Изучение реакции специфической иммунной системы на вирусный гепатит В и С

0,032

0,010

0,008

0,014

0,012

0,009

0,020

0,010

0,015

E

0,010

0,015

0,007

0,015

0,016

0,017

0,011

3,715

0,016

0,034

0,015

0,007

F

0,015

0,008

0,021

0,014

0,009

0,009

0,024

0,015

0,008

0,008

0,021

0,014

G

0,010

0,054

0,015

1,310

0,014

0,008

0,010

0,007

0,010

0,018

0,016

0,018

H

0,007

0,011

0,015

0,012

0,020

0,008

0,011

2,984

0,009

0,014

0,017

0,021

Таблица 51 ? Результаты статистической обработки оптической плотности образцов

Проба	Минимальное значение	Среднее значение	Максимальное значение	Стандартное отклонение
Положительный контроль	3,144	3,229	3,315	0,085
Отрицательный контроль	0,010	0,011	0,012	0,001
Исследуемые образцы	0,008	0,179	3,715	0,590
Исследуемые образцы с < ОПкрит	0,008	0,014	0,024	0,002
Исследуемые образцы с > ОПкрит	0,231	2,547	3,715	1,184

ОП критическая для данного исследования составила 0,112. Таким образом, по данным анализа 91 пробы и 5 контрольных проб все оптические плотности выше критической (1,310; 3,715; 2,984) проба подлежащая повторному исследованию в двух лунках, проба подлежащая повторному исследованию на конфирматорном тесте (0,231), результаты приводятся ниже. При повторном исследовании в 1 пробе подтверждено наличие anti-HCV (totol).

Таблица 52 ? Серологический протокол скринингового обследования на наличие anti-HCV №11

№стрипа №ряда	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
A	2,988	0,013	0,015	0,010	1,474	0,008	0,010	0,023	0,030	0,010	0,007	0,011
B	3,104	0,014	0,010	0,015	1,426	0,031	0,125	3,912	0,015	0,012	0,014	0,021
C	0,011	0,008	0,012	0,016	3,838	0,019	0,009	0,021	0,013	0,014	0,015	0,013
D	0,014	0,021	0,122	0,014	3,820	0,011	0,090	0,016	0,010	0,009	0,024	0,016
E	0,015	0,010	0,082	0,012	3,874	0,018	0,016	0,016	0,013	0,012	0,010	0,009
F	0,011	0,013	0,010	0.010	3,769	0,026	3,673	0,014	0,121	0,014	0,008	2,780
G	0,012	0,011	0,014	0,008	0,015	0,014	3,108	0,009	0,015	0,015	0,009	0,010
H	0,009	0,008	0,016	0,011	0,017	0,009	0,016	0,010	0,009	0,018	0,011	0,011

ОП критическая для данного исследования составила 0,113. Таким образом, по данным анализа 91 пробы и 5 контрольных проб все оптические плотности выше критической (3,673; 3,108; 3,910; 2,780) пробы подлежащие повторному исследованию в двух лунках, пробы подлежащие повторному исследованию на конфирматорном тесте (0,122; 0,125; 0,121), результаты приводятся ниже.

Таблица 53 ? Результаты статистической обработки оптической плотности образцов

Проба	Минимальное значение	Среднее значение	Максимальное значение	Стандартное отклонение
Положительный контроль	2,988	3,046	3,104	0,058
Отрицательный контроль	0,011	0,013	0,015	0,001
Исследуемые образцы	0,008	0,377	3,912	0,634
Исследуемые образцы с < ОПкрит	0,008	0,015	0,090	0,006
Исследуемые образцы с > ОПкрит	0,121	2,464	3,912	1,393

Таблица 54 ? Серологический протокол ИФА анти-HCV конфирматорного теста №3

№ряда №ряда	1	2	результат
А	3,44	0,07	отр
B	3,27	0,04	отр
C	0,19	0,07	отр
D	0,06	0,04	отр
E	0,17	0,07	отр
F	0,06	0,05	отр
G	0,10	0,06	отр
H	0,06	0,04	отр

Исследовались 4 образца сывороток крови оптическая плотность которых в скрининговом тесте была меньше 1,0, на конфирматорном тесте наличие anti-HCV не подтвердилось.

