Микробиология и вирусология

2. Изучение особенностей роста стафилококков и стрептококков на питательных средах. По демонстрационным посевам изучите и опишите:

а) характер роста гемолитических, зеленящих, негемолитических стрептококков, гемолитических стафилококков на кровяном агаре, стафилококка на элективной среде;

б) характер роста стрептококков и стафилококков на жидкой питательной среде.

3. Бактериоскопическое и бактериологическое исследование гноя на стафилококк (1-й день). Ознакомьтесь с сопроводительной запиской и внесите данные в журнал. Из гноя приготовьте мазок. Окрасьте по Граму, микроскопируйте. Затем гной посейте петлей штрихами на чашку с кровяным агаром для получения изолированных колоний и на МПА шпателем для определения чувствительности микрофлоры гноя к антибиотикам. На засеянную чашку положите диски с антибиотиками. Запишите проделанную работу.

4. Продолжение выделения культуры из крови (стрептококковый сепсис, 2-й день). Демонстрация. Ознакомьтесь с сопроводительной запиской и внесите данные в журнал. Исследование 1-го дня было выполнено накануне: 10 мл крови больного с предполагаемым диагнозом «сепсис» посеяли в 90 мл сахарного бульона. 2-й день: опишите характер роста микробов в бульоне. Приготовьте мазок, окрасьте по Граму, микроскопируйте. Сделайте пересев на чашку Петри с кровяным агаром. В журнале опишите проделанную работу.

5. Посев слизи из носа для выявления носительства стафилококка. Слизь из носа возьмите стерильным тампоном друг у друга и сделайте посев на чашку с молочно-солевым агаром. В журнале запишите собственные паспортные данные и проделанную работу.

6. Бактериоскопическая диагностика гонореи. Микроскопируйте и зарисуйте мазок из гноя уретры. На основании изучения мазка сделайте вывод.

7. Бактериоскопическая диагностика эпидемического церебрального менингита. Микроскопируйте и зарисуйте мазок из спинномозговой жидкости больного.

Занятие 25. Микробиологическая диагностика инфекций, вызываемых гноеродными кокками (продолжение), грамотрицательными палочковидными микроорганизмами и анаэробными микроорганизмами

Вы продолжаете изучение гноеродных кокков и уже убедились, что микробиологическая диагностика каждого из заболеваний, вызываемых ими, имеет свои особенности. Если на предыдущем занятии Вы должны были усвоить общую характеристику и особенности отдельных видов этой группы, то сейчас вам необходимо разобраться в особенностях проведения микробиологической диагностики при заболеваниях, вызываемых отдельными представителями, научиться дифференцировать отдельные виды и усвоить методы специфической профилактики и терапии гнойных инфекций. С этой целью на данном занятии Вы будете изучать препараты, применяемые для диагностики, специфической профилактики и лечения инфекций, вызываемых патогенными кокками. Во второй части занятия Вам предстоит познакомиться с представителями новой группы - патогенными анаэробами, вызывающими очень тяжелые заболевания. Сведения о профилактике, диагностике и лечении этих заболеваний необходимы каждому врачу. Кроме того, вам предстоит познакомиться и усвоить свойства возбудителей и лабораторную диагностику гнойно-воспалительных процессов, вызываемых грамотрицательными палочковидными микроорганизмами.

Цель самоподготовки

После самостоятельного изучения темы Вы должны знать микробиологическую диагностику инфекций, вызываемых гноеродными кокками, и препараты для диагностики, лечения и профилактики этих заболеваний, свойства грамотрицательных палочек - возбудителей гнойных и раневых инфекций, классификацию и свойства неспорообразующих анаэробов, а также свойства клостридий - возбудителей раневых инфекций. Необходимо также усвоить правила забора, транспортировки и методику первого дня исследования материала, содержащего анаэробные микроорганизмы.

Исходный уровень знаний

Для успешного усвоения темы необходимо повторить из общей микробиологии разделы: биологическое окисление микроорганизмов, методы выделения чистых культур анаэробов и знать материал предыдущего занятия.

Цель занятия

1. Ознакомиться с возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний: псевдомонадами, протеями, клебсиеллами, кишечной палочкой, их морфологией, культуральными свойствами и факторами патогенности.

2. Ознакомиться с возбудителями анаэробных инфекций: клостридиями и неспорообразующими анаэробами, их морфологией, культуральными свойствами и факторами патогенности.

3. Изучить принципы лабораторной диагностики инфекций, вызванных грамотрицательными палочковидными микроорганизмами.

4. Ознакомиться с набором иммунобиологических препаратов для диагностики, лечения и профилактики инфекций, вызванных грамотрицательными палочковидными микроорганизмами.

План изучения темы

1. Определение признаков патогенности и видовой принадлежности стафилококков.

2. Стафилококковое носительство, его диагностика и значение.

3. Стрептококковые заболевания: нагноения, сепсис, скарлатина, ревматизм и их диагностика.

4. Характеристика грамотрицательных аэробных палочек (псевдомонады, протей, клебсиеллы, кишечные палочки) и их роль в этиологии гнойно-воспалительных процессов.

5. Характеристика неспорообразующих и спорообразующих анаэробов - возбудителей раневых и гнойных инфекций.

После изучения темы студент должен уметь

1. Производить диагностику стафилококковых и стрептококковых инфекций.

2. Производить посев исследуемого материала для диагностики клостридиальных инфекций.

3. Классифицировать биологические препараты по теме занятия в соответствии с их назначением.

Дополнительный материал к занятию

Ускоренные методы диагностики анаэробной газовой инфекции

1. Исследуемый материал засевают в 10 пробирок с полужидкой средой и затем 5 пробирок прогревают при 800С 20 минут для уничтожения вегетативных форм бактерий. После этого в пробирки добавляют различные моновалентные противогангренозные сыворотки. Обнаружение через 10-18 часов микробов в стрептобациллярной форме и роста их изолированными колониями подтверждает соответствие возбудителя типу сыворотки. Диффузный рост и беспорядочное расположение клостридий указывает на несоответствие возбудителя типу сыворотки.

2. Внутрикожная проба на морских свинках. Материал от больного (тканевая жидкость) вводят внутрикожно в область предварительно выбритой брюшной стенки морским свинкам в смеси с моновалентными противогангренозными сыворотками и одному животному без сыворотки (контроль). Наблюдение за животными ведут в течение 24 часов. При нейтрализации токсина, содержащегося в содержимом раны, специфической сывороткой реакция отсутствует. Если сыворотка оказалась неспецифической (как и в контроле), на месте введения материала кожа морских свинок окрашивается в синий или фиолетовый цвет.

