Основы гистологии

Размещено на http://www.allbest.ru/

БИЛЕТ № 1

1.Гипофиз. Развитие. Гистофизиология долей. Гормоны долей гипофиза и их роль. Васкуляризация и иннервация гипофиза.

Гипоталамус. Строение. Гипоталамо-аденогипофизарная и гипоталамо-нейрогипофизарная системы. Роль либеринов и статинов гипоталамуса. Возрастные изменения.

2. Мочевыводящие пути. Функции. Принцип строения слизистой оболочки. Тканевой состав оболочек. Особенности строения стенки разных отделов. Особенность строения мужского и женского мочеиспускательного канала. Регенерация.

3.Органеллы цитоплазмы, гиалоплазма. Классификация органелл, функции. Ультраструктурная характеристика цитоплазматической мембраны, плазмолеммы, ядра. Методы микроскопического исследования клеток, тканей и органов. Основные этапы изготовления гистологического препарата.

Вопрос 1

ГИПОФИЗ (hypophysis cerebri) анатомически состоит из ножки и тела. Находится в гипофизарной ямке турецкого седла клиновидной кости и отделен от полости черепа отростком твердой оболочки головного мозга.

Гипофиз регулирует активность ряда желез внутренней секреции и служит местом выделения гипоталамических гормонов крупноклеточных ядер гипоталамуса.

Гипофиз состоит из :

· Нейрогипофиз (нейрогенного происхождения) - задняя доля - части выроста промежуточного мозга

· Аденогипофиз (эктодермальное происхождение) разделяется на переднюю долю, узкую промежуточную (среднюю) долю и слабо развитую туберальную часть (бугорная, трабекулярная) - не обладает эндокринными функциями.

1 - серый бугор: возвышение на нижней поверхности головного мозга; и в нем: 2 - нижняя часть третьего желудочка мозга. 3 - гипофизарная ножка; и в ней: 4 - воронка мозга 5 - передняя доля; 6 - промежуточная доля; 7 - гипофизарная щель; 8 - бугорная (трабекулярная) часть; 9 - задняя доля

гормон гипофиз органелла слизистый

Гипофиз покрыт капсулой из плотной волокнистой соединительной ткани. Его строма представлена очень тонкими прослойками рыхлой соединительной ткани, связанными с сетью ретикулярных волокон, которая в аденогипофизе окружает тяжи эпителиальных клеток и мелкие сосуды.

Развитие. Гипофиз образуется из двух зачатков эктодермального (карман Ратке) и нейрогенного (processus infundibularis). На 4-5 неделе эктодермалый эпителий крыши ротовой бухты образует карман Ратке - вырост, направляющийся к мозгу. Из этого гипофизарного кармана развивается аденогипофиз (передняя, промежуточная и входящая в состав ножки туберальная доля). Навстречу карману Ратке растет выпячивание промежуточного мозга, дающее начало нейрогипофизу (задняя доля гипофиза, гипофизарная часть ножки гипофиза и срединное возвышение).

Гистофизиология долей. Гормоны долей гипофиза и их роль.

Передняя доля. Ее легко отличить по присутствию в ней ацидофильных эндокриноцитов (аденоцитов), имеющих розовую зернистость. Самая крупная зона в виде полумесяца. Клетки ее крупные, располагаются тяжами, между которыми просматриваются крупные гемокапилляры розового цвета.

Передняя часть имеет трабекулярное строение. Трабекулы, сильно разветвляясь, сплетаются в узкопетлистую сеть. Промежутки между ними, заполнены рыхлой соединительной тканью, по которой проходят многочисленные синусоидные капилляры. В каждой трабекуле можно различить несколько разновидностей железистых клеток (аденоцитов):

· Хромофильные - интенсивно окрашиваются на гистологических препаратах, расположены по периферии трабекул, более крупные по размерам, содержат секреторные гранулы.

· Хромофобные (главные, ввиду кол-венного преобладания), занимающие середину трабекул, отличаются слабо окрашивающейся цитоплазмой.

Хромофильные клетки делятся на базофильные и ацидофильные (эозинофильные).

Базофильные клетки, или базофилы, продуцируют 2 гонадотропных гормона - фоллитропин и лютропин, и тиреотропный гормон - тиротропин.

Тиротропин - стимулирует выработку тириооидных горомнов щитовидной железы

Фоллитропин - стимулирует развитие фолликулов яичника - овогенез, выработку гормонов эстрагенов; в мужском организме стимулирует сперматогенез.

Лютропин - в женском организме стимулирует развитие желтого тела и секрецию прогестерона, а в мужском выработку тестостерона и стимулирует развитие интрестициальной ткани.

Ацидофильные аденоциты продуцируют 2 гормона, влияющие на обмены. Это:

Соматотропный гормон (гормон роста, соматотропин) - управляет процессами роста и развития; стимулирует синтез белков

Лактотропный гормон - пролактин - стимулирует рост паренхимы молочных желез, секрецию молока, способствует развитию желтого тела, и синтезу им гормона прогестерона

Хромофобные клетки вырабатывают аденокортикотропный гормон - кортикотропин - стимулируют секрецию гормонов пучковой и сетчатой зон коры надпочечников. Т.о. участвуют в адаптации организма к голоданию, травмам и др. видам стресса.

Задняя доля округлой формы, бледно окрашена, так как она построена из нейроглин - питуицитов (небольшие отростчатые или веретеновидные клетки) и нервных волокон, которые при данной окраске не выявляются. В виде пояска средняя доля окружает заднюю долю. На большом увеличение микроскопа в задней доле можно определите бледно окрашенные ядра питуицитов и синусоидные капилляры.

В заднюю долю входят аксоны нейросекреторных клеток супраоптического и паравентрикулярного ядер переднего

гипоталамуса. В задней доле эти аксоны заканчиваются расширенными терминалями (накопительными тельцами, или тельцами Херринга), которые контактируют с капиллярами.

Задняя доля гипофиза накапливает антидиуретический гормон (вазопрессин) и окситоцин, вырабатываемые нейросекреторными клетками супраоптического и паравентрикулярного ядер переднего гипоталамуса. Возможно, что в передаче этих гормонов из накопительных телец в кровь участвуют питуициты.

Промежуточная (средняя) доля построена из клеток с базофильной цитоплазмой между которыми встречаются небольшие полости - псевдофолликулы и расширенные гемокапилляры.

