содержащих щёлочи, оксиды и соли тяжёлых металлов.

Гидрофобные основы гарантированно обеспечивают форму МЛС, но сводят к минимуму динамические процессы, связанные с диффузией и высвобождением АФИ, в результате чего ЛС оказываются малоэффективными [150]. При использовании гидрофобных основ разработчики ЛС должны повышать эффективность препаратов за счет увеличения концентрации АФИ. Кроме того, такие основы препятствуют нормальному функционированию кожи, а в отдельных случаях применение мазей на вазелиновых основах категорически противопоказано.

Липофильно-гидрофильные основы: а) абсорбционные (сплавы липофильных основ с эмульгаторами (ланолином б/в, спермацетом, воском); б) эмульсионные (типа м/в, в/м). Однако эта классификация неполно отражает современные представления о вспомогательных веществах, т. к. одно и то же соединение может быть использовано в разных ЛФ [151].

Другая классификация разделяет вспомогательные вещества в зависимости от влияния на физико-химические характеристики и фармакокинетику ЛФ на такие группы: формообразующие, стабилизирующие, пролонгирующие, солюбилизирующие, корригирующие [152].

Но некоторые авторы исключают группу формообразующих веществ, поскольку формообразование, как правило, есть результат совокупного действия нескольких вспомогательных веществ с разными технологическими функциями [144].

Для практической фармации украинские ученые приводят обобщенную информацию свойств часто используемых эмульгирующих веществ на основе Международных фармакопей, с помощью которой можно целенаправленно подбирать вспомогательные вещества, учитывая медико-биологические требования к разрабатываемому препарату [153].

В качестве загустителей, структурообразующих и смягчающих веществ используют полиэтиленгликоль-400, эмульгатор № 1, ПЭО, ПВП-3, масло касторовое, глицерин, производные метилцеллюлозы [154].

В современной фармации широко используется микрокристаллическая целлюлоза, учитывая ее способность под воздействием високих сдвиговых напряжений в воде диспергироваться с образованием устойчивых гелеобразных дисперсий [155, 156]. Высокая химическая чистота и физиологическая инертность целлюлозы в сочетании с химической стойкостью, нерастворимость в воде и органических растворителях, отсутствие вкуса, запаха, окраски позволяют использовать его в качестве наполнителя, стабилизатора и эмульгатора в фармацевтической и косметической промышленности [157].

В настоящее время ведётся интенсивный поиск новых вспомогательных веществ с целью увеличения сроков годности препаратов. Добавление различных стабилизирующих веществ обеспечивает высокую эффективность ЛС в течении длительного времени, что имеет не только большое медицинское, но и экономическое значение, так как позволяет увеличить срок их годности [158].

Перспективными для разработки новых основ для МЛФ признаны гидрогели на основе редкосшитых акриловых полимеров. При нанесении на кожу такие гели образуют тончайшие гладкие пленки, обеспечивая пролонгированный эффект препаратов, более полно и равномерно высвобождают АФИ, хорошо распределяются по слизистой и кожной поверхности, оказывают охлаждающее действие, не обладают токсичностью и раздражающим действием. Аппликации препаратов на гидрогелевой основе эстетичны по внешнему виду, не растекаются, не пачкают одежду, легко смываются водой [159].

Фармацевтическая технология. Повышение растворимости АФИ в растворителях предполагает значительное увеличение их эффективности. Поэтому важным вопросом фармацевтической технологии является повышение растворимости труднорастворимых АФИ в воде и липидах, поскольку их биологическая доступность в значительной степени зависит от размера частиц и степени коагуляции. Чем меньше радиус частицы, тем меньше энергия адсорбции, которая выражает прочность закрепления частицы на межфазной поверхности. Поэтому слишком маленькие частицы не закрепляются на поверхности. Экспериментально показано, что частицы размером менее 100 нм закрепляются на поверхности в/м только в агрегированном виде [160]. Связь агрегации частиц и эмульсионной стабильности объясняется повышенными реологическими характеристиками межфазных пленок [161].

Размеры частиц влияют не только на транспортную функцию и специфичность АФИ, но и на скорость их выделения из организма при прочих равных условиях [162, 163].

Также повысить растворимость АФИ можно за счет использования сорастворителей (бензилбензоат, бензиловый спирт, пропиленгликоль (ПГ), ПЭО и др.), гидротропных средств (мочевина, натрия салицилат и др.), а также явления солюбилизации и комплексообразования [164].

Индийские ученые для повышения биодоступности труднорастворимых АФИ используют перспективную методику гомогенизации высоким давлением с целью получения наносуспензий. Наносуспензии состоят из чистого труднорастворимого в воде АФИ без матричного материала, суспендированного в дисперсии [165].

В Украины также работают в области создания твердых дисперстных систем. Так, учеными НМАПО имени П. Л. Шупика созданы комплексы немисулида, милоксикама, ибопруфена, полученные методом соосаждения с полиэтиленгликолем 6000, Колидоном 25, в-циклодекстрином, растворимость которых повышается по сравнению с чистыми субстанциями [166].