1 Положительные контроли: А1 core ОП ? 3,44, В1 NS ОП ? 3,27;

2 Отрицательные контроли core ? С1 ОП ? 0,19,E1 ОП ? 0,17;

3 Отрицательные контроли NS ? D 1 ОП ? 0,05, F1 ОП ? 0,05;

4 Контроль коньюгата core G1 ОП - 0,10, H1 NS ОП - 0,06;

5 Исследуемые образцы ? А1 - H2;

6 Минимальное значение оптической плотности пробы ? 0,04;

9 Максимальное значение оптической плотности пробы - 0,07;

10 Среднее значение оптической плотности пробы ? 0,143;

11 Стандартное отклонение ? 0,012.

Таблица 55 - Распределение оптических плотностей первично положительных проб на anti-HCV

ОП проб подлежащих повторному исследованию в двух лунках, оптическая плотность которых в Скрининговом тесте > 1,0
№пробы	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
ОП	1,026	1,084	1,310	1,572	1,609	1,620	1,760	1,938	1,984	2,112
№пробы	11	12	13	14	15	16	17	18	19	20
ОП	2,310	2,504	2,590	2,657	2,771	2,780	2,840	2,984	2,986	3,020
№пробы	21	22	23	24	25	26	27	28	29	30
ОП	3,106	3,108	3,109	3,220	3,242	3,276	3,342	3,570	3,590	3,670
№пробы	31	32	33	34	35	36	37	38
ОП	3,673	3,715	3,750	3,822	3,851	3,894	3,910	3,959

Таблица 56 - Распределение оптических плотностей первично положительных проб на anti-HCV

ОП проб подлежащих повторному исследованию на конфирматорном тесте, оптическая плотность которых в скрининговом тесте < 1,0
№пробы	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
ОП	0,112	0,114	0,115	0,116	0,118	0,121	0,122	0,125	0,131	0,132
№пробы	11	12	13	14	15	16	17	18	19	20
ОП	0,140	0,147	0,160	0,164	0,171	0,176	0,182	0,183	0,192	0,195
№пробы	21	22	23	24	25	26	27	28	29	30
ОП	0,208	0,213	0,220	0,226	0,231	0,243	0,280	0,347	0,357	0,411
№пробы	31	32	33	34	35
ОП	0,563	0,619	0,837	0,936	0,958



Ось х количество исследуемых образцов.

Ось y оптическая плотность исследуемых образцов.

Рисунок 5 - Распределение оптических плотностей первично положительных проб на anti-HCV

Вирусная нагрузка бывает высокой и низкой и в целях стандартизации выражается в Международных единицах на мл (МЕ/мл):

* высокая -- более 500 000 МЕ/мл

* низкая -- менее 500 000 МЕ/мл.

Информацию для пересчета из МЕ/мл в копии/мл (или наоборот) предоставляет тестирующая лаборатория, так как стандартной формулы не существует.

Анализируя частоту выявления маркеров вируса гепатита С среди групп пациентов, можно отметить высокий уровень заболеваемости вирусным гепатитом среди пациентов инфекционного отделения 12 человек (11 мужчин и 7 женщин), наркологический диспансер 2 мужчины и медицинский работник 2 женщина.

Таблица 57 ? Результаты статистической обработки оптической плотности образцов

Количество первично положительных проб	73(6,84%)
Количество положительных на конфирматорном тесте	22(2,0%)
Минимальное значение	0,112
Среднее значение	1,573
Максимальное значение	3.959
Стандартное отклонение	0,952
Учреждение или группа пациентов положительных на HBsAg	Поликлиника (кабинет инфекционных заболеваний)	11 мужчин, 7 женщин
	Кожно-венерологоческий диспансер	0
	Наркологический диспансер	2 мужчины
	Медицинские работники	2 женщины

Полученные данные сравнили с показателями заболеваемости в городе Минске. Среди взрослого населения (жители в возрасте 18 лет и старше) в 2010 году в городе Минске мужчины болели ВГ в 1,5 раза чаще, чем женщины: 84,7 и 56,6 на 100 тысяч жителей.

