Предмет, методы и содержание микробиологии

Болезнь протекает приступами продолжительностью от одних до трех суток. Число приступов больше, чем при эпидемическом возвратном тифе.

Микробиологическая диагностика проводится путем микроскопии толстой капли и мазков крови. Ставится биологическая проба на морских свинках, у которых после заражения кровью больного развивается заболевание, а в крови животного обнаруживаются боррелий.

Для лечения применяют тетрациклин, левомицетин.

Возбудитель системного клещевого боррелиоза (болезни Лайма).

В 1975 г. заболевание было описано у группы жителей города Лайма штата Коннектикут (США). В 1982 г. У. Бургдорфер выделил из клещей боррелий. Возбудитель получил название Borrelia burgdorferi.

По морфологии это подвижная грамотрицательная боррелия длиной 4-30 мкм.

Культивируется на сложной питательной среде, оптимальная температура роста 33-37°С. При культивировании на питательной среде утрачивает вирулентность. Хорошо культивируется в организме монгольских хомячков.

Заболевание у человека. Системный клещевой боррелиоз (хроническая мигрирующая эритема, болезнь Лайма, клещевая эритема) - природно-очаговая инфекция. Естественным резервуаром боррелий являются дикие животные (грызуны, сумчатые, олени), птицы, а также домашние животные (кошки, собаки, овцы, крупный рогатый скот). Клещи определенных видов заражаются от животных, у некоторых клещей возможна трансовариальная передача возбудителя. Инфицированные клещи заражают человека при укусе. Инкубационный период продолжается от трех дней до месяца. Выделяют три фазы болезни:

Фаза I - общетоксическая. В месте укуса клеща появляется папула, затем кольцевидная эритема, быстро увеличивающаяся в размерах, с бледным центром и приподнятыми краями.

Фаза II - неврологические и кардиальные расстройства, развивающиеся на 4-5 неделе заболевания. Фаза продолжается в течение одного или нескольких месяцев.

Фаза III - артритическая, проявляется поражением суставов.

Лабораторная диагностика проводится путем выделения боррелий из материала, взятого в области эритемы, из синовиальной или церебральной жидкости, а также путем обнаружения антител к В. burgdorferi в парных сыворотках, взятых с интервалом в 2 недели.

Лечебные препараты. Пенициллины, тетрациклин, эритромицин, левомицетин.

Лептоспиры

Возбудитель лептоспироза - Leptospira interrogans.

Морфология, биологические свойства. Лептоспиры - тонкие спиралевидные микроорганизмы длиной 6-15 мкм, с многочисленными мелкими завитками (лат. leptos - мелкий, spira - завиток), концы загнуты в виде крючков и утолщены (рис. 41). Лептоспиры очень подвижны, их изучают живыми, в темном поле зрения, так как они прозрачны и в проходящем свете не видны. Анилиновыми красителями лептоспиры окрашиваются плохо, по Романовскому-Гимза - в розовый цвет. В фиксированных окрашенных препаратах видны загнутые концы лептоспир, которые придают им вид буквы S или С.

Факультативные анаэробы. Культивируются в жидкой питательной среде, содержащей кроличью сыворотку, при температуре 28-30°С. Растут медленно, рост обнаруживается на 5-7-й день культивирования при микроскопии в темном поле зрения. Культура остается прозрачной.

Антигены. По антигенной структуре лептоспиры делят на серогруппы и серовары.

Факторы патогенности - адгезивность в отношении эндотелия капилляров. При разрушении лептоспир освобождается эндотоксин.

Устойчивость. Лептоспиры быстро погибают при действии высоких температур, дезинфицирующих средств, но устойчивы к низким температурам, длительно выживают в воде, благодаря чему сохраняются в природных условиях. В открытых водоемах остаются живыми в течение 2-3 недель в почве до 3 месяцев, на пищевых продуктах - несколько дней.

Заболевание у человека. Лептоспироз - зоонозная инфекция. Источником инфекции для человека являются больные и переболевшие дикие и домашние животные, выделяющие возбудителей с мочой и заражающие воду и почву. Больной человек не является источником инфекции.

Заражение человека происходит при купании и употреблении воды из водоемов, пищевых продуктов, загрязненных инфицированной мочой, а также при уходе за больными животными. В организм человека лептоспйры проникают через слизистые оболочки и поврежденную кожу. Инкубационный период продолжается 7-10 дней. Лептоспйры распространяются по всему организму, поражая паренхиматозные органы: печень, почки, легкие. При поражении печени развивается желтуха. Повреждение стенки кровеносных сосудов приводят к кровоизлияниям в различных органах.

Иммунитет после перенесенной болезни стойкий, но типоспеци-фический, поэтому возможно повторное заболевание, вызванное другими сероварами.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования на первой неделе заболевания служит кровь, в последующем - моча. Производят посевы, обнаруживают на 5-7-й день культивирования лептоспйры. Серотип их определяют в живых культурах с помощью иммунных сывороток, наблюдая в темном поле микроскопа агглютинацию лептоспир, затем их лизис. Применяют биологический метод - заражение морских свинок внутрибрюшинно.

Серологическую диагностику проводят путем обнаружения антител в сыворотке крови больного с помощью реакции агглютинации-лизиса живых культур лептоспир. Исследуют парные сыворотки крови, взятой в период разгара болезни и в более поздние сроки. Диагностическим считается нарастание титра в 4 раза. Используют также РСК и РИГА.

Профилактические и лечебные препараты. Вакцина представляет собой взвесь убитых лептоспир нескольких серогрупп. Вакцинируют людей, принадлежащих к группам риска. Для лечения применяют пе-нициллины, тетрациклин, при тяжелых формах - противолептоспироз-ный иммуноглобулин.

МИКОПЛАЗМЫ

К семейству микоплазм относятся два рода: Mycoplasma и Ure-aplasma.

Из рода микоплазм М. pneumoniae является возбудителем респираторных заболеваний. Условно-патогенные микоплазмы играют роль в развитии заболеваний: М. hominis - урогенитального тракта, М. arthritidis - ревматоидного артрита.

Из рода уреанлазм патогенными являются Ureaplasma urcalyticum, вызывающие заболевания мочеполовых органов.