Карман Ратке просматривается как узкий просвет серповидной формы между передней и средней долей, сросшейся с задней.

Васкуляризация и иннервация гипофиза.

Иннервация. Гипофиз, а также гипоталамус и эпифиз получают нервные волокна от шейных ганглиев (главным образом от верхних) симпатического ствола. Экстирпация верхних шейных симпатических ганглиев или перерезка шейного симпатического ствола приводят к усилению тиротропной функции гипофиза, тогда как раздражение тех же ганглиев вызывает ее ослабление.

Кровоснабжение. Верхние гипофизарные артерии вступают в медиальную эминенцию, где распадаются на первичную капиллярную сеть. Ее капилляры образуют петли и клубочки, внедряющиеся в эпендиму медиальной эминенции. К этим петлям подходят аксоны пептидоадренергических клеток медиобазального гипоталамуса, образуя на капиллярах аксовазальные синапсы (контакты), в которых совершается передача гипоталамических либеринов и статинов в ток крови. Затем капилляры первичной сети собираются в портальные вены, идущие вдоль гипофизарной ножки в паренхиму аденогипофиза, где они вновь распадаются на вторичную капиллярную сеть, синусоидные капилляры которой, разветвляясь, оплетают трабекулы. Наконец, синусоиды вторичной сети сливаются в выносящие вены, отводящие кровь,обогатившуюся аденогипофизарными гормонами, в общую циркуляцию.

ГИПОТАЛАМУС (hypothalamus) занимает базальную область промежуточного мозга и окаймляет нижнюю часть 3 желудочка головного мозга. Полость III желудочка продолжается в воронку, стенка которой становится гипофизарной ножкой и на своем дистальном конце дает начало задней доле гипофиза (или нейрогипофизу).

Гипоталамус, являясь высшим центром эндокринных функций, контролирует и объединяет все висцеральные функции организма, объединяет эндокринные механизмы регуляции с нервными, будучи мозговым центром симпатического и парасимпатического отделов вегетативной нервной системы.

В сером веществе гипоталамуса выделяют ядра (свыше 30 пар), которые группируются в переднем, среднем (медиобазальном или туберальном) и заднем отделах гипоталамуса.

В переднем отделе располагаются парные супраоптическое и паравентрикулярное ядра, образованные крупными нейросекреторными клетками. В этих ядрах вырабатываются гормоны вазопрессин и окситоцин, которые накапливаются в задней доле гипофиза.

В ядрах среднего отдела, образованных мелкими нейросекреторными клетками, вырабатываются аденогипофизотропные гормоны, которые либо стимулируют (либерины: гонадолиберин, кортиколиберин, соматолиберин, тиролиберин), либо угнетают (статины: меланостатин, пролактостатин, соматостатин) соответствующие гормонообразовательные функции аденогипофиза.

В сером бугре локализуются аркуатное и вентромедиальное ядра, образованные мелкими нейросекреторными клетками в сочетании с адренергическими нейронами обычного типа. Вентромедиальное ядро отличается большими размерами и оказывается основным местом выработки аденогипофизотропных гормонов, но наряду с ним эта функция присуща также аркуатному ядру.

Гипоталамо-аденогипофизарная и гипоталамо-нейрогипофизарная системы.

Связь переднего гипоталамуса с задней долей гипофиза, а медиобазального гипоталамуса -- с аденогипофизом позволяет расчленить гипоталамо-гипофизарный комплекс на гипоталамо-нейрогипофизарную и гипоталамо-аденогипофизарную системы. Значение задней доли гипофиза состоит в том, что в ней аккумулируются и выделяются в кровь нейрогормоны (вазопрессин, окситоцин), вырабатываемые крупноклеточными парасимпатическими ядрами переднего гипоталамуса. Следовательно, задняя доля гипофиза не является железой, а представляет собой вспомогательный нейрогемальный орган гипоталамо-нейрогипофизарной системы.

Аналогичным нейрогемальным органом гипоталамо-аденогипофизарной системы оказывается медиальная эминенция (возвышение на дне ромбовидной ямки), в которой накапливаются и поступают в кровь аденогипофизотропные гормоны (либерины и статины), продуцируемые симпатическими нейросекреторными клетками медиобазального гипоталамуса.

Возрастные изменения.

У новорожденного структура гипоталамуса еще полностью не сформирована. Для этого периода характерно резкое увеличение размеров нейроцитов ядер гипоталамуса. Большинство клеток имеет неправильную многоугольную форму с отростками.

В последующие годы процесс формирования заканчивается постепенно, отличаясь резкой выраженностью изменений в различных ядрах. Наибольшее увеличение числа клеток и крупные клетки характерны для супраоптического, паравентрикулярного ядер. Меньше изменяются размеры клеток ядер медиобазального гипоталамуса. Нарастает неоднородность клеточного состава гипоталамических ядер.

К 2-4 годам формирование архитектоники гипоталамуса человека заканчивается. В последующем происходит развитие волокнистых систем и дальнейшая цитологическая дифференцировка.

Более раннее, опережающее развитие крупноклеточных ядер по отношению к мелкоклеточным ядрам подбугорья подтверждает их неодинаковое филогенетическое происхождение. Супраоптические и паравентрикулярные ядра филогенетически более древние, в то время как дорсо- и вентромедиальные - более новые.

В период новорожденности особенная развитость волокнистых элементов отмечена в заднем гипоталамусе. В последующие годы постнатального развития происходит увеличение волокон в переднем и среднем гипоталамусе.

К 13-14 годам наблюдается интенсивное развитие связен гипоталамуса с передней долей гипофиза и отмечается повышение инкреторной деятельности клеток ядер подбугорья.

В течение постнатального онтогенеза продолжается увеличение абсолютного объема гипоталамуса в целом и его отдельных ядер.

До 20--25 лет изменения в гипоталамо-гипофизарной системе незначительны. Они сводятся к прогрессирующему увеличению размеров крупноклеточных элементов, некоторому увеличению размеров телец Херринга.

Вопрос 2

К мочевыводящим путям относятся почечные чашечки и лоханки, мочеточники, мочевой пузырь и мочеиспускательный канал.

Строение стенок почечных чашечек и лоханок, мочеточников и мочевого пузыря в общих чертах сходно. В них различают: слизистую оболочку, состоящую из переходного эпителия и собственной пластинки, подслизистую основу, мышечную оболочку, наружную оболочки.