Анализ данных полученных в ходе сбора эпидемиологического анамнеза выявил множество вероятных путей передачи и факторов риска инфицирования, среди которых превалировали наличие в анамнезе случайных половых связей - 15,93%; проведение медицинских парентеральных вмешательств - 11,45%; потребление инъекционных наркотиков - 7,81%; внутрисемейное инфицирование - 6,96%; проведение татуировок в неприспособленных местах (в местах лишения свободы, во время службы в армии, у знакомых и частных лиц на дому) - 6,34%. В 2010 году выявлено 90 случаев инфицирования в семье (контактно-бытовой путь - 40 случаев - 3,09%, половой путь в семье - 50 случаев - 3,87%. В структуре путей передачи микст-гепатитов каждый второй случай - потребители инъекционных наркотиков - 40,91%.

По путям передачи у 12% медицинских работников установлено внутрисемейное инфицирование, по 2,4% случаев пришлось на установление профессионального заражения (поликлиника МВД) и половой путь, около 9,5 % медицинских работников в анамнезе имели множественные медицинские парентеральные вмешательства, в ѕ случаев путь инфицирования не был установлен.

Вирусные гепатиты являются одной из самых актуальных проблем современной медицины. Стремительный рост наркомании, множественные пути инфицирования, исходы болезни в цирроз и первичный рак печени, низкая эффективность этиотропных средств и многое другое определяют актуальность данных инфекций. К группе риска относятся люди с наличием татуировок, употребляющие наркотики, родственники инфицированных, доноры, лица, получившие травмы, посещающие стоматолога, меняющие половых партнеров, медицинские работники и др.

Специфический иммунный ответ организма на проникновение вируса гепатита В представлен реакцией со стороны клеточного звена иммунитета через цитотоксические Т-лимфоциты. Реакция со стороны гуморального звена менее значима и заключается в продукции специфических антител к антигенам ВГВ.

При исследовании показателей сыворотки крови жителей города Светлогорска, входящих в группу риска инфицирования вирусным гепатитом, обследовано 938 человек маркёры ПВГ выявлены у 37 человек, инфицированность HBsAg составила 15 человек(1,4%), инфицированность anti-HСV 22 человека (2,0%) Обследование пациентов четырех лечебных учреждений показало, что из наибольшая частота встречаемости вирусных гепатитов среди пациентов инфекционного отделения.

Анализируя частоту выявления вирусных гепатитов, можно отметить что гепатит С, обладающий высоким хрониогенным потенциалом, обнаруживается значительно чаще, чем вирус гепатита В. В структуре заболеваемости по полу мужчины составили ВГВ - 10 человек ВГС - 13 человек, женщины ВГВ - 5 человек, ВГС - 9 человек.

Хочется отметить, что, принимая во внимание относительно низкую себестоимость, простоту и быстроту исполнения иммуноферментного анализа, не инвазивный способ изучения показателей, исключает риск инфицирования, облегчает и уменьшает объем работы, он должен быть одним из первых диагностических методов исследования.

Список использованных источников

1 Галактионов В.Г. Иммунология / В.Г. Галактионов// Издательство Московского университета, 1998. - 480 с.

2 Актуальные аспекты вирусных гепатитов: учебно-метод. пособие / И.А. Карпов [и др.] - Минск, 2002. - 46 с. Майер К.П. Гепатит и последствия гепатита. - М., 2004

3 Иммунология: практикум: учеб. пособие / [Ковальчук Л.В. и др.]; под ред. Л.В. Ковальчука, Г.А. Игнатьевой, Л.В. Ганковской.- М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010.- 176 с.

4 Демчило А.П. Лабораторная диагностика вирусных гепатитов: Учебно-методическое пособие / А.П. Демчило.- Гомель: Гомельский государственный медицинский университет - 2008. - 29 с.

5 Ивашкин В.Т. Иммунная система и повреждения печени при хронических гепатитах В и С // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2009. - Т.19. - N6. - С. 4 - 10

6 Майер К.П Гепатит и последствия гепатита /К.П.Майер// Издательство ГЭОТАР МЕДИЦИНА Москва 1999г.

7 Волжанин В.М., Жданов К.В., Лобзин Ю.В. Вирусные гепатиты. СПб., 2009 г.

8 Михайлов М.И. Лабораторная диагностика гепатита С (Серологические маркеры и методы их выявления) / М.И. Михайлов // Вирусные гепатиты: достижения и перспективы. Инф. бюл. - 2001. - № 2 (12). - С. 8 - 18.

9 Егоров В.Б., Валишин Д.А., Камилов Ф.Х., Магазов Р.Ш. Хронические вирусные гепатиты. - Уфа: Гилем, 2005. - 164 с.