М. pneumoniae впервые был выделен М. Итоном из мокроты больных атипической пневмонией и считался вирусом. Только в 1963 г. был определен как Mycoplasma. Это нрокариоты, лишенные клеточной стенки, полиморфные, встречаются шаровидные, нитевидные, грушевидные формы. Грамотрицательны.

Факультативные анаэробы. Культивируются на специальных питательных средах с добавлением сыворотки. При посеве на плотные питательные среды через несколько суток вырастают в виде мелких колоний, которые изучают с помощью лупы. Колонии напоминают "яичницу-глазунью" - круглые, с куполообразным врастающим в среду центром и плоской полупрозрачной периферией. Микоилазмы культивируют также в культуре клеток.

По биохимическим свойствам можно дифференцировать М. pneumoniae от U. urealyticum, которые вызывают гидролиз мочевины.

В клеточной мембране микоплазм содержатся видоспицифические антигены, по которым проводится идентификация видов. С этой целью применяется тест угнетения роста - при добавлении в питательную среду специфической антисыворотки размножение микробов подавляется. »

Патогенность микоплазм связана со способностью их клеточной мембраны взаимодействовать непосредственно с мембраной клеток макроорганизма. Будучи фагоцитировапы, они размножаются в клетке.

Микоплазмы во внешней среде неустойчивы, быстро погибают при нагревании, чувствительны к ультрафиолетовым лучам, к дезинфицирующим средствам.

Источником инфекции является больной человек. Заражение происходит воздушно-капельным путем. Клинические формы респираторной микоплазменной инфекции: острое заболевание верхних дыхательных путей и острая пневмония.

После перенесенной пневмонии формируется невосприимчивость. Микробиологическая диагностика в остром периоде заболевания может быть проведена путем обнаружения возбудителя с помощью ИФЛ или.культивирования на питательной среде.

Серологические исследования проводятся с помощью РСК, ИФА, РИГА.

Будучи лишены клеточной стенки, микоплазмы нечувствительны к антибиотикам, подавляющим синтез пептидогликана (пенициллины и др.). Применяются тетрациклины, зритромицин, аминогликозиды, левомицетин.

РИККЕТСИИ

Возбудитель эпидемического сыпного тифа

Возбудителем сыпного тифа является риккетсия Провацека -Rickettia prowazekii. Получил свое название в память американского ученого Г.Т. Риккетса и чешского ученого С. Провацека, погибших при изучении риккетсиозов.

Морфология, биологические свойства. Риккетсии Провацека - полиморфные микроорганизмы, кокковидные, палочковидные, иногда нитевидные. Культивируются в желточном мешке куриного эмбриона или путем заражения мышей в легочную ткань.

Антигены. Имеют антиген, общий с другими риккетсиями, и ви-доспецифический, присущий только риккетсиям Провацека.

Факторы патогенности. Содержит эндотоксины и белковый токсин, обладающий свойствами экзотоксина, но прочно связанный с клеткой.

Заболевание у человека. Источником инфекции является больной человек. Переносчиком являются вши, в основном платяные, реже -головные, которые заражаются, насосавшись крови больного человека, после этого через 4-5 дней выделяют риккетсии с испражнениями в течение всей своей жизни. Человек заражается при втирании испражнений вши в поврежденную расчесами кожу. В результате риккетсии попадают в кровь. Инкубационный период равен в среднем 10-14 дням. В основе патогенеза сыпного тифа лежит размножение риккетсии в клетках эндотелия, выстилающего кровеносные сосуды, освобождение эндотоксина, под действием которого эндотелиальные клетки разрушаются. Поражаются преимущественно капилляры, и это ведет к нарушению микроциркуляции в головном мозге, миокарде, почках. С поражением капилляров связано появление характерной сыпи.

Наблюдались случаи заражения в лабораторных условиях при попадании культуры риккетсии в дыхательные пути и конъюнктиву глаза.

Непосредственной передачи от человека человеку не наблюдалось.

Иммунитет. После перенесенного заболевания формируется стойкий иммунитет - антимикробный и антитоксический. При недостаточности иммунитета возбудители могут в течение длительного времени сохраняться в организме переболевших.

Болезнь Брилля-Цинссера - рецидивная форма сыпного тифа, вызванная риккетсиями Провацека, сохранившимися в организме после перенесенного заболевания. Рецидив может наступить через много лет после первичной инфекции. Среди больных преобладают люди старшего возраста. Клиническое течение болезни более легкое.

Лабораторная диагностика. Культивирование риккетсии технически сложно. В практических лабораториях используют серологический метод - обнаружение антител в сыворотке крови больных с помощью РСК, РНГА, ИФА, реакции агглютинации риккетсии (РАР). У некоторых больных положительной бывает только одна из серологических проб, поэтому целесообразно ставить несколько реакций, обычно РСК и РНГА. Антитела обнаруживаются с 6-7 дня болезни.

Дифференциальная диагностика первичного сыпного тифа и бо" лезни Брилля-Цинссера основана на особенности вторичного иммунного ответа: при первичном сыпном тифе сначала образуются IgM, при болезни Брилля-Цинссера - с самого начала IgG.

Лечебные и профилактические препараты. Для этиотропного лечения применяют тетрациклины, левомицетин, рифампицин.

Вакцинация химической сыпнотифозной вакциной проводится по эпидемическим показаниям.

Возбудитель эндемического (крысиного) сыпного тифа

RickelЈia lyphi - возбудитель эндемического (крысиного, блошиного) сыпного тифа был открыт в 1928 г. X. Музером. По морфологии и биологическим свойствам R. typhi сходны с R. prowazekii, имеют общие антигены. Дифференцируют их по видоспецифическому антигену. Заболевание зоонозное. Источником инфекции являются грызуны - крысы, мыши, у которых риккетсии выделяются с мочой. Основным переносчиком являются блохи, которые выделяют риккетсии с испражнениями, а также клещи.