Почечные чашечки и лоханки. Слизистая оболочка состоит из переходного эпителия, вслед за которым располагается собственная пластинка слизистой оболочки, незаметно переходящая в соединительную ткань подслизистой основы. Мышечная оболочка состоит из двух тонких слоев гладких мышечных клеток -- внутреннего (продольного) и наружного (циркулярного). Однако вокруг сосочков почечных пирамид сохраняется только один циркулярный слой гладких мышечных клеток. Наружная оболочка без резких границ переходит в соединительную ткань, окружающую крупные почечные сосуды.

Мочеточники обладают выраженной способностью к растяжению благодаря наличию в них глубоких продольных складок слизистой оболочки. Подслизистая основа нижней части мочеточников имеет мелкие альвеолярно-трубчатые железы, по строению напоминающие предстательную железу. Мышечная оболочка мочеточников в верхней половине состоит из двух слоев -- внутреннего (продольного) и наружного (циркулярного). Мышечная оболочка нижней части мочеточников имеет три слоя -- внутренний и наружный слои продольного направления и средний слой -- циркулярного. В мышечной оболочке мочеточников в местах их прохождения через стенку мочевого пузыря пучки гладких мышечных клеток идут только в продольном направлении. Снаружи мочеточники покрыты соединительнотканной адвентициальной оболочкой.

Мочевой пузырь. Слизистая оболочка мочевого пузыря состоит из переходного эпителия и собственной пластинки. В спавшемся или умеренно растянутом состоянии слизистая оболочка мочевого пузыря имеет множество складок. Участок стенки мочевого пузыря, имеющий форму треугольника, лишен подслизистой основы, и его слизистая оболочка плотно сращена с мышечной оболочкой. Мышечная оболочка мочевого пузыря состоит из трех ограниченных слоев -- внутреннего, наружного с продольным расположением гладких мышечных клеток и среднего -- циркулярного. Гладкие мышечные клетки часто напоминают расщепленные веретена. В шейке мочевого пузыря циркулярный слой образует мышечный сфинктер. Наружная оболочка на верхнезадней и частично на боковых поверхностях мочевого пузыря характеризуется листком брюшины (серозная оболочка), в остальной его части она является адвентициальной. Стенка мочевого пузыря богато снабжена кровеносными и лимфатическими сосудами. В серозной, мышечной и слизистой оболочках мочевого пузыря имеется также большое число рецепторных нервных окончаний.



Мужской мочеиспускательный канал:

В мужском мочеиспускательном канале соответственно выделяют: 1) простатическую часть; 2) перепончатую часть; 3) губчатую часть;

Слизистая оболочка: для простатической части уретры характерен переходный эпителий, в перепончатой части он замещается на многослойный цилиндрический, в губчатой части так же выстлана многослойным цилиндрическим, головку полового члена покрывает многослойный плоский ороговевающий. Слизистая оболочка мужской уретры характеризуется хорошо развитым железистым аппаратом.

Мышечная оболочка: образует сфинктеры. Внутренний сфинктер мочеиспускательного канала образован гладкими мышечными клетками наружного циркулярного слоя. Наружный сфинктер мочевого пузыря образуется за счет скелетной мускулатуры диафрагмы таза.

Женский мочеиспускательный канал:

Слизистая оболочка: имеет продольные складки. Эпителий слизистой образует углубления микроскопической величины - лакуны мочеиспускательного канала. Собственная пластинка слизистой содержит многочисленные эластические волокна и венозные сплетения.

Мышечная оболочка: образована двумя слоями гладкомышечных волокон: внутренний продольный и наружный циркулярный. Круговой слой связан с мускулатурой мочевого пузыря и образует внутренний непроизвольный сфинктер.

Вопрос 3.

Цитоплазма состоит из гиалоплазмы и органеллы.

Гиалоплазма или матрикс цитоплазмы составляет внутреннюю среду клетки. Химический состав. Гиалоплазма состоит из воды (90 %) и различных биополимеров (7 %) белков, нуклеиновых кислот, полисахаридов, липидов, из которых основную часть составляют белки различной химической и функциональной специфичности. В гиалоплазме содержатся также аминокислоты, моносахара, нуклеотиды и другие низкомолекулярные вещества. Через оболочку (билипидную мембрану) гиалоплазма взаимодействует с внеклеточной средой. Следовательно, гиалоплазма является весьма динамичной средой и играет важную роль в функционировании отдельных органелл и жизнедеятельности клетки в целом.

Строение цитоплазматической мембраны (ЦПМ).

Химический состав - состоит из белков (50-55 %) и липидов (40 %).

Схема ультраструктуры:

двойной слой липидных молекул (билипидная мембрана), в которую местами включены молекулы белков - интегральных (пронизывают всю толщу билипидного слоя, участвуют в транспорте электролитов, ионов) и полуинтегральных (включающиеся только в монослой липидов: наружный или внутренний, выполняют роль активного транспорта аминокислот в клетку или из клетки.)

Каждый монослой ее образован в основном молекулами фосфолипидов и, частично, холестерина. При этом в каждой липидной молекуле различают две части:

- гидрофильную головку;

- гидрофобные хвосты.

Гидрофобные хвосты липидных слоев молекул связываются друг с другом и образуют билипидный слой. Гидрофильные головки билипидного слоя соприкасаются с внешней или внутренней средой. Билипидная мембрана, а точнее ее глубокий гидрофобный слой, выполняет барьерную функцию, препятствуя проникновению воды и растворенных в ней веществ, а также крупных молекул и частиц.

Гидрофильные головки обеспечивают транспорт жирорастворимых веществ.

Белковые молекулы встроены в билипидный слой мембраны локально и не образуют сплошного слоя. По расположению и функции выделяют три вида белковых молекул.

1.интегральные;

2.полуинтегральные,

3.покровные, прилежащие к мембране, но не встроенные в нее. формообразующая, разграничительная, рецепторная функция.

Строение плазмолеммы - оболочки клетки.

Плазмолемма - оболочка животной клетки, ограничивающая ее внутреннюю среду и обеспечивающая взаимодействие клетки с внеклеточной средой. Плазмолемма имеет толщину около 10 нм и более.

Химический состав - состоит из белков 50-55 %, 40 % из липидов, 5-10 % - углеводов (в составе гликокаликса), Плазмолемма состоит из трех слоев:

1.наружный (электронноплотный). Представлен молекулами углеводов, имеющими вид разветвленных цепочек

2.промежуточный (с низкой электронной плотностью) представлен ЦПМ.

