Патогенетическое обоснование принципов коррекции нарушений иммунологической реактивности при инфекционном процессе на фоне низкодозового рентгеновского облучения

Целью данного раздела исследования была проверка предположения о том, что системный рост уровней TGF, индуцированный низкими дозами фракционированного рентгеновского излучения, в комплексе с повышением синтеза IL-10, создает условия для поляризации CD4+-T-эффекторных механизмов специфического иммунного ответа в направлении Th1/Th2.

В ходе исследования иммунологической реактивности в ответ на фракционированное рентгеновское облучение была проанализирована динамика цитокинового профиля, отвечающего за поляризацию Th1/Th2- специфического иммунного ответа (табл. 3.1.1).

Таблица Влияние фракционированного тотального рентгеновского облучения на показатели иммунологической реактивности крыс

Показа-тель	Ед. изм.	Сутки эксперимента	Конт-роль
		1	2	3	10	17	28
TGF-в	пг/мл	M	986,21	1212,41	1347,81	1319,5	829,21	211,1	198,1
		m	185	229	275,9	362,4	396,2	18,8	32,3
IL-10	пг/мл	M	4,7	8,3	5,1	39,91	21,81	3,1	3,1
		m	1,2	3,9	2,4	6,6	10,4	1,6	0,6
IFN-г	пг/мл	M	18,8	16,4	10,61	16,1	19,6	23,8	20,3
		m	6,7	7,2	6,6	5,3	5,4	7,7	8,5
IL-4	пг/мл	M	32,6	29,7	29,1	21,11	32,6	33,2	35,8
		m	4,7	5,8	6,7	2,6	4,3	5,1	4,2

Примечание: 1 - р<0,05, по сравнению с интакными животными.

После облучения в выбранном режиме выраженное и стабильное повышение сывороточного уровня TGF-в наблюдалось на протяжении, по крайней мере, 17-ти суток. Максимальные уровни этого показателя, более чем в 6 раз превышающие его значение у интактных животных (198,1±32,3 пг/мл), отмечены на 3-и и 10-е сутки после облучения (1347,8±275,9 и 1319,5±362,4 пг/мл, соответственно).

Кроме того, к параметрам цитокинового профиля, колебания которых были достоверными, принадлежит и уровень IL-10, рост которого зафиксирован на 10-е (37,9±6,56 пг/мл) и 17-е (21,8±10,4 пг/мл) сутки исследования по сравнению со значением у интактных крыс (3,1±0,6 пг/мл).

Приведенные выше данные свидетельствуют о наличии условий для угнетения индукции основных эффекторных механизмов (Th1, Th2). Однако, достоверное снижение уровня одного из маркерных цитокинов Th1-лимфоцитов - IFN-г - наблюдалось лишь на 3-и сутки (10,6±6,6 пг/мл) по сравнению с контрольными значениями (20,3±8,5 пг/мл).

Как указывалось, Th2-лимфоциты являются преимущественными продуцентами противовоспалительных цитокинов, к которым относится и IL-4, угнетение продукции которого наблюдалось на 10-е сутки (21,1±5,6 пг/мл против 35,8±4,2 пг/мл в контроле). В конце 4-й недели наблюдения существенных отличий при сравнении с показателями интактных животных не отмечалось.

Местная продукция IL-4 Th2-клетками ведет к сильной клональной пролиферации и экспансии активированных В-клеток. Он выступает в качестве антагониста IFN-г при воздействии на макрофаги, Т-хелперы [19, 47, 48].

Таким образом, существенный интерес представляет изучение в этих условиях клеточных и гуморальных факторов неспецифической иммунологической реактивности [19, 47, 48].

Фагоцитарная активность макрофагов и нейтрофилов.

Для исследования параметров клеточного звена неспецифической реактивности нами были взяты показатели активности фагоцитирующих клеток, динамика которых представлена в таблице 3.1.2, установлено, что после облучения в выбранном режиме фагоцитарная активность перитонеальных макрофагов на протяжении первой недели наблюдения имела лишь тенденцию к снижению, и только на 10-е сутки достигла достоверной разницы по сравнению с контрольной группой (41,7±3,9% против 52,8±5,1%, соответственно). При этом фагоцитарное число макрофагов достоверно снижалось по сравнению с интактной группой уже на 3-и сутки (3,9±0,3 ед. против 9,5±0,8 ед. в контроле), а минимальный его уровень наблюдался на 10-е сутки (3,2±0,4 ед.) с последующим восстановлением до нормальных значений.

Таблица Влияние фракционированного тотального рентгеновского облучения на показатели клеточного звена неспецифического иммунного ответа крыс

Показа-тель	Ед. изм.	Сутки эксперимента	Конт-роль
		1	2	3	10	17	28
ФИ мФ	%	M	48,6	43,2	46,8	41,71	49,3	51,9	52,8
		m	4,2	9,6	4,5	3,9	2,3	4,7	5,1
ФЧ мФ	ед	M	9,1	8,3	3,91	3,21	7,7	8,5	9,5
		m	0,7	1,2	0,3	0,4	1,3	0,9	0,8
ФИ нФ	%	M	57,4	55,8	53,61	44,71	57,6	60,4	62,8
		m	6,1	8,3	4,4	4,1	5,9	4,2	5,4
ФЧ нФ	ед	M	7,3	6,8	5,71	5,21	7,4	8,3	8,5
		m	1,2	2,3	2,3	0,4	1,5	1,3	0,9

Примечание: 1 - р<0,05, по сравнению с интактными животными.

Что касается фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа нейтрофилов, то здесь динамика была более выраженной. Так, достоверного снижения количество фагоцитирующих нейтрофилов (ФИнф) облученных крыс достигло на 3-и сутки (53,6±4,4%) по сравнению с контролем (62,8±5,4%) и минимума - на 10-е сутки (44,7 ± 4,1 %). Для показателя поглотительной способности нейтрофилов (ФЧнф) была характерна та же динамика: 5,7±2,3 против 8,5±0,9 ед. в группе интактных животных на 3-и сутки и 5,2±0,4 против 8,5±0,9 ед. - на 10-е. К 17-м и 28-м суткам эксперимента значения вышеуказанных показателей также восстанавливались до контрольных.