Заражение человека происходит через пищу, зараженную мочой больных грызунов, или при втирании в кожу инфицированных фекалий блох или через воздух. Возможно заражение при укусе инфицированными клещами. Течение заболевания более легкое, чем при эпидемическом сыпном тифе. После перенесенного заболевания остается невосприимчивость. Для диагностики используют серологические методы: ставят РСК и ИФА со специфическими антигенами. Для этиотропного лечения применяют тетрациклин. Больной эндемическим блошиным тифом незаразен для окружающих, и госпитализация его не обязательна.

Возбудитель Ку-лихорадки

Возбудитель Ку-лихорадки - Coxiella burnetii. Заболевание впервые описал Е.Г. Деррик в 1937 г. в Австралии и назвал Q-febris (англ, «query» - неясный) и выделил возбудителя, риккетсиозную природу которого определили Ф. Бернет и М. Фриман.

Морфология, биологические свойства. Coxiella burnetii - мелкие кокковидные или палочковидные риккетсии, неподвижные, грамотрица-тельные, окрашиваются по Романовскому-Гимза в красный цвет. Способны к образованию L-форм. Облигатные внутриклеточные паразиты. Культивируются в желточном мешке куриного эмбриона или в культуре клеток.

Антигены. У них нет общих антигенов с другими риккетсиями. Обладают фазовой изменчивостью: у больных в РСК антитела к антигенам I фазы обнаруживаются в период реконвалесценции, а II фазы -в ранний период болезни.

Устойчивость. К факторам внешней среды более устойчивы, чем другие риккетсии. В свежем мясе при 4°С сохраняются до 30 дней, в стерильном молоке до 4 мес. При кипячении погибают только через 10 мин. Устойчивы к действию желудочного сока. В 1%-ном растворе фенола погибают через сутки, в 0,5%-ном растворе хлорамина - через 4 суток.

Заболевание у человека. Ку-лихорадка - природно-очаговая инфекция с разнообразными путями передачи. Источниками инфекции являются домашние животные, грызуны. Возбудитель передается через молоко, через предметы, зараженные мочой и испражнениями больных животных, а также при укусах инфицированных клещей, которые выделяют риккетсии Бернета с фекалиями при крово-сосании. Заражение может произойти при обработке шерсти, кожи зараженных животных и при уходе за ними.

Заражения здорового человека от больного не наблюдается. Инкубационный период длится от 3 до 30 дней. Заболевание чаще всего протекает как пневмония.

Иммунитет после перенесенного заболевания длительный.

Лабораторная диагностика. Выделение возбудителя из крови, мокроты, мочи проводится путем заражения морских свинок, белых мышей. На практике обычно применяют серологические методы диагностики: РСК, РИФ. В качестве ретроспективной диагностики применяется кожно-аллергическая проба.

Профилактические и лечебные препараты. С целью этиотроиной терапии применяют тетрациклины, левомицетин. По эпидемическим показаниям проводится активная иммунизация живой вакциной из С. burnetii, разработанной П.Ф. Здродовским и В.А. Гениг (1962).

ХЛАМИДИИ

Хламидии - прокариоты, внутриклеточные паразиты. Полная зависимость от клетки хозяина обусловлена неспособностью хламидий синтезировать АТФ, это как бы "энергетические паразиты". По морфологии это мелкие грамотрицательные кокковидные микрорганизмы. Цикл развищя хламидии: элементарные тельца ретикулярные тельца - деление - элементарные тельца (см. главу 2), - совершается в течение 40-72 часов.

Химический состав хламидий сложный: они содержат ДНК и РНК, белки, липиды, углеводы. Имеют два вида антигенов: термостабильные групповые, общие для всех хламидий, и термолабильные - ви-доспецифические.

Хламидии вызывают острые и хронические болезни человека, млекопитающих, птиц.

Возбудитель орнитоза.

Возбудитель орнитоза-пситтакоза (греч. ornis - птица, psittacus -попугай) - Chlamydia psittaci - был выделен в 1930 г. от больных людей, заразившихся от попугаев.

Культивируется на куриных эмбрионах, в организме белых мышей, в культуре клеток.

Факторы патогенности. Образует токсическое вещество типа эндотоксинов.

Устойчивость. Во внешней среде сохраняются до 2-3 недель, чувствительны к нагреванию, при 70°С погибают в течение 15-20 минут. Чувствителен к дезинфицирующим веществам.

Заболевание у человека. Источником инфекции являются больные птицы. Заражение человека происходит при контакте с ними и их выделениями, но чаще всего через воздух. Заражения здорового человека от больного не наблюдается.

Инкубационный период длится 7-15 дней. Возбудитель проникает через слизистые оболочки верхних дыхательных путей и пищеварительного тракта. Заболевание протекает в виде атипичной пневмонии, бронхита. Нередко заболевание переходит в хроническую форму.

Иммунитет непродолжительный, возможны рецидивы. Лабораторная диагностика имеет значение, так как клинический диагноз поставить трудно. Исследуемым материалом служат кровь, мокрота, при вскрытии умерших лиц - кусочки легочной ткани и селезенки. Для выделения возбудителя производят заражение куриных эмбрионов, культуры клеток, белых мышей. Возбудителя в зараженных клетках обнаруживают путем микроскопии или с помощью РИФ.

Для обнаружения антител в сыворотке крови больных ставятся РСК с парными сыворотками (сыворотку берут в начале болезни и через 2-3 недели), РТГА.

Аллергическая внутрикожная проба с орнитином положительна с 2-3-го дня болезни и до 3 месяцев.

Лечебные препараты. Из этиотропных средств для лечения применяют тетрациклины.

Chlamydia pneumoniae

Выделен в 1965 г. (Тайвань), с 1989 г. признан новым видом хламидий. Вызывает острые и хронические заболевания верхних дыхательных путей и легких.

Источником инфекции является больной человек, путь передачи - воздушно-капельный.

Лабораторная диагностика. Возбудителя обнаруживают в мокроте путем микроскопии, путем заражения куриных эмбрионов, культур клеток. Для серологической диагностики ставят РСК, РНГА, РИФ.

Лечебные препараты. Для этиотропной терапии применяют тет-рациклины, эритромицин.

Chlamydia trachomatis

Chlamydia trachomatis обладает тропизмом к цилиндрическому эпителию конъюнктивы глаза и слизистых оболочек мочеполовых путей. Существует несколько сероваров С. trachomatis, вызывающих заболевания у человека (хламидийный уретрит и трахому).