3.внутренний (электронноплотный) образован микротрубочками и микрофиламентами

Микрофиламенты - это фибриллярные сократительные белки. Микротрубочки дополнительно участвуют в транспорте ионов, электролитов через цитоплазму клеток..

Функции плазмолеммы:

1. Разграничивающая (барьерная);

2. Антигенная - защитная.

3. Участие в образовании межклеточных контактов.

4. Рецепторная. Эту роль выполняют рецепторные белки, гликопротеиды, которые формируют на поверхности мембраны специфические структуры. Пример: штифтики у рецепторных вкусовых луковиц, «булавы» - у чувствительных обонятельных клеток и т.д. РОЛЬ: рецепторы передают воспринимаемые сигналы на внутриклеточные ферментные системы, усиливая или угнетая обмен веществ, и тем самым оказывают влияние на функции клеток.

5.Транспортная функция. обмен клетки с окружающей средой.

6.Участие во внутриклеточном пищеварении.

Участие в образовании органелл спец. назначения: микроворсинок, ресничек, жгутиков, псевдоподии при передвижении клетки.

Ультраструктура и функции ядра.

Ядро имеется в любой соматической клетке, кроме зрелых эритроцитов. В некоторых соматических клетках может быть 2-3 ядра (многоядерные клетки, которые образуются в результате незавершенного митоза. Происходит удвоение ДНК, далее - кариотомия, а цитотомия отсутствует).

Функции ядер соматических и половых клеток:

· - барьерная, (отделяет содержимое ядра от цитоплазмы), ограничивает доступ крупных агрегатов биополимеров.

· - хранение генетической информации, закодированной в молекулах ДНК;

· - репарация (восстановление) молекул ДНК после их повреждения с помощью специальных репаративных ферментов;

· - редупликация (удвоение) ДНК в синтетическом периоде интерфазы;

· - передача генетической информации дочерним клеткам во время митоза;

· - реализация генетической информации, закодированной в ДНК, для синтеза белка и небелковых молекул: образование аппарата белкового синтеза информационной, рибосомальной и транспортной РНК.

· - обеспечивает синтез белка.

· - обеспечивает синтез всех видов РНК.

· - образование субъединиц рибосом.

· - регулирует обменные процессы клетки

· - наружная оболочка в ряде клеток участвует в синтезе белка.

· - внутренняя мембрана обеспечивает примембранную локализацию гетерохроматина.

Ультраструктура ядра.

Основные структуры ядер.ядерной оболочки, кариоплазмы, хроматина и ядрышек или хромосом.

1.Ядерная оболочка Ядерная оболочка состоит из двух ЦПМ - внешней и внутренней.

Внутренняя и наружная мембраны, замыкаясь на себя образуют поры. Поры закрыты белковыми комплексами. Белковые комплексы и диаметр пор обеспечивают избирательную проницаемость веществ их цитоплазмы в кариоплазму и наоборот. Между наружной и внутренней мембранами оболочки ядра имеется перинуклеарное пространство. Оно заполнено цитоплазмой. На наружной поверхности, обращенной к цитоплазме клетки, расположены рибосомы, синтезирующие белок. С внутренней поверхностью оболочки ядра связан гетерохраматин.

2. Кариоплазма.

В состав кариоплазмы входят: вода, микро-макроэлементы, нуклеиновые кислоты: ДНК и РНК гистоновые и негистоновые белки, углеводы до 5%, нет липидов. Следует выделить и обменную функцию белков кариоплазмы.

Хроматин- хромосомы, утратившие в интерфазу компактную форму.

Ядрышко - 2 компонента. В центре - фибриллярный, По периферии - гранулярный.

Роль: это место образования рибосомных (р-РНК) субъединиц рибосом. Образование ядрышек происходит на хромосомах в области ядрышковых организаторов (вторичной перетяжки).

Органеллы

Органеллы - постоянные структурные элементы цитоплазмы клетки, имеющие специфическое строение и выполняющие определенные функции.

Классификация органелл

1. По строению органеллы в свою очередь делятся на: мембранные органеллы и немембранные.

К группе мембранных органелл относятся:

-оболочка клетки

-оболочка ядра

- митохондрии,

- эндоплазматическая сеть,

- пластинчатый комплекс Гольджи,

- лизосомы,

К группе немембранных органелл:

· рибосомы,

· клеточный центр,

· микротрубочки,

· микрофибриллы,

· микрофиламенты.

- пероксисомы;

МЕМБРАННЫЕ ОРГАНЕЛЛЫ

Митохондрии. Форма митохондрий может быть овальной, округлой, вытянутой и даже разветвленной, но преобладает овально-вытянутая. Стенка митохондрий образована двумя билипидными мембранами. Внешняя мембрана охватывает по периферии в виде мешка всю митохондрию и отграничивает ее от гиалоплазмы. Внутренняя мембрана отграничивает внутреннюю среду митохондрии, при этом она образует внутрь митохондрии складки - кристы. Внутренняя среда митохондрии (митохондральный матрикс) имеет тонкозернистое строение и содержит гранулы (митохондриальные ДНК и рибосомы).

Функции митохондрий - образование энергии в виде АТФ - окисление пировиноградной кислоты в митохондриальном матриксе в цикле трикарбоновых кислот, а на кристах митохондрий осуществляется фосфорилирование АДФ и образование АТФ. Образующаяся в митохондриях АТФ является единственной формой энергии, используемой клеткой для выполнения различных процессов.

Эндоплазматическая сеть представлена в форме уплощенных цистерн. Стенка этих образований состоит из билипидной мембраны. Различают две разновидности эндоплазматической сети:

· зернистая (гранулярная или шероховатая) - прикреплены рибосомы

· незернистая или гладкая.

Функции зернистой эндоплазматической сети: синтез белков, предназначенных для выведения из клетки;

Функции гладкой эндоплазматической сети: участие в синтезе гликогена; синтез липидов; нейтрализация токсических веществ, посредством соединения их с другими веществами.

Пластинчатый комплекс Гольджи (сетчатый аппарат, транспортный аппарат клетки) представлен скоплением уплощенных цистерн и небольших везикул, ограниченных билипидной мембраной. Пластинчатый комплекс подразделяется на субъединицы - диктиосомы. В диктиосоме различают два полюса:

· цис-полюс - направлен основанием к ядру;

· транс-полюс - направлен в сторону цитолеммы.