Важнейшей проблемой в фармацевтической технологии является стабилизация ЛС. Связано это с тем, что АФИ под воздействием химических (гидролиз, омыление, окисление, полимеризация и др.), физических (испарение, изменение консистенции, расслаивание, укрупнение частиц) и биологических (прокисание и др.) явлений изменяют свои свойства. С этой целью для стабилизации гомогенных МЛС широко используют различные химические (добавление стабилизаторов, антиоксидантов, консервантов и т. д.) или физические (использование неводных растворителей и др.) методы [167]. Для стабилизации гетерогенных лекарственных систем (суспензии, эмульсии) используют загустители и эмульгаторы в виде ПАВ и ВМС [167, 168].

Также для стабилизации дисперсных систем используют тонкодисперсные порошки, это обусловлено физико-химическими свойствами и явлениями (энергия абсорбции, капиллярное давление, статическое и электростатическое отталкивание между слоями, упругость сетки-структуры, образуемой твердыми частицами) [168, 169, 170, 171].

С другой стороны, для легко растворимых и адсобрирующихся ЛС проблема пролонгации времени высвобождения, снижения пиковых концентраций остается сложной задачей, для решения которой разработаны различные методы (создание контейнеров, химическая модификация и др.) [172].

Сегодня зарубежные ученые активно применяют передовые технологии создания наноэмульсий с использованием различных вспомогательных веществ. С помощью ультразвука производят наноэмульсии из лауриновой кислоты с размером капель масла около 100 нм. Используют также методику струи высокого давления для создания наноэмульсий кокосового масла [173, 174, 175].

Таким образом, развитие физики, химии, биохимии определяет стремительное развитие в области фармации. Варьируя различные сочетания вспомогательных веществ, можно регулировать силу и продолжительность терапевтического действия МЛС, регулировать биодоступность АФИ, влиять на их накопление в тканях и на процесс элиминации. Основная тенденция развития производства МЛФ связана с использованием все более эффективных АФИ, современных вспомогательных веществ и созданием на их основе комбинированных препаратов, предназначенных для лечения определенных заболеваний, учитывая их этиологию и патогенез.

Таким образом, можно сделать следующие заключения:

1. Местные антимикробные средства широко применяются в лечении инфекций ВДП и как дополнение к системной антибиотикотерапии, и как самостоятельные средства. Выбор оптимального препарата определяется спектром его антимикробной активности, отсутствием аллергенности и токсического эффекта.

2. Выявлено, что лидирующее положение по группам биологически активных веществ (БАВ) растений, входящих в состав фитопрепаратов для наружного применения, занимают эфиромасличные растения, на втором месте находится группа алкалоидсодержащего сырья, на третьем находится сырье, фармакологические эффекты которого обусловлены содержанием флавоноидных соединений, сырье, содержащее кумарины, смолы, кароти-ноиды и сапонины имеет сравнимый удельный вес.

3. Кроме бактерицидных свойств многие ароматические масла обладают антивирусным действием. Особую ценность представляют эфирные масла для санации воздуха в местах скопления людей в периоды вспышек вирусного гриппа и острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ). Противовоспалительное действие ароматических масел обусловливается влиянием ароматических компонентов на сосудисто-тканевые реакции: уменьшение проницаемости стенок сосудов, стабилизация мембран клеток, оптимизация сосудистых реакций, вяжущее, противоотечное действие, оптимизация кислородного обмена, стимуляция пролиферации и регенерации, противорадикальная активность.

4. Исходя из вышеизложенного, разработка мягких фармакотерапевтических средств для лечения простудных заболеваний с эфирным маслом иссопа зеравшанского на основе научно-обоснованного выбора составов и технологии является актуальным и перспективным для отечественной фармацевтической и медицинской науки.

РАЗДЕЛ 2. ОБОСНОВАНИЕ ОБЩЕЙ КОНЦЕПЦИИ И МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Выбор общей методологии исследований

Эффективность лекарственных средств местного действия зависит от влияния целого комплекса взаимосвязанных факторов, важнейшими из которых является способность активного ингредиента оптимально воздействовать на поврежденные ткани-мишени, а также характеристики основы лекарственной формы, которые обеспечивают такую возможность. Именно поэтому, при создании новых и совершенствовании существующих лекарственных препаратов первоочередными задачами являются поиск эффективной и безопасной активной субстанции и, что немаловажно, выбор вспомогательных веществ и разработка основы-носителя [176].

Важно подчеркнуть, что мази является достаточно удобной лекарственной формой для местного лечения различных заболеваний. Так, в мази можно вводить различные гидрофильные и липофильные лекарственные препараты, регулировать за счет основ высвобождение и биодоступность лекарственных веществ, управляя эффективностью и безвредностью препаратов. Большое количество основ позволяет разработать комбинированные препараты, учитывающие основные особенности различных заболеваний. В этой лекарственной форме заложена возможность постоянного усовершенствования, как самих лекарственных препаратов, так и методов лечения больных.

При наружном применении мазь должна проявлять местнораздражающее, отвлекающее, противовоспалительное и антисептическое действия. Фармакологические свойства препарата должны быть обусловлены компонентами, входящими в его состав. Необходимо использовать комбинацию веществ, которые при нанесении на кожу расширяю кровеносные сосуды, вызывать ощущение холода, сопровождающееся обезболивающим эффектом, оказывать антисептическое, противобактериальное и противогрибковое действие.