Макрофаги, активированные IFN-г, выполняют функции эффекторных клеток в защитных и повреждающих реакциях воспалительного процесса. При этом макрофаги синтезируют и секретируют широкий спектр цитокинов, обладающих эффекторной и регуляторной активностью, расщепляющие ферменты и супероксидные радикалы. Регулирующим цитокином для макрофагов является IL-10 - антагонист IFN-г. Его продуцентами могут быть моноциты/макрофаги, T-клетки. Ингибирующим цитокином является и TGF-в, эффекты которого зависят как от его концентрации, так и от присутствия других цитокинов [59].

Активность комплемента и уровень ЦИК в сыворотке крови.

Для характеристики состояния гуморального звена неспецифической реактивности положены показатели активности системы комплемента сыворотки крови, колебания которой на протяжении всего периода наблюдений имели лишь характер тенденций (были статистически недостоверными) по сравнению с этим показателем у контрольных животных, за исключением 3-х суток (74,3±7,6 гем. ед. против 96,6±8,1 гем. ед.).

Как показано в таблице 3.1.3, недостаточный уровень функционирования макрофагов и нейтрофилов отразился и на механизмах элиминации патогена, что проявилось в повышении уровня ЦИК с достоверным максимумом на 3-и (97,8±9,6 МЕ) и на 17-е сутки - 95,0±4,5 МЕ, при 85,0±5,3 МЕ в контрольной группе.

Таблица Влияние фракционированного тотального рентгеновского облучения на показатели гуморального звена неспецифического иммунного ответа крыс

Показа-тель	Ед. изм.	Сутки эксперимента	Конт-роль
		1	2	3	10	17	28
ЦИК	МЕ	M	91,3	96,2	97,81	95,01	110,51	87,2	85,0
		m	10,1	12,6	9,6	4,5	15,3	5,4	5,3
Компле-мент	гем.ед.	M	85,6	78,9	74,31	94,8	88,9	94,7	96,6
		m	9,2	17,9	7,6	8,1	10,2	6,9	8,1

Примечание: 1 - р<0,05, по сравнению с интактными животными.

Резюме. Фракционированное рентгеновское облучение приводит к системному росту уровня TGF-в, что, в комплексе с усилением синтеза IL-10, создает условия для угнетения эффекторных механизмов Th1/Th2- специфического иммунного ответа, проявляющегося снижением уровней сывороточных цитокинов IFN-г и IL-4. Наряду с этим наблюдается нестойкий, носящий преимущественно характер тенденций, дефицит в системе неспецифической иммунной защиты.

Нарушения иммунологической реактивности под влиянием предварительного фракционированного тотального низкодозового рентгеновского облучения при остром экспериментальном генерализованном кандидозе.

Описанные в предыдущем разделе результаты влияния фракционированного тотального рентгеновского облучения на крыс указывают на признаки скрытой функциональной недостаточности неспецифической реактивности иммунной системы, что при дополнительной функциональной нагрузке, в нашем случае - экспериментальном генерализованном кандидозном сепсисе, может усиливать дефект антиинфекционной резистентности в различной степени выраженности.

Внутривенное введение штамма C. albicans (ATCC 885 - 653) в сублетальной дозе (2,5х106 КОЕ/мл) интактным крысам линии Вистар обеспечивало развитие септического состояния с диссеминацией и персистенцией возбудителя во внутренних органах. Элиминация возбудителя, по результатам бактериологического исследования внутренних органов, наблюдалась на протяжении 5-ти - 7-ми суток с момента инфицирования. Уровень летальности при этой модели не превышает 3%.

Содержание цитокинов, отвечающих за поляризацию Th1/Th2-специфического иммунного ответа, в сыворотке крови.

В результате микробиологических, серологических и иммунологических исследований нами были получены результаты, представленные в таблицах 3.2.1 - 3.2.5.

Исследование показателей сывороточного цитокинового профиля (табл. 3.2.1) позволило продемонстрировать определенные отличия в процессах индукции Th-эффекторных механизмов формирования специфического иммунного ответа.

Таблица Влияние фракционированного тотального рентгеновского облучения на уровень сывороточных цитокинов у крыс на модели острого диссеминированного кандидоза

По-каза-тель	Ед. изм	Груп-пы	Сутки эксперимента	Конт-роль (M±m)
			1	2	3	10	17	28
IFN-г	пг / мл	II	M	95,81	176,41	426,21	181,71	23,8	7,51	20,3±8,5
			m	25,2	91,7	212,8	48,9	16,4	4,5
		III	M	47,71;2	78,71;2	99,51;2	116,61;2	85,61;2	63,81;2
			m	19,7	49,6	24,9	30,9	23,9	26,3
IL-17	пг/мл	II	M	79,51	130,41	127,21;2	67,41;2	51,81;2	14,72	17,7±4,1
			m	5,6	11,7	34,9	9,1	8,9	3,7
		III	M	83,31	149,91	215,81	273,61	241,31	89,31
			m	18,7	27	49,3	47	42,9	35,7
IL-10	пг/мл	II	M	2,41;2	3,11	1,81	17,71;2	4,12	2,21;2	3,1±0,6
			m	1,1	0,3	0,4	2,6	3,4	0,9
		III	M	6,31	10,7	18,91	16,41	11,11	5,7
			m	1,9	17,6	14,1	3,6	4,6	2,4
IL-4	пг/мл	II	M	90,51	99,11	148,31	102,11	88,41	62,31	35,8±4,2
			m	10,5	12,2	16,4	2,5	3,6	6,6
		III	M	51,41;2	85,61;2	92,11;2	57,91;2	82,71;2	79,31;2
			m	14,5	6,4	10,3	3,3	2,5	7,1

Примечания: 1 - достоверность отличий от интактной группы животных; 2 - достоверность отличий от группы животных, не подвергавшихся облучению.