Микробиологические методы идентификации микробов рода Staphylococcus

Целью идентификации является установление рода и вида выделенной чистой культуры. Род стафилококка относится к семейству Micrococcaceae, в которое входят также роды Micrococcus и Planococcus. Общими чертами представителей этого семейства являются: морфология, положительная окраска по Граму; наличие фермента - каталазы.

Род Staphylococcus состоит из нескольких видов, наиболее важными из которых являются S.аureus, S.epidermidis и S.saprophyticus. Представители последних двух видов являются коагулазоотрицательными и долгое время считались непатогенными. В настоящее время доказано, что эпидермальный стафилококк может вызвать такие заболевания, как эндокардит, сепсис, конъюнктивит, инфекция ран и мочевыводящих путей, послеродовые инфекции, а сапрофитический - острый уретрит, цистит и др. На первом этапе устанавливается принадлежность выделенной культуры к семейству Micrococcaceae и роду Staphylococcus. На принадлежность культуры к семейству микрококков указывает положительная проба на каталазу, так как другие кокки (в частности стрептококки), каталазу не образуют. Для установления принадлежности культуры к роду Staphylococcus основными методами являются культуральный и биохимический.

Культуральный метод. Основным отличием стафилококков от микрококков является окраска колоний на плотной среде. Для стафилококков характерна золотистая или белая окраска колоний. У микрококков колонии окрашены в желтый или розовый цвет.

Биохимический метод. Он основан на том, что стафилококки являются факультативными анаэробами, микрококки - облигатными аэробами. В связи с этим стафилококки способны расти и ферментировать глюкозу в анаэробных условиях, а микрококки лишены этой возможности. Для определения этого признака культуру засевают петлёй в столбик полужидкой среды, содержащей 1% глюкозы и индикатор на кислые продукты. Сверху среду заливают стерильным вазелиновым маслом и ставят в термостат при 370С на 5 суток. Рост культуры и изменение цвета среды указывает на принадлежность её к роду Staphylococcus.

Видовая идентификация стафилококков. S.aureus отличается от других видов наличием золотистого или палевого пигмента (в большинстве случаев), наличием ферментов: плазмокоагулазы, лецитиназы (лецитовителлазы) и ДНК-азы. Плазмокоагулазу определяют путём посева культуры в цитратную кроличью плазму, после чего посевы помещают в термостат при 370С и регистрируют результаты через 1, 2, 4, 6 и 18 часов. Появление на дне пробирки студнеобразного сгустка любого размера считается положительным результатом реакции. Лецитиназу определяют путём посева культуры на молочно-желточный солевой агар. В составе яичного желтка имеется лецитовителлин, а наличие молока стимулирует образование пигмента. Посевы выдерживают в термостате при 370С 18-24 часа. О наличии лецитиназы свидетельствует образование вокруг колоний радужного венчика.

Определение ДНК-азы. Принцип метода: под действием ДНК-азы добавленная в плотную среду высокополимерная ДНК распадается на низкополимерные фрагменты. При этом мутная среда, содержащая высокополимерную ДНК, становится прозрачной. Ход исследования: на питательную среду в чашке Петри, включающую от 50 до 200 мг ДНК и 0,5 мл 10% раствора хлористого кальция, штрихами засевают исследуемую культуру и помещают в термостат при 370С на 18-24 часа. После этого на поверхность агара заливают 5-7 мл 3 моль/л раствора соляной кислоты. Если через 2-3 минуты вокруг посевов появляются зоны просветления, то реакция считается положительной

Если культура имеет золотистый (палевый), пигмент, коагулирует плазму и обладает хотя бы одним из двух других ферментов (лецитиназа, ДНК-аза) - её относят к виду золотистого стафилококка. При отсутствии полного набора указанных признаков (основным является наличие плазмокоагулазы) проводят идентификацию видов эпидермального и сапрофитического стафилококков по трем основным признакам, отличающим эти два вида (см. таблицу).

Вид стафилококка	Устойчивость к новобиоцину	Фосфатаза	Ферментация маннита
эпидермальный	-	+	-
сапрофитический	+	-	+

Устойчивость к новобиоцину определяют путём посева культуры на среду, содержащую 2 мкг/мл новобиоцина. Ферментацию маннита проводят в аэробных условиях путём посева культуры бляшкой на поверхность среды в чашке Петри, содержащей 1% маннита и индикатор на кислые продукты. Появление окрашенных колоний (в цвет индикатора) указывает на способность культуры ферментировать маннит. Таким образом, для эпидермального стафилококка характерны:

- чувствительность к новобиоцину;

- наличие фосфатазы и неспособность окислять маннит.

Для сапрофитического стафилококка характерны противоположные свойства.

Выделенные культуры S.aureus обычно подвергают фаготипированию с международным набором фагов (22 фага). Определение фаготипа стафилококка помогает установить источник инфекции и принадлежность выделенной культуры к госпитальным штаммам.

Контрольные вопросы

Опишите по дням ход исследования и результаты при выделении золотистого стафилококка из гноя. Опишите по дням ход исследования и результаты при подозрении на сепсис: сколько крови взять, в какую питательную среду посеять, какое количество питательной среды взять, в каких условиях производится взятие крови и её посев. Дальнейший ход исследования описать отдельно при обнаружении стафилококка и стрептококка. Какие материалы исследуют при подозрении на стафилококковое пищевое отравление, что обнаруживают в исследуемых материалах, на каких животных ставится проба? Идентификация чистой культуры стафилококка: по каким признакам определяют родовую и видовую принадлежность. Методы определения факторов патогенности стафилококка: пламокоагулазы, лецитовителлазы, ДНК-азы. Фаготипирование стафилококков: с какой целью проводится, каким набором фагов, методика фаготипирования. Схема микробиологического исследования при пищевой интоксикации стафилококкового происхождения. Опишите по дням ход исследования и результаты при выделении стрептококка из гноя. Краткая характеристика основных видов из группы грамотрицательных микроорганизмов. Синегнойная палочка: название по-латыни, морфология, культивирование, пигментообразование, основные факторы вирулентности; группы больных, у которых чаще всего наблюдается синегнойная инфекция. Протей: название по-латыни, морфология и физиология, особенности культуральных свойств. Кишечные палочки: наиболее частые формы инфекции (места локализации воспалительных процессов). Характеристика возбудителей анаэробной газовой инфекции (основных трёх видов): название видов по-латыни, морфология (споры, жгутики, капсула). Окраска по Граму, способ биологического окисления, среды для культивирования, характер колоний в толще агара, изменения на среде Вильсон-Блера, изменения на молоке; свойства токсина, действие в организме, серологические типы токсина. Факторы инвазивности. Характеристика неспорообразующих (неклостридиальных) анаэробов. Классификация: семейства, роды, основные виды (названия по-латыни). Основные свойства: морфология, отношение к окраске по Граму, условия культивирования. Ассоциация микроорганизмов (смешанная инфекция) при гнойных и раневых инфекциях: наиболее частые сочетания, особенности микробиологической диагностики при ассоциациях возбудителей.