Необходимо учитывать так же и условия нанесения разрабатываемой мази - мазь должна наноситься в небольшом количестве на верхнюю часть груди и спины, вдоль средней линии.

С учетом фармакологического назначения разрабатываемой мази необходимо также учитывать следующие положения:

- при боли в мышцах, спине мазь наноситься на болевой участок. Для достижения наилучшего результата, эту область следует неплотно прикрыть теплой повязкой;

- при головной боли мазь наносить на кожу височной области;

- при насморке или заложенности носа мазь наносят на кожу крыльев носа;

- при кашле, связанном с простудой, мазь наносят на грудную клетку и шею.

- процедуру нанесения можно повторять до трех раз в сутки.

Все эти факторы должны быть учтены при разработке состава на основе современных достижений фармацевтической технологии, рациональным подбором вспомогательных веществ, так и видом лекарственной формы создаваемого препарата.

С учетом этих возможностей в последние годы разработаны комбинированные препараты многонаправленного действия. Количество мазей комбинированного действия, используемых в медицинской практике разных стран, колеблется, но имеет тенденцию к постоянному расширению. С успехами органической химии высокомолекулярных соединений, предложила новые вспомогательные вещества, а также биологической ориентацией в фармацевтической технологии при разработке и производстве лекарств появились новые научные подходы в создании мазей комбинированного действия. За счет одновременного многонаправленного действия таких мазей на основные симптомы заболевания значительно расширился диапазон их применения, повысилась эффективность и безопасность их использования.

Одной из первоочередных задач, связанных с достижением поставленных целей, был выбор оптимального носителя, который бы при минимальной концентрации действующих веществ обеспечивал ее максимальную эффективность и проявления основного спектра фармакологического действия действующих веществ.

Носители лекарственных субстанций в мазях является большой группой вспомогательных веществ природного, полусинтетического и синтетического происхождения. Их использования в фармацевтической технологии базируется на условиях наличия формообразующих свойств, которые определяются назначением мази, индифферентности по отношению к организму и лекарственным субстанциям. С развитием биофармации эти требования к носителям (мазевым основам) значительно повысились и поскольку они формируют все основные свойства мазей, их подбору при приготовлении лекарств уделяется особое внимание. Многоцелевое назначение мазей требует применения различных по своим составам и физико-химическим свойствам мазевых основ.

Для производства современных мазей используют мазевые основы сложного типа, включающие как жидкие, так и твердые компоненты, с помощью которых формируются не только фармакологическая эффективность, но и потребительские характеристики (поверхностно-активные, реологические и другие) с учетом их назначения. С этой целью используются различные вспомогательные вещества, которые в производстве лекарственных препаратов могут выполнять следующие функции: растворителей, смачивателей, диспергаторов, активаторов всасывания, консервантов, осмотически-активных, консистентных веществ, эмульгаторов, загустителей, антиоксидантов и т.д.

В основы для препаратов, предназначенных для лечения заболеваний верхних дыхательных путей, могут быть предъявлены следующие медико-биологические требования:

1. Основы должны быть химически стабильны и совместимы с лекарственными веществами; они должны обеспечивать физическую, химическую и микробиологическую стабильность лекарственного препарата в течение срока хранения, установленного МКК ЛС.

2. Основа должна быть гидрофобной, так как вещества обуславливающие фармакологический эффект растворяются в жировых компонентах основы.

3. Основа должна обладать способностью легко отдавать или не препятствовать высвобождению летучих компонентов действующих веществ.

4. Действующие вещества из основы не должны всасываться через эпидермис.

5. Цитотоксическое действие основы должна быть избирательным в отношении микробов, но не к тканям человека. Основы должны быть самостерилизующейся или не способствовать размножению и росту микроорганизмов.

6. Основа должна обеспечивать соответствие лекарственной формы ее физико-химическим свойствам: мазеобразной или жидкой консистенции и т.д.

7. Основа не должна изменять своих физико-химических и биофармацевтических свойств в процессе хранения лекарственного средства.

8. Основа должна проявлять увлажняющее и смягчающее воздействие на кожу.

9. Основа не должна вызывать дискомфорт при нанесении и удалении.

Для решения поставленного круга задач был разработан план исследований, который состоял из следующих последовательных этапов:

1. фармакологическое обоснование типа основы мягкой лекарственной формы, в которой наблюдалась бы максимальная эффективность действующих веществ;

2. выбор концентрации активных веществ с помощью фармакологических исследований модельных образцов с различным содержанием действующих веществ;

3. оптимизация отобранной в предыдущих исследованиях основы по биофармацевтическим, технологическим и другими критериям;

4. разработка рациональной технологии препарата, создание технологического регламента на производство;

5. выбор критериев контроля качества препарата, а также разработка и валидация основных методик проведения анализа, разработка МКК ЛС;

6. исследования по обоснованию срока годности и условий хранения разрабатываемого средства;

7. проведение доклинического изучения препарата.