Уровень IFN-г у необлученных инфицированных крыс (II группа) прогрессивно возрастал на протяжении первой недели. На 1-е сутки он составлял 95,8±25,2 пг/мл, на 2-е - 176,4±91,7 пг/мл, на 3-и - 426,2±212,8 пг/мл. На 10-е сутки он снижался до 181,7±48,9 пг/мл, на 17-е - восстанавливался до нормы - 23,8±16,4 пг/мл, а на 28-е сутки был ниже нормы - 7,5±4,5 пг/мл против 20,3±8,5 пг/мл.

У облученных и инфицированных крыс повышение уровня IFN-г было менее выражено, но он оставался статистически достоверно больше значений контрольной группы (интактных крыс) (табл. 3.2.1).

У необлученных животных рост уровня IL-17 зафиксирован уже в первые трое суток после инфицирования. На 1-е сутки он составлял 79,5±5,6 пг/мл, на 2-е - 130,4±11,7 пг/мл, на 3-и - 127,2±34,9 пг/мл. В последующем он снижался: на 10-е сутки - до 67,4±9,1 пг/мл, на 17-е - до 51,8±8,9 пг/мл. На 28-е сутки он составлял 14,7±3,7 пг/мл при норме 17,7±4,1 пг/мл. У облученных крыс продукция IL-17 оставалась на более высоком уровне на протяжении, по крайней мере, четырнадцати суток после инфицирования. На 1-е сутки уровень цитокина в сыворотке крови составлял 83,2±18,7 пг/мл, на 2-е - 149,8±27 пг/мл, на 3-и - 215,7±49,3 пг/мл, на 10-е - 273,5±47 пг/мл, на 17-е - 241,2±42,9 пг/мл. Значения показателя оставались высокими и на 28-е сутки - 89,2±35,7 пг/мл.

Уровень IL-10, который, по данным многих исследований [59-63], положительно коррелирует со степенью тяжести течения системного кандидоза, у облученных животных заметно возрастал после инфицирования. На 2-е сутки он составлял 10,7±17,6 пг/мл, на 3-и - 18,9±14,1 пг/мл, на 10-е - 16,4±3,6 пг/мл, на 17-е - 11,1±4,6 пг/мл, с восстановлением до нормы на 28-е сутки - 5,7±2,4 пг/мл против 3,1 ± 0,6 пг/мл у интактных крыс. В то же время у необлученных животных повышение этого показателя наблюдалось лишь на 10-е сутки после инфицирования - 17,7±2,6 пг/мл - и фактически совпадало с периодом клинической ремиссии.

Что касается динамики IL-4, то у необлученных животных на фоне кандидозного сепсиса его уровень также прогрессивно нарастал на протяжении первой недели с максимальными значениями на 3-и сутки - 148,3±16,4 пг/мл - и на 10-е - 102,1±2,5 пг/мл. У облученных крыс рост уровня IL-4 был менее выраженным: на 3-и сутки он составлял 92,1±10,3 пг/мл, на 10-е - 57,91±3,3 пг/мл.

Фагоцитарная активность макрофагов и нейтрофилов.

У необлученных крыс при генерализованнм кандидозном сепсисе (II группа) наблюдалась стремительная стимуляция фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов по сравнению с интактной группой на протяжении 17-ти суток эксперимента, достигая максимума для ФИмф на 3-и сутки (91,2±11,1%), а для ФЧмф - на 17-е (15,7±1,6 ед.). У облученных и инфицированных животных (III группа) наблюдалось уменьшение процента активных макрофагов с первых же суток наблюдения по сравнению с необлученными инфицированными крысами (II группа). Еще более заметными были изменения со стороны поглотительной способности макрофагов, показатели которых были ниже показателей не только группы сравнения (II группы) (4,2±0,7 ед. против 11,3±2,6 ед.), но и интактных животных (4,2±0,7 ед. против 9,5±0,8 ед.) (табл. 3.2.2).

Аналогичная динамика прослеживалась и для функциональной активности нейтрофилов. Наблюдалось закономерное нарастание как поглотительной активности фагоцитов, так и количества фагоцитирующих клеток при диссеминированном кандидозе у необлученных крыс в течение первых 10-ти дней, достигая максимума на 3-и сутки для ФИнф (83,4±8,1 против 79,7±8,2%), а для ФЧнф - на 17-е (14,1±1,7 ед. против 11,4±1,3).

Таблица Влияние фракционированного тотального рентгеновского облучения на показатели неспецифической иммунологической реактивности крыс на модели острого диссеминированного кандидоза

По-каза-тель	Ед. изм	Груп-пы	Сутки эксперимента	Конт-роль (M±m)
			1	2	3	10	17	28
ФИ Мф	%	II	M	69,61	75,41	91,21	74,71	57,8	40,31	52,8±5,1
			m	7,2	8,3	11,1	7,1	6,1	4,3
		III	M	37,41;2	53,22	57,12	55,82	49,72	47,32
			m	5,6	6,9	7,4	4,6	5,4	4,7
ФЧ мФ	ед.	II	M	11,3	12,51	14,81	13,41	15,71	9,1	9,5±0,8
			m	2,6	1,8	2,3	1,5	1,6	0,8
		III	M	4,21;2	5,91;2	6,81;2	7,41;2	7,91;2	8,21
			m	0,7	1,2	1,5	0,6	0,9	0,6
ФИ нФ	%	II	M	69,81	76,81	83,41	73,41	69,5	58,1	62,8±5,4
			m	3,5	8,5	8,1	6,5	6,8	5,7
		III	M	61,82	70,71	79,71	65,42	62,2	51,41
			m	7,3	6,6	8,2	5,6	6,4	5,5
ФЧ нФ	ед.	II	M	10,81	13,31	14,11	12,41	9,2	8,8	8,5±0,9
			m	1,6	1,8	1,7	1,4	1,1	0,7
		III	M	9,8	10,11;2	11,41;2	7,21;2	10,41	9,3
			m	1,2	1,0	1,3	0,7	0,7	0,5

Примечания: 1 - достоверность отличий от интактной группы животных; 2 - достоверность отличий от группы животных, не подвергавшихся облучению. * - р<0,05; ** - р<0,01.