Хламидийный (негонорройный) уретрит. Этиологическая роль С. trachomatis особых сероваров установлена в 1972 г. Источником инфекции является больной человек. Заболевание передается половым путем, широко распространено. Мочеполовая система может быть поражена на всем протяжении. У мужчин развивается уретрит, простатит. У женщин - вульвовагинит, цервицит, эндометрит, сальпингит. Заболевание может явиться причиной бесплодия. Нередко сочетается с гонореей, сифилисом, микоилазменной инфекцией. Для микробиологического диагноза исследуют цитологическим методом отделяемое уретры, соскоб со слизистой оболочки, обнаруживают ретикулярные тельца микроскопически и с помощью РИФ. Выделение культур хламидий проводится путем заражения куриных эмбрионов, культуры клеток. Применяются серологические методы: РСК, РИФ, ИФА, РИА.

Для этиотропного лечения применяют антибиотики: тетрациклин, макролиды.

Трахома - хроническое инфекционное заболевание глаз, с поражением конъюнктивы и роговицы (греч. trachis - шероховатый). Источником инфекции является больной человек, заражение происходит при прямом контакте и непрямом контакте - через предметы. Заболевание распространено в странах Азии и Африки.С диагностической целью обнаруживают в соскобах конъюнктивы ретикулярные тельца Провацека.Для этиотропного лечения применяют антибиотики.

Другие заболевания, вызываемые сероварами С. trachomatis: венерический паховый лимфогранулематоз, конъюнктивит новорожденных, болезнь Рейтера, системный хламидиоз.

ВОЗБУДИТЕЛИ ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

В настоящее время известно более 500 вирусов, вызывающих заболевания у человека и животных (табл. 11). Классификация вирусов основана на типе нуклеиновой кислоты вируса (ДНК или РНК), наличии или отсутствии внешних оболочек (суперкапсида), количестве кансоме-ров (белковых молекул) в капсиде и Time их укладки (тип симметрии).

В вирусологии приняты таксономические категории: семейство, подсемейство, род. Биноминальное название для вирусов не применяется.

Микробиологические методы исследования при вирусных инфекциях имеют особенности. Ранним методом диагностики является обнаружение вируса в исследуемом материале. Для этого используют вирусологическое исследование - выделение и идентификацию вирусов путем заражения куриных эмбрионов, культур клеток, экспериментальных животных. Применяется микроскопическое исследование патологического материала с целью обнаружения внутриклеточных включений, а также электронномикроскопическое исследование для обнаружения вирионов. Для выявления вирусов, обладающих способностью агглютинировать эритроциты (вирус гриппа) используют реакцию гемагглютинации, а для определения вида и типа вируса - реакцию торможения гемагглютинации (РТГА).

Для вирусов, вызывающих явление гемадсорбции (адсорбции эритроцитов на клетках, зараженных вирусом), для определения серотипа вируса применяется реакция торможения гемадсорбции с помощью специфической антисыворотки.

Для обнаружения и идентификации вирусов, оказывающих цито-патическое действие (вирус полиомиелита) применяют реакцию нейтрализации вируса специфической антисывороткой (цветную пробу).

Для идентификации вирусов, для выявления их антигенов в исследуемом материале применяют РСК, ИФА, РИФ, ИЭМ со специфическими диагностическими сыворотками.

Серологический метод, то есть определение антител в сыворотке крови больного, относится к методам поздней, ретроспективной диагностики. Для того, чтобы выявить нарастание титра антител в динамике, исследуют парные сыворотки крови больного, взятые в начале заболевания и через 2-3 недели. Для серологической диагностики используют РСК, РТГА, реакцию нейтрализации, ИФА, иммуноблотгинг.

К РНК-содержащим вирусам относятся вирус гриппа, парагрип-па, респираторно-синцитиальный вирус, вирус эпидемического паротита, кори, вирус иммунодефицита человека, вирусы полиомиелита и других энтеровирусных инфекций, вирус краснухи, ротавирусы, вирусы А, С, D, Б и др.

Вирусы гепатитов рассмотрены в одной группе.

К ДНК-содержащим вирусам относятся вирус оспы, аденовирусы, герпесвирусы, вирус гепатита В и др.

РНК-содержащие вирусы

Вирус гриппа

Грипп - одно из наиболее распространенных инфекционных заболеваний. В период эпидемии грипп составляет до 90% всех острых респираторных вирусных инфекций, а в межэпидемический период преобладают другие вирусы - возбудители ОРВИ (около 300 видов).

Возбудитель гриппа впервые был выделен от человека в 1933 г. В. Смиттом, К. Эндрюсом и П. Лэйдлоу путем заражения белых хорьков.

Структура и биологические свойства. Вирус гриппа относится к РНК-содержащим вирусам, к семейству ортомиксовирусов. Вирионы средних размеров 80-120 нм, имеют шаровидную или нитевидную форму. РНК вируса типа А однонитевая, минус-нить, состоит из 8 отдельных фрагментов, что способствует изменчивости вируса (см. главу 10).

Нуклеокапсид вируса покрыт липопротеидной оболочкой. Наружный слой состоит из гликопротеидов - гемагглютинина и нейрамини-дазы, имеющих вид шипов на поверхности. Гемагглютинины обеспечивают прикрепление вириона на поверхности клетки, а нейраминидаза - выход зрелых вирионов из клетки (рис. 42).

Антигены. Антиген внутреннего белка - S-антиген (англ, soluble -растворимый). По этому антигену вирусы гриппа разделяются на серологические типы А, В, С, Вирусы типа А, в зависимости от антигенных свойств гемагглютинина (Н) и нейраминидазы (N), подразделяются на подтипы. У вирусов типа А, вызывающих грипп у человека, известны три разновидности гемагглютининов и две разновидности нейраминидазы. Известны подтипы: H1N1, H2N2, H3N2.

У вирусов типов В и С антигенная структура стабильна. Поверхностные антигены вируса типа А изменчивы. Изменчивость проявляется в виде антигенного "дрейфа", то есть частичного изменения гемагглютинина или нейраминидазы в пределах одного подтипа, или в виде антигенного "шиф-та", то есть возникновения нового подтипа вирусов гриппа А.