Функции пластинчатого комплекса: транспортная - выводит из клетки синтезированные в ней продукты; образование лизосом (совместно с зернистой эндоплазматической сетью); участие в обмене углеводов;

Лизосомы. Представляют собой тельца, ограниченные липидной мембраной и содержащие электронноплотный матрикс, состоящий из набора гидролитических белков-ферментов (50 гидролаз), способных расщеплять любые полимерные соединения (белки, липиды, углеводы и их комплексы) на мономерные фрагменты. Маркерным ферментом лизосом является кислая фосфатаза.

Функция лизосом - обеспечение внутриклеточного пищеварения, то есть расщепления как экзогенных, так и эндогенных веществ.

Пероксисомы - микротельца цитоплазмы (0,1-1,5 мкм), сходные по строению с лизосомами, однако отличаются от них тем, что в их матриксе содержатся кристаллоподобные структуры, а среди белков-ферментов содержится каталаза, разрушающая перекись водорода, образующуюся при окислении амин.

НЕМЕМБРАННЫЕ ОРГАНЕЛЛЫ

Рибосомы - аппарат синтеза белка и полипептидных молекул.

По локализации подразделяются на: свободные (находятся в гиалоплазме) и несвободные или прикрепленные (связаны с мембранами эндоплазматической сети).

Каждая рибосома состоит из малой и большой субъединиц. Каждая субъединица рибосомы состоит из рибосомальной РНК и белка рибонуклеопротеида, которые образуются в ядрышке.

Свободные и прикрепленные рибосомы, помимо отличия в их локализации, отличаются определенной функциональной специфичностью: свободные рибосомы синтезируют белки для внутренних нужд клетки (белки-ферменты, структурные белки), прикрепленные синтезируют белки "на экспорт".

Клеточный центр - цитоцентр,

В неделящейся клетке клеточный центр состоит из двух основных структурных компонентов: диплосомы и центросферы. Диплосома состоит из двух центриолей - материнской и дочерней, расположенных под прямым углов друг к другу. Центросфера - бесструктурный участок гиалоплазмы вокруг диплосомы, от которого радиально отходят микротрубочки (лучистая сфера).

Функции цитоцентра: образование веретена деления в профазе митоза; участие в формировании микротрубочек клеточного каркаса;

Микротрубочки - обеспечивает движение ресничек и жгутиков.

Микрофибриллы Функциональная роль микрофибрилл состоит в участии в формировании клеточного каркаса, выполняя опорную функцию.

Микрофиламенты составляют сократительный аппарат клетки, обеспечивающий различные виды движений: перемещение органелл; изменение клеточной поверхности;

Скопление микрофиламентов в мышечных волокнах образует специальные органеллы - миофибриллы.

Классификация органелл по назначению (функции)

1.группа:Органеллы общего назначения присущие всем клеткам и обеспечивают различные стороны жизнедеятельности клетки, т. е. в целом - обмен веществ. К этой группе относятся:1. ядро, 2.оболочка - цитолемма (плазмолемма), 3.ЭПС, 4.аппарат Гольджи, 5. рибосомы, 6.митохондрии, 7.лизосомы, 8.пероксисомы, 9.клеточный центр (см. описание строения и функции выше).

2 группа: Органеллы специального назначения имеются только у дифференцированных, зрелых функционирующих клетках и выполняют специфические (конкретные) функции этих клеток.

А. цитоплазматические: миофибриллы, нейрофибриллы, тонофибриллы, базальные тельца, жгутик

Б. органеллы клеточной поверхности: реснички, микроворсинки, исчерченность.

Изготовление гистологического препарата.

1. Взятие материала. Из органа вырезается кусочек, размеры которого не должны превышать 1 куб .см.

2. Фиксация материала. Фиксирующие жидкости: 10-12% раствор формалина в воде (фиксировать от 3 часов до 1 суток и более).

3. Обезвоживание материала, обезжиривание и уплотнение его.

4. Заливка материала. Заливка производится в парафин, целлоидин или желатину.

5. Приготовление гистологических срезов. Срезы производятся бритвой производятся, толщина которых не должна превышать 10-12 микрон.

6. Окраска гистологических срезов. Различные тканевые элементы избирательно относятся к красителям, что, позволяет их дифференцирование окрасить. Ядра клеток прочнее окрашиваются основными красителями (гематоксилин, азур, кармин и др.). Цитоплазма красителя кислыми красителями (эозин, фуксин, аналин и др.).

7. Обезвоживание, просветление окрашенных срезов и заливка их в бальзам. Окрашенные срезы обезвоживают в 2-х порциях 96 спирта, просветляют в карболе-ксиоле. переносят посредством шпателя на предметное стекло, наносят на срез каплю бальзама и покрывают покровным стеклом.

Виды микроскопии:

1) световая микроскопия (наиболее распространенный вид микроскопии, при этом разрешающая способность микроскопа составляет 0,2 мкм);

2) ультрафиолетовая микроскопия (разрешающая способность микроскопа составляет 0,1 мкм);

3) люминисцентная микроскопия (применяется для определения в исследуемом гистологическом препарате определенных химических структур);

4) фазово-контрастная микроскопия (применяется для обнаружения и изучения определенных структур в неокрашенных гистологических препаратах);

5) поляризационная микроскопия (используется в основном для изучения волокнистых структур);

6) микроскопия в темном поле применяется для изучения живых объектов;

7) микроскопия в падающем свете (предназначена для изучения толстых объектов);

8) электронная микроскопия (наиболее современный вид микроскопии, имеющий разрешающую способность 0,1--0,7 нм). Имеются две разновидности электронной микроскопии -- просвечивающая (трансмиссионная) и сканирующая (или растворная) микроскопия, дающая отображение поверхностных ультраструктур.

БИЛЕТ № 2

1.Яичник. Органогенез. Гистофизиология коркового и мозгового вещества. Овогенез. Фолликулогенез. Развитие желтого тела. Атрезия фолликулов. Овариальные циклы. Регуляция. Возрастные изменения.

2.Хрящевая ткань. Источник развития. Принцип строения. Классификация. Расположение. Отличительные особенности видов хрящевой ткани. Строение хряща как органа. Трофика. Рост. Регенерация.