2.2 Объекты исследования

В этом разделе представлены объекты и методы исследования, которые в своей совокупности наиболее полно отражают сущность и характер проведенной работы по решению задач данной проблемы.

Объектами исследования в данной работе были компоненты основ мягких лекарственных форм, готовые основы, вспомогательные вещества (неводные растворители, консерванты, масла растительные, эмоленты, формообразующие и др.). В качестве биологически активных веществ для разработки состава мази использовали эфирное масло иссопа зеравшанского, камфору и метилсалицилат.

Масло эфирное иссопа зеравшанского (проект МКК ЛС) - эфирное масло, полученное из травы иссопа зеравшанского в фазе цветения методом перегонки с водяным паром. Эфирное масло вида иссопа зеравшанского почти золотисто-желтовато цвета, обладает сильным приятным запахом.

Растворимость. Мало растворим, очень мало растворим или практический нерастворим в воде; легко растворим или растворим в 96-% спирте, эфире и других органических растворители.

Оптическое вращение. От -15°- -18°.

Плотность эфирного масло иссопа зеравшанского при 20 °С колеблется от 0,9670 до 0,9684 г/см².

Показатель преломления эфирного масло иссопа зеравшанского (надземная часть) при 20 °С от 1,4769 до 1,4781.

Кислотное число - показатель свободных кислот колеблется в эфирном масле иссопа зеравшанского в надземной части растений от 6,6 до 7,1.

Эфирное число - показатель содержания сложных эфиров в эфирном масле иссопа зеравшанского (надземной части) от 15,2 до 19,2.

Эфирное число после ацетилирования - показатель суммы сложных эфиров, содержащихся первоначально в 1 г масла и образовавшихся при ацетилировании в эфирном масле иссопа зеравшанского (надземной части) от 48,4 до 60,3.

Камфора рацемическая Camphora racemica (ГФУ, изд. 1, стр. 382-383) - (1 RS,4SR)-1,7,7-три-метилбицикло[2.2.1]гептан-2-он.

С₁₀Н₁₆О М.м. 152.2

Описание. Кристаллический порошок или рыхлая кристаллическая масса белого цвета, легко летучая даже при комнатной температуре.

Растворимость. Мало растворима в воде, очень легко растворима в 96 % спирте, эфире и петролейном эфире. Легко растворимая в маслах, очень мало растворимый в глицерине.

Температура плавления. От 172 °С до 180 °С.

Оптическое вращение. От +0.15° до -0.15°.

Метилсалицилат Methylis salicylas (ГФУ, изд. 1, доп. 2, стр. 504).

С₈Н₈О₃ М.м. 152.1

Метилсалицилат содержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % метил-2-гидроксибензоат.

Описание. Бесцветная или слегка желтоватого цвета жидкость.

Растворимость. Очень мало растворим в воде, смешивается с 96 % спиртом, жирными и эфирными маслами.

Показатель преломления. От 1,535 до 1,538.

Плотность. От 1,180 до 1,186.

ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ ВЕЩЕСТВА

Изопропилмиристат Isopropylis myristas (ГФУ, изд. 1, доп. 2, стр. 504).

С₁₇Н₃₄О₂ М.м. 270.5

1-Метилетил тетрадеканоат вместе с переменным количеством других изопропиловых эфиров жирных кислот.

Содержание не менее 90.0 % С₁₇Н₃₄О₂.

Описание. Прозрачная, бесцветная, маслянистая жидкость.

Растворимость. Не смешивается с водой, смешивается с 96 % спиртом, метиленхлоридом, жирными маслами и вазелиновым маслом.

Плотность составляет около 0,853.

Показатель преломления. От 1,434 до 1,437.

Вязкость. От 5 мПа*с до 6 мПа*с.

Кислотное число. Не более 1,0.

Йодное число. Не более 1,0.

Число омыления. От 202 до 212.

Смягчающее, масляная транспортная добавка, пенетрант, растворитель.

Изопропилпальмитат Isopropylis palmitas (USPNF, BP, CAS № 142-91-6)

1-Methylethyl hexadecanoate

C₁₉H₃₈O₂ 298.51

Изопропиловый пальмитат является прозрачной, от бесцветной до светло-желтого цвета, практически без запаха, вязкой жидкостью.

Температура кипения: 160 °С при 266 Па (2 мм рт.ст.)

Точка замерзания: 13-15 C

Растворимость. Растворим в ацетоне, хлороформе, этаноле (95 %), этилацетат, нефтепродуктах, пропан-2-оле, силиконовых маслах, растительных маслах, алифатических и ароматических углеводородах, практически не растворим в глицерине, гликолях и воде.

Поверхностное натяжение. 29 мН/м при 25 °С.

Вязкость (динамическая). 5-10 мПа*с (5-10 сП) при 25 °С.

Смягчающее, масляная транспортная добавка, пенетрант, растворитель.

Воск пчелиный (ГОСТ 21179-90). Твердая масса от белого до светло-коричневого цвета со специфическим запахом. Широко используется в пищевой, фармацевтической и парфюмерно-косметической промышленности в качестве структурообразователя.

Твердый жир (ВФС 42-1117-81). Основа для суппозиториев, содержащая жир кондитерский для шоколадных изделий, конфет и пищевых концентратов на основе пластифицированного саломаса и различные эмульгаторы.