Относительная недостаточность активации фагоцитоза нейтрофилов, которая наблюдалась у облученных и инфицированных животных (III группа) относительно аналогичных показателей у необлученных инфицированных крыс (II группа), достигала статистически достоверных значений на 10-е сутки. При этом ФИнф составлял 65,4±5,6% и 73,4±6,5% соответственно.

Активность комплемента, уровень ЦИК, титр специфических иммуноглобулинов к C. albicans в сыворотке крови и степень контаминации внутренних органов.

Для характеристики состояния гуморального звена неспецифической реактивности положены показатели активности системы комплемента уровень циркулирующих иммунных комплексов, специфических антител и показатели степени обсемененности внутренних органов C. albicans.

У необлученных животных (табл. 3.2.3) с диссеминированным кандидозным сепсисом (II группа) наблюдалось нарастание уровня ЦИК со 2-х суток (97±8,8 МЕ) и на протяжении всего периода наблюдения. У облученных и инфицированных крыс (III группа) наблюдалось статистически значимое различие по сравнению с показателями группы сравнения с максимальными значениями на 10-е (154±7,1 МЕ) и 17-е (166±15,7 МЕ) сутки, что, по-видимому, связано с нарушением функции элиминации со стороны фагоцитарных клеток и системы комплемента. Так, на 10-е сутки в облученных и инфицированных животных содержание ЦИК составляло 154±7,1 МЕ при 131±8,4 МЕ у необлученных инфицированных крыс и 85±5,3 МЕ у интактных.

Комплементарная активность сыворотки крови снижалась в обеих группах инфицированных животных, по-видимому, за счет усиленного потребления для инактивации циркулирующих иммунных комплексов, а также элиминации патогена по альтернативному пути. Минимальные значения активности комплемента наблюдались на 10-е сутки эксперимента и составляли 39,8±2,9 гем. ед. в группе облученных животных с кандидозным сепсисом по сравнению с 58,8±4,7 гем.ед. у необлученных инфицированных крыс при 96,6±8,1 гем.ед. у интактных (табл. 3.2.3).

Таблица Влияние фракционированного тотального рентгеновского облучения на уровень циркулирующих иммунных комплексов и систему комплемента крыс на модели острого диссеминированного кандидоза

По-каза-тель	Ед. изм	Груп-пы	Сутки эксперимента	Конт-роль (M±m)
			1	2	3	10	17	28
ЦИК	МЕ	II	M	88	971	1101	1311	1421	1051	85±5,3
			m	9,3	8,8	10,5	8,4	13,2	9,4
		III	M	1051;2	1291;2	1451;2	1541;2	1661;2	1491;2
			m	9,8	11,6	14,9	7,1	15,7	16,9
Комп-ле-мент	гем. ед.	II	M	91,4	74,31	62,61	58,81	68,71	89,4	96,6±8,1
			m	8,7	7,8	6,9	4,7	7,8	9,4
		III	M	78,11;2	63,51;2	54,41;2	39,81;2	48,51;2	69,71;2
			m	8,1	6,6	5,4	2,9	5,6	7,7

Примечания: 1 - достоверность отличий от интактной группы животных; 2 - достоверность отличий от группы животных, не подвергавшихся облучению.

У облученных крыс наблюдалась 100% генерализация инфекционного процесса как на 7-е сутки, так и на 14-е сутки (табл. 3.2.4). Уровень элиминации возбудителя, о котором судили по отсутствию положительной динамики степени обсеменения внутренних органов, свидетельствует об усугублении клинического течения инфекции, индуцированном фракционированным облучением, и даже наблюдалась летальность в данной группе животных.

Таблица Результаты бактериологического исследования течения кандидозного сепсиса у облученных и необлученных крыс

Группы животных	Сутки	% животных с генерализованной формой	% животных с различной степенью обсеменения внутренних органов (КОЕ log2/г-1)
			1-20	21-50	51-100	>100
ІI (n=6)	7 дней	100	0	0	0	100
	14 дней	66,71	0	0	25	75
III (n=6)	7 дней	100	0	0	0	100
	14 дней	100	0	0	0	100

1 - р?0,05 по сравнению с интактными животными;

При исследовании уровня специфических антител к Candida albicans было установлено, что на седьмые сутки инфекции титры специфических антител были вчетверо ниже у облученных крыс III группы, чем у необлученных животных II группы, - 1:20 против 1:80, на четырнадцатые сутки различия в титрах антикандидозных антител были вдвое (табл. 3.2.5).

Таблица Сравнительный анализ динамики нарастания титров специфических антител к Candida albicans у облученных и необлученных крыс

Титры антител	Необлученные, ІI Группа	Облученные, ІІI Группа
7 сутки	1:80	1:20
14 сутки	1:160	1:80

Таким образом, при инфекционном процессе функциональная декомпенсация неспецифической реактивности у облученных крыс нарастала. По-видимому, усугубление имеющегося дисбаланса в цитокиновом соотношении IFN-г/IL-4 привело к негативным последствиям - диссеминации инфекции и ухудшению клинической картины.

Резюме. У необлученных животных при кандидозном сепсисе концентрации цитокинов IL-4 и IFN-г прогрессивно нарастали на протяжении первой недели, что соответствует параметрам обычного развития инфекционного процесса. Напротив, у облученных крыс их рост был менее выраженным, что, вероятно, указывает на депрессивное воздействие выбранного режима облучения на противоинфекционную защиту.

У инфицированных облученных крыс наблюдались гораздо более высокие уровни циркулирующих иммунных комплексов по сравнению с необлученными животными, что, по всей видимости, связано с нарушением функции элиминации со стороны фагоцитарных клеток и системы комплемента.