Задания для выполнения в процессе самоподготовки

Написать по-латыни названия видов неспорообразующих анаэробов, грамотрицательных микроорганизмов - возбудителей раневых и гнойных инфекций и названия возбудителей анаэробной газовой инфекции.

Работа студента на практическом занятии

1. Продолжение исследования гноя (2-й день). Изучите и опишите колонии стафилококка на чашках с кровяным агаром. С помощью миллиметровой бумажки определите диаметр зон задержки роста вокруг дисков с антибиотиками и сделайте вывод о чувствительности микрофлоры гноя к антибиотикам. Проведите идентификацию выделенной чистой культуры стафилококка:

а) учтите результаты посева на анаэробное сбраживании глюкозы;

б) поставьте реакцию плазмокоагуляции: в пробирку с 0,5 мл кроличьей цитратной плазмы в разведении 1:4 (опыт) и в другую пробирку с 0,5 мл раствора хлорида натрия (контроль) внесите по 1 петле исследуемой культуры стафилококка. Пробирки поставьте в термостат. В конце занятия проверьте результат и сделайте вывод, данные запишите в журнал;

в) учтите результаты посева на лецитовителлазу;

г) учтите результаты посева на ДНК-азу;

д) учтите результаты фаготипирования.

Все результаты запишите в журнал, обобщите полученные данные, сформулируйте заключение, внесите его в графу «Результат».

2. Продолжение исследования крови на сепсис (3-й день). Изучите колонии на кровяном агаре, обратите внимание на размеры колоний, зоны гемолиза, определите вид стрептококка (по гемолизу). Приготовьте мазок из колоний, окрасьте по Граму, микроскопируйте, зарисуйте. Результаты запишите в журнал, сделайте заключение по исследованию крови на данном этапе, а в графе «Примечания» отметьте какие ещё исследования следовало бы провести для определения вида стрептококка и его антигенной структуры.

3. Продолжение исследования на стафилококковое носительство. Изучите и опишите характер колоний на молочно-солевом агаре. Сделайте мазок и, после окраски по Граму, промикроскопируйте. Результаты запишите в журнал, сделайте вывод. В графе «Примечания» опишите, какие исследования надо провести, чтобы дать заключение о наличии или отсутствии стафилококкового носительства.

4. Разберите схему исследования при стафилококковой интоксикации.

5. Изучите профилактические и лечебные препараты, применяемые при стафилококковых и стрептококковых инфекциях. Посмотрите препараты, прочитайте этикетки, охарактеризуйте каждый препарат по схеме: что собой представляет (вакцина, анатоксин, сыворотка, иммуноглобулин и др.), что содержит (антиген, антитело), как приготовлен, для чего применяется. Если препарат лечебно-профилактический - какое оказывает действие на организм. Дозируется ли препарат и в каких единицах? Если диагностический - что выявляют с помощью этого препарата?

6. Исследование отделяемого раны на возбудителей анаэробной газовой инфекции. Ознакомьтесь с сопроводительной запиской и внесите данные в журнал. Приготовьте мазок из отделяемого раны, окрасьте по Граму, промикроскопируйте. Произведите посев на среду Китта-Тароцци, на среду Вильсон-Блера и на молоко. Проделанную работу и результаты запишите в журнал.

Занятие 26 микробиологическая диагностика анаэробных инфекций, заболеваний, вызванных грамотрицательными палочковидными микроорганизмами (продолжение), дифтерии

Хотя вызываемые анаэробами заболевания (столбняк, анаэробная газовая инфекция, ботулизм) встречаются сравнительно редко, лечение их представляет большие трудности, особенно при запоздалой диагностике. Поэтому важное значение приобретают профилактика и ранняя диагностика столбняка, анаэробной газовой инфекции и ботулизма.

В результате плановой специфической профилактики дифтерия в последние годы встречается в виде спорадических случаев. Однако наличие бактерионосительства и определённой прослойки неиммунизированных людей создает условия для возникновения отдельных случаев и даже вспышек дифтерии.

Цель самоподготовки

После самостоятельного изучения темы вы должны знать свойства возбудителей столбняка, ботулизма и дифтерии. Составьте схемы лабораторной диагностики этих заболеваний и усвойте методы их специфической профилактики и лечения. Обратите внимание на особенности исследований для обнаружения неспорообразующих анаэробов, а также особенности лабораторных исследований при смешанных инфекциях.

Исходный уровень знаний

Восстановите в памяти методы культивирования и выделения чистых культур анаэробов, свойства экзотоксинов, особенности антитоксического иммунитета, получение и способы введения антитоксических гетерологичных сывороток для предупреждения аллергических реакций.

Цель занятия

1. Изучить принципы лабораторной диагностики инфекций, вызванных клостридиальными и неспорообразующими анаэробами.

2. Изучить принципы лабораторной диагностики инфекций, вызванных грамотрицательными палочковидными микроорганизмами.

3. Ознакомиться с возбудителем ботулизма, его морфологией, культуральными свойствами и факторами патогенности.

4. Изучить принципы лабораторной диагностики ботулизма.

5. Ознакомиться с возбудителями дифтерии, их морфологией, культуральными свойствами и факторами патогенности.

6. Изучить принципы лабораторной диагностики дифтерии.

7. Ознакомиться с набором иммунобиологических препаратов для диагностики, лечения и профилактики анаэробных инфекций и дифтерии.

План изучения темы

1. Методы культивирования и выделения чистых культур анаэробов.

2. Характеристика возбудителей и лабораторная диагностика столбняка, анаэробной газовой инфекции.