Парафин нефтяной твердый марки П-1 (ГОСТ 23683-89). Высокоочищенный парафин, применяемый при изготовлении косметических препаратов и в фармацевтической промышленности в качестве структурообразователя. Представляет собой кристаллическую массу белого цвета с температурой плавления не ниже 54°С.

2.3 Методы исследований

При выполнении работы были использованы современные технологические, физико-химические, структурно-механические, биофармацевтические и биологические методы исследования, позволяющие оценивать образцы исходных веществ и готовых лекарственных форм [177, 178, 179, 180, 181].

Для проведения контроля качества образцов изучаемых лекарственных форм придерживались рекомендаций и методик, приведенных в ГФУ 1 изд., Раздел «Мягкие лекарственные средства для местного применения», с. 507-511. Для некоторых мазей дополнительно пользовались некоторыми методиками, приведенными в ГОСТ 29189-91 «Кремы косметические. Общие технические условия».

Описание

Контролировали внешний вид и характерные органолептические свойства образцов (цвет, запах, консистенцию и т.д.). Исследуемые лекарственные формы контролировали на предмет наличия прогорклого запаха, а также признаков физической нестабильности (агрегация частиц, коалесценция, коагуляция, расслоение).

Определение однородности

Определение проводили по методике, приведенной в ГФУ 1 изд. С. 511. Принимали четыре пробы каждого образца по 20-30 мг каждая, размещали по две пробы на предметное стекло, накрывали вторым предметным стеклом и крепко прижимали до образования пятен диаметром около 2 см.

Полученные пробы рассматривали невооруженным глазом (на расстоянии около 30 см от глаз). Образец считали однородным, если во всех четырех пробах не выявлялись видимые частицы, инородные включения и признаки физической нестабильности: агрегация и коалесценция частиц, коагуляция. Если одна из проб не выдерживала испытания, определение проводили дополнительно еще на восьми пробах, при этом все восемь проб имели выдерживать тест.

Определение коллоидной стабильности

Для проведения теста использовали лабораторную центрифугу с набором пробирок, ртутный термометр с интервалом измеряемых температур от 0 до 100 °С и ценой деления 1 °С, а также секундомер и водяную баню.

Пробирки наполняли на 2/3 объема (примерно 9 г) исследуемыми образцами (так, чтобы массы пробирок с препаратом не отличались более чем на 0,02 г), и взвешивали с точностью до 0,01 г. Затем пробирки содержали в водяную баню при температуре (42,5 ± 2,5) °С на 20 минут, после чего насухо вытирали с внешней стороны и размещали в гнезда центрифуги. Центрифугировали в течение 5 минут со скоростью 6000 об/мин (относительная сила центрифугирования при этом составляла около 5000 g).

Образец считали стабильным, если после центрифугирования в пробирках не наблюдали расслоение. Если хотя бы в одной из пробирок наблюдали расслоение образца или выделение осадка, анализ проводили повторно с новыми порциями. Если при повторном тесте выявляли хотя бы одну пробирку с расслоением, образец считали нестабильным.

Определение термостабильности

Для определения брали 5-6 стеклянных пробирок диаметром 15 мм и высотой 150 мм. Пробирки наполняли 8-10 мл исследуемыми образцами и помещали их в термостат марки ТС-80М-2 с температурой (42,5 ± 2,5) °С на 7 суток. После этого образцы переносили на 7 суток в холодильник с температурой (6 ± 2) °С и затем в течение 3 суток выдерживали их при комнатной температуре. Стабильность определяли визуально: если в одной пробирке не наблюдали расслоение, то образец считали стабильным.

Определение рН

Уровень рН исследуемых образцов определяли потенциометрически (ГФУ 1 изд., 2.2.3). Тест проводили 5-6 раз с новыми порциями исследуемых образцов.

Реологические исследования

Реологические исследования проводили с помощью прибора «Rheotest-2» (Германия), который представляет собой ротационный вискозиметр с коаксиальными цилиндрами. Он используется для определения динамической вязкости ньютоновских жидкостей и для проведения широкого круга реологических исследований неньютонивских жидкостей. Для последних записывалась реограма - кривая текучести, отражающий зависимость касательной напряжения сдвига (фr) от градиента скорости сдвига (Dr). Исходя из вида кривой текучести, определяли тип течения системы, структурную вязкость (з), экстраполированное предельное напряжение сдвига, наличие тиксотропных свойств и т.п.

Измерения проводили при комнатной температуре и (34,0±0,2) єС (температура кожи) кроме отдельных случаев, указанных ниже. Температуру измеряли лабораторным термометром с ценой деления 0,1 єС. Термостатирование осуществляли с помощью ультратермостата, входящего в комплект реотеста.

Для исследования брали навеску экспериментального образца (около 30 г) и помещали в емкость внешнего неподвижного цилиндра, после чего цилиндр крепили к станине прибора, помещали в него внутренний подвижный цилиндр. В результате исследуемая основа заполняла кольцевую щель коаксиальных цилиндров. При определенных скоростях вращения внутреннего цилиндра фиксировали показатели индикатора прибора. Показатели вискозиметра фиксировали на каждой ступени скорости, после выдержки в течение 15 секунд. Определение проводили при увеличении скорости вращения цилиндра и обратно. На максимальной скорости вращения систему выдерживали 1 минуту с последующей фиксацией напряжения сдвига.