3.2 Корригирующая эффективность метилглюкамина акридонацетата и дипептида глутамил-триптофана в отношении иммунологической реактивности облученных крыс с острым экспериментальным диссеминированным кандидозом

Учитывая отсутствие у облученных животных признаков достаточной активации моноцитарно-макрофагальной системы и усугубление дисбаланса про- и противовоспалительных цитокинов в ответ на кандидозную инфекцию, для коррекции выявленных нарушений антиинфекционной резистентности, индуцированных фракционированным облучением, были выбраны препараты - метилглюкамина акридонацетат и дипептид глутамил-триптофан.

Метилглюкамина акридонацетат является низкомолекулярным индуктором б-, в- и г-интерферонов в органах и тканях, богатых лимфоидными элементами. Этот препарат обладает широким спектром биологической активности, что используется для повышения эффективности терапии хронических инфекционных заболеваний, однако, конкретные механизмы реализации его иммунотропного потенциала изучены недостаточно. Суточная доза препарата в наших исследованиях составляла 10 мг/кг массы тела.

В качестве иммуномодулятора сравнения использовали дипептид глутамил-триптофан - синтетический аналог тимотропных препаратов зобной железы, который способствует дифференцировке CD4+-лимфоцитов и нормализует соотношение их эффекторных и регуляторных популяций. Кроме того, препарат имеет радиопротекторные свойства и способность угнетать развитие серотонинового и гистаминового отека, свидетельствующее о его возможной эффективности в условиях гиперергического воспаления, индуцированного длительной поляризацией адаптивного иммунного ответа. Суточная доза препарата в наших исследованиях составляла 1 мкг/кг массы тела.

Влияние метилглюкамина акридонацетата и дипептид глутамил-триптофана на концентрацию сывороточных цитокинов.

Результаты исследования влияния метилглюкамина акридонацетата на уровень сывороточных цитокинов при коррекции патогенетических нарушений течения инфекции Candida albicans сведены в таблице 3.3.1

Таблица Влияние метилглюкамина акридонацетата на уровень сывороточных цитокинов при инфекции Candida albicans у облученных и необлученных крыс

Группы	V	I	VI	II	VII	III	VIII	IV
IFN-г, пг/мл	M	28,43	16,1	282,33	181,7	252,33	116,6	44,33	20,3
	m	10,1	5,3	17,8	48,9	22,5	30,9	4,7	8,5
IL-17, пг/мл	M	30,4	42,2	40,5	67,4	218,23	273,5	30,63	17,7
	m	12,6	5,6	30,4	9,1	32,5	47,2	9,5	4,1
IL-10, пг/мл	M	45,4	37,9	11,2	17,7	23,13	16,4	2,0	3,1
	m	8,9	6,6	7,8	2,6	5,6	3,6	1,3	0,6
IL-4, пг/мл	M	29,7	21,1	122,3	102,1	72,23	57,9	41,2	35,8
	m	10,2	2,6	22,5	2,5	7,3	3,3	5,1	4,2
IFN-г/ IL-10		0,6	0,4	25,2	10,3	10,9	7,1	22,2	6,6

Примечание: 3 - р<0,05, по сравнению с животными, не подвергавшихся иммунокоррекции.

К однозначно негативным последствиям применения метилглюкамина акридонацетата у облученных животных нужно отнести усуглубление имеющегося дисбаланса в цитокиновом профиле: соотношение IFN-г/ІL-10 у инфицированных животных (группа VIІ) возросло с 7,1 до 10,9, за счет умеренного увеличения уровня IL-10 - до 23,1±5,6 пг/мл против 16,4±3,6 пг/мл в контроле (в 1,4 раза)- и повышения уровня IFN-г до 252,3±22,5 пг/мл по сравнению со 116,6±30,9 пг/мл у контрольных животных (т.е.в 2,2 раза). У неинфицированных животных (V группа) этот эффект был менее заметным: соотношение IFN-г/IL-10 возросло с 0,4 до 0,6 за счет повышения уровня IFN-г до 28,4±10,1 пг/мл с 16,1±5,3 пг/мл у крыс без иммунокоррекции.

Кроме того, возрастал уровень IL-4 у инфицированных крыс, получавших метиглюкамина акридонацетат (72,2±7,3 пг/мл против 57,9±3,3 пг/мл в контроле), при том, что у животных без коррекции он составлял 21,1±2,6 пг/мл против 29,7±10,2 пг/мл. Это, очевидно, только содействовало углублению дисбаланса в цитокиновом профиле. При этом ожидаемого уровня стимуляции функций фагоцитов у инфицированных облученных животных не наблюдалось.

При изучении действия оппозитного иммуномодулятора - дипептид глутамил-триптофана мы получили данные, указывающие на то, что к наиболее существенным положительным изменениям в иммунном статусе облученных животных на фоне его введения (табл. 3.3.2) можно отнести наличие тенденции к уменьшению дисбаланса в цитокиновом профиле, более выраженное у облученных животных с генерализованным сепсисом: соотношение IFN-г/IL-10 у инфицированных животных уменьшилось с 7,1 до 6,1, за счет увеличения уровня IL-10 до 30,1±12,6 пг/мл против 16,4±3,6 пг/мл в контроле и умеренного повышения уровня IFN-г - до 182,2±8,9 пг/мл против 116,6±9,6 пг/мл в контроле. Аналогичный эффект наблюдался и у необлученных животных: соотношение IFN-г/IL-10 уменьшилось с 10,3 до 5,8 за счет достоверного повышения уровня IL-10 к 35,3±2,2 пг/мл от 17,7±2,1 пг/мл в контроле и умеренного повышения уровня IFN-г до 203,6±5,1 пг/мл со 181,7±4,1 пг/мл в контроле.