3. Лабораторная диагностика заболеваний, вызываемых неспорообразующими анаэробами.

4. Характеристика аэробных грамотрицательных палочек и лабораторная диагностика гнойных и раневых инфекций, вызываемых этими бактериями.

5. Специфическая профилактика и лечение столбняка, анаэробной газовой инфекции.

6. Характеристика возбудителя ботулизма.

7. Характеристика возбудителей дифтерии.

Повторите по учебнику разделы: «Споры и спорообразование»; «Микробные токсины»; по руководству - методы культивирования и выделения чистых культур анаэробов. Обратите внимание на схемы микробиологических исследований при анаэробной газовой инфекции, столбняке, ботулизме.

После изучения темы студент должен уметь

1. Идентифицировать по культуральным свойствам P.aeruginosa и протей.

2. Проводить исследования при выделении возбудителя анаэробной газовой инфекции.

3. Классифицировать биологические препараты по теме занятия в соответствии с их назначением.

Контрольные вопросы

Перечислить методы культивирования анаэробов. Как создаются анаэробные условия при применении этих методов? Методы выделения чистой культуры анаэробов (назвать и описать). Какой материал нужно взять от больного с предполагаемым диагнозом «анаэробная газовая инфекция»? Опишите результаты, которые наблюдаются при посеве на соответствующие среды материала, содержащего Clostridium perfringens; через какой срок после посева нужно учитывать результаты? Какие препараты применяются для активной иммунизации против анаэробной газовой инфекции? В каких случаях проводится пассивная иммунизация против анаэробной газовой инфекции, какими препаратами, как они вводятся? Правила забора и пересылки в лабораторию материала от больного при подозрении на анаэробную инфекцию, вызванную неспорообразующими анаэробами. Культивирование неспорообразующих анаэробов: питательные среды, газовые смеси, длительность культивирования. Методы дифференцировки неспорообразующих анаэробов. Методы выделения и идентификации синегнойных палочек, протеев из гноя при раневой и гнойной инфекции. Характеристика возбудителя столбняка: название по-латыни, морфология (споры, жгутики, капсулы), отношение к окраске по Граму, способ биологического окисления, устойчивость спор, характер токсина: действие на организм, имеются ли серологические типы токсина. Столбняк у человека: механизм заражения, основной фактор патогенности. Методика обнаружения токсина в биологической пробе. Препараты для специфической профилактики и лечения. Плановая профилактика столбняка и профилактика столбняка по показаниям.

ЗАДАЧА. В больницу поступили два пациента, получившие травму (повреждение кожных покровов). При опросе выяснилось, что один из них, тракторист М., 22 лет, во время службы в армии получил плановые профилактические прививки, в том числе и против столбняка. Вторая пациентка, колхозница 50 лет, в последние 30 лет не прививалась против столбняка. Врач с целью профилактики столбняка назначил первому пациенту введение столбнячного анатоксина, второй - введение анатоксина и противостолбнячной сыворотки. Правильно ли сделал назначения врач? Почему в первом случае врач счёл возможным ограничиться введением анатоксина, а во втором назначил еще и сыворотку?

Характеристика возбудителя ботулизма: название, морфология, споры, жгутики, капсула, окраска по Граму, условия культивирования, гибнет ли при кипячении, характер токсина, серологические типы, отношение токсина к соляной кислоте и пищеварительным ферментам, к температуре 800С и к высоким концентрациям хлористого натрия. Ботулизм у человека: вследствие чего возникает заболевание, при каких условиях это может произойти; основной фактор патогенности возбудителя, действие его в организме; какие материалы берут для лабораторного исследования, что обнаруживают в исследуемом материале? Опишите методы обнаружения ботулинического токсина в крови больного, в пищевом продукте, определение типа токсина. Препараты для активной иммунизации и лечения ботулизма; что они содержат, в каких единицах дозируются?

Характеристика возбудителя дифтерии: название по-латыни, морфология (форма, взаимное расположение клеток, споры, жгутики, капсула, включения), отношение к окраске по Граму, специальные методы окраски; способ биологического окисления, среды для культивирования, характер роста на свёрнутой сыворотке и теллуритовой среде, биологические типы. Дифтерийный токсин: действие на организм, единицы измерения силы токсина, получение антитоксина. Опишите методику определения токсиногенности дифтерийной культуры (реакция преципитации в агаре); наиболее частая локализация местного процесса при дифтерии. Какие материалы берут от больных, а также при исследовании на носительство дифтерийной палочки? Опишите по дням ход исследования и результаты, которые наблюдаются при выделении токсигенного возбудителя дифтерии: как формулируется ответ на разных этапах исследования? Опишите по дням ход исследования и результаты, которые наблюдаются при выделении нетоксигенной дифтерийной палочки. Методы дифференцировки истинных дифтерийных палочек и дифтероидов: морфология, биохимическая активность, пробы на уреазу и цистиназу по антигенной структуре и вирулентности. Иммунитет при дифтерии: характер иммунитета, методы определения напряжённости иммунитета, продолжительность иммунитета после плановых прививок. Специфическая профилактика дифтерии; какие препараты применяются, с какого возраста начинают прививки? Препарат для специфической терапии дифтерии; что содержит, как получен, в каких единицах дозируется, как вводится?

Задания для выполнения в процессе самоподготовки

Написать в дневнике название по-латыни возбудителя столбняка и схему введения гетерологичной сыворотки (по Безредке).

Работа студента на практическом занятии

1. Изучение морфологии грамотрицательных палочек и патогенных анаэробов. Промикроскопируйте и зарисуйте окрашенные по Граму препараты чистых культур синегнойной палочки, протея, возбудителей анаэробной газовой инфекции, столбняка и ботулизма. Название возбудителей под рисунками напишите по-латыни.

2. Изучение культуральных свойств синегнойной палочки и протея. Просмотрите готовые посевы синегнойной палочки и протея на скошенном агаре и в чашках Петри с МПА. Обратите внимание на пигмент синегнойной палочки и характер роста протея.

3. Ознакомление с аппаратурой для выращивания анаэробов. Посмотрите аппараты Аристовского, анаэростат, эксикатор, трубки Вейон-Виньяля, посев по Фортнеру, среду Китта-Тароцци. Устно опишите, как создаются анаэробные условия в этих аппаратах и средах.