Культивирование. Вирус гриппа культивируется в куриных эмбрионах, в культуре клеток. Экспериментальная инфекция создается у белых мышей, африканских хорьков, хомячков, обезьян.

Устойчивость. Вирусы гриппа погибают при 60°С в течение 20-30 минут, при кипячении - сразу, чувствительны к ультрафиолетовым лучам и дезинфицирующим средствам, устойчивы к низким температурам, хорошо сохраняются при -70°С.

Заболевание у человека. Источником инфекции является больной человек или носитель. Передача возбудителя происходит воздушно-капельным путем (франц. gripper - схватывать).

Среди острых респираторных вирусных инфекций грипп является наиболее массовой и тяжелой. Возникновение пандемий и крупных эпидемий связано с антигенным шифтом и появлением нового подтипа, к которому у населения нет иммунитета. Эпидемические вспышки возникают в результате антигенного дрейфа вируса.

Вирус гриппа проникает в организм через верхние дыхательные пути, а также через конъюнктиву глаз. Размножается в эпителиальных клетках, попадает в кровь, вызывая вирусемию. Вирусы не содержат и не продуцируют токсины, но сами вирионы, их компоненты и, главным образом, продукты аутолиза клеток создают интоксикацию.

Инкубационный период при гриппе типа А от нескольких часов до 2 дней, при гриппе типа В - до 3 дней. Начало болезни острое. Клинические проявления: интоксикация, катаральные явления в виде ринита; ларингита, трахеита, фарингита. Нарушение факторов антиинфекционной защиты организма способствует возникновению бактериальных осложнений, вызванных условно-патогенной микрофлорой дыхательных путей.

Иммунитет. Невосприимчивость к заражению связана с естественными факторами противовирусной неспецифической защиты, в частности, вирусными ингибиторами. Главную роль в выздоровлении играет образование интерферона, который защищает соседние клетки слизистых оболочек от репродукции в них вируса. Антитела образуются позже, достигая максимальных титров через 2-3 недели и защищают, в основном, от реинфекции. Главная роль при этом принадлежит секреторным IgAS. Своеобразие приобретенного иммунитета заключается в том, что он носит анамнестический характер и строго специфичен к определенному подтипу вируса, который впервые у данного человека вызвал его формирование.

Лабораторная диагностика. В эпителиальных клетках в мазках-отпечатках со слизистой оболочки носа обнаруживают вирус с помощью РИФ со специфической антисывороткой и антиген вируса с помощью ИФА. В последнее время применяется метод молекулярной гибридизации РНК.

Для выделения вируса смывом из носоглотки больного заражают куриные эмбрионы в хорион-аллантоисную полость или же культуры клеток. Наличие вируса и его тип определяют по РСК, подтип ге-магглютинина - с помощью РТГА.

Для серодиагностики необходимо исследовать парные сыворотки от больного, взятые в начале болезни и через 1-2 недели. Ставится РТГА с гриппозными диагностикумами. Диагностическим считается нарастание титра в 4 раза.

Профилактические и лечебные препараты. Для вакцинопрофилактики используют несколько вакцин.

Инактивированные цельновирионые вакцины содержат вирусы, выращенные в куриных эмбрионах. Вакцины вводят внутрикожно с помощью безыгольного инъектора, применяют для проведения массовой вакцинации.

Вакцина из расщепленных вирионов (АГХ - адсорбированная гриппозная химическая) вводится подкожно, используется для иммунизации лиц, которым противопоказана вакцинация целыювирион-ными и живыми вакцинами.

Живая аллантоисная (яичная) вакцина вводится интраназально, двукратно, с интервалом 20-30 дней, применяется для вакцинации небольшого числа людей.

Живая тканевая вакцина применяется перорально, используется для вакцинации детей, так как не вызвает побочных реакций.

Субъединичная вакцина "грипповак" содержит гликопротеиды (гемагглютинины) вирусов гриппа H3N2, H1N1 и В.

Состав вакцин меняется год от года, в соответствии с типами и подтипами вирусов, вызывающих эпидемические вспышки.

Для экстренной профилактики в период эпидемии применяют ре-мантадин по 100 мг в день, а также индукторы эндогенного интерферона.

Для этиотропного лечения' назначают ремантадин, интерферон, в тяжелых случаях - противогриппозный иммуноглобулин. Антибиотики применяют только при наличии бактериальных осложнений.

Другие вирусы, вызывающие острые респираторные заболевания: вирусы парагриппа человека и респираторно-синцитиальный вирус (PC-вирус), относящиеся к семейству парамиксовирусов, риновирусы, вирусы, относящиеся к семейству коронавирусов и к семейству реови-русов, а также аденовирусы, относящиеся к ДНК-содержащим вирусам.

Вирус кори

Инфекционную природу кори доказали в 1911 г. Дж. Андерсон и Дж. Гольдбергер в опыте на обезьянах. В 1954 г. Дж. Эндерс и Т.К. Пиблс получили культуру вируса кори.

Структура и биологические свойства. Вирус кори относится к иара-миксовирусам. Вирионы сферической формы, средних размеров. Содержит однопитчатую (минус-нить) РНК, поверх нуклеокапсида располагается суперкапсид. Имеет гемагглютинин. Вызывает гемолиз эритроцитов. В антигенном отношении стабилен и однороден. Культивируется в курином эмбрионе и в культуре клеток.

Во внешней среде неустойчив, погибает через несколько минут, поэтому при кори дезинфекцию не проводят, ограничиваясь только систематической влажной уборкой и проветриванием. При 56°С погибает через 30 минут.