Касательное напряжение сдвига вычисляли по формуле 2.1:

		(2.1)

гдефr - касательная напряжение сдвига, Па Мс;

z - константа прибора (зависит от типа цилиндра);

а - показания прибора.

После вычисления напряжения сдвига при определенных скоростях сдвига, рассчитывали структурную вязкость исследуемых основ, пользуясь формулой 2.2:

з =	фr	(2.2)
	Dr

где Dr - скорость сдвига, с-1;

з - структурная вязкость, ПаМс;

Реологические (структурно-механические) свойства образцов определяли также с помощью ротационного вискозиметра «Rheolab QC» (Anton Paar, Австрия) с коаксиальными цилиндрами C-CC27/SS. Прибор позволяет измерять касательное напряжение смещения (ф) в интервале 0,01-3,0·10⁴ Па, градиент скорости сдвига (Dr с^-1) от 0,1 до 4000 с^-1, вязкость (з) - 0,01-106 Па·с. Данный прибор «Rheolab QC» позволяет осуществлять статистическую обработку полученных данных. Из многочисленного количества моделей математической обработки полученных результатов эксперимента выбрана модель Casson I. Данная модель является наиболее известной реологической моделью описания неньютоновских жидкостей.

Изучение реологических параметров осуществляли при температуре от 20 єС до 34 єС. Термостатирование образцов осуществляли с помощью термостата MLM U15c.

Навеску образца около 17,0 (± 0,5) г помещали в емкость внешнего неподвижного цилиндра, устанавливали необходимую температуру опыта, время термостатирования - 30 мин. С помощью программного обеспечения, которым оснащен прибор, устанавливались условия опыта: (градиент скорости сдвига внутреннего цилиндра (от 3,42 до 150 с^-1), количество замеряемых точек на кривой течения образца (45), продолжительность измерения каждой точки кривой (1 с.).

Определение количественной оценки течения мазей. Проводят при помощи ротационного вискозиметра «Реотест-2» с цилиндрическим устройством путем определения вязкости системы при скоростях сдвига 3,0 и 5,4 с^-1, соответствующих скорости движения ладони при распределении мягкой лекарственной формы по поверхности слизистых оболочек и вязкости системы при скоростях сдвига 27,0 и 145,8 с^-1, воспроизводящих скорость технологической обработки в процессе ее изготовления. На основании полученных результатов рассчитывают по формулам величины коэффициентов динамического течения системы.

, (2.3)

, (2.4)

где K_d1, K_d1 - коэффициенты динамического течения;

з - эффективная вязкость при определенных скоростях сдвига.

Определение плотности

Плотность эфирного масла определяли согласно ГФУ, 1-е изд., (2.2.6).

Чистый сухой пикнометр взвешивают с точностью до 0,0002 г, заполняют с помощью маленькой воронки дистиллированной водой немного выше метки, закрывают пробкой и выдерживают в течение 20 мин в термостате, в котором поддерживают постоянную температуру воды 20 єС. При этой температуре уровень воды в пикнометре доводят до метки, быстро отбирая излишек воды при помощи пипетки или свернутой в трубку полоски фильтровальной бумаги. Пикнометр снова закрывают пробкой и выдерживают в термостате еще 10 мин, проверяя положение мениска по отношению к метке, затем пикнометр вынимают из термостата, фильтровальной бумагой вытирают внутреннюю поверхность горлышка пикнометра, а также весь пикнометр снаружи, оставляют под стеклом аналитических весов в течение 10 мин и взвешивают с той же точностью.

Пикнометр освобождают от воды, высушивают, споласкивая последовательно спиртом и эфиром (сушить пикнометр путем нагревания не допускается), удаляют остатки эфира продуванием воздуха, заполняют пикнометр испытуемой жидкостью и затем производят те же операции, что и с очищенной водой.

Плотность (р₂₀), г/см³ вычисляют по формуле:

,

где, m - масса пустого пикнометра, г;

m₁ - масса пикнометра с очищенной водой, г;

m₂ - масса пикнометра с испытуемой жидкостью, г;

0,99703 - значение плотности воды при 20 єС, г/см³ (с учетом плотности воздуха);

0,0012 - плотность воздуха при 20 єС и барометрическом давлении 760 мм рт. ст.

Определение кислотного числа.

Кислотным числом называют количество миллиграммов едкого кали, необходимое для нейтрализации свободных кислот, содержащихся в 1 г исследуемого вещества [177].

Около 10 г (точная навеска) масла, жира, воска или около 1 г (точная навеска) смолы помещают в колбу вместимостью 250 мл и растворяют в 50 мл смеси равных объемов 95 % спирта и эфира, предварительно нейтрализованной по фенолфталеину раствором едкого натра (0,1 моль/л); если необходимо, нагревают с обратным холодильником на водяной бане до полного растворения. Прибавляют 1 мл раствора фенолфталеина и титруют при постоянном помешивании раствором едкого натра (0,1моль/л) до появления розового окрашивания, не исчезающего в течение 30 с. для вещества с небольшим кислотным числом (до 1) титрование проводят из микробюретки.