4. Продолжение исследования отделяемого раны (2-й день). Изучите характер роста микробов на средах Китта-Тароцци, Вильсон-Блера, молоке. Приготовьте мазок из среды Китта-Тароцци, окрасьте по Граму, промикроскопируйте, зарисуйте. Сделайте посев по Вейнбергу для выделения чистой культуры. Опишите проделанную работу.

5. Усвоение схемы исследования материала от больных на наличие:

а) неспорообразующих анаэробов;

б) грамотрицательных палочковидных микроорганизмов (синегнойная палочка, протей, кишечная палочка).

Расскажите устно и запишите схему исследования в дневнике.

6. Усвоение по таблицам микробиологической диагностики столбняка. Расскажите устно и запишите схему исследования в дневнике.

7. По таблицам разберите схему исследования при ботулизме. Изучите демонстрационный набор препаратов для диагностики и лечения ботулизма.

8. Изучение диагностических, профилактических и лечебных препаратов, применяемых при раневых анаэробных инфекциях. Посмотрите препараты, прочитайте этикетки, охарактеризуйте каждый препарат по схеме, приведенной на предыдущем занятии.

9. Исследование слизи зева на носительство дифтерийной палочки. Возьмите стерильным тампоном слизь из зева друг у друга и посейте на свёрнутую сыворотку. В журнале запишите паспортные данные обследуемого студента и проделанную работу (1-й день).

Занятие 27. Микробиологическая диагностика анаэробных инфекций, дифтерии (окончание). Микробиологическая диагностика коклюша, гемофильной инфекции, легионеллёза, туберкулёза, лепры, актиномикоза

Заболеваемость коклюшем находится в прямой зависимости от уровня коллективного иммунитета. Клиническая диагностика коклюша в выраженной форме не представляет больших трудностей. Однако стёртые формы коклюша и паракоклюш могут быть выявлены только при использовании микробиологических методов исследования.

В последнее время всё чаще встречаются инфекционные заболевания, вызванные гемофильной палочкой. Для заболеваний, вызванных гемофильными бактериями, обязательно проводят бактериологическое исследование с определением антибиотикограммы возбудителя.

Легионеллёз относится к так называемым «новым» инфекциям, описан сравнительно недавно (1977 г.) Встречается в виде спорадических случаев или вспышек легионеллёзной пневмонии, лихорадочных заболеваний. Диагноз легионеллёза может быть подтверждён только микробиологическими и серологическими методами.

Заболеваемость туберкулёзом во многом зависит от социальных факторов, и при снижении социальной защищенности населения может увеличиваться. Однако в любых условиях уровень заболеваемости туберкулёзом различных локализаций (туберкулёз легких, костей, выделительной системы и др.) будет зависеть от того, насколько грамотно и своевременно врачами различных специальностей будет поставлен первичный диагноз туберкулёза. Решающее значение при этом имеют микробиологические исследования.

Заболевания, вызванные актиномицетами, встречаются сравнительно редко. Однако поставить диагноз актиномикоза по клиническим проявлениям бывает очень трудно. И здесь наиболее достоверные результаты можно получить с помощью микробиологических исследований.

Цель самоподготовки

После самостоятельного изучения материала необходимо знать методы профилактики и лечения токсинемических инфекций, характеристику возбудителей коклюша, гемофильной инфекции, легионеллёза, туберкулёза, лепры и актиномикоза и лабораторные методы диагностики этих заболеваний, их профилактику и лечение.

Исходный уровень знаний

Методы окраски кислотоустойчивых бактерий, специальные среды для выращивания возбудителей туберкулёза, коклюша.

Цель занятия

1. Выработать чёткое понятие об инфекциях, вызываемых бордетеллами коклюша и паракоклюша.

2. Выработать чёткое понятие об инфекциях, вызываемых легионеллами.

3. Выработать чёткое понятие об инфекциях, вызываемых гемофильными микроорганизмами.

4. Изучить принципы лабораторной диагностики дифтерии, коклюша, паракоклюша, легионеллёзов, гемофильной инфекции.

5. Ознакомиться с набором иммунобиологических препаратов для диагностики, лечения и профилактики коклюша, паракоклюша, легионеллёзов, гемофильной инфекции.

6. Выработать представление о микобактериях как патогенных, условно-патогенных и сапрофитических микроорганизмах, широко распространённых в окружающей среде.

7. Изучить методы микробиологической диагностики туберкулёза и лепры.

8. Научиться классифицировать препараты для диагностики, лечения и специфической профилактики туберкулёза.

9. Изучить характеристику возбудителей актиномикоза у человека, методы диагностики заболевания.

План изучения темы

1. Микробиологическая диагностика, лечение и профилактика дифтерии, коклюша и гемофильной инфекции.

2. Особенности эпидемиологии, диагностики и лечения легионёллеза.

3. Микробиологическая диагностика, лечение и профилактика туберкулёза, лепры, актиномикоза.

После изучения темы студент должен уметь

1. Дифференцировать возбудителей дифтерии по морфологическим, тинкториальным, биохимическим и токсигенным свойствам.

2. Окрасить микропрепарат из мокроты больного туберкулёзом по Цилю-Нильсену и идентифицировать возбудителей туберкулёза.

3. Проводить идентификацию актиномицетов в тканях.

4. Классифицировать биологические препараты по теме занятия в соответствии с их назначением.