3. Кровеносные и лимфатические сосуды. Классификация. Принцип строения стенки. Тканевой состав оболочек. Отличительные особенности и обуславливающие их причины



Вопрос 1

Яичник - парная женская половая железа, располагается в области малого таза. В яичниках развиваются и созревают женские половые клетки (яйцеклетки), а также продуцируются поступающие в кровь и лимфу женские половые гормоны - эстрогенов и прогестеронов.

Снаружи яичник покрыт белочной оболочкой и зачатковым эпителием (мезотелием). Паренхима органа состоит из коркового и мозгового вещества.

В корковом веществе находится большое количество мелких примордиальных (первичных) фолликулов. Овоцит 1 порядка первичного фолликула окружен одним слоем плоских или кубических фолликулярных клеток.

Глубже расположены вторичные (плотные) фолликулы. Овоцит I порядка окружен слоем фолликулярных клеток (зернистый слой) и соединительно-тканной оболочкой - текой. Объем овоцита увеличивается в два раза.

Несколько глубже располагаются пузырчатые фолликулы (зрелые). В овоците видны ядро и цитоплазма. Окружающая овоцит блестящая оболочка, при слегка опущенном конденсоре, выглядит как сильно преломляющий ободок розового цвета на поверхности овоцита. Вокруг овоцита просматривается лучистый венец, образованный фолликулярными эпителиоцитами. Фолликул заполнен фолликулярной жидкостью. За базальной мембраной лежит соединительно-тканная внутренняя тека с капиллярами. Наружная тека состоит из плотно расположенных друг к другу волокон и веретенообразной формы клеток.

Атретические тела можно узнать по сохранившейся в них деформированной блестящей оболочке разрушенного овоцита.

Мозговое вещество содержит кровеносные и лимфатические сосуды, окруженные рыхлой соединительной тканью. В мозговом веществе можно обнаружить рудиментарные эпителиальные тяжи.

Овогенез протекает в корковом веществе яичника и включает 3 фазы: 1) размножения, 2) роста и 3) созревания.

Фаза размножения овогоний происходит внутриутробно и завершается до рождения; большая часть образовавшихся клеток гибнет, меньшая вступает в фазу роста, превращаясь в первичные овоциты.

Фаза роста овоцита складывается из двух периодов: малого и большого. Первый отмечается до полового созревания в отсутствие гормональной стимуляции; второй происходит только после него под действием фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) гипофиза и характеризуется периодическим вовлечением фолликулов в циклическое развитие, завершающееся их созреванием.

Фаза созревания начинается с возобновления деления первичных овоцитов в зрелых фолликулах непосредственно перед наступлением овуляции. При завершении I деления созревания образуются вторичный овоцит и мелкая, почти лишенная цитоплазмы клетка - первое полярное тельце. Вторичный овоцит сразу же вступает во II деление созревания, которое, однако, останавливается в метафазе. При овуляции вторичный овоцит выделяется из яичника и поступает в маточную трубу, где в случае оплодотворения спермием завершает фазу созревания с образованием гаплоидной зрелой женской половой клетки (яйцеклетки) и второго полярного тельца. Полярные тельца в дальнейшем разрушаются. В отсутствие оплодотворения половая клетка подвергается дегенерации на стадии вторичного овоцита.

Овогенез протекает при постоянном взаимодействии развивающихся половых клеток с эпителиальными в составе фолликулов, изменения которых известны как фолликулогенез.

Овариальный цикл:

Дни	Фаза овариального цикла	Гормоны выделяемые гипофизом	Процессы в яичнике	Гормоны в яичнике
1-4	Относительного покоя	Минимум ЛГ (лютропин) и ФСГ (фоллитропин)	Отсутствие процессов фолликулогенеза. Атрофия желтого тела	Не вырабатываются
5-14	Фолликулогенез	Фоллитропин (фолликулостимулирующий гормон)	Формирование зрелого Граафового пузырька (третичный фолликул)	Эстрогены, гонадокринин
15-28	Лютеиновая	ЛГ (лютеотропный гормон)	Овуляция, образование желтого тела	Прогестерон - удерживает слизистую матки в покое

Фолликулогенез:

1) примордиальный фолликул: овоцит в 4 стадии профазы мейоза+фолликулярные клетки

2) первичный фолликул: овоцит 1 порадка+слой плоских или кубич. Фолликулярных клеток

3) вторичный фолликул: овоцит 1 порядка+зернистый слой (фолликулярные клетки)+тека

4) третичный фолликул (или граафов пузырек): овоцит 2 порядка+яйценосный буорок+лучистый венец+тека.

Во время овуляции фолликул разрывается, овоцит, окруженный фолликулярными клетками выбрасывается в брюшную полость и поступает в матку. При этом в овоците формируется зрелая яйцеклетка.

Лютеиновая фаза: На месте лопнувшего фолликула образуется желтое тело. Оно развивается из граафова пузырька и состоит из лютеинезированных фолликулов и клеток теки, между которыми располагаются капилляры синусоидального типа. В лютеиновую стадию цикла функционирует менструальное желтое тело, которое поддерживает в крови высокий уровень эстрогенов и прогестерона и обеспечивает подготовку эндометрия к имплантации. В последующем развитие желтого тела стимулируется хорионическим гонадотропином (только при условии оплодотворения). Если оплодотворение не произошло, то желтое тело подвергается инволюции, после чего в крови значительно понижаются уровни прогестерона и эстрогенов. При условии оплодотворения и имплантации образуется желтое тело беременности. Высокий уровень прогестерона, образующегося в желтом теле, и эстрогенов позволяет сохранить беременность. Наиболее активно желтое тело беременности функционирует в первом и начале второго триместров, затем его функция постепенно угасает, а синтез прогестерона начинает осуществляться сформировавшейся плацентой. После дегенерации желтого тела, на его прежнем месте формируется соединительно-тканный рубец, называемый белым телом.

Атрезия фолликулов. Одновременно с прогрессивным процессом - фолликулогенезом в корковом веществе часть фолликулов подвергается обратному развитию - атрезии (регрессивный процесс), при этом формируется атретическое тело, в центре которго лежат участки блестящей оболочки разрушенного овоцита.

Возрастные изменения. Размеры яичников и их вес у новорожденной девочки крайне малы. К 1 году вес их увеличивается в 2,5 раза. В 5-6 лет вес каждого яичника достигает 1 грамма, а к 12 годам они вновь увеличиваются вдвое и их вес уже несколько превышает 2 грамма.