Кислотное число (кч) вычисляют по формуле:

,

где, а - количество миллилитров раствора едкого натра (0,1 моль/л), израсходованное на титрование;

б - навеска вещества, г;

5,61 - количество миллиграммов едкого кали, соответствующее 1 мл раствора едкого натра (0,1 моль/л).

Определение эфирного числа

Эфирное число, обозначающее количество миллиграммов едкого кали, пошедшее на омыление сложных эфиров, содержащихся в 1 г эфирного масла, определяют в растворе, полученном после определения кислотного числа [177]. К этому раствору прибавляют 20 мл спиртового раствора едкого кали (0,5 моль/л) и нагревают на водяной бане в колбе с воздушным холодильником (диаметр трубки 1 см, длина 100 см) в течение 1 часа, считая с момента закипания. затем раствор разбавляют 100 мл воды и избыток едкого кали титруют раствором серной кислоты (0,25 моль/л), (индикатор - фенолфталеин).

Эфирное число (х) вычисляют по формуле:

,

где, v - объем спиртового раствора едкого кали (0,5 моль/л), израсходованного на омыление эфиров, мл;

m - навеска масла, г;

28,05 - количество миллиграммов едкого кали, содержащихся в 1 мл спиртового раствора едкого кали (0,5 моль/л).

Определение эфирного числа после ацетилирования

Эфирное число после ацетилирования обозначает количество миллиграммов едкого кали, необходимое для омыления суммы сложных эфиров, содержащихся первоначально в 1 г масла и образовавшихся при ацетилировании [177].

Определение проводят следующим образом: 10 г масла помещают в специальную колбу для ацетилирования с пришлифованным воздушным холодильником, приливают 10 мл уксусного ангидрида и прибавляют около 2 г безводного ацетата натрия. Смесь кипятят на песчаной бане в течение 2 ч. после охлаждения прибавляют 20 мл воды и нагревают на водяной бане при частом взбалтывании в течение 15 мин. затем смесь переносят в делительную воронку вместимостью 100 мл и отделяют слой масла. Масло 4-5 раз промывают при взбалтывании 50 мл насыщенного раствора хлорида натрия, затем масло дважды промывают порциями воды по 20 мл для удаления следов хлорида натрия, обезвоживают безводным сульфатом натрия (около 3 г) и фильтруют 1-2 г полученного масла (с точностью до 0,001 г), взвешивают в конической колбе, растворяют в 5 мл спирта, нейтрализуют спиртовым раствором едкого кали (0,5 моль/л), (индикатор - фенолфталеин) и определяют эфирное число (как описано выше).

Эфирное число после ацетилирования (х2) вычисляют по формуле.

,

где, v - объем спиртового раствора едкого кали (0,5 моль/л), израсходованного на омыление эфиров, мл;

m - навеска масла, г;

28,05 - количество миллиграммов едкого кали, содержащихся в 1 мл спиртового раствора едкого кали (0,5 моль/л).

Определение показателя преломления (индекс рефракции)

Определение проводили согласно ГФУ, 1-е изд., (2.2.6).

Количественное определение эфирного масла иссопа зеравшанского

Количественное определение ЭМИЗ в мазях проводили спектрофотометрическим методом.

Предварительно готовятся стандартные спиртовые растворы эфирного масла.

Приготовление стандартного спиртового раствора

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещали точную навеску ЭМИЗ 0,01 г и доводили этанолом до метки (раствор А). Затем в пикнометр, вместимостью 10 мл, последовательно помещали от 0,5 до 3,5 мл раствора А, то есть готовили раствор Б, доводя его до метки этанолом. Полученные растворы тщательно перемешивали и измеряли оптическую плотность при длине волны 280 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

На основании проведённых исследований, за стандартный раствор ЭМИЗ взято количество раствора А, соответствующее 2,0 мл ЭМИЗ концентрацией 0,0034 %, оптическая плотность которого равна 0,55.

Количественное определение эфирного масла в мази.

Точную навеску (около 0,5г) мази отвешивали в бюкс и растворяли в 10 мл этанола. Полученный раствор количественно переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл (бюкс смывали этанолом), раствор в колбе доводили до метки этанолом, перемешивали, 2 мл полученного раствора помещали в пикнометр вместимостью 10 мл и доводили этанолом до метки. Измеряли оптическую плотность мази с ЭМ на спектрофотометре при длине волны 280 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения использовали раствор чистой основы, приготовленный по аналогичной схеме.

Относительная ошибка определения не превышает 1,92 %.

Спектрофотометрические исследования в инфракрасной области с использованием спектрофотометра ПЭ-5400УФ (Российская Федерация) проводили для идентификации спектров чистого ЭМ и ЭМ, извлечённых из свежеприготовленной мази и мази, находившейся на хранении. Извлечение ЭМ из мази осуществляли н-гексаном, т.к. основа мазей имеет свой собственный ИК-спектр и, кроме того, она гидрофобная, что затрудняет идентификацию спектров.