Таблица Влияние дипептида глутамил-триптофана на уровень сывороточных цитокинов при инфекции Candida albicans у облученных и необлученных крыс

Группы	IX	I	X	II	XI	III	XII	IV
IFN-г, пг/мл	M	32,13	16,1	203,1	181,7	182,23	116,6	30,2	20,2
	m	15,6	5,3	15,6	48,9	8,9	30,9	15,8	8,5
IL-17, пг/мл	M	20,33	42,2	45,3	67,4	103,4	273,5	14,5	17,7
	m	17,6	5,6	23,4	9,1	32,6	47,2	5,9	4,1
IL-10, пг/мл	M	50,4	37,9	35,33	17,7	30,13	16,4	7,23	3,1
	m	15,6	6,6	10,4	2,6	12,6	3,6	1,3	0,6
IL-4, пг/мл	M	15,2	21,1	89,2	102,1	41,23	57,9	20,5	35,8
	m	6,7	2,6	15,4	2,5	15,9	3,3	16,4	4,2
IFN-г/ IL-10		0,6	0,4	5,8	10,3	6,1	7,1	4,2	6,5

Примечание: 3 - р<0,05, по сравнению с животными, не подвергавшихся иммунокоррекции.

Кроме того, у облученных и инфицированных животных, лечение дипептидом глутамил-триптофаном привело к уменьшению уровня IL-4 - 41,2±3,3 пг/мл против 57,9±3,7 пг/мл в контроле, у инфицированных животных без предварительного облучения - 89,2±3,8 пг/мл против 102,1±3,1 пг/мл, что, очевидно, свидетельствует о противовоспалительном эффекте препарата.

Что касается продукции IL-17, то наблюдалось ее уменьшение у животных ХІ группы до 211±0,3 пг/мл против 273,5±3,9 пг/мл в контроле, (p < 0,05).

Влияние метилглюкамина акридонацетата и глутамил-триптофана на активность фагоцитов.

При исследовании влияния метилглюкамина акридонацетата на показатели неспецифической иммунологической реактивности при инфекции Candida albicans мы получили результаты, приведенные в таблице 3.3.3.

Таблица Влияние метилглюкамина акридонацетата на показатели неспецифической реактивности при инфекции Candida albicans у облученных и необлученных крыс

Группы	V	I	VI	II	VII	III	VIII	IV
ФИмф, %	M	49,33	41,7	77,5	74,7	65,43	55,8	51,3	52,8
	m	4,3	3,9	6,8	7,1	5,6	4,6	5,4	5,1
ФЧмф	M	5,13	3,2	15,13	13,4	8,43	7,4	7,8	9,5
	m	1,7	0,4	1,6	1,5	0,9	0,6	0,7	0,8
ФИнф, %	M	52,13	44,7	77,5	73,4	61,3	65,4	71,3	62,8
	m	5,3	4,1	6,9	6,5	5,5	5,6	8,4	5,4
ФЧнф	M	6,43	5,2	10,53	12,4	6,4	7,4	9,8	8,5
	m	0,5	0,4	1,2	1,4	0,8	0,7	0,8	0,9

Примечание: 3 - р<0,05, по сравнению с животными, не подвергавшихся иммунокоррекции.

У облученных животных, которым вводили метилглюкамина акридонацетат, на 7-е сутки после инфицирования наблюдалось статистически достоверное повышение уровня активации макрофагов: ФИ макрофагов был увеличен до 49,3±4,3% по сравнению с 41,7±3,9% у животных без иммунокоррекции, а ФЧмф у животных исследуемой группы было 5,1±1,7 ед. против 3,2±0,4 ед. у крыс контрольной группы.

Влияние метилглюкамина акридонацетата на фагоцитарную активность макрофагов выражалось в статистически недостоверной тенденции к увеличению у необлученных и достоверном росте у крыс VII группы. Для необлученных крыс (VI группа) ФИмф составлял 77,5±6,8% против 74,7±7,1 % в контроле, ФЧмф - 15,1±1,6 ед. против 13,4±1,5 ед. Для облученных крыс (VIІ группа) ФИмф составлял 65,4±5,6% против 55,8±4,6% в контроле, ФЧмф - 8,4±0,9 ед. против 7,4±0,6 ед.

Достоверное повышение фагоцитарной активности нейтрофилов под влиянием метилглюкамина акридонацетата было выявлено лишь у облученных крыс, не подвергавшихся инфицированию: ФИ нф - 52,1±5,3% против 44,7±4,1% в контроле, а ФЧнф - 6,4±0,5 ед. против 5,2±0,4 ед. В обеих группах инфицированных животных под влиянием метилглюкамина акридонацетата фагоцитарная активность нейтрофилов имела статистически недостоверную тенденцию к увеличению. У крыс с диссеминированным кандидозным сепсисом, получавших метиглюкамина акридонацетат, ФИнф составлял 77,5±6,9% против 73,4±6,5% у группы сравнения, а ФЧнф - 10,5±1,2 ед. против 12,4±1,4 ед. Аналогично, для облученных и инфицированных животных, леченных метилглюкамина акридонацетатом, ФИнф составлял 61,3±5,5% против 65,4±5,6% в контрольной группе, ФЧнф - 6,4±0,8 ед. против 7,4±0,7 ед.

При введении дипептид глутамил-триптофана фагоцитарная активность макрофагов статистически достоверно повышалась именно у облученных животных, которые имели наиболее низкий исходный уровень этого показателя. У облученных крыс без генерализованного сепсиса ФИмф составлял 54,7±4,2% против 41,7±3,9% в группе сравнения, ФЧмф - 7,1±0,8 ед. против 3,2 ± 0,4ед.; у облученных животных с инфекционным процессом ФИмф был 64,7±5,8% против 55,8±4,6%; ФЧмф - 10,3±1,1 ед. против 7,4±0,6. Аналогичный, но менее выраженный эффект стимуляции был у инфицированных необлученных животных: ФИмф составлял 85,8±7,9% против 74,7±7,1%, а ФЧмф - 16,5±2,1 ед. против 13,4±1,5 ед. (табл. 3.3.4).