Контрольные вопросы

Возбудитель коклюша. Название по-латыни. Морфология: форма, взаимное расположение, споры, жгутики, капсула, отношение к окраске по Граму. Физиология: требовательность к питательным средам, факторы роста, основные питательные среды, время образования и характер колоний, ферментативная активность. Антигенная структура; токсинообразование, характеристика токсинов. Источник инфекции, способ передачи, патогенез. Микробиологическая диагностика на ранней стадии заболевания: методы забора материала, питательные среды, выделение чистой культуры, критерии для отличия возбудителей коклюша от других бордетелл. Препараты для специфической профилактики и лечения. Гемофильные бактерии. Название возбудителей по-латыни. Морфология, отношение к окраске по Граму. Культуральные свойства, антигенная структура. Факторы патогенности. Основные формы инфекций, вызываемых гемофильными бактериями. Бактериологическое исследование при диагностике гемофильной инфекции. Специфическое лечение и профилактика. Легионеллы. Название возбудителя по-латыни. Морфология, отношение к окраске по Граму. Особенности физиологии: температурный оптимум, требовательность к питательным средам, тип биологического окисления, ферментативная активность. Антигенная структура, серологические группы, виды. Экология легионелл: постоянное место обитания, условия, способствующие их размножению и накоплению. Основные формы легионеллёза. Пути передачи. Микробиологическая диагностика. Препараты для лечения. Возбудители туберкулёза. Кем открыт первый возбудитель? Чем объясняется название «микобактерии»? Название по-латыни. Морфология: форма, морфологические варианты, зёрна Муха, споры, жгутики, капсула. Особенности химического состава туберкулёзных бактерий и связанных с этим свойств. Какой способ окраски применяется и на каких свойствах возбудителя он основан? Способ биологического окисления, среды для культивирования, скорость роста. Виды туберкулёзных палочек: различия между ними по морфологии, отношению к глицерину, по патогенности для человека и лабораторных животных. Токсические вещества туберкулёзных палочек, их действие в организме. Туберкулёз у человека: источники инфекции, пути проникновения возбудителя в организм; какие органы поражаются чаще всего? Особенности иммунитета при туберкулёзе, механизм иммунитета, аллергия; к какому типу аллергических реакций относится? Микробиологический диагноз туберкулёза: материалы для исследований, способы обогащения мокроты, схемы исследования, ускоренные методы диагностики, дифференцировка видов туберкулёзных палочек и способы дифференциации от потенциально-патогенных микобактерий, определение лекарственной устойчивости. Кожно-аллергическая проба; что вводится в организм, что образуется на месте введения при положительном результате? На какое состояние организма указывает положительный результат? Для чего ставится аллергическая проба? Специфическая профилактика: название вакцины; что содержит, как получена? С какого возраста производят вакцинацию, способ введения вакцины. Какой вид иммунитета формируется? Перечислите препараты, применяемые для лечения туберкулёза. Характеристика потенциально-патогенных микобактерий: классификация, название основных видов по-латыни. Морфология и физиология. Источники инфекции и условия возникновения заболеваний. Дифференцировка от возбудителей туберкулёза. Препараты для лечения. Характеристика возбудителя лепры: название по-латыни, морфология и физиология, абсолютный паразитизм. Распространение лепры, клинические формы, микробиологическая диагностика. Препараты для лечения. Возбудители актиномикоза: название по-латыни двух видов; наиболее часто вызывающих заболевания, морфология и физиология. Актиномикоз у человека. Какие органы поражаются чаще всего? Материалы для исследования, методы исследования. Препараты для диагностики и лечения.

Работа студента на практическом занятии

1. Окончание исследования отделяемого раны. Изучите и опишите колонии в глубине агара в трубках Вейон-Виньяля; отберите и отметьте колонии, характерные для возбудителей анаэробной газовой инфекции; после распила трубки приготовьте мазки, окрасьте по Граму. На основании микроскопии мазков определите наличие сходства по морфологии (с учётом характера колоний) с возбудителями анаэробной газовой инфекции; сделайте вывод. Запишите предварительный диагноз в графу «Результат», в графе «Примечания» опишите, что необходимо ещё сделать для постановки окончательного диагноза.

2. Ознакомьтесь со схемами и запишите в дневник последовательность исследований при диагностике коклюша, гемофильной инфекции, легионеллёза.

3. Изучение посевов на носительство дифтерийной палочки. Изучите посев макроскопически, а затем приготовьте мазок со свёрнутой сыворотки, окрасьте по Нейссеру и кислым генциан-виолетом. После микроскопии приготовленного мазка и демонстрационного мазка из чистой культуры дифтерийной палочки (для сравнения) сделайте заключение: имеются ли палочки, сходные с дифтерийной, в изучаемом посеве.

4. Познакомьтесь по таблицам со схемой исследования при дифтерии, характером роста на теллуритовой среде колоний типов гравис и митис; методикой определения токсигенности дифтерийных палочек. Просмотрите и опишите «пёстрые» ряды культур дифтерийной палочки и дифтероидов, результаты проб на уреазу и цистиназу.

5. Изучение морфологии и культуральных свойств туберкулёзных палочек. Промикроскопируйте и зарисуйте демонстрационные препараты из культуры туберкулёзных палочек и микроколонии, полученные по методу Прайса. Изучите и опишите характер роста туберкулёзных палочек на питательных средах. Бактериоскопический диагноз туберкулёза: запишите в журнал данные из сопроводительной записки. Приготовьте из мокроты больного мазок, окрасьте по Цилю-Нильсену, микроскопируйте. Результаты занесите в журнал, сделайте вывод, заполните графу «Результат».

6. Изучение схемы микробиологической диагностики лепры. Микроскопируйте препарат из слизи носа больного лепрой.

7. Проведение бактериоскопической диагностики актиномикоза. Микроскопируйте и зарисуйте препарат «друза» в срезе из органа и мазок из чистой культуры актиномицетов. Изучите схему микробиологического диагноза актиномикоза.

8. Изучение диагностических, профилактических и лечебных препаратов, применяемых при коклюше, дифтерии, туберкулёзе. Посмотрите препараты, прочитайте этикетки, охарактеризуйте каждый препарат по схеме.

Занятие 28. Итог по разделу «микробиологическая диагностика инфекций, вызываемых гноеродными кокками, грамотрицательными палочковидными и анаэробными микроорганизмами. Микробиологическая диагностика дифтерии, коклюша, гемофильной инфекции, легионеллёза, туберкулёза, лепры, актиномикоза»

Темы, изучение которых вы закончили, включают большую группу возбудителей и нозологических форм, имеющих общие черты и существенные различия. Поскольку на предстоящем занятии будет дана оценка вашим знаниям по этим важным разделам, необходима тщательная подготовка к итоговому занятию. Особенно важно обратить внимание на характеристику возбудителей раневых гнойных инфекций и возбудителей воздушно-капельных инфекций, так как вызываемые ими заболевания имеют широкое распространение и с ними в своей практике встречаются врачи всех специальностей. Важно также иметь в виду, что знания, которые вы получили, дадут возможность своевременной и обоснованной организации профилактических и лечебных мероприятий, а следовательно, обеспечат надежное излечение и предупреждение этих заболеваний.

Цель самоподготовки

После самостоятельного изучения материала необходимо быть готовым ответить на контрольные вопросы по изученным разделам, хорошо ориентироваться в лабораторной диагностике, профилактике и лечении заболеваний, знать иммунобиологические препараты, их состав, приготовление и применение.

Исходный уровень знаний

Материалы занятий по данным разделам и необходимые сведения из общей части (см. занятия 24-27).