Заболевание у человека. Корь - антропонозное заболевание. Источником инфекции является больной человек, он заразителен в последние дни инкубационного периода и в первые 2-3 дня болезни. Механизм передачи - воздушно-капельный. Вирус проникает через слизистую оболочку верхних дыхательных путей и конъюнктиву глаз. В эпителиальных клетках вирус не размножается, первичная репродукция вируса происходит в лимфоидных органах, затем наступает вирусе-мия еще в инкубационном периоде, который длится в среднем 10 дней (у привитых иммуноглобулином до 28 дней). Клинические проявления болезни - лихорадка, поражение органов дыхания, сыпь. В большинстве случаев при отсутствии осложнений течение благоприятное. Возбудитель кори способен к пожизненной персистенции в организме человека, перенесшего заболевание, что может привести к развитию медленной инфекции - подострого склерозирующего панэнцефалита (ПСПЭ). Это заболевание встречается редко, поражает головной мозг, длится несколько лет и приводит к смерти.

Иммунитет. Врожденного иммунитета у человека нет, к кори восприимчивы все, кто не имеет иммунитета, приобретенного после перенесенного заболевания или после вакцинации. У детей до 6-месячного возраста имеется пассивный естественный иммунитет.

После перенесенного заболевания остается стойкий, напряженный иммунитет. Повторная корь наблюдается редко.

Лабораторная диагностика. Выделение вируса из глоточного смыва, крови, мочи проводят в культуре клеток, возможно обнаружение антигена в моче с помощью РИФ.

Обычно применяется серологическая диагностика - определение нарастания титра антител в парных сыворотках с помощью РТГА, РСК. Диагностическим считается повышение титра антител в 4 раза.

Профилактические препараты. Активная иммунизация проводится с помощью живой аттенуированной вакцины (штамм Л-16 - получен А.А. Смородинцевым и М.П. Чумаковым). Вакцина вводится всем детям в возрасте 1 года, не болевшим корью. Вакцина сохраняет эффективность только при хранении в холодильнике.

Для пассивной иммунизации в очагах кори применяется нормальный человеческий (противокоревой) иммуноглобулин.

Вирус эпидемического паротита (свинки)

Вирусная этиология заболевания была доказана в 1934 г. Вирус относится к семейству парамиксовирусов, имеет средние размеры, содержит РНК, обладает гемагглютинирующей, нейраминидаз-ной и гемолитической активностью. Антигенная структура стабильна, известен только один серотип вируса. Вирус культивируется в куриных эмбрионах и в культурах клеток. Лабораторные животные малочувствительны к вирусу паротита, только у обезьян удается воспроизвести заболевание, сходное с паротитом человека.

Во внешней среде вирус нестоек, погибает при 70°С в течение 10 минут, чувствителен к дезинфицирующим средствам, хорошо сохраняется при низких температурах.

Заболевание у человека. Источником инфекции является больной человек. Заражение происходит воздушно-капельным путем. Инкубационный период обычно равен 2-3 неделям. Клинические проявления болезни: повышение температуры, увеличение и болезненность околоушных (parotis), подъязычных и подчелюстных слюнных желез. Болезнь длится 7-10 дней. Возможны осложнения: орхит у мальчиков, менингит, менингоэнцефалит.

Иммунитет после перенесенного заболевания прочный. Дети первых месяцев жизни имеют пассивный иммунитет и не болеют паротитом.

Лабораторная диагностика. Вирус выделяют из слюны, отделяемого носоглотки, мочи, ликвора путем заражения животных или культуры клеток. Идентифицируют с помощью РИФ, реакции нейтрализации, РТГА, РСК. Для серологической диагностики используют РТГА, РСК.

Профилактика. Для активной иммунизации применяют живую вакцину из штамма Л-3, полученную А.А. Смородинцевым. Вакцина вводится подкожно детям с 15 месяцев жизни.

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ)

Вирус иммунодефицита человека - возбудитель синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД).

Первые случаи болезни были зарегистрированы в 1981 г. в Атланте (США). Вирусная природа болезни была установлена в 1983 г. В институте Пастера в Париже Л. Монтанье получид вирус из Т-лимфоцитов больного, а Р. Галло (США) выделил вирус из крови больных СПИДом. Позже была установлена идентичность этих культур вируса, названного ВИЧ. В 1985-86 гг. в образцах крови из Гвинеи-Бисау (Западная Африка) был выделен ВИЧ-2.

Структура и биологические свойства. Вирусы иммунодефицита человека относятся к семейству ретровирусов, подсемейству медленных вирусов. Вирионы размером 100-140 нм имеют сферическую форму. В нуклеокапсиде, имеющем форму пули, содержится двухцепочечная РНК, фермент обратная транскриптаза, внутренние белки с молекулярной массой 7 кД и 9 кД, обозначаемые как р7 и р9 ("р" означает protein), заключенные в двухслойный белковый футляр, который состоит из белков р24 и р18.

Нуклеокапсид одет фофсфолипидной мембраной с расположенными на ней гликопротеиновыми "шипами". Каждый шип состоит из двух субъединиц: gp41 пронизывает фосфолипидный слой, gp120 находится снаружи (рис. 43).

Антигены. Антигенными свойствами обладают белки сердцевины и оболочечные гликопротеины. Антигенная изменчивость ВИЧ выражена во много раз больше, чем у других вирусов и связана с изменением оболочечных антигенов gp120 и gp41.

Взаимодействие вируса с клеткой. Вирус взаимодействует с клетками, на мембране которых имеется белок, так называемый рецептор CD4. Это, главным образом, Т4-лимфоциты (Т-хелперы), кроме того, моноциты крови, тканевые макрофаги и другие клетки. Гликопротеины gp120 соединяются с белком CD4 клетки, отделяются от gp41, который обеспечивает проникновение вируса в клетку (рис. 44). Здесь вирусная РНК освобождается от белковых оболочек, и на ее матрице с помощью обратной транскриптазы образуется вирусспецифическая ДНК. Приняв форму кольца, ДНК проникает в ядро клетки и встраивается в хромосому клетки в виде провируса и может сохраняться здесь в течение длительного времени. В гаком "неактивном" состоянии вирус может персистнровать от нескольких месяцев до нескольких лет, не вызывая заболевания, но обусловливая появление антител, что впоследствии ведет к иммунным нарушениям.

При воздействии разнообразных внешних факторов начинается интенсивная репродукция вирионов. На матрице провируса реплицируется вирусная РНК. На рибосомах клетки образуются вирусные белки, происходит сборка вирионов, которые проходят через мембрану клетки, повреждая ее. Клетка перестает функционировать. Это приводит к уменьшению количества Т-хелперов. Соотношение Тх/Тс сокращается до 0,2-0,5 при норме 1,9-2,4.