Таблица Влияние дипептида глутамил-триптофана на показатели иммунологической реактивности при инфекции Candida albicans у облученных и необлученных крыс

Группы	IX	I	X	II	XI	III	XII	IV
ФИ, мф, %	M	54,73	41,7	85,83	74,7	64,73	55,8	77,6	52,8
	m	4,2	3,9	7,9	7,1	5,8	4,6	5	5,1
ФЧ, мф	M	7,13	3,2	16,53	13,4	10,33	7,4	7,2	9,5
	m	0,8	0,4	2,1	1,5	1,1	0,6	1,5	0,8
ФИ, нф, %	M	54,83	44,7	79,8	72,4	74,73	65,4	77,6	62,8
	m	4,5	4,1	6,3	7,1	7,8	5,6	5,0	5,4
ФЧ, нф	M	6,13	5,2	14,3	12,4	10,33	7,2	7,2	8,5
	m	0,7	0,4	2,4	1,2	1,1	0,7	1,5	0,9

Примечание: 3 - р < 0,05, по сравнению с животными, не подвергавшихся иммунокоррекции.

Дипептид глутамил-триптофан оказывал достоверное стимулирующее влияние на фагоцитарную активность нейтрофилов во всех исследованных группах, кроме инфицированных необлученных крыс, которые имели наиболее высокий исходный уровень этого показателя. У облученных крыс, подлежавших коррекции глутамил-триптофаном, ФИнф составлял 54,8±4,5% против 44,7±4,1% в группе сравнения, ФЧнф - 6,1±0,7 ед. против 5,2±0,4 ед.; в группе инфицированных животных, предварительно не облученных, ФИнф был 79,8±6,3% против 72,4±7,1%, ФЧнф - 14,3±2,4 ед. против 12,4±1,2 ед.; у облученных и инфицированных крых ФИнф составлял 74,7±7,8% против 65,4±5,6%, ФЧнф - 10,3±1,1 против 7,2±0,7.

Влияние метилглюкамина акридонацетата и глутамил-триптофана на комплементарную активность, содержание ЦИК и титр специфических иммуноглобулинов к C. albicans в сыворотке крови и степень контаминации внутренних органов.

Недостаточность достигнутого уровня стимуляции фагоцитарных функций подтверждается и стабильностью в концентрации ЦИК в обеих группах инфицированных животных. Так, концентрация ЦИК у всех крыс, учавствовавших в эксперименте, была достоверно выше по сравнению с интактными животными. У животных с кандидозным сепсисом без предварительного облучения, на фоне введения метилглюкамина акридонацетата, наблюдалось статистически недостоверное снижение ЦИК до 125,2±9,5 МЕ против 131,0±8,4 МЕ у животных без иммунокоррекции. У аналогичных, но предварительно облученных животных - уровень ЦИК составлял 148,4±11,0 МЕ против 154,0±7,1 МЕ в группе сравнения (табл. 3.3.5). антиинфекционный иммунитет макрофаг нейтрофил

Таблица Влияние метилглюкамина акридонацетата на показатели ЦИК и системы комплемента при инфекции Candida albicans у облученных и необлученных крыс

Группы	V	I	VI	II	VII	III	VII1	IV
ЦИК, МЕ	M	91,3	95,0	125,2	131,0	148,4	154,0	93,5	85,0
	m	2,6	4,5	9,5	8,4	11,0	7,1	9,2	5,3
Комплемент, гем. Ед.	M	89,7	94,8	67,23	58,8	45,63	39,8	101,4	96,6
	m	6,9	8,1	5,7	4,7	3,5	2,9	9,3	8,1

Примечание: 3 - р<0,05 по сравнению с животными, не подвергавшихся иммунокоррекции.

Метилглюкамина акридонацетат оказал негативное влияние и на активность комплемента в сыворотке крови в условиях сепсиса, как у животных, подвергшися предварительному облучению (45,6±3,5 гем. ед.), так и не подвергшихся (67,2±5,7 гем. ед.) (против 96,6±8,1 гем. ед. у интактных животных).

На фоне введения дипептида глутамил-триптофана статистически достоверно снижалось количество циркулирующих иммунных комплексов в обеих группах инфицированных животных: 100,0±8,1 МЕ против 131,0±8,4 МЕ в Х группе и 123,8±9,7 МЕ против 154,0±7,1 МЕ в ХІ группе. В этих же группах наблюдалось повышение комплементарной активности сыворотки крови: 78,5±6,8 гем. ед. против 58,8±4,7 гем. ед. в Х группе и 61,5±6,3 гем. ед. против 39,8±2,9 гем. ед. в ХІ группе животных (табл. 3.3.6).

Таблица Влияние дипептида глутамил-триптофана на показатели иммунологической реактивности при инфекции Candida albicans у облученных и необлученных крыс

Группы	IX	I	X	II	XI	III	XII	IV
ЦИК, МЕ	M	84,3	91,7	100,03	131,0	123,83	154,0	90,8	85,0
	...

Подобные документы

• Реактивность организма: виды и возрастные изменения

  Схема основных видов реактивности. Примеры биологической реактивности. Особенности индивидуальной реактивности. Возрастные изменения реактивности. Сущность патологической, болезненно измененной реактивности. Характеристика механизмов реактивности.
  
  реферат [16,6 K], добавлен 30.05.2010
  

• Реактивность организма

  Реактивность как свойство организма отвечать изменением жизнедеятельности на воздействия окружающей среды. Истериозис нервных центров как один из типов изменения реактивности и функциональной подвижности. Хронаксия как выражение реактивности организма.
  
  реферат [15,4 K], добавлен 30.05.2010
  

• Иммунологическая реактивность. Пищеварительный аппарат, особенности обмена веществ

  Механизмы естественной иммунологической реактивности организма. Анатомо-физиологические особенности пищеварительного аппарата у детей. Напряженность процессов обмена как основная особенность растущего организма. Особенности процессов пищеварения у детей.
  
  реферат [268,0 K], добавлен 23.06.2010
  

• Биохимия цитокинов

  Спектр биологической активности цитокинов, их вмешательство в работу систем организма. Особенности лечения препаратами цитокинов. Функциональная классификация интерлейкинов. Лечебная и профилактическая активность интерферонов, их широкое применение.
  