План изучения темы

Итог по разделу «Микробиологическая диагностика инфекций, вызываемых гноеродными кокками, грамотрицательными палочковидными и анаэробными микроорганизмами. Микробиологическая диагностика дифтерии, коклюша, гемофильной инфекции, легионеллёза, туберкулёза, лепры, актиномикоза». Последовательно повторите пройденный материал по учебнику, конспекту лекций, руководству, пособию. Знание лабораторной диагностики заболеваний проверьте по схемам в руководстве и своим записям в журнале и дневнике. Просмотрите на кафедре наборы иммунобиологических препаратов и проверьте свои знания о них. Обязательно потренируйтесь в ответах на контрольные вопросы.

После изучения раздела студент должен уметь

1. Проводить исследования для диагностики заболеваний, вызванных гноеродными кокками.

2. Проводить исследования для диагностики заболеваний, вызванных грамотрицательными палочковидными микроорганизмами.

3. Проводить исследования для диагностики заболеваний, вызванных анаэробными микроорганизмами.

4. Проводить исследования для диагностики дифтерии.

5. Проводить исследования для диагностики туберкулёза, проказы.

6. Выбирать биологические препараты для диагностики, профилактики и терапии инфекций.

Контрольные вопросы для подготовки к итоговому занятию

Общая характеристика гноеродных кокков. Общая характеристика возбудителей анаэробных раневых инфекций и аэробных грамотрицательных палочек как возбудителей раневых инфекций. Характеристика стафилококков. Токсины и ферменты патогенности стафилококков, способы их обнаружения. Заболевания, вызываемые стафилококками. Схема исследования гноя при стафилококковых инфекциях. Исследование крови при подозрении на сепсис. Роль стафилококков в возникновении внутрибольничных инфекций. Препараты для лечения и профилактики стафилококковых инфекций. Характеристика стрептококков. Токсины и ферменты патогенности стрептококков. Классификация по гемолизу и антигенной структуре. Заболевания человека, вызываемые стрептококками: гнойные, негнойные, острозаразные. Роль стрептококка в этиологии скарлатины, ревматизма. Методы диагностики стрептококковых инфекций. Препараты для лечения. Характеристика пневмококков. Схема микробиологического исследования. Препараты для диагностики и лечения. Характеристика гонококков. Заболевания у человека. Лабораторная диагностика острой и хронической гонореи. Препараты для диагностики и лечения. Роль грамотрицательных палочковидных бактерий в этиологии гнойных и раневых инфекций; характеристика основных видов: синегнойная палочка, протей, кишечные палочки. Смешанные гнойные инфекции. Характеристика ассоциаций при гнойных и раневых инфекциях. Характеристика возбудителей анаэробной газовой инфекции: виды, морфология, условия культивирования, токсины и ферменты патогенности. Морфология, культуральные и биохимические особенности С.реrfringens. Схема лабораторной диагностики анаэробной газовой инфекции. Ускоренные методы диагностики. Биологические пробы для определения токсинов (составьте схему опыта). Препараты для диагностики, специфической профилактики и лечения анаэробной газовой инфекции. Характеристика неспорообразующих анаэробов: классификация, морфология, особенности культивирования, роль в этиологии раневых и гнойных инфекций. Лабораторная диагностика заболеваний, вызываемых неспорообразующими анаэробами. Препараты для лечения. Характеристика возбудителя столбняка, столбнячный токсин, его обнаружение с целью диагностики столбняка. Плановая профилактика столбняка и профилактика по показаниям. Препараты для специфической профилактики и терапии столбняка. Характеристика легионелл, особенности их физиологии и экологии. Заболевания (легионеллёзы), микробиологическая диагностика, препараты для лечения. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства менингококков, резистентность по внешней среде. Классификация по антигенной структуре. Заболевания человека, вызываемые менингококками, значение носительства. Микробиологическая диагностика менингококковых заболеваний и носительства. Препараты для специфической профилактики, препараты для лечения. Возбудитель коклюша: морфология и физиология, антигенная структура, характеристика токсинов. Микробиологическая характеристика коклюша, дифференцировка возбудителей коклюша от других бордетелл. Препараты для специфической профилактики, препараты для лечения. Возбудители гемофильной инфекции: морфология, тинкториальные и культуральные свойства, факторы патогенности. Основные формы инфекций, вызываемых гемофильными бактериями. Бактериологическое исследование при диагностике гемофильной инфекции. Специфическое лечение и профилактика. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства возбудителя дифтерии, токсинообразование. Определение токсигенности дифтерийных палочек. Микробиологическая диагностика дифтерии и дифтерийного носительства. Иммунитет при дифтерии, определение уровня иммунитета. Препараты для специфической профилактики и терапии дифтерии. Возбудители туберкулёза: виды туберкулёзных палочек, морфология, химический состав, способ окраски. Среды для культивирования, характер роста, длительность выращивания. Заболевания, вызываемые туберкулезными палочками. Особенности иммунитета. Аллергическая проба и её значение. Микробиологическая диагностика туберкулёза. Препараты для специфической профилактики, препараты для лечения туберкулёза. Потенциально-патогенные микобактерии и их роль в патологии человека. Характеристика возбудителей актиномикоза. Виды, патогенные для человека. Лабораторная диагностика актиномикоза, препараты для лечения.

ЗАДАЧА 1. При бактериологическом исследовании гноя обнаружены стафилококки. Достаточно ли этого для диагноза. Что нужно ещё сделать?

ЗАДАЧА 2. В поликлинику обратилась женщина по поводу резаной раны кисти. За последние 10 лет прививок против столбняка не получала. Как в данном случае провести профилактику столбняка?

ЗАДАЧА 3. В поликлинику обратился больной по поводу колотой раны стопы. Год назад во время службы в армии получал прививку столбнячным анатоксином. Какой препарат нужно ввести раненому? Почему? Какой вид иммунитета будет создан в данном случае?

ЗАДАЧА 4. Какими препаратами необходимо провести профилактику столбняка следующим лицам: рабочему с ожогом предплечья, иммунизированному столбнячным анатоксином год назад; ребёнку 8 лет с рваной раной голени, получившему ревакцинацию АКДС в 6 лет; строителю 50 лет с ранением бедра, получившему по поводу предыдущей травмы противостолбнячную сыворотку 10 дней тому назад.

ЗАДАЧА 5. В травматологический пункт доставлен в бессознательном состоянии водитель автомобиля с открытым переломом бедра после автомобильной катастрофы. Рана засыпана землёй. Профилактику каких заболеваний необходимо ему провести, какими препаратами, какие правила необходимо при этом соблюдать?