Только к 20 годам яичник достигает предельного веса - чуть больше 6,5 грамма.

У новорожденной девочки резкой границы между корковым и мозговым веществом различить не удается. Корковый слой широк и содержит огромное количество примордиальных фолликулов (300-400 тыс.), расположенных в 20 и более рядов.

К концу первого года жизни количество примордиальных фолликулов значительно уменьшается и затем с каждым годом продолжает неуклонно снижаться. Так к 8 годам их остается 25 тыс., к 10 годам - 20 тыс., к 14 годам - 16 тыс., к 18 годам - от 5 до 7 тыс. Количество ооцитов уменьшается главным образом и связи с процессом атрезии, и в меньшей степени - благодаря овуляции.

В постнатальном периоде процесс развития фолликулов интенсивен, и яичник девочки 12-13 лет, как правило, содержит несколько вторичных фолликулов и граафовых пузырьков. Однако полного развития фолликулы достигают в периоде половой зрелости.

Соединительнотканная основа яичника новорожденных более плотная. Она приобретает специфические черты строения только многие годы спустя. Вес яичника первых лет жизни нарастает и за счет роста соединительнотканной основы и кровеносных сосудов.

При воздействии неблагоприятных факторов (при осложнении беременности и родов) замедляется или нарушается созревание яичников в постнатальном онтогенезе. Ингибирующее воздействие на созревание яичников оказывают заболевания матери: малокровие, резус конфликт, поздние токсикозы беременности.

Вопрос 2

Хрящевая ткань - скелетная соединительная ткань.

Хрящевая ткань мезенхимного происхождения. Это определяет принцип строения ткани - клетки и межклеточное вещество.

Хрящевая ткань состоит из клеток -- хондроцитов и хондробластов, а также из плотного межклеточного вещества. Хондробласты - небольшие клетки овальной формы с базофильной цитоплазмой, расположенные одиночно. Эти клетки постепенно дифференцируются в дефинитивные клетки хрящевой ткани -- хондроциты. Хондробласты обладают способностью митотического деления. В надхрящнице (состоит из 2ух слоев, наружный - фиброзный. Внутренний - сосудистый) , окружающей хрящевую ткань, содержатся неактивные, малодифференцированные формы хондробластов, которые при определенных условиях дифференцируются в хондробласты, синтезирующие межклеточное вещество, а затем и в хондроциты.

Классификация хрящевых тканей основана на особенностях строения и биохимического состава их межклеточного вещества и выделяет: (1) гиалиновую хрящевую ткань, (2) эластическую хрящевую ткань и (3) волокнистую (фиброзную) хрящевую ткань.

Гиалиновая хрящевая ткань широко распространена и входит в состав крупных хрящей гортани (щитовидного и перстневидного), трахеи, хрящевой части ребер. Особенности: наличие классических изогенных групп округлой формы, состоящих из 4-6 хондроцитов. Хондробласты выявляются, но количество их меньше. В хондромукоиде не просматриваются коллагеновые волокна, так как угол их преломления одинаков с основным веществом.

Волокнистый хрящ. В организме встречается лишь в ограниченных местах: составляет часть межпозвоночных дисков (фиброзное кольцо), а также локализуется в местах прикрепления связок и сухожилий к гиалиновым хрящам. Особенности: послойное расположение пучков коллагеновых волокон в виде пучков, расположенных по силовым линиям. Между пучками просматриваются изогенные группы в виде «цугов» - удлиненной формы из 2ух, 3ех хондроцитов. Пучки коллагеновых волокон постепенно распадаются и переходят в волокна сухожилия

Эластический хрящ. (ушная раковина, хрящи наружного носа, мелкие хрящи гортани, бронхов) Особенности: изогенные группы располагаются столбиками, направленными перпендикулярно поверхности хрящевой ткани, в межклеточном веществе видны многочисленные эластические волокна, образующие сеть.

Хрящ как орган включает функционально ведущую и количественно преобладающую хрящевую ткань, которая образует два нерезко разграниченные слоя (зоны), а также покрывающую его снаружи соединительнотканную оболочку - надхрящницу.

Зона молодого хряща - сравнительно тонкая, расположена под надхрящницей и состоит из уплощенных хондроцитов, которые лежат поодиночке параллельно поверхности хряща и окружены гомогенным оксифильным матриксом. Зона зрелого хряща располагается глубже предыдущей и представлена округлыми хондроцитами, собранными в изогенные группы и окруженными преимущественно базофильным матриксом. Надхрящница обеспечивает механическую связь хряща с другими структурами (сухожилиями, связками и др.), она содержит кровеносные сосуды (обеспечивает питание хряща), нервы и камбиальные элементы хрящевой ткани.

Трофика: за счет надкостницы и синовиальной жидкости сосудов

Рост. Регенерация хряща. Надхрящница -- оболочка, покрывающая развивающийся хрящ снаружи. Во внутренней зоне надхрящницы клетки интенсивно делятся, дифференцируются в хондробласты. В процессе секреции и наслаивания на уже имеющийся хрящ сами клетки «замуровываются» в продукты своей деятельности. Так происходит рост хряща способом наложения, или его аппозиционный (периферический) рост.

Хрящевые клетки, лежащие в центре молодого развивающегося хряща, сохраняют способность в течение некоторого времени делиться митотически, оставаясь в одной лакуне (изогенные группы клеток), и вырабатывать коллаген II типа. За счет увеличения количества этих клеток происходит увеличение массы хряща изнутри, что называется интерстициальным ростом. Интерстициальный рост наблюдается в эмбриогенезе, а также при регенерации хрящевой ткани.

Вопрос 3

Кровеносные сосуды. Развиваются из мезенхимы зародыша.

Классификация:

1. артерии (мышечного, эластического и смешанного типов)

2. вены

3. артериолы

4. венулы

5. каппиляры

Артерии. Стенка:

1.Интима (внутренняя оболочка) имеет зубчатый характер, представлена эндотелием(эпителием), более вытянут по сравнению с венами, и соединительнотканной пластинкой (рыхлая соединительная ткань), без сосудов Граница между внутренней и средней оболочкой - внутренная пограничная эластическая мембрана - хорошо выражена, мощнее всего развита у аорты

2.Медиа (средняя оболочка, мышечная) - циркулярно расположенные миоциты (гладкая мышечная ткань). Миоциты располагаются слоями, больше слоев у крупных артерий, между слоями - промежуточная эластическая мембрана. У артерий медиа развита хорошо - в 2 раза толще адвентиции. Между средним и наружным слоем - наружная пограничная эластическая мембрана, хорошо развита, поддерживает диаметр сосудов (обр эластический каркас)

3.Адвентиция (наружная оболочка) - соединительнотканная оболочка. Имеются сосуды, располагающиеся в прослойках рыхлой соединительной ткани, питающие стенку до внутренней пограничной мембраны.