В результате заражения макрофагов подавляются их функции. Зараженные макрофаги, циркулируя в организме, могут переносить вирус в разные органы и инфицировать их.

Культивирование ВИЧ удается в культурах Т-хелперов, которые выделяют из периферической крови человека и стимулируют интер-лейкином-2.

Устойчивость. При 100°С вирус быстро, в течение 1-5 минут, и полностью инактивируется, при 56°С в течение 30 минут инфекциошюсть вируса снижается в 100 раз. В высушенном состоянии сохраняется в течение 4-6 недель. Чувствителен к дезинфицирующим средствам (3% раствор перекиси водорода, 5% раствор лизола, 0,2% гипохлорит натрия, 1% глютаральдегид, 20% этиловый спирт, эфир, ацетон). Поскольку РНК вируса при дезинфекции не разрушается, рекомендуется в процессе обработки заведомо зараженного материала (белье, халаты) предварительно подвергнуть его щелочному гидролизу, затем прокипятить,

Заболевание у человека. ВИЧ-инфекция - антропоноз. Источником инфекции являются больные и ВИЧ-инфицированные люди. Вирус обнаруживается в крови, сперме, ликворе, влагалищном секрете. Пути передачи:

1) половой - гетеросексуальный, гомосексуальный;

2) парентеральный - при переливании крови и ее компонентов, трансплантации тканей, при внутривенном введении наркотиков и т.д.;

3) вертикальный - от матери ребенку - до родов, во время родов, в процессе грудного вскармливания.

Не наблюдалась передача ВИЧ воздушно-капельным, фекально-оральным, контактно-бытовым путями, через кровососущих членистоногих.

Группы высокого риска заражения: гомосексуалисты, люди, ведущие беспорядочную половую жизнь; наркоманы; дети от ВИЧ-инфи-цированных матерей; реципиенты донорской крови, особенно больные гемофилией; медицинский персонал, профессионально контактирующий с кровью пациентов (как при вирусном гепатите В).

Клинические проявления заболевания связаны с нарушением функции иммунной системы. Возникают условия для развития болезней, вызываемых различными вирусами, бактериями, грибами, простейшими, в том числе условно-патогенными или непатогенными, а также для возникновения злокачественных опухолей, аутоиммунных процессов.

Лабораторная диагностика. Выделение и идентификация вируса осуществляется в специальных лабораториях. В поздних стадях болезни вирус выделяется редко.

Высокочувствительным и специфичным является тест на обнаружение вирусной нуклеиновой кислоты с помощью нуклеиновых зондов.

Наиболее широко применяется серологическая диагностика. Антитела к антигенам ВИЧ выявляются через 1 -6 месяцев после заражения с помощью ИФА, РИА, РИФ. Для подтверждения специфичности положительных результатов используется иммуноблоттинг, позволяющий определить антитела к отдельным антигенам вируса (gp120, gp41, p24, р18).

Лечебные и профилактические препараты. В качестве противовирусного препарата применяют азидотимидин (АЗТ, ретровир, зидо-вудин), который блокирует обратную транскриптазу и нарушает таким образом образование вирусной ДНК. Используется также дидезоксинозин (ДДИ), интерфероны. Применяются различные иммуностимулирующие средства, а при аутоиммунных явлениях - им-муносупрессоры.

Для лечения вторичных инфекций применяются соответствующие средства.

Разрабатываются вакцины, в том числе генноинжснерные с использованием кишечной палочки, вируса осповакцины.

Вирус бешенства

Бешенство (Rabies, Lyssa, Hydrophobia) - острая вирусная болезнь теплокровных животных и человека, поражающая центральную нервную систему, смертельная для человека.

Структура и биологические свойства. Вирус бешенства относится к семейству рабдовирусов. Вирионы размером 80-180 нм, имеют форму пули. Нуклеокапсид содержит однонитевую РНК (минус-нить), покрыт суперкапсидом.

Обладает нейротропностью. Репродукция вируса в нейронах приводит к образованию внутриклеточных включений Бабеша-Негри. Обнаружение их в клетках аммонова рога мозга имеет диагностическое значение.

Вирус бешенства культивируется в культуре клеток, а также в организме кролика при заражении в мозг.

Вирус однороден в антигенном отношении.

Устойчивость во внешней среде невысокая. Кипячение убивает вирус в течение минуты. Чувствителен к дезинфицирующим средствам, УФ-облучению. Устойчив к низким температурам.

Заболевание у человека. Бешенство - зоонозная инфекция. Ис

точником инфекции являются животные дикие и домашние (лисицы, волки, собаки, кошки и др ). У зараженных животных вирус находится в головном мозге и выделяется со слюной в последние 7-10 дней инкубационного периода и на протяжении всего заболевания.

Заражение происходит при укусе или ослюнении кожи или слизистых оболочек, при оцарапании больным животным. От человека вирус в естественных условиях не передается.

Вирус проникает через кожу или слизистые оболочки. От места внедрения распространяется по периневральным пространствам и нервным волокнам и достигает центральной нервной системы, где репродуцируется в нейронах.

Инкубационный период продолжается в среднем 1-3 месяца, колеблясь от 10 дней до 1 года. Длительность его зависит от локализации укуса (наиболее короткий - при укусах в голову и кисти рук, наиболее продолжительный - при укусах в стопы ног), а также от размера и глубины ран, количества возбудителя, попавшего в рану.

Клинические проявления связаны с поражением мозга: боль на месте укуса, бессоница, беспокойство, гидрофобия, аэрофобия, спазм мышц гортани и глотки. Болезнь продолжается 3-7 дней и заканчивается смертью.

Лабораторная диагностика проводится обычно посмертно, путем обнаружения включений Бабеша-Негри в нейронах путем микроскопии и РИФ со специфической антисывороткой. Можно определить наличие вируса путем внутримозгового заражения белых мышей, у которых наступает паралич конечностей и гибель.

Профилактические препараты. Эффективные методы лечения уже наступившего заболевания отсутствуют.