ЗАДАЧА 6. После вскрытия параректального абсцесса обнаружен гной со зловонным запахом, серого цвета с участками некротизированной ткани. Наличие каких микроорганизмов можно предположить? Как произвести забор и доставку материалов в лабораторию для подтверждения этого предположения?

ЗАДАЧА 7. В перевязочной хирург обнаружил, что повязка у больного окрасилась в сине-зелёный цвет. Наличие какого микроорганизма можно предположить? Как проверить это предположение?

Занятие 29. Микробиологический диагноз зоонозных инфекций - чумы, туляремии, бруцеллёза, сибирской язвы

В результате широкого применения мер общей и специфической профилактики зоонозных инфекций на территории нашей страны длительное время не регистрировались случаи заболевания людей чумой, а туляремия, бруцеллёз и сибирская язва встречались в виде спорадических случаев. Однако до настоящего времени во многих регионах сохраняются природные очаги чумы и туляремии среди грызунов и заболевания бруцеллёзом и сибирской язвой среди домашних животных. В связи с этим сохраняется потенциальная возможность заболевания людей этими инфекциями, которая может реализоваться при снижении социальных условий жизни людей и внимания к профилактическим мероприятиям. Следовательно, для каждого сохраняется необходимость врача знания возбудителей, специфической профилактики и терапии зоонозных инфекций.

Цель самоподготовки

После самостоятельного изучения темы Вы должны знать характеристики возбудителей чумы, туляремии, бруцеллёза, схемы микробиологических исследований при этих заболеваниях. Следует также уяснить, почему эти заболевания называются зоонозами, особо опасными, и какие меры предосторожности необходимы при работе с материалом, содержащим перечисленных возбудителей.

Исходный уровень знаний

Из курса общей микробиологии необходимо вспомнить культуральные свойства и факторы патогенности бактерий, методы и правила заражения и вскрытия животных, методы постановки реакции агглютинации.

Цель занятия

1. Ознакомить студентов с зоонозными инфекциями, обосновать высокую патогенность возбудителей для животных и человека.

2. Подчеркнуть эпидемический характер чумы, туляремии, бруцеллёза, множественность путей передачи, разнообразие клинических форм.

3. Показать особенности методов микробиологической диагностики чумы, туляремии, бруцеллёза.

4. Научить правильно подбирать биологические препараты для диагностики и профилактики изучаемых заболеваний.

План изучения темы

1. Характеристика возбудителей чумы, туляремии, бруцеллёза.

2. Правила забора, пересылки и работы с материалом, содержащим возбудителей особо опасных инфекций.

3. Схемы микробиологического диагноза чумы, туляремии, бруцеллёза.

4. Экспериментальный метод исследований: заражение животных с диагностической целью.

После изучения темы студент должен уметь

1. Дифференцировать возбудителей чумы, сибирской язвы, туляремии, бруцеллёза от сходных микроорганизмов.

2. Оценить результаты серологических реакций по определению антител в сыворотке крови больных бруцеллёзом и туляремией.

3. Классифицировать биологические препараты по теме в соответствии с их назначением.

Контрольные вопросы

Почему чуму, туляремию, бруцеллёз, сибирскую язву называют зоонозными инфекциями, почему они относятся к особо опасным инфекциям? Возбудитель чумы: название по-латыни, морфология, споры, жгутики, капсула, особенность окраски, окраска по Граму, способ биологического окисления, температурный оптимум роста, растёт ли на простых средах? Внешний вид колоний палочки чумы на плотной среде, какие колонии образуются вирулентными формами? Невирулентными формами? Характер роста в жидкой среде, антигенная структура, факторы вирулентности. Чума у человека: название по-латыни, источники инфекций, пути проникновения возбудителя в организм; перечислите клинические формы; наблюдается ли бактериемия? Микробиологический диагноз чумы: в каких лабораториях производится исследование, какие материалы берут от больного в зависимости от формы заболевания, какие ещё материалы исследуют; что обнаруживают в исследуемых материалах; назовите методы исследования; что необходимо сделать при обнаружении возбудителя чумы? Методы исследования при чуме: что обнаруживают при микроскопии мазка, какое значение имеет метод микроскопии; на какую среду делается посев материала, при какой температуре культивируется, по каким признакам идентифицируют культуру. С каким микробом дифференцируют палочку чумы; по каким признакам дифференцируют возбудителей чумы и псевдотуберкулёза? Каких животных заражают и каким способом? Возбудитель туляремии: название по-латыни, морфология, споры, жгутики, капсула, окраска по Граму, способ биологического окисления, среды для культивирования, образует ли экзотоксин, какие антигены содержит, с каким микробом имеет общий антиген? Туляремия у человека: источники инфекции, входные ворота; какие изменения в биологических свойствах туляремийной палочки происходят в организме человека, в чём это выражается, передаётся ли туляремия от больного человека к здоровому? Микробиологический диагноз туляремии; перечислите методы микробиологической диагностики туляремии: что мы обнаруживаем каждым из этих методов; какие материалы берут от больного; каково значение первичной микроскопии исследуемого материала, каким способом выделяют культуру микроба, в каких лабораториях производится исследование на обнаружение возбудителя? Что такое тулярин, что он содержит, для чего применяется, каким способом вводится, что наблюдается при положительной реакции? У кого наблюдается положительная реакция? Возбудители бруцеллёза: название по-латыни, у каких видов животных они встречаются; морфология, споры, жгутики, капсула, окраска по Граму; среды для культивирования, как скоро вырастает культура? Культуральная особенность Brucella abortus, как дифференцируют отдельные виды бруцелл, почему их нельзя дифференцировать по антигенной структуре? Токсинообразование. Бруцеллёз у человека: источники инфекции, как происходит заражение, ворота инфекции, пути распространения и преимущественная локализация; характер иммунитета; наблюдается ли перекрёстный иммунитет между видами бруцелл. Назовите методы микробиологической диагностики бруцеллёза, исследуемый материал, что обнаруживают с помощью каждого из этих методов; какие из методов нельзя использовать в обычной лаборатории? Реакция Райта: для чего применяется, что обнаруживают с помощью этой реакции, что служит исследуемым материалом, что, является диагностическим препаратом, техника постановки. То же о реакции Хеддльсона. То же о пробе Бюрне.

...