10 Жибурт Е.В., Зубиков Т.М., Кучеровцев А.А. Вирусные гепатиты. 2009 г.

11 Богомолов Б.П. Диагностика и лечение вирусного гепатита С / Б.П. Богомолов, М.К. Костюнина // Клиническая медицина.- 1997.- №9.- С. 62-64

12 Казанцев А.П., .Матковский В.С. Справочник по инфекционным болезням./В.С. Матковский// - М., Медицина, 1979. - С. 46 - 50.

13 Клиническая иммунология и аллергология с основами общей иммунологии: учебник /Л.В. Ковальчук, Л.В. Ганковская, Р.Я. Мешкова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. - 640 с.

14 Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты / С.Н. Соринсон - СПб.: ТЕЗА, 1997. - 306 с.

15 Лок, А.С.Ф. / Хронический гепатит В: практические рекомендации Американской ассоциации по изучению заболеваний печени / А.С.Ф. Лок, Б.Дж. МакМахон // Клиническая микробиология и антимикробная терапия. - 2002 - №2 - C. 164 - 193.

16 Львов, Д.К. Вирусные гепатиты от А до G и далее / Д.К. Львов // Журнал микробиологии - 1997 - № 1 - C. 70 - 77.

17 Использование полимеразной цепной реакции в обнаружении гепатита С / Н.А. Федоров [и др.] // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 1995. - № 4. - С. 23-27.

18 Мукомолов С.Л., Валькова И.В, Чайка Н.А. Вирусные гепатиты - Спб.: Институт им. Пастера, 1992 - 96 с.

19 Основы микробиологии, вирусологии, иммунологии: учеб. О - 753 для студ. сред. проф. Образования / [Воробьев, А.А. Быков, А.С. Пашков Е.П. и др.]; под ред.А.А. Воробьева, В.В.Зверева. - 3-е изд., перераб. и доп. - М. Издательский центр «Академия», 2009. - 288 с.

20 Подымова, С.Д. Болезни печени / С.Д. Подымова - М.:Медицина, 1998. - 704 с.

21 Ярилин А.А. Основы иммунологии. Медицина, 1999 г. С27 - 28.

22 Соринсон С.Н., Корочкина О.В. Вирусные гепатиты А, В, С, Д, Е. /Учебно-метод. Пособие. - Н.Новгород, 1992. - 128 с.

23 Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты / С.Н. Соринсон - СПб.: ТЕЗА, 1997. - 306 с.

24 Шерлок Ш. Заболевания печени и желчных путей: Практич. рук. (Пер. с англ.) / Ш. Шерлок, Дж. Дули - М.: Гэотар Медицина, 1999. - 864 с.

25 Титов Л.П. Научное издание / И.А. Азарова, Т.А. Аблова //Сб. науч. тр./¬Минск, 2012.-Вып-5: Современные проблемы инфекционной патологии человека-С.4 - 7.

26 Шмелева Е.В. Иммунопрогностические критерии развития цирроза печени как исхода хронического вирусного гепатита С: Автореф. дисс. канд. мед. наук. - M., 2009.

27 Шувалова Е.П., Антонова Т.В. Биохимические аспекты патогенеза вирусных гепатитов // Тер. Арх. - 1996 - №2 - с. 8 - 10.

28 Евпилов В.И. Деятельность лечебного учреждения по профилактике и лечению инфекционных заболеваний. 2003 г.

29 Эффективность вакцинопрофилактики гепатита В при эпидемическом уровне заболеваемости в крупном городе / Башкова Н.М., Романенко В.В., Юровских А.И., Кузнецова И.О,. Шахгильдян И.В, Михайлов М.И. // Журнал «Мир вирусных гепатитов» - Москва., 2003. - №3. - С.5- 10

30 Ананьев В.А., Жданов К.В., Стаханова В.М. Вирусные гепатиты. 2006 г.

31 Национальный Интернет-портал Республики Беларусь

32 Информационные технологии в биологии и химии: лабораторный практикум для студентов вузов по специальности 1 - 31 01 01 «Биология» / Ю.М. Жученко; М - во образования РБ, Гомельский гос. ун - т им. Ф. Скорины. - Гомель: ГГУ им. Ф. Скорины, 2009.- 139 с.

Размещено на Allbest.ru

...