Для профилактики проводят вакцинацию антирабической вакциной. Задолго до открытия вируса бешенства, в 1885 г. Пастер предложил вакцину против бешенства. Пастер поставил целью получить возбудителя, который в отличие от диких, "уличных" штаммов вируса с непостоянной вирулентностью, обладал бы постоянной, фиксированной вирулентностью. Исходным материалом для получения вакцины послужил мозг собаки, погибшей от бешенства. Вводя суспензию из мозга собаки кролику, а затем производя последовательные пассажи на кроликах, Пастер к 133-му пассажу получил вирус с постоянным инкубационным периодом для кроликов, утративший вирулентность для других видов животных и человека. Пастер назвал этот вирус фиксированным. Вакцинацию людей он проводил вакциной, приготовленной из мозга кроликов, зараженных фиксированным вирусом.

В настоящее время применяют антирабическую культуральную вакцину, содержащую вирус бешенства, выращенный в культуре почки сирийских хомячков и инактивированный УФ-лучами.

В случае укуса или ослюнения больным животным человека проводят курс вакцинации продолжительностью в среднем 20-25 дней.

При укусах в голову и кисти рук и при множественных укусах, когда инкубационный период может оказаться коротким, кроме вакцины, вводят антирабический иммуноглобулин, полученный из крови лошадей, гипериммунизированных фиксированным вирусом.

Поскольку вирус выделяется у зараженных животных в последние 7-10 дней инкубационного периода, в случае укуса здоровым на вид животным пострадавшему проводят условный курс вакцинации - 2-4 инъекции антирабической вакцины, установив наблюдение за животным на 10 дней.

Вирус полиомиелита

Вирусную этиологию полиомиелита доказали в 1909 г. К. Ландштейнер и Е. Поппер, получив у обезьян типичное заболевание путем заражения их материалом из спинного мозга ребенка, умершего от полиомиелита. Вирус в культуре клеток получил Эндерс в 1949 г.

Структура и биологические свойства. Вирус полиомиелита относится к семейству пикорнавирусов, к роду энтеровирусов. Вирионы сферической формы, мелкие, размером 25-30 нм, содержат одну нить РНК (плюс-нить) и белковый капсид.

Антигены. По антигенной структуре различают три типа вируса полиомиелита: I, II, III, дифференциация которых производится в реакции нейтрализации.

Культивирование. Вирус полиомиелита культивируется в культуре клеток, вызывает выраженное цитопатическое действие (ЦПД).

Устойчивость во внешней среде высокая. Вирус до 3-4 месяцев сохраняется в фекалиях, сточных водах, в молоке и на овощах. Чувствителен к дезинфицирующим средствам и к высокой температуре, устойчив к низким температурам.

Заболевание у человека. Полиомиелит - антропонозное заболевание. Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Основной механизм передачи - фекально-оральный, так как вирус выделяется преимущественно с содержимым кишечника. Возможен и воздушно-капельный путь передачи инфекции, поскольку вирус может выделяться с носоглоточной слизью.

Вирус проникает в организм через слизистую оболочку тонкой кишки. Первичная репродукция вируса происходит в лимфатических узлах глоточного кольца и тонкой кишки. Этим объясняется обильное выделение вируса с носоглоточной слизью и с фекалиями еще до начала заболевания. В большинстве случаев вирус не выходит за пределы кишечника и глоточного кольца, и инфекция протекает как бессимптомная. У части больных вирус проникает в кровь, наступает вирусе-мия, вирус внедряется в различные органы и ткани. В некоторых случаях вирус проникает в нейроны спинного и головного мозга. Репродукция вируса в двигательных нейронах передних рогов спинного мозга, а также в нейронах головного мозга приводит к гибели нейронов.

Инкубационный период составляет, в среднем, 5-12 дней. Клинические формы полиомиелита- паралитическая, которая развивается в 1% случаев, мешшгеальная (без параличей) и абортивная. Бессимптомная инфекция наблюдается у носителей, которые могут быть источником инфекции.

Иммунитет. После перенесенного заболевания формируется стойкий иммунитет к соответствующему серотипу вируса. Антитела в высоком титре обнаруживаются в течение длительного времени после выздоровления У детей первых 4-5 недель жизни сохраняется пассивный иммунитет, приобретенный от матери

Лабораторная диагностика. Выделение вируса из испражнений, отделяемого носоглотки проводится путем заражения культуры клеток Вирус обнаруживают по ЦПД, тли вируса определяют с помощью реакции нейтрализации специфическими типовыми сыворотками.

Обычным методом диагностики является серологический метод. Определяют нарастание титра антител в парных сыворотках, взятых с интервалом 3-4 недели, с помощью РСК или реакции нейтрализации с типовыми штаммами вируса (цветная проба).

Профилактические препараты. В 1953 г. Дж. Солк разработал убитую формалином вакцину, которая вводилась подкожно, трехкратно в'акцина создает гуморальный иммунитет с высоким титром антител в крови, но не обеспечивает местного иммунитета кишечника.

А. Себин (C1IIA) в 1956 г. получил аттенупрованные штаммы вирусов полиомиелита, из которых в 1958 г. А.А. Смородинцев и М.П Чумаков разработали живую культуральную вакцину. Вакцина выпускается в жидком виде и в форме драже, применяется перорально. Плановая иммунизация проводится всем детям, начиная с 3-месячного возраста. Вакцина обеспечивает гуморальный иммунитет и местный иммунитет кишечника за счет секреторных IgAS.

Для пассивной иммунизации применяют человеческий иммуноглобулин.

Вирусы Коксаки, ECHO и другие энтеровирусы

Вирусы Коксаки и ECHO относятся к роду энтеровирусов, к семейству пикорнавирусов, являются возбудителями энтеровирусных не-полиомислитных инфекций.

Вирусы Коксаки впервые выделены в 1948 г. в CШA в местечке Коксаки из испражнений детей с заболеванием, подобным полиомиелиту. Вирусы были выделены путем заражения новорожденных мышей.

Известно 30 серотипов вирусов Коксаки, из которых 24 относятся к группе А и 6 - к группе В. Коксаки А вызывают у мышей поражение скелетной мускулатуры, Коксаки В - поражение мозга и гибель мышей.

...