Жидкостная хроматография

Исследования проводились согласно требованиям ГФУ, 1-е изд., дополнение 1, (2.2.29., N).

Эфирные масла, полученные методом дистилляции, высушивали безводным сульфатом натрия и запаивали в ампулы. Химический состав масла исследовали на газовом хроматографе Agilent Technologies (6890N) с квадрупольным массспектрометром (MSD 5973) в качестве детектора, на кварцевой колонке HP5MS (30 м х 0,25 мм).

В хроматограф вводили 1 %-ный раствор масел в метаноле. Температура испарителя 280 єС. Начальная температура колонки 100 єС (1 мин.), далее 100-230 єС (2 єС/мин.), 230 єС (1 мин). Температура интерфейса между газовым хроматографом и массселективным детектором - 280 єС. Температура источников ионов - 173 єС. Энергия ионизирующих электронов - 70 эв. Данные собирались со скоростью 1,2 скан./с в диапазоне 30650 а.е.м.

Микробиологические методы исследования

Оценка микробиологической чистоты

Исследования микробиологической чистоты образцов мазей осуществляли согласно требованиям ГФУ, 1-е изд., (2.6.12., 2.6.13.).

Оценка антимикробной активности

Антимикробную активность ЭМИЗ, как в отдельности, так и в составе мази, изучают методом серийных разведений и диффузии в агар.

Исследование методом диффузии в агар проводят следующим образом: в стерильные чашки Петри разливают мясопептонный агар, после застывания слоя на поверхность помещают цилиндры и вокруг заливают мясопептонный агар, засеянный культурой испытуемого микроба, после застывания вынимают цилиндры и в образовавшиеся лунки заполняют нужным количеством испытуемого масла или мази. Чашки помещают в термостат и инкубируют при 37 єС в течение 24-48 часов. Степень чувствительности микробов к препарату определяют по диаметру зоны задержки роста вокруг лунки.

Метод серийных разведений. Приготовляют 1% спиртовые растворы ЭМИЗ. Из каждого исследуемого вещества готовят ряд последовательно убывающих по концентрации растворов на жидкой питательной среде Хотингера, из расчёта 1 мл от 64 до 512 мкг препарата (5 пробирок), 6-я пробирка служит контролем засеваемой культуры. В каждую пробирку засевают свежую культуру одного из испытуемых микроорганизмов, выращенных на мясопептонном агаре. Во всех случаях микробная нагрузка одинаковая - 1000 микробных тел в 1 мл. Посевы инкубируют при температуре 36-37 єС. Параллельно изучают контроль (мясопептонный бульон без добавок масел, контроли со спиртом и др.)

Минимальное количество препарата, дающее полную видимую задержку роста культуры (прозрачный бульон) соответствует минимальному количеству масла и определяет степень чувствительности штаммов к ЭМ.

Для установления бактерицидного действия ЭМ на тест-культурах из прозрачных пробирок после осторожного взбалтывания жидкости производят посев на агаровые среды. Наименьшую концентрацию ЭМ в пробирке, посевы из которой при инкубации в течение 24-72 часов не дают рост на питательной среде, принимают за минимальную бактерицидную концентрацию.

Статистический анализ результатов биологических испытаний и количественных определений

Исследования проводились согласно требованиям ГФУ, 1-е изд., дополнение 1, (5.3).

ВЫВОДЫ

1. Теоретически обоснована методология создания мягких лекарственных средств для лечения дерматомикозов, осложненных гиперкератозом с учетом медико-биологических требований.

2. Представлены краткие данные об активных фармацевтических ингредиентах и вспомогательных веществах, которые использовали при розработке и исследовании мягких лекарственных форм.

Предложены методики фармакотехнологических, физико-химических, структурно-мехнических, микробиологических и фармакологических исследований мягких лекарственных средств, которые позволяют объективно оценить их технологическое качество.

РАЗДЕЛ 3. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКОЕ И ФАРМАКО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЭФИРНОГО МАСЛА ИССОПА ЗЕРАВШАНСКОГО

3.1 Изучение эфирного масла иссопа зеравшанского

3.1.1 Содержание эфирного масло в некоторых видах растительного сырья флоры Таджикистана

Эфирные масла состоят по большей части изменчивого липофильного вторичного метаболита, охватывающего углеводороды (терпены и сесквитерпены) и различные смеси (алкоголи, альдегиды, кетоны, фенолы, эфиры, эфиры фенола и др.). Эти смеси могут за счет свободной диффузии накапливаться в биомембранах и клетках, особенно после применения на кожу или в виде ингаляции. Много факторов влияет на химический состав эфирных масел. Внешние воздействующие факторы в частности (состав грунта, водообеспеченность, солнечный свет, температура) имеют существенный эффект на качество и количество эфирного масла. Эфирные масла привлекают внимание в качестве сырья для производства духов, косметики, фармацевтической продукции и пестицидов. Кроме того они широко используются в аромо- и фитотерапии. В последних нескольких десятилетиях, биологически активные вещества эфирных масел было широко исследованы. Многие эфирные масла содержат смеси, обладающие антимикробным, противовирусным и противогрибковым действием.

...