В целом стенка артерий толще чем у вен.

Вены. Стенка:

1.Интима: эндотелий - близок к кубическому. Внутренняя пограничная эластическая мембрана выражена слабо, поэтому интима у вен ровная.

2.Медиа: развита слабо, миоциты расположены циркулярно, но пучками, между которыми прослойки рыхлой соединительной ткани. Наружная промежуточная мембрана отсутствует.

3.Адвентиция: развита хорошо, толще чем медиа за счет пучков миоцитов, расположенных продольно. Они поднимают и проталкивают кровь к сердцу.

Микроциркуляторное русло - это обменные сосуды. Включает в себя артериолы (мельчайшие артерии), венулы (мельчайшие вены), капилляры (гемокапилляры, стыковое звено). Когда капилляры отсутствуют возникают анастамозы. Принцип строения стенки: также три оболочки интима, медиа, адвентиция; истончена средняя - медиа; у артериол стенка толща, 1-2 слоя циркулярно расположенных миоцитов, эритроциты через стенку не просвечивают; у венул в стенке единичные миоциты, эритроциты просвечивают и поэтому венулы розового цвета.

Гемокапилляры. Стенка: состоит из эндотелиоцитов, выстилающих сосуд изнутри, и базального слоя (в нем различают перициты - клеточный компонент и базальная мембрана - неклеточный компонент), адвентиция.

Типы каппиляров:

1. капилляры соматического типа (у мыщц) - сплошной базальный слой, нет пор и фенестр

2. капилляры висцерального типа (у почек, кишечника) - сплошной базальный слой, фенестрированный эндотелий

3. синусоидные капилляры ( у печени, костного мозга) - прерывистый базальный слой, большой диаметр, имеет щели

Лимфатические сосуды: подразделяются на

1. лимфатические капилляры - начинается в тканях слепо, стенка состоит из эндотелиоцитов, базальный слой отсутствует.

2. Внутри- и внеорганные лимфатические сосуды - внутренняя оболочка образует клапаны

БИЛЕТ №3

Вопрос 1:

Тимус.

Центральный орган кроветворения(лимфоцитопоэз)и иммунитета (из костномозговых предшественников Т-лимфоцитов происходит их дифференцировка в Т-лифоциты). Разновидности Т лимфоцитов осущетвляют реакции клеточного и гуморального иммунитета.

Развитие: Закладка у человека происходит к концу первого месяца внутриутробного развития из эпителия глоточной кишки в области 3,4 пар жаберных карманов, как экзокринная железа (в виде тяжей многослойного эпителия).Проксимальная часть вытягивается подобно выводному протоку, а дистальная образует тело тимуса. В дальнейшем тяж соединяющий железу с эпителием жаберных карманов подвергается обратному развитию. К концу 2-го месяца эмбриогенеза орган заселяется лимфоцитами. Затем мезенхима с сосудами, врастающая в эпителиальную закладку подразделяет тимус на дольки. На 3-м месяце дифференцировка органа на мозговую и корковые части(в ней больше лимфоцитов). Т-лимфоциты (размножившиеся митозом) мигрируют в загладки лимфатических узлов и др. лимфоидные органы - тимусзависимые зоны. 3-5 месяц -появление разных типов ретикулярных эпителиоцитов. Конец формирования, это когда ретикулярные эпителиоциты начинают секретировать гормоны, а вне тимуса появляются Т-киллеры, супрессоры и хелперы.

Строение, кроветворная и эндокринная функция:

Снаружи вилочковая железа покрыта соединительнотканной капсулой. От нее внутрь органа отходят междольковые соеднинительнотканные перегородки, разделяющие железу на дольки. Особенность долек в том,что они ограничены от окружающей соединительной ткани базальной мембраной.

Эндокринная функция. Гормон Тимозин вырабатывается тимоцитами) стимулирует дифференцировку Т-лимфоцитов. Гормон роста- развитие всех органов тела (кроме половых).

Кроветворная функция: Лимфоцитопоэз . В корковом веществе тимуса происходит "обучение" Т-лимфоцитов, т.е. они приобретают способность распознавать "свое" или "чужое". В тимусе образуются лимфоциты строго специфичные для всех возможно мыслимых А-генов, даже против своих клеток и тканей, но в процессе "обучения" все лимфоциты имеющие рецепторы к своим тканям уничтожаются, оставляются только те лимфоциты, которые направлены против чужеродных Антигенов. Вот поэтому в корковом веществе наряду с усиленным размножением видим и массовую гибель лимфоцитов. Таким образом в тимусе из предшественников Т-лимфоцитов образуются субпопуляции Т-лимфоцитов, которые в последующем попадают в периферические лимфоидные органы, дозревают и функционируют.

Гистофизиология долек:

Основа долек- сетчатый эпителий:эпителиальные клетки отросчатые,соединяются отростками,образуют сеть. Его функции:1)микроокружение для созревающих лимфоцитов 2)синтез гормона тимозина (нужен в эмбр. периоде для нормальной закладки и развития периферических лимфоидных органов,а в постэмбр. периоде для регуляции их функции, 3)Трофическая4)Опорная). В её петлях- лимфоциты (тимоциты).

Вещество долек делится на 2 слоя: корковый и мозговой. В корковом в петлях сетчатого эпителия больше тимоцитов- поэтому корковая часть темнее, мозговой (там меньше). В мозговой В центральной части дольки стареющие эпителиальные клетки образуют слоистые тимусные тельца или тельца Гассаля - концентрически наслоенные эпителиальные клетки с вакуолями, гранулами кератина и фибриллярными волокнами в цитоплазме.

Взаимодействие стромальных и гемопоэтических элементов:

Строма- из отросчатых эпителиальных клеток- тимоцитов,они контактируют отростками. В петлях-лимфоциты разной степени развития (лимфобласты- на перефирии в субкапсулярной зоне,а глубже более зрелые- в мозговом веществе)Они покидают мозговое вещество через венулы кортикомедуллярной зоны в кровоток.

...