  презентация [3,8 M], добавлен 08.06.2013
  

• Общие вопросы о реактивности организма

  Формы связи и взаимодействия организма с внешней средой в условиях нормы и патологии. Формы и показатели реактивности, ее показатели. Наследственные и приобретенные свойства организма. Основные формы и виды групповой реактивности. Учение И.М. Павлова.
  
  реферат [31,2 K], добавлен 30.08.2011
  

• Влияние низкомолекулярной фракции кордовой крови на фагоцитарную активность нейтрофилов in vitro

  Сравнительное исследование влияния низкомолекулярной фракции кордовой крови и фармакологического препарата актовегина на показатели фагоцитарной активности нейтрофилов трансфузионной лейкоцитарной массы и кислород-зависимых бактерицидных механизмов.
  
  дипломная работа [131,5 K], добавлен 17.08.2011
  

• Клинико-диагностические значение редокс-системы у больных урогенитальным хламидиозом

  Проблема урогенитального хламидиоза. Состояние иммунологической реактивности пациенток с хламидийной инфекцией. Клинико-микробиологическая характеристика пациенток. Состояние редокс-системы при заболевании, протекающем на фоне инвазии энтерококками.
  
  диссертация [900,7 K], добавлен 02.09.2013
  

• Специфический белок кальпротектин

  Кальпротектин как белок, который высвобождается из лейкоцитов (макрофагов и нейтрофилов) при их активации или гибели, который сигнализирует о воспалительном процессе в кишечнике. Механизм определения количественного содержания кальпротектина в кале.
  
  презентация [374,1 K], добавлен 08.04.2016
  

• Роль факторов окружающей среды в возникновении вторичных иммунодефицитных состояний

  Иммунодефициты как нарушения иммунологической реактивности; классификация иммунодефицитных состояний. Причины и особенности вторичных ИДС: формы, инфекционные агенты, заболевания, лечение. Воздействие окружающей среды на возникновение вторичных ИДС.
  
  презентация [36,5 K], добавлен 08.09.2014
  

• Понятие об иммунитете организма животных и человека

  Характеристика системы иммунной защиты организма. Приобретенный иммунитет и его формы. Выработка антител и регуляция их продукции. Образование клеток иммунологической памяти. Возрастные особенности иммунитета, вторичные (приобретенные) иммунодефициты.
  
  реферат [34,1 K], добавлен 11.04.2010
  

• Иммунитет

  Иммунитет как невосприимчивость, сопротивляемость организма к инфекциям и инвазиям чужеродных организмов. Иммунный ответ. Нейтрофилы и их функция. Моноциты, макрофаги, лимфоциты. Виды нарушений фагоцитарной системы. Методы оценки гуморального иммунитета.
  
  презентация [2,0 M], добавлен 05.04.2015
  

• Воздействие на человека аллергенов

  Понятие термина "иммунитет". Строение антигенов и антител. Белки системы комплемента. История изучения аллергии. Наиболее распространенные заболевания. Стадии аллергической реакции. Виды аллергенов. Причины возникновения болезни. Теория влияния гигиены.
  
  учебное пособие [2,3 M], добавлен 17.11.2011
  

• Определение активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ нейтрофилов крови людей, больных панкреонекрозом

  Этиология, патогенез и лечение панкреонекроза. Нейтрофилы: жизненный цикл, морфология, функции, метаболизм. Биолюминесцентный метод определения активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в нейтрофилах. Активность лактатдегидрогеназы нейтрофилов крови.
  
  курсовая работа [175,0 K], добавлен 08.06.2014
  

• Защита от антигенов. Иммунитет

  Описание механизмов защиты организма человека от различных возбудителей: вирусов, бактерий, грибов, простейших, гельминтов. Общие свойства клеточных факторов неспецифической защиты. Функции гранулоцитов и нейтрофилов. Свойства антител-иммуноглобулинов.
  
  презентация [176,1 K], добавлен 15.02.2014
  

• Цитокины

  Классификация цитокинов по типу пространственной структуры, клеточных рецепторов, их биологическим свойствам. Механизм воздействия цитокинов на клетку, их основная биологическая функция. Роль цитокинов в развитии заболеваний воспалительного генеза.
  
  презентация [1,2 M], добавлен 18.12.2013
  

• Изучение цитокинов

  Рассмотрение классификации цитокинов - продуцируемых клетками белково-пептидных факторов, осуществляющих короткодистантную регуляцию межклеточных и межсистемных взаимодействий. Общие свойства и роль цитокинов в развитии заболеваний воспалительного генеза.
  
  презентация [328,0 K], добавлен 05.09.2011
  

• Оптические свойства гранулярных клеток крови: нейтрофилы

  Анализ нейтрофилов как клеток крови, случаи их патологического изменения. Методы изучения нейтрофилов. Экспериментальная апробация способа получения гематологических характеристик, которые могут быть использованы как признаки патологии нейтрофилов.
  
  курсовая работа [1,3 M], добавлен 29.02.2012
  

• Основные группы цитокинов, их характеристика

  Характеристика цитокинов как большой группы медиаторов белковой природы, рассмотрение основных групп: интерлейкины, интерфероны, колониестимулирующие факторы, хемокины. Механизмы действия цитокинов, знакомство с интерферонами, функция хемокинов.
  
  презентация [254,7 K], добавлен 13.03.2013
  

• Роль реактивности организма в патологии

  Особенности реактивности детского возраста. Резистентность организма, определение, виды. Формы ответной реакции организма на раздражитель. Виды реактивности, характеристика. Роль пола, конституции в реактивности. Болезни пожилого и старческого возраста.
  
  лекция [8,7 M], добавлен 29.10.2014
  

• Биологическое действие радиации

  Прямое и косвенное действие ионизирующего излучения. Воздействие ионизирующего излучения на отдельные органы и организм в целом, мутации. Действие больших доз ионизирующих излучений на биологические объекты. Виды облучения организма: внешнее и внутреннее.
  
  реферат [27,4 K], добавлен 06.02.2010
  

• главная
• рубрики
• по алфавиту
• вернуться в начало страницы
• вернуться к началу текста
• вернуться к